LNG汽车各种常见的问题解析

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第一篇:LNG汽车各种常见的问题解析

LNG汽车各种常见的问题解析

一般刚接触LNG汽车的车主,应该会遇到各种问题,而又不知道解决的方法,为此,笔者整理了一些LNG汽车常见问题解析,希望

可以帮到大家。

LNG汽车加气量怎么计算?怎么知道何时需要加气?

(1)LNG的计量方式与汽柴油相同,一种是以体积来计量,计量单位是立方米(汽柴油计量单位是升),一种是以质量来计量,计量单位是公斤(汽柴油计量单位是吨)。根据不同地区的计量习惯,可以选择立方米或公斤作为计量单位。无论用什么计量单位,加气量是相同的,加气机都可以自动计量,换算关系是1公斤LNG大约与1.4方立方米天然气相当。

(2)LNG汽车驾驶室装有LNG液量显示器,与汽柴油车的油量显示一样,液量显示部分包括液量图标、液量刻度线、液量指针和液量值(L)。钥匙开关打开电源,显示屏全亮3秒后开始显示气瓶各参数值,包括液量值和气瓶压力值,客户可以根据剩余液量值选择加气时间,当液量刻度线低于液量警戒线(该数据由汽车生产商决定,液量警戒线一般为气瓶有效容积的12.5%),液量刻度线红色线段,状态灯闪烁,提醒客户及时加液。

LNG汽车加气时间长吗?加一次气要多长时间?

加注相同体积的LNG和汽柴油所需时间相当,LNG加液机最大加液能力150到200L/min,正常加气时间为5到10分钟。

LNG重卡、LNG客车续驶里程是多少?

LNG汽车的续驶里程由车辆配备的LNG车用瓶体积和百公里耗气量决定的,续驶里程可以达到400到1000公里,和柴油车辆相当。例如:LNG客车配备1个275升车用瓶可以存储大约140立方天然气,百公里耗气量约30方,可以续航400多公里;LNG重卡配备2个450升的车用瓶可以存储大约500立方天然气,百公里耗气量50方,可以续航900多公里。

LNG汽车与柴油车辆的优势有哪些?

1、续驶里程长:LNG重卡用450L瓶可行驶400Km以上,加气时间短。

2、经济性更优:车辆节约燃油成本,设备简单,维护成本低,车辆超载效果更突出。

3、安全性高:LNG的燃点为650℃,比汽、柴油高;LNG的爆炸极限为5%—15%,爆炸极限比汽、柴油窄,且气化后密度很低,稍有泄漏即挥发扩散。

4、清洁环保:LNG组分纯,CO等排放量少,环境效果明显。

天然气汽车能使用柴油吗?

目前国内天然气重卡都是使用单一燃料,即只能使用压缩天然气CNG或者液化天然气LNG,不能使用柴油。因为柴油和天然气的工作原理差异较大,柴油为压燃式,天然气为点燃式,所以一般来说,汽油和天然气可以混合使用,但柴油和天然气不能混合使用。

LNG汽车(搅拌车、水泥罐车、长途大巴、公交车、牵引车)实际运营中的百公里气耗量是多少,比柴油如何?

LNG汽车实际运行中百公里耗气量与同功率的柴油车相比,根据不同气源地气质的影响,大约1.3方左右天然气替代1升柴油,例如:百公里油耗40升的重卡,同功率的LNG重卡百公里耗气大约50方左右。

为什么LNG气罐要时不时放气啊,会不会有危险?

若长时间不使用液化天然气汽车,因气瓶内液体不断气化,导致气瓶内压力不断增大。当压力超过一定值时,气瓶的副安全阀自动打开泄压,保证气瓶安全,在副安全阀失灵或发生故障时,主安全阀工作,从而保护气瓶的安全;当发生意外事故如气瓶外壳被外力破坏、真空失效或系统压力急剧升高时,主、副安全阀先后打开泄压,保证车辆的安全。气瓶放气时因为主要成分为甲烷,甲烷比空气轻,易挥发,不容易聚集发生危险。

给天然气车加气过程中,加气站都要求车内不能坐人,是因为不安全吗?

燃点对比:柴油:燃点220℃;汽油燃点427℃。但汽油挥发性强,汽油蒸汽要对柴油燃点低,液化石油气(LPG):燃点490℃,天然气:燃点650℃。

比重对比:液化石油气(LPG):与空气比重1.5~2,发生泄漏时往下沉积,易造成爆炸的安全隐患。天然气(NG):与空气比重0.5 8~0.79,发生泄漏时会很快往空中挥发,不易造成安全隐患。

爆炸极限对比:液化石油气(LPG):1.7% ~ 9.7%。极易发生爆炸。天然气(NG):爆炸极限5~15%。不易发生爆炸。

压力对比:LNG比CNG充气压力低,约为CNG充装压力的1/40,不易泄漏。LNG充装压力仅为0.5MPa,CNG充装压力却是20Mpa。

从以上看出,LNG的各项安全性指标均高于常见的几种燃料,所以以LNG为燃料的安全性相对于其它燃料来说,安全性更高。但是从为更好保证乘客安全角度,保证加气站内明火隐患控制,对于安全风险的有效控制方面,要求加气站加气时车内不能坐人。

LNG的气瓶安全吗?

LNG储气瓶出厂前要进行特殊检验。气瓶经常规检验后,还需充气作火烧、爆炸、坠落、枪击等试验,合格后,方能出厂使用。

汽车用LNG气瓶是作为一种低温绝热压力容器,设计有双层(真空)结构。内胆用来储存低温液态的液化天然气,在其外壁缠有多层绝热材料,具有超强的隔热性能,同时夹套(两层容器之间的空间)被抽成高真空,共同形成良好的绝热系统。外壳和支撑系统的设计能够承受车辆在行驶时所产生的相关外力。

内胆设计有两级安全阀在超压时起到保护作用。在超压情况下首先打开的是主安全阀(开启压力为1.6MPa左右),其作用放散由于绝热层和支撑正常的漏热损失导致的压力上升、或真空遭破坏后以及在失火条件下的加速漏热导致的压力上升。副安全阀(开启压力一般为2.4MPa以上)的压力设定点较主安全阀高,在主安全阀失效或发生堵塞时,副安全阀启动。

外壳在内部超压条件下的保护是通过一个环形的抽空塞来实现的。如果内胆发生泄漏(导致夹套压力超高),当压力达到0.1~0.2 MPa抽空塞将打开泄压。万一抽空塞发生泄漏将导致真空破坏,这时可以发现外壳出现“冒汗”(大面积结水珠)甚或结霜现象。当然,在与气瓶连接的管道末端出现的结霜或凝水现象是正常的。所有的管路、阀件都设置在气瓶的一端,并用护环或保护罩进行防护。

车辆发生事故或碰撞时,LNG会不会容易爆炸?

LNG储存在压力为0.05至0.5MPa的绝热容器中,与CNG相比,储存压力小,LNG气化后密度低(比空气轻),一旦有泄漏即挥发扩散,不易发生爆燃现象;LNG燃点为645℃,爆炸极限为5%—15%,液态LNG不容易被点燃,比汽柴油更安全。LNG储气瓶出厂前要进行特殊检验,气瓶经常规检验后,还需充气作火烧、爆炸、坠落、枪击等试验,车辆碰撞后一般不会发生损坏,一旦泄露,由于比空气轻,很快挥发,不宜聚集发生燃烧。LNG汽车现在比较少,车辆售后维修如何保证?

(1)LNG汽车只是在发动机、燃料存储供应系统和点火装置方面和柴油车有所不同,其他方面都相同,维修总体差异比较小;

(2)汽车厂商都有配套完善的售后服务体系和服务网络,在推广LNG汽车前已经对销售LNG汽车经销商和4S店进行LNG汽车维修保养的相关培训,能够满足客户的需要,我们也会提供相应的简单技术咨询服务。

(3)LNG发动机及LNG存储供应系统技术成熟,发生故障的可能性很小,而且随着LNG汽车的日益增加,其他车辆维修厂也逐步掌握LNG汽车的维修技术,LNG汽车的维修将和柴油车一样方便。

LNG车辆的维修费用高吗?

与柴油车相比,主要区别在燃料供应系统,发动机使用LNG做燃料,运行平稳、噪音低、不积炭、能延长发动机使用寿命,不需经常更换机油,并且LNG不含硫化氢对缸体无腐蚀,可节约一定的维修费用。

柴油车可以改装成LNG燃料车吗?改装大概要多少钱?

柴油车可以改装成LNG燃料车由柴油机改装的LNG车分为,双燃料燃气汽车,是指燃用LNG与柴油混合燃料的汽车;单燃料燃气汽车一般为更换燃气发动机来实现。双燃料车辆改装费用大约8-10万元。

目前双燃料重卡改装技术如何?改造后的动力是否有影响?

LNG单燃料整车功率与同等功率柴油车相比,输出功率完全一样,没有衰减;改装双燃料车 瞬间爆发力会有所下降,但不超过10%,车辆平稳运行后,双燃料发动机输出功率会略高于传统柴油机输出功率。

LNG车辆会不会比柴油车自重会重,对记重收费来说会不会造成损失?

根据不同生产厂家生产的LNG牵引头配备二个450升瓶自重比柴油车牵引头自重重一吨左右,国家对公路运输载货的标准为总质量不超55吨,意味着车辆本身自重越轻载货越多,车辆自重重一吨就少拉一吨货,车主就少挣一吨运费。

天然气发动机与柴油发动机比哪个寿命更长,更耐用?

发动机使用LNG做燃料,运行平稳、噪音低、不积炭、不稀释润滑油,能延长发动机使用寿命。

水泥搅拌车能否用LNG作为燃料,效果如何?

LNG水泥搅拌车现在已经大规模使用,以下是江苏淮安LNG水泥搅拌车运行状况:柴油水泥搅拌车百公里综合油耗为50L柴油,相同路况下,LNG水泥搅拌车百公里综合气耗为50kg,油气两类型车辆的能耗比为1:1.378,LNG水泥搅拌车与普通柴油车辆相比,燃料费用节约率为(7.8×50 – 6.22×50)÷7.8×50×100% = 20%。

LNG车为什么比柴油车贵,都贵在哪了?

主要是钢瓶价格贵,因为LNG车辆需要装置储存液化天然气的专用钢瓶,双层真空结构,汽车用LNG气瓶是作为一种低温绝热压力容器,设计有双层(真空)结构。内胆用来储存低温液态的液化天然气,在其外壁缠有多层绝热材料,具有超强的隔热性能,同时夹套(两层容器之间的空间)被抽成高真空,共同形成良好的绝热系统。其次是天然气发动机是新型产品,初期销量规模小,研发费用分摊比高。随着销量的增加,发动机价格会越来越接近甚至低于柴油发动机。

LNG钢瓶需要定期年检吗?

能和车辆一起年检吗?LNG钢瓶需要定期检验,但目前国家目前还没有明确规定,一旦出现问题由钢瓶厂家负责维修;天然气钢瓶的使用年限达10年以上,从客户购车起,基本不用更换气瓶;LNG钢瓶是单独检验,车辆年检时不对钢瓶进行检验。

放散气挺可惜的,有什么办法能够减少钢瓶放散吗?

LNG气化是由其自身特点决定的,车辆正常行驶或短暂停运气化的LNG直接进入发动机燃烧,不会发生放散现象;长期停驶时LNG自然气化后会造成LNG车用瓶内压力提高,达到LNG车用瓶安全阀设定压力时会起跳,释放气体,降低压力。车载钢瓶放散量有限,回收不经济,一般采取放散气体自然挥发方式。

LNG气瓶结霜与漏气是一回事吗?

LNG气瓶出现“结霜”现象的原因可能有:

(1)当气瓶内胆的真空受到破坏,使绝热能力下降或失效,这时可能发生气瓶外壳“冒汗”或“结霜”现象,这种故障不是漏气现象。但若车辆出现这种现象,应报气瓶厂家维修。

(2)当气瓶管路出现泄漏时,在漏点可能出现“冒汗”或“结霜”现象,这种故障属于漏气,当车辆出现漏气故障,应检修后在使用车辆。

(3)当车辆运行使用LNG时,在气瓶头部会出现“ 冒汗”或“结霜”现象,这不是故障,而是一种正常现象。

(4)当环境温度过低或空气湿度过大,这时可能发生气瓶外壳“冒汗”或“结霜”现象,这不是故障,而是一种正常现象。

使用LNG汽车国家有什么优惠政策吗?

使用LNG车辆能够减少尾气排放,符合国家节能减排的要求,国家和地方对于LNG车辆有相应的优惠政策。例如:财政部交通运输部关于印发《交通运输节能减排专项资金管理暂行办法》的通知、交通运输节能减排专项资金申请指南等文件鼓励车辆使用清洁能源。

公交车用LNG单燃料还能享受燃油补贴吗?

公交企业属于社会公用事业,在城市中按照政府核定的线路、站点、票价和时刻表营运,公交车原来大部分都是耗油或油气两用,政府给予燃油补贴,现在公交车改用LNG单燃料后,只是燃料发生了变化,公交企业可以申请燃料补贴,具体标准可以参照替代燃油的量进行折算,相关具体政策都是地方政府决策制定的。此外,使用天然气后能够大幅度降低二氧化碳等汽车尾气污染物的排放,为地方政府政府节能减排做出贡献,可以根据国家财务部、交通运输部《交通运输节能减排专项资金管理暂行办法》申请节能减排专项资金。

使用LNG汽车需要注意些什么?

(1)出车前LNG汽车的日常维护除普通车辆的日常维护项目外,还应该注意:上车首先检查燃气泄漏报警器,如遇有故障灯亮应及时查找原因和报修,不得擅自操作;连接检查检视气瓶、支架等连接部件的紧固情况;检查转换开关、仪表、阀门、管道连接、固定情况。气量检查接通电源,打开点火开关(不起动发动机),检查气量显示器指示的气量,确保不影响正常运营;漏电检查检查点火系统和发电机是否有漏电、跳火现象,如有应及时修理;保持LNG发动机清洁,特别是电气设备不得有油污。

(2)起动、行车:在起动发动机前,拉好手制动,将变速箱换至空档,在空档状态下,将钥匙转到“ON”位置,接通电源后检查各仪表指示是否正常后等待几秒后方可启动;起动时间不能超过10秒,连续起动要间隔半分钟;如果连续启动3次不能正常启动,则应仔细检查燃气系统以及电路系统有无故障;每次起动后,禁止大油门运转冷态发动机,冷起动后应逐渐提高发动机转速。起动时严禁猛踩油门。应怠速运行发动机1-3分钟才能逐步提速起步;发动机怠速时间严禁超过10分钟。行车中应勤观察各仪表(开关)的工作情况,注意听察涉及气路的异响,选择良好路面行驶,防止对气路系统形成撞击,当感觉到有异常情况时,应立即停车,检查确认安全后继续运行。否则应立即报修,等待处理。

第二篇:LNG汽车常见问题解答

1、LNG的主要用途有哪些?

1、民用: 宾馆、酒店等公共设施。具有安全、方便、快捷、污染少等特点。

2、车船用:作为车船燃料使用,经济效益好、环保性能高等特点。

3、冷能用:作为冷源,速冷食品以及塑料、橡胶、海水淡化等用途。

4、工业用:作为工业气体燃料,用于玻璃厂、陶瓷厂、发48电厂等。

2、LNG加气站分类及特点有哪些?

标准式加气站:主要适应于加气在3 – 5万m³ /天,占地面积在5 – 7亩左右,主要用于车辆较多、充装量较大的重型卡车或大 城市的城际大巴。3-5万m³ /天标准加气站主要设备 按双泵双液机设备配置。

撬装式加气站:设备体积小巧,占地面积小;工厂制造,现场基本无施工,制造成本低;撬装设计,可以整体迁移,转到其他地方使用;设备工厂制造,供货周期短,投入运行快。

L-CNG加气站:该站综合性能比较强,既能充装LNG,又能充装CNG;在LNG价格比较优惠的地区及较大的城市能充分发挥其效能。

3、各类天然气加气站的区别?

根据气源的不同情况,可以分为以下几类加气站:

LNG加气站:槽车运输LNG气源,通过低温泵和LNG加气机直接给LNG车辆充装LNG,包括城际大巴、公交、重卡。

CNG 加气站:

1、母站:管道燃气供应CNG 气源,可以给槽车,也可以给公交出租车加气

2、标准站:管道燃气供应CNG气源

3、子站:槽车供应CNG气源,可给公交、出租车加气;

LNG/CNG加气站:LNG和CNG 两种气源合建站,可给城际大巴、公交、出租车、重卡加气;

L-CNG加气站:LNG通过增压、汽化后转化成CNG 气源,通过柱塞泵和高压汽化器将LNG 气化后变成CNG,由CNG加气机给CNG公交、出租车进行加气; LNG/L-CNG加气站:LNG气源,CNG气源是通过LNG转化而成,是LNG加气站和L-CNG 站的合并,既可以给LNG车辆加气也可以给CNG车辆加气,像城际大巴、公交、出租车、重卡等。

4、一立方的天然气等于多少升柴油?天然气和柴油间如何换算?

一立方天然气热值等于0.86升柴油;一方天然气产生的动力与0.75-0.8升柴油相当。

5、LNG加气站有的地方用公斤计量,有的地方用立方米计量,哪个更合理?

用公斤计量和用立方米计量实质是一样的,只是计量单位不同,根据地方习惯确定,不同地区计量单位应根据客户情 况、市场情况等综合分析而确定。使用立方米为单位可以根据气化率的变化而调整销售价格,公斤则是较为普遍的计量单位。绝大部分LNG加气机都采用质量流量计,以公斤计量销售偏差最小,若以标方计量销售,需考虑气化率指标定价,确保客户利益。

6、为什么LNG加注时有时加的多有时加的少?(LNG充装经常出现450L的车载瓶罐,充装的LNG质量超200KG)

由于气源产地不同,LNG的密度、热值、气化率、温度会稍有差别,加注量略有波动,不影响加气计量的准确性。LNG加气设备按照国家标准,定期由国家计量部门定期检定,确保计量的准确定。

7、LNG汽车加气量怎么计算?怎么知道何时需要加气?

(1)LNG的计量方式与汽柴油相同,一种是以体积来计量,计量单位是立方米(汽柴油计量单位是升),一种是以质量来计量,计量单位是公斤(汽柴油计量单位是吨)。根据不同地区的计量习惯,可以选择立方米或公斤作为计量单位。无论用什么计量单位,加气量是相同的,加气机都可以自动计量,换算关系是1公斤LNG大约与1.4方立方米天然气相当。

(2)LNG汽车驾驶室装有LNG液量显示器,与汽柴油车的油量显示一样,液量显示部分包括液量图标、液量刻度线、液量指针和液量值(L)。钥匙开关打开电源,显示屏全亮3秒后开始显示气瓶各参数值,包括液量值和气瓶压力值,客户可以根据剩余液量值选择加气时间,当液量刻度线低于液量警戒线(该数据由汽车生产商决定,液量警戒线一般为气瓶有效容积的12.5%),液量刻度线红色线段,状态灯闪烁,提醒客户及时加液。

8、LNG汽车加气时间长吗?加一次气要多长时间?

加注相同体积的LNG和汽柴油所需时间相当,LNG加液机最大加液能力150到200L/min ,正常加气时间为5到10分钟。

9、LNG重卡、LNG客车续驶里程是多少?

LNG汽车的续驶里程由车辆配备的LNG车用瓶体积和百公里耗气量决定的,续驶里程可以达到400到1000公里,和柴油车辆相当。例如:LNG客车配备1个275升车用瓶可以存储大约140立方天然气,百公里耗气量约30方,可以续航400多公里;LNG重卡配备2个450升的车用瓶可以存储大约500立方天然气,百公里耗气量50方,可以续航900多公里。

10、LNG汽车与柴油车辆的优势有哪些?

1、续驶里程长:LNG重卡用450L瓶可行驶400Km以上,加气时间短。

2、经济性更优:车辆节约燃油成本,设备简单,维护成本低,车辆超载效果更突出。

3、安全性高:LNG的燃点为650℃,比汽、柴油高;LNG的爆炸极限为5%—15%,爆炸极限比汽、柴油窄,且气化后密度很低,稍有泄漏即挥发扩散。

4、清洁环保:LNG组分纯,CO等排放量少,环境效果明显。

11.天然气汽车能使用柴油吗?

目前国内天然气重卡都是使用单一燃料,即只能使用压缩天然气CNG或者液化天然气LNG,不能使用柴油。因为柴油和天然气的工作原理差异较大,柴油为压燃式,天然气为点燃式,所以一般来说,汽油和天然气可以混合使用,但柴油和天然气不能混合使用。

12、我更换了LNG汽车,要是你们的加气站停气了怎么办?

(1)新奥在全国1 0 0多个城市经营城市燃气和加气站业务,从来没有因为新奥的原因发生大面积停气现象,有着良好的品牌形象和信誉保证;

(2)新奥在广西北海、山西沁水、宁夏银川、湖南长沙建有自己的LNG工厂,现在日生产能力110万方,到2013年河北唐山、河南平顶山、江苏溧阳、江西九江和云南曲靖的LNG工厂都将投产,产能将达到330万方/日,并根据市场需求情况扩大产能,完全能够保证客户的需要。

(3)新奥能源下辖新奥能源物流有限公司,具备一级道路运输资质,是目前国内最大的非管输LNG天然气承运商,拥有天然气专用运力500多台,外协运力1500多台,年运送能力达到6.5亿方,曾多次克服冬季资源紧缺、大雪封路及冻雨灾害的困难,保证按时将LNG运送给客户;

(4)新奥建有LNG应急保障体系,众多项目城市建有LNG储配站,在长株潭地区还建有规模庞大的储备库,储气能力1200万方,在其他区域和重点城市也将建设多座储备库。新奥能源现有LNG储配站60多座,LNG储存能力约1600万方,可为各地发展车船用LNG业务提供气源保障和储备调剂,同时在各地配备移动加液车解决临时加气等问题。

13、LNG加注站网点较少,如何解决在外地加不到气的问题?

目前LNG加气站网点确实不像加油站布点广,加气方便,但随着发展,会不断增加,经常跑外地运输的客户可依据续航的里程定制好加气站点,比较发达的省份已基本满足了LNG汽车的续航要求,新奥能源已经在全国建设LNG加气站,并与全国各大经营商建立同盟关系,站点资源丰富,如您需要在外地加气,可联系新奥能源,新奥能源可以根据行驶里程、行驶路线定制相应加气服务站点,愿意为您服务。

14.车辆停运十天以上、LNG放散完后或车辆在外出现故障时,如何解决临时加气问题?

(1)尽量避免车辆停运;

(2)车辆出现故障新奥可以提供移动加液车或拨打95158救援。(3)放散完后需重新遇冷钢瓶,初次加液耗气量较多。

15.LNG加气站的建设有那么快吗?手续不完备停气了怎么办?

撬装站在设备到位、具备施工条件的情况下需要半个月时间达到试运行;加气站的建设运营,一般情况下都取得政府的同意,一般情况下不会停气,有应急解决措施。

16、你们的气源都是哪来的,有保障吗?

新奥能源现自有北海、晋城、银川、长沙四座LNG工厂,生产量达110万方/日,尚有唐山、平顶山、溧阳、九江LNG工厂正在建设,2012年将陆续投产,将新增产量140万方/日; 在全国建有60多座LNG储配站,储配能力达3000多万方;与国内主要LNG工厂均签有长期采购协议,外部长期协议量320万方/日。

17、我车辆经常在* *线路上运行,你们在这条线路上有LNG加气站吗?

目前我们在全国大部分地区都有LNG加气站站点,经常跑外地运输的客户可依据续航的里程定制好加气站点,比较发达的省份已基本满足了LNG汽车的续航要求,如您是一名客户,可联系新奥能源(021-51876027-8511 周先生),我们可为您定制好加气站点,为您做好服务。新奥可以根据行驶里程、行驶路线定制相应加气服务站点。.一座LNG撬装站日加气能力有多大? 大约能够多少辆车使用?

LNG加气站日加气能力不同,主要与设备配置有关,包括储罐、潜液泵、LNG加液机的数量,一般撬装站的配备为一台60立方米储罐,一台潜液泵、一台加液机,加气能力约1万立方米,可满足约50台公交车加气。

19、车辆经常在矿区及复杂路况行驶,天然气会不会动力不足?

天然气车辆的发动机是发动机厂家根据天然气的特点设计的,能够满足天然气车辆的正常行驶,发动机的额定输出功率是同样的,对于陡坡、超载等特殊状况,天然气汽车起步加速时间稍长,但动力性不下降,客户可以按照自己车辆行驶状况和车辆载重情况,根据车辆厂商的推荐,选择合适车型。同时天然气发动机在设计时已经考虑爆发力不足的情况,通过瞬间增加气量的方法来增加爆发力,气柴油比可达1.4,所以原厂设计的发动机基本不存在爆发力不足的情况。

20、听说天然气动力不如柴油车动力好,是这样吗?

不是的,动力性不降低。这是因为汽车动力指标主要由最高车速、加速能力和最大爬坡度来表示,其影响因素有发动机的功率和扭矩,变速器的传动比分布,整车的总体重量等重要指标,天然气为动力与柴油的比较动力性能同功率的发动机基本相同,只是其加速性能略有下降。.使用LNG怎么有的时候感觉经济性比较好,有的时候好像不理想呢?是不是气的质量有问题?

由于产地不同,气源热值稍有差别,可能会对经济性有一些影响,但影响不大,此外,与车辆行驶环境、驾驶员熟练程度,驾驶习惯也有一定关系。

22、使用LNG汽车需要注意些什么?

答:(1)出车前LNG汽车的日常维护除普通车辆的日常维护项目外,还应该注意:上车首先检查燃气泄漏报警器,如遇有故障灯亮应及时查找原因和报修,不得擅自操作;连接检查检视气瓶、支架等连接部件的紧固情况;检查转换开关、仪表、阀门、管道连接、固定情况。气量检查接通电源,打开点火开关(不起动发动机),检查气量显示器指示的气量,确保不影响正常运营;漏电检查检查点火系统和发电机是否有漏电、跳火现象,如有应及时修理;保持LNG发动机清洁,特别是电气设备不得有油污。

(2)起动、行车:在起动发动机前,拉好手制动,将变速箱换至空档,在空档状态下,将钥匙转到“ON”位置,接通电源后检查各仪表指示是否正常后等待几秒后方可启动;起动时间不能超过10秒,连续起动要间隔半分钟;如果连续启动3次不能正常启动,则应仔细检查燃气系统以及电路系统有无故障;每次起动后,禁止大油门运转冷态发动机,冷起动后应逐渐提高发动机转速。起动时严禁猛踩油门。应怠速运行发动机1-3分钟才能逐步提速起步;发动机怠速时间严禁超过10分钟。行车中应勤观察各仪表(开关)的工作情况,注意听察涉及气路的异响,选择良好路面行驶,防止对气路系统形成撞击,当感觉到有异常情况时,应立即停车,检查确认安全后继续运行。否则应立即报修,等待处理。

(3)回场后应检查气瓶、支架、管路、仪表、阀门等固定情况;检查气路有无漏气现象;检查汽化器热水循环水路的工作情况;清洁各仪表、阀外表面,关闭阀门;检查气瓶厢的封闭情况和加气孔盖的锁止情况,如有异常应立即报修处理;定期检查、清洁发动机的空滤;定期清洁供气系统中的天然气过滤器;定期清洁减压器的加热水循环系统。

(4)LNG驾驶操作要领:LNG车同柴油车在驾驶操作上大体相同,但由于LNG发动机的本身特性,我们在实际驾驶时需注意以下几点: 起步,时应严格遵守一档起步的原则,严禁二档起步。换挡,在行驶中可根据行驶的道路状况和车辆载重选择合适的档位,尽可能以经济车速行驶。正确驾驶、平稳地接合离合器,及时换档,避免突然加速和紧急制动,减少车身和动力系统的负荷。由于燃气车辆低转速时输出功率不高,使用的是电子点火系统,所以应改变以前的柴油车驾驶习惯,在加档前可适当提速,但仍应尽量保持发动机转速在1200 – 1500转/分时换档。

(5)使用过程中的其他注意事项:检漏时,驾驶员师傅们可用矿泉水瓶自制肥皂液并随车携带,以方便检查漏点;如有天然气泄漏,处理时需做好自身防护工作,各类接头尽量以紧固为主,避免拆卸管路接头,以防低温腐蚀;处理故障时如阀门被冰块冻住,应用温水解冻后,方可操作,不能用锤或其他物件敲击冰块;不得用手直接接触低温管道,如需接触需戴好防护手套;在充装、维修时需戴护目镜、脸罩、绝热手套,禁止驾驶员私自操作;严禁用水冲洗发动机,当车辆过积水路面时,应减速慢过,以避免水溅到电器元件上,造成短路,损坏电控系统;气瓶在熄火后或行驶中阀体周边出现结冰属于正常现象,如果发动机长时间不工作而阀体周边出现结冰,说明阀体出现泄漏,应即时处理。

23、LNG价格会不会和柴油一样波动很大?等我们换了LNG汽车后LNG涨价了怎么办?

国内投运的LNG工厂已经有50多个,LNG接收站5个,在建的LNG工厂和接收站有数十个,随着西气东输、川气东送、海气上岸、国外天然气大规模引进、国内管网建设日趋完善,管输气资源日益充裕,LNG将主要用于车船燃料,LNG资源充足,LNG价格相对稳定,受国际原油价格波动影响很小;新奥和客户签订长期合作协议,约定LNG销售价格和价格变动机制,明确双方责任义务,保障双方的共同利益。

24.单燃料LNG重卡相比柴油重卡大约能节省多少燃料成本?

根据不同地区的柴油价格和LNG价格,使用LNG车后,节约的成本不同:以山东为例,柴油车百公里耗油量50升,每升柴油7.32元;油气比按照1:1.3计算,LNG重卡百公里耗气应为65立方米,每立方米LNG销售价格按照4.2元计算,柴油车百公里燃料费为366元LNG车百公里燃料费为273元,百公里节省燃料费93元。不同地方、不同时期,不同车辆节约程度不同,一般节约20%以上。

25.LNG汽车(搅拌车、水泥罐车、长途大巴、公交车、牵引车)实际运营中的百公里气耗量是多少,比柴油如何?

LNG汽车实际运行中百公里耗气量与同功率的柴油车相比,根据不同气源地气质的影响,大约1.3方左右天然气替代1升柴油,例如:百公里油耗40升的重卡,同功率的LNG重卡百公里耗气大约50方左右。

26.为什么LNG气罐要时不时放气啊,会不会有危险? 若长时间不使用液化天然气汽车,因气瓶内液体不断气化,导致气瓶内压力不断增大。当压力超过一定值时,气瓶的副安全阀自动打开泄压,保证气瓶安全,在副安全阀失灵或发生故障时,主安全阀工作,从而保护气瓶的安全;当发生意外事故如气瓶外壳被外力破坏、真空失效或系统压力急剧升高时,主、副安全阀先后打开泄压,保证车辆的安全。气瓶放气时因为主要成分为甲烷,甲烷比空气轻,易挥发,不容易聚集发生危险。

27.给天然气车加气过程中,加气站都要求车内不能坐人,是因为不安全吗?

燃点对比:柴油:燃点220℃;汽油燃点427℃。但汽油挥发性强,汽油蒸汽要对柴油燃点低,液化石油气(LPG):燃点490℃,天然气:燃点650℃。

比重对比:液化石油气(LPG):与空气比重1.5~2,发生泄漏时往下沉积,易造成爆炸的安全隐患。天然气(NG):与空气比重0.5 8~0.79,发生泄漏时会很快往空中挥发,不易造成安全隐患。

爆炸极限对比:液化石油气(LPG):1.7% ~ 9.7%。极易发生爆炸。天然气(NG):爆炸极限5~15%。不易发生爆炸。

压力对比:LNG比CNG充气压力低,约为CNG充装压力的1/40,不易泄漏。LNG充装压力仅为0.5MPa,CNG充装压力却是20Mpa。

从以上看出,LNG的各项安全性指标均高于常见的几种燃料,所以以LNG为燃料的安全性相对于其它燃料来说,安全性更高。但是从为更好保证乘客安全角度,保证加气站内明火隐患控制,对于安全风险的有效控制方面,要求加气站加气时车内不能坐人。

28.LNG的气瓶安全吗?

LNG储气瓶出厂前要进行特殊检验。气瓶经常规检验后,还需充气作火烧、爆炸、坠落、枪击等试验,合格后,方能出厂使用。

汽车用LNG气瓶是作为一种低温绝热压力容器,设计有双层(真空)结构。内胆用来储存低温液态的液化天然气,在其外壁缠有多层绝热材料,具有超强的隔热性能,同时夹套(两层容器之间的空间)被抽成高真空,共同形成良好的绝热系统。外壳和支撑系统的设计能够承受车辆在行驶时所产生的相关外力。

内胆设计有两级安全阀在超压时起到保护作用。在超压情况下首先打开的是主安全阀(开启压力为1.6MPa左右),其作用放散由于绝热层和支撑正常的漏热损失导致的压力上升、或真空遭破坏后以及在失火条件下的加速漏热导致的压力上升。副安全阀(开启压力一般为2.4MPa以上)的压力设定点较主安全阀高,在主安全阀失效或发生堵塞时,副安全阀启动。

外壳在内部超压条件下的保护是通过一个环形的抽空塞来实现的。如果内胆发生泄漏(导致夹套压力超高),当压力达到0.1~0.2 MPa抽空塞将打开泄压。万一抽空塞发生泄漏将导致真空破坏,这时可以发现外壳出现“ 冒汗”(大面积结水珠)甚或结霜现象。当然,在与气瓶连接的管道末端出现的结霜或凝水现象是正常的。所有的管路、阀件都设置在气瓶的一端,并用护环或保护罩进行防护。

29.车辆发生事故或碰撞时,LNG会不会容易爆炸?

LNG储存在压力为0.05至0.5MPa的绝热容器中,与CNG相比,储存压力小,LNG气化后密度低(比空气轻),一旦有泄漏即挥发扩散,不易发生爆燃现象;LNG燃点为645℃,爆炸极限为5%—15%,液态LNG不容易被点燃,比汽柴油更安全。LNG储气瓶出厂前要进行特殊检验,气瓶经常规检验后,还需充气作火烧、爆炸、坠落、枪击等试验,车辆碰撞后一般不会发生损坏,一旦泄露,由于比空气轻,很快挥发,不宜聚集发生燃烧。

30.LNG汽车现在比较少,车辆售后维修如何保证?

(1)LNG汽车只是在发动机、燃料存储供应系统和点火装置方面和柴油车有所不同,其他方面都相同,维修总体差异比较小;

(2)汽车厂商都有配套完善的售后服务体系和服务网络,在推广LNG汽车前已经对销售LNG汽车经销商和4S店进行LNG汽车维修保养的相关培训,能够满足客户的需要,我们也会提供相应的简单技术咨询服务。

(3)LNG发动机及LNG存储供应系统技术成熟,发生故障的可能性很小,而且随着LNG汽车的日益增加,其他车辆维修厂也逐步掌握LNG汽车的维修技术,LNG汽车的维修将和柴油车一样方便。

31.LNG车辆的维修费用高吗?

与柴油车相比,主要区别在燃料供应系统,发动机使用LNG做燃料,运行平稳、噪音低、不积炭、能延长发动机使用寿命,不需经常更换机油,并且LNG不含硫化氢对缸体无腐蚀,可节约一定的维修费用。

32.柴油车可以改装成LNG燃料车吗?改装大概要多少钱?

柴油车可以改装成LNG燃料车由柴油机改装的LNG车分为,双燃料燃气汽车,是指燃用LNG与柴油混合燃料的汽车;单燃料燃气汽车一般为更换燃气发动机来实现。双燃料车辆改装费用大约8-10万元。

33.目前双燃料重卡改装技术如何? 改造后的动力是否有影响?

LNG单燃料整车功率与同等功率柴油车相比,输出功率完全一样,没有衰减;改装双燃料车 瞬间爆发力会有所下降,但不超过10%,车辆平稳运行后,双燃料发动机输出功率会略高于传统柴油机输出功率。

34.LNG车辆会不会比柴油车自重会重,对记重收费来说会不会造成损失?

根据不同生产厂家生产的LNG牵引头配备二个450升瓶自重比柴油车牵引头自重重一吨左右,国家对公路运输载货的标准为总质量不超55吨,意味着车辆本身自重越轻载货越多,车辆自重重一吨就少拉一吨货,车主就少挣一吨运费。

35.天然气发动机与柴油发动机比哪个寿命更长,更耐用?

发动机使用LNG做燃料,运行平稳、噪音低、不积炭、不稀释润滑油,能延长发动机使用寿命。

36.水泥搅拌车能否用LNG作为燃料,效果如何?

LNG水泥搅拌车现在已经大规模使用,以下是江苏淮安LNG水泥搅拌车运行状况:柴油水泥搅拌车百公里综合油耗为50L柴油,相同路况下,LNG水泥搅拌车百公里综合气耗为50kg,油气两类型车辆的能耗比为1:1.378,LNG水泥搅拌车与普通柴油车辆相比,燃料费用节约率为(7.8×50 – 6.22×50)÷7.8×50×100% = 20%。

37.LNG车为什么比柴油车贵,都贵在哪了?

主要是钢瓶价格贵,因为LNG车辆需要装置储存液化天然气的专用钢瓶,双层真空结构,汽车用LNG气瓶是作为一种低温绝热压力容器,设计有双层(真空)结构。内胆用来储存低温液态的液化天然气,在其外壁缠有多层绝热材料,具有超强的隔热性能,同时夹套(两层容器之间的空间)被抽成高真空,共同形成良好的绝热系统。其次是天然气发动机是新型产品,初期销量规模小,研发费用分摊比高。随着销量的增加,发动机价格会越来越接近甚至低于柴油发动机。

38.LNG钢瓶需要定期年检吗?能和车辆一起年检吗?

LNG钢瓶需要定期检验,但目前国家目前还没有明确规定,一旦出现问题由钢瓶厂家负责维修;天然气钢瓶的使用年限达10年以上,从客户购车起,基本不用更换气瓶;LNG钢瓶是单独检验,车辆年检时不对钢瓶进行检验。

39.放散气挺可惜的,有什么办法能够减少钢瓶放散吗?

LNG气化是由其自身特点决定的,车辆正常行驶或短暂停运气化的LNG直接进入发动机燃烧,不会发生放散现象;长期停驶时LNG自然气化后会造成LNG车用瓶内压力提高,达到LNG车用瓶安全阀设定压力时会起跳,释放气体,降低压力。车载钢瓶放散量有限,回收不经济,一般采取放散气体自然挥发方式。

40.LNG气瓶结霜与漏气是一回事吗?

LNG气瓶出现“结霜”现象的原因可能有:(1)当气瓶内胆的真空受到破坏,使绝热能力下降或失效,这时可能发生气瓶外壳“冒汗”或“结霜”现象,这种故障不是漏气现象。但若车辆出现这种现象,应报气瓶厂家维修。

(2)当气瓶管路出现泄漏时,在漏点可能出现“冒汗”或“结霜”现象,这种故障属于漏气,当车辆出现漏气故障,应检修后在使用车辆。

(3)当车辆运行使用LNG时,在气瓶头部会出现“ 冒汗”或“结霜”现象,这不是故障,而是一种正常现象。

(4)当环境温度过低或空气湿度过大,这时可能发生气瓶外壳“冒汗”或“结霜”现象,这不是故障,而是一种正常现象。

41.我购买的柴油车3年后要当做二手车处理,LNG汽车会不会不好出手?

LNG二手车会好出手的,因为只要LNG比柴油有明显的经济性优势存在,LNG汽车有发展前景,目前LNG车辆大约有四万辆,未来还会不断发展壮大,未来数年内加大力度建设LNG气站,LNG气站网点数量会成倍增加,另外随着用户对LNG汽车认知度的提高和国家不断出台对节能环保的LNG汽车的支持政策,所以其正规的二手车市场很快诞生的,目前掌握LNG二手车信息是非正规渠道的,如新疆开展LNG业务比较早地区收购LNG汽车等等,担心LNG二手车不好出手是不客观的,目前只是因为LNG汽车刚刚起步发展阶段,LNG是个新兴产品,会越来越紧俏。

42.LNG客车、重卡、公交主要有哪些生产企业?

随着车用LNG业务的迅速发展和天然气发动机、LNG供气系统技术的不断完善,国内主要汽车生产商都有LNG整车推向市场。LNG客车和公交主要生产商有郑州宇通、苏州金龙、厦门金龙、丹东黄海、聊城中通、重庆恒通、合肥安凯、福田欧辉客车等;LNG重卡主要生产商有陕汽重卡、中国重汽、北方奔驰、福田欧曼、东风天龙、集瑞联合重卡、华菱重卡、一汽解放等,此外水泥搅拌车、装载机、自卸车等大部分原可以配置柴油发动机的车辆现在都有以LNG作为燃料的车型推向市场。目前新奥能源已与陕汽、重汽、金龙、宇通等整车生产厂商签订战略合作协议,共同发展LNG业务。

43.目前生产LNG车辆的厂商和发动机厂商有哪些?

整车生产厂家有: 陕汽、东风、长安、重汽、金龙、宇通等。发动机生产厂家:潍柴、玉柴、无柴、上柴等目前我公司已与陕汽、重汽、金龙、宇通等整车生产厂商签订合作战略协议,共同发展LNG业务。

44.使用LNG汽车国家有什么优惠政策吗?

使用LNG车辆能够减少尾气排放,符合国家节能减排的要求,国家和地方对于LNG车辆有相应的优惠政策。例如:财政部交通运输部关于印发《交通运输节能减排专项资金管理暂行办法》的通知、交通运输节能减排专项资金申请指南等文件鼓励车辆使用清洁能源。

45.公交车用LNG单燃料还能享受燃油补贴吗?

公交企业属于社会公用事业,在城市中按照政府核定的线路、站点、票价和时刻表营运,公交车原来大部分都是耗油或油气两用,政府给予燃油补贴,现在公交车改用LNG单燃料后,只是燃料发生了变化,公交企业可以申请燃料补贴,具体标准可以参照替代燃油的量进行折算,相关具体政策都是地方政府决策制定的。此外,使用天然气后能够大幅度降低二氧化碳等汽车尾气污染物的排放,为地方政府政府节能减排做出贡献,可以根据国家财务部、交通运输部《交通运输节能减排专项资金管理暂行办法》申请节能减排专项资金。

第三篇:销售常见问题解析

1、网上了解价格

这类客户通常会连续转过几家店后才会决定是否购买,例如:在网上了解的是N518 来店后直接会问N518多少钱,销售员在这时千万不要直接报价,因为我们在价格方面没有优势,当客户问这个问题的时候是一个非常好的转型的一个机会,通常我会说您好,电纸书N518系列有三款型号,不知道您说的是哪款,此时要看是什么样的客户,如果是那种比较强势的就不要吞吞吐吐的,要自信一些很有底气的报价:N518我们全国的统一价格是XXXX当客户转身要走时一定不要放弃,紧跟一句您就看中518了吗?我们最新的产品您了解一下吧,我给您介绍一下好吗?通常客户都会停下脚步 等待你介绍,这时的机会很大,接下来你可以问客户问题,先要了解客户对产品到底了解多少,根据他所了解的一些产品相关的东西你在给出相应的问题和解决方案,切忌:想尽一切办法给客户惊喜,最后让他觉得你给介绍的产品才是他最需要的2、长期关注价格 经常在卖场里询价

这类客户通常会给销售员一个假象,路过我们店面的时候会顺嘴问一句你家XX电纸书多少钱,你说什么都不理你就让你报下价格,然后转身就走。

如果遇到类似这样的客户大家不要慌,越是这样的客户说明他越是谨慎,越是谨慎就越经不住我们吓,这时最好的武器就是我们的形象,案例:我遇到过这样的一个客户,产品是N518我报的价格是2980 当时他就很生气说了一句你们怎么这么贵,当时我就觉得有希望,我说不是我们价格贵,是全国都是这个价格 我又问他您问到多少钱啊 他很不情愿的告诉我2600 我就笑了一下您被骗了 应该是2300当我说完这句话的时候客户就是满脸的疑问紧接着我就很热情的把请进店里 跟他说产品售后,给他赠值服务,跟他讲为什么价格乱为什么什么价格都有在问他相关的需求为他提出其他的方案,有的时候即使你知道客户就是要高端你也要适当的推下低端很真诚的和他说:其实您用510就可以了完全不用那么高端的,让客户觉得你是在为他着想,是客户更加信任你 最后价格绝对不是问题。

备注(请专卖店的销售人员利用好自己的形象,我们的专业术语,一定把讲客户和谈客户区分开,朋友式的聊天和买卖式的交易谈话给人的感觉是完全不一样的,一切为客户着想 最后肯定是谈客户,而不是讲客户)

3.预算有限

我比较喜欢转型,我相信每个人都有自己的销售方法 我最喜欢的还是转型,因为在转型的过程当中你又机会和客户走的更近,让客户更加信任你,主要表现就是你在不停的为他解决问题,最后你选出的产品肯定是可以满足他需求的产品。转型的前提 对产品要非常了解,任意拿出几款产品都要说出各自的优势 无论高端低端都有个自得特点 用心就能想的出来 简单列举几个低端比高端价格除外。1 N510D20510待机时间超长 一定比d20长 稳定性好体积小 比D20更方便携带n517n518单手持的时候517明显比518要舒服,518指示灯亮影响看书,体积比517重,笔没有517的舒服

3d21f21我想每个人对这两款产品都很尴尬 有 D21的时候针对个人用户F21就不知道该怎么推了 不过个人发

现F21翻页速度要比D21快很多

请大家根据个人需求去推相应的产品,不要一味的推高端,一切为客户着想才是一个成功的销售员该做的。

产品技巧的演示

位置: 这里的位置是指你和客户所站的位置,1、你要站在一个不容易让客户很轻松就出店的位置可以理解为客户前面让他不容易摆脱你

2、尽量的和客户站的近一些 特别是中老年人 因为卖场一般都比较杂乱 有的时候你在介绍产品的时候容易听不清对你销售产品有影响

3、尽量让客户正面对着一个死角这样的话在你给他演示的过程中避免它看见代理商的店 让他的注意力集中在你的店里防止出去询价

演示内容:产品演示前尽量装一些市面上比较畅销的书籍,或比较不错的有声读物,来吸引客户,初步让客户产生兴趣,尽量找一些比较不错的PDF文件或者反复试验不出问题的 WORD文档,在演示带手写的电子书的时候一定要让客户体会到汉王手写识别的功能,在演示OCR软件的时候尽量用公司提供的演示样张。根据需求演示功能 给自己留有余地:销售过程中要问清客户需求了解需求后在演示相应的功能,在没有确定成交的情况和已经满足客户的初步需求的时候 剩下的产品特点先不要说,因为这一点可能成为我们和客户谈判最后的底牌,同时也是为转型做铺垫

销售过程中要问的问题

其实在销售过程中有很多问题,并不是固定的 我总结的这点也只不过是平时比较常问的,主要的目的还是要引导客户,帮助客户发现自己需求,但在问问题之前请销售员一定不要刻意的去问,是在两个人聊天聊的挺投机的时候去问,比如第一句就在客户进店点名电子书的时候去问,主要起两个作用 1、看客户是否对我们的产品有所了解,如果说听说过 或者直接说了解过那这个人很可能就知道产品的价格在报价的时候就要多加注意

2、如果说没了解过 那我们就可以热情主动的和客户说那您坐 我给您详细介绍下,紧接着拿出演示机给客户讲解。第二问题就是要近一步的锁定客户的目标。看客户到底需求什么样的产品,第三个问题主要还是在同客户沟通的时候去提出来这个问题的目的是吧客户引开,当客户说出喜欢看什么书时可以把我们准备好的资源给客户看,近一步交流 了解客户。当客户自己不知道该选择什么,或者你和客户已经谈的很好的并且很信任你你可以这样去发问 您觉得这款怎么样? 可能客户已经有理想的选择 可你提出这个问题可能会给他一个新的惊喜。第五个问题当客户被你说东心了在犹豫的时候千万不要和停下来。这个时候问这句话是最合适的 因为如果你帮他解决完他担心的问题他基本没有退路了当你给客户介绍完产品,并且很全面客户仍以言不发 起身要走 这时一定要上前问一句,肯定是你之前某个细节出了问题不要放弃近一步了解。在销售过程中没有固定话术,大家记住一点引导客户 不停的抛出问题和难题,然后在不停的解决你所给客户抛出去的难题。@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@2

首先,卖产品就是在卖自己,顾客之所以会选择购买你的产品就是因为相信你,相信从你口中介绍出来的产品,你在推销你的产品的同时也是在推销你自己,所以想做好销售就要先学会做人。

销售是一门学问,不是简单的介绍产品,报个价,这样的事情任何人都能做得来,就像“轻松销售法”里面所说的以明确、清楚、只锁定一个目标为一个方向。每一句就是要达到一个目的为一个单位。比如如果顾客正在询问产品可以这样主动反问顾客问题:“先生/小姐,请问您是个人用还是单位用”这样问的目的是要了解顾客是个人用户还是单位采购。

做销售最重要的一点就是要“强势”,在有些人看来强势是厉害一点,态度

蛮横一点,其实不然。强势是让你在跟顾客交流时能占有主动权,主动去引导顾客,使顾客跟着你的思路走下去,不要出现顾客带着你走的局面,这样销售产品会显的比较被动,换句话说顾客会欺负你,比如讨价还价,索要赠品等。如果你不能满足他的要求他就会拿不买来要挟你。

总的来说今天再看轻松销售法要比第一次看理解的更透彻一点,因为这毕竟是自己做零售的这一年来亲身经历的事情,想说的还有很多现在就分享到这里。@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@2222

将客户依照其个性分解为17种类型,根据这些客户类型的谈话特点,我们相应采取一些沟通谈话的对策

1、健谈型

 客户可能只顾自己的感受畅谈,不要让夸夸其谈的顾客将你引入和销售会谈毫不相关的其他话题中,要抓住一切机会礼貌地将谈话引入正题。(经常会有被说晕的感觉,听对方滔滔不决的讲他们公司和公司的产品)

2、少言寡语型

这种客户说得太少,甚至你问一句他就答一个字,不然就是用“哼”、“啊”作答。然而,你不要失去耐心,尽量不要用封闭式的提问,提出一些不能仅仅用“是”或“否”回答的问题,选择开放式的提问打开他的话匣子。话语要显示出你获得信息的热情,来调动客户的积极性。要比平日更具耐性,直至客户开尊口,并示意客户说下去。(说了半天对方没音,还要来一个喂?一定不要出现这个景象,一定要多问客户)关键字“什么”、“哪里”、“告诉”、“怎样”、“为什么”、“谈谈”、“如何”

3、因循守旧型

 这种客户会聆听,但会在购买决策上磨蹭,如果不及时采取促成交易的行动或条件,时间消耗下去也将会失掉这单生意。要向客户指出信息带来的帮助,如果有非常合适的项目也可以提供给他,或提出来更好的方案。如果这次你的提案和以往有些不同也可以强调新方案的优势,说明与以往的不可比性。

4、反对型

 往往客户上来先表示反对,来挫你的锐气。事实上是要争取谈判的主动地位。有可能反对是无理的,但你尽量不要与其争论和回击、保持冷静,听他把话说完,同时面带微笑表示谈判还可以进行下去。一方面你抓住客户提出的需要(主要是执行效果的)表示可以调整方案

如果你能够现场就把方案调整过来了,马上再来询问“如果这样如此--------可不可以?”;另一方面把客户的意见加到方案中,来确认“您看是不是这样?”。*若客户再反对,你可能要重新思考方案的价值了,*给自己留后路先撤回来*,请客户再给机会进行下一个方案*。

5、胆怯型

这类客户往往是没有经验或没有决策权,不愿意负责。如果是他没有经验,要提供引导、保证和支持,帮助客户克服成交的担心心理,鼓励客户,证明他决策的正确,使其放松压力,表示你可以成为他信任的朋友。若是他没有决策权,一方面可以陈述方案的要点与效果的描述令他确信这是个好生意;再有就是请他引见

能够决策的人物出场。

6、自我为中心型

 这种客户具有优越感、愿意用以上对下的口吻讲话。保持上下的距离会令他有良好的感觉。仔细地聆听并且恭维他,在合适的时候,向他征询意见,把他的主意变成你的生意。(如果您的业务可以辅射到河北,天津就建议您用个北方区更划算,您看呢?)

7、果断型

 这类客户很自信,知道将要得到什么。如果方案得到认同不要给客户过多的销售解释,尽快将注意力提到合同要求上。对客户关心的内容只给必要的细节,要严格忠于事实,因为他可能是通过细节来验证他的判断。

8、精明型

 这类客户善于搬出不同方案进行比较,或用一方的信息销售人员的方案对付另一方信息销售人员,要应用巧妙的恭维来表达对他的判为讨价能力的赞赏,同时表示在象他这样如此精明的客户面前,你就遇到了识货的人/懂行的人/专家。这类客户是砍价的专家,甚至胡砍一通,你就更要采用“示弱”的姿态,点明对方的精明已经使你无利可图,要对方手下留情。(您可真是高手,我们从来没有过您这么多的增值服务,希望您今年用的好,能与您长期合作我非常荣幸)

9、质疑型

 这类客户会找到方案中的问题点提出怀疑,不要躲避问题,对他的反对做出反应,但不要和他争论,确实是你的问题就坦然承认,也别做过多解释,否则你越描越黑,给他感觉问题越来越大。若不是你的问题,只是对方虚张声势或小题大做,要敢于说话,应用逻辑和已证明的事实,有可靠的数据支持最好。

10、牢骚型

 这是个事事不顺心的客户,牢骚是他发泄和减压的方式。你要特别快乐,不要被他的心情所影响,力图找到困扰他的麻烦是什么,搞清是与你方案有关的原因还是除此之外的原因。是与你有关的原因,要听清楚,表示同情和关切。是你能解决的不妨表示可以帮忙试试,千万别都揽下来!有些你做不到。若不是你的原因,客户他发完了牢骚可能就好了。别让客户陷在牢骚里,乐观开导,转移话题,为了继续谈你的事。(立邦)

11、条理型

 这类客户做事缓慢,似乎对你提出的每句话都在权衡,你急他不急。你表示很急切,可能他会采取更保守的态度,或用你急切的心态压制你。调整你的步伐,和他保持一致,放慢速度,你可能还可以获取对方更多的需求信息,在给对方的方案还可以尽量向细节上扩展,使他有充分的时间接受如做些宣传方面的信息。最好在见面前就给他方案,留时间让他消化,但也要注意方案的周全性。

12、依赖型

 这类客户在做决定时需要有人帮助、参谋,来证明他决定的正确。你最好把参谋的角色担当起来。为了解客户的需要,在你可以在首次接触时就问他一些问题,然后在后面跟进时说明你的产品方案就是为他量身订做的,能最好地满足他的需要。在谈话时将上一次的结果作为这次的开始,“您上次要我做一个有关某某的计划,我给您做好了”“我把和您沟通的内容

做了一个方案,我给您发过去您看一下?”。在细节的处理上,可以解释为就是围绕客户的要求制定的13、挑剔型

 这类客户看好信息可能也不会说OK,因为至少他要与你讨价还价,还会提出一些不满意,实际上,他需要你的东西才会花精力与你谈判,你必须强调信息的好处,后期的增值服务,证明我们的信息值这个价钱,而且不要把你能守住的底价过早地报出来,留有还价的余地。再有,做让步的时候要让对方感到,你的每次让步都是不容易的。而且可以让对方付出一些代价,例如你答应客户提出的优惠的价格,但要让对方介绍几个客户等。

14、冲动型

这类客户很容易下结论,谈判的节奏也比较快。见面要直接步入正题,不要绕圈子,可以提出建议,通过这个建议客户就能直接提出结果。就是说结论要从客户的嘴里说出来。你要注意的是把合同带上,能签就签,不往后拖。

15、分析型

 这类客户喜欢数据、事实和详尽的解说,这种客户富有条理,如果对客户提案需要做些数据支持的准备,在提案过程中注意你的条理性,给客户的信息越多越好。结论最好是清楚的,不要模棱两可。(一般在和市场部策划部负责人谈判时会遇到这样的问题,特别是一些大企业)

16、感情型

 这类客户对个人感情看得极重,你应该和这类客户逐渐熟识,每次通话都带给他一个好消息或提到一个好消息,让他能高兴起来。全身心地投入谈话并且保持你对他的专注。和他建立日常联系,建立私人友谊对工作深有益处。

17、固执型

这类客户总是装出很重要的样子,摆老大的派头。他如果对方案明显地表示出错误和不专业也不要指出来,向客户表明你是极尊重他的,抬高客户,同时也抬高你自己,有可能的话向他致以真挚的夸奖。注意他流露出来的意向,抓住他的意思,把你的主意变成是他的主意通过的可能性就会大大提高。

 一流的公司卖标准

 二流的公司卖品牌

 三流的公司卖服务

 四流的公司卖产品差导化

 五流的公司在同质化的产品下打价格战

只要用心,一切皆有可能

销售是一份灵活的工作,只要用心去分析和维护每一位新老客户,那么一定可以做出卓越的成绩

第四篇:质粒提取常见问题解析

质粒提取常见问题解析

涂布棒在酒精蘸一下,然后烧一下,能不能保证把所用的菌烧死?

参考见解:涂布棒可以在酒精中保藏,但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会,烧的是酒精而不是涂布棒。建议涂布棒还是干烧较长时间后,冷却了再涂。同时作多个转化时,应用几个涂布棒免得交叉污染。

原先测序鉴定没有问题的细菌,37℃摇菌后发现质粒大小或序列出现异常? 参考见解:这种情况出现的几率较小,常出现在较大质粒或比较特殊的序列中。解决办法:

1、降低培养温度,在20~25℃下培养,或室温培养可明显减少发生概率。

2、使用一些特殊菌株,如Sure菌株,它缺失了一些重组酶,如rec类等,使得质粒复制更加稳定。

3、质粒抽提有一个酶切不完全的原因就是溶液Ⅱ中的NaOH浓度过高造成的,请大家注意一下!

【有两种方法可以在提质粒前判断菌生长是否正常:

1、利用你的嗅觉。只要平时做实验仔细点就能闻出大肠杆菌的气味,新鲜的大肠杆菌是略带一点刺鼻的气味,但不至于反感。而在泥水状的菌液中你只要一凑过去就感觉到其臭无比或者没有气味,可以和正常菌液对照。

2、肉眼观察活化菌株。对于生长不正常的菌液进行划板验证或者稀释到浓度足够低涂板,第二天观察单克隆生长情况,LB平板生长的DH5A正常形态在37℃16h后直径在1mm左右,颜色偏白,半透明状,湿润的圆形菌斑,如果观察到生长过快,颜色又是泛黄的话基本上不正常了。】

未提出质粒或质粒得率较低,如何解决? 参考见解:

1、大肠杆菌老化:涂布平板培养后,重新挑选新菌落进行液体培养。

2、质粒拷贝数低:由于使用低拷贝数载体引起的质粒DNA提取量低,可更换具有相同功能的高拷贝数载体。

3、菌体中无质粒:有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如,柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定,因此不要频繁转接,每次接种时应接种单菌落。另外,检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。

4、碱裂解不充分:使用过多菌体培养液,会导致菌体裂解不充分,可减少菌体用量或增加溶液的用量。对低拷贝数质粒,提取时可加大菌体用量并加倍使用溶液,可以有助于增加质粒提取量和提高质粒质量。

5、溶液使用不当:溶液2和3在温度较低时可能出现浑浊,应置于37℃保温片刻直至溶解为清亮的溶液,才能使用。

6、吸附柱过载:不同产品中吸附柱吸附能力不同,如果需要提取的质粒量很大,请分多次提取。若用富集培养基,例如TB或2×YT,菌液体积必须减少;若质粒是非常高的拷贝数或宿主菌具有很高的生长率,则需减少LB培养液体积。

7、质粒未全部溶解(尤其质粒较大时):洗脱溶解质粒时,可适当加温或延长溶解时间。

8、乙醇残留:漂洗液洗涤后应离心尽量去除残留液体,再加入洗脱缓冲液。

9、洗脱液加入位置不正确:洗脱液应加在硅胶膜中心部位以确保洗脱液会完全覆盖硅胶膜的表面达到最大洗脱效率。

10、洗脱液不合适:DNA只在低盐溶液中才能被洗脱,如洗脱缓冲液EB(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH8.5)或水。洗脱效率还取决于pH值,最大洗脱效率在pH7.0-8.5间。当用水洗脱时确保其pH值在此范围内,如果pH过低可能导致洗脱量低。洗脱时将灭菌蒸馏水或洗脱缓冲液加热至60℃后使用,有利于提高洗脱效率。

11、洗脱体积太小:洗脱体积对回收率有一定影响。随着洗脱体积的增大回收率增高,但产品浓度降低。为了得到较高的回收率可以增大洗脱体积。

12、洗脱时间过短:洗脱时间对回收率也会有一定影响。洗脱时放置1min可达到较好的效果。

细菌离心加入溶液I蜗旋振荡后,发现菌体呈絮状不均匀或呈细砂状? 参考见解:

1、很可能是细菌发生溶菌,可减少培养时间或者试试平板培养,质粒提取前用PBS将菌落洗下,相较来说固体培养基上细菌生长的要好一些。

2、质粒抽提过程很大程度上是受细菌生长情况决定的,刚活化的菌比负80℃保存菌种所培养出来的菌液状态好,保存久的菌株可能会造成质粒浓度低,质粒丢失等不明原因。

3、判断生长的菌液是否正常,可以用肉眼观察,在光线明亮处摇荡新鲜培养液,如果发现菌液呈漂絮状,情况很好。如果发现呈泥水状,即看不到絮状,只是感觉很浑浊,则可能提不出好的质粒,或者没有质粒。

4、菌液不宜生长太浓,摇床速度不宜过高。达到OD600 1.5就可以了,(尤其是对于试剂盒提取要注意)另外如果只是简单的酶切验证根本无需酚氯仿抽提(安全考虑,慎重),只要溶液I/ II /III比例恰当,转管过程仔细吸取不会有太多杂志。

为什么加了溶液Ⅱ后,菌体没有逐渐由混浊变澄清?提出来的条带几乎没有,但是RNA很亮(没加RNA酶)?

溶液Ⅱ主要就是NaOH,如果菌液没有由混浊变澄清,参考见解:

1、可能是因为溶液储存不当,或屡次操作没有及时盖好溶液瓶盖,导致其吸收空气中的CO2失效。RNA在菌体中量较多,相对少量的菌体裂解,可有较DNA明显的条带。

2、可能是菌量大,加溶液Ⅱ后,菌体并不能完全裂解,所以没有变清,这也会导致质粒产率低下.

3、可能是质粒的拷贝数不高,质粒产率不高.如果是使用自己配的试剂,建议做中提或大提;或者买试剂盒提.用自己配的试剂,不加RNA酶,最后RNA是很亮的,要去除干净就要用比较好的RNA酶。

4、如果不是试剂的原因,可能是质粒表达的过程中使膜蛋白变化(数量变多),很难使用碱裂解法,可以尝试用其他比较剧烈的方法(比如高温或者低温研磨等),然后使用一般的发放。

5、可能质粒随乙醇一起倒掉了。

加入溶液II后,菌液仍然呈浑浊状态,或者混浊度没有明显的改变? 裂解不完全,参考见解:

1、问题可能是发生在溶液II上。首先看看10%SDS是否是澄清的?NaOH是否是有效的?如果使用的是试剂盒,也要首先确认溶液II是否澄清没有沉淀?

2、可能是细菌浓度很高,适当调整增加溶液I/II/III的体积。

3、可能是“杂菌”污染,如果菌液生长异常快,就有可能被杂菌污染。这种情况一般表现为和目的菌有相同的抗性,生长速度异常,能够提出质粒,跑胶的条带也异常的亮,但产物不是自己想要的质粒,要特别注意一下。抽提DNA去除蛋白质时,为什么要是酚/氯仿混合使用?怎样使用酚与氯仿较好? 参考见解:酚与氯仿都是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性。经过离心,变性蛋白质的密度比水的密度大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开。而酚与氯仿有机溶剂比重更大,保留在最下层。

作为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水相有一定程度的互溶,大约10%~15%的水溶解在酚相中,因而损失了这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水不相混溶,不会带走DNA。所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好。经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第二次变性蛋白质,此时一起将酚带走。也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合(1:1)使用。

呈粉红色的酚可否使用?如何保存酚不被空气氧化?

参考见解:保存在冰箱中的酚,容易被空气氧化而变成粉红色的,这样的酚容易降解DNA,一般不可以使用。为了防止酚的氧化,可加入疏基乙醇和8-羟基喹琳至终浓度为0.1%。8-羟基喹琳是带有淡黄色的固体粉末,不仅能抗氧化,并在一定程度上能抑制DNase的活性,它是金属离子的弱螯合剂。用Tris pH8.0水溶液饱和后的酚,最好分装在棕色小试剂瓶里,上面盖一层Tris水溶液或TE缓冲液,隔绝空气,以装满盖紧盖子为宜,如有可能,可充氮气防止与空气接触而被氧化。平时保存在4℃或-20℃冰箱中,使用时,打开盖子吸取后迅速加盖,这样可使酚不变质,可用数月。

为什么用酚与氯仿抽提DNA时,还要加少量的异戊醇?

参考见解:在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力,可以降低抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24:1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25:24:1(不必先配制,可在临用前把一份酚加一份24:1的氯仿与异戊醇即成),同时异戊醇有助于分相,使离心后的上层水相,中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定。加入酚/仿抽提,离心后在水相和有机相间没有出现变性蛋白相层,在随后的乙醇沉淀步骤中却出现大量的半透明沉淀,溶解后发现蛋白浓度很高?

乙醇沉淀时,较纯的质粒沉淀是白色的(PEG纯化的沉淀是透明的肉眼不易发现),如沉淀是半透明的凝胶状,则应是蛋白含量高。参考见解:首先看看平衡酚是否已被氧化?pH是否是8.0?其次检测溶液III反应完成后的离心上清pH是否在8.0左右?有时由于溶液III配置的问题,会出现溶液III反应后离心的上清pH与8.0偏差较大的现象,这会降低平衡酚抽提蛋白抽的有效性,pH偏差过大也会导致水相和平衡酚互溶。使用酚仿抽提方法,质粒的纯度很好,但酶切不能完全切开? 参考见解:

1、确认酶的有效性。

2、平衡酚是否被氧化(正常是黄色,而氧化后是棕色的)。

3、是否不小心吸入了痕量的酚。

4、乙醇沉淀后,70%乙醇漂洗的是否充分(残留的盐类会影响酶切)。

5、乙醇漂洗后是否完全干燥(残留的乙醇会影响酶切)。

碱裂解法提取的质粒DNA进行琼脂糖电泳进行鉴定时,看到的三条带分别是什么? 参考见解:碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA,得到的三条带是以电泳速度的快慢排序的,分别是超螺旋、开环和复制中间体(即没有复制完全的两个质粒连在了一起)。如果你不小心在溶液II加入后过度振荡,会有第四条带,这条带泳动得较慢,远离这三条带,是20-100kb的大肠杆菌基因组DNA的片断。提取质粒中RNA没有去除? 可能是RNase失效或效率不高。参考见解:

1、更换RNase A,并保证其储存条件是正确的

2、手工提取质粒的,可单独增加一步去除RNA的步骤,溶液III反应后,在离心的上清中加RNase,室温下去除RNA 10min~30min(需要保证RNase A是经过失活DNase的),同时较高温度(如50℃)会更加快速完全的去除RNA,经验所得经过高温处理的质粒质量不是很高。

提取的质粒电泳后,为连续的一片火箭状? 参考见解:

1、质粒如果盐离子多,会有走胶变形的现象,如果提到的质粒不够纯,会有电泳条带不平齐的现象。

2、当电压太大时,容易出现火箭状,而降解应该是弥散状。

3、可能是宿主菌影响的,质粒抽提好后,用酚-氯仿处理一下再酶切,若有改善,则为宿主菌影响。转化到其它宿主菌再切。

4、NaOH的浓度过高,会出现火箭状的结果。

用碱裂解法提取质粒,裂解5分钟,没有用酚 / 氯仿抽提,最后用灭菌水溶解质粒DNA15min。双酶切后跑胶一条带都没有,原因是什么? 参考见解:

1、溶解时间稍微短了点,但是根据各个实验室RNase不同,这个条件是不同的。在溶解的过程要涡旋处理促进溶解。

2、确认一下酶切过程中是不是有DNA酶的污染,比如酶切体系的Buffer或者是水,特别是水中;其次是酶切体系的问题;建议再把提取的产物用70%酒精重新洗涤一遍,也可以用酚 / 氯仿重新抽提一下。

3、也可能在用乙醇洗时把质粒倒掉了。

4、没有用RNase消化,不要用放久的 RNase否则会有DNA酶的污染;

5、在没有进行酶切时,把所提的质粒跑一下核酸电泳看看,如果是提核酸的问题那这一步电泳结果应该没有大于三千的条带,这样可以先排除核酸提取的问题.若是没有酶切时间过长等其他问题的话可以那可以检查一下所用的溶解DNA的溶液是否有DNAse污染的问题,建议将超纯水换成TE。

用碱裂解法提取的质粒,取3ul转化感受态大肠杆菌涂amp抗性平板,却出现阳性克隆较少(含绿色荧光蛋白,阳性克隆应该显绿色,在紫外灯下非常明显,就几十个菌落)大部分菌落不发绿,这些菌落比发绿的菌落小一些的现象,为什么? 参考见解:

1、做一次阴性对照,拿空白菌涂布在含amp的平板上,如生长,说明amp过期,一般这种情况不多见。一般粉末状的amp不容易失效,如果amp有效的话,可以配制远高于标准的浓度,如果细菌耐药的话,也能生长良好,如不耐药,则放置数天仍不见细菌生长。

2、拿阴性和阳性的细菌各取数个放于高浓度的amp液体培养基中,如能生长,说明空白菌中带有耐药菌,建议换菌.3、提质粒的菌受污染了,重新划线挑单克隆。

培养基、抗生素、质粒提取都没有问题,而细菌菌液提取不到质粒?

参考见解:如果是氨苄抗性的,有可能是质粒丢失造成的。主要是培养时间较长,导致培养基中的beta-内酰胺酶过多,作用时间过长,同时培养基pH值降低,氨苄青霉素失活,从而使无质粒的菌株大量增殖。解决的办法:可以添加葡萄糖,缩短培养时间,改用羧苄青霉素。|||谢谢楼主,还有什么专题也要贴出来啊!|||谢谢分享

到一个小tips。转帖过来和菜鸟分享。大虾凭手感就可以了,我们还是要学学的,受益匪浅

1.溶液I—溶菌液:

溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。

EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在,有利于溶菌酶的作用,因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。

2.溶液II-NaOH-SDS液:

NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。

SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。(2)解聚细胞中的核蛋白。(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-„R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。

3.溶液III--3mol/L NaAc(pH4.8)溶液:

NaAc的水溶液呈碱性,为了调节pH至4.8,必须加入大量的冰醋酸。所以该溶液实际上是NaAc-HAc的缓冲液。用pH4.8的NaAc溶液是为了把pH12.6的抽提液,调回pH至中性,使变性的质粒DNA能够复性,并能稳定存在。而高盐的3mol/L NaAc有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和核酸上的电荷,减少相斥力而互相聚合,后者是因为钠盐与SDS-蛋白复合物作用后,能形成较小的钠盐形式复合物,使沉淀更完全。

4.为什么用无水乙醇沉淀DNA?

用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。

5.在用乙醇沉淀DNA时,为什么一定要加NaAc或NaCl至最终浓度达0.1~0.25mol/L? 在pH为8左右的溶液中,DNA分子是带负电荷的,加一定浓度的NaAc或NaCl,使Na+中和DNA分子上的负电荷,减少DNA分子之间的同性电荷相斥力,易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀,当加入的盐溶液浓度太低时,只有部分DNA形成DNA钠盐而聚合,这样就造成DNA沉淀不完全,当加入的盐溶液浓度太高时,其效果也不好。在沉淀的DNA中,由于过多的盐杂质存在,影响DNA的酶切等反应,必须要进行洗涤或重沉淀。

6.加核糖核酸酶降解核糖核酸后,为什么再要用SDS与KAc来处理?

加进去的RNase本身是一种蛋白质,为了纯化DNA,又必须去除之,加SDS可使它们成为SDS-蛋白复合物沉淀,再加KAc使这些复合物转变为溶解度更小的钾盐形式的SDS-蛋白质复合物,使沉淀更加完全。也可用饱和酚、氯仿抽提再沉淀,去除RNase。在溶液中,有人以KAc代替NaAc,也可以收到较好效果。

7.为什么在保存或抽提DNA过程中,一般采用TE缓冲液?

在基因操作实验中,选择缓冲液的主要原则是考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用。磷酸盐缓冲系统(pKa=7.2)和硼酸系统(pKa=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围(pH),可作DNA的保存液,但在转化实验时,磷酸根离子的种类及数量将与Ca2+产生Ca3(PO4)2沉淀;在DNA反应时,不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同,有的要求高离子浓度,有的则要求低盐浓度,采用Tris-HCl(pKa=8.0)的缓冲系统,由于缓冲液是TrisH+/Tris,不存在金属离子的干扰作用,故在提取或保存DNA时,大都采用Tris-HCl系统,而TE缓冲液中的EDTA更能稳定DNA的活性。

8.如何选择聚乙二醇(6000)的浓度来沉淀DNA?

采用PEG(6000)沉淀DNA,大小不同的DNA分子所用的PEG的浓度也不同,PEG的浓度低,选择性沉淀DNA分子量大,大分子所需PEG的浓度只需1%左右,小分子所需PEG浓度高达20%。本实验选择性沉淀4.3kb的pBR322质粒DNA,每毫升加入0.4毫升的30% PEG,其最终PEG浓度为12%。PEG选择性沉淀DNA的分辨率大约100bp。

9.抽提DNA去除蛋白质时,怎样使用酚与氯仿较好?

酞与氯仿是非极性分子,水是极性分子,当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时,蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去,使蛋白失去水合状态而变性。经过离心,变性蛋白质的密度比水的密度为大,因而与水相分离,沉淀在水相下面,从而与溶解在水相中的DNA分开。而酚与氯仿有机溶剂比重更大,保留在最下层。

作为表面变性的酚与氯仿,在去除蛋白质的作用中,各有利弊,酚的变性作用大,但酚与水相有一定程度的互溶,大约10%~15%的水溶解在酚相中,因而损失了这部分水相中的DNA,而氯仿的变性作用不如酚效果好,但氯仿与水不相混溶,不会带走DNA。所以在抽提过程中,混合使用酚与氯仿效果最好。经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚,由于酚与氯仿是互溶的,可用氯仿第二次变性蛋白质,此时一起将酚带走。也可以在第二次抽提时,将酚与氯仿混合(1:1)使用。

10.为什么用酚与氯仿抽提DNA时,还要加少量的异戊酵?

在抽提DNA时,为了混合均匀,必须剧烈振荡容器数次,这时在混合液内易产生气泡,气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力,所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24:1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25:24:1(不必先配制,可在临用前把一份酚加一份24:1的氯仿与异戊醇即成),同时异戊醇有助于分相,使离心后的上层水相,中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定。

11.为什么要用pH8的Tris水溶液饱和酚?呈粉红色的酚可否使用?如何保存酚不被空气氧化?

因为酚与水有一定的互溶,苯酚用水饱和的目的是使其抽提DNA过程中,不致吸收样品中含有DNA的水分,减少DNA的损失。用Tris调节至pH为8是因为DNA在此条件下比较稳定。在中性或碱性条件下(pH5~7),RNA比DNA更容易游离到水相,所以可获得RNA含量较少的DNA样品。

保存在冰箱中的酚,容易被空气氧化而变成粉红色的,这样的酚容易降解DNA,一般不可以便用。为了防止酚的氧化,可加入疏基乙醇和8-羟基喹琳至终浓度为0.1%。8-羟基喹琳是带有淡黄色的固体粉末,不仅能抗氧化,并在一定程度上能抑制DNase的活性,它是金属离子的弱螯合剂。用Tris pH8.0水溶液饱和后的酚,最好分装在棕色小试剂瓶里,上面盖一层Tris水溶液或TE缓冲液,隔绝空气,以装满盖紧盖子为宜,如有可能,可充氮气,防止与空气接触而被氧化。平时保存在4℃或-20℃冰箱中,使用时,打开盖子吸取后迅速加盖,这样可使酚不变质,可用数月。

第五篇:应届生简历常见问题解析[范文]

应届生简历常见错误解析

毕业季来临,大批应届生走出校门,寻找工作,开始职业生涯的第一步就是要做一份个人简历,而对于应届生来说,经验的缺失导致简历中常常出现很多问题,今天小编就为大家解析一下应届生简历的常见错误。

1.简历不简

所谓简历,以简为主。然而很多应届生自身没有多少履历,却能搞出厚厚的一沓简历,仿佛简历写的越多,阅历就越丰富,其实是大错特错。

企业hr看简历的时间往往只有一两分钟,如果在这个时间内没有找到需要的信息,那么很有可能被pass掉,因此,应届生简历要讲求简洁明了,把自己的主要信息和经历简明扼要的写出来,更容易俘获hr的心。

2.华而不实

小编经常会遇到这样的简历:有着精美的封面和包装,色彩斑斓,格式前卫,再附上一张靓照,然而内容却乏陈可数。要知道hr是在工作而不是逛艺术展,hr想要的是你的职业素养和个人信息,千万不要本末倒置,以为通过简历的包装就能吸引hr的眼球,这往往是出力不讨好的事。

3.没有重点

一份好的简历一定是重点突出的,比如你需要应聘技术性工作,就注重叙述你的作品,证书等资料,而如果应聘销售类职位,则可以着重体现自己的实习经历和一些社团学生会经历等,做到与应聘职位相符合,很多应届生的简历如同流水账,重点不突出,要知道,hr可是没有时间帮你提炼信息。

以上就是职通天下人才网总结的应届生简历常见问题,希望找工作的同学们有则改之,无则加勉。

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