分子诊断学教学大纲

第一篇：分子诊断学教学大纲

《分子诊断学》理论教学大纲(本科)编写单位：临床生物化学教研室

参考教材：《分子诊断学》，尹一兵主编，高等教育出《分子诊断学》教学大纲

课程编码：版社，第1版，2007年

05290040 课程名称：分子诊断学（Molecular Diagnose）学分:2.5 总学时：50学时

理论学时：38学时 实验学时：12学时 先修课程要求：生物化学、细胞生物学、医学微生物学、医学免疫学 适应专业：医学检验 教材： 1.尹一兵.分子诊断学，高等教育出版社，第1版，2007年1月； 2.查锡良.生物化学，人民卫生出版社，第七版，2008年1月

一、课程在培养方案中的地位、目的和任务 分子诊断学是临床检验诊断学的一个重要分支。是利用分子生物学技术来研究机体外源性和内源性生物大分子和大分子体系的存在、结构或表达调控的改变，从而为疾病诊断，病情监测，药物疗效，预后判断和疾病预防等多方面提供信息和理论依据。随着分子生物学理论与技术在临床检验中的应用，分子诊断学成为当代医学的重要前沿领域，将在临床检验工作中逐步进入主导地位。

二、课程的基本要求 了解分子诊断学性质、任务、发展历程；掌握有关分子诊断学的基本理论和基础知识，重点掌握基因与基因组结构特点与功能；真核生物和原核生物的基因表达调控的基本原理；掌握分子诊断学常用技术方法，着重掌握基因工程技术、PCR、分子杂交、核酸测序、生物芯片技术等分子生物学核心实验技术；了解分子生物学新技术及应用、新进展，并学习DNA提取、PCR基因克隆技术等基础实验，培养学生实验操作技能和实际动手能力。

三、学时安排

（理论课

38学时）授课内容

总学时 理论学时 实验学时 备注 绪论 2 基因组概论 2 8 基因表达调控 4 蛋白质组学 2 生物大分子物质的分离与纯化 2 重组DNA技术 4 PCR 6 4 核酸测序技术 2 核酸分子杂交技术 2 生物芯片技术 2 生物信息学概论 4 其他分子诊断检测技术 4 复习2 总计 50 38 12

四、考核 考核方式：理论考试笔试。成绩构成：理论考试,70%，实验和平时成绩30%。

五、课程基本内容 第一章 绪论 [目的要求] 1.了解分子诊断学的发展简史 2.熟悉分子诊断学研究的主要内容 3.熟悉临分子诊断学在医学中的应用 [讲课时数] 2学时 [教学内容] 1.分子诊断学的性质、任务和特点 2.分子诊断学的历史、现状及未来 3.分子诊断学的现状 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第二章 基因组概论

[目的要求] 1.了解基因组学的发展及研究内容 2.熟悉基因组计划主要内容 3.掌握基因与基因组概念 [讲课时数] 2学时 [教学内容] 1.基因 2.基因组 3.基因组计划 4.基因组学 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第十三章 基因表达调控（生物化学）[目的要求] 1.熟悉基因表达调控的基本概念 2.熟悉基因表达调控的基本原理 3.熟悉原核生物和真核生物基因表达调节方式 [讲课时数] 4学时 [教学内容] 1.基因表达调控的基本概念 2.基因表达调控的基本原理 3.原核生物基因表达调节 4.真核生物基因表达调节 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第五章 蛋白质组学 [目的要求] 1.熟悉蛋白质组学研究特点及研究内容 2.熟悉蛋白质组学主要技术 3.掌握蛋白质组学基本概念 [讲课时数] 2学时 [教学内容]

1.蛋白质组学基本概念

2.蛋白质组学研究特点 3.蛋白质组学主要技术 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第六章 核酸的分离与纯化 [目的要求] 1.熟悉核酸分离与纯化的设计与原则 2.熟悉常用基因组DNA、质粒DNA和RNA分离与纯化原理与方法 [讲课时数] 2学时 [教学内容] 1.核酸分离与纯化的设计与原则 2.基因组DNA的分离与纯化 3.质粒DNA的分离与纯化 4.RNA的分离与纯化 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第七章 重组DNA技术 [目的要求] 1.了解重组DNA技术的临床应用 2.了解重组DNA技术常用载体 3.熟悉重组DNA技术的一般步骤 4.掌握限制性核酸内切酶作用特点与重组DNA技术概念 [讲课时数] 4学时 [教学内容] 1.重组DNA技术概念 2.重组DNA技术体系 2.基因组DNA技术常用载体 3.重组DNA技术一般操作步骤 4.重组DNA技术的应用 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学

第八章 PCR [目的要求] 1.了解 PCR

技术的临床应用 2.了解荧光定量PCR 3.熟悉 PCR的设计及影响因素 4.掌握PCR反应原理 [讲课时数] 6学时 [教学内容] 1.PCR反应原理 2.PCR的设计及影响因素 3.荧光定量PCR 4.PCR检测技术的临床应用 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第十章 核酸测序技术 [目的要求] 1.了解 DNA测序策略 2.了解DNA测序新技术及DNA自动化测序 3.熟悉 Sanger双脱氧链终止法原理与过程 4.熟悉化学测序法原理与过程 [讲课时数] 2学时 [教学内容] 1.Sanger双脱氧链终止法 2.化学测序法 3.DNA测序策略 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第九章 核酸分子杂交技术（2学时）[目的要求] 1.了解 液相核酸分子杂交 2.熟悉传统的核酸分子杂交技术（Southern印迹、Northern印迹、原位杂交）。

3.熟悉常用探针标记方法

4.掌握核酸分子杂交基本原理 [讲课时数] 2学时 [教学内容] 1.核酸分子杂交的基本原理 2.核酸分子杂交常见探针与标记 3.传统核酸分子杂交技术 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第十一章 生物芯片技术 [目的要求] 1.了解 芯片实验室 2.熟悉基因芯片基本原理及技术 3.熟悉 蛋白质芯片基本原理及技术 [讲课时数] 2学时 [教学内容] 1.基因芯片原理、技术与应用 2.蛋白质芯片原理、分类、技术与应用 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学 第十三章 生物信息学概论 [目的要求] 1.了解 生物信息学的定义 2.了解重要生物信息数据库 3.了解核酸数据分析与蛋白质数据分析 [讲课时数] 4学时 [教学内容] 1.生物信息学的定义与发展历史 2.数据库检索 3.核酸数据分析与蛋白质数据分析 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学

第十二章 其他分子诊断检测技术 [目的要求] 1.了解 基因变异检测技术 2.了解脉冲电场凝胶电泳技术 3.了解分子影像技术 4.了解凋亡常用检测方法 5.了解RNA干扰 [讲课时数] 4学时 [教学内容] 1.基因变异检测技术原理、技术与应用 2.脉冲电场凝胶电泳技术原理、技术与应用 3.分子影像技术原理、技术与应用 4.凋亡常用检测方法原理 5.RNA干扰 [教学方法]讲授法 [教学手段]多媒体教学

第二篇：诊断学教学大纲-四川大学

四川大学华西临床医学院

诊断学教学大纲

（供口腔、法医、预防、医检、妇幼、医技、营养等）

四川大学华西临床医学院内科教研室

二O一五年九月

目录

前言……………………………………………………………………………………………… 绪论……………………………………………………………………………………………… 常见症状…………………………………………………………………………………………

一、发热………………………………………………………………………………………

二、疼痛………………………………………………………………………………………

三、呼吸困难………………………………………………………………………………

四、咳嗽、咳痰、咯血……………………………………………………………………

五、水肿、心悸、紫绀……………………………………………………

六、腹泻、腹痛……………………………………………………………………………

七、消化道出血………………………………………………………………………………

八、黄疽……………………………………………………………………………………… 问诊、书写病历……………………………………………………………………………… 检体诊断…………………………………………………………………………………………

一、基本检查方法及一般状态检查………………………………………………………

二、头、颈部检查…………………………………………………………………………

三、胸廓、肺部检查………………………………………………………………………

四、心、血管的检查……………………………………………………………………

五、腹部检查………………………………………………………………………………

六、生殖器、肛门、直肠、脊柱与四肢检查……………………………………………

七、神经系统检查…………………………………………………………………………

八、病历编写及诊断方法概述…………………………………………………………… 器械检查…………………………………………………………………………………………

一、心电图检查…………………………………………………………………………

二、超声波检查……………………………………………………………………………

三、实验诊断学（检验系）、血常规检查（讲、习）…………………………………

前言

一、诊断学是一门桥梁课，但它的内容以及在整个教学计划中的位置都更偏向为一门临床课，重点内容包括：问诊、检体诊断、实验诊断、心电图诊断、超声诊断。其它部分，未列入教学大纲中的内容，供学生自学参考。

二、诊断学总教学时数为90学时，其中检体诊断60学时，心电图检查15学时，超声波检查6学时。实验诊断5-6学时，其中课堂讲授36学时，临床见习45学时，电教9学时。

三、在诊断学教学过程中，转换角色，互相实践，应尽可能地多运用电子模具及接触临床，参加实践，以达到理论联系实际的目的。要注意引导学生努力学习运用辩证唯物主义的观点、方法，去认识问题、分析问题和解决问题。不断提高独立思考、分析和解决问题的能力。在本阶段的教学中，通过专业理论学习与临床实践，使学生逐步掌握诊断疾病的基本理论，基本知识和基本技能，为进一步学习各临床课程打下基础。

四、学习诊断学的要求：

1、学会问诊了解常见症状的发生机理和临床意义。

2、掌握检体诊断的基本理论和基本方法，以及典型体征的发生机理与临床意义。

3、熟悉实验诊断讲授内容的基本理论，临床意义和应用指征，并了解血液、尿液、粪便三项常用临床检验操作方法。

4、熟悉心电图各波形产生的基本原理，初步掌握正常心电图的各波形及各波的测量方法，并了解心电图检查的临床应用及其某些常见典型的异常心电图表现。

5、熟悉超声波检查的基本原理及应用范围。

6、初步学会对各方面临床资料进行综合、分析的方法。在教学过程中，逐步使学生具有独立编写完整的住院病历和提出初步诊断的能力。

绪

论

《教学要求》阐述诊断学是应用问诊、体格检查、化验室检查及器械检查等方法，进行调查研究，达到正确认识健康与疾病的一门课程。学习本课程，必须以辩证唯物主义的观点为指导，发扬“救死扶伤，实行革命的人道主义”的精神，全心全意为人民服务。

《教学内容》

一、学习诊断学的指导思想。

二、诊断学在临床医学中的地位与作用。

三、祖国医学对诊断学的贡献。

四、诊断学的基本内容：常见症状、问诊、体格检查，化验室检查，心电图检查，超声检查，病历编写与诊断思维方法，并概要介绍诊断方法的新进展。

五、学习诊断学的方法和要求。《教学时数》2学时 《教学方法》课堂讲授

常 见 症 状

《教学目的与要求》

症状学是机体在病理生理学或病理解剖学改变的基础上，病人主观感受到的异常感觉。重点了解常见症状的临床表现，启示学生了解症状分析对诊断疾病的重要作用。要求学生认识常见症状，并掌握其出现的原因，发生机理及临床意义。

《教学内容》：发热、疼痛、呼吸困难、咳嗽与咯血、心悸、紫绀、水肿、腹泻、腹痛消化道出血，黄疸。

一、发热（自学）

（一）发热的原因：

1、感染性发热；

2、非感染性发热。

（二）发热的起病方式（急缓），过程和临床常见的几种热型（稽留热、弛张热、间歇热、不规则热）。

二、疼痛（自学）

（一）在分析疼痛时应注意：

1、疼痛的位置与传播；

2、疼痛的特点与程度；

3、疼痛延续时间、频度或间期；

4、诱发、加重或减轻的原因；

5、伴随症状与体征。

（二）临床常见几种疼痛的特点：

1、头痛

2、胸痛

3、腹痛

4、腰痛

5、关节肌肉痛

重点了解疼痛的病因、发生机理及特点。

三、呼吸困难

重点了解呼吸困难的病因、机理与临床意义及表现：

·1·

（一）肺源性（呼气性、吸气性及混合性）；

（二）心源性（左心或右心功能不全）；

（三）其他原因（如中毒性、神经精神性等）。

四、咳嗽、咳痰、咯血

（一）咳嗽的性质、时间及伴随症状；

（二）咳嗽与咳痰的原因及临床表现；

（三）咯血的原因及临床表现；

五、紫绀：

（一）定义；

（二）中心性紫绀和周围性紫绀的特点和病因。

六、水肿

（一）病因、分类及特点；

（二）心源性水肿与肾病性水肿的鉴别要点。

七、心悸：常见的病因和发生机理。

八、腹泻

（一）腹泻的概念及发生机理；

（二）急性与慢性腹泻的常见原因及特点。

九、消化道出血

（一）呕血：

1、呕血常见的病因；

2、呕血与咯血的鉴别；

3、消化性溃疡出血与肝硬化合并食管静脉曲张破裂出血的鉴别。

（二）便血：便血的特点及临床意义。

1、鲜血便；

2、柏油样便。

十、黄疸

溶血性、阻塞性、肝细胞性黄疸的鉴别。《教学时数》4学时

《教学方法》课堂讲授：呼吸困难、心悸、紫绀、水肿、[咯血，腹痛、黄疸、消化道出血，自学]。

结合临床实习及典型病例示教，用理论联系实际的教学方法，对常见症状进行观察、·2· 讨论和分析。教材中的其他症状，供实习中结合临床自学与参考。

问

诊

《教学目的与要求》

问诊是采集病史，了解病情发生发展的重要方法，是诊断疾病的第一步，因此讲授时，要求学生充分认识问诊的重要性，并掌握问诊的主要内容与方法。

《教学内容》

一、问诊的重要意义

二、问诊的方法及注意事项

三、问诊的内容：

（一）一般项目

（二）主诉

（三）现病史

（四）既往史、个人史、婚姻史、月经及生育史、家庭史。

（五）各系统的问诊要点，呼吸系统、循环系统、泌尿生殖系统、消化系统、造血系统、内分泌系统及代谢障碍性疾病。

《教学时数》，习3学时。

《教学方法》教师在见习课堂中讲授:问诊内容、方法、病历书写格式及方法，并将举例说明如何问诊，写病历。

检

体

诊

断

基本检查方法及一般状态检查 《教学目的与要求》

一、掌握望诊、触诊、叩诊、听诊的基本方法。

二、熟悉一般状态检查内容。正常及异常体征的临床意义。《教学内容》

一、望诊、触诊、叩诊的检查方法。

·3·

二、性别、年龄及疾病的关系。

三、体温（测量体温的方法，正常范围及变异，以及引起差错的原因）、呼吸（见肺部检查）、脉搏及血压（见血管检查），并综合分析上述四项内容的临床意义。

四、发育及营养的判断方法，常见的意识障碍，精神状态，不同疾病的特殊面容及表情、姿势、体位（自动体位、被动体位、强迫体位）与疾病的关系。

五、皮肤的弹性、颜色、皮疹、出血点、瘀瘢、蜘蛛痣、水肿等的辨认以及临床意义。

六、淋巴结的检查方法、分布及其变化的临床意义。

七、头颈部检查。《教学目的与要求》

熟悉头部、颈部的检查顺序与方法，并了解正常状态和异常改变的临床意义。《教学内容》

一、头颅外部一般检查

二、眼、耳、鼻检查

三、口腔检查：唇、口腔粘膜、牙及牙龈、扁桃体、咽和腭、舌等的检查及临床意义。

四、颈部检查：颈部活动情况及外形检查，甲状腺及气管位置检查，颈静脉怒张及静脉或动脉搏动的临床意义。

《教学时数》6学时，（示教1，实习5）。《教学方法》

一、通过示教进行讲授，然后学生相互检查，反复练习检查顺序、方法及认识正常状态。

二、通过临床实习，检查病人，识别异常体征，并分析其临床意义。

胸廓、肺部检查

《教学目的与要求》

一、掌握望诊、触诊、叩诊、听诊四种基本方法在胸廓及肺部检查中的应用，通过相互检查，能获得较为准确的检查结果。

二、通过临床实习，熟悉肺部异常体征，并分析其临床意义。《教学内容》

一、胸部常用的骨骼标志、划线及分区的意义。

·4·

二、胸廓：正常及病态胸廓。

三、肺部检查。

（一）望诊：肺叶在体表的投影，呼吸的类型，节律、深度的改变及其临床意义。

（二）触诊：语颤的检查方法，产生机理，正常胸部语颤的特点。

（三）叩诊：叩诊的方法及其注意事项，间接与直接叩诊法，重叩诊与轻叩诊法。叩诊音的种类：清音、过清音、鼓音、浊音及实音。肺界叩诊法及临床意义。

（四）听诊：

1、正常肺部呼吸音的种类（肺泡性呼吸音、支气管性呼吸音、支气管肺泡性呼吸音）、特点及分布。

2、病理性呼吸音及临床意义，肺泡性呼吸音的增强、减弱或消失。支气管性呼吸音，支气管肺泡性呼吸音。

3、啰音：啰音的发生机理、分类、特点和临床意义。湿性啰音（水泡音）：大、中、小水泡音，捻发音。干性啰音：哨笛音、鼾音。

4、胸膜摩擦音的发生机理、特点及临床意义。

5、语音传导：语音传导的检查方法及临床意义。

（五）呼吸系统常见病的主要体征：大叶性肺炎，肺气肿，胸腔积液等。《教学时数》12学时（课堂讲授

4、实习6，电教2）《教学方法》

一、教师指导学生相互检查，掌握检查的顺序和方法以及正常肺部体征。

二、在临床实习中示教典型体征，使学生熟悉肺部各种异常体征。配合电子模拟人实习。

三、通过实习达到独立写出呼吸系统疾病问诊及肺部检查记录。

心血管的检查

《教学目的与要求》

一、能比较准确地叩出心界。

二、掌握第一与第二心音产生的机理、鉴别要点，并了解其增强、减弱的临床意义。

·5·

三、熟悉心脏杂音的产生机理及临床意义，正确掌握其听诊要点，并能辨别收缩期及舒张期杂音。

四、熟悉常见心律失常的特点（心动过速，心动过缓，过早搏动及心房颤动）。

五、正确测量血压，并了解其改变的临床意义。

六、熟悉脉搏检查方法及血管体征。《教学内容》

一、心脏：

（一）望诊

1、心前区外形

2、心尖搏动：正常心尖搏动的位置、强度、范围及其改变的临床意义。

3、心前区及其他部位搏动的临床意义。

（二）触诊

1、心尖搏动的位置、强度、范围、节律及其改变的临床意义。

2、心前区震颤的原因、部位、时间（收缩期、舒张期及连续性）及其临床意义。

（三）叩诊

1、心脏叩诊方法。

2、正常心脏浊音界及心脏浊音界改变的原因、特点及临床意义。

3、心界各部的组成及胸部、腹部疾病对心浊音界的影响。

（四）听诊

1、各瓣膜听诊区的部位。

2、正常心音及其产生机理，第一、第二心音的鉴别方法。

3、心率与心律。

4、心音的变化。

（1）第一心音的强度、性质、改变的原因及临床意义。

（2）主动脉瓣区及肺动脉瓣区第二音增强、减弱或分裂的原因及临床意义。

5、心脏杂音

（1）心脏杂音的产生机理。（2）分析杂音的注意点：

部位、性质、杂音的时期（收缩期、舒张期及连续性）、强度（收缩期杂音的分级）及传导方向。

6、心包摩擦音的产生原因、特点、临床意义及其与胸膜摩擦音的区别。

·6·

二、血管：

（一）动脉搏动、脉率及脉律。

（二）脉搏的强弱、大小、血管紧张度与动脉壁的情况。

（三）水冲脉及奇脉。

（四）毛细血管搏动征。

（五）血管杂音及射枪音。

（六）动脉血压的测量方法及临床意义。

三、循环系统常见病变的主要症状和体征：心功能不全、慢性风湿性心瓣膜病等。《教学时数》12学时（课堂讲授4，实习6，电教2）。《教学方法》

一、课堂讲授后，学生互相检查，反复练习心脏及血管的检查方法。

二、通过临床实习，由教师指导进行心脏检查，听心音及心脏杂音，以电子模拟人实习为主。

三、通过临床实习并结合电教（如心音及心脏杂音的录音）逐步深入掌握心脏及血管常见的体征及其临床意义。

四、实习后，写出心血管检查的记录（包括病史及体征）。

腹 部 检 查

《教学目的与要求》

一、掌握腹部检查方法（重点为肝、脾触诊），了解体表划线、分区与腹腔内脏的对应关系。

二、熟悉腹部常见体征及临床意义。《教学内容》

一、腹部的体表标志及分区。

二、腹部检查

（一）望诊：

1、腹部外形；

2、呼吸运动；

3、腹壁静脉曲张；

·7·

4、蠕动波；

5、皮肤及其他

（二）触诊：

1、触诊方法；

2、触诊内容：腹壁紧张度，腹部压痛、反跳痛、包块及肝、胆、脾、肾的触诊。

（三）叩诊：

1、肝啤叩诊及肾区叩击痛；

2、移动性浊音及波动感。

（四）听诊：

1、肠鸣音；

2、振水音；

3、血管杂音。

三、腹部常见病的主要症状及体征：消化性溃疡、肝硬化腹水、腹膜炎。《教学时数》11学时（课堂讲授

3、示教

1、实习5，电教2）《教学方法》

一、课堂讲授后，教师示教检查方法，然后在教师指导下相互检查，练习检查手法。

二、通过临床实习，观察腹部异常体征的表现，在病情允许的情况下，指导学生亲手检查。配合电子模拟人实习。

生殖器、肛门、直肠、脊柱与四肢检查

《教学目的与要求》

了解肛门、直肠检查的重要性，熟悉脊柱，四肢的检查方法及病理改变的临床意义。《教学内容》

一、生殖器、肛门和直肠检查，以讲为主。

二、脊柱：正常曲度、畸形、压痛和叩击痛、运动功能障碍。三、四肢：肢体的位置与形态异常、运动障碍、关节病变、下肢静脉曲张。《教学时数》与腹部检查同时进行。

·8· 《教学方法》由教师示教脊柱、四肢的检查方法，学生相互检查。

神经系统检查

《教学目的与要求》

一、了解神经系统检查的内容及方法，（感觉、运动及植物神经功能的检查）。

二、颅神经：十二对颅神经，重点掌握面神经和舌下神经的中枢性损害和周围性损害的特点。

三、掌握神经反射的检查方法及临床意义。《教学内容》

一、简要讲授感觉神经、运动神经及植物神经功能检查的临床意义。检查方法由学生自学参考。

二、简要讲授神经反射的检查方法及病理反射的临床意义。

（一）浅反射：腹壁反射，提睾反射。

（二）深反射：二头肌反射、三头肌反射、桡骨膜反射、膝反射、跟腱反射。

（三）病理反射： 1.锥体束征。

（1）跖反射（babinski征）及与其临床意义相同的奥本海姆（Oppenheim）征、戈尔登（Gordon）征、、查多克（Chaddock）征。

（2）霍夫曼（Hoffmann）征（3）阵挛：髌阵挛及踝阵挛。

2、脑膜刺激征：（1）颈项强直

（2）克尼格（Kernig）征。（3）布鲁辛斯基（Brudzinski）征

3、拉塞格（Lasegue）征。

《教学时数》4学时（示教

1、实习2，电教1）《教学方法》

一、简要介绍感觉神经、运动神经及植物神经功能检查的临床意义。

二、介绍神经反射的检查方法及病理反射阳性时的临床意义。

·9·

三、在教师指导下，学生相互练习检查方法。

四、示教病理反射、指导学生检查，结合临床分析阳性时的临床意义。

五、通过电教，了解异常神经系统检查方法及临床意义。

病历编写及诊断方法概述

《教学目的与要求》

一、使学生了解，病历具有临床诊治疾病、教学、科研、法律依据等方面的重要意义。要求学生必须以认真负责、实事求是的态度编写病历，能独立写出格式正确、文字通顺，字体清楚，符合实际的病历。

二、结合临床实践，培养学生对诊断的综合分析能力，使学生熟悉症状、体征的现象与本质、共性与个性、局部与整体、主要矛盾与次要矛盾，形态与功能的关系。了解诊断步骤，逐步掌握诊断过程的思维方法。

《教学内容》

一、诊断步骤和思维方法。

（一）资料的收集、整理与分析。

（二）作出初步诊断。

二、病历编写。

（一）病历的重要性。

（二）病历编写中注意的事项。

（三）住院病历的格式及项目。《教学时数》9学时（示教3，实习6）

《教学内容》在临床实习中，认真采集病史，进行细致的体格检查，按正规格式编写出2-3份完整的病历。教师修改后讨论，指出病历编写中存在的问题，为临床各科实习奠定良好的基础，全身体格检查录像。

心电图检查

·10·

《教学目的与要求》

一、熟悉正常心电图各波的图形、正常值。

二、熟悉心电图检查的临床应用范围及临床意义。

三、熟悉几种常见异常心电图的特征。《教学内容》

一、简述心电图产生的原理及常用导联。

二、心电图的各个波段、波形的测量法及其正常值。

三、心电图的临床应用。

四、扼要介绍几种常见异常心电图的特征。

（一）左/右心房、心室肥大。

（二）期前收缩（房性、室性）。

（三）心房扑动、心房颤动。

（四）房室传导阻滞（一度/二度I型/二度II型/高度/三度）。

（五）WPW预激综合症。

（六）左/右束支传导阻滞。

（七）心肌梗死。（重点学习心肌梗死部位及时相的判断方法）《教学时数》15学时，（课堂讲授6，实习9。）《教学方法》

一、利用教具讲授心电图的产生、描记方法及导联等。

二、采取边讲解、边看心电图、边讨论和解答问题的方式进心电图的测量及几种异常心电图的教学。

三、学生独立阅读及测量正常或大致正常心电图，并写出报告，交教师批阅。

超 声 波 检 查

《教学要求》

一、了解超声诊断的原理，B型、M型检查方法及其临床应用的范围和价值。

二、了解肝占位性病变、胆囊和肾脏常见疾患以及妊娠的典型图象。

三、了解心脏内部结构的声象图、瓣膜病、心包积液、先天性心血管畸形的典型图象。

·11· 《教学内容》

一、超声诊断的物理基础，基本诊断原理，A、B、M、D各型超声检查的特点。

二、超声波的临床应用。

（一）肝胆疾患

（二）肾脏疾患

（三）妊娠声象图

（四）正常心脏声象图

（五）瓣膜病、心包疾患、心脏肿瘤、先天性心血管畸形。《教学时数》4学时（课堂讲授4学时）《教学方法》

一、讲解超声诊断的基本原理，A、B、M、D各型超声检查法的特点。

二、讲解各系统常见疾病超声的图象特点及其诊断价值。

三、课堂讲解时充分利用幻灯片和典型病例进行讲解，辅以典型病例录象示教。

实

验

诊

断

[教学目的与要求] 掌握 ：

实验诊断的定义，诊断性实验的选择与评价，以临床思维方式应用实验诊断项目。

熟悉

： 实验诊断学的定义及工作范围。了解 实验诊断学发展现状及未来。[教学内容] 实验诊断学的基本概念、主要内容和应用范围

实验诊断学的现状及进展

实验诊断的临床应用与评价

[自学内容] 标本的采集与处理

[教学时数] 讲课2学时

[教学方法] 应用多媒体进行理论讲解。

·12· “血常规检查” [教学目的与要求]

熟悉： 红细胞计数和血红蛋白测定及临床意义；白细胞计数和分类计数及临床意义；自动血细胞分析的检测参数及正常范围。

了解：

白细胞计数及分类计数；红细胞计数；血小板计数的测定方法

[教学内容]

红细胞常规检查：红细胞计数、血红蛋白测定；红细胞比积及有关参数；红细胞分布宽度；网织红细胞。

白细胞常规检查：白细胞计数及分类计数的测定及临床意义。

血小板常规检查：血小板数量及相关指标的测定及临床意义。

全血细胞分析：自动血细胞分析的方法；常见检测参数、细胞直方图、细胞分布图及异常信息指示；全血细胞检测的分析及临床应用。[实验内容]

白细胞计数及分类计数；红细胞计数；血小板计数。

[教学时数] 实验3学时

[教学方法] 1． 教师先讲解教学内容中的项目。2． 学生在教师指导下互检练习。

·13·

第三篇：(医学影像诊断学教学大纲

(<医学影像诊断学》教学大纲

(供七年制影像专门化用)前言

由于影像技术和设备的迅速发展，应用于临床的影像手段已经包括了x线、CT、MRI、核索成像技术、超声，以及参与治疗的介入放射技术。本课程重点以讲授x线、CT、超声学为主，扼要介绍MRI特点。介入放射学、核素成像另作安排。

本大纲采用2005年8月白人驹主编、人民卫生出版社出版、供医学影像学专业用的全国高等医药院校教材《医学影像诊断学》(第2版)为蓝本，结合本校及各系统专业授课教师的实际而编写。

本课程的教学是在学生学习完“人体结构”、“呼吸与循环模块”、“消化模块”、“骨骼与肌内模块”、“神经学模块”、“胚胎与生殖模块”系统基础模块课程及内、外、妇、儿部分临床核心模块等课程．而且完成了本科临床实习后，在第6学年进行的专科定向培养授课，在教学过程中强调联系和印证各系统模块的基础理论知识，并密切联系临床课专业知识。重点介绍本专业的基础理论、基本知识和基本技能即“三基”知识。

本课程以备系统放射学(x线、CT、MRI)和超声学的正常表现、基本病变、常见疾病的 诊断与鉴别诊断为主要内容。要求学生重点掌握“三基”的要求，强调全面观察、系统分析的临影像思维能力的锻练，为学生从事医学影像诊断专业打好良好的基础。

教师在教学活动中，必须贯彻小而精的原则，精讲多看(图像)，要充分发挥教导的主导作用，着重培养学生影像自学能力和影像思维能力。本学科属形态学科．因此要重视形象教学和直观教学，理论讲授与适当阅读影像图片相结合，还要充分利用视听教具，以多媒体课堂授课和阅片见习为主要教学方式，避免抽象式的理论教授。同时在教学过程中，必须注意言教身教，教书育人，寓医德于课堂教育中，促使学生在德育、智育的全面发展。

授课学时300(含x线、cT、MRI、超声)，理论讲授与实习l：1。根据各系统的篇幅·以 及临床发病就诊情况、教学片数量、、授课难点等因素，大致分配如下。放射学(260学时)：总论4学时，呼吸系统52学时，循环系统32学时，乳腺4学时，骨关节48学时，消、泌、殖62学时，中枢神经系统36学时，五官颈部16学时，机动6学时。超声40学时。以上根据每学期的教学计划、教师的特点，各部分教学学时可适当调整。核医学另作安排a

总

论(4学时)【教学要求】

通过医学影像诊断学总论的学习，在学习了影像技术学的基础上，对不同成像技术的特点 有进一步的理解，并了解各种影像技术在临床中的应用概况，同时了解医学影像诊断原则和诊断步骤、影像报告书写要点。

【教学内容】

一、医学影像诊断学的定义和发展概况。

二、不同成像技术的特点和l临床应用 1 x线图像的特点和临床应用 2 cT图像的特点和临床应片j 3 MRI图像的特点和临床应用

二、不同成像技术和方法的比较及综合应用 1不同成像技术和方法的比较

2不同成像技术和方法的综合应用

三、医学影像诊断原则和诊断步骤 l医学影像诊断原则

2．医学影像诊断步骤

四、正确书写影像诊断报告书 【教学方法】

课堂讲授。电脑幻灯中展示各种影像检查图片和有关示意图、线圈，说明图像的特点和临床应用概况。配以典型实例，讲解诊断原则和步骤。

呼吸系统(52学时)【教学要求】

一、了解呼吸系统的x线及cT检查方法。

二、掌握呼吸系统正常影像解剖基础及基本病变的x线和cT表现。

三、掌握呼吸系统常见病的x线和cT表现与诊断。

四、了解呼吸系统某些较少见病的x线表现。【教学内容】

一、了解胸部x线检查方法、价值与限度

二、掌握胸部影像学解剖

三、胸部基本病变的x线表现

四、常见的x线表现与诊断

1、掌握慢性支气管炎、支气管扩张、肺部毙霉菌性病变、肺结核、肺部肿瘤、以胸外伤、气管支气管异物的x线表现及诊断。

2、了解不常见疾病，如结缔组织病的肺x线表现、原因不明肺部病变、造血系统及网状内质系统病的肺部表现以及变态反应引起的肺部病变。

3、掌握胸膜炎、肠胸脓肿及胸膜肿瘤等x线表现及诊断。

4、掌握纵隔肿瘤与囊肿及肿瘤样病变的x线表现与诊断。

5、了解膈膨升、膈下脓肿、膈肌肿瘤的x线诊断。

6、了解胸癌术后改变及并发症的x线诊断。

五、胸部cT诊断

1、胸部cT检查应用价值与限度。

2、胸部cT检查方法。

3、正常胸部cT影像解剖。

4、常见病的cT表现与诊断。

①掌握纵隔常见病的cT表现与诊断。

②掌握肺癌、肺结核、肺炎、特发性间质纤维化肺气肿、肺囊肿、肺转移瘤的cT表现。

@了解尘肺、结节病及肺血管病变的cT表现-

④熟悉肺门部、胸壁及胸膜常见病变的cT表现。

【教学方法】

课堂理论讲授和阅片见。，电脑幻灯中展示典型病例图片，配以扼要的文字说明加以展开讲解。特别要注意病变图像与正常图像，以及不同病变影像的比较，培养学生阅片发现瘸灶的能力、诊断和鉴别诊断的能力。

循环系统(32学时)【教学要求】

一、熟悉心脏大血管的x线检查方法。

二、掌握心脏大血管正常x线表现。

三、掌握心脏各房室增大及肺循环改变的x线表现。

四、掌握常见心脏病的x线诊断。【教学内容】

一、引言

二、熟悉检查方法

1、普通x线检查

2、造影检查

三、掌握正常x线表现

1、不同体位正常心脏太血管的x线表现

2、肺门-和肺血管生理解剖结构及x线表现

3、心脏大血管的持动

4、心脏大血管的x线测量

四、掌握心脏大血管基本病变的x线表现

1、各房室增大

2、主要血管异常x线征象

3、肺循环改变

4、心脏移位和位置改变

五、掌握常见病的x线诊断

l、后得性心脏病：

风湿性心脏病、冠心病、高血压心、肺源性心脏病、心肌病、心先疾患、主动脉疾病。

2、先天性心脏病：

房缺、室缺、动脉导管未闭、肺动脉狭窄、法鲁氏四联症、先天性主动脉异常。【教学方法】

课堂理论讲授和阅片见。，电脑幻灯中展示典型病例图片，配以扼要的文字说明加以展开讲解。特别要注意病变图像与正常图像，以及不同病变影像的比较，培养学生阅片发现病灶的能力、诊断和鉴别诊断的能力。

乳腺(4学时)【教学要求】

一、了解乳腺钼靶检查意义、方法。

二、熟悉正常乳腺和常见乳腺疾病的x线表现。掌握泌尿系统x线解剖及生理。

三、了解乳腺CT/MRI。【教学内容】

一、乳腺铝靶检查意义、方法。

二、乳腺的基本解剖，生理变化。

三、乳腺疾病的基本病x线表现

四、常见乳腺病x线诊断。

五、乳腺cT、MRJ概况 【教学方法】

课堂理论讲授和阅片见习。电脑幻灯中展示典型病例图片．配以扼要的文字说明加以展开讲解。特别要注意不同年龄的乳腺图像、病变图像与正常图像，以及不同病变影像的比较。【教学要求】 消化系统(46学时)

一、熟悉消化系统检查方法。

二、了解胃肠道正常x线解剖及生理。

三、掌握胃肠道异常影像学表现。

四、掌握胃肠道疾病的x线诊断。

五、了解胆道系统的检查方法，正常x线表现及常见病x线诊断。

六、了解肝、胆、胰、腺CT检查基本方法、正常CT表现及常见病的CT诊断。【教学内容】

一、引言及消化道检查方法。

二、掌握胃肠道正常x线解剖及生理。

三、胃肠道异常x线表现。

四、掌握胃肠道常见病的x线诊断与鉴别诊断及了解某些少见病的x线表现。

1、食管疾病的x线诊断，重点是食管肿瘤的x线诊断与鉴别诊断。

2、胃部疾病的x线诊断，重点是冒、十二指肠溃疡、胃癌、恶性淋巴瘤及胃部术后改变及并发症的x线诊断与鉴别诊断。

3、小肠疾病的x线诊断，重点是肠结核、小肠肿瘤的x线诊断。

4、结肠疾病的x线诊断，重点是溃疡性结肠炎、结肠癌及结肠结核及结肠息肉的x线诊断。

5、了解消化道畸形及小儿胃肠疾病的x线诊断。

6、急腹症的x线诊断、检查方法、正常、异常x线表现及常见病的x线诊断，重点是小肠梗阻的x线诊断与鉴别诊断。

7、了解腹腔、腹膜后腔的x线检查方法，正常x线解剖及腹膜后感染及肿瘤的x线诊断。

8、了解胆道系统的x线检查方法，正常x线解剖生理及异常x线表现，以及常见病的x线诊断。

9、了解肝、胆、胰、脾的cT检查方法，正常及异常cT表现和常见病的cT诊断。【教学方法】

课堂理论讲授和阅片见。，电脑幻灯中展示典型病例图片，配以扼要的文字说明加以展开讲解。特别要注意病变图像与正常图像，以及不同病变影像的比较，培养学生阅片发现病灶的能力、诊断和鉴别诊断的能力。

泌尿系统(10学时)【教学要求】

一、了解、掌握泌尿系统影像学检查方法。

二、掌握泌尿系统x线解剖及生理。

二、掌握泌尿系统基本病变的x线表现。

四、掌握泌尿系统常见病的x线诊断。【教学内容】

一、引言及检查方法

二、泌尿系统x线解剖与生理

三、泌尿系统基本病x线表现

四、常见病x线诊断

1、了解先天发育异常的x线表现

2、泌屎系结石

3、泌屎结核与慢性肾盂肾炎

4、泌屎系肿瘤

5、肾囊肿及其他病变

6、肾上腺疾病的x线诊断

7、了解泌尿系统的cT检查方法，正常及异常cT表现和常见病的cT诊断。【教学方法】

课堂理论讲授和阅片见。，电脑幻灯中展示典型病例图片，配以扼要的文字说明加以展开讲解。特别要注意病变图像与正常图像，以及不同病变影像的比较，培养学生阅片发现病灶的能力、诊断和鉴别诊断的能力。

生殖系统(6学时)【教学要求】

一、了解妇科的影像学检查方法及适应症。

二、了解女性生殖器官正常影像学表现。

三、掌握常见妇科疾病的影像学诊断。

四、了解宫内节育器的x线检查与诊断。

五、了解男性生殖系统的影像学检查与正常表现及常见病的诊断。【教学内容】

一、影像学检方法及适应症，与禁忌症

1、平片

2、子宫输卵管造影术

3、盆腔空气造影

4、盆腔淋巴造影

5、cT检查

二、女性生殖器官正常影像学表现

1、平片表现

2、子宫输卵管造影正常表现

3、盆腔充气造彤正常表现

4、盆腔淋巴造影1E常表现

5、正常cT表现

三、常见病影像学诊断

l、先天性发育异常

2、非特异性炎症及子宫输卵管内膜结核

3、子宫、卵巢良恶性肿瘤

4、子宫内节育器的x线检查与诊断

5、男性生殖系统x线、cT检查方法与正常cT表现及常见病的cT诊断。

【教学方法】

课堂讲授。电脑幻灯中展示典型病例cT图片，配以掘要的文字说明。特别要注意病变 图像与正常图像的比较，培养学生闻片发现病灶的能力和初步的鉴别诊断能力。

骨关节系统(48学时)【教学要求】

一、了解骨关节系统的影象检查方法。

二、掌握骨关节系统的正常影象学表现。

三、掌握骨关节系统基本病变的影象学表现

四、掌握化脓性骨髓炎、骨关节结核、肿瘤及肿瘤样病变、代谢性骨痛、慢性骨病等常见 病的典型x线、cT及MRl表现。

五、熟悉影象学分析“九项要点”在骨关节系统疾病分析中的应用 了解如何综合分析临床影象学所见的完成诊断，训练诊断思维方法。【教学内容】

一、引言和检查方法

(一)x线CT、MR／检查在骨关节系统的效用和限度。

(二)骨关节系统的影象检查方法

1．x线检查

(1)普通x线检查

1)通透视

2)普通摄片：正但6位

(2)特殊x检查

3)体层摄影

4)放大摄影

5)血管造影

6)关节造影

CT检查

MR]检查

二．骨关节正常x线解剖、变异

骨的结构

骨的成分

骨分类(按骨的结构)

骨分类(按骨的形式)

骨化形式

影响骨发育的因素

骨与关节正常x线表现(小儿骨骼)小儿骨骼正常表现的特点 小儿骨生长方式及注意事项 成人骨骼的正常表现

荧节的概念、构成

脊柱正常解剖及x线表

常见的解剖变异

三．骨关l节基本病变的x线表现

骨骨质软化概念、x线表现、常见原阁、病变

质骨质破坏概念、x线表现、常见痛变疏松概念、x线表现、常见原因

骨质增生概念、x线表现、常见病变

骨膜增生概念、x线表现、常见原因

骨内与软骨钙化概念、x线表现、常见原因

骨质坏死概念、x线表现、常见原因

矿物质沉着病理改变、x线表现

骨骼大小改变、x线改变、原因

骨骼形态改变、x线改变、原刚

周围软组织改变、x线表现、原因

关节肿胀原因、x线表现

关节破坏概念、x线表现、意义

关节退行性改变概念、x线表现、原因

关节强直(骨性、纤维性)概念、x线表现、原因 四．骨关节外伤 骨关节外伤x线诊断目的、方法 骨折概念、临床症状 骨折的x线表现 骨折类型

骨折对位对线关系概念

骨折愈合及愈合不照、骨折并发症 关节脱位概念、分型、临床表现

常见部位脱位的x线表现

先天性髋关节脱位病理、临床表现x线表现 五．化脓性骨髓炎

化脓性骨髓炎病理基础及蔓延途径 急性化脓性骨髓炎临床表现 急性化脓性骨髓炎x线表现 急性化脓性骨髓盎病愈征象 慢性化脓性骨髓炎病因及临床表现 慢性化脓性骨髓炎x线表现

特征类型的化脓性骨髓炎病理x线表现Brode氏脓肿、Carre氏骨髓炎、化脓性脊柱炎 化脓性关节炎病闻及临床表现 佬脓性关节炎的x线表现 六．骨关节结核

骨关节结核概述及临床表现

长骨结核x线表现及鉴别诊断 短骨结核x线表现及鉴别诊断 关节结核概述、分型

常见关节结核(髋关节、臆关节)临床、x线分型 脊柱结核

七骨肿瘤与肿瘤样痛变

骨肿瘤与肿瘤样病变概述

骨软骨瘤及骨巨细胞瘤病理、临床及x线表现 骨瘤、内生软骨瘤、骨样骨瘤诊断要点

骨母细胞瘤、软骨母细胞瘤诊断要点

成骨肉瘤、软骨肉j留、尤文氏肉瘤、纤维肉瘸的}临床病理、x线表现 骨髓瘤和转移瘤的诊断要点

骨囊肿、骨纤维结构不良、动脉瘤样骨肿病理、x线诊断要点 八．代谢性及内分泌性骨病的x线诊断要点 九．骨缺血性坏死、RA、AS、氟骨症x线表现 骨缺血性坏死概述、诊断要点

股骨头及胫骨结节缺血性坏死的x线诊断 强直性脊柱临床及x线诊断 类风邂性荚节炎x线诊断 氟骨症x线诊断

十慢性骨病、血液病、软组织病变等 退行性骨关节病的病理及x线诊断

剖伤性、痈风性骨关节病的病理及x线诊断

组织细胞增生症病理分型及x线诊断要点

血液痛的骨关节改变

软组织病变 【教学方法】

课堂讲授a电脑幻灯中展示典型病例cT图片，配以扼要的文字说明。特别要注意病变 图像与正常图像的比较，培养学生阅片发现痈灶的能力和初步的鉴别诊断能力。

理论讲授与阅片密切配台，每一教学内容的讲授和实习．安排在同一单元时内完成。课堂讲授过程中尽量同时展示x线、cT、MRI示教片印证所讲内容，使理论知识与感性认识结台地授予学生。注意以病理为基础和仿照应用“九项要点’’分析病灶的方法，来启发引导学生取得对病变x线、cT、MRI表现的理解和认识。阅片实习时，强调要学生反复运用“九项要点”去分析病灶，进行推论和结合I临床资料作山综合诊断，以训练临床诊断思维方法和能力。

中枢神经系统(36学时)

【教学要求】

一、了解中枢神经系统影像学检查方法，指征及价值与限度。

二、掌握平片诊断。

三、了解脑室造影定位诊断及脑血管造影定位、定位诊断。

四、掌握颅脑cT检查方-挂．正格cT表现及异常cT表现。

五、掌握颅脑常见病的影像学诊断，重点是颅脑外伤、脑肿瘤、脑

六、掌握脊髓疾病的影像检杏与诊断。【教学内容】

一，引言及检查方法

头颅平片、脑室造影、脑血管造影、颅脑cT、脊椎平片、脊髓造影、脊椎与脊髓CT检查。

二、头颅平片诊断

1、头颅平片正常表现。

2、头颅先天性畸形：狭骼症、颅骨偏扁、颅底陷入。

3、头颅外伤骨折、颅缝分离及头颅外伤后遗症。

4、颅内疾病平片诊断价值、颅高压及颅内肿瘤平片表现。

三、脑室造影定位诊断根据

四、脑血管造影正常表现及定位与定性诊断

五、颅脑cT诊断

1、颅内肿瘤影像学诊断。

2、颅脑外伤

3、脑血管疾病

4、颅内感染与寄生虫

5、脑先天性畸形与发育障碍

6、脑萎缩与脱髓鞘疾病

七、脊髓疾病诊断

l、脊髓、脊膜和椎管系解剖

2、脊椎平片诊断

3、脊髓造影诊断

4、脊柱和脊髓的cT诊断

①脊柱和脊髓正常cT表现

②脊柱和脊髓病变的cT表现

【教学方法】

课堂讲授。电脑幻灯中展示典型病例cT图片．配以扼要的文字说明。特别要注意病变 图像与正常图像的比较，培养学生阅片发现病灶的能力和初步的鉴别诊断能力。

五官系统(16学时)【教学要求】

一、了解眼鼻咽喉耳的影像学检查方法。

二、掌握正常眼鼻咽喉耳的影像学表现。

三、掌握常见病的影像学诊断。【教学内容】

眼、鼻与鼻窦、咽喉及耳的检查方法、正常影像学表现及常见病的影像学诊断。【教学方法】

课堂讲授。电脑幻灯中展示典型病例cT图片，配以扼要的文字说明。特别要注意病变 图像与正常图像的比较，培养学生阅片发现病灶的能力和初步的鉴别诊断能力。

超声诊断(40学时)【教学要求】

一、了解超声诊断的发展史及诊断原理，熟悉超声诊断的类型及检查方法。

二、掌握各脏器的正常超声图像特点。

三、熟悉常见病的超声诊断及鉴别诊断，正确判断超卢检查对不同疾病的诊断价值。【教学内容】

一、概论、超声诊断学基础与原理

1．超声诊断的发展史与发展趋势

2超声检查与其它影像检查优缺点的比较，超声的物理基础及诊断基础

3常见声学效应及其对声像闰的影响，人体组织回声类型，超声检查类型(包括A型、B 型、M型、频谱多谱勒及彩色多普勒)、超声检查方法，检查前准备、声像固基本断面与影像像分析

二、胸腔与心脏

l、了解胸腔与心脏的解剖结构

2、熟悉胸腔与心脏的检查方法

3、掌握心脏正常的超声图像

4、熟悉胸腔积液，胸膜间皮瘤的超声诊断及鉴别诊断

5、熟悉下列常见心脏病的超声诊断及鉴别诊断，包括：先天性心脏病：肺动脉瓣狭窄、房间隔缺损、室间隔缺损、法乐氏四联症)：风湿性心瓣膜病：二尖瓣狭窄及关闭不全，主动脉瓣狭窄及关闭不全，三尖瓣关闭不垒l心肌病：扩张型心肌病，肥厚型心肌病．限制型心肌病；其它心脏疾病；心包积液，左房粘液瘤，左房血栓，心内膜赘生物，瓣膜脱垂，腱索断裂；冠心病：陈旧性心梗，室壁瘤：肺动脉高压，左心功能障碍

三、肝脏

l、了解肝脏的解剖结构

2、熟悉肝脏的检查方法

3、掌握肝脏正常的超声图像

4、熟悉下列常见肝脏疾病的超声诊断及鉴别诊断，包括：肝脏弥漫性痛变：急性病毒 性肝炎、肝硬化、血吸虫病肝脏、脂肪肝及非均匀脂肪肝肝脏古液性病变：肝囊肿、多囊肝、肝脓肿及肝脏实性占位病变：原发性肝癌、继发性肝癌、肝血管瘤、肝局灶性结节性增生、良性腺瘤、炎性假瘤

四、胆道

l、了解胆道的解剖结构

2、熟悉胆道的检查方法

3、掌握胆道正常的超声图像

4、熟悉下列常见胆道疾病的超声诊断及鉴别诊断，包括：胆系结石：胆囊结石、肝外

胆管结石及肝内胆管结石：胆系炎症：急性胆囊炎、慢性胆囊炎；胆囊癌及肝外胆管癌胆囊； 息肉样病变、胆囊腺瘤胆道蛔虫病；先天性胆总管囊肿；阻塞性黄疸的超声表现。

五、胰腺

1、了解胰腺的解剖结构

2、熟悉胰腺的检查方法

3、掌握胰腺正常的超声图像

4、熟悉下列常见胰腺疾病的超声诊断及鉴别诊断，包括：急性、慢性胰腺炎； 胰腺囊肿占位病变；囊肿、囊腺瘤、胰腺假性囊肿；胰腺、胰岛素瘤、无功能胰岛细胞瘤；胰腺恶性肿瘤：胰腺癌及壶胰腺癌。

六、脾脏、胃肠

1、了解脾脏、胃肠的解剖结构

2、熟悉脾脏、胃肠的检查方法

3、掌握脾脏、胃肠的超声图像

4、熟悉下列常见脾脏、胃肠疾病的超声诊断及鉴别诊断，包括：脾肿大、副脾、脾血 管瘤、恶性淋巴瘤、脾破裂；胄癌、大肠癌、胃肠恶性淋巴瘤、肠梗阻及肠套叠；

七、肾脏、输尿管、膀胱及前列腺

l、了解肾脏、输尿管、膀胱及前列腺的解剖结构

2、熟悉肾脏、输尿管、膀胱及前列腺的检查方法

3、掌握肾脏、输尿管、膀胱及前列腺的超声图像

4、掌握下列常见肾脏、输尿管、膀胱及前列腺疾病的超声诊断及鉴别诊断，包括：

肾及输尿管结石、肾及输尿管积水、肾囊肿；肾肿瘤：肾细胞瘤、肾母细胞瘤及血管平滑肌脂肪瘤；肾先天性畸形：肾外伤；肾周脓肿；移植肾、无功能肾及肾功能衰竭；输屎管囊肿、输尿管狭窄；膀胱癌；膀胱结石、异物和血块；膀胱憩室；前列腺增生和前列腺痛；

八、妇科

1、了解女性盆腔生殖器官的解剖结构

2、熟悉女性盆腔生殖器官的检查方法

3、掌握女性盆腔生殖器官的超声图像

4、熟悉下列常见妇科疾病的超声诊断及鉴别诊断，包括：各种类型的子宫先天性畸形； 子宫肌瘤(肌壁间、粘膜下及浆膜下)；子宫腺肌症厦腺肌瘤：子宫粘膜息肉；子宫内膜癌；宫内节有器；卵巢非赘生性囊肿(卵泡囊肿、黄体囊肿、多囊卵巢、黄素囊肿、卵巢巧克力囊肿)；各种卵巢良性肿瘤；各种卵巢恶性：卵巢输卵管脓肿；输卵管积水；盆腔静脉曲张症：

九、产科

1、了解正常妊娠的解剖结构及生理特点

2、熟悉妊娠的检查方法

3、掌握正常妊娠胎儿及附属物的超声图像

4、熟悉下列常见产科疾病的超声诊断及鉴别诊断，包括：妊娠的诊断及测量；胎儿发 育与标准测量；多胎妊娠；流产；异位妊娠；过期妊娠；胎儿宫内发育迟缓；胎儿畸形：神经管畸形；心血管畸形：消化道畸形；泌尿系畸形；膜壁异常；羊膜疾病；胎盘与脐带异常；前置胎盘i胎盘出血：胎盘绒毛膜血管瘤；脐带绕颈；滋养细胞疾病：葡萄胎：恶性葡萄胎与绒毛膜癌；

十、腹膜后、肾上腺、腹部大血管

1、了解眼球、甲状腺、乳腺的解剖结构及生理特点

2、熟悉眼球、甲状腺、乳腺的检查方法

3、掌握正常眼球、甲状腺、乳腺的超声图像

4、熟悉下列常见眼球、甲状腺、乳腺疾病的超声诊断及鉴别诊断，包括：眼球疾病： 视网膜母细胞瘤、脉络膜黑色素瘤、视网膜脱离、脉络膜脱离、玻璃体出血、脉络膜出血、球内异物；弥漫性肿大：甲亢、亚急性甲状腺炎、慢性甲状腺炎；甲状腺占位性瘸变：结节性甲状腺肿、单纯性甲状腺肿、甲状腺癌、甲状腺腺瘤、甲状腺囊肿： 【教学方法】

l-理论内容一一电脑PPT软件播放文字内容、图表及部分影像

2影像部分一一多媒体图像播放软件播放实例静态及动态影像

第四篇：分子诊断学复习资料 简答题部分

简答

基因组的特点：？（大题）人类基因组的特点：

1、人类基因组具有23对染色体，基因组序列大约2.9亿个核苷酸，含有蛋白质编码基因大约20, 000-25, 000个。其中大量基因与中枢神经系统，特别是脑部发育相关；

2、绝大多数基因为断裂基因，且分布不均（每条染色体具有基因富集区和基因稀疏区）。除蛋白质编码基因外，其他大量基因为RNA编码基因；

3、基因内和基因附近中存在大量短序列调控元件，发挥基因的调控表达和协调表达的作用；

4、基因组（基因内）中存在大量功能未知的其他序列（“非编码DNA”），如串联重复序列、转座元件。

5、序列突变是人类基因突变的重要来源，序列/基因多态性是研究人类遗传突变的重要手段。

6、线粒体DNA（mtDNA）是人类母系遗传疾病的重要来源基础。真核基因组特点：

1.真核基因组结构庞大：人：3×109bp。几、十、百倍于原核。

2.线性双链DNA，多条染色体和二倍体（Diploid）：DNA和组蛋白质形成染色体，存在于核膜内。人：23对，46条；

3.单顺反子(Monocistron)：一个结构基因转录生成一条mRNA。

4.功能基因不连续性，内含子与外显子并存（断裂基因）：转录后需剪接(Splicing)5.非编码区多于编码序列(9:1)6.含有大量重复序列（Repetitive Sequences): 重复次数可达数百万次，序列多态性是真核生物基因组的重要特征。原核生物基因组的特点：

1.基因组呈共价闭合环状双链状态，散布在细胞中，有时相对集中形成类核/拟核（Nucleoid）

2.基因组DNA小，基因数目少（1500-5900个），种间DNA大小差异大，GC含量差异大(菌种鉴定和分类标准），基因多为单拷贝基因（编码rRNA、tRNA基因多拷贝，利于核糖体的快速组装和蛋白质合成）

3.基因组只有一个复制起始点，功能相关的基因大多成簇地串联排列（操纵子结构）在染色体上，结构基因无内含子，基因连续分布，为多顺反子。

4.除主基因组外，原核生物往往还具有质粒基因组

5.转座元件/基因是原核生物基因组的重要特征（转座元件（Tranposable Element）是指可移动的基因成分，即能在一段DNA分子内部或两段DNA分子之间移动的DNA片段，又称跳跃基因。）6.致病基因是致病原核生物基因的重要特征 病毒基因组的特点：

1.基因组大小相差很大（HBV：3.2kb，痘病毒：300kb）

2.结构分子具有多样性（DNA病毒/RNA病毒，单链DNA/RNA病毒，双链DNA/RNA病毒，环状分子/线性分子）3.基因组多数是连续性（单一分子基因组），但RNA病毒往往不连续（呼肠孤病毒：10条节段双链RNA，甲乙流感病毒：8条单链节段RNA，丙型流感病毒：7段单链节段RNA。包装在同一个病毒颗粒内，或在不同病毒颗粒内，只有全部基因组序列都存在，才具备感染能力）4.编码序列占基因组的90%以上，间隔区序列很少；

5.多为单拷贝（单倍体），即每个基因只出现一次（除逆转录病毒基因组有两个拷贝）； 6.相关基因丛集（功能上相关的基因排列在一起）、有重叠基因和不规则基因结构序列。

1、试述点突变（基因背景清楚和未知）的主要检测方法。答：对基因背景清楚或部分清楚的点突变，可以采取直接检测基因点突变的方法，如等位基因特异性寡核苷酸杂交(allele specific oligonucleotide，ASO)、PCR-ELISA、等位基因特异性扩增(allele specific amplification，ASA)、PCR-RFLP、基因芯片技术等进行诊断，例如β地中海贫血，可以使用ASO、PCR-RFLP 联合基因芯片技术进行诊断。对于一些基因背景未知的点突变，可以采用单链构象多态性(single-strand conformational polymorphism，SSCP)、变性梯度凝胶电泳(denaturing graient gel electrophoresis，DEEG)、异源双链分析(heteroduplex analysis，HA)、DNA序列测定、蛋白截短测试（protein truncation test，PTT）等方法，如Hopkins大学医学院的研究人员设计了47 对PCR引物，分段扩增血友病A因子Ⅷ 基因片段，进行DGGE分析，发现多态性片段后再进行DNA序列分析，几乎查清了所有临床轻中度病人的点突变。

2、试述限制性内切酶MstⅡ切割法诊断镰状细胞贫血的原理并图示。

答：在FⅧ基因区域内，有一种A基因存在三个拷贝，其功能不详，其中一个A基因位于FⅧ基因的第22 号内含子内(A1)，另外两个位于X染色体的末端(A2、A3)。A1基因可以与其上游的两个A基因拷贝中的一个发生同源重组，引起FⅧ基因的1-22 外显子片段倒位，这种倒位导致FⅧ功能完全丧失而发生严重的血友病(图15-5)。其中与A2发生的重组称为近端重组，约占倒位的15％；与A3发生的重组称为远端重组，约占倒位的85％。

3、试述近端重组、远端重组概念。

答：在FⅧ基因区域内，有一种A基因存在三个拷贝，其功能不详，其中一个A基因位于FⅧ基因的第22 号内含子内(A1)，另外两个位于X染色体的末端(A2、A3)。A1基因可以与其上游的两个A基因拷贝中的一个发生同源重组，引起FⅧ基因的1-22 外显子片段倒位，这种倒位导致FⅧ功能完全丧失而发生严重的血友病(图15-5)。其中与A2发生的重组称为近端重组，约占倒位的15％；与A3发生的重组称为远端重组，约占倒位的85％。

4、简述TGGE/DGGE的基本原理

答：在TGGE中，随着温度的逐渐升高时，DNA分子会呈阶梯式逐步发生解链。部分解链的双链DNA分子表现出一种复杂的分枝构像，使得其电泳迁移率大大下降。DNA分子的解链决定于该分子的解链温度（Tm），而Tm有强烈的序列依赖性，如在单取代突变中，若是A:T（两个氢键）被G:C（三个氢键）取代，将增加该双链DNA分子的Tm值。而整个DNA分子序列对解链温度也有影响，若A:T被T:A替代，或G:C被C:G替代，分子的解链温度也会发生改变。因此不同的DNA分子由于其Tm不同，将于不同凝胶位置（温度不同）产生分枝（解离）使电泳迁移率降低，从而在凝胶上的不同位置形成条带。DGGE的变性条件为热（一般为60℃的恒定温度）和固定比率的甲酰胺（0－40％）、尿素（0－7M）。这些梯度变性的功能就相当于TGGE中的温度梯度的功能，使不同DNA分子在不同的凝胶部位发生解链，引起迁移率下降，从而将不同的DNA分子分离。

5、简述变性高效液相色谱法检测基因变异的优点

答：DHPLC突变检测技术与其它方法相比，具有更高的准确性和敏感性。

（1）DHPLC与各种电泳法的比较 SSCP 分析片段长度<300 bp，对于人类SNP的检出率为50～95％，尤其容易漏检位于发夹结构中的变异。CSGE检测杂合子的灵敏度与SSCP相当或稍低。而DHPLC对150bp~600bp的DNA片段的突变检出率都可达到100％，且而不需要特殊的样本处理。TGGE/DGGE对于异源双链及同源双链分子的检测灵敏度高出CSGE和SSCP很多。但对于较高温度的融解区域的突变检测，DHPLC的灵敏度要高于TGGE/DGGE。（2）DHPLC与DNA测序的比较 对于频率高于20%的变异，直接测序的检出率为80％，DHPLC的检出率可达到100％；基因突变频率低于20%时就很难用测序方法检测到，而DHPLC可从待检样品中检测到占总基因量0.5-5%的突变等位基因，且重现性很好。

6、试述PTT检测基因变异的优缺点

答：PTT检测突变的优点：①能检测出只与疾病相关的蛋白截短突变；②可检测出在RNA形成过程中发生的突变（如剪接突变）；③通过只鉴定引起疾病截短突变，PTT分析不会受到基因沉默变异如多态性的妨碍；④截短蛋白分子的长度指明了突变的位置，因此更方便进行测序分析以确定突变。

PPT检测突变的缺点：①由于PCR扩增效率的影响，对于包含几千个核苷酸序列多个外显子的疾病基因，就需要分成几个1－2kb的片段分别扩增，分别进行PTT检测；②由于微小缺失/插入突变对蛋白产物分子大小影响太小，凝胶不能分辩，因而检测不出编码序列中小的插入或缺失或是错义突变；③引起RNA产量改变或使mRNA不稳定的突变可能被漏检。

7、简述PFGE的基本原理

答：PFGE采用一种正交的交变脉冲电场，在进行琼脂糖凝胶电泳时，其方向、脉冲时间和电压大小可交替改变。在每次电场方向改变时，DNA分子就要有一定的时间改变形状和迁移方向，只有当DNA分子达到一定构型，沿新的泳动方面伸直后，才能向前迁移。DNA分子的转向时间与其大小关系极为密切，分子越大，分子构型转换所需时间就越长，转变迁移方向的时间也就越长。对于不同大小的DNA大分子，其改变泳动方向所需的时间不等，迁移速度的快慢也就不等，因此就可以按DNA分子量大小使其分离开来。根据欲分离的DNA分子大小适当调节电场方向的相交角度、电压及脉冲时间等参数，即可将各种分子量大小不同的分子分开。

8、假基因的分类及其发生机理。

与正常功能的基因序列相似，但无转录功能或转录产物无功能的基因称假基因(pseudogene)。根据是否保留相应功能基因的间隔序列(如内含子), 假基因分两大类:一类保留了间隔序列，称为非加工假基因(non-processed pseudogene)，通常因基因的复制修饰,如点突变、插入、缺失和移码突变而导致复制后的基因在转录和翻译时出现异常,丧失正常功能，它与功能基因一般在同一染色体上, 也称复制型假基因(duplicated pseudogene)。假基因中大多数则缺少间隔序列的称为已加工假基因(processed pseudogene)，主要是转录过程中mRNA 以cDNA 的方式重新整合进入基因组(很可能发生在生殖细胞中)，在长期进化选择过程中因为随机突变积累而丧失功能，通常这种假基因无内含子，两边有小的侧翼定向重复序列(flanking direct repeat)，3'端多具多聚腺苷酸尾。

9、简述CpG岛与DNA甲基化调控。

大约有一半的人类基因富含CpG 的顺序，称为CpG岛(CpG island)，CpG 岛常位于转录调控区或其附近，主要存在于看家基因和一些组织特异性表达基因。在正常组织，除印记基因和失活的X染色体外，包括启动子区在内的基因5′端CpG 岛大部分是非甲基化的。DNA甲基化与基因表达呈负相关，DNA甲基化调控基因表达直接的机制可能是因为甲基从DNA分子的大沟中突出，阻止了转录因子与基因相互作用，还可能直接抑制RNA聚合酶活性而抑制基因的表达。间接的机制包括两种类型：①与甲基化DNA结合蛋白结合；②改变染色质结构，这都间接阻碍转录因子与DNA结合而抑制转录。DNA甲基化对胚胎发育非常重要，与X染色体失活，基因组印记，特别是肿瘤密切相关。

10、作为一种遗传标记，人类短串联重复序列（STR）的主要用途有哪几个方面？

主要用途①人类基因遗传图谱的制作。②目的基因筛选和基因诊断。通常目的基因若与STR位点有连锁关系, 则其位置与STR位点邻近, 故通过对STR附近区域克隆测序, 就可能发现目的基因。通过家系和对照研究, 运用连锁和相关分析, 可以找到与疾病高度相关的STR位点。③法医学个体识别和亲权鉴定。法医案例中, 对于量极少和降解严重的生物检材, 通过PCR进行STR位点扩增并将几个STR 位点联合起来分析, 可得到相当高的累积个体识别率和父权排除率。因而STR用于法医学领域有着广阔的前景，为司法侦案、破案提供有利的科学依据。

11、人类单核苷酸的多态性（SNP）的特点及主要用途有哪几个方面？

疾病的连锁分析与基因的定位：包括复杂疾病（如骨质疏松症、糖尿病、心血管疾病、精神性紊乱、各种肿瘤等）的基因定位、关联分析，并可用于遗传病的单倍型诊断。

指导用药和药物设计：SNP多态性能充分反映个体间的遗传差异。通过研究遗传多态性与个体对药物敏感性或耐受性的相关性, 可以阐明遗传因素对药物效用的影响, 从而对医生针对性的用药和药物的开发提供指导和依据。

用于进化和种群多样性的研究：生物界的进化及进化过程中物种多样性的形成与基因组的突变和突变的选择密切相关, 构建整个基因组的SNP 图谱对于直接研究人类的起源、进化具极大意义。对比人群之间SNP 图谱的异同情况可以对人类的起源、迁移等作出估计, 从而理清人类进化过程中源与流的问题。

12、人类基因组研究的主要内容是什么？

人类基因组研究主要包括两方面的内容：以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学，又称后基因组研究。

结构基因组学代表基因组分析的早期阶段，通过基因作图、核苷酸序列分析确定基因组成、基因定位的科学，包括规模化地测定蛋白质、RNA及其它生物大分子的三维结构等内容,以获得一幅完整的、能够在细胞中定位以及在各种生物学代谢途径、生理途径、信号传导途径中全部蛋白质在原子水平的三维结构全息图。功能基因组学代表基因分析的新阶段，是利用结构基因组学提供的信息研究基因功能，使人们有可能在基因组学、蛋白质组学、分子细胞生物学以致生物体整体水平上理解生命的原理。对疾病的防治和机理的阐明有重要应用意义。

基因分类：A.按功能:1.结构基因---编码蛋白和酶分子结构（蛋白基因）；2.调控基因(Regulatory Gene)---调节结构基因表达，包含调节基因、操纵基因和启动基因；3.转录而不翻译的基因（RNA基因）：rRNA基因→rRNA→核仁形成区，核糖体组成。tRNA基因→tRNA→转运氨基酸。

B.按重要程度: 1.看家基因(House-keeping Gene): 维持细胞最低限度功能所不可少的基因, 如编码组蛋白基因、编码核糖体蛋白基因、线粒体蛋白基因、糖酵解酶的基因等。这类基因在所有类型的细胞中都进行表达。2.必需基因(Essential Gene): 突变时会引起致死表型的基因.基因表达的特点：A时间特异性，单细胞生物：特定基因表达严格按特定时间顺序发生。多细胞生物：基因表达在不同的发育阶段严格按特定时间顺序开启或关闭。又称为阶段特异性（Stage specificity）。B, 空间特异性, 在某发育阶段，同一基因在不同组织器官其表达有差异。又称为细胞特异性（Cell specificity）

基因表达的方式: A组成性表达, 某些基因的表达不受内外环境的影响，在个体生长过程中，几乎在所有的组织中持续表达或变化很小。这些基因一般为看家基因（Housekeeping gene）B, 诱导和阻遏表达, 诱导（Induction）：基因受环境刺激而开启表达增强。阻遏（Repression）：基因受环境刺激而表达受到抑制和减弱C, 协调表达, 在一定控制机制下，功能相关的一组基因进行协调共同表达

14、叙述原核生物基因组的结构特征。

在原核生物基因组中只有一个DNA复制起点。基因组DNA通常是由一条环状双链DNA（double stranded DNA，dsDNA）分子组成。基因组DNA与支架蛋白和RNA结合在一起，以复合体的形式存在。广泛存在操纵子结构。操纵子结构是原核生物基因组的功能单位，在原核基因调控中具有普遍的意义。原核生物的结构基因多数是单拷贝的并且结构基因中没有内含子成分。编码顺序一般不重叠。具有编码同工酶的不同基因。基因组中编码区所占比例为50﹪，不编码区中常常含有基因表达调控的序列。基因组DNA分子中存在多种功能的识别区域，这些区域经常有反向重复序列存在，并能形成特殊的结构。原核生物基因组存在着可移动的DNA序列，这些可移动的DNA序列，通过不同的转移方式发生基因重组，使生物体更适应环境的变化。

15、简述原核生物的类核组成。

原核生物与真核生物的主要区别在细胞核上。原核生物没有典型的细胞核结构，基因组DNA位于细胞中央的核区，没有核膜将其与细胞质隔开，但能在蛋白质的协助下，以一定的组织形式盘曲、折叠包装起来，形成类核（nucleoid）也称拟核。类核的中央部分由RNA和支架蛋白（scaffolding protein）组成，外围是双链闭环的超螺旋DNA。在超螺旋结构的基础上，DNA 分子再扭结成许多活结样或花瓣样的放射状结构的DNA环。每个环形的活结状结构代表一个结构域，在各结构域中DNA呈负超螺旋状态。每个DNA环是一个相对独立的功能区，可以独立完成不同区域的基因表达与调控。在类核中80﹪为DNA，其余为RNA 和蛋白质。如果用DNA酶处理后可使基因组DNA链断裂；如果用RNA酶或蛋白酶处理类核，则类核变得松散，不能维持DNA链的折叠结构，这表明RNA和蛋白质对维持类核分子的折叠以及形成环状结构是必不可少的。

16、简述原核生物转座子的类型及特点。

⑴插入序列（insertion sequence,IS）长度约700bp～2 000bp，由一个转位酶基因及两侧的反向重复序列（16bp～41bp）组成。反向重复序列的对称结构使IS可以双向插入（正向插入或反向插入）靶位点。并在插入后于两侧形成一定长度（3bp～11bp）的顺向重复序列称靶序列（target sequence）IS的转位频率为10-7／拷贝，即在一个世代的107细菌中有1次插入。⑵转座子（transposon,Tn）是一类复杂的转位因子。Tn比IS大，约4500～20000bp，除了携带有关转座的必需基因外，还含有能决定宿主菌遗传性状的基因，主要是抗生素和某些药物的抗性基因，转座子中的转位酶称为转座酶（transposase），其功能是介导转座子从一个位点转座到另一个位点，或从一个复制子转座到另一个复制子，其转座过程与IS相似。

⑶Mu噬菌体 是一类具有转座功能的温和性噬菌体。温和性噬菌体有多种，如大肠杆菌λ噬菌体、大肠杆菌Mu-

1、P1和P2噬菌体等。这类噬菌体具有整合能力，可以整合到细菌染色体中去，也称可转座的噬菌体（transposable phage）。当它们感染细菌后，其溶源性整合和裂解周期的复制均以转座方式进行，但转座位点是随机的。

17、通过转座可引起哪些遗传效应？

⑴引起突变 转位可能引起多种基因突变。当转位因子插入一个基因内部，会引起这个基因的插入失活；当插入多顺反子前端的基因中时，可引起下游的所有基因停止转录，因为转位因子中含ρ依赖的转录终止信号；当插入染色体或质粒中时，常引起缺失和倒位突变。⑵引入新的基因 在插入位点上引入新的基因，如含有抗药基因R质粒的转位因子，转位到染色体中时，可在该部位出现抗药性基因。若将带有Amp+R质粒的细菌与不含R质粒的带有Kan+转座子的细菌进行接合，结果产生了Amp+ Kan+的细菌，并且能够在含有氨苄青霉素及卡那霉素的培养板上生长。经过转位作用，在这种细菌内产生Amp+及Kan+的质粒，经过再次接合作用，即可产生含Amp+ Kan+R质粒细菌。

⑶引起生物进化 基因重排经常发生，转座作用是基因重排的重要机理之一，如通过转座，可将两个本来相隔遥远的基因靠拢，从而进行协调的控制作用，这两段基因顺序经过转座作用连接在一起有可能在进化过程中产生新的蛋白质。

18、真核生物染色体基因组的一般特点？

①真核生物基因组远大于原核生物基因组，结构复杂，基因数庞大，具有多个复制起点；②真核细胞的基因组DNA都是线状双链DNA，而不是环状双链分子；③基因组中非编码区多于编码区；④真核基因多为不连续的断裂基因，由外显子和内含子镶嵌而成；⑤存在大量重复序列。

19、真核生物基因组含有的重复序列有哪些？

（一）高度重复序列

重复频度>105。根据卫星DNA的长度，又可分成3种：卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA。

（二）中度重复序列

这类重复序列主要由比较大的片段（由100bp到几千bp）串联重复组成，分散在整个基因组中，重复频度不等，如Alu家族、rRNA、tRNA和组蛋白等。

20、简述质粒的概念和特性，常用的质粒载体有哪几种？

质粒为细菌染色体外一些双链、共价闭合环状DNA分子，是能够进行独立复制并保持稳定遗传的复制子。质粒具有复制和控制机构，能够在细胞质中独立自主的进行自身复制，并使子代细胞保持它们恒定的拷贝数。

质粒一般具有以下特性：①自主复制性，它能独立于宿主细胞的染色体DNA而自主复制；②质粒不相容性；③可扩增性；④可转移性。

理想质粒载体应具备①具有松弛型复制子；②在复制子外存在几个单一的酶切位点；③具有插入失活的筛选标记；④分子量相对较小，有较高的拷贝数。

常见的质粒载体有：pBR322质粒、pUC质粒载体、pGEM系列载体等。

21、试述举2种质粒DNA提取的方法及应用。

[答案] 质粒DNA提取的方法包括碱裂解法、煮沸裂解法和SDS裂解法。

1）碱裂解法：在NaOH存在的强碱性（pH12.0～14.0）的条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁和裂解细胞，并使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性，释放出质粒DNA。它是一种适用范围很广的方法，能从所有的大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA，制备量可大可小。

2）煮沸裂解法：是将细菌悬浮于含Triton X-100和溶菌酶的缓冲液中，Triton X-100和溶菌酶能破坏细胞壁，再用沸水浴裂解细胞，使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性。对CCC质粒DNA因结构紧密不会解链，当温度下降后，CCC质粒DNA可重新回复其超螺旋结构，通过离心去除变性的蛋白质和染色体DNA，然后回收上清液中的质粒DNA。本法只能用于小质粒DNA（小于15kb）的小量或大量制备，适用于大多数从大肠杆菌（E.coli）菌株中分离出质粒DNA。

3）SDS裂解法：它是将细菌悬浮于等渗的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA处理以破坏细胞壁，再用SDS裂解去壁细菌，从而温和地释放出质粒DNA到等渗溶液中，然后用酚/氯仿抽提。适用于大质粒DNA的提取。

22、简述哺乳动物细胞基因组DNA抽提的主要方法有哪几种？ [本题答案]哺乳动物细胞基因组DNA抽提的主要方法有： 酚提取法、甲酰胺解聚法、玻棒缠绕法和异丙醇沉淀法、磁珠吸附法等。

23、简述从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的主要方法有哪几种？

[本题答案] 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段的方法主要包括 DEAE-纤维素膜插片电泳法、电泳洗脱法、低熔点琼脂糖凝胶挖块回收法、冷冻挤压法及现在有试剂盒供应的以硅为基础的纯化系统等。

24、简述磁性球珠分离法分离mRNA的原理。

[本题答案]磁性球珠分离法是基于寡聚(dT)与poly(A)的互补配对特性、用生物素标记寡聚(dT)，通过寡聚(dT)与mRNA 3’端poly(A)形成杂交体，这种杂交非常迅速，在1－2分钟内就可完成，可有效地除去rRNA, tRNA以及其他RNA,而后通过生物素与链亲和素顺磁性磁珠之间的相互作用来捕获这些杂交物而达到分离纯化。

25、描述质粒DNA的结构特点。

多数细菌来源的质粒核酸是环状双链DNA分子，没有游离的末端，每条链上的核苷酸通过共价键头尾相连。质粒DNA分子通常具有三种不同的构型。当其两条核苷酸链均保持完整环形结构时，为共价闭合环状DNA分子，这样的DNA常以超螺旋状态存在；如果两条链中只有一条链保持完整环形结构，另一条链出现一至数个缺口时，为半开环DNA；若两条链均有缺口并发生断裂则成为线性DNA分子。

26、试述质粒的类型有哪些？

根据细菌染色体对质粒复制的控制程度是否严格可将质粒分为：严紧型质粒和松弛型质粒。按转移方式分为：接合型质粒、可移动型质粒、自传递型质粒。按质粒大小分为：小型质粒、大型质粒。按质粒的宿主范围分为：窄宿主谱型质粒、广宿主谱型质粒。按质粒的功能分为：F质粒、R质粒、Col质粒。

27、线粒体DNA与核DNA有哪些不同之处？

（一）非孟德尔的母系遗传。mtDNA 因位于细胞质中,表现为严格的母性遗传, 不服从孟德尔遗传，绝大部分mtDNA 是通过卵细胞遗传。

（二）高突变率。mt DNA突变率约为nDNA的10～100倍，此外mtDNA 与有毒物质的结合频率比核DNA 高数倍至数十倍。

（三）异质性和复制分离。异质性即突变mtDNA与野生型mtDNA 以不同的比例共存于一个细胞内的现象。复制分离即在细胞分裂的复制过程中,突变的和野生型的mtDNA 随机进入子细胞的过程，复制分离的结果使突变mtDNA 杂合体向突变纯合或野生纯合方向转变,但因突变复制具有优势,故易产生突变积累，突变积累的程度不同,突变mtDNA 在群体中的多态性程度也不同。

（四）阈值效应。每个细胞的mt DNA有多种拷贝，而一个细胞mt DNA编码基因的表现型依赖于一个细胞内突变型mt DNA和野生型mt DNA的相对比例，mtDNA 突变导致氧化磷酸化水平降低,当能量降低到维持组织正常功能所需能量的最低值时即达到了mtDNA表达的能量阈值，可引起某组织或器官的功能异常而出现临床症状，这就是阈值效应。

（五）半自主复制与协同作用。mt DNA虽有自我复制、转录和编码功能，但该过程还需要数十种nDNA编码的酶参加，因此mt DNA基因的表达同时也受nDNA的制约，两者具有协同作用。

28、何谓线粒体病？简述线粒体病的遗传学分类。

线粒体病（mitochondriopathy）是指由于线粒体呼吸链功能不良所导致的临床表现多样化的一组疾病。临床表现常见为眼睑下垂、外眼肌麻痹、视神经萎缩、神经性耳聋、痉挛或惊厥、痴呆、偏头痛、类卒中样发作等。

从核基因缺陷和线粒体基因缺陷的角度对线粒体病进行遗传学分类可分为三种类型：点突变，mtDNA的大规模缺失或插入和源于核DNA缺陷引起mtDNA缺失。

29、病毒的基本结构成份主要有哪些？

毒没有完整的细胞结构，由四种基本结构成份组成：①由一种核酸(DNA或RNA)组成的病毒基因组。②由病毒基因组编码的衣壳蛋白组成的衣壳。③来源于宿主细胞质膜系统（细胞膜、内质网膜或高尔基体膜）的包膜。④病毒颗粒中的其它内容物，包括酶、核酸结合蛋白及金属离子等。30、国际病毒分类委员会（ICTV）将病毒分成哪几类？ 国际病毒分类委员会（ICTV）制定了《国际病毒分类与命名原则》。根据病毒的基因组组成及复制方式，可将病毒分为如下几类：

DNA病毒（DNA Viruses）

第一组：双链DNA病毒（Group I: dsDNA Viruses）第二组：单链DNA病毒（Group II: ssDNA Viruses）RNA病毒（RNA viruses）

第三组：双链RNA病毒（Group III: dsRNA Viruses）第四组：正链RNA病毒（Group IV:(+)ssRNA Viruses）第五组：负链RNA病毒（Group V:(-)ssRNA Viruses）

DNA与RNA逆转录病毒（DNA and RNA Reverse Transcribing Viruses）

第六组：RNA逆转录病毒（Group VI: RNA Reverse Transcribing Viruses）第七组：DNA逆转录病毒（Group VII: DNA Reverse Transcribing Viruses）亚病毒因子（Subviral Agents）

卫星（Satellites）类病毒（Viroids）朊病毒（Prions）

31、简述长病毒末端重复序列的特点和作用。

逆转录病毒基因组RNA在逆转录后生成的双链DNA中，两端有长末端重复序列（long terminal repeat，LTR）结构。LTR在结构与功能上与上述重复序列不同。LTR中的重复序列只占一部分，另外还包括单一序列。5＇端的LTR包含许多特定的基因表达调控区域，是一组真核生物增强子和启动子单位，而3＇端的LTR具有转录终止的作用。另外，逆转录病毒基因组利用LTR中的重复序列形成环状结构，在整合酶作用下整合入宿主细胞基因组内。53蛋白质组学的研究特点有哪些？

① 整体性 ② 揭示生命的动态性过程 ③ 体现生命现象的复杂性

32、等电聚焦凝胶电泳的原理是什么？

依据蛋白质分子的净电荷或等电点进行分离的技术。在等电聚焦过程中，电场所采用的载体两性电解质含有脂肪族多氨基多羧酸，可在电场中形成正极为酸性，负极为碱性的连续pH梯度，蛋白质分子在一个载体两性电解质(ampholyte)形成的连续而稳定的线性pH梯度中电泳，当蛋白质迁移到其等电点位置时，净电荷为零，在电场中不再移动，因此可将各种不同等电点性质的蛋白质分离开来

33、简述酵母双杂交系统的优缺点。

酵母双杂交系统所具有的优点：①蛋白质作为被研究的对象不用被纯化；②检测在活细胞内进行，可以在一定程度上反映体内（细胞内）的真实情况；③由于这一系统可以反映基因表达产物的累积效应，因而可检测存在于蛋白质之间微弱或短暂的相互作用；④采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA文库，可用于分析多种不同功能的蛋白。

局限性：①双杂交系统分析蛋白间的相互作用定位于细胞核内，而许多蛋白间的相互作用依赖于翻译后加工如糖基化、二硫键形成等，这些反应在核内无法进行。②由于某些蛋白本身具有激活转录功能或在酵母中表达时发挥转录激活作用，从而引起报告基因的表达，产生“假阳性”结果。③双杂交只是反映蛋白质间能发生作用的可能性，这种可能还必须经过其他实验验证，尤其要与生理功能研究相结合，否则可能会误入歧途。

34、蛋白质间互作鉴定：

（1）蛋白质亚基的聚合：线性、环状、螺旋、球状、交叉聚合（2）分子识别：抗原与抗体、配体与受体、酶与底物（3）分子的自我装配：核糖体、细菌鞭毛、病毒的自动装配

（4）多酶复合体：丙酮酸脱氢酶复合体包括丙酮酸脱氢酶、二氢硫辛酸转乙酰基酶和二氢硫辛酸脱氢酶。

蛋白质间作用力：（1）氢键：肽键之间，主－侧、侧－侧链之间（2）范德华力：取向力、诱导力、色散力

（3）疏水键：非极性基团为了避开水相二群集在一起的作用力。（4）离子键（盐键）：正负离子之间的静电引力所形成的化学键。

蛋白质相互作用的研究方法: 体外：（1）肽蛋白质亲和层析；（2）亲和印迹；（3）免疫沉淀；（4）交联等。

体内：（1）酵母双杂交系统；（2）噬菌体展示技术；（3）生物传感芯片质谱；（4）蛋白质定点诱变。

蛋白组学研究内容：1.蛋白质分离；2.蛋白质的鉴定；3.蛋白质-核酸间相互作用；4.蛋白质与蛋白质的相互作用。蛋白组学研究的特点：1）整体性和规模化；2）动态性和网络化；3）复杂性和综合技术化；

蛋白质组研究常用技术：

1）蛋白质分离技术（电泳和层析技术）；2）蛋白质检测与图像分析以及鉴定技术； 3）蛋白质互作研究技术；4）生物信息学分析技术。

35、蛋白质组学的研究内容有哪些？

蛋白质组学的研究包括两个方面：一是针对蛋白质表达模式的研究，一是在蛋白质功能模式方面的深入分析。

36、PCR，聚合酶链反应（Polymerase chain reaction)：是一种模拟体内天然DNA复制过程的体外核酸扩增技术，是基因扩增技术的一次重大革新。

PCR原理：利用DNA聚合酶催化一对引物间的特定DNA片段在体外实现快速、大量扩增的方法，也称：无细胞克隆技术或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法。PCR标准反应体系（五要素,）

（1）DNA模板(template)：靶基因

（2）原料：dNTPs（dATP，dGTP，dCTP，dTTP）

（3）催化酶：耐高温的DNA聚合酶（如：Taq酶）

（4）一对引物（primer）：扩增序列的决定者其与靶基因两侧序列互补

（5）Mg2+ 和 Buffer PCR反应过程----三步曲

1.高温变性：在高温（95℃）下，待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板

2.低温退火：在低温（37～55℃）下，两条人工合成的寡核苷酸引物分别与互补的单链DNA模板结合，形成部分双链

3.适温延伸：在耐热DNA聚合酶的最适温度（72℃）下，以引物的3’端为合成的起点，以单核苷酸为原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA新链。

37、PCR衍生技术(pcr技术有哪些)：逆转录PCR、反向PCR、巢式PCR、标记PCR、多重PCR、原位PCR、不对称PCR、定量PCR、锚定PCR

38、如何提高PCR扩增的特异性？

① 升高退火温度可增加引物与模板结合的特异性

② 缩短退火和延伸时间，可减少错误引发及多余的DNA聚合酶分子参与酶促延伸的机会 ③降低引物和酶的浓度也可以减少错误引发，尤其是能减少引物二聚体的引发 ④ 改变Mg2+的浓度可进一步提高扩增的特异性 ⑤ 引物设计的特异性 ⑥ 减少循环次数

⑦ 热启动（Hot Start）：即首先将模板变性，然后在较高温度时加入Taq DNA聚合酶、引物及MgCl2等一些重要成分，这样使得引物在较高温度下与模板退火，提高了反应的严格性，使扩增更特异 ⑧ 采用两对引物即外引物和内引物进行扩增来提高扩增的特异性。

39、PCR检测技术有何临床应用：(1)PCR在病原微生物的检测中的应用；（2）PCR在遗传病中的应用；（3）PCR在肿瘤中的应用；（4）其它方面的应用：PCR技术除用于临床诊断和治疗外，还可用于DNA指纹、个体识别、亲子关系识别、法医物证等。40、影响PCR反应的因素有哪些？

PCR反应体系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需离子的反应缓冲液，这些因素都对PCR反应产生影响。

41、影响PCR反应的因素有哪些？

PCR反应体系包含DNA模板、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、dNTP及含有必需离子的反应缓冲液，这些因素都对PCR反应产生影响。

42、简述bDNA信号放大系统的原理。

分枝DNA是人工合成的带有侧链的DNA片段，在每个侧链上都可以标记可被激发的标记物。以bDNA为基础建立的连续放大DNA信号以检测DNA的技术称为分枝DNA信号放大系统。

bDNA信号放大系统包括四种杂交探针，即目标探针、前放大体、放大体和标记探针。首先用亲和素包被微孔，加入目标探针，该组探针能与等检核酸靶序列上不同区域互补，其5′端用生物素标记，能与微孔中的亲和素高度亲和结合；再向微孔中加入待测标本，目标核酸与固定于微孔中的目标探针结合；再加入前放大体，该组探针的一段能与目标核酸的不同区域互补结合，另一段与放大体（即分枝DNA）的主链部分的序列互补结合，分枝DNA由主链和数十根寡核苷酸组成，每个分枝上都有标记探针的杂交位点，由酶标寡核苷酸组成的标记探针与bDNA上的互补序列结合，加入底物后最后经化学发光检测仪检测。利用bDNA信号放大系统可在每个靶序列上结合60～300个酶分子，而且所有杂交反应同时进行，观察到的信号与靶DNA的量成正比，可通过标准曲线将靶DNA定量。

43、简述链末端终止法测定 DNA 序列的原理

答：利用DNA聚合酶，以待测单链DNA为模板，以dNTP为底物，设立四种相互独立的测序反应体系，在每个反应体系中加入不同的双脱氧核苷三磷酸（dideoxyribonucleoside triphosphate，ddNTP）作为链延伸终止剂，在测序引物引导下，按照碱基配对原则，每个反应体系中合成一系列长短不一的引物延伸链，通过高分辨率的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，放射自显影检测后，从凝胶底部到顶部按5′→3′方向读出新合成链序列，由此推知待测模板链的序列。

44、简述化学法测定 DNA序列的基本原理

答：化学法是对待测DNA进行化学降解。在化学法的测序系统中，先对待测DNA末端进行放射性标记，然后分成4组或5组互为独立的化学反应体系，每一组用不同的化学试剂特异地针对某一种或某一类碱基进行化学切割，通过化学降解后产生长短不一的DNA片段，其长度取决于改组反应所针对的碱基在待测DNA片断中的位置，将各组反应产物通过高分辨率的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，放射自显影检测后直接识读待测DNA的序列。

45、Sanger双脱氧链终止法,全称：双脱氧链末端合成终止法

原理：利用DNA聚合酶，以待测单链DNA为模板，以dNTP为底物，设立4种互相独立的测序反应体系，在每个反应体系中加入不同的双脱氧核苷酸三磷酸（ddNTP）作为链延终止剂，在测序引物引导下，按照碱基配对原则，每个反应体系中合成一系列长短不一的引物延伸链，通过高分辨率的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，放射自显影检测后，从凝胶底部到顶部按5’到3’方向读出新合成链序列，由此推知待测模板链的序列。每个测序反应体系的组成：1.DNA聚合酶；2.单链DNA模板（待测片段）；3.带有3-OH末端的单链寡核苷酸引物；4.Mg2+；5.原料-dNTPs(dATP,dGTP,dCTP和dTTP)；6.终止剂-ddNTPs(ddATP,ddGTP,ddCTP和ddTTP)测序体系的关键成分：（1）链终止剂，2’，3’-二脱氧核糖核苷酸（ddNTPs)（2）用于测序的变性聚丙烯酰胺凝胶（PAGE)胶长40cm，厚度均匀；4-8%丙烯酰胺；7mol/L尿素（3）模板，即待测序的DNA片段（4）引物。酶促测序反应中，利用一个与模板特定序列互补的合成寡核苷酸作为DNA合成的引物（5）DNA聚合酶（6）放射性同位素标记的dNTP：α-35S-dNTP 焦磷酸测序技术（PSQ)：在以靶DNA链为模板指导核酸合成的过程中，将释放的可见光作为检测信号，从而对靶DNA链进行实时测序的方法，是一种合成测序技术。原理：同一反应体系中由四种酶催化的级联化学发光反应，首先让测序引物与待测模板结合成杂交体，在每一轮测序反应中，只加入一种dNTP，若该dNTP与模板配对，聚合酶就可以将其掺入到引物链中，并释放出等摩尔的焦磷酸基团（PPi），PPi最终转化为可检测的光信号，并由Pyrogram TM 转化为一个峰值，每个峰值的高度与反应中掺入的核苷酸数目成正比，随后，加入下一种dNTP，继续DNA链的合成。产生的荧光信号自动传入分析系统，直接测读靶DNA序列。特点：1.无需电泳，也无需荧光标记，操作极为简便，具快速、准确、经济和实时；2.阅读能力已从100bp至400bp ；3.该技术具有多种不同的用途。

46、简述哺乳动物细胞基因组DNA抽提的主要方法有哪几种？

哺乳动物细胞基因组DNA抽提的主要方法有： 酚提取法、甲酰胺解聚法、玻棒缠绕法和异丙醇沉淀法、磁珠吸附法等。

47、简述重组DNA技术的原理及技术。

重组DNA是在体外利用限制性内切酶，将不同来源的DNA分子进行特异的切割，获得的目的基因或DNA片段与载体连接，从而组成一个新的DNA分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞，并在宿主细胞中进行无性繁殖，获得大量的目的基因或DNA片段。经重组的DNA分子能在宿主细胞中进行表达，获得相应的蛋白质。

大致步骤包括：①目的基因的获取；②载体的选择；③目的基因与运载体连接成重组 DNA；④重组DNA导入受种细胞；⑤重组体的筛选

49、简述黏性末端DNA重组体的构建过程。

目的基因和载体可由同一种限制酶切割后产生，或由不同的限制酶切割形成互补黏性末端，经退火，彼此间很容易按碱基配对原则形成氢键。然后由DNA连接酶催化连接接头处的缺口，形成重组质粒。载体DNA在限制酶切割后，用碱性磷酸酶处理，除去5’端磷酸基，以避免载体DNA自身环化。50、举例说出重组DNA技术在医药领域的应用。

可以利用重组DNA技术探明致病基因的结构和功能，了解其致病机制；开发基因工程药物和疫苗用于临床；建立基因诊断、治疗技术，为疾病的预防、治疗提供新方法、新技术。具体可用于基因诊断：基因诊断是从基因水平上检测人类遗传性疾病的基因缺陷；基因治疗：是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过载体导入人体靶细胞取代靶细胞中的缺陷基因，从而达到治疗疾病目的的方法；基因工程药物、疫苗和抗体的研究和制备；利用基因敲除或转基因技术可改造生物、培育新的生物品种或用于药物筛选和新药评价等。

51、基因芯片的主要类型及其特点（1）从支持物来分 ①薄膜型：聚丙烯膜、硝酸纤维素膜和尼龙膜②玻片型：生产此类产品的公司 如 Affimetrix（2）从点阵的制备方法来分 ①原位合成型（In Situ Synthesis）②合成点样型（off-chip synthesis）（3）根据探针片段长度分 ①Oligo-Chip：约8~25nt，常用于基因类型的分析，如突变、正常变异（多态性）和测序②cDNA-Chip：<2000nt，常用于基因表达和差异表达分析（两种或以上相关样本）③Genomic Chip：>5000nt，基因组结构分析（4）根据用途分：基因变异检测芯片表达谱芯片功能基因芯片.52、生物芯片：采用平面微细加工技术（光导原位合成或微量点样等）将大量生物样品（核酸、多肽、细胞、组织切片等）有序地固化于支持物表面（玻片、硅片、尼龙膜等）由此组成的密集二维生物样品的微阵列。原理：分子间特异的相互作用

生物芯片技术的特点：1）高度交叉的综合性新技术；2）高度集成性、微型化和连续化；3）高通量；4）通过设计不同的探针阵列、使用特定的分析方法，可使该技术具有多种不同的应用价值。

基因芯片：

1）基因芯片：有序地、高密度地排列着大量的基因片段（probe)的载体(玻璃片或纤维膜等)。2）基因芯片技术：将大量核酸探针分子固定于支持物上，标记的样品分子按碱基互补原则与探针进行杂交，通过检测杂交信号分布和强度、进而获取关于样品分子的序列和数量的信息，是高通量研究基因表达、突变等的革命性技术。基因芯片检测的原理和步骤：

原理：将大量探针分子固定于支持物上，然后与标记的待测样品进行杂交，通过检测杂交信号的分布和强度，实现对样品中基因信息的定性和定量分析。

基本步骤：

1.芯片制备。2.靶核酸制备（样品提取纯化、扩增和标记）3.靶核酸与探针（芯片）杂交 4.杂交结果的扫描5.图像分析和数据处理

基因芯片的特点：

1.微型化和自动化；现有芯片面积：最大525cm２,最小1cm２样品DNA的用量：5nl/阵点 杂交和洗片等过程自动化,工作效率极高。2.高度平行性；实验组和对照组的样品等都在同一张芯片上同时进行杂交分析,结果的可比性好。

3.巨大的信息产出率；芯片上各点所对应的基因或其表达的定性（量）分析、差异表达分析等。4.高度敏感性和专一性；能可靠并准确检测出10pgDNA/μL样品。5.可反复使用；一张由尼龙膜制作的微阵列，可以重复杂交使用多达20次。

53、简述蛋白芯片的原理及应用。

蛋白质芯片的基本原理是采用原位合成、机械点样或共价结合的等方法将多肽、蛋白、酶、抗原、抗体固定于固相介质上形成的生物分子点阵，在待分析样品中的生物分子与蛋白质芯片的探针分子发生杂交或相互作用或其他分离方式分离后，利用激光共聚焦显微扫描仪对杂交信号进行高通量检测和分析。蛋白质芯片是将整个蛋白质水平的相关生化分析过程集成于芯片表面，从而实现对多肽、蛋白质及其他生物成份进行高通量检测。

蛋白质芯片技术是一种快捷、高效、高通量、并行、微型化和自动化的蛋白质分析技术，适用于分析包括组织、细胞系、体液在内的多种生物样品能分析包含针对信号传导、癌症、细胞周期调控、细胞结构、凋亡和神经生物学等广泛的生物功能的相关蛋白，灵敏度高达pg/ml。

54、举例说明基因芯片在临床诊断中的应用。

基因芯片作为一项现代化的诊断新技术在感染性疾病、遗传性疾病的诊断和耐药性检测等方面已显示出良好的应用前景。下面举例说明基因芯片在疾病诊断的应用。

（1）感染性疾病的诊断。性传播疾病、肝炎等。

（2）遗传性疾病的诊断。地中海贫血、血友病、婚前检查等。（3）耐药性检测。结核分支杆菌耐药性检测芯片等。

55、试述基因芯片的工作原理及制备。

基因芯片技术是建立在基因探针和杂交测序技术上的一种高效、快速的核酸序列分析手段。它将大量探针分子固定于支持物上，然后与标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号的强度及分布来进行分析。在一块1cm2大小的基因芯片上，根据需要可固定数以千计甚至万计的基因，以此形成一个密集的基因方阵，实现对千万个基因的同步检测。基因芯片技术主要包括四个主要步骤：芯片制备、样品制备、杂交反应和信号检测以及结果分析。

56、试述生物芯片的种类及主要功能。

生物芯片根据其结构特点，可以将生物芯片分为微阵列芯片和微流体芯片两个主要类别。微阵列芯片是由生物材料微阵列构成的芯片，包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片和组织芯片等，由于它们的工作原理都是基于生物分子之间的亲和结合作用，如核酸分子的碱基配对作用，抗原和抗体的结合等，所以通常也称为亲和生物芯片。微流芯片是以各种微结构为基础的芯片，利用它可实现对各种生化组分的微流控操作和分析，这类芯片的代表有毛细管电泳芯片、PCR反应芯片、介电电泳芯片等。(生物芯片发展的最终目标是将各种生物化学分析操作的整个过程，从样品制备、生化反应到结果检测，都集成化并缩微到芯片上自动完成，以获得所谓的微型全分析系统（micro total analysis systen,μ-TAS）,或称“微缩芯片实验室”（lab-on-a-chip）。微缩芯片实验室代表了生物芯片技术发展的未来。)

57、核酸探针：序列已知的、能与待测的靶核酸序列互补结合、并带有可检测标记的核酸片段。（它可以是整个基因，或基因的一部分；它可以是DNA或RNA）。

58、基因组DNA探针：为某一基因的全部或部分序列。缺点：真核基因组含有内含子序列；因此，当其用于检测基因表达时，杂交效率低

cDNA探针：从已构建的cDNA文库中筛选和分离出来的靶基因序列。cDNA探针无内含子序列，尤其适用于基因表达的检测，目前应用最广。

59、基因组探针和cDNA探针的共同优点：①制备方便：克隆于质粒载体中②稳定：DNA探针较RNA探针稳定；RNA易被RNA酶降解③标记方法成熟和多样。共同缺点：双链探针存在自身复性，影响杂交效率。

60、RNA探针的优点：单链：杂交时不存在第二条链的竞争（自身复性），杂交效率高；含RNA的杂交体更稳定（Tm更高），杂交反应可以在更为严格的条件下进行，因而RNA探针杂交的特异性高 主要缺点：探针不稳定，易被RNase降解。RNA探针适合于：Northern杂交、原位杂交等。61原位杂交的基本原理

样本经适当处理后，使细胞通透性增加，让探针进入细胞内与组织、细胞中待检测的核酸进行特异性结合形成杂交体，然后通过组织化学或免疫组织化学方法在被检测的核酸原位形成的杂交信号，在显微镜或电子显微镜下对待测核酸进行细胞内定位的方法。

62、核酸杂交技术是一种分子生物学的标准技术，用于检测DNA或RNA分子的特定序列（靶序列）。DNA或RNA先转移并固定到硝酸纤维素或尼农膜上，与其互补的单链DNA或RNA探针用放射性或非放射性标记。在膜上杂交时，探针通过氢键与其互补的靶序列结合，洗去未结合的游离探针后，经放射自显影或显色反应检测特异结合的探针。

63、核酸分离与纯化的原则：

1.保证核酸序列结构完整性，防止降解和结构破坏;2.剔除其他物质，保证纯度

64、在核酸的分离和纯化过程中，如何保持核酸的完整性？

[本题答案] 为了保证核酸的完整性，首先在操作过程中，应尽量简化操作步骤，减少各种破坏核酸的有害因素，包括物理、化学与生物学的因素。提取应在0～4℃的条件下进行；另外避免强力的机械剪切力对核酸的破坏。细胞内或外来的核酸酶对核酸的生物降解，而破坏核酸的一级结构，使用EDTA、柠檬酸盐并在低温条件下操作，基本上就可以抑制DNA酶的活性；并尽可能地抑制RNA酶的活性。65、RNA的分离与提取：

难点：RNA在体外十分不稳定，易降解，不易得到全长；RNA酶在体外存在于手汉、唾液、呼吸、灰尘中。原则：防止污染、防止降解。

防止方法： 高压灭菌；器皿：200 ℃烘烤2h；试剂：采用焦碳酸二乙脂（DEPC）处理；戴手套、口罩。

提取方法：（1）异硫酸胍-酚氯仿法： 异硫酸胍（4M）+巯基乙醇（0.14M）为蛋白质变性剂，酚/氯仿抽提，异丙醇沉淀RNA，75%乙醇洗涤（2）TRIzol法： TRIzol（苯酚+硫氰酸化合物）+氯仿+异丙醇+75%乙醇（3）酚-氯法。纯化方法：饱和酚（pH4.5-5.5）66、简述原位杂交在临床中的应用

原位杂交技术可以通过标记的探针与分裂中期染色体DNA杂交来精确定位特定核苷酸序列在染色体上的位置；与细胞RNA杂交可观察组织细胞中特定基因的表达水平；还可用特异性的细菌或病毒的核酸序列作为探针与组织、细胞杂交，以确定有无病原体的感染等。原位杂交能在成分复杂的组织中对单一细胞进行研究，不受同一组织中其它成分的影响，因此对于那些细胞数量少且散在于其它组织中的细胞内DNA或RNA的研究更为方便。此外，原位杂交不需要从组织中提取核酸，有利于检测组织中含量极低的靶序列，并可完整地保持组织和细胞的形态，更能准确地反应出组织细胞的相互关系及功能状态。举例：原位杂交检测上皮细胞中人乳头状瘤病毒（HPV）DNA 67、简述临床诊断常用的FISH探针的类型及用途。

根据核酸探针的序列特点，可将FISH探针分为三大类：重复序列探针、单一序列探针和全染色体涂抹探针。重复序列探针（repetitive sequences probes）是指与某条特定的染色体结构结合、特异识别重复DNA序列的探针如着丝粒探针、端粒探针等。一般来说，不同的染色体，着丝粒重复序列中的核苷酸序列也不同，但端粒重复序列不具有染色体特异性。单一序列探针(Unique sequence probes)与某条染色体上特定的区域或基因的单拷贝DNA序列杂交。包括带特异性探针（band special probes）和基因座特异性探针（Locus Specific probes）等。全染色体涂抹探针（whole chromosome painting probes, WCP）是识别一条特定染色体全长上的单一序列探针的混合物。68、临床基因扩增检验实验室应如何设置。

由于基因扩增检验是对靶核酸的指数倍扩增过程，因而有大量的扩增产物的出现，这种扩增产物极易对以后的新扩增反应产生“污染”，为防止这种污染的发生，就需要对基因扩增检验实验室进行严格的分区。临床基因扩增检验实验室原则上分为四个分隔开的工作区域，即试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区以及扩增产物分析区。如果采用全自动扩增仪，后两个区域可以合并。应注意的是，各工作区域必须有明确的标记，避免不同工作区域内的设备、物品混用。进入各工作区域必须严格按单一方向进行，即试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。各区的仪器设备包括工作服、鞋子、实验记录本和笔等都必须专用，不得混淆。此外，上述四个工作区域内还应有固定于房顶的紫外灯，以便于工作后区域内的空气照射。69、如何保证临床基因扩增检验实验室的质量。

临床基因扩增检验实验室的常规测定由一系列步骤组成，包括样本收集、样本处理（核酸提取）、核酸扩增、产物检测结果报告及解释等。室内质量控制仅涉及样本处理、核酸扩增和产物分析等测定分析步骤，而室间质量评价则除了监测测定分析步骤外，还包括较大范围的实验室活动，诸如样本接收中的可靠性、结果报告及解释等。QA则是覆盖更广范围的活动，包括样本收集、结果报告和解释等。

第五篇：吉林大学实验诊断学教学大纲

白院08级临床八班荣誉出品 实验诊断教学大纲（2个版本）

总 论

了解实验诊断学概念、任务；

熟悉影响检查的生理因素及干扰结果的原因、参考值、异常值、误差的概念；

掌握实验诊断学的学习方法和临床思维方法。

第一章 血液检验

（一）了解血细胞计数仪基本原理

（二）掌握红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数及白细胞分类的检查方法、参考值及临床意义

（三）熟悉贫血的形态学分类、红细胞压积、红细胞指数的参考值及临床意义

（四）熟悉网织红细胞计数、血沉测定，掌握参考值及临床意义

（五）熟悉ABO血型和交叉配血的理论知识，了解血型鉴定与交叉配血方法

第二章 骨髓细胞学检查

（一）熟悉骨髓细胞学检查的适应症，骨髓血细胞的发育规律

（二）掌握正常骨髓像的内容和增生程度分级、粒红比值以及变化的临床意义等

（三）了解常用的细胞化学染色法（糖原、过氧化酶、碱性磷酸酶、铁粒和酯酶染色）的临床意义

（四）掌握常见贫血、白血病和血小板减少性紫癜的骨髓像特点

第三章 止血与凝血障碍的检查

（一）掌握出血时间、凝血时间、凝血酶原时间、活化凝血活酶生成试验和血小板计数的参考值与临床意义

（二）掌握临床常见出血性/血栓性疾病的检查规律

（三）了解常用纤溶和抗凝试验的原理、参考值和临床意义

第四章 尿液检查

（一）掌握尿标本的收集及其影响因素

（二）掌握尿液性状、蛋白质、糖、酮体及尿沉渣等检查的参考值及临床重义

（三）了解尿液其它检查项目的临床意义

第五章 肾功能检验

（一）掌握肾功能分段检查的方法、参考值和临床意义

（二）熟悉常用肾功能试验选择原则，肾功能损害的分期标准

第六章 酸碱平衡测定与血气分析

（一）掌握血气分析的指标、参考值

（二）掌握血气分析检查的原则和临床意义 第七章 妊娠试验和生殖系统的体液检验

（一）掌握精液、前列腺液检查的临床意义

（二）熟悉临床常用的妊娠试验、阴道分泌物检查的临床意义

第八章 肝脏试验室检查

（一）熟悉常用肝功能及肝脏疾病的实验室检查的试验原理，掌握参考值和临床意义及选用原则

（二）了解血浆脂质的种类及熟悉常用脂质测定的参考值及临床意义

（三）掌握血糖参考值、临床意义；了解葡萄糖耐量试验临床意义

（四）掌握胆红素检查的参考值、临床意义

（五）掌握乙型病毒肝炎检验指标及临床意义;熟悉其它病毒肝炎的检查方法

（六）熟悉肝癌标志物检验的临床意义

第九章 血清酶学检查

（一）了解临床酶学变化的一般规律

（二）掌握常用临床酶学检查项目;尤其是肝与心肌酶的参考值及临床意义

第十章 粪便、脑脊液、浆膜腔积液的检查

（一）掌握粪便检查及便潜血反应的临床意义

（二）掌握脑脊波检查的参考值和临床意义

（三）熟悉渗出液与漏出液的鉴别要点

第十一章 临床免疫学检验

（一）了解自身抗体的类别，主要检查法及其临床意义

（二）了解临床最常用的肿瘤标记物检查的临床意义

（三）了解淋巴细胞亚群分类方法和临床意义

第十二章 血清离子检查

了解血清离子检查方法，掌握参考值及临床意义

第十三章 内分泌激素测定

了解血清内分泌激素的检查方法，掌握参考值及临床意义

绪论：

掌握实验诊断学定义，理解学习实验诊断学的目的意义。第一章：实验室检查标准化

了解实验室检查标准化的意义。了解质量控制方法。掌握参考范围的概念。了解循证实验诊断学。

第二章 临床血液检查

掌握红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数和分类的参考值及其增减变化的临床意义。了解上述各项检验的检验方法。

熟悉贫血的形态学分类，以及红细胞比积、红细胞平均指数的参考值及临床意义。

了解网织红细胞计数及红细胞沉降率测定的适应征，掌握其参考值及临床意义。

了解溶血性贫血常用实验室检查的原则和临床意义。

临床血液检查——骨髓细胞学检查

熟悉骨髓细胞学检查的适应症、骨髓穿刺和骨髓活检的选择原则，以及送检要求。

熟悉常见的血液病血象和骨髓象特点。

了解血细胞发育规律、骨髓增生程度分级、正常骨髓细胞的形态和分类比值。

了解常用的细胞化学染色法及其在急性白血病鉴别诊断中的临床意义。

临床血液检查—常见血液病血液学特征、输血与配血

1、掌握四类七种常见血液病血液学特征

2、了解配血与输血原则

第四章 血栓与止血障碍的检查

1熟悉引起止血与凝血障碍的常见原因。2掌握止血与凝血障碍常用检验法的临床意义。3熟悉止血与凝血障碍常用检验方法的原理。熟悉出血性疾病的实验室检查选用原则及实验室诊断的步骤。了解播散性血管内凝血的基本检查。

临床生物化学检查

1熟悉各种蛋白质、脂类、氨基酸、胆红素检测的参考范围及其临床意义

2掌握各种血清酶、水、电解质酸碱平衡、血气分析、内分泌激素的参考范围及其临床意义。3了解钙磷代谢、治疗药物的基本检查。

第五章 主要器官的实验室检查

1掌握常用肝功能试验及肝脏疾病实验室检查选用原则与检查程序。掌握常用心脏疾病实验室检查选用原则与检查程序。3 掌握常用肾功能试验选用原则与检查程序。4 熟悉胰腺、骨相关代谢的实验室检查的选用原则及检查程序。熟悉甲状腺/甲状旁腺、肾上腺、性腺、脑垂体分泌激素的实验室检查的选用原则及检查程序。

第五章 临床免疫学检查

一、掌握免疫功能评价常用检查方法及临床意义

二、掌握病毒性肝炎血清标志物、类风湿因子（RF）测定、肥达（Widal）试验的参考值与临床意义。

三、熟悉自身抗体检查的常用项目：抗核抗体的检查、抗双股DNA抗体测定、抗ENA抗体测定及其临床意义。第六章 临床病原学检查

掌握标本的采集和运送的注意事项

熟悉细菌、病毒、真菌和寄生虫的检验程序与特点；熟悉各系统感染时的细菌、病毒和真菌的检查项目；掌握败血症的概念和细菌感染检查项目的选择和应用。熟悉性传播疾病的概念、标本采集和检查项目的选择和应用

掌握抗菌药物敏感性试验和细菌耐药性的检查 熟悉医院感染的实验室诊断

第七章 临床细胞遗传学与分子生物学检查

熟悉PCR、染色体的检测、基本芯片技术的概念、原理、临床应用

熟悉21-三体综合征、X单体综合征、47，XYY综合征的染色体病检查；血友病的基因突变病检查

了解DNA测序、SNP、DNA印迹技术、FISH检测

第九章 体液、分泌物、排泄物检查掌握尿液检验原理与方法

1掌握其参考范围及临床意义。

2熟悉粪便检验法，掌握其异常变化的临床意义；熟悉粪便隐血试验的方法，掌握其临床意义。

3掌握脊液检验的临床意义、适应征及参考值。4熟悉常见脑及脑膜疾病的脑脊液特点； 5掌握浆膜腔积液检查的临床意义，漏出液与渗出液的鉴别要点。