生化工程 - 03

第一篇：生化工程 - 03

微生物的营养

微生物的营养（nutrition）是指微生物从环境获得它们合成自身的细胞物质和提供机体进行各种生理活动所需的能量，以及形成代谢产物所需的营养物质的全过程。

一、微生物的营养类型

根据碳源不同，分为自养微生物（autotrophic microorganism）和异养微生物（heterotrophic microorganism）；根据所需能量不同，分为光能营养（phototrophy）型和化能营养（chemotrophy）型。

上述营养型的分类并非绝对，在自养和异养、光能型和化能型之间都存在中间过渡类型，成为兼性营养型。比如：氢细菌可以利用氢和CO2进行自养生活，也可以直接利用有机物进行异养生活；红螺菌既可利用光能又可利用化能。微生物的营养类型之间没有绝对的界限。

二、微生物的营养基质

（一）碳源（carbon source）

碳源主要是碳水化合物，如葡萄糖、糖蜜、蔗糖、淀粉等。葡萄糖：活性碳源，微生物可以直接吸收利用。

淀粉：惰性碳源，先要经过微生物酶水解形成单糖才能被吸收利用。常用的淀粉原料有玉米、土豆、麸皮、米糠等，近年来木薯在发酵工业上广泛用于生产酒精、柠檬酸、谷氨酸、赖氨酸等。

糖蜜是制糖生产的副产品，含有丰富的糖、含氮化合物、无机盐和维生素等，物美价廉，是发酵工业常用的原料。

近年来，醇类、有机酸、石油烷烃也常被用作碳源来发酵生产一些特殊产品。比如用烷烃或脂肪酸发酵生产化工原料长链二元酸。

（二）氮源（nitrogen source）

有机氮源：花生饼、豆饼、棉籽饼、菜籽饼、玉米浆、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、鱼粉、蚕蛹、酒糟、米糠等。提供蛋白质、多肽、游离氨基酸，少量糖类、脂肪、无机盐、维生素和某些生长因子。

无机氮源：铵盐、硝酸盐、尿素、氨水等，与有机氮源配合使用往往效果更好。分子态氮：固氮微生物。

（三）无机元素（inorganic element）

主要功能：（1）构成菌体的组成成分；（2）作为酶活性基团的组成部分；（3）调节微生物体内的pH和氧化还原电位；（4）某些自养菌的能源。

6种主要元素：C、H、O、N、P、S 大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Mg、Ca、Fe 微量元素：Mn、Co、Cu、Zn、Ni等

（四）生长因子（growth factor）

微生物生长发育过程中不可缺少而需要量极少的一类特殊营养物质，包括维生素、氨基酸、核苷酸等，以辅酶或辅基的形式参与菌体生长发育过程的酶促反应。许多天然碳源、氮源，比如玉米浆、麸皮、麦糠等含有丰富的生长因子。

三、微生物的培养基（culture medium）

培养基：人工配制的适于微生物生长繁殖或累积代谢产物的营养基质。

（一）按物理状态分类

1.固体培养基（solid medium）

麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉 + 无机盐 + 水 —— 白酒厂、酿造厂等生产用 溶解的培养液 + 胶凝剂（琼脂、明胶等）—— 实验室用 2.半固体培养基（semisolid medium）

半固体培养基是在培养液中加入少量的凝固剂（如0.2%～0.5%的琼脂）。这种培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。3.液体培养基（liquid medium）

把培养基成分溶解或悬浮在水中而进行液体培养的培养基。广泛用于微生物的培养、研究和大规模生产。

（二）按营养物质的来源分类

天然培养基（complex medium）：动植物组织或微生物的浸出物、水解液等，如蛋白胨、牛肉膏、麦芽汁、马铃薯、玉米粉、米糠、豆饼粉等。

合成培养基（synthetic medium）：由已知化学成分及数量的化学药品配制而成，适合于定性定量的研究工作。

半合成培养基（semi-synthetic medium）：在天然培养基的基础上，适当添加一些化学药品，补充无机盐等不足，使之更能充分满足微生物对营养的需要。在实验室和生产中使用最多。

（三）按用途分类

基础培养基（basic medium）含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质，可供大多数细菌生长

鉴别培养基（differential medium）在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。例如：伊红美蓝乳糖培养基（EMB培养基，Eosin-methylene blue medium）用于检测水中的大肠杆菌污染。

加富培养基（enriched medium）有利于某种微生物而不利于其它微生物生长而设计的培养基。

选择培养基（selected medium）在培养基中加入某种化学物质以抑制不需要菌的生长而保证需要菌的生长，从而在混杂的微生物中选出需要的菌种。

配制培养基的原则：

（1）目的明确：实验or生产？菌种的营养类型？（2）营养协调：特别是C :N（3）条件适宜：pH、渗透压等

（4）经济节约：尽量选用容易获得、价格低廉的原料作为培养基成分

四、微生物对营养物质的吸收

 被动吸收：又称单纯扩散，通过滤过、渗透、简单扩散和易化扩散（需要载体）等几种形式，将营养物质吸收进入细胞内。这种吸收形式不需要消耗能量。一些分子 量低的物质，如简单多肽、各种离子、电解质和水等的吸收即为被动吸收。

主动吸收：又称主动运输，必须通过机体消耗能量，依靠细胞载体蛋白来完成的一种逆浓度梯度的物质转运形式。是细胞吸收营养物质的主要机制。被动吸收和主动吸收主要区别有两点：主动运输需要能量和载体，可以跨浓度梯度运输。被动吸收有滤过、渗透、简单扩散和易化扩散，除易化扩散外都不需要载体，但都是顺浓度梯度运输，即靠渗透压来运输，但都不消耗能量。

五、影响微生物生长发育的因素

1.温度

微生物的生长实际上可以看做是生物体的一系列生物化学反应的有机组合，温度是这些反应的必须条件。

最适温度是一个相对的概念，最适生长温度未必最适合微生物的生物合成，反之亦然。

2.pH 一般霉菌、酵母最适pH为3~5，细菌、放线菌6.5~8。

不同生长阶段要求pH值不同，过程中pH值会发生改变（变酸为主），改变的原因是：

3.通气（aeration）与搅拌（agitation / stirring）

根据微生物对氧的需求不同，可将其分为3类：   好氧微生物：工业发酵中应用最多

厌氧微生物：分子态氧对其有毒害作用，如丙酮-丁醇产生菌

 兼性微生物：酵母菌有氧生长繁殖，无氧发酵产生酒精 发酵过程中通气一般前少后多

搅拌能打碎气泡，增加气液接触面积，加速氧的溶解，提高空气利用率，促进微生物的繁殖，但过度剧烈的搅拌会导致培养液产生大量气泡，增加污染杂菌的机会。4.基质浓度

菌体生长速率是基质浓度的函数，常用Monod方程来描述菌体生长速率与基质浓度的关系：

第二篇：生化工程实验室分子生物学操作规范

生化工程实验室分子生物学操作规范

1.手套使用

原则上不论什么实验都应带手套操作，特别是： 1）无菌操作；

2）与RNA有关的所有操作；

3）重要克隆菌的挑单克隆、扩增、保存等；

4）与有毒试剂有关的所有操作，比如用EB染胶，用有机溶剂提取（在通风橱内操作）。2.移液枪及枪头使用 1）在合适量程范围内使用； 2）移液枪定期校对；

3）枪头必须插紧，防止脱落以及吸样体积不够； 4）不要水平放置带有枪头的枪； 5）使用后挂在枪架上，不可以乱放；

6）装枪头时必须戴手套，灭菌后50-70℃烘干后使用；

7）加样体积应为枪头最大体积的20-100%，低于该范围的用小一号的枪头。3.加样

1）加用任何试剂前要将试剂混合（除饱和酚或一些特别的有机试剂）；

2）加样的枪头应在试剂的中间表层吸收，防止枪头外壁带用过多试剂，改变加样试剂体积（除饱和酚外，一定要伸到饱和酚液的下部吸取）；

3）加酶时酶要放置在冰上，应注意体积准确，外壁不带，内壁吹打干净。注意用枪头从反应体系的管底吸上，反复吹打。4.混匀

1）除上述特殊试剂外，所有试剂在使用前后都要充分混匀；多数分子操作在加样后、反应前都要充分混匀；

2）0.2ml和0.5ml管30%体积以下可进行枪混匀和擦边混匀；

3）0.5-1.5ml管15-40%体积时，试管30%体积以下时可使用漩涡混匀器混匀； 4）0.5-1.5ml管30-70%体积，试管30-70%时可进行颠倒混匀。5.水浴锅

1）需提前10-30分钟调好温度，稳定后才能使用； 2）水位不可以低于水浴锅高度的50%，及时添水或换水； 3）使用合适的浮子； 4）使用完毕及时关闭电源。6.离心

1）离心如果需要预冷，应至少预冷15min； 2）要质量对称放置； 3）不合适的离心管应外套其他型号的离心管；

4）离心后如果要移动，应放在离心管架上移动，防止破坏液面； 5）短暂离心要在3000-8000rpm范围内，时间应短于30秒； 6）离心完毕应及时清理离心机。7.琼脂糖凝胶电泳 1）凝胶制作

配制凝胶的浓度据实验需要而变，一般在0．8％ ～2．0％之间，如果一次配制凝胶100 ml，没用完的凝胶可以再次融化，但随着融化次数的增加，水分丢失也越多，凝胶浓度则会越来越高，导致实验结果不稳定，补水办法：一是在容器上标记煮胶前的刻度，煮胶后补充相应的水分至原刻度；二是在煮胶前称重，煮胶后补充水至原重量。粗略一点的方法是通过多次较恒定的煮胶条件得出一个经验补水值。2）梳板的选用

一般每个制胶模具均配有多个齿型不同的梳板，梳齿宽厚，形成的点样孔容积较大，用于DNA 片段回收实验等；相反，梳齿窄而薄，形成的点样孔容积就较小，用于PCR产物、酶切产物鉴定等。梳板的选择主要是看上样量的多少而定，一般来说，上样量小时尽量选择薄的梳板制胶，此时电泳条带致密清晰，便于结果分析。另外，每次制胶时都要注意梳齿与底板的距离至少要1 mm，否则，拔梳板时易损坏凝胶孔底层，导致点样后样品渗漏。当然，点样孔的破坏还与拔梳板的时间和方法有关，一般凝胶需冷却30 min以上方可拔梳板，应急的情况下可以将成型的凝胶块放4℃ 冰箱中冷却15 min 左右，拔梳板的方法是将制胶槽放置在电泳槽中的电泳缓冲液中，然后垂直向上慢慢用力，因为有液体的润滑作用，梳板易拔出且不易损坏点样孔。3）点样

点样需加上样缓冲液，因为上样缓冲液中加了甘油或蔗糖增加密度，使样品沉入孔底；指示样品的迁移过程，上样缓冲液中一般加了两种指示剂，溴酚兰和二甲苯青(值得注意的是指示剂并非染色剂，DNA染色剂是溴化乙锭，而且要在紫外光的激发下才能看见桔红色荧光)。上样缓冲液储存液一般为6×(10×)，表示其浓度为工作浓度的六倍。使用时上样缓冲液应稀释到一倍浓度。点样方法是将移液器基本垂直点样孔，用另一只手帮助固定移液器下端，移液器枪头尖端进入点样孔即可将样品注入孔内，千万不可将尖插至孔底，并点上适合的DNA分子量标准，所谓适合是指样品DNA分子量大小应基本在DNA分子量标准范围之内。4）电泳 将电泳仪的正极与电泳槽的正极相连，负极与负极相连，核酸带负电荷，从负极向正极移动。电泳槽中电泳缓冲液与制胶用电泳缓冲液应相同，电泳缓冲液刚好没过凝胶1 mm 为好，电泳缓冲液太多则电流加大，凝胶发热。电泳时凝胶上所加电压一般不超过5 v/cm(指的是正负电极之间的距离，而不是凝胶的长度)，电泳时间一般为30-60 min，根据实验需要也可作适当调整，电压增高，电泳时间缩短，核酸条带相对来说不够整齐，不够清晰；相反，电压降低，电泳时间较长，核酸条带整齐清晰。另外，如果电泳后样品泳动很慢或者没泳动，请检查胶模两端的封口胶条是否已去掉。5）结果分析

较成功的电泳结果是分子量标准条带整齐清晰，样品条带也整齐清晰，如果条带模糊暗淡，单从琼脂糖凝胶电泳角度来说，可能的原因：EB见光易分解，母液配制时间过长或保存不当(一般4℃ 避光保存一年内有效)，或者终浓度没达到0.5 ug/ml；电泳槽中缓冲液使用次数过多，缓冲能力下降。特别是TAE缓冲液，一般用2-3次就要更换，TBE缓冲液则可使用10次左右。另外，溴化乙锭(EB)是一种中等强度诱变剂，操作过程中要戴手套，并将加有EB的染色液作好标记、妥善保存。实验室要严格区分污染区和非污染区，不要把污染区的物品拿到非污染区，碰过EB的手套要及时丢弃。

第三篇：生化实验

1．火

（1）酒精及其它可溶于水的液体着火时，可用水灭火

（2）汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着火时，应用石棉布或砂土扑灭，绝对不能用水，否则反而会扩大燃烧面积。

（3）电起火，不能用水和二氧化碳灭火器，应切断电源或用四氯化碳灭火器。2．烧伤

（1）强碱烧伤：先用大量水冲洗，再用5%的硼酸溶液和2%的乙酸溶液冲洗。（2）强酸烧伤：先用大量水冲洗，再用5%的碳酸氢钠或5%的氢氧化铵冲洗。

氨基酸的分离鉴定纸层析法

纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。层析溶剂由有机溶剂和水组成。物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值（比移）来表示的：

在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统；层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本实验利用纸层析法分离氨基酸。

在操作过程中，手不要摸滤纸。点样直径不超过3mm。

点样的一端朝下, 扩展剂的液面需低于点样线1cm。

即时取出滤纸, 以免出现氨基酸层析跑到滤纸的外面不能检测。

蛋白质及氨基酸的呈色反应 双缩脲反应

紫红色

肽键 可用于蛋白质的定性或定量测定 一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应，但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。茚三酮反应

除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α—氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色物质。此反应的适宜pH为5~7，同一浓度的蛋白质或氨基酸在不同pH条件下的颜色深浅不同，酸度过大时甚至不显色。

与茚三酮呈阳性反应的不一定就是蛋白质或氨基酸。在定性、定量测定中，应严防干扰物存在。该反应十分灵敏，1∶1 500 000浓度的氨基酸水溶液即能给出反应，是一种常用的氨基酸定量测定方法。茚三酮反应分为两步，第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛，水合茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮同另一个水合茚三酮分子和氨缩合生成有色物质。黄色反应

含有苯环结构的氨基酸，如酪氨酸和色氨酸，遇硝酸后，可被硝化成黄色物质，该化合物在碱性溶液中进一步形成橙黄色的硝醌酸钠。苯丙氨酸不易硝化，需加入少量浓硫酸才有黄色反应。

坂口反应

与精氨酸反应呈红色，精氨酸是唯一呈此反应的氨基酸，反应极为灵敏 醋酸铅反应

蛋白质分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白质在强碱条件下，可分解形成硫化钠。硫化钠和醋酸铅反应生成黑色的硫化铅沉淀。若加入浓盐酸，就生成有臭味的硫化氢气体。

蛋白质分子中常含有半胱氨酸和胱氨酸，含硫蛋白质在强碱条件下，可分解形成硫化钠。硫化钠和醋酸铅反应生成黑色的硫化铅沉淀。若加入浓盐酸，就生成有臭味的硫化氢气体。

蛋白质的等电点测定和沉淀反应

当溶液的pH达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等，在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液pH值称为此种蛋白质的等电点。

用醋酸与醋酸钠（醋酸钠混合在酪蛋白溶液中）配制成各种不同pH值的缓冲液。向缓冲液溶液中加入酪蛋白后，沉淀出现最多的缓冲液的pH值即为酪蛋白的等电点 蛋白质的沉淀反应

在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水化层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒，在一定的理化因素影响下，蛋白质颗粒可因失去电荷和脱水而沉淀。蛋白质的沉淀反应可分为两类。

（1）可逆的沉淀的反应

此时蛋白质分子的结构尚未发生显著变化，除去引起沉淀的因素后，蛋白质的沉淀仍能溶解于原来的溶剂中，并保持其天然性质而不变性。如大多数蛋白质的盐析作用或在低温下用乙醇（或丙酮）短时间作用于蛋白质。提纯蛋白质时，常利用此类反应。

（2）不可逆沉淀反应

此时蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于原来溶剂中。加热引起的蛋白质沉淀与凝固，蛋白质与重金属离子或某些有机酸的反应都属于此类。

蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在（如电荷），并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已变性。

考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度

考马斯亮蓝G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰(max)位置由465 nm变为595 nm，溶液颜色也由棕黑色变为蓝色。通过测定595 nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。吸光度与蛋白质含量成正比。灵敏度高，测定快速简便，干扰物质少。

微量凯氏定氮法

有机物与浓硫酸共热，有机氮转变为无机氮（氨），氨与硫酸作用生成硫酸氨，后者与强碱作用释放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此过量酸液被中和的程度，即可计算出样品的含氮量。

中和程度用滴定法来判断，分回滴法和直接法两种。

（1）回滴法：用过量的标准酸吸收氨，其剩余的酸可用标准NaOH滴定，由盐酸量减去滴定所耗NaOH的量即为被吸收的氨之量。此法采用甲基红做指示剂。

（2）直接法：用硼酸作为氨的吸收溶液，结果使溶液中[H+]降低，混合指示剂（PH4.3－5.4），黑紫色变为绿色。再用标准酸来滴定，使硼酸恢复到原来的氢离子浓度为止，指示剂出来淡紫色为终点，此时所耗的盐酸量即为氨的量。

样液：1g卵清蛋白溶于0.9%NaCl液，并稀释至100ml。如有不溶物，离心取上清液备用。

醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质

本实验是以醋酸纤维素薄膜作为支持体的区带电泳。

方法是将少量新鲜血清用点样器点在浸有缓冲液的乙酸纤维素薄膜上，薄膜两端经过滤纸与电泳槽中缓冲液相连，所用缓冲液pH值为8.6，血清蛋白质在此缓冲液中均带负电荷，在电场中向正极泳动。

由于血清中不同蛋白质带有的电荷数量及分子量不同而泳动速度不同。带电荷多及分子量小者泳动速度快；带电荷少及分子量大者泳动速度慢，从而彼此分离。

电泳后，将薄膜取出，经染色和漂洗，薄膜上显示出五条蓝色区带，每条带代表一种蛋白质，按泳动快慢顺序，一般经漂洗后，薄膜上可呈现清晰的5条区带，由正极端起，依次为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白。

经洗脱比色观察不同蛋白质的区带。

1、醋酸纤维素薄膜一定要充分浸透后才能点样。点样后电泳槽一定要密闭。电流不宜过大，以防止薄膜干燥，电泳图谱出现条痕。

2、缓冲溶液离子强度不应小于0.05或大于0.07。因为过小可使区带拖尾，过大则使区带过于紧密。

3、电泳槽中缓冲液要保持清洁(数天过滤)两极溶液要交替使用；最好将连接正、负极的线路调换使用。

4、通电过程中，不准取出或放入薄膜。通电完毕后，应先断开电源后再取薄膜，以免触电。

酶的特性

温度对酶活力的影响

大多数动物酶的最适温度为37－40℃，植物酶的最适温度为50－60℃。高温失活，低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。pH对酶活性的影响

唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。唾液淀粉酶的活化和抑制

酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。

血糖的定量测定

动物血液中的糖主要是葡萄糖，其含量较恒定。用硫酸锌和氢氧化钠除去被检测血中的蛋白质制成无蛋白血滤液。当将血滤液与标准铁氰化钾溶液共热时,一部分铁氰化钾还原成亚铁氰化钾，并与锌离子生成不溶性化合物。

向混合物中加入碘化物后，用硫代硫酸钠溶液滴定所释放的碘。即可知剩余的铁氰化钾量。血糖越多，剩余的铁氰化钾越少，所消耗的硫代硫酸钠也越少。硫代硫酸钠溶液用量与血糖的关系可以由经验确定下来的数字表查出。对照组要多一些，且要先查表再相减

脂肪酸的β－氧化

样品中丙酮的含量=(V1-V2)x C Na2S2O3 x 1/6 V1—滴定对照所消耗的Na2S2O3 的体积 V2—滴定样品所消耗的Na2S2O3 的体积 C—Na2S2O3 的浓度

维生素C的定量测定

2，6-二氯酚靛酚滴定法

用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素 C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,如无其他干扰物质存在，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原性抗坏血酸量成正比。

过氧化物酶的作用 过氧化物酶能催化过氧化氢释出新生氧以氧化某些酚类和胺类物质，例如氧化溶于水中的焦性没食子酸生成不溶于水的焦性没食子橙（橙红色）；氧化愈创木脂中的愈创木酸成为蓝色的愈创木酸的臭氧化物。

目前测定蛋白质含量的方法有很多种，下面列出根据蛋白质不同性质建立的一些蛋白质测定方法：

物理性质：紫外分光光度法。

化学性质：凯氏定氮法、双缩脲法、Lowry法等。染色性质：考马斯亮蓝染色法、银染法。其他性质：荧光法。

一、凯氏定氮法： 根据蛋白质的含氮量来测定蛋白质的含量

公式:每g样品中含氮克数 × 6.25 ×100

二、比色法：利用蛋白质与不同试剂的呈色反应，测定蛋白质的含量，如双缩尿法和酚试剂法（lowry’s method）。

三、紫外分光光度法：利用蛋白质对280nm紫外光有最大的吸光度而采用

第四篇：生化心得体会

生化心得体会——糖的一生

糖是人体所必需的一种营养，经人体吸收后马上转化为碳水化合物，以供人体能量。糖主要分为单糖和双糖。单糖——葡萄糖，分子式为C6分子单链，人体可以直接吸收再转化为人体所需。双糖——食用糖，有些糖人体不能直接吸收，须经胰蛋白酶转化为单糖再被人体吸收利用。以上便是糖的简介，接下来便是进入我们正题——糖的一生。

说道糖的一生，那可是多姿多彩，但又是那么的短暂。糖的一生最主要的就是糖代谢，糖代谢又分为好多种，什么糖的氧化，磷酸戊糖途径，糖原合成与分解和糖异生。当人吃东西的那一刻起，便到了糖的繁殖期。糖的繁殖分为三种，第一是食物会在人的转化为糖。第二种是肝糖原分解成为糖。第三种是非糖的物质转化如甘油，乳酸及生糖氨基酸通过上面所说糖代谢中的糖异生转化为糖。而糖的繁殖期是非常短暂的。因为人体时时刻刻都需要消耗能量，而葡萄糖作为人体能量的直接来源，所以他也被时时刻刻的转化为能量，也就是糖的去路。糖的去路大致分为5种。第一种是糖的氧化分解。第二种是肝糖原和肌糖原的合成。第三种是转化为其他糖类糖类近似物。第四种是转化为非糖物质。第五种是随人的尿液或汗液排出体外，而出现这种情况就是临床上所说的糖尿病，由此可以看出糖的代谢是多模的重要。

提到糖代谢，最主要的就是糖的无氧氧化和糖的有氧氧化。因为糖的大部分去路都是走的这条路径，而这两条途径中最重要的就是有氧氧化。糖的无氧氧化一共有10步。葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸；葡萄糖-6-磷酸转变为果糖-6-磷酸；果糖-6-磷酸转变为果糖-1,6-二磷酸；果糖-1,6-二磷酸裂解成2分子磷酸丙糖；磷酸二羟丙酮转变为3-磷酸甘油醛；3-磷酸甘油醛氧化为1,3-二磷酸甘油酸；1,3-二磷酸甘油酸转变成3-磷酸甘油；3-磷酸甘油酸转换为2-磷酸甘油酸；2-磷酸甘油酸脱水生成磷酸烯醇式丙酮酸；磷酸烯醇式丙酮酸将高能磷酸基转移给ADP生成ATP和丙酮酸。而这些过程可以规划为活化、裂解、放能、还原。活化阶段又分为磷酸化、异构、再磷酸化。这些步骤中需要另一种人体必需物质——酶的催化，这就是糖的无氧氧化。糖的有氧氧化就不向无氧氧化这样简单，他不紧经历了无氧氧化的经历，已经了无氧氧化没有的经历。而有氧氧化又是错综复杂的，虽然它分为葡萄糖经酵解生成丙酮酸；丙酮酸进入线粒体氧化脱羧生成乙酰辅酶A；乙酰辅酶A进入柠檬酸循环以及氧化磷酸化生成ATP这三步。但每一步幽会多多少少分成号多小步，尤其是柠檬酸循环，竟分为8步，而其中又有很多的酶，而且乙酸辅酶A在很多代谢中都会产生，所以很多代谢都要经过糖的有氧氧化，所以说糖的有氧氧化是主要的，也是错综复杂的。产生的能量也是最多的。接下来便是磷酸戊糖途径，意思是从糖酵解的中间产物葡萄糖-6-磷酸开始形成旁路，通过氧化、基团转移两个阶段生成果糖-6-磷酸甘油醛，从而返回糖酵解的代谢途径，已成为磷酸为糖旁路。它分为两个阶段，第一是氧化阶段，第二是一系列基团转化反应。磷酸戊糖途径的生理意义生成NADPH和磷酸戊糖。再来就是糖原的合成与分解，这也是最简单的途径，糖原就是由多个葡萄糖连接成的多聚体，糖原的合成与分解受严格调控。最后就糖异生，也是相当重的要一条途径。糖异生的定义是饥饿下由非糖化合物（乳酸、甘油、生糖氨基酸等)转变为葡萄糖或糖原的过程成为糖异生。糖异生的生理意义是维持血糖的恒定。它其中也是分为好多步，也是错综复杂的，糖的异生一般发生在正在处于一种饥饿状态下的人体，他们无法靠外界摄取糖类或者能量，只能靠体内的一些非糖物质进行转化为糖类，来提供体内所需的能量。所以说，糖异生也是糖代谢中的重要环节

以上是糖代谢的几个大的方面，还有一些小的方面，比如说随着尿液与汗液排出体外，当然这是一种病例的体现，如果有人发生这种情况，一是这个人体内糖分过高，二是这个人体内糖不能进行正常的代谢，临床上把这种现象成为糖尿病，得了这种病的人要及时去就医，随然刚开始病状不会很明显，但如果到了最后，病情变得严重了那就会有一系列的后果，如：糖尿病足病、糖尿病肾病、糖尿病眼病、糖尿病脑病、糖尿病性心脏病、糖尿病胰腺癌、糖尿病皮肤病、糖尿病性病、糖尿病口腔病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病神经病变、糖尿病合并高血压、无症状糖尿病、糖尿病ED。这些都是糖尿病的并发症，这不禁让我想起一句话，改编一下就是，糖尿病不是病，可病起来那是真要命呀。所以糖的代谢在人的一生当中是不可缺少的东西。

以上便是我今天所介绍的我的生化心得——糖的一生

临床三班

袁朔 201310010312

第五篇：生化实验计划

2016-2017学年第一学期生物化学教研室实验室工作计划

一、指导思想

坚持以邓小平理论和“三个代表”的重要思想及科学发展观为指导，践行社会主义核心价值观,开展教育教学改革，全力推进以高等卫生职业教育为核心的素质教育，抓好教育教学管理工作。

二、工作计划

（一）实验室日常管理计划

1、牢固树立“教学中心”意识，对实验室的仪器耗材进行精确登记备案，以便为《生物化学》实验做好后勤服务。

2、严格执行仪器使用人使用仪器必须登记的规章制度。

3、严格执行及时更新实验耗材的规章制度。

4、严格执行实验安全条例，做好实验室安全意识宣讲，做到实验室安全零事故。

5、严格执行实验室值日制度。

6、严格执行实验室卫生制度，保持实验室卫生整洁，给学生提供一个良好的实验环境。

7、严格执行学院规定及时批改实验报告。

8、切实做好实验课的示教工作。

（二）实验室师资队伍建设

1、开展政治学习和业务学习，特别是学习社会主义核心价值体系和人才培养水平评估标准，提高教师的政治品德和业务素养，组织教师开展高等卫生职业教育理念讨论，切实转变教学理念，改变教学方式，提高教学水平。

2、加强实验指导教师的管理和培养，提高实验实训的准备能力和指导水平。

3、加强实验指导教师的安全责任意识。

生物化学教研室 2016年9月