病理技术的新进展

第一篇：病理技术的新进展

病理技术的新进展

放射自显影技术（autoradiograph)是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影术用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布与代谢径路，包括定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。

其原理是将放射性同位素（如14C和3H）或放射性同位素标记的化合物导入生物体内（注入动物体内或加入培养基中），间隔一定时间取材,制成标本（如切片或涂片），在暗室中涂上液体原子核乳胶（卤化银乳胶），置暗处经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。数日后再经显影、定影处理，或经染色后光镜观察，在放射性同位素或其标记物存在的部位，溴化银被还原成黑色的微细银颗粒，即可得知标本中标记物的准确位置和数量，放射自显影的切片还可再用染料染色，这样便可在显微镜下对标记上放射性的化合物进行定位或相对定量测定。这种技术与电镜样品处理，则为电镜放射自显影术(electron microscope autoradiography)。

在生物学研究中，常用的放射性同位素主要是能量低、射程短、电离作用强β的射线如3H，14C，32P，35S，125I，45Ca，等或其它化合物。

放射自显影优点：定位精确，灵敏度高，分辨率好，能保存相当长时间；操作简便，无需复杂设备；可供定量研究和双同位素示踪；将形态、机能和代谢地研究统一起来；研究某些大分子在体内地动态变化过程。原位杂交 原位杂交的概念

原位杂交是用标记的核酸探针与细胞和组织切片中的核酸进行杂交并对其进行检测的方法。即使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。分细胞原位杂交和组织切片原位杂交。

原位杂交技术(In situ hybridization，ISH)是在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的，由分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术。原位杂交的发展简史

ISH始于20世纪60年代。由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是20世纪70年代末到80年代初，分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功，为原位杂交技术的发展奠定了深厚的技术基础。原位杂交的基本原理 两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，能通过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子，应用已知碱基序列并具有标记物的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)RNA或DNA片段作为核酸探针，与组织切片或细胞内的待测核酸互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，通过标记物的显示（例如放射自显影等方法），在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位。为显示特定的核酸序列必须具备3个重要条件：组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物。原位杂交的实践应用

原位杂交技术可在原位研究和检测细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达，进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。随着相继建立的生物素和地高辛等非放射性标记技术，并结合应用免疫组织化学的显示技术，使原位杂交技术迅速推广应用于基础理论研究和临床诊断。如在肝炎病毒，肾综合征出血热病毒，人乳头瘤病毒，结核菌等检测中该法被迅速推广应用。由于其存在的不足，国外用微波加热技术进行改良，在节省杂交时间和蛋白酶K方面取得了良好的效果。

经研究表明，微波加热的原位杂交可以取代普通原位杂交而用于石蜡标本的基因表达检测。目前在国内已逐步开展荧光标记原位杂交技术，能在荧光显微镜下更加简便，清晰地观察结果。

原位杂交的优点和缺点

优点：(1)高特异性及灵敏性：抗原和抗体之间的特异识别及结合的特点，决定了荧光原位杂交的高度特异性，同时使检测的结果具有很高的灵感度；原位杂交技术因其高度的灵敏性和准确性而日益受到许多科研工作者的欢迎，并广泛应用到基因定位、性别鉴定和基因图谱的构建等研究领域。(2)结果直观：其结果在荧光显微镜下可直接观测。

缺点：(1)费时：实验步骤较多，周期长；(2)成本高：蛋白酶K需要量大，所以成本较高。

几种原位杂交技术

1、基因组原位杂交技术

基因组原位杂交(Genome in situ hybridization，GISH)技术是20世纪80年代末发展起来的一种原位杂交技术。它主要是利用物种之间DNA同源性的差异，用另一物种的基因组DNA以适当的浓度作封阻，在靶染色体上进行原位杂交。GISH技术最初应用于动物方面的研究。

2、荧光原位杂交技术

荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization，FISH)技术是20世纪80年代末在已有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性DNA分子原位杂交技术。

FISH的基本原理是利用荧光标记（取代了同位素标记）的核酸片段为探针，将DNA(或RNA)探针用特殊的核苷酸分子标记，然后将探针直接杂交到染色体或DNA纤维切片上，再用与荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析。

FISH技术检测时间短，检测灵敏度高、安全无污染、探针能长期保存、能同时显示多种颜色等优点, 不但能显示中期分裂相,还能显示于间期核。同时在荧光原位杂交基础上又发展了多彩色荧光原位杂交技术和染色质纤维荧光原位杂交技术，已广泛应用于染色体的鉴定、基因定位和异常染色体检测等领域。

3、多彩色荧光原位杂交技术

多彩色荧光原位杂交(Multicolor fluorescence in situ hybridization，mFISH)是在荧光原位杂交技术的基础上发展起来的一种新技术，它用几种不同颜色的荧光素单独或混合标记的探针进行原位杂交，能同时检测多个靶位，各靶位在荧光显微镜下和照片上的颜色不同，呈现多种色彩，因而被称为多彩色荧光原位杂交。它克服了FISH技术的局限，能同时检测多个基因，在检测遗传物质的突变和染色体上基因定位等方面得到了广泛的应用。

4、原位PCR

原位PCR技术是常规的原位杂交技术与PCR技术的有机结合，即通过PCR技术对靶核酸序列在染色体上或组织细胞内进行原位扩增使其拷贝数增加，然后通过原位杂交技术进行检测，从而对靶核酸序列进行定性、定位和定量分析。原位PCR技术大大提高了原位杂交技术的灵敏度和专一性，可用于低拷贝甚至单拷贝的基因定位，为原位杂交技术的发展提供了更广阔的发展前景。PCR

PCR的概念： 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一种在体外由引物介导的DNA酶促合成反应，也叫基因扩增技术。是在体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术，即无细胞分子克隆技术。它的出现使人们对微量甚至单个细胞DNA的分析成为可能，并且表现出了前所未有的敏感性和特异性。

聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）是利用DNA聚合酶依赖于DNA模板的特性，在离体条件下模仿细胞内DNA复制过程，用两种与相反链杂交并附着于靶DNA两侧的寡核苷酸引物经酶促反应合成特异的DNA片段的体外方法。包括模板变性、引物退火和用DNA聚合酶延伸退火引物在内的重复循环，使末端被引物5‘端限定的特异性片段成指数形式积累。这种由Mullis发现的方法最早被美国Cetus公司的人类遗传学部的一个小组用于球蛋白DNA的扩增及镰刀形红细胞贫血病的产前诊断。近十几年来，PCR技术得到了迅速发展，并日益完善，在医学生物科学研究的许多不同领域中简化了分析工作。该技术在分子生物学、医学、法医学、考古学等领域中都有重要的应用价值，并且对已建立的基因克隆、DNA序列分析等现代分子生物学技术的发展起到巨大的推动作用。PCR的基本原理：

类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链，随之将反应混合物冷却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火，再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环，PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复，前一轮扩增的产物又充当下一轮扩增的模板，目的DNA以2的指数方式积累，使皮克水平的起始物达到μg数量级。

PCR的应用：

近2O年来，分子生物学突飞猛进，也开拓了分子病理学领域。分子病理学应用分子生物学一些基本技术，结合病理形态学的特点，将核酸原位分子杂交、聚合酶链反应(PCR)、核酸测序等应用于病理研究和诊断。

PCR技术已广泛应用于分子生物学各个领域，并成为分子病理学的一个强有力的手段，被列为20世纪90年代生物学技术十大热点之首，已被广泛应用于分子克隆、DNA序列分析、癌相关基因的检测、遗传病和分子病理诊断等多个领域。它不仅可用于基因的分离、克隆和核酸序列的分析，还可用于突变体、重组体的构建、基因表达调控研究、遗传病、传染病的诊断及肿瘤发生机理的探讨等。如应用PCR技术检测瘤细胞的基因重排诊断淋巴瘤，检测相关病毒、细菌等诊断结核、SARS等感染性疾病。荧光定量PCR技术利用荧光素标记探针，PCR扩增时会发出荧光，通过检测荧光的强度可实时(real time)监测PCR反应，定量准确，易于标准化。该技术解决了PCR产物的污染和PCR模板定量的问题，在临床观察患者病情发展及预后，判断药物疗效等方面的用途和前景十分广阔。在肿瘤细胞基因组DNA的PCR实验中，应用显微切割技术在显微镜下将单个肿瘤细胞与正常组织细胞或瘤旁细胞中分离出来，避免非肿瘤细胞基因组DNA的干扰。

新鲜组织和福尔马林固定石蜡包埋的病理组织切片或细胞涂片、培养细胞、血、痰液、乳汁和各种体液及尿液均可应用PCR技术进行DNA水平的相关研究。PCR技术的发展：

RT-PCR，即 Reverse transcript反转录PCR。

原位PCR(In situ PCR)技术是继PCR技术之后又发展起来的一门新技术。是将PCR的高效扩增与原位杂交技术的细胞定位相结合，在组织切片或细胞涂片上原位对特定的DNA或RNA进行高效扩增再用特异性的探针作原位杂交检测。既能检出细胞内单拷贝及低拷贝的核酸序列，又能对含靶序列的组织细胞进行形态学分析。极大提高了在细胞原位检测核酸及抗原的敏感性。

原位逆转录PCR(In situ RT-PCR)是将逆转录反应和PCR结合，检测细胞内低拷贝mRNA．以mRNA为模板合成cDNA，再以cDNA为模板在DNA聚合酶作用下进行扩增，rTth逆转录酶具有分别依赖RNA或DNA的耐热I)NA聚合酶活性。可同时执行RT和PCR，使反应时间缩短。

实时荧光定量PCR：

开始阶段的PCR只局限于DNA的定性研究，随着科技的发展，定量PCR应运而生。然而，其精确性与特异性也不是绝对的，直到实时荧光定量PCR的出现，人们才真正实现了PCR从定性到定量的飞跃。

基本原理：聚合酶链式类似体内的DNA复制过程，主要是利用DNA聚合酶依赖DNA模板的特性，在一对引物诱发聚合酶反应。整个过程包括模板变性、模板与引物的结合和引物延伸3个步骤。而实时荧光定量PCR是在常规的PCR反应体系中加如入荧光标记探针，通过荧光信号积累实时检测整个PCR进程，来实现其定量功能。

实践应用：实时荧光定量PCR在肿瘤学方面应用较广泛。(1)检测微量残渣疾病：目前血液肿瘤患者的高度复发是痊愈的一个主要障碍，而微量残渣疾病的检测是提供血液肿瘤患者有效治疗方案的关键一步，可以根据不同患者在分子水平的不同反应来指导个性化治疗；(2)检测单核苷酸多态性(SNP)：单核苷酸是第3代遗传标记，即每一个核苷酸在任何一代人群中大约每1×lo9个个体就会发生一次变异，此种方法可以检测其差异，将在未来分子诊断中起重要的作用；(3)监测基因表达：实时荧光定量PCR技术即可以定量又可以定性的监测基因表达的变化，从而确定其是否有差异性表达；(4)甲基化的研究：实时荧光定量PCR在检测DNA甲基化方面更具有优越性，它避免了反应后的凝胶电泳，因而增加了灵敏度和通量；(5)实时荧光定量PCR技术还可以与显微镜切割技术或石蜡固定标本提取DNA技术相结合，使从石蜡固定的少量标本中提取完整的DNA并进行检测基因表达成为可能。

优点和缺点：优点：(1)高特异性与准确性：由于其对模板DNA的定量是在PCR反应的指数增长期进行的，所以准确性很高。而不同的模板DNA需要不同的探针，则决定了它的高特异性；(2)污染小：一般PCR产物都需要通过凝胶电泳，染色剂染色，紫外线观察，不仅费时费力，并且染色剂对人体有害，且过多的实验操作大大增加了污染的机会，而如果利用实时荧光定量PCR整个过程只需在加样时打开一次盖子，其后的过程完全是封闭的，并且不需要凝胶电泳PCR后操作，这样就大大减少污染的机会，高灵敏度、高通量，能够同时检测多样样品。缺点：实时荧光定量PCR最大的缺点在于价格昂贵。流式细胞技术(FCM)

基本概念：

流式细胞仪(Flow Cytometer):是集光电子物理，光电测量，计算机，细胞荧光化学，单抗技术为一体的高科技细胞分析仪。

流式细胞术(Flow Cytometry):是利用免疫或荧光细胞化学的原理，以激光激发荧光，结合计算机处理信息和快速分拣系统进行定量检测。

利用流式细胞仪对处于快速流动的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速（每秒可达1000-10000个）的定量分析和分选（纯度可达99%以上）的检测技术。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，与传统的荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。

优点： 1.测量速度快 2.高通量：一次可以检查上万个细胞，PCR的测量是以整个样品为单位，FCM的测量是以样品中的每一个细胞为单位。

3.可进行多参数测量

4.是一门综合性的高科技方法（FCM综合了光学，电子学，流体力学，细胞化学，免疫学，激光和计算机等多门学科和技术）；

5.既是细胞分析技术，又是精确的分选技术。局限性：

1.需要新鲜没有固定过的样品；

2.样品采集和样品制备的过程中可能有选择性的细胞丧失； 3.得到的形态学信息很有限。工作原理：

将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度，这样，鞘液就能够包绕着样品高速流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过检测区域。

流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。荧光信号的接受方向与激光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号，再转换为数字信号通过计算机处理、分析。可以单独显示每个参数的直方图，也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。

应用范围：

可用于白血病的分型、肿瘤细胞染色体的异倍性测定，以及免疫学研究，并已开始用于细菌鉴定，病毒感染细胞的识别合爱滋病感染者T4、T8细胞的记数。

自70年代以来，随着流式细胞技术水平的不断提高，其应用范围也日益广泛。流式细胞术已普遍应用于免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等临床医学和基础医学研究领域。

FCM可以发挥最大优势的领域是细针穿刺(FNA)以及各种体液、血液和骨髓的检查。组织芯片 生物芯片技术包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片以及元件微阵列芯片、生物传感芯片等新型生物芯片，对DNA、RNA、多肽、蛋白质、细胞、组织以及其它生物成分进行高效快捷的测试和分析。组织芯片概念

组织芯片(tissue chip)又称组织微阵列(tissuemicroarray，TMA)，是一种新兴的生物高科技技术。是将数十甚至数千个不同个体的小组织标本整齐地排放在一张载玻片上而制成的组织切片。可以了解组织形态、组化特性、蛋白和核酸(RNA和DNA)在组织细胞中的定位和分布 组织芯片发展简史

1986年Battfora 多组织块和多组织片，是组织芯片的前身。他制备多组织片的目的是提高测试抗体的效率。

20世纪90年代初西方国家如丹麦也用手工方法制出多组织片，其目的是为了测试各级病理医师的诊断水平和进行免疫组化的质量检控。

1998年Kononen等采用机器(组织芯片机，tissue arrayer)通过钻洞取样，将645个直径0．6 1TITI组织从不同的蜡块转移到一个新的蜡块中，并井然有序地排列在一起，然后切片制成了乳腺癌的组织芯片，并应用荧光原位杂交、免疫组织化学和mRNA原位杂交技术研究了6种基因及其表达产物的表达状态。他们制作组织芯片的目的是为了高效地检测肿瘤组织中相关基因及其表达，从而建立肿瘤的分子文库。

目前组织芯片主要用于肿瘤特异性基因的筛选和功能基因组的研究。

组织芯片的应用领域

包括与生命科学相关的基础研究、临床研究、应用研究和新药开发等。组织芯片可用于常规苏木素-伊红染色(HE)、组织化学、免疫组织化学（IHC）染色、原位杂交（ISH）、荧光原位杂交（FISH）、原位PCR、原位RT-PCR和寡核苷酸启动的原位DNA合成（PRINS）等。可以广泛地与核酸、蛋白质、细胞、组织、微生物相关技术相结合，分别在基因、转录和表达产物的生物学功能这三个水平上进行研究，可对病人的疾病诊断，预后和治疗相关的标志物的分析。组织芯片的广泛应用将会极大地促进现代医药学、基因组学和蛋白组学研究的深入发展。

在掌握组织芯片基本应用范围的基础上可以演绎出很多种用途。有的已成为现实，如：①HE 染色：其目的是展现组织细胞的形态，据此，可以做成正常组织芯片、肿瘤组织芯片、炎性病变组织芯片、心血管疾病和神经疾病等系统性疾病组织芯片、疑难疾病组织芯片、少见病组织芯片、寄生虫组织芯片、基本病理改变组织芯片等等。这些组织芯片可用于教学、水平测试，亦可作为缩微的组织学和病理学图谱。②组化染色和免疫组化染色：目的是了解组织细胞和病原中的组化成分或抗原表达，可以根据需要做成各种组织芯片，研究各种组织细胞以及病原的表型和表达，在这方面有很大的科研潜能。另一方面，可以通过已知的组织细胞和病原了解各种试剂和／或抗体的特异性和敏感性。根据需要做成各种组织芯片测试新试剂和新抗体，进行组化染色和免疫组化染色的质量监控，也可用于常规组化染色和免疫组化染色阴性和阳性对照。与HE染色片配合，亦可用于教学、水平测试和作为缩微的图谱。③原位杂交和荧光原位杂交：目的是了解组织细胞的基因或基因表达，可以根据需要做成各种组织芯片，如乳腺癌组织芯片、膀胱癌组织芯片、肾癌组织芯片等，研究各种组织细胞的基因情况。

组织芯片的优点

优点是：①体积小，信息含量大，一次实验可获得大量结果。②实验误差小：组织芯片中的众多组织都处在相同条件下进行实验，因此较传统的1个病例1张切片的实验误差小，试验结果可比性强；③对原始组织蜡块损坏差小；④成本低：组织块较小，试剂的用量较少，故成本低廉；⑤连续性：可以将病变的许多不连续过程集中到一起，使之连续化并微型化，由此可了解病变的整个过程； ⑥应用范围广泛。⑦高效，快速。

局限性：由于构成组织芯片的组织很小，因此必然会出现一个问题，即这些小组织是否能够代表其原来的组织?特别是在对有多种组织起源组成的肿瘤进行研究时，这个问题是很难避免的。

芯片技术的出现是生物信息分析领域的一个革命性的里程碑，它使以往的繁多、复杂的基因序列分析和基因检测研究工作变得省时、省力、准确、高效率，该技术的广泛应用必将使人类对生物体的生长、发育、分化、遗传、疾病等重大生命问题，有更加本质的认识。

组织芯片的制作方法：(1)收集和选择病例。

(2)复查组织切片，审查病理诊断，(3)收集相应组织蜡块(称为供体蜡块donor)、标记相应靶点。可采用打点或画圈法。(4)制作空白蜡块(即受体蜡块recipient)：

(5)用组织芯片制作机(Beecher Instnnnents，usA)在受体蜡块上打洞。(6)获取供体蜡块组织芯(7)用距离调节器准确地将打洞针前后或左右移动适当的距离，再重复上述(5)(6)的操作方法，如此反复即可将数十至上千的组织芯整齐地安插于受体蜡块中。最后，用三张载玻片叠放在一起将所有组织芯按平，使制成的组织芯片蜡块表面平坦光滑。

(8)将制成的组织芯片蜡块再放入蜡块制作模具，放入60℃ 烤箱内1 h，使组织芯与受体蜡块的蜡融为一体。冷却后取出。组织芯片蜡块便制做成功。(9)制作好的芯片蜡块，可进行切片或放入4℃冰箱内保存备用。(10)对组织芯片蜡块进行切片。

用于免疫组织化学染色或原位杂交。

组织芯片技术目前仍处于不断完善的过程中，但已显示了重要的科研和应用价值，也具有很大经济价值，不仅为人类基因组研究发挥作用，也将为病理学的发展起重大推动作用。现在，已有公司生产出自动组织芯片打孔仪、点样仪等仪器，有助于提高组织芯片的制作速度。诊断细胞学技术

诊断细胞学的涂片制作和染色技术是一直使用传统的方法，脱落细胞学检查通过采集病变处脱落的细胞，涂片染色后进行观察。其作用可以普查肿瘤；为细胞培养提供标本；并测定激素水平。

然而，传统的宫颈涂片制作有近80％以上的细胞包括异常的细胞未能收集在玻片上，而且制片质量不佳，有诊断价值的细胞重叠严重，或被炎症细胞、血细胞和黏液等遮盖而影响诊断。近年来液基薄层细胞学制片技术的应用使细胞学涂片，特别是宫颈涂片制作技术有了很大的发展。

液基薄层细胞学制片技术包括膜式液基薄层细胞技术(Thih．prepCytolosy Test，TCT)和离心沉淀式液基薄层细胞学制片技术(AutoCyte Prep)，制作出的涂片几乎可以收集到取样器上的所有细胞，细胞呈单层平铺，背景清晰少有血细胞和黏液等的干扰。与传统涂片相比，异常细胞的检出率有了显著提高。液基薄层细胞制片技术与TBS(The Bethesda System)报告方式结合在宫颈病变筛查及诊断中起着越来越大的作用。该技术还可用于非妇科标本，如尿、痰、体腔渗出液、支气管冲洗液、食管拉网标本以及细针穿刺的标本检测。但是该技术仪器和耗材成本较高，在一定程度上影响了该技术的推广和普及。图像分析技术与网络技术

图像分析技术在病理学中的应用标志着我国已进入定量病理学的新阶段。在对组织细胞或细胞的微小结构定性和定位的形态基础上，利用图像分析仪能较客观而精确地以数字表达存在于标本中的各种信息，进行半定量或定量分析。如在研究和诊断中应用该技术对胃肠粘膜上皮重度增生和腺癌细胞核中DNA含量进行测定，以及开展定量免疫组织化学研究。其结果较人工观察计算更客观、精确，重复性好，可比性强，但也受到制片质量不均

一、采集图像是否恰当、不同厂家的分析软件系统的差异诸多因素的影响。

同时，在病理教学中多媒体技术广泛应用，大大地提高了教学改革的进行。随着网络技术的飞速发展，促进了病理专业网站的建立，网上的病理读片，疑难病理讨论，技术论坛，诊断经验交流，极大地方便了病理学工作者之间交流、沟通和共同提高。医院局域网的建立，使各科室间能方便快捷地交流信息，共享资源。全自动显微镜系统及超强计算机技术的应用，成就了病理远程会诊。

其它技术

20世纪80年代初激光扫描共聚焦显微镜问世，它在显微镜高分辨率成像的基础上加装激光扫描装置对组织内或细胞内部微细结构进行光学非侵入式分层扫描，然后通过计算机进行图像处理，迅速完成对图像立体、多层面、动态的全面观察，再转换成具有三维效果的图像从屏幕上显示并拍摄。是当今生物组织形态学研究的先进手段之一，在整个生物学研究领域都有着广阔的应用前景。

新近由Microbright Field开发的虚拟切片技术，可使整张切片的图像存储在固定媒体上，实现了无切片无显微镜的病理时代，开创病理诊断及教学新模式。

第二篇：病理技术试卷

病理技术期末考试试题

一、名词解释（每题3分，共15分）1.固定2.染色3.分化4.蓝化5.免疫组化

二、填空题

（每空1分，共15分）1.普通切取的组织块厚约＿＿厘米。2.一般用于固定的甲醛液浓度为＿＿。3.浸蜡的温度应高于蜡熔点＿＿度。4.切片贴附于载玻片左侧＿＿与＿＿交界处。

5.切片前将包埋组织周围过多的石蜡切去的过程为＿＿。6.展片温度一般为＿，烤片温度一般为＿＿。7.我们常用的盐酸乙醇分化液浓度为＿＿。8.显示碱性磷酸酶常用＿＿和＿＿显示法。

9.免疫酶组化技术标记的酶中，最常用的标记抗体的酶为＿＿。10.在免疫组化染色过程中，使用＿＿去除大部分内源性酶。11.在免疫组化染色过程中，常用的抗原修复方法有＿＿、＿＿、＿＿。

三、选择题（每题2分，共20分）1.绝大多数酶组织化学技术属于（）

A.类化学方法

B.物理学方法

C.化学方法 D.显微烧灰法 2.大多数酶在下列（）温度时活性最强。A.35℃ B.8℃ C.27℃ D.48℃

＿ 3.大多数酶反应最适宜的PH值（）A.5.5 B.8.0 C.4.0 D.7.0 4.显示酶组织化学中，金属离子沉淀反应常用的底物有（）A．萘酚 B.甘油磷酸酯 C.吲哚酚酯 D.吲胺

5.显示酶组织化学中，（）酶用偶氮盐偶联反应法显示 A.酸性磷酸酶 B.ATP酶 C.糖苷酶

D.碱性磷酸酶 6.切片时蜡块切成的厚度为（）

A.0.2-0.3厘米

B.3-5厘米

C.3-5微米

D.2-3厘米 7.浸蜡时蜡温温度为（）

A.5-6℃ B.2-4℃ C.56-58℃ D.60-70℃ 8.常用的透明剂是（）

A.甲醛 B.酒精 C.二甲苯 D.汞

9.固定液的量不能少于组织块总体积的（）倍。A.4 B.2 C.6 D.1 10.脱蜡后我们将切片放入乙醇中，此时乙醇浓度由（）A.低到高 B.高到低 C.不变 D.无

四、简答题

（共50分）1.固定的目的（5分）

2.常规染色从切片到封固的过程（8分）3.固定的注意事项（8分）

4.光镜酶组织化学技术的基本步骤（9分）5.离心沉淀法的步骤（10分）6.免疫组化的标准化染色程序（10分）

第三篇：病理检验技术

荧光原位杂交 FISH 用DNA探针与组织切片上互补的DNA杂交，通过观察荧光信号在染色体上的位置和颜色来反映相应基因的情况。

第一章 病理检验技术概述

病理学的作用：

1、研究疾病的病因、发病机制，认识

疾病的发生发展规律

2、为临床诊断疾病、治疗疾病、分析预

后提供依据等。

病理检验的定义：

------在临床医疗实践中，通过对患者病变组织或细胞进行检查，以协助临床诊断疾病的方法称为病理检验。

一、病理检验的主要任务

（一）确定疾病的诊断

（二）为临床选择治疗方案提供依据

（三）提供有关预后因素的信息。（最正确、最可靠、最后的诊断）

（四）了解疾病的发展及分析疗效

（五）为科学研究积累资料

（六）为提高临床诊断水平服务

二、病理检验分类

（一）细胞学检验（脱落细胞、细针穿刺吸取）

（二）组织学检验---最后的诊断

活体组织检验、手术标本检验、手术中病理检验

（三）尸体剖验

病理学技术：

在病理学临床及科学研究工作中使用的各种技术方法统称为病理学技术。病理检验技术的质量和水平是临床病理诊断工作中至关重要的因素。“技术是病理学之母。”

第二节、病理检验技术常规工作 收发工作

协助取材和尸体剖检工作 制作制作切片及细胞学涂片 病理资料管理及检索

药品、物资的管理及仪器维护 大体标本的收集和制作

第六章 组织制片技术 P39 常规石蜡切片制作程序 组织固定→取材→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→染色→封片→观察

第一节 组织块的处理

（一）组织切片制作过程中的各种操作：

1、取材与固定：合理取材、及时固定；

2、洗涤、脱水、透明；

4、浸蜡、包埋；

5、切片、贴片（展片、捞片）和染色：

6、封片：长期保存。

一、取材：

-------按照病理检查的目的和要求，切取适当大小和数量的组织块，用于制作组织切片的过程。

注意事项：

部位、大小、形状、方向

二、固定和固定液

生理盐水或10%甲醛。

固定：将组织浸入某些化学试剂，使

4、蒸汽固定法：为了固定组织中可溶性物组织细胞内的物质尽量保持在生活状态时质、的形态结构和位置过程。

血液、细胞涂片等；

（一）固定目的：

（三）固定液的特性：

（1）防止组织、细胞的自溶与腐败；

1、渗透力强，迅速渗入组织内部

（2）凝固或沉淀细胞内物质；

2、不会使组织过度收缩或膨胀

（3）增加组织硬度，便于制片；

3、能硬化组织，保持细胞形态和位置

（4）产生不同的折光率，有利于染色后观

4、使组织对染料产生亲和力，产生折光率 察辨认。

（四）组织固定注意事项：

（二）固 定 方 法：

1、及时固定

1、浸泡固定法：病理外检一般均用此法；

2、固定容器宜大

2、注射、灌注法：体积过大或整个脏器或

3、固定液应足量：固定组织体积的10-20尸体的固定； 倍

3、微波固定法：应用于临床病理快速诊断，4、防止组织变形 微波固定组织温度至关重要。微波固定介质

5、确定恰当的固定时间 可用

（五）组织固定液 常用固定液： 1、4%甲醛（福尔马林）：配置为市售的40%甲醛1份加水9份混合即成；

2、酒精（乙醇）：高浓度组织硬化显著，先用80%固定数小时，再用95%固定；

3、中性缓冲甲醛液：可提高免疫组化阳性率。

4、酒精-甲醛液（A-F固定液）：

5、Zenker固定液： 1、4%甲醛（福尔马林）：

久置能产生白色沉淀（三聚甲醛），容易氧化变成甲酸，严重影响细胞核着色。固定陈旧多血脏器如肝脾，易产生黑色色素，叫甲醛色素。

2、酒精（乙醇）：

高浓度组织硬化显著，先用80%固定数小时，再用95%固定；

50%以上浓度的乙醇可溶解脂肪和类脂质，也可以溶解血色素和损害其他色素。

中性甲醛液

配置：40%甲醛150-200ml，蒸馏水800-850ml，磷酸二氢钠4g，磷酸氢二钠13g。常用的固定液或标本保存液，是免疫组化最常用的固定液。

选择性固定液：

1、丙酮：广泛用于组织化学中酶的固定；

2、戊二醛固定液：广泛用于电镜标本的固定，应采用缓冲液配制固定液

3、醋酸：不能保存糖，也不能固定脂肪及类脂，5%醋酸pH2～3可抑制细菌和酶的活性；

4、苦味酸：强酸，易燃易爆，酒精溶液可固定糖类；

5、氯化汞：只宜固定薄片组织，2mm～3mm厚的组织需固定6～18小时；

6、重铬酸钾：固定高尔基体、线粒体，对酸性染料着色良好；

7、锇酸：浓度为1%～2%水溶液用于电镜制片；

骨组织脱钙液：

在脱钙前，先将骨或钙化组织锯成4mm～5mm厚的簿片，按常规充分固定，然后进行脱钙。

组织脱钙的方法及应用：

（一）酸性溶液脱钙：

1、脱钙液配制：

（1）5%～10%硝酸水溶液：浓硝酸5ml～10ml，蒸馏水加至100ml；（2）硝酸甲醛液：浓硝酸10ml，10%福尔马林90ml；

（3）Schridde液：浓硝酸20ml，10%福尔马林100ml。对组织无明显损害，迅速、安全；（4）5%～10%甲酸水溶液：甲酸5ml～10ml，蒸馏水加至100ml（5）甲酸酒精液：脱钙速度较硝酸慢，但破坏组织也轻。（6）Plank-Rychlo液：脱钙比5%硝酸液快3倍。

Jenkins混合酸脱钙液、盐酸氯化钠液、枸橼酸钠、甲酸脱钙液等

2、脱钙方法：骨片悬于脱钙液中，敞开瓶口，每日更换一次新液，最好早晚各一次。

（二）螯合剂脱钙：速度很慢，但对组织成分几乎没有损害。用于免疫组化染色较理想。

1、脱钙液配制：取乙二胺四乙酸二钠（EDTA）25g，溶解于200ml蒸馏水中，氢氧化钠（NaOH）调整pH至7.0（大约加2.5g NaOH）。EDTA与钙可形成一种可溶性非离子化的复合物。

2、脱钙法：将骨片浸入脱钙液中，每周更换一次新液。一般致密骨脱钙需要6～8周，含有少量骨渣的组织约需一周。

（三）电解脱钙法： 此法即在脱钙液中通过电流，电解加速脱钙。

1、电解脱钙液配制：

25%盐酸50ml，25%甲酸200ml，蒸馏水750ml；

2、脱钙方法：直径30cm电解槽内盛大量电解液，将骨组织放在一个四周多孔的塑料小容器内放入电解液内，此容器通入白金丝或钨丝作阳极，在电解液内再放一白金丝或钨丝作阴极，通入6V直流电，电流强度1A～2A，调节两电极的距离来控制。电解液温度不超30℃～45℃，一般2～6小时即可脱尽。

脱钙后的处理

1、脱钙后的组织经流水冲洗4～12小时，除去残留的脱钙剂；

2、修去锯面的薄层组织，切成适当大小的组织块，进行常规脱水、透明、浸蜡及包埋；

3、用酸性液脱钙后的组织，苏木素染色时间应适当延长，在伊红中的时间应该缩短；

4、脱钙后组织切片在染色中较易脱落，充分烤片，染色前滴加2%～5%的火棉胶液，以使之粘贴牢固。

三、洗涤、脱水、透明

（一）组织的洗涤

1、洗涤的目的：防止组织中留有较多的固定液而影响脱水剂；

2、洗涤的方法：

（1）固定剂以水配制者：常用的固定剂是甲醛溶液（10%福尔马林溶液），用流水冲洗。大组织冲洗24小时，小组织冲洗2～4小时。

（2）固定剂含酒精者：一般不用冲洗，如需要冲洗必须用与固定剂中的酒精浓度相近或略低的酒精冲洗。

（二）组 织 脱 水

1、脱水的目的及原则：用某些溶剂逐渐将组织内吸收的水分置换出来，以利于透明剂和石蜡或火棉胶的渗入。

2、脱水剂的种类及特征：

特征：能与水在任何比例下混合；能与透明剂在任何比例下混合；

单纯脱水剂：脱水后再经二甲苯透明才浸蜡；

酒精：最常见的脱水剂。脱水能力强，但易使组织收缩、脆。

单纯脱水剂：脱水后再经二甲苯透明才浸蜡； 丙酮：脱水强，组织收缩严重，价格高。异丙醇：可代替无水酒精使用。价格贵。脱水兼透明剂：脱水后即可直接浸蜡。

正丁醇：为脱水剂兼有透明剂作用。用于植物标本的处理效果较好。叔丁醇：脱水兼透明。电镜标本制作时常用作中间脱水剂。

（三）组织透明或媒浸

目的是使石蜡能浸入组织块便于包埋。

1、二甲苯：最常用的透明剂，有毒、易挥发，透明力强，但组织易收缩变脆，小块组织以30分钟。

2、苯和甲苯：组织收缩小、不易变脆。

3、氯仿：即三氯甲烷。易发挥，透明力比二甲苯差，时间长，多用于大块组织的透明。

4、香柏油：为柏树树脂，收缩小，透明时间长，常用于染色后切片的透明。

四、组织浸蜡（透蜡）P48

（一）浸蜡的目的和方法：除去组织中的透明剂而代之以石蜡，以便切片。

（二）浸蜡剂的种类：

1、石蜡：经56℃～58℃石蜡浸蜡的组织包埋，有利于组织切片的连续性，对蜡块资料保存可靠，一般为3-4小时。

2、火棉胶：目前使用火棉胶浸入组织较少，多用于染色前的覆盖液。

3、碳蜡；

4、明胶。

五、组 织 包 埋 P49

（一）石蜡包埋法：为最常用的包埋法。

1、常规石蜡包埋法:包埋过程、包埋面的选择；

2、体液标本一般不做包埋和切片。

（二）快速石蜡包埋法：

1、操作过程：全程均加热，20～30分钟完成。（1）取材、固定：薄片1cmⅹ0.5cmⅹ0.3cm,在快速固定液（95%酒精、40%甲醛、冰醋酸）内加热煮沸1～2分钟。（2）脱水：组织厚度不超1.5mm，加入丙酮5 ～ 8ml，煮沸5～6分钟。（3）透明：加二甲苯加热1～2分钟。（4）包埋：石蜡包埋冰水冷却硬化。

3、碳蜡包埋法：即聚乙烯二醇。包埋熔点为38℃和52℃左右的分子量为1500和4000两种。适用于脂肪及脂类组织的制片。

4、明胶包埋法：

5、石蜡半薄切片包埋法：常根据组织类型进行脱水、透明和浸蜡。

6、树脂包埋法：适用于不脱钙骨髓活检组织、肝、肾穿刺活检和淋巴结组织等。

第二节 切片器具与切片

一、切片机：制作组织切片的主要仪器设备。

（一）切片机的种类及使用：

1、石蜡切片机：能将石蜡包埋的组织切出一定厚薄的切片。分为旋转式、滑动式、摆动式等。最常用的为旋转式。

2、冷冻切片机：多为恒冷箱切片机用于组织化学、免疫组化及病理诊断。

3、火棉胶切片机：多用于眼球、内耳、脊髓和脑的切片，切片厚度可达20µm～50µ。

二、组织切片刀 P58

（一）切片刀的种类： 其长度一般有 4cm、8cm、14cm、18cm、20cm、24cm等。

1、平凹型：一侧为直线，另一侧为凹度，大凹度刀适用于火棉胶切片，小凹度刀适于石蜡切片。

2、双平型：刀身两侧均无凹度，两面是平面。适用于冷冻切片和轮转式切片机的石蜡切片。

3、双凹型：刀身两侧均有凹度，适用于轮转式石蜡切片。

4、一次性刀片：需配置专用刀架。

（二）刀背套与刀柄：刀背套供磨刀时用，刀背套有金属和塑料两种。刀柄有木制及塑料制两种。

（三）磨刀与被刀：

1、手工磨刀法：

①磨刀前用软布试净磨刀石面尘垢；

②装上刀背和刀柄，滴磨刀油于磨刀石上；

③右手紧握刀柄，左手紧按刀背另一端，刀刃向前，逐渐推动刀片至磨刀的一端，从右到左全部磨完。

2、被刀：用被刀皮革被刀，与磨刀的动作相反；

三、石蜡切片制作 P60

（一）切片前的准备：

修整蜡块，然后置于冷水或冰箱中冷却，以增加硬度；

准备毛笔、眼科弯镊子；

载玻片均匀涂上薄层蛋清甘油，占2/3；

接通摊片机电源，调节摊片（42℃～48℃）

烤片（60-70℃左右）的温度；

（二）快速石蜡切片 P63 快速石蜡切片时，组织取材应薄，厚度一般不超过2mm，组织固定后要重新修正至1.5mm左右厚度，以利脱水，将组织块埋入预制的蜡块内，冷却硬化后方可切片（取材、脱水、透明浸蜡、包埋见）。

切片捞至载波片上，用酒精灯略加烘烤，再入二甲苯脱蜡，经95%酒精后即刻入水水化，随后即可进行常规快速苏木素伊红染色。

（三）冷冻切片制作 P64 组织经过冷冻后，其内的水分结冰，使组织变硬，有利于切成薄片。

一、设备要求：

（一）冷冻切片机：一般由转轮式切片机或推拉式切片机加上制冷装置而成：

1、二氧化碳制冷器；

2、半导体制冷器；

（二）恒冷箱冷冻却片机：利用压缩机通过制冷剂循环制冷。

冰冻切片机

二、制作过程

（一）取材、固定：选取有代表性的组织制片，厚度1～2mm。一般病理急诊、组织化学显示酶和免疫病理学进行荧光抗体研究等，多数都用新鲜组织直接冷冻，切片后再进行固定、染色或直接染色或孵化。采用二氧化碳冷冻设备制作须先固定。

（二）冷冻切片方法：

1、恒温箱冷冻切片法

（1）开机预冷：切片前2～3小时，所需温度如下： 各种新鲜组织冷冻切片参考温度（℃）脑、淋巴结、肝、肾、脾、睾丸-12--16 肌肉、肾上腺、甲状腺、子宫、卵巢-18--22 乳腺、皮肤、前列腺-22--28（2）放入、速冻、修整组织，待恒冷箱内温度降至要求温度后，将组织用OT包埋，再速冻1～2分钟，装于机样本夹上，修平；（3）调节抗卷板，以与刀刃平行对齐；

（4）切片：所需厚度为4µm～8µm，用毛笔展平，贴于洁净玻片上，晾干或吹干后染色；（5）切片后处理：清洁保养。

2、半导体冷冻切片法

3、二氧化碳冷冻切片法

（三）冷冻切片粘片法

1、蛋白甘油粘片法：

按石蜡切片的粘片法处理，但温度不宜超过40℃。烤干后即取出，70%酒精和自来水洗后即可染色。

2、Lillie明胶粘片法：切片放入1%明胶水溶液数分钟，捞到载玻片上，5%甲醛水溶液固定5分钟，水洗10分钟，即可染色。

3、酒精明胶粘片法：切片浸入0.1%或0.75%明胶溶液（用40%酒精配制）数分钟，用载玻片捞起后，室温干燥，入氯仿1分钟，经95%和75%酒精洗去氯仿，再经蒸馏水洗后即可染色。

三、注意事项

1、冷冻切片的组织不用固定；

2、组织尽可能新鲜，不能用湿的盐水纱布包裹和放入10℃冰箱内缓慢冷却，否则组织内水分可逐渐析出形成水晶，造成组织结构破坏；

3、冷冻包埋剂应适量；

4、组织太小，不能做冷冻切片；

5、冷冻时间太久的组织不能马上切片，以免损伤切片刀；

6、一般来说骨组织和钙化组织不能做冷冻切片。观察

第七章组织切片染色技术

第一节 病理切片染色概述 P68

一、概念：用染液对组织切片进行处理，使组织中的不同成分被染上相应的颜色，产生不同的折射率，以利于显微镜观察和分析。

三、染色的原理

染色就是染色剂和组织细胞相结合的过程。

（一）染色的化学反应：组织细胞的酸性物质与碱性染料的阳离子相结合，碱性物质与酸性染料的阴离子相结合。具有酸性的细胞核被碱性苏木素液所染色，碱性的胞质与酸性染料伊红所染色。

（二）染色的物理作用：

1、渗透作用：染料进入组织；

2、吸附作用：把另一种物质的分子、原子、离子集中在界面上的过程；

3、吸收作用（溶解作用）。

三、常用染料概述：

（一）染料的性质：有色的无机物或有机化合物

1、发色团：能使染料分子产生颜色的基团，叫发色团；

2、助色团：能使染料分子颜色加深，并与被染物质分子形成亲和力的基团。

（二）染料的分类：

1、据染料来源：天然、合成染料和无机化合物

2、根据染料化学反应：酸性、碱性和中性染料

3、据染色对象：（1）组织染料： 1）结缔组织和肌纤维染料：有胶原纤维、网状纤维、弹力纤维和肌原纤维等染料； 2）神经组织的染料：尼氏体、神经轴突、神经髓鞘、神经胶质细胞等染料；（2）细胞染料：细胞核、细胞质染料等

常用染色剂简介见附录一。

五、常用染色术语的概念

一、普通染色：最常应用的是苏木素-伊红染色法，简称HE染色。

二、特殊染色：特染是为了显示特定的组织结构或其他的特殊成分。

三、单一染色：选用一种染料染色。

四、复染色：用两种不同性质的染料染色方法。

五、多种染色法：用两种以上染料的染色法。

第三节 染色前后的处理 P74

一、染色前的处理：

1、脱蜡至水：必须经过二甲苯脱蜡、各级酒精（100%、95%、85%、75%）至水洗的过程。

2、脱汞盐结晶：切片在脱蜡后用0.2%～0.5%碘酒精处理5～15分钟，使汞盐沉淀物溶解。

3、脱甲醛色素：在切片脱蜡至水后，用Verocay液（1%氢氧化钾水溶液1ml，80%酒精100ml）处理10分钟，然后流水冲洗5分钟再常规染色。

（二）染色后的处理：

1、分化作用：必须用1%盐酸酒精脱去所吸附的染料。

2、蓝化作用：分化后，用碱性水使细胞核变成蓝色。

3、染色后的脱水：低度到高度酒精逐步脱水。

4、染色后的透明：透明剂用二甲苯。

三、封固：

1、封固剂：

（1）甘油明胶封固剂

配制方法：明胶10g，蒸馏水60ml，甘油70ml，石炭酸0.25g。（用前将甘油明胶置于温箱内融化后即可封片）。（2）中性树胶（二甲苯树胶液）：属油性封固剂，组织切片需彻底脱水、透明。优良封固剂，可直接封片。

七、染色的注意事项

（1）具备实验室基本设备和染色准备工作（2）正确完成固定、脱水、透明、脱蜡步骤；

（3）染色过程中，既要按书本的方法进行操作，又要根据实际情况进行灵活运用。

第八章 组织切片常规染色技术 第一节 常规染色的概念

一、染色原理

（一）苏木素染色原理：苏木红和铝结合形成带正电的 蓝色色精，带负电的细胞核与带正电的蓝色色精以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

（二）伊红染色原理：伊红Y是一种化学合成的酸性染料。在伊红Y染料液中加入醋酸，使胞质中蛋白质带正电荷，可被带负电的伊红染料染色，从而使细胞质及红细胞等染成红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。

二、染液的配制 P80

（一）苏木素液：从苏木素的树中提炼的天然染料。

1、Harris苏木素液：最常用。

苏木素 1g 蒸馏水 200ml 无水酒精 10ml 氧化汞 0.5g 硫酸铝钾 20g 配置方法见书81页。染色3～4分钟。保存时间为一年。

（二）伊红染液：

0.5%伊红酒精染液:醇溶伊红Y0.5g，95%酒精100ml。染色时间1～3分钟。水溶性伊红酒精液： 沉淀酸化伊红Y酒精液：

2、Mayer苏木素改良配法：

（1）A液：苏木素2g，无水酒精40ml加热溶解；

（2）B液：硫酸铝钾100g，蒸馏水600ml，稍加热使硫酸铝钾在水中溶解，再将A与B液混合2分钟。用蒸馏水补足600ml，加入400mg碘酸钠充分混匀，苏木素染液呈紫红色即可。染色时间为10～20分钟。

3、Ehrlich苏木素液：苏木素2g，无水酒精100ml，甘油100ml，硫酸铝钾15g，蒸馏水100ml，冰醋酸10ml。（染色时间为10～20分钟）。

4、Gill改良苏木素液：苏木素2g，无水酒精250ml，硫酸铝钾17.6g，蒸馏水750ml，碘酸钠0.2g,冰醋酸20ml。染色时间为5分钟。

（三）0.5%～1%盐酸酒精分化液：

盐酸 0.5ml～1ml, 75%酒精99ml。此液用一段时间后需要延长时间或更换液体，新液体分化时间要短。

（四）蓝化液：“蓝化”是指苏木素液染细胞核后，通过盐酸酒精分化，切片由酸性转入弱碱性液体，使之变蓝的过程。1、50℃温水

2、稀氨水（1%氢氧化铵液）3 蒸馏水 100ml，氨水1ml。

三、染色方法 P83

（一）人工操作苏木素-伊红染色方法：

1、脱蜡至水：

（1）二甲苯Ⅰ脱蜡（脱蜡2-5分钟）；（2）二甲苯Ⅱ（2-5分钟）；（3）无水酒精Ⅰ（1-2分钟）；（4）95%酒精1分钟；（5）85%酒精1分钟；（6）75%酒精1分钟；（7）自来水洗2分钟；

2、苏木素染色：苏木素液染色5-10分钟；自来水洗1分钟；

3、分化返蓝：0.5%～1%盐酸酒精分化数秒至30分钟呈紫红色；自来水1分钟；用温水(50℃)蓝化5～15分钟(或稀氨水蓝化30秒，自来水洗5～10分钟)；

4、伊红染色：水溶性伊红可直接入伊红液，1分钟；自来水洗1分钟；

5、脱水、透明：

（1）85%酒精（20秒）；（2）95%酒精Ⅰ（1分钟）；（3）无水酒精Ⅰ（1分钟）；（4）二甲苯Ⅰ（1～2分钟）；（5）二甲苯Ⅱ（1～2分钟）。

6、封固：

（1）用中性树胶封片；

（2）附贴标签可书写病理编号。

（二）冷冻切片HE染色：

冷冻切片贴片后，用95%酒精和冰醋酸5ml的混合液固定1分钟，自来水洗30秒～1分钟，HE染色。

（三）快速石蜡切片染色：脱蜡至水、HE染色

第三节 染色中常见问题及注意事项 P85 HE染色结果：

细胞核被苏木素染成明显的蓝色；

细胞质被伊红染成红色。

第九章 组织切片特殊染色 P87 为了显示特定的组织结构或组织细胞特殊成分，采用特定的染料和方法对组织切片进行染色。第一节 结缔组织染色 P88

一、胶原纤维染色

Van Gieson染色法（简称VG染色）（书上无）

1、染料配制：

（1）铁苏木素液：见Masson三色染色（2）Van Gieson苦味酸酸性品液：

甲液：1.22%苦味酸饱和水溶液90ml，乙液 ： 1%酸性品红水溶液10ml。

两液提前配制，临用前混合使用。

2、染色步骤：

（1）切片脱蜡至水（2）蒸馏水洗（3）Weigert铁苏木素液染5～10分钟（4）自来水洗2分钟

（5）据情况可用0.5%盐酸酒精分化（6）自来水洗至变蓝再用蒸馏水洗（7）Van Gieson液染色3～5分钟（8）去染液，用95%酒精分化脱水

（9）无水酒精脱水（10）二甲苯透明（11）中性树胶封固。

3、染色结果：胶原纤维红色,肌纤维黄色, 细胞核黑色.4、胶原纤维染色的应用 P88（1）对梭形细胞肿瘤来源、性质提供诊断和鉴别诊断的依据；

（2）显示各种组织、器官病变时的修复情况与纤维化程度，如肝穿组织中纤维组织的含量与分布的观察；

（3）鉴定心肌坏死后疤痕的形成；

（4）鉴别心内膜弹力纤维增生症与心内膜心肌纤维化。

三、网状纤维染色 Gomori银染法: P92

1、染液配制：银氨溶液：甲液：硝酸银10.2g,蒸馏水100ml；乙液:氢氧化纳3.1g,蒸馏水100ml

2、染色步骤：（1）切片脱蜡至水（2）高锰酸钾氧化液（高锰酸钾0.5g,蒸馏水95ml,再加3%硫酸5ml)5分钟(3)水洗1分钟(4)2%草酸漂白2分钟,水洗2分钟(5)2%硫酸铁铵媒染2分钟(6)蒸馏水充分洗(7)氨银溶液染色1分钟(8)蒸馏水洗3次(9)20%福尔马林液还原5分钟(10)蒸馏水洗2次(11)入0.2%氯化金液中调色2分钟,蒸馏水洗2次(12)2%硫代硫酸钠固定2分钟,自来水、蒸馏水洗（13）必要时用VG或伊红复染（14）无水酒精脱水（15）二甲苯透明（16）中性树脂封固。

3、染色结果：网状纤维呈黑色，胶原纤维呈红色。

4、网状纤维染色的应用

（1）区分上皮性与非上皮性肿瘤；（2）区分血管内皮瘤与血管外皮瘤；（3）判断原位癌与早期浸润癌；

（4）观察肝脏病变处的网状支架塌陷或增生的情况，判断病变性质、程度及发展与转归。

四、多色染色： P93

（一）Masson三色染色法： P93

1、染液配制：

（1）丽春红酸性品红液：丽春红0.7g，酸性品红0.3g，冰醋酸1ml，蒸馏水99ml（先配好醋酸溶液后，分别溶解丽春红或酸性品红）；亮绿液：亮绿1.0g，冰醋酸1ml，蒸馏水99ml。（2）苯胺蓝液：苯胺蓝2g，冰醋酸2ml，蒸馏水加至100ml。

（3）Weigert铁苏木素液：甲液：苏木素1g，95%酒精或无水酒精100ml；乙液：29%三氯化铁水溶液4ml，纯盐酸1ml，蒸馏水95ml（临用前取甲、乙两液混合即可，24小时内使用有效。）

2、Masson三色的染色步骤：（1）切片脱蜡至蒸馏水；

（2）Weigert铁苏木素染色5～10分钟；（3）流水稍洗；（4）盐酸酒精分化；（5）流水冲洗数分钟；

（6）丽春红酸性品红液染色5分钟；（7）蒸馏水稍冲洗；

（8）1%磷钼酸水溶液处理5分钟，镜下见肌肉纤维呈红色，胶原纤维呈淡红色即可；（9）不经水而直接用苯胺蓝液或亮绿液染5分钟；（10）1%冰醋酸处理1分钟；（11）95%酒精、无水酒精脱水；（12）二甲苯透明；（13）中性树胶封固。

3、染色结果：胶原纤维呈蓝色（用苯胺蓝染）或绿色（用亮绿染），肌纤维、细胞质呈红色，细胞核呈蓝褐色。

（二）Mallory三色染色法 P94

1、染液配制：

（1）0.5%酸性品红水溶液；

（2）苯胺蓝橙黄G液：苯胺蓝0.5g，橙黄G 2g，磷钨酸1g，蒸馏水100ml。（先将1%的磷钨酸溶液配好，一半用于溶解苯胺蓝，另一半用于溶解橙黄G，加热溶解，冷却后分别过滤，可长期保存。临用前将两液混合）。（3）重铬酸钾液；

2、染色步骤：

（1）切片脱蜡至水；（2）Zenker固定液固定1小时；（3）充分水洗；（4）0.5%碘酒精处理5～10分钟；（5）0.5%硫代硫酸纳处理2～5分钟；（6）充分水洗，再用蒸馏水浸洗；（7）酸性品红液染5分钟；（8）水洗、蒸馏水洗；（9）苯胺蓝橙黄-G液染20～30分钟；（10）直接95%酒精快速分化；（11）无水酒精脱水；（12）二甲苯透明；（13）中性树胶封固。

3、染色结果：胶原纤维、网状纤维呈蓝色，心机纤 维橘红色，红细胞呈浅黄色，细胞核呈黑色。

结缔组织复合染色的应用（1）区分各种纤维成分；

（2）判定各种组织、器官的病变程度和修复情况；（3）鉴别某些梭形细胞软组织肿瘤的来源的判断（4）用于肾小球肾炎的诊断。

第二节 肌肉组织染色 P95

（一）Mallory磷钨酸苏木素染色法（简称PTAH）：

1、染液配制

（1）磷钨酸苏木素：苏木素0.1g, 磷钨酸2g, 蒸馏水100ml。

将苏木素加入20ml蒸馏水中,加热溶解，再将磷钨酸溶于80ml蒸馏水中。苏木素冷却后将两液混合放置3～3月后使用。此液可保存数年。急用时可加高锰酸钾0.15g促成熟,12～24小时即可用。

（2）酸性高锰酸钾液：5%高锰酸钾水溶液50ml；

0.5 硫酸水溶液50ml。

2、染色步骤：

（1）组织以Zenker液固定最佳；如用甲醛固定则先要用Zenker液处理（37℃温箱内）3小时；

（2）切片脱蜡至水，用碘液除汞，用95%酒精脱碘；（3）充分水洗；（4）酸性高锰酸钾液处理5～10分钟（5）自来水洗2分钟；（6）1%草酸漂白1分钟；（7）自来水洗，蒸馏水洗2次；

（8）磷钨酸苏木素液浸染24～48小时；（9）直接用95%酒精分化；（10）无水酒精脱水；（11）二甲苯透明；（12）中性树胶封固。

3、染色结果：横纹肌纤维、细胞核呈紫蓝色，胶原纤维、网状纤维呈玫瑰红色。

4、肌肉组织染色

常用于Mallory磷钨酸-苏木素染色法能显示与区分：(1)横纹肌纤维的正常与异常形态；

(2)诊断心肌损伤早期病变及全身弥漫性血管内凝血有一定参考价值；(3)用于横纹肌肉瘤时显示横纹，(4)用于显示神经胶质。

第三节 脂肪染色 P96 苏丹Ⅲ染色法：(书上无)

1、染料配制：

（1）苏丹Ⅲ染液：苏丹Ⅲ 0.15g,60%～70%酒精100ml。（将苏丹Ⅲ染料溶于60%～70%酒精形成饱和液，作长期备用液。临时配制时需要过滤才可使用。备用液仅用上清液。密封容器存放备用液）。

（2）甘油明胶液：明胶 5g，甘油35ml，蒸馏水 35ml。（先将明胶溶于蒸馏水中加热溶解，再加甘油充分混合，加1～2粒石炭酸。冷却后4℃保存，用时水浴加热）。

2、苏丹Ⅲ染色步骤：

（1）冷冻切片厚8µm～10µm；（2）蒸馏水稍洗；（3）Harris苏木素1～2分钟；（4）自来水洗，盐酸酒精分化、反蓝；（5）水洗、蒸馏水洗；（6）70%酒精浸洗；

（7）苏丹Ⅲ染液30～60分钟（如置于56℃温箱中可缩短时间）；（8）70%酒精分化数秒；（9）蒸馏水洗；（10）在空气中稍晾干；（11）甘油明胶液封固。

3、注意事项：采用冰冻切片染色。苏丹Ⅲ染液温浸时应加盖，防止染液中的酒精或丙酮挥发。在封固前，甘油明胶液应放置56℃温箱中加温，避免摇荡，防止封固时出现气泡。切片染色后不能长期保存，应尽快观察或照相。

4、染色结果：脂肪呈橘红色，脂肪酸不作色，细胞核呈淡蓝色。

5、脂肪染色的应用（1）鉴别细胞内空泡的性质（水样变性、脂肪变性或糖原）；

（2）显示动脉粥样斑块病灶内的脂质沉积、脂肪栓塞。

（3）神经系统一些变性、脱髓鞘疾病的诊断有极为重要的作用。

（4）脂肪染色主要用于卵巢纤维瘤与卵泡膜细胞瘤、肾母细胞瘤、皮脂腺癌的诊断和鉴别诊断。

第四节 糖原染色与粘液染色

一、过碘酸雪夫染色法（PAS法）：P98

1、染色配制：

（1）过碘酸氧化液：过碘酸0.5g，蒸馏水100g。（此溶液应放4℃冰箱保存）。（2）Schiff液：碱性品红 1g，1mol/L盐酸 20ml，偏重亚硫酸钠（钾）1g，双蒸馏水200ml。（先将双蒸馏水200ml煮沸，加入1g碱性品红，再煮沸2分钟。冷却至50℃加1mol/L的盐酸20ml，待温度降低至25℃时，加入偏重亚硫酸钠（钾）1g～1.5g,温室2小时后碱稍带红色，5小时后为无色液体，如有颜色应加入活性炭1g～1.5g,用双层滤纸过滤,盛于棕色磨口瓶内,放入4℃冰箱保存。

2、染色步骤：

（1）切片脱蜡至水；（2）蒸馏水洗；（3）0.5%过碘酸氧化液10～20分钟；(4)充分蒸馏水洗；（5）进入Schiff液染色10分钟（如室温低于15℃可稍加温）；（6）自来水洗10分钟；（7）用Mayer或 Harris明矾苏木素染细胞核3～5分钟；（8）盐酸酒精分化；（9）水洗；（10）无水酒精脱水；（11）二甲苯透明；（12）中性树胶封固。

3、染色结果：糖原及其它PAS反应阳性物质 染成红色，细胞核染成蓝色。

4、糖原染色的应用

（1）用于显示糖原，对明确细胞空泡的性质、糖原贮积病和糖尿病的诊断及某些透明细胞肿瘤的鉴别诊断方面具有重要作用。

（2）用于中性黏液物质，对低分化腺癌的诊断也有一定价值。

（3）清楚地显示基底膜（肾炎的诊断）、网状纤维、真菌菌丝、寄生虫及腺泡状软组织肉瘤中胞质内结晶体。

（4）观察缺血缺氧早期心肌坏死或梗死区的糖原减少情况。

粘液染色

二、奥辛蓝染色法（简称AB染色）：P99

1、染液配制：（1）AB液：（pH 2.5)奥辛蓝8GS 1g，蒸馏水97ml，冰醋酸3ml，麝香草酚2粒（防腐）。（先配好3%冰醋酸，然后溶解奥辛蓝。过滤后使用。pH值2.5～3.0之间.(2)0.5%中性红水溶液: 中性红 0.5g,蒸馏水加至 100ml。

2、奥辛蓝染色步骤：

(1）石蜡切片脱蜡至水；(2)AB液染色20～30分钟；（3）快速蒸馏水洗；（4）0.5%中性红染1～2分钟；（5）快速只能流水洗；

（6）95%酒精、无水酒精脱水；（7）二甲苯透明；（8）中性树胶封固。

3、染色结果：酸性粘液物质（及真菌菌丝、隐 球菌的夹膜）呈蓝色，中性粘液呈红色，混合 粘液呈紫红色，细胞核呈红色。

4、粘液染色的应用

（1）黏液性肿瘤的诊断和鉴别诊断，如黏液瘤、黏液肉瘤、脂肪瘤、胃肠道低分化腺癌、软骨黏液样纤维瘤；

（2）用于结缔组织疾病及慢性胃炎肠上皮化生等的诊断。

第五节 病原微生物染色 P100 石炭酸品红抗酸杆菌染色法：P101

1、染色配制：

石炭酸品红液：碱性品红 1g，无水酒精 10ml，石炭酸（5%）水溶液100ml。

（首先将碱性品红溶于无水酒精，然后与石炭酸水溶液混合，临使用前过滤）。

2、抗酸杆菌染色步骤：（1）石蜡切片脱蜡至水；

（2）将石炭酸品红液滴切片上，文火热至蒸气出现，离火染15～20分钟；（3）蒸馏水洗；

（4）1%盐酸酒精液分化，至无红色染料流下止；（5）蒸馏水洗；（6）1%美蓝液复染2分钟；（7）95%酒精分化，美蓝脱色，以示清楚；（8）无水酒精脱水；（9）二甲苯透明；（10）中性树胶封固。

3、染色结果：抗酸杆菌(如结核杆菌、麻风杆菌 等）呈红色，细胞核呈淡蓝色。

4、病原微生物染色的应用

用于结核病的干酪样坏死灶及麻风病中泡沫状细胞（瘤型麻风）内的抗酸杆菌，其形态特点是：结核分支杆菌弯曲细长，长短粗细不一；而麻风杆菌短粗成堆，数量较多（称为麻风团）。

淀粉样物质的染色（书上无）Bennhola刚果红染色法：

1、染色配制：

（1）1%刚果红水溶液： 刚果红 1g，蒸馏水100ml。（2）碳酸锂饱和水溶液：碳酸锂 1.25g，蒸馏水100ml。

2、染色结果：

淀粉样物质呈红色，其它组织呈浅红色，细胞核呈蓝色。

3、Bennhola刚果红染色步骤：（1）石蜡切片脱蜡至水；（2）明矾苏木素染液淡染细胞核3～5分钟；（3）1%盐酸酒精液稍分化。水洗1～2分钟；（4）充分水洗返蓝；（5）蒸馏水稍洗；

（6）1%刚果红溶液染色10～30分钟或更长；（7）经碳酸锂饱和溶液处理1～2分钟；

（8）80%酒精液急速分化至无红色染液流下为止；（9）水洗1～2分钟；

（10）95%酒精脱水及无水酒精脱水；（11）二甲苯透明；（12）中性树胶封固。

4、淀粉样物质的染色的应用

（1）淀粉样物质染色能显示变性程度:如全身淀粉样变性；（2）用于全身消耗性疾病的观察:如结核病、甲状腺髓样癌等；（3）用于肿瘤的诊断和鉴别诊断:如内分泌肿瘤的间质常出现淀粉样物质沉着，又如甲状腺髓样癌、胰岛细胞瘤、肺小细胞癌等，淀粉样物质染色阳性可作为诊断重要依据；

（4）为某些疾病的诊断与鉴别诊断提供依据:钙化上皮瘤、声带息肉等常出现淀粉样变性，可为诊断依据。

黑色素染色

Masson-Fontana染色法：

1、染液配制：

（1）Masson-Fontana染：10%硝酸银 15ml，蒸馏水 15ml。（将浓氨水逐滴加入10%硝酸银液中直至微乳白色，并加入蒸馏水15ml，过滤后静置1～2小时后使用。4℃冰箱保存，恢复室温后使用，每次使用前应重新过滤）。（2）5%硫代硫酸钠水溶液。

2、染色结果：黑色素、嗜银细胞颗粒呈黑色，细胞核、胶原纤维呈红色。

3、黑色素（Masson-Fontana）染色步骤：（1）10%福尔马林固定组织，石蜡包埋；（2）切片脱蜡至水；（3）蒸馏水充分洗；

（4）用Masson-Fontana液室温染18～48小时；（5）蒸馏水细数次；

（6）用5%硫代硫酸钠水溶液固定5～10分钟；（7）蒸馏水洗数次；

（8）用0.5%中性红对比染色1～2分钟；（9）蒸馏水洗5～10分钟；（10）无水酒精脱水；（11）二甲苯透明；（12）中性树胶封固。

4、黑色素染色的应用 主要用于黑色素瘤的诊断，尤其是无色素性的分化差的黑色素瘤的诊断极为重要；对淋巴结内转移的肿瘤细胞，证实有无黑色素的存在对肿瘤的诊断可提供有利的证据；还有一些肿瘤及疾病中也存在色素，如色素性神经瘤、透明细胞肉瘤、黑色棘皮病、老年疣等等均可提供诊断依据。

第十五章 病理检验技术进展 P177

一、计算机图像分析技术

二、流式细胞仪技术

三、分子病理学技术

第十六章 病理档案管理 P190

二、组织制片常用玻璃器具：（1）染色缸：

（2）标本瓶：用于脱水、透明及染色；（3）培养皿：盛装蛋清甘油；

（4）配制试剂用具：量筒、量杯、烧杯、三角烧瓶、漏斗、吸管、滴管、滴瓶、试剂瓶、蒸馏水瓶、玻璃棒及研钵等；（5）酒精灯：用于染液配制等；（6）载玻片：（7）盖玻片：

3、免疫组化常用设备：（1）微波炉或高压锅；（2）微量加样器；（3）微波震荡器；

（4）恒温水浴箱或湿盒；

4、常用器械盒工具：

（1）标本巨检器械：解剖刀、手术刀、手术剪、镊子、血管钳、不绣钢尺、搪瓷盘等；（2）尸体剖验器械；

三、常用玻璃器材的清洗方法

（一）新购玻璃器皿的处理: 先用洗衣粉浸泡洗刷,自来水洗后再用1%～2%盐酸水溶液浸泡数小时后，用自来水冲洗干净，再用蒸馏水洗2次。

（二）使用后玻璃器皿的清洗方法：

（1）自来水冲洗；

（2）毛刷蘸洗衣粉洗擦干净；

（3）自来水冲洗；

（4）凉干后放入清洁液内浸泡24小时；

（5）自来水冲洗干净，最后用蒸馏水洗2次；

（6）把器皿置于有孔架上凉干或温箱中烤干，备用。

清洁液的配制：重铬酸钾+浓硫酸+蒸馏水

（三）新购载玻片的处理：

高质量的已经处理，可直接使用。对不净的可放入清洁液浸泡5～12小时以上，流水冲洗，蒸馏水清洗，95%酒精浸泡，擦干备用

（四）新购盖玻片的清洗：

投入清洁液中浸泡1～2小时左右，经流水反复冲洗，蒸馏水洗，后投入95%酒精浸泡数分钟，再转入纯酒精中浸泡，使用前用洁净绸布擦干或在温箱中烤干备用。

（五）旧载玻片的清洗：

用洗衣粉液煮沸30分钟。

（六）旧盖玻片的清洗：

先置入1%洗衣粉液中煮沸1分钟，离火，待沸腾水泡平下后，再行煮沸，反复2～3次即可。基层医院病理科（室）应完成：

1、常规石蜡切片：按常规，在3~5天发出报告；

2、冷冻切片或快速石蜡切片：术中快速病理诊断。

3、常用特殊染色和免疫组织化学检查：据临床病理诊断的需要。

4、诊断细胞学检查：完成临床脱落细胞学及穿刺组织涂片检查。

5、尸体剖验检查：与临床医师密切结合，开展新生儿及成人尸检，提高诊断治疗水平。

第四篇：病理技术年终总结

病理技术年终总结

病理技术年终总结1

本人95年7月毕业于XXXXX，所学专业为电力系统及自动化。后分配至文秘部，8月取得助理工程师资格。几年来在身边师傅同事及领导的帮助下做了一些专业技术工作，现做如下介绍：

一、继电保护定值整定工作

96年9月至担负分公司10kV配电线路、10kV用户站继电保护定值整定工作，由于分公司原来没有整定人员，但自从开展工作以来建立了继电保护整定档案资料，如系统阻抗表、分线路阻抗图、系统站定值单汇总用户站定值单汇总，并将定值单用微机打印以规范管理，还包括各重新整定定值的计算依据和计算过程，形成较为完善的定值整定计算的管理资料。

近两年时间内完成新建贯庄35kV变电站出线定值整定工作和审核工作。未出现误整定现象，且通过对系统短路容量的计算为配电线路开关等设备的选择提供了依据。97年底由于机构设置变化，指导初级技术人员开展定值整定工作并顺利完成工作交接。

二、线损专业管理工作

96年至9月，作为分公司线损专责人主要开展了以下工作：完成了线损统计计算的微机化工作，应用线损计算统计程序输入表码，自动生成线损报表，并对母线平衡加以分析，主持完成理论线损计算工作，利用理论线损计算程序，准备线损参数图，编制线损拓补网络节点，输入微机，完成35kV、10 kV线路理论线损计算工作，为线损分析、降损技术措施的采用提供了理论依据。

编制“九五”降损规划，96—98各降损实施计划，月度、季度、的线损分析，积极采取技术措施降低线损，完成贯庄、大毕庄等35kV站10kV电容器投入工作，完成迂回线路、过负荷、供电半径大、小导线等线路的切改、改造工作，98年关于无功降损节电的论文获市电力企协论文三等奖，荣获市电力公司线损管理工作第二名。参与华北电力集团在天津市电力公司试点，733#线路降损示范工程的改造工作并撰写论文。

三、电网规划的编制工作

98年3月至98年11月，作为专业负责人，参与编制《东丽区—20xx年电网发展规划及20xx年远景设想》工作，该规划涉及如下内容：电网规划编制原则、东丽区概况、东丽区经济发展论述、电网现状、电网存在问题、依据经济发展状况负荷预测、35kV及以上电网发展规划、10kV配网规划、投资估算、预期社会经济效益、20××年远景设想等几大部分。为电网的建设与改造提供了依据，较好地指导了电网的`建设与改造工作，并将规划利用微机制成演示片加以演示，获得了市电力公司专业部室的好评。

四、电网建设与改造工作

96年3月至现在参加了军粮城、驯海路35kV变电站主变增容工作，军粮城、驯海路、小马场更换10kV真空开关工作，参加了贯庄35kV变电站、东丽湖35kV变电站、小马场35kV变电站，易地新建工作，新建大毕庄35kV变电站、先锋路35kV变电站。

目前作为专业负责开展么六桥110kV变电站全过程建设工作，参加了厂化线等5条35kV线路大修改造工作，主持了农网10kV线路改造工程，在工作中逐步熟悉设备和工作程序，完成工程项目的立项、编制变电站建设及输电线路改造的可行性报告，参与变电站委托设计，参加设计审核工作，参加工程质量验收及资料整理工作，制定工程网络计划图，工程流程图，所有建设改造工程均质量合格，提高了供电能力，满足经济运行的需要，降低线损，提高供电可靠性和电能质量，满足了经济发展对电力的要求，取得了较好的经济和社会效益。

五、专业运行管理

参加制定专业管理制度，包括内容是：供电设备检修管理制度；技改、大修工程管理办法；固定资产管理办法实施细则；供电设备缺陷管理制度；运行分析制度；外委工程管理规定；生产例会制度；线路和变电站检修检查制度；技术进步管理及奖励办法；科技进步及合理化建议管理制度；计算机管理办法、计算机系统操作规程。技术监督管理与考核实施细则；主持制定供电营业所配电管理基本制度汇编。

参加制定生产管理标准，内容是：电压和无功管理标准；线损管理标准；经济活动分析管理标准；设备全过程管理标准；主持制定专业管理责任制：线路运行专业工作管理网及各级人员责任制；变压器专业工作管理网及各级人员责任制；防污闪工作管理责任制；防雷工作管理责任制；电缆运行专业工作管理网及各级人员责任制；变压器反措实施细则。

主持制定工程建设项目法人负责制实施细则及管理办法；城乡电网改造工程招投标管理办法；城乡电网改造工程质量管理暂行办法等。积极开展季节性工作，安排布置的重要节日保电工作、重大政治活动保电安排、防汛渡夏工作，各季节反污工作安排。这些工作的开展，有力地促进了电网安全稳定运行。

六、科技管理工作

96年至今，在工作中尽可能采用计算机应用于管理工作之中，提高工作效率和管理水平。一是应用固定资产统计应用程序，完成全局固定资产输机工作，完成固定资产的新增、变更、报废、计提折旧等项工作。二是应用天津市技改统计程序完成技术改造的统计分析工作。

三是作为专业负责完成分公司地理信息系统的开发应用工作，组织完成配电线路参数、运行数据的录入工作，形成线路数据库，并用AUTOCAD绘制分公司地理图，在地理图上标注线路的实际走向，所有线路参数信息都能够在地理图上的线路上查询的出，该项成果获天津市电力公司科技进步三等奖。五是完成配电线路加装自动重合器试点工作，形成故障的自动判断障离，提高了供电可靠性，为配电线路自动化进行了有益尝试。

四是20××年9月主持完成分公司WEB网页浏览工作，制定分公司“十五”科技规划及科技计划，制定科技管理办法，发挥了青年科技人员应发挥的作用。另外，在96年7月至98年3月间利用定额进行分公司业扩工程、城网改造工程的电气施工预算的编制审核工作。总之，在这几年来的专业技术工作中，自己利用所学的专业技术知识在生产实践中做了一些实际工作，具备了一定的技术工作能力，但是仍存在着一些不足，在今后的工作中，自己要加强学习、克服缺点，力争自己专业技术水平能够不断提高。

病理技术年终总结2

20xx年即将过去，回顾这一年，病理科在院领导的关心照顾下，在以妇科门诊为代表的兄弟科室的大力支持下，病理科的工作迈上了一个更高的台阶，开创出了一个全新的局面，取得了开科以来最好的历史成绩。具体如下：

一、经济效益实现历史最好水平

20xx年里完成液基细胞学检测（TCT）3510人次，组织病理检测850人次，宫颈抹片850人次，白带多项检测15000人次，实现经济总收入87万多，与20xx年相比增长率为45%。（20xx年病理科的收入是60万），大幅度超额完成年初制定的经济目标。更值得一说是，所有成果的取得，靠的是我一个人努力工作和辛勤劳动。我也可以厚着脸皮说按个人来算，我绝对是第一。

二、社会效益稳步提升，社会影响逐步扩大

我多次在关键时刻给病人和临床作出科学、合理、及时的病理诊断并提出合理有建设性的意见和建议，得到病人和上级医院病理专家教授的一致认可和好评，为医院和科室树立了良好的对外形象。

三、加强业务学习，狠抓内部质量，提高诊断水平，保证医疗质量和医疗安全

我来妇幼有xx年了，到病理科工作已经7年，在这7年里，病理科是唯一一个没有因业务和技术上的问题被病人投诉被要求赔偿的科室。20xx年切片外借省级医院会诊37例，最终检测结果与我们一致的有37例，准确符合率100%。最值得高兴的是有一次对同一病例我们和湘东医院作出了不同的诊断，我们认为没有到癌，而湘东医院认为到癌了，最后湘雅同意我们的`诊断，认为我们在这一病例上拿捏的比较准，得到了当事病人家属高度赞扬。

四、积极参与医院和科室的管理，为医院和科室的持续发展出谋划策

20xx年年初的时候，我对怎样做好服务、怎样做大做强医院，以书面的形式提出了自己的一些想法，得到了院里的认可并加以实施执行，自从加入作风建设小组以后，在贺书记的直接领导下，我实事求是的做好了手术室、妇科、产科等8个部门的考评和满意度问卷调查，为医院和科室的科学管理与不断完善提供了最真实的资料，为妇幼品牌的建设尽了最大的努力。

五、对照二甲复审的要求，加班加点做好了二甲复审的准备工作，加强了科室的质量体系建设和内部管理，保证了科室的健康发展。

成绩的取得固然可喜可贺，但透过这成绩的背后，我觉得病理科还是有许多不足之处：

一、支撑病理科的或者能与病理科对接的科室单一，目前来说只有一个妇科门诊，那么对病理科来说，业务的增长点几乎没有，不利于业务的持续增长。

二、人员的配备不合理。

按我们业务收入，病理科配备4个人都不为过，湘东医院8个人，他们的业务收入是150万左右，中医院3个人，他们的业务收入大概是50万，而病理科今年只有我一个人，业务收入已达87万，还不包括免费和打折的。另外，虽然我自认为业务素质和业务水平比较高，但按现在的要求，我还不具备直接从事病理诊断的条件，而刚刚进修回来的宋芹还需要一个成长学习的过程。

三、人员紧缺，再加上场地狭小，新的项目，新的技术无法开展和推广。虽然面临的问题还很多，甚至有的问题短时间内还不能解决，但是作为妇幼人的我在20xx年里一定会竭尽所能，始终坚持以病人为中心，以质量为核心，以感恩、利他、成长为理念，在邹院长，贺书记的带领下秉承踏石留印，抓铁留痕的工作作风，脚踏实地的做好每一件事，实现妇幼从一个辉煌走向另一个辉煌的崛起。

病理技术年终总结3

20xx年来，在院党委、行政班子领导关心、支持下，切实转变服务理念，加强科学管理，紧扣开展“医疗质量服务年”活动的主题，全面落实了《医疗质量全面管理目标责任制》的各项工作指标任务，全科上下心往一处使，使科室管理医疗质量、教学科研等各项工作有了新的突破，成为区内病理学科专业的龙头科室。

一、加强管理，细化职责，确实开创医疗质量新局面

病理科重视思想政治学习，严格遵守医院各项规章制度，积极参与并完成

医院开展各项工作及活动，进一步建立健全医疗工作全面质量管理工作计划及病理工作规章制度，针对不同环节重新强化科主任、医师、技术员岗位职责，做到了制度健全、管理有章可循、职责落实到位，取得了可喜的成绩。在20xx市卫生局组织的《医疗质量全面管理目标责任书》检查评比中排名第一，20xx年本人被银川市政府授予“十佳医生”，病理科在20xx、20xx被医院评为“先进科室”，本人也被评为“优秀科主任”。

二、拓新工作，健全制度，努力发掘病理诊断新亮点

病理科能较好地完成所签定的“五大责任书”规定的各项内容，认真完成

半年及年终“五大责任书”的自查工作，始终把医院开展的“医疗质量服务年”等活动，真正落实到实处，不摆花架子，转变服务观念，一切工作围绕临床转，临床的需要就是我们的工作，积极创造人力、物力条件，大力引进、应用和开展新技术、新业务，先后有5人外派到长春、内蒙、北京、上海等地学习，特别实学习了国外疑难切片病理诊断的思路及方法、免疫组化质控标准、分子生物学、原位杂交技术操作、细胞病理学诊断，两年多来我科先后开展了四项新技术：

1、持笔式针吸细胞学穿刺；

2、多药耐药基因检测；

3、原位杂交检测hpv感染；

4、液基细胞检查应用于宫颈病变筛查。解决了临床工作中的实际问题，受到临床医生的好评和认可，并大大提高了科室的整体业务技术水平，增强了医院综合竞争实力。

积极开展科研立项两项，培养科研人才，提高了科研能力及水平。20xx年主持自治区自然科学基金项目“原位杂交检测hpv和p16ink4a表达与宫颈癌关系的研究”，20xx年主持院级科研项目“多药耐药基因的表达”；20xx年主持院级科研项目“hpv感染和p16ink4a蛋白表达与宫颈癌关系的研究”。两年多来共撰写专业论文5篇，先后发表于《宁夏医学杂志》的论著及实验研究栏目。

为了加强我院病理科质量建设，促进学科发展，扩大病理科的影响，显示病理科的内部建设、管理水平与能力，20xx年办了三件事：

一是在XX年银川召开的“全国中华医学会病理学分会年会”上，作为宁夏地区的唯一代表科室主任王岩在大会交流了“浅谈病理诊断质量控制与质量保证”一题，受到了与会者的高度关注与好评，从而提升了xx市第一人民医院病理科在全国病理界的影响。

二是：XX年12月在院领导的大力支持下成功举办了“骨肿瘤及消化道肿瘤新进展研讨会暨宁夏医学会病理学分会20xx学术年会”，会上邀请了国内知名病理学专家天津医科大学病理教研室主任孙保存教授，天津医院病理科王瑞琳主任，会议效果使大家既学到了知识，又为扩大我院影响及知名度，提升我院病理科在全区病理界的`品牌位置起到了重要的作用。

三是：为了更好得使临床医生及患者更加了解、认识病理诊断在临床诊疗中的作用，先后两期在《xx日报》刊登“掌握诊断金钥匙，服务临床高标准”和“免疫组化在临床工作的应用价值”，并在银川电视台生活栏目中播出了病理科的建设与发展，临床诊疗中的“金标准”、“判决书”等作用。从而树立了病理科良好的服务形象，许多同行及患者纷纷带着疑难病理切片到病理科会诊，打造了宁夏病理品牌效应，受到了宁夏病理同行及临床医生、患者的一致赞誉。

三、狠抓效益，重视实效，稳步为医院创收做贡献

按照医院的规章制度，在做好为患者服务的基础上，引进先进设备和技术。

实现了社会效益和经济效益的同步增长。其中：外检5039例，冰冻187例，免疫组化867项，脱落细胞学1740例，针吸细胞学141例，脑脊液细胞学69例，经济收入共888，438.00，比去年同期增加82，804.00，增长率25.5%。创建科以来最高记录。仪器使用率等业务指标、经济指标取得了可喜的成绩。

四、内塑素质，外树形象，大力培育医疗工作新风尚

病理科全体医务人员始终坚持党的基本路线，模范遵守国家法律、法规。

经常组织科室人员学习医疗卫生文件，做到防微杜渐。牢固树立良好的服务意识，在公开评议行业作风和治理医药购销领域商业贿赂工作中，科室工作受到了患者、社会的认可和赞誉。他们在解答病人咨询时，一视同仁，耐心细致，不厌其烦，从不收红包，深受医护人员和患者的尊敬和好评，为医院两个文明建设做出了贡献。他们无论在贯彻执行卫生局、医院改革的各项方针政策，还是在全面质量管理、行风建设、“医疗质量服务年”等活动中为医院做了大量工作，使科室面貌焕然一新。在科室的各项工作中，他们团结协作，互帮互学，团队精神强，为人正派、诚实，从不计较个人得失，吃苦在前，享受在后，默默无闻，甘当“幕后英雄”。

五、找出不足及存在问题，制定管理工作的发展思路

1、呼吁院领导重新确认病理科在“三级”医院中的位置

病理诊断是医院所有的诊断工作中的终末诊断，具有高度专业性和高度风险性，衡量一个医院的诊疗水平和质量如何关键看病理科的诊断水平和质量，它是“金标准”、“医生的医生”，因此，按照20xx年7月在北京召开的“中国医师协会病理科医生分会成立大会”会议精神要求把病理科作为临床科室、一级科室来对待，而不是普通的“医技科室”。因而主要要体现在人力、物力、设备的投入、学科建设、人才梯队的培养、奖金等待遇方面的倾斜政策。

2、建立分子实验室

随着分子生物学在诊断治疗恶性肿瘤工作中突飞猛进的发展，尤其是“靶向”治疗的问世使得“三级医院”建立分子实验室的重要性日显突出。我科在原有免疫组化实验室的基础上奠定了建立分子实验室的基础，故需要院领导在软、硬件方面的投入与支持，这样一方面能满足临床诊疗工作的需要，另一方面为我院研究生课题实验搭建平台。

3、加强病理与临床及医技科室的联系，不断提高病理医师业务素质

我们要克服以往临床与病理的脱节，加强与临床医生的沟通，了解治疗工作的需求，取得临床同道的理解与支持，熟悉检验、影像学的改变，加强住院医师培训工作；抓好质量控制，推进病理质量的提高。

第五篇：病理技术工作总结

篇一：2013年病理科工作总结 2013年病理科工作总结

2013年即将过去，回顾这一年，病理科在院领导的关心照顾下，在以妇科门诊为代表的兄弟科室的大力支持下，病理科的工作迈上了一个更高的台阶，开创出了一个全新的局面，取得了开科以来最好的历史成绩。具体如下：

一、经济效益实现历史最好水平。

2013年里完成液基细胞学检测（tct）3510人次，组织病理检测850人次，宫颈抹片850人次，白带多项检测15000人次，实现经济总收入87万多，与2012年相比增长率为45%。（2012年病理科的收入是60万），大幅度超额完成年初制定的经济目标。更值得一说是，所有成果的取得，靠的是我一个人努力工作和辛勤劳动。我也可以厚着脸皮说按个人来算，我绝对是第一。

二、社会效益稳步提升，社会影响逐步扩大。

我多次在关键时刻给病人和临床作出科学、合理、及时的病理诊断并提出合理有建设性的意见和建议，得到病人和上级医院病理专家教授的一致认可和好评，为医院和科室树立了良好的对外形象。

三、加强业务学习，狠抓内部质量，提高诊断水平，保证医疗质量和医疗安全。

我来妇幼有13年了，到病理科工作已经7年，在这7年里，病理科是唯一一个没有因业务和技术上的问题被病人投诉被要求赔偿的科室。2013年切片外借省级医院会诊37例，最终检测结果与我们一致的有37例，准确符合率100%。最值得高兴的是有一次对同一病例我们和湘东医院作出了不同的诊断，我们认为没有到癌，而湘东医院认为到癌了，最后湘雅同意我们的诊断，认为我们在这一病例上拿捏的比较准，得到了当事病人家属高度赞扬。

四、积极参与医院和科室的管理，为医院和科室的持续发展出谋划策。

2013年年初的时候，我对怎样做好服务、怎样做大做强医院，以书面的形式提出了自己的一些想法，得到了院里的认可并加以实施执行，自从加入作风建设小组以后，在贺书记的直接领导下，我实事求是的做好了手术室、妇科、产科等8个部门的考评和满意度问卷调查，为医院和科室的科学管理与不断完善提供了最真实的资料，为妇幼品牌的建设尽了最大的努力。

五、对照二甲复审的要求，加班加点做好了二甲复审的准备工作，加强了科室的质量体系建设和内部管理，保证了科室的健康发展。

成绩的取得固然可喜可贺，但透过这成绩的背后，我觉得病理科还是有许多不足之处：

一、支撑病理科的或者能与病理科对接的科室单一，目前来说只有一个妇科门诊，那么对病理科来说，业务的增长点几乎没有，不利于业务的持续增长。

二、人员的配备不合理。

按我们业务收入，病理科配备4个人都不为过，湘东医院8个人，他们的业务收入是150万左右，中医院3个人，他们的业务收入大概是50万左右，而病理科今年只有我一个人，业务收入已达87万多，还不包括免费和打折的。另外，虽然我自认为业务素质和业务水平比较高，但按现在的要求，我还不具备直接从事病理诊断的条件，而刚刚进修回来的宋芹还需要一个成长学习的过程。

三、人员紧缺，再加上场地狭小，新的项目，新的技术无法开展和推广。虽然面临的问题还很多，甚至有的问题短时间内还不能解决，但是作为妇幼人的我在2014年里一定会竭尽所能，始终坚持以病人为中心，以质量为核心，以感恩、利他、成长为理念，在邹院长，贺书记的带领下秉承踏石留印，抓铁留痕的工作作风，脚踏实地的做好每一件事，实现妇幼从一个辉煌走向另一个辉煌的崛起。篇二：病理科年终工作总结 病理科2014年工作总结

一年来，在院党委、行政班子领导关心、支持下，切实转变服务理念，加强科学管理，紧扣开展“医疗质量服务年”活动的主题，全面落实了《医疗质量全面管理目标责任制》的各项工作指标任务，全科上下心往一处使，使科室管理医疗质量、教学科研等各项工作有了新的突破，成为区内病理学科专业的龙头科室。

一.加强管理，细化职责，确实开创医疗质量新局面

病理科重视思想政治学习，严格遵守医院各项规章制度，积极参与并完成医院开展各项工作及活动，进一步建立健全医疗工作全面质量管理工作计划及病理工作规章制度，针对不同环节重新强化科主任、医师、技术员岗位职责，做到了制度健全、管理有章可循、职责落实到位，取得了可喜的成绩。在xxxx市卫生局组织的《医疗质量全面管理目标责任书》检查评比中排名第一，xx年本人被银川市政府授予“十佳医生”，病理科在xxxx、xxxx被医院评为“先进科室”，本人也被评为“优秀科主任”。二.拓新工作，健全制度，努力发掘病理诊断新亮点

病理科能较好地完成所签定的“五大责任书”规定的各项内容，认真完成

半年及年终“五大责任书”的自查工作，始终把医院开展的“医疗质量服务年”等活动，真正落实到实处，不摆花架子，转变服务观念，一切工作围绕临床转，临床的需要就是我们的工作，积极创造人力、物力条件，大力引进、应用和开展新技术、新业务，先后有5人外派到长春、内蒙、北京、上海等地学习，特别实学习了国外疑难切片病理诊断的思路及方法、免疫组化质控标准、分子生物学----原位杂交技术操作、细胞病理学诊断，两年多来我科先后开展了四项新技术：1.持笔式针吸细胞学穿刺；2.多药耐药基因检测；3.原位杂交检测hpv感染；4.液基细胞检查应用于宫颈病变筛查。解决了临床工作中的实际问题，受到临床医生的好评和认可，并大大提高了科室的整体业务技术水平，增强了医院综合竞争实力。

积极开展科研立项两项，培养科研人才，提高了科研能力及水平。xx年主持自治区自然科学基金项目“原位杂交检测hpv和p16ink4a表达与宫颈癌关系的研究”，xx年主持自治区卫生厅科技重点计划项目“基质金属蛋白酶及其抑制剂在乳腺癌中的表达及浸润的关系”；xx年主持院级科研项目“多药耐药基因在乳腺癌中的表达”；xx年主持院级科研项目“hpv感染和p16ink4a蛋白表达与宫颈癌关系的研究”；xx年主持院级科研项目“显色原位杂交检测乳腺癌her2基因状态的分析”。两年多来共撰写专业论文5篇，先后发表于《宁夏医学杂志》的论著及实验研究栏目。

为了加强我院病理科质量建设，促进学科发展，扩大病理科的影响，显示病理科的内部建设、管理水平与能力，xx年办了三件事：一是在xx年银川召开的“全国中华医学会病理学分会年会”上，作为宁夏地区的唯一代表科室主任王岩在大会交流了“浅谈病理诊断质量控制与质量保证”一题，受到了与会者的高度关注与好评，从而提升了xx市第一人民医院病理科在全国病理界的影响。二是：xx年12月在院领导的大力支持下成功举办了“骨肿瘤及消化道肿瘤新进展研讨会暨宁夏医学会病理学分会xx学术年会”，会上邀请了国内知名病理学专家天津医科大学病理教研室主任孙保存教授，天津医院病理科王瑞琳主任，会议效果使大家既学到了知识，又为扩大我院影响及知名度，提升我院病理科在全区病理界的品牌位置起到了重要的作用。三是：为了更好得使临床医生及患者更加了解、认识病理诊断在临床诊疗中的作用，先后两期在《xx日报》刊登“掌握诊断金钥匙，服务临床高标准”和“免疫组化在临床工作的应用价值”，并在银川电视台生活栏目中播出了病理科的建设与发展，临床诊疗中的“金标准”、“判决书”等作用。从而树立了病理科良好的服务形象，许多同行及患者纷纷带着疑难病理切片到病理科会诊，打造了宁夏病理品牌效应，受到了宁夏病理同行及临床医生、患者的一致赞誉。

三.狠抓效益，重视实效，稳步为医院创收做贡献

按照医院的规章制度，在做好为患者服务的基础上，引进先进设备和技术，实现了社会效益和经济效益的同步增长。其中：外检5039例，冰冻187例，免疫组化867项，脱落细胞学1740例，针吸细胞学141例，脑脊液细胞学69例，经济收入共888，438.00，比去年同期增加82，804.00，增长率25.5%。创建科以来最高记录。仪器使用率等业务指标、经济指标取得了可喜的成绩。

四.内塑素质，外树形象，大力培育医疗工作新风尚

病理科全体医务人员始终坚持党的基本路线，模范遵守国家法律、法规，经常组织科室人员学习医疗卫生文件，做到防微杜渐。牢固树立良好的服务意识，在公开评议行业作风和治理医药购销领域商业贿赂工作中，科室工作受到了患者、社会的认可和赞誉。他们在解答病人咨询时，一视同仁，耐心细致，不厌其烦，从不收红包，深受医护人员和患者的尊敬和好评，为医院两个文明建设做出了贡献。他们无论在贯彻执行卫生局、医院改革的各项方针政策，还是在全面质量管理、行风建设、“医疗质量服务年”等活动中为医院做了大量工作，使科室面貌焕然一新。在科室的各项工作中，他们团结协作，互帮互学，团队精神强，为人正派、诚实，从不计较个人得失，吃苦在前，享受在后，默默无闻，甘当“幕后英雄”。

五.找出不足及存在问题，制定管理工作的发展思路

1.呼吁院领导重新确认病理科在“三级”医院中的位置。

病理诊断是医院所有的诊断工作中的终末诊断，具有高度专业性和高度风险性，衡量一个医院的诊疗水平和质量如何关键看病理科的诊断水平和质量，它是“金标准”、“医生的医生”，因此，按照xx年7月在北京召开的“中国医师协会病理科医生分会成立大会”会议精神要求把病理科作为临床科室、一级科室来对待，而不是普通的“医技科室”。因而主要要体现在人力、物力、设备的投入、学科建设、人才梯队的培养、奖金等待遇方面的倾斜政策。2.建立分子实验室。

随着分子生物学在诊断治疗恶性肿瘤工作中突飞猛进的发展，尤其是“靶向”治疗的问世使得“三级医院”建立分子实验室的重要性篇三：2013年病理科工作总结及2014年工作计划 科室： 病理科 科主任签字： 门诊、医技科室

一、对本科室工作做概括总结。

2013年病理科坚持积极响应医院的各项号召及精神，按照三级甲等医院标准建设病理科，病理科全体在新建病理科工作环境中圆满出色地完成全年工作任务，同时科室工作也得到了全面、健康、协调快速的发展，现就一年来工作总结如下：

一、工作量完成情况及经济效益：活检8479例，冰冻1153例，免疫组化503例、2479项，特殊染色hp751例，tct 2028例，脱落细胞6409例，hpv检测95例，接受外院会诊68例，尸体解剖2例。共计创收：2604378元，其中免疫组化：247900元，特殊染色hp：45060元，hpv检测：33250元。

二、基础设施建设方面：

1、引进朗珈病理信息系统，实现了病理科数字化管理。提高了工作效率,方便临床病理结果查询。正逐步实现部分电子申请单的普及。

2、十人共览显微镜的引进，可做到十人共同阅读同张切片，方便了科内全体人员的学习、带教，疑难病例会诊。提高了病理科整体的病理诊断水平。

3、自动染色-封片仪的投入使用，满足了我科与日俱增的制片工作量，提高了病理切片质量。

4、病理读片示教会议室的建设。实现了网络病理图片资源的学习，为讲课培训、区域性病理读片会及其他科室资源共享提供了良好的硬件设施。

三、人员梯队建设情况：我科人员梯队建设基本完成，高、中、初级比例为2：4：8。亚病理专业建设已初成规模，病理科目前已有较为成熟的妇科病理专业、消化道病理专业，乳腺病理专业，今年新增泌尿系及前列腺病理专业、尸体解剖等亚病理专业。

四、人才培养培训情况。

1、每天八点于十人共览显微镜下进行科内疑难病例会诊，全科诊断医生进行学习讨论；上级诊断医师带教初级医师及冰冻报告的发放；

2、每周四下午进行业务学习、每半月进行“三基三严”的培训，制定初级医师培训计划并积极参加院内组织的各类培训；

3、北京病理专家老师定期阅片讲座；

4、外派进修学习人员1名，学成并获得解放军总医院优秀进修生称号；

5、科室五人次参加区内外学术会议十余次。

6、年内请保卫科、感染科等对病理科全体人员进行相关知识的培训。

五、新技术、新业务开展情况：

1、开展了cervista hpv分子病理检测，共检测95例，阳性31例。

2、新增免疫组化23项，完成年初计划增加20项的任务，其中增加了甲状腺乳头状癌galectin-

3、肺癌nopsin-a、乳腺肌上皮calponin等多病种的特异性强、敏感度高的标记物。

3、幽门螺旋杆菌hp特染检测751例，阳性503例，阳性率达66.98%。

4、全面开展tct工作，取消传统的细胞学刮片。

六、科研和攥写论文情况： 1、2013年开展课题三项：①《使用同一样本进行hpv检测、液基细胞学和阴道镜下组织活检在宫颈病变中的相关性分析》；②《甲状腺微小乳头状癌冰冻与石蜡病理诊断分析》；③《胃疾病与幽门螺旋杆菌hp检测的临床病理意义》。

2、攥写论文2篇。

七、临床交流协作情况：我科自2013年6月22起于每周六早会期间走访临床各科室，沟通协商解决了许多实际问题：

1、申请单方面，现填写基本符合等级医院要求，完整清晰利于病理医生的诊断；

2、病例报告出具时间问题，一般均为5个工作日，但为更好配合临床工作，现我科已调整为将胃镜、阑尾、扁桃体等标本在制片完成后优先挑选出来第一时间进行阅片诊断及出具报告。临床医生可在病理医生出具报告后第一时间网上查询到结果。

3、术中快速冰冻方面。（1）各临床科室已了解到术中冰冻适宜及不宜应用范围，能够结合患者情况及手术目的参看冰冻适用范围进行送检。

（2）对于时间外冰冻，会在下班前及时通知我科留人，便于工作的顺利进行。（3）取消冰冻也能够及时通知我科人员。

八、病理科为主办方在区卫生局支持下成立了海拉尔区病理读片会：于2013年8月起每月第三个周一下午召开，现已进行5次，中蒙医院、农垦医院、海拉尔区医院及我院病理科参与，每次针对各院疑难病例进行讨论学习，促进各医院间的病理人员相互学习，更利于呼伦贝尔地区的病理的全面发展，为打造区域性病理中心打下坚实的基础。

九、质量控制方面：年内两次参加全国的免疫组化质控活动均达到了优良的认证。

十、“创三甲”迎评准备情况：按等级医院工作要求，（1）新增制度2项、流程1项，修订制度、7项、流程15项。（2）设计、修正各登记、记录本近50本，使其系统化、正规化。

二、年内工作计划完成情况，亮点与不足，改进措施。2013年工作计划完成情况：

1、完成科内基础设施建设：（1）病理读片示教会议室的建设，十人共览显微镜及可播放病理幻灯的投影设备的引进，为讲课、带教、培训提供了良好硬件基础；（2）自动染色-封片机的引进，满足了我科制片与日俱增的工作量，并避免制片质量稳定性欠佳等问题；（3）信息系统的引进，完善病理信息化建设，监控和降低可能出现的风险。

2、等级医院迎评工作完成情况：全面贯彻实施医院评审的标准，把制度及规范已融入每日常规工作中。

3、专业技术水平上，亚病理专业建设已初成规模，病理科目前已有较为成熟的妇科病理专业、消化道病理专业，乳腺病理专业，新增泌尿道及前列腺病理专业、尸体解剖等亚病理专业。

4、质量控制方面：按等级医院细则完善了从标本接收到签发报告过程中病理科各项质控活动，并于每月质控会中对出现的问题进行讨论、协商出解决办法，下月质控会上进行反馈。同时做好室内质控，参加全国免疫组化室间质控活动获得两次优良认证。

5、新技术、新业务及科研项目。（1）新增免疫组化23项；（2）开展hpv检测95例，阳性37例，阳性率达38.9%。（3）特殊染色hp751例，阳性503例，阳性率达66.98%。（4）完成科研项目：开展课题三项①《使用同一样本进行hpv检测、液基细胞学和阴道镜下组织活检在宫颈病变中的相关性分析》；②《甲状腺微小乳头状癌冰冻与石蜡病理诊断分析》；③《胃疾病与幽门螺旋杆菌hp检测的临床病理意义》。

6、区域性病理诊断中心的申请情况，我科积极申请，同时加强科内设施建设现已满足硬件条件，并加快人才培养步伐，争取早日达到区域性病理诊断中心的标准。亮点:

1、引进病理科信息系统，实现了病理科数字化管理。提高了工作效率,方便临床病理结果查询，正逐步实现电子申请单的普及。

2、十人共览显微镜的引进，可做到十人共同阅读同张切片，更便于科内全体人员的学习、带教，疑难病例会诊。

3、自动染色-封片仪的投入使用，满足了我科与日俱增的制片工作量，并避免了制片质量稳定性欠佳等问题。

4、病理读片示教会议室的建设及播放病理幻灯投影设备的引进，为讲课培训、区域性病理读片会及其他科室资源共享提供了良好的硬件基础，在建设方面，我院病理科已达自治区一流水平。

5、开展了cervista hpv分子病理。与妇科液基细胞学、阴道镜下取活检共同在女性宫颈防癌筛查中发挥着重要的作用。共检测95例，阳性为31例，创收33250元，tct联合hpv共58例，共同阳性者22例阳性，22例中做活检10例，阳性3例，检出率：37.9%，其中单独做hpv37例，阳性9例，9例中取活检4例，阳性1例，检出率：24.3%。

6、免疫组化开展80余项。

7、成立了海拉尔区读片会。多家医院病理科参与，针对各院疑难病例进行讨论学习，促进各医院间的病理人员相互学习，不仅利于提高我院病理科的整体诊断水平，更利于呼伦贝尔地区的病理的全面发展，缩小与全国领先地区的差距。

8、加强临床沟通协作工作。自六月份每周六早会期间走访临床各科室，为临床解决病理相关问题。不足：

1、科室技术人员严重不足，人才梯队出现断层，成熟的技术人员少，仅两名并已到退休年龄，且我科工作量较为繁重，其引起的直接后果是，甲级切片率低，达不到等级医院要求的标准。只能应对日常工作，不能将工作进一步细化，不能分配出一组专门人员满足临床时间外冰冻的需要，并且也影响新技术、新业务的开展。

2、重点专科未完成的任务是：

（1）指导研究生开展结合临床病理的科研设计，完成课题及论文答辩，学习诊断病理并达到一般进修医师的水平；

（2）进行国际合作，与国际先进水平接轨。

3、科室人员科研意识薄弱，攥写论文篇幅较少。

4、皮肤、细胞学等病理亚专业缺少专业人员相关的培养。改进措施：

1、加快技术人员的引进、培养，年轻的技术人员仅一名，技术人员梯队出现断层，达不到等级医院要求的标准，并且技术组的工作量较为繁重，