第一篇:关于血细胞分析仪的几个问题
关于血细胞分析仪的几个问题
一. 发展简史
1947年美国科学家库尔特(W.H.Coulter)发明了用电阻法计数粒子的专利技术。1956年他又将这一技术应用于血细胞计数获得成功,其原理是根据血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行血细胞计数和体积测定,这种方法称为电阻法或库尔特原理。1962年,我国第一台血细胞计数仪在上海研制成功。到了60年代未血细胞分析仪除可进行血细胞计数外,还可以同时测定HGB血红蛋白。70年代,血小板计数仪问世。80年代,开发了白细胞分类(3分类及5分类)。90年代,开发出了可对网状红细胞进行计数的血细胞分析仪,同时5分类及幼稚细胞检测更成熟,并发展成为血细胞分析流水线。
二. 如何选购血细胞分析仪
当前,在我国境内销售的的血细胞分析仪品牌很多,给医院的选购造成了一定的麻烦。如日本SYSMEX公司(东亚医用电子株式会社)的血细胞分析仪系列、美国库尔特公司(现已被贝克曼收购)的血细胞分析仪系列、日本光电公司的血细胞分析仪系列、美国丹能公司以及瑞典博尔医疗公司的血细胞分析仪系列。因此建议医院购买时从以下几个角度考虑:
1.实用性。医院应该根据自身的能力和标本量来决定购买何种档次的机器,不要盲目攀比,争相购买高档机器,从而造成仪器购置的浪费。
2.仪器性能。这是最关键的一个因素。不能完全相信厂家的宣传,要多听取专家意见和到友邻单位了解。
3.价格比。衡量同档次机器的价格。
4.售后服务。俗话说:救人如救火。对机器也是一样,机器损坏待修时间过长会造成病人对医院的信誉度下降,久而久之就会造成病人的流失。所以,机器的售后服务也是一个必须考虑的因素。
5.辅助设备、试剂、消耗品和零配件价格。要建立请专家进行论证的制度,纠正过去由院长一人说了算的错误做法。
三. 如何验收血细胞分析仪
1.验收前准备工作:仔细阅读说明书;按说明书要求准备仪器的工作环境和相关的外部设备;成立验收小组;拟定验收计划。
2.开箱:必要时请商检局派人参加;开箱后按照装箱单清点物品是否和装箱单一致。
3.安装:应该对安装过程进行详细的记录。
4.验收仪器的技术性能指标
(1)测定仪器试剂的本底;
(2)检测仪器的精密度:用高、中、低值新鲜血标本各测10次,计算X-S、CV值,取20~30个标本随机排列,各测3次,求出总重复性CV%,它代表批内精度、仪器稳定性、互染等因素的总和;
(3)互染率:取高、低两个浓度全血(高、低值相差4~5倍),先测定高浓度3次,接着测低浓度3次,再测高浓度3次,计算高对低、低对高的互染率;
(4)线性:取全血标本,用盐水稀释相当于全血的90%、80%、70%……,测得RBC、WBC、HGB结果做y=a+bx,a接近于0,b接近于1;
(5)校准:应由厂家提供全血校准物(低档仪器用校准颗粒及HGB校准液)进行校准;
(6)上述指标必须符合该仪器的出厂指标,才算验收合格。由验收小组成员、安装工程师及设备科同志签字后存档。
四. 如何对血细胞分析仪进行校准
仪器经使用一个阶段后应该作一次全面的校准,因为仪器本身是个比较器。一旦仪器产生漂移将带来分析误差及不精密度,所以仪器应该经常定期校准。
1. 仪器校准前准备:彻底清洗管道,去除管道中的残留血液、吸附的蛋白和纤维等,然后测定试剂空白,本底必须符合要求。
2. 校准物准备:检查校准物是否在有效期内,外观有无变质。从冰箱中取出后,必须平衡至室温,轻轻混匀,小心打开瓶盖,勿使血液溅出,分装成两瓶。
3. 在仪器上测定校准物,连续测定11次。第1次结果弃置不用,将2至11次结果计算S,绝对误差,相对误差。
4. 核对实测结果与校准物所示结果,检查实测结果有无升高或下降的趋向性。
5. 判断校准结果:校准标准要求如下表1。(1)如果各参数的绝对值误差和相对误差小于一级要求,属合格范围,不须作任何校准。(2)如果参数大于一级要求,小于二级要求,可按说明书要求调整系数。当调整后,可再测定另一瓶全血标准物,理应达到小于一级要求水平。(3)如果结果大于二级要求,则需通知厂家派工程师修理或调整,为保证病人标本测试质量,该仪器应暂停使用。
6. 表1校准标准 要求
绝对误差 相对误差
一级要求 二级要求 一级要求 二级要求
WBC 0.1×109/l 0.4×109/l 1.25% 5%
RBC 0.03×1012/l 0.08×1012/l 0.7% 8.0%
HGB 1g/l 8g/1 0.78% 3.0%
HCT 0.8% 1.7% 2.0% 4.5%
MCV 1.0fl 8.0fl 1.18% 2.5%
PLT 6.0×109/l 20.0×109/l 2.7% 9.0%
MPV 0.50fl 8.0fl 5% 20%
五.使用血细胞分析仪的注意事项
为了保证使用血细胞分析仪得出的结果能够尽量反映病人的真实情况,在使用时必须注意以下几方面:
1. 血样:由于静脉血受外界因素影响较小,成份比较稳定,检测结果准确度高重复性好,因此除婴儿外,建议取血者均应采用静脉血。如果采集未梢血时,注意不可局部过度挤压,避免血液中混入大量的组织液,而且易激活凝血系统产生局部凝血,导致检测结果的误差;第一滴血由于细胞成分不稳定应弃掉,用第二滴血进行检测。
2. 抗凝:使用拘橼酸盐抗凝剂时间过长易结晶,细胞形态易发生变化,影响计数结果的准确性;草酸盐易使血小板产生凝集,并可使白细胞形态发生变化,影响计数结果及分类;而肝素抗凝过量易引起白细胞凝集和血小板减少;EDTA-2Na较EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此国际血液学标准委员会(ICSH)1993年发表的文件中建议使用EDTA-2K作为血细胞分析仪的抗凝剂,用量为1.5~2.2mg/ml血。
3. 采血后用塞子密闭,室温保存不超过6小时。
4. 稀释:稀释器、吸样管要经过校准。吸血后吸样管外的血液要完全擦干净。血液稀释后要尽快测定,否则易引起“稀释性溶血”。
5. 混匀:检测前混匀很重要,如果无旋转式混匀器应颠倒混匀至少8次。
6. 试剂:血细胞分析仪对试剂的要求非常严格,要求有严格的渗透压标准、稳定的导电率、高标准的纯净度以及对仪器管道和阀路无腐蚀作用。因此溶血剂、稀释液及清洗剂等最好选用原厂配套产品。
7. 白细胞分类:首先必须明确,迄今为止,世界上无论多先进的血细胞分析仪,进行的白细胞分类都只是一种过筛手段,并不能完全取代人工镜检分类。要坚决纠正有些单位用了血细胞分析仪就丢掉镜检的错误思想。
8. 质量控制:血液分析必须建立严格的质量控制制度,才能保证结果的可靠性。
六.现代血细胞分析仪的主要进展
随着高科技的引用和基础医学的发展,各种先进的血细胞分析测试技术被应用到血细胞分析仪上。1987年Coulter公司发明的VCS(Volume,V,体积;Conductivity,C,电导性;
Scatter,S,光散射)技术可使血细胞未经任何处理,在与体内形态完全相同的自然状态下得出检测结果。而在SYSMEX的NE-8000和SF-3000血细胞分析仪中采用了阻抗和射频技术联合的白细胞分类法。进入90年代后,仪器的自动化程度增高(达到120份/小时);可进行多参数分析(高达30余项);精密度高(重复计数;保证微孔管清洁;取中段血;运动流式细胞计数原理;鞘流原理……);向5分类及鉴别幼稚细胞发展;准确度好,全面质量管理,保证仪器检测可靠性;具有智能化,可对同一病人诊断的前后进行对比,提出综合意见,确定诊断方向;更加注意保护操作人员的安全(SLS-Hb、自动混匀、进样、吸样针内外清洗等);向流水线发展,将血细胞分析仪、网织红细胞计数仪、推片、染色机联成流水操作线。最后,再强调一下,坚决反对用了血细胞分析仪后就不进行镜下复检和分类的错误倾向。
第二篇:自动血细胞分析仪操作规程
4.操作程序 4.1开机启动
首先开启仪器主机侧面板的电源开关,然后开电脑主机,仪器主机前面板状态指示灯变为橙绿闪烁,仪器主机初始化后开始自检,自检时仪器会自动灌注稀释液、清洗液及溶血剂,并清洗液路。自检完成后,仪器进入血液细胞分析窗口。
4.2本底测试
4.2.1放置洁净的空试管于采样针下,应确保采样针轻挨试管底部。在血液细胞分析窗口,点击“排液”图标,仪器通过采样针排出稀释液到试管中。
4.2.2在血液细胞分析窗口,点击“编号”图标,进入下一个编号操作,输入“0”,再点击“确定”按钮返回血液细胞分析窗口。(注意:仪器系统软件将本底测试的顺序号设定为0,试测试数据将不存储在仪器中,但禁止将血液样本的顺序号设定为0)。
4.2.3将盛有稀释液的试管放在采样针下,按仪器前面板的“RUN”键,待听到“滴”的一声后,方可移走试管。仪器开始自动计数、测量。
4.2.4计数过程中,在窗口的右下方有WBC、RBC的计数计时器,显示WBC、RBC的计数时间。当计数时间过长或过短时,仪器会发出故障报警,并给出报警提示。若出现报警提示,即参照说明第9章《故障处理》进行处理。
4.3质量控制
首次装机或在每天进行血液样本测试之前必须对仪器进行质控,具体参照说明第5章《质量控制》进行处理。
4.4标定
若本底测试,质控结果达不至要求,且某些参数漂移变化较大,则必须对仪器进行重新标定,具体参照说明第6章《标定》进行处理。
4.5血液样本的采集
4.5.1由于所有的临床样本、质控物、标定物均可能含有人血或人的血清,具有潜在的传染性,因此在处理这些物品时必须遵守已建立的实验室或临床操作规程,穿好工作服,戴好医用手套及安全眼镜。
4.5.2采血过程避孕必须干净、无污染,必须使用合格的抗凝剂。严禁剧烈摇动采血管。在室温下,静脉血只能保存4个小时,若在短时间内不能将血样处
理完毕,须将血样存放于2℃~8℃的冷藏室内保存。
4.5.3静脉血(全血)的采集
利用静脉穿刺采取静脉血,放于含有抗凝剂(EDTA-K2·2H2O)的干净试管内,抗凝剂能够保持红细胞、白细胞的形态不变,同时可抑制血小板聚集。轻轻摇动试管5-10次,将试管内的血液彻底摇匀。
4.5.4末梢血(预稀释)的采集
末梢血的采集一般采用局部穿刺法,典型的采集方法是从指端穿刺采集,采血管用20μL定容采血管。指端穿刺采集血液样本时,不能过分挤压穿刺部位,避免组织液混入血液,造成测试分析结果不准确。
4.6全血模式与预稀释模式的转换
4.6.1在电脑工作界面点击“全血”标识,屏幕上将弹出“转换到预稀释模式”,点击“是”,转换成“预稀释工作模式”,同时屏幕上的标识变成“稀释”标识。
4.7血样计数、分析 4.7.1预稀释模式
a)将洁净的空试管置于采样针下,在血细胞分析窗口,点击“排液”图标,仪器通过采样针排出稀释液到试管中。
b)试管移出,将20μL定容采血管内的血样迅速注入到准备好的盛有稀释液的试管中,并轻轻摇动试管,使血样与稀释液混匀。
c)将试管放于采样针下,应确保采样针轻挨试管底部。
d)按仪器前面板的“RUN”键,待听到“滴”的一声后,方可移走试管。e)仪器开始自动分析样本,请等待分析结果。4.7.2全血模式
a)轻轻摇动盛有标本的试管,血样充分混匀后,将试管置于采样针下。b)按仪器前面的“RUN”键,待听到“滴”的一声后,方可移走试管。c)仪器开始自动分析样本,请等待分析结果。
注意:在“预稀释”模式下,必要时可将剩余样本再进行一次计数。4.8样本资料的输入 4.8.1手工资料的输入
在血液细胞分析窗口,点击“资料”图标,弹出资料编辑窗口后,用鼠标点击需要输入项目的文本框并输入资料。资料输入完毕后,用点击“确定”按钮,仪器保存当前编号的资料并返回血液细胞分析窗口。
点击“下一个”按钮,可输入下一个编号的资料,这样就可以批量输入样本资料,然后批量样本测量。点击“取消”按钮,仪器取消本次输入的资料并返回血液细胞分析窗口。
注意:序号0是仪器本底测试的专用序号,在正式的血液标本测试时请勿输入此序号。
4.9测量结果分析、处理
仪器提供丰富、便捷的测量结果分析、处理功能。点击“图形”图标,可以修改分析结果。
点击“传输”图标,可以将当前样本数据传输到网络。
点击“记录”图标,可以将当前样本数据的分析报告,通过内置记录仪打印出来。
点击“打印”图标,可以将当前样本数据的分析报告或浏览历史详细的报告,通过外置打印机打印出来。
点击“报警音”图标,可以关闭故障的警报音,再次点可恢复报警音。点击“帮助”图标,可以进入帮助窗口,获得版本号等信息,点击“详细”按钮,进入帮助文件获得需要的帮助。
如果仪器分析所得到的参数的数值超过系统所设定的参数界限,仪器会用不同的颜色进行标记。
蓝色表示测试参数值低于系统设定的下限;红色表示测试参数值超过系统设定的上限。
如果计数时间低于系统内部设定的时间,则仪器会提示“WBC气泡”或“RBC气泡”,同时在检测结果前显示“B”。
如果计数时间高于系统内部设定的时间,则仪器会提示“WBC堵孔”或“RBC堵孔”,同时在检测结果前显示“C”。
当WBC直方图出现报警时,R1,R2,R3,R4,RM分别表示如下含义: *R1报警:提示淋巴细胞左侧区域异常,可能原因:RBC溶血不全、血小板凝
结、巨大血小板、疟原虫、有核红细胞、异常淋巴细胞、冷凝球蛋白及脂类克立等。
*R2报警:提示淋巴和单核细胞间区域异常,可能原因:异型淋巴细胞、异常淋巴细胞、姜细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞增多、原幼细胞等存在。
*R3报警:提示单核细胞与粒细胞之间区域异常,可能原因:有未成熟粒细胞、异常细胞和嗜酸性粒细胞存在。
*R4报警:提示粒细胞右侧区域异常,可能原因:粒细胞增多。
*RM报警:提示在白细胞的分区中,除以上区域外的多区存在异常,可能原因:以上多种原因共同存在。
当PLT的直方图出现异常时,其右侧会出现Pm报警提示,Pm报警的具体含义为:
*PM报警:提示血小板与红细胞交界处区域异常,可能原因:有血小板凝结、大血小板、小的红细胞、细胞碎片和纤维蛋白存在。
注意:若系统测试所得到的参数数值为“***”,表示本次测试数据为无效数据。(测试本底除外)
注意:当PLT直方图出现Pm报警时,参数PDW的测试值有可能为“***”。注意:当WBC的测试结果的数值小于0.5*109/L时,白细胞分类可能不准确,白细胞分类可能不准确,建议手工复查。
4.10报告输出
仪器提供内置热敏记录仪和外接打印机两种设备,可根据用户的需要配置。当血液样本分析完成后:
点击“传输”图标,可以将当前样本数据传输到网络。
点击“记录”图标,可以将当前样本数据的分析报告,通过内置记录仪打印出来。
点击“打印”图标,可以将当前样本数据的分析报告或浏览历史详细的报告,通过外置打印机打印出来。
当“自动打印”被选中:
若“记录仪”被选中,内置记录仪会自动打印出测试报告; 若“外接打印机”被选中,外接打印机会自动打印出测试报告;
若同时被选中,则记录仪和打印机可以同时输出报告。若“自动传输”被选中,仪器会自动将测试数据传输到网络。
记录仪、打印机、传输及测试报告的格式再“设置”窗口进行设置,具体设置方法、步骤请参考参照本说明书第4章《仪器设置》。
4.11分析结果修改
当操作者认为仪器的WBC、RBC、PLT浮动解表自动分类不能满足临床或实验室的特殊样本的分类需求,操作者可以根据临床或实验室的实际情况,采用人工移动分类界标进行WBC、RBC、PLT的调整。
注意:不必要或不正确的人工移动分类界标,可能导致不可信的分析结果。在用于临床前建议用镜检验证。
具体方法、步骤如下:
a)在血液细胞分析窗口,点击“图形”图标,此时WBC直方图被选中,其图形被红白相间的矩形框包围,点击屏幕下方的“参数”图标可以选择需要调整的WBC、RBC、PLT直方图参数。
b)确定要修改的直方图参数后,点击“分类”图标,选择需要调整的分类限,选中的分类限会由绿色虚线变为粉红色实线。
c)根据需要点击“左移”图标或“右移”图标,可分别向左或右移动选中的分类线,在直方图的左下方同时显示选中的分类线的数值,同时相应的检测结果也随着分类线的移动面变化。
d)调整完成后,点击“返回”图标,出现提示对话框,点击“取消”图标可以取消本次调整结果,点击“确定图标则存储本次调整结果。
4.12关机
a)在血液细胞分析窗口,点击屏幕右上角的“关机”图标,屏幕弹出关机窗口。
b)若关闭仪器,点击“是”。
c)仪器开始对液路进行保养、清洗,关机程序运行完毕后,仪器会自动退出系统,此时关闭仪器后面板的电源开关。
d)清理工作台并处理废液。
注意:禁止违规进行关机操作,否则将导致仪器性器性能和可靠性的降低。
5.支持性文件
5.1 URIT-3300全自动血液细胞分析仪使用说明书。5.2LZCDC-BX04检测设备操作规程编写要求。
第三篇:血细胞分析仪的基本结构
血细胞分析仪的基本结构
血细胞分析仪的基本结构介绍:
各类型血细胞分析仪结构各不同。但大都由机械系统、电学系统、血细胞检测系统、血红蛋白测定系统、计算机和键盘控制系统等,以不同的形式组成。
1.机械系统
各类型的血细胞分析仪虽结构各有差异,但均有机械装置(如全自动进样针、分血器、稀释器、混匀器、定量装置等)和真空泵,以完成样品的吸取、稀释、传送、混匀,以及将样品移入各种参数的检测区。此外,机械系统还发挥清洗管道和排除废液的功能。
2.电学系统
电路中主电源、电压元器件、控温装置、自动真空泵电子控制系统以及仪器的自动监控、故障报警和排除等。
3.血细胞检测系统
国内常用的血细胞分析仪,使用的检测技术可分为电阻抗检测和光散射检测两大类。
1)电阻抗检测技术:由信号发生器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成。这类主要用在二分类或三分类仪器中。
2)光散射检测技术:主要由激光光源、检测区域装置和检测器组成。
激光源:多采用氩离子激光器,以提供单色光。
监测区域装置:主要由鞘流形式的装置构成,以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流。
检测器:散射光检测器系光电二极管,用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号;荧光检测器系光电倍增管,用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号。
这类检测技术主要应用于“五分类、五分类+网织红”的仪器中。
4.血红蛋白测定系统由光源、透镜、滤光片、流动比色池和光电传感器组成。
5.计算机和键盘控制系统。
第四篇:血细胞分析仪简介
血细胞分析仪简介
血细胞分析仪又叫血液细胞分析仪、血球仪、血球计数仪等,是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一,随着近几年计算机技术的日新月异的发展,血细胞分析的技术也从三分群转向五分群,从二维空间进而转向三维空间,而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术,如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。
一、发展历史
20世纪初期,莫尔德兰采用光电器进行血细胞计数;1947年拉格克兰茨采用高效光电倍增管加上光电扫描技术及暗视野照明法进行学习吧检测分析,克服了莫尔德兰光电法中存在的问题,可试用于临床;1958年,库尔特在前人的基础上,采用电阻率变化与电子技术相结合的方法,研制出性能比较稳定、操作比较方便的血液分析仪,称为库尔特电子血球计数器。20世纪60年代,以库尔特原理为基础的各种类型血液分析仪应运而生并广泛应用,逐步替代了传统的显微镜常规操作。70年代,在库尔特原理上开发出了以激光鞘流技术为基础的各类血液分析仪。80年代初推出了双通道仪器,除可直接计数血小板外,还能得到淋巴细胞总数和百分数等14个参数。90年代以来,有的学者根据幼稚细胞和成熟细胞膜的结构差异进行细胞分类,特别是对幼稚细胞的检测,为血细胞计数仪开创了新的领域。基本原理
根据血细胞信号的获取方式不同,其原理可以归纳为5种:光电式、电容式、电阻式、离心式和激光散射式。
二、检测方法
1.体积、电导、激光散射法(VCS)
这是Beckman-Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法,它集三种物理学检测技术于一体,在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞,然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用,使白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变。然后应用鞘流技术将细胞推进到流动细胞计数池(Flowcell)中,接受仪器VCS三种技术的检测。
V代表体积(Volume)测量法,是采用经典的库尔特专利技术,用低频电流准确分析细胞体积。体积是区分白细胞亚群的一个重要的参数,它可有效区分体积大小差异显著的淋巴细胞和单核细胞。
C代表高频电导性(Conductivity),采用高频电磁探针原理测量细胞内部结构间的差异,也是该公司的专利技术。细胞膜对高频电流具有传导性,当电流通过细胞时,细胞核的化学组份可使电流的传导性产生变化,其变化量可以反映出细胞内含物的信息。该参数可用来区分体积相近而内部性质不同的细胞群体,如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞,由于它们的细胞核特性不同而在传导性参数上有所区别。
S代表激光散射(Scatter)测量技术,采用氦氖激光源发出的单色激光扫描每个细胞,收集细胞在10°~70°角度内出现的散射光(MALS)信号。该激光束可穿透细胞,探测细胞内核分叶状况和胞浆中的颗粒情况,提供有关细胞颗粒性的信息,可以区分出颗粒特性不同的细胞群体。例如细胞内颗粒粗的要比颗粒细的散射光更强,因此可以用于区分粒细胞中的嗜中性、嗜酸性和嗜碱性三种细胞。
2.电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术
典型机型如SysmexSE-9000/SE-9500/XE-2100等。这类仪器共有四个不同的检测系统,将标本用特殊细胞染色技术处理后再应用RF和DC技术对白细胞进行分类和计数。其共采用如下四个检测系统:
嗜酸性粒细胞检测系统:该系统是利用电阻抗方式计数。血液经分血器分血后部分与嗜酸性粒细胞计数溶血剂混合,特异的溶血剂使嗜酸性粒细胞以外的所有细胞均溶解或萎缩,这种含完整嗜酸性粒细胞的液体经阻抗电路计数。
嗜碱性粒细胞系统:该系统检测原理与嗜酸性粒细胞相同,不同的是其溶血剂只能保留血液中的嗜碱性粒细胞。
淋巴、单核、粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)检测系统:该系统采用电阻抗与射频联合检测方式,使用作用较温和的溶血剂,对核及细胞型态影响不大。在内外电极上存在直流和高频两个发射器。由于直流电不能达到细胞质及核质,而射频电能透入胞内测量核大小和颗粒多少,因此这两种不同的脉冲信号的个数及高低综合反映了细胞数量、大小(DC)和核及颗粒密度(RF)。由于淋巴细胞、单核细胞及粒细胞的大小、细胞质含量、核形态与密度均有较大差异,故可通过扫描得出其比例。幼稚细胞检测系统:该系统也是利用电阻抗方式计数。其原理是由于幼稚细胞上的脂质较成熟细胞少,在细胞悬液中加入硫化氨基酸后,由于脂质占位不同,结合在幼稚细胞上的硫化氨基酸较成熟细胞多,且对溶血剂有抵抗作用,故能保持幼稚细胞的形态完整而溶解成熟细胞,即可通过阻抗法检测。3.激光散射和细胞化学染色技术
在白细胞分类上,仪器采用两个通道进行,一个为过氧化酶检测通道,另一个为嗜碱细胞检测通道。
过氧化酶反应(peroxidase,POX)是血涂片染色的一个常用细胞化学染色方法,用于鉴别原始细胞与成熟的粒细胞,鉴别粒细胞与非粒细胞。染色后的细胞内无蓝黑色颗粒出现为阴性反应,出现细小颗粒或稀疏样分布的黑色颗粒为弱阳性反应,出现黑色粗大而密集的颗粒为强阳性反应。过氧化物酶主要存在于粒细胞系和单核细胞系中,各类白细胞对过氧化物酶的反应是这样的:早期的原始粒细胞为阴性,早幼粒以后的各阶段都含有过氧化物酶,并随着细胞的成熟过氧化酶含量逐渐增强,中性分叶核粒细胞会出现强阳性反应,嗜酸性粒细胞具有最强的过氧化物酶反应,嗜碱粒细胞不含此酶呈阴性反应。在单核细胞系统,除早期原始阶段外,幼稚单核和单核细胞会出现较弱的过氧化物酶反应。淋巴细胞、幼稚红细胞、巨核细胞等都为过氧化物酶阴性反应。过氧化酶检测通道就是根据这个原理设计的,它检测每一个通过流动计数池中的白细胞,经过激光照射所产生的过氧化酶散射光吸收率,来当然试剂和辅助试剂均进行了改良。1)过氧化酶最强阳性的嗜酸性粒细胞; 2)过氧化酶强阳性的嗜中性分叶核粒细胞; 3)体积较大、过氧化酶弱阳性的单核细胞; 4)体积较小、过氧化物酶阴性的淋巴细胞;
5)体积大于淋巴细胞且过氧化物酶阴性的未染色大细胞,此类细胞增加提示幼稚或原始的各类细胞可能出现。
在嗜碱细胞通道中采用的检测原理是:专用的嗜碱细胞试剂将除了嗜碱细胞以外的白细胞除去细胞膜,使其裸核化并体积变小,仅将嗜碱性粒细胞保持原有状态,体积明显大于其他类的白细胞。4.多角度偏振光激光散射技术
美国雅培公司(ABBOTT)推出的血细胞分析仪,在白细胞分类中采用独特的多角度偏振光散射(MAPSS)技术,其所生产的血细胞计数仪从CELL-DYN 3000,3200,3500,3700,4000,以及Sapphire(蓝宝石),在白细胞分类上均采用了MAPSS技术。该技术基本原理是细胞在激光束的照射下,在多个角度都产生散射光,仪器在四个角度的四个检测器将接收到的相应的散射光信号,然后经过微处理器分析处理,将各类细胞安置在散点图上的相应位置,并计算出白细胞分类结果。
多角度偏振光散射白细胞分类技术(Multi—Angle Polatised Scatter Separation of white cell,MAPSS)其原理是一定体积的全血标本用鞘流液按适当比例稀释。其白细胞内部结构近似于自然状态,因嗜碱性粒细胞颗粒具有吸湿的特性,所以嗜碱性粒细胞的结构有轻微改变。红细胞内部的渗透压高于鞘液渗透压而发生改变,红细胞内的血红蛋白从细胞内游离出来,而鞘液内的水分进入红细胞中,细胞膜的结构仍然完整,但此时的红细胞折光指数与鞘液的相同,故红细胞不干扰白细胞检测。在鞘流系统的作用下,样本被集中为一个直径30μm的小股液流,该液流将稀释的血细胞单个排列,然后通过激光束,激光照射于细胞上,在各个方向都有其散射光出现。
1)0°为前向角散射光,可粗略地测定细胞大小;
2)10°为狭角散射光,可测细胞结构及其复杂性的相对特征; 3)90°垂直光散射,主要对细胞内部颗粒和细胞成分进行测量。4)90°为消偏振光散射,基于颗粒可以将垂直角度的偏振激光消偏振的特性,将嗜酸细胞从中性粒细胞和其它细胞中分离出来。
5)这四个角度同时对单个白细胞进行测量和分析后,即可将白细胞划分为嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞5种。ABBOTT的五分类法定量很有意思,不用传统的体积定量,而是采用数量定量,每次计数时完成10000个细胞测定即停止。
三、分类结构 1.分类
⒈)按自动化程度分:半自动血细胞分析仪、全自动血细胞分析仪和血细胞分析工作站、血细胞分析流水线;
⒉)按检测原理分:自动化血液细胞分析仪按其工作原理主要可分为电阻型、激光型和运用多项高新技术的综合运用型(应用流式细胞术,细胞化学染色,特殊细跑质去除法等)。电阻型血液分析仪
血液按一定比例稀释后经负压吸引通过仪器的一个微孔小管,由于血细胞与稀释液相比是相对不良导体,当每个血细跑通过微孔时均挤代等体积的稀释液在电路上形成一短暂的电阻而导致电压的变化,产生相应的脉冲信号并经放大、甄别后被累加记录。脉冲数被转换为细胞数量;脉冲的高低与细胞体积大小成正比,经计算机处理得出各种血细胞的数量、血细胞体积大小的平均数、变异系数、占全血体积的百分比和体积大小分布直方图等。一般仪器分为红细胞/血小板和白细胞/血红蛋白两个通道,白细胞/血红蛋白通道需加入溶血剂使红细胞破坏后测定血红蛋白、白细胞数量和粗略分类(按溶血后白细胞体积大小分出两类或三类白细胞)。
由于电阻型血液细胞分析仪操作简便、快速、分析参数较多、价格便宜,目前已在国内普遍使用。激光型血液分析仪
血液按一定比例稀释后形成一个极细的液流穿过激光束,每个血细胞被激光照射后产生光散射并被光电倍增管接收。细胞的前向角散射与细胞的体积大小有关、侧向角(或高角)散射与细胞的内部结构、颗粒性质等有关,细胞数量则与细胞通过激光束时光散射的脉冲次数相同。各种检测信号被放大、甄别后经计算机处理可得到各种血细胞的数量和体积大小的平均数、变异系数、占全血体积的百分比及体积大小分布直方图等.血红蛋白测定同电阻型仪器.白细胞可分为三类细胞。
激光型比电阻型仪器稳定,不易受外电场的干扰,但激光管寿命有限。
综合型血液分析仪
此类仪器是多种先进的细胞分析技术的高度综合应用,对血细胞的分析参数更多,结果也更准确。如Coulter VCS血细胞分析仪就采用了体积分析、高频传导和激光散射等多项技术,Technicon H*3血细胞分析仪则采用了激光流式细胞分析、细胞化学染色、细胞分光光度术等多项技术。Technicon H*3的分析参数可达四十余项,对红细胞除可作一般分析外尚可对单个细胞内血红蛋白含量、浓度、细胞大小不等、高低色素性变化做出定量描述,而且可测定网织红细胞的数量、形态、体积、血红蛋白含量及浓度等.对白细胞可分出三类5种并提示幼稚细胞数量,还可对核象左移、核象右移、过氧化物酶染色强度作定量描述,而且还能分析淋巴细胞亚群等。
此类综合型仪器的性能代表了当今血液细胞分析仪的最新发展趋势,但价格昂贯,在临床常规血液学检查方面尚难普及。
⒊按仪器分类白细胞的水平分:二分群、三分群、五分群、五分群+网织红血细胞分析仪。2.基本结构
各类型血细胞分析仪结构各不同。但大都由机械系统、电学系统、血细胞检测系统、血红蛋白测定系统、计算机和键盘控制系统等,以不同的形式组成。3.机械系统
各类型的血细胞分析仪虽结构各有差异,但均有机械装置(如全自动进样针、分血器、稀释器、混匀器、定量装置等)和真空泵,以完成样品的吸取、稀释、传送、混匀,以及将样品移入各种参数的检测区。此外,机械系统还发挥清洗管道和排除废液的功能。电学系统
电路中主电源、电压元器件、控温装置、自动真空泵电子控制系统以及仪器的自动监控、故障报警和排除等。4.血细胞检测系统
国内常用的血细胞分析仪,使用的检测技术可分为电阻抗检测和光散射检测两大类。
⑴电阻抗检测技术:由信号发生器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成。这类主要用在二分类或三分类仪器中。
⑵光散射检测技术:主要由激光光源、检测区域装置和检测器组成。
⑶激光源:多采用氩离子激光器,以提供单色光。
⑷监测区域装置:主要由鞘流形式的装置构成,以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流。
⑸检测器:散射光检测器系光电二极管,用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号;荧光检测器系光电倍增管,用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号。这类检测技术主要应用于“五分类、五分类+网织红”的仪器中。5.血红蛋白测定系统
由光源(一般为540nm波长)、透镜、滤光片、流动比色池和光电传感器组成。6.计算机和键盘控制系统
使检测过程更加快捷、方便。
四、注意事项
为了保证使用血细胞分析仪得出的结果能够尽量反映病人的真实情况,在使用时必须注意以下几方面:
1.血样:由于静脉血受外界因素影响较小,成份比较稳定,检测结果准确度高重复性好,因此除婴儿外,建议取血者均应采用静脉血。如果采集未梢血时,注意不可局部过度挤压,避免血液中混入大量的组织液,而且易激活凝血系统产生局部凝血,导致检测结果的误差;第一滴血由于细胞成分不稳定应弃掉,用第二滴血进行检测。
2.抗凝:使用拘橼酸盐抗凝剂时间过长易结晶,细胞形态易发生变化,影响计数结果的准确性;草酸盐易使血小板产生凝集,并可使白细胞形态发生变化,影响计数结果及分类;而肝素抗凝过量易引起白细胞凝集和血小板减少;EDTA-2Na较EDTA-2K的可溶性低,血小板凝集的可能性大。因此国际血液学标准委员会(ICSH)1993年发表的文件中建议使用EDTA-2K作为血细胞分析仪的抗凝剂,用量为1.5~2.2mg/ml血。
3.采血后用塞子密闭,室温保存不超过6小时。4.稀释:稀释器、吸样管要经过校准。吸血后吸样管外的血液要完全擦干净。血液稀释后要尽快测定,否则易引起“稀释性溶血”。
5.混匀:检测前混匀很重要,如果无旋转式混匀器应颠倒混匀至少8次。
6.试剂:血细胞分析仪对试剂的要求非常严格,要求有严格的渗透压标准、稳定的导电率、高标准的纯净度以及对仪器管道和阀路无腐蚀作用。因此溶血剂、稀释液及清洗剂等最好选用原厂配套产品。
7.白细胞分类:首先必须明确,迄今为止,世界上无论多先进的血细胞分析仪,进行的白细胞分类都只是一种过筛手段,并不能完全取代人工镜检分类。要坚决纠正有些单位用了血细胞分析仪就丢掉镜检的错误思想。
8.质量控制:血液分析必须建立严格的质量控制制度,才能保证结果的可靠性。
第五篇:五分类全自动血细胞分析仪
五分类全自动血细胞分析仪
1、白细胞五分类全自动血细胞分析仪,检测速度CBC/Diff ≥59 标本/小时。
2、测定参数包括细胞计数,细胞分类,幼稚细胞,异型淋巴细胞等,不少于26项, 其中研究用参数不得少于6项。
★
3、血小板检测要求有脉冲编辑、重叠校正、两次计数等至少3项技术确保检测准确
4、要有嗜碱细胞的检测通道
★
5、能用末梢全血检测白细胞五项分类,所需试剂种类为5种
6、CBC+Diff分析全血进样量要求:≤53L
7、有废液报警功能
★
8、要求有原厂生产的校准品和质控品,要求校准品有溯源性,并提供溯源性证明文件。★
9、免费提供的实验室质量保证活动(IQAP),达到实验室与国际接轨。★
10、CAP认可的免日常维护,操作简便。★
11、精密度要求达到 WBC RBC Hgb HCT <2% <2%(10X103细胞/µl)(5X106细胞µl)
<1%
(15g/dl)
<2% <5%(45%)(300X103细胞/µl)PLT
★
12、厂家在河南省有独立注册的服务机构(提供营业执照)
★
13、中标单位须在中标通知书下发三日内,携带中标通知书与厂家授权书(或代理商授权书)与用户签订合同。肺功能检查仪检测(便携式)
一、检测项目:
用力肺活量(FVC)、肺年龄、静息肺活量(SVC)、最大通气量(MVV)、支气管扩张试验(BD)、支气管激发试验(PC20)
二、测量指标:
1、FVC(用力肺活量):FVC、PEF、FEV0.75、FEV1、FEV3、FEV6、FEV0.75/FVC、FEV1/FVC、FEV3/FVC、FEV6/FVC、FEV0.75/FEV6、FEV1/FEV6、EVE、LUNG AGE
2、流速容积曲线:PIE、FIVC、FIV1、FIV1/FIVC
3、呼吸峰流速:PEFT、MEF75、MEF50、MEF25、FEF75、FEF50、FEF25、MMEF、FET25、FET50、MIF75(FIF75)、MIF50(FIF50)、MIF25(FIF25)、FEF50/FIF50(R50)
4、肺龄、肺器官年龄损害程度
5、VC/SVC(静息肺活量):VC/SVC、ERV、IRV、TV、IC、IVC
6、MVV(最大肺通气量):MVV、MVVF、MRF
7、支气管扩张试验(BD):VC/SVC,FVC,MVV
8、支气管激发试验:PC20
三、技术性能/指标:
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1、全中文操作界面及可选不同格式的打印报告,方便各级医院,特别是基层医护人员操作使用
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2、采用可调彩色6英寸触摸屏,薄膜按键方便选择、快捷操作
3、最新的LILLY型压差式双向流速传感器,测试精确度高重复性好
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4、传感器采用航天纳米UM薄膜过滤技术,耐用且防止交叉感染,方便更换、清洗、消毒。★
5、内置自动BTPS传感器,实时调整环境数据,实时校对传感器有效保障测试数据的精准度
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6、专门设有特殊人群测试指导卡通动画,提高老龄及幼龄受测者的测试质量。
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7、专门设有激发试验,扩张试验规程菜单,按不同测试要求自行编辑药物名称和剂量,检查结果自动计算,结果用不同颜色曲线标识,清晰明了,无需额外高额购买激发升级软件,检测质量稳定,性价比高,准确安全
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8、全面的肺通气功能检查和一口气用力肺活量检查可供选择,医护人员可因临床检查或大规模体检的要求相互切换,提高工作效率。更适合体检中心与疾控中心 ★
9、专门设有由全球肺创仪肺功能预计值公式专责委员郑劲平的预计值公式。适合全球所有年龄,多民族男女。可根据测试者年龄自动采用成人或儿童预计值公式,统计数据广泛、准确、权威。
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10、自带高速热敏打印机和USB输出端口,可通过仪器热敏打印图文丰富的报告,或通过USB输出端口连接计算机打印A4纸报告,中文报告显示,随意编辑所需的项目参数
11、测试结果自动分析并选择最佳结果,储存空间300份完整报告,并储存电脑数据库 ★
12、内置蓄电池,可交流、直流两用。可便携使用,方便医生临床,外出体检使用。★
13、可升级心、肺功能检测仪
14、流速:16L/WITH
精度:±5%或50ml/s(更大值适用)
15、容积范围:0.025L-8L
容量精确度:±3%或50毫升(更大值适用)
16、产品通过CE认证,中国与美国FDA认证和ISO国际认证
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四、中标单位须在中标通知书下发三日内,携带中标通知书与厂家授权书(或代理商授权书)与用户签订合同。