大众汽车使用常见问题解析ZT

第一篇：大众汽车使用常见问题解析ZT

大众汽车使用常见问题解析ZT

Q01：大众汽车应多久保养一次？

A01：根据德国原厂的要求，大众汽油车种每一年或每15,000公里（以先到者为准）作一次换油保养。每一年或每30,000公里（以先到者为准）作一次检查保养。详细保养项目可至标达授权保养厂参看原厂保养表。由于南方地区气候炎热潮湿、污染及行驶里程数较低，我们建议可缩短保养期限，以确保爱车车况；至于期限缩短至何程度，则依各人实际用车状况而定，一般而言，每半年或每7,500公里作一定保养应较合理。

Q02：我的大众车应该使用什么机油？

A02：以下是VW原厂的机油规范：

501 01复级润滑油价钱较合理 特性：适用于气候温和地带适用各种不同的引擎负荷及温度低磨擦阻力特别适应严苛条件下使用，如炎热地区或山路行驶、拖尾车等

505 00复级润滑油 特性： 适用所有VW柴油引擎目前所有大众保养厂所提供的机油皆符合VW规范，大众车主可放心使用。

Q03：机油为何会减少？

A03：机油对引擎而言，好比人体的血液，重要性不言可喻，引擎运转中机油不断被机油泵运送到引擎各部位进行润滑、清洁、散热等作用，再回收过滤后重复使用，看起来不应减少。但实际使用上，机油确会减少。以下就是可能原因：

泄漏：此原因在泄漏处会湿润或滴油，容易发现理解。

引擎磨损吃油：引擎长期使用后，活塞环或汽门油封会磨损导致机油进入引擎燃烧室内而被烧掉，严重时排气管会冒蓝烟。

新车磨合期：新车磨合期间，由于各零件间未完全磨合，导致间隙存在使机油进入燃烧室消耗，此种情况在磨合期后会自动消失。磨合期间一般约在半年或15,000公里左右，也有可能更长或较短。

正常消耗：机油为一种流质液体，在长期高温下，小部份会蒸发成气体而消耗，另外活塞环并非完美的密封，使用中小部份机油也会进入燃烧室消耗。一般而言，每5,000公里可能减少半公升机油。

故由第4点可知，即使完全正常引擎或多或少也会消耗机油，故车主定期检查机油尺高度是非常重要的，如果确知引擎机油消耗量较高时，可选择黏较高机油作为因应，一般可稍减机油消耗量。

大众汽车自2000年车型起安装有机油油面感知器，在机油不足时会发出声响及亮橘色灯警示，此时不必惊慌，仍可安心行驶，然后尽速添补机油即可。

Q04：我有需要加机油添加剂吗？

A04：机油是一种由基础油添加复杂配方（抗氧化剂、黏度改善剂、防泡剂、抗磨擦剂……），而成的润滑剂。只要不是假油一般都符合API（美国石油工程协会）要求，如果任意添加不明成份，将破坏原配方的平衡性未蒙其利先受其害。为了减少污染所有车系皆安装触媒转换器（Catalytic converter）及含氧感知器（O 2 sensor），将对人体有害的一氧化碳（CO）、氮氧化合物（NOX）及碳氢化合物（HC）转化成对人体无害的二氧化碳（CO2）及水（H2O），但是铅、磷、硫等物质对此系统有害，这也是为什么生产汽油要使用硫设备，及不再添加铅于无铅汽油中的原因，一般机油添加剂中皆有磷及硫的成份在内，会毒死触媒系统造成损坏，故未经核可的汽油、机油添加剂不用为妙。

Q05：我的车为什么很耗油？

A05：汽车耗油的原因很多，可能原因如下:

机械因素：

．汽车故障导致效率下降，请回厂检修确定无故障。

．汽车引擎磨损老旧：大修引擎。

．胎压不足：请时常注意轮胎状况，保持胎压，不但省油且增长使用寿命。

．刹车咬住：可自行作慢速空档滑行测试，确定刹车无此状况。

人为操作因素：

．温车过久：由于现代引擎材质、机油、控制系统皆有长足进步，温车已成为过时习惯，过度温车徒然浪费汽油及制造污染，正确的作法，在发动后至多30秒钟确认所有警示灯熄灭即可上路。

．狂暴驾驶：急踩油门加速又紧急刹车，或飙至极速，除了耗油外，机械亦加速磨损，应尽量避免。．开冷气睡觉或长时间等人而不熄火，除了耗油，且引擎容易积碳。

．长时间使用不必要的电器，如除雾线、加强雾灯等，因为天下没有白吃的午餐，电力的消耗也会转嫁于汽油消耗。

交通因素：

．短程使用：如上班地点距住家非常近，引擎可能尚未加热至正常工作温度，即抵达目的地，由于冷引擎效率低，燃料大半消耗于将引擎及冷却水加温，耗油是不可避免的，此种用车状况亦会导致引擎积碳。．巿区行车：巿区行车因堵车及红绿灯，停停行行耗油量甚至数倍于高速公路行车。

其它因素：

．车上如放置过多的杂物长期下来也会导致耗油量增加。

总结：

．汽车是文明的产物，它的出现方便了现代生活，但也带来了污染、噪音及减少运动的机会，所以，如果短程又不赶时间何妨安步当车，也许您又会有新的人生体会呢？！

Q06：大众汽车可否使用无铅汽油？

A06：高级汽油中添加铅的目的有：a.提高燃油抗爆值，防止爆震、提升引擎效率；b.润滑引擎燃烧室内的进排气门座，如果气门座未经硬化处理的引擎使用无铅汽油，就容易导致气门座缺乏润滑而损坏。

大众汽车早于1976年开始即全面生产使用无铅汽油的引擎，所以中油停用高级汽油后，车主可放心改用无铅汽油而不会对引擎产生任何损坏。

Q07：大众汽车应使用95或98无铅汽油？

A07：大众汽车为提高效率，引擎压缩比皆在10.0:1以上，故至少应使用95无铅汽油，如果使用95无铅汽油后，当加速或爬坡时仍有爆震声（轻脆敲击声），则可改用98无铅汽油。

Q08：引擎为什么会积碳？

A08：汽油主要成份为碳氢化合物，当燃烧不完全（冷车时较严重）或汽油品质不良时，就会在燃烧室内产生一层积碳，使热传导不良及提高压缩比，导致引擎加速时会听到金属敲击声一般叫爆震（knocking）。

轻微爆震对引擎无任何影响，在维修试车时甚至可作为引擎正工作于巅峰的证明，大众汽车引擎控制系统具（ECU），有所谓的爆震感知侦测装置（knocking sensor），当轻微爆震产生时，系统听到特定频率声响，立刻自动延迟点火至适当角度，以消除敲击声，所以当您驾驶大众汽车加速时也许会听到数声轻微敲击声，但随后立即消失，此为系统运作的正常现象。

Q09：为什么冷天早上启动引擎会抖动熄火？

A09：早上引擎启动不良原因很多，分析如下：

引擎有故障，如进气系统漏气，汽油油压不足，零件损坏等。

汽油品质不良，导致进气门背面积碳，而喷射系统喷油嘴直接将汽油喷在进气门背面，当早上冷启动时，积碳已完全干燥，此时它就像一块海棉，吸附汽油，造成短暂缺油，所以引擎会抖动，甚至熄火，但再启动后即较佳或完全正常，一般预防重于治疗，建议加原厂汽油添加剂G17可防止积碳。

汽油产品的挥发性太差，汽油喷入引擎内必须吸热气化后，才能被引擎点燃利用，当挥发性不足时，部份汽油仍然在液态造成引擎冷启动缺油，热车后温度提高，汽化良好，问题自然解决，最近一个例子就是中油推出98无铅汽油造成许多汽车冷启动不良，大家应该不陌生。

由于环保观念抬头，废气防治法规且益严格，汽车产生最多污染的阶段就是冷启动至温车，所以各大制造厂皆针对此区域研发最新科技。但总而言之就是精准的计量引擎燃油喷射量，绝不多给，因此造成此区域非常敏感，当外在条件变动时，很容易影响冷启动，但热车后则一切正常，对于修护者而言实在百口莫辩，但为子孙着想，再启动一次而已，应可忍受而为环保尽一份力。

Q10：刹车油使用中减少怎么办？

A10：打开引擎盖引擎室内的刹车油壶上有高线（MAX）及低线（MIN）两条线，刹车油面在这两条线间皆属正常，如果来令片使用一段时间磨损后油面就会因补偿作用而下降，但不会低于低线（MIN），此时切勿添加，否则下次换新来令片时刹车油就会太多甚至满出。VW汽车使用DOT4刹车油，不可与一般刹车油（如DOT3）混用，根据经验即使规格相同但品牌不同的刹车油也应避免，毕竟刹车是有关安全的系统。

刹车油VW原厂规定每24个月更换一次，但南方高湿高热，我们诚心建议可改为一年更换一次较安全。如果因泄漏而减少至油面下限，仪表板上的警示灯会亮起，这时就要立刻安排修护，找出漏油原因加以修复。

第二篇：大众汽车使用常见问题及解答

大众汽车使用常见问题及解答-适用于Golf、Bora、Polo……

Q1：大众汽车应多久保养一次？

A1：根据德国原厂的要求，大众汽油车种每一年或每15,000公里（以先到者为准）作一次换油保养。每一年或每30,000公里（以先到者为准）作一次检查保养。

详细保养项目可至标达授权保养厂参看原厂保养表。

由于台湾地区气候炎热潮湿、污染及行驶里程数较低，我们建议可缩短保养期限，以确保爱车车况；至于期限缩短至何程度，则依各人实际用车状况而定，一般而言，每半年或每7,500公里作一定保养应较合理。

Q2：我的大众车应该使用什么机油？

A2： 以下是VW原厂的机油规范：

501 01复级润滑油价钱较合理 特性：良好清洁功能抗氧化

500 00复级高级润滑油 特性：低磨擦阻力具有500 00及501 01特性适用所有VW柴油引擎 目前所有大众保养厂所提供的机油皆符合VW规范，大众车主可放心使用。

Q3：机油为何会减少？

A3：机油对引擎而言，好比人体的血液，重要性不言可喻，引擎运转中机油不断被机油泵运送到引擎各部位进行润滑、清洁、散热等作用，再回收过滤后重复使用，看起来不应减少。但实际使用上，机油确会减少。以下就是可能原因：

泄漏：此原因在泄漏处会湿润或滴油，容易发现理解。

引擎磨损吃油：引擎长期使用后，活塞环或汽门油封会磨损导致机油进入引擎燃烧室内而被烧掉，严重时排气管会冒蓝烟。

新车磨合期：新车磨合期间，由于各零件间未完全磨合，导致间隙存在使机油进入燃烧室消耗，此种情况在磨合期后会自动消失。磨合期间一般约在半年或15,000公里左右，也有可能更长或较短。

正常消耗：机油为一种流质液体，在长期高温下，小部份会蒸发成气体而消耗，另外活塞环并非完美的密封，使用中小部份机油也会进入燃烧室消耗。一般而言，每5,000公里可能减少半公升机油。

故由第4点可知，即使完全正常引擎或多或少也会消耗机油，故车主定期检查机油尺高度是非常重要的，如果确知引擎机油消耗量较高时，可选择黏较高机油作为因应，一般可稍减机油消耗量。

大众汽车自2000年车型起安装有机油油面感知器，在机油不足时会发出声响及亮橘色灯警示，此时不必惊慌，仍可安心行驶，然后尽速添补机油即可。

Q4：我有需要加机油添加剂吗？

A4：机油是一种由基础油添加复杂配方（抗氧化剂、黏度改善剂、防泡剂、抗磨擦剂……），而成的润滑剂。只要不是假油一般都符合API（美国石油工程协会）要求，如果任意添加不明成份，将破坏原配方的平衡性未蒙其利先受其害。

为了减少污染所有车系皆安装触媒转换器（Catalytic converter）及含氧感知器（O2 sensor），将对人体有害的一氧化碳（CO）、氮氧化合物（NOX）及碳氢化合 物（HC）转化成对人体无害的二氧化碳（CO2）及水（H2O），但是铅、磷、硫等物质对此系统有害，这也是为什么生产汽油要使用脱硫设备，及不再添加铅于无铅汽油中的原因，一般机油添加剂中皆有磷及硫的成份在内，会毒死触媒系统造成损坏，故未经核可的汽油、机油添加剂不用为妙。

Q5：我的车为什么很耗油？

A5：汽车耗油的原因很多，可能原因如下:

机械因素：

．汽车故障导致效率下降，请回厂检修确定无故障。

．汽车引擎磨损老旧：大修引擎。

．胎压不足：请时常注意轮胎状况，保持胎压，不但省油且增长使用寿命。

．剎车咬住：可自行作慢速空档滑行测试，确定剎车无此状况。人为操作因素：

．温车过久：由于现代引擎材质、机油、控制系统皆有长足进步，温车已成为过时习惯，过度温车徒然浪费汽油及制造污染，正确的作法，在发动后至多30秒钟确认所有警示灯熄灭即可上路。

．狂暴驾驶：急踩油门加速又紧急剎车，或飙至极速，除了耗油外，机械亦加速磨损，应尽量避免。

．开冷气睡觉或长时间等人而不熄火，除了耗油，且引擎容易积碳。

．长时间使用不必要的电器，如除雾线、加强雾灯等，因为天下没有白吃的午餐，电力的消耗也会转嫁于汽油消耗。

交通因素：

．短程使用：如上班地点距住家非常近，引擎可能尚未加热至正常工作温度，即抵达目的地，由于冷引擎效率低，燃料大半消耗于将引擎及冷却水加温，耗油是不可避免的，此种用车状况亦会导致引擎积碳。

．巿区行车：巿区行车因堵车及红绿灯，停停行行耗油量甚至数倍于高速公路行车。

其它因素：

．车上如放置过多的杂物长期下来也会导致耗油量增加。

总结：

．汽车是文明的产物，它的出现方便了现代生活，但也带来了污染、噪音及减少运动的机会，所以，如果短程又不赶时间何妨安步当车，也许您又会有新的人生体会呢？！

Q6：大众汽车可否使用无铅汽油？

A6：高级汽油中添加铅的目的有：a.提高燃油抗爆值，防止爆震、提升引擎效率；b.润滑引擎燃烧室内的进排气门座，如果气门座未经硬化处理的引擎使用无铅汽油，就容易导致气门座缺乏润滑而损坏。

大众汽车早于1976年开始即全面生产使用无铅汽油的引擎，所以中油停用高级汽油后，车主可放心改用无铅汽油而不会对引擎产生任何损坏。

Q7：大众汽车应使用95或98无铅汽油？

A7：大众汽车为提高效率，引擎压缩比皆在10.0:1以上，故至少应使用95无铅汽油，如果使用95无铅汽油后，当加速或爬坡时仍有爆震声（轻脆敲击声），则可改用98无铅汽油。

Q8：引擎为什么会积碳？

A8：汽油主要成份为碳氢化合物，当燃烧不完全（冷车时较严重）或汽油品质不良时，就会在燃烧室内产生一层积碳，使热传导不良及提高压缩比，导致引擎加速时会听到金属敲击声一般叫爆震（knocking）。

轻微爆震对引擎无任何影响，在维修试车时甚至可作为引擎正工作于巅峰的证明，大众汽车引擎控制系统具（ECU），有所谓的爆震感知侦测装置（knocking sensor），当轻微爆震产生时，系统听到特定频率声响，立刻自动延迟点火至适当角度，以消除敲击声，所以当您驾驶大众汽车加速时也许会听到数声轻微敲击声，但随后立即消失，此为系统运作的正常现象。

Q9：为什么冷天早上启动引擎会抖动熄火？

A9：早上引擎启动不良原因很多，分析如下：

引擎有故障，如进气系统漏气，汽油油压不足，零件损坏等。

汽油品质不良，导致进气门背面积碳，而喷射系统喷油嘴直接将汽油喷在进气门背面，当早上冷启动时，积碳已完全干燥，此时它就像一块海棉，吸附汽油，造成短暂缺油，所以引擎会抖动，甚至熄火，但再启动后即较佳或完全正常，一般预防重于治疗，建议加原厂汽油添加剂G17可防止积碳。

汽油产品的挥发性太差，汽油喷入引擎内必须吸热气化后，才能被引擎点燃利用，当挥发性不足时，部份汽油仍然在液态造成引擎冷启动缺油，热车后温度提高，汽化良好，问题自然解决，最近一个例子就是中油推出98无铅汽油造成许多汽车冷启动不良，大家应该不陌生。

由于环保观念抬头，废气防治法规且益严格，汽车产生最多污染的阶段就是冷启动至温车，所以各大制造厂皆针对此区域研发最新科技。但总而言之就是精准的计量引擎燃油喷射量，绝不多给，因此造成此区域非常敏感，当外在条件变动时，很容易影响冷启动，但热车后则一切正常，对于修护者而言实在百口莫辩，但为子孙着想，再启动一次而已，应可忍受而为环保尽一份力。

Q10：剎车油使用中减少怎么办？

A10：打开引擎盖引擎室内的剎车油壶上有高线（MAX）及低线（MIN）两条线，剎车油面在这两条线间皆属正常，如果来令片使用一段时间磨损后油面就会因补偿作用而下降，但不会低于低线（MIN），此时切勿添加，否则下次换新来令片时剎车油就会太多甚至满出。

VW汽车使用DOT4剎车油，不可与一般剎车油（如DOT3）混用，根据经验即使规格相同但品牌不同的剎车油也应避免，毕竟剎车是有关安全的系统。

剎车油VW原厂规定每24个月更换一次，但台湾高湿高热，我们诚心建议可改为一年更换一次较安全。

如果因泄漏而减少至油面下限，仪表板上的警示灯会亮起，这时就要立刻安排修护，找出漏油原因加以修复。

Q11：剎车来令片应多久更换？

A11：剎车来令片更换期限依据个人使用习惯、交通状况、来令片材质而有很大差异，一般在15,000～30,000公里之间。

由于来令片磨损耗尽后会磨坏剎车碟，故最好是能定期检查来令片厚度，车主也可自行注意，当来令片厚度距来令片铁质背板只有3～4mm时即可考虑更换。

由于一般剎车片内含石绵，磨耗的碎屑有致癌的危险，所以大众汽车早于1988年即停止生产含石绵的来令片，色泽较黑，使用上防止异音特性可能不如石绵材质，但也算对环保尽了一份心力。

Q12：何谓排档安全锁?

A12：所谓车辆排档安全锁ASL为Automatic Gearbox Shift Lock之简称，此装置目的为防止无预期加速（暴冲）而设。

自动变速箱之设计目的为使汽车操作简单，故即使小孩误动排档杆汽车也能行驶（手排车则会熄火），而油门与剎车踏板又左右相邻，距离不超过10公分，故在操作中万一有闪失即可能造成巨大灾害。

ASL构造原理其实很简单，当汽车在P或N檔要排入D或R档前，必须先踩剎车（解除锁定装置，防止误踩油门），否则排档杆无法操作，故可有效防止暴冲之发生。

VW汽车在1990年以后生产之车型即加装此项安全装置，在台湾自VOLVO之暴冲事件发生后，此项装置政府已列为自排车的标准装备，以保障消费者。

Q13：为何VW自排车无O/D或E/S开关看起来很阳春？

A13：所谓O/D是指Over Drive超速传动，由引擎动力转速输入经变速箱内部齿轮减 速比输出后增加转速（约0.8:1，即引擎转0.8转，变速箱输出转1转），以达省油的目的。

所谓E/S开关是指两段式「Economic（经济）/Sport（跑车）的不同自动换文件模式，当E模式时向上换文件提早，即尽早进入高速文件，降低引擎转速以利省油、宁静，但性能较差；S模式时则相反，尽量提前向下降文件，提升引擎转速，故性能较佳」。

VW车系不设O/D开关原因是所有VW车系最高速档（四档或五档依车型而定）早已是O/D齿轮，不必要再设开关造成混淆。

VW汽车早期亦有E/S开关，然操作开关易分心及增加操作复杂性，随着科技进步，已改用Fuzzy Logic控制（人工智能），能自动在E及S之间随油门动作的速度及幅 度，作256段自动切换，故早已取消E/S开关。

所谓Lock（扭力转换器锁定）开关可比喻为释放手排车的离合器踏板，使离合器完全接合没有打滑，以增加引擎效率。可省油及降低变速箱温度，大众汽车此项功能已整合于变速箱控制计算机内，当引擎转速高于2,000rpm时，即自动锁定扭力转换器，减少不必要操作，使自排兼具手排的优点。

此外，VW变速箱除了Fuzzy Logic外并增加Hill Program（山路模式），当上、下 陡坡时，系统会自动侦测得知并降档以在上坡时增加马力及下坡时提供引擎剎车效果，达到最大安全要求，所以上、下坡时发现引擎转速较一般为高时，不必担心，系统正主动照顾您。

Q14：自排车在等红绿灯时是否要排N檔?

A14：只要引擎在运转，自动变速箱中的油压泵就在运转提供油压及润滑，所以不论置于P或N或D，皆不会对变速箱造成损坏。

为了减少不必要操作，建议预期暂停时间短如等红绿灯时，不必作任何变动，直接以D檔等待即可。

预期暂停时间较长，则可排入N档，减少引擎负荷，附带好处有：减少油耗、降低引擎温度。

如果停得更久，可排入P档或干脆熄火。

Q15：VW自排车应该换什么油？

A15：VW Golf / Vento / Passat / Bora / New Beetle97年以后新车种，编号01M /01N变速箱，应使用原厂黄色ATF；如果使用红色一般ATF，根据经验会产生换档不顺的现象，一段时间后变速箱会损坏。

Q16：为何方向盘打到底时引擎会有异音?

A16：动力方向盘为一利用油压推动方向机之装置，当方向盘打到底时，由于转向连杆已至最终位置被挡死，而此时持续施力于方向盘将使动力方向机内伺服阀全关，切断油压系统之回油，导致压力上升至最高，此时泄压安全阀会开启而产生异音；如果驱动皮带松驰则产生尖叫声。长期错误使用将使方向机油封或油管泄漏而损坏。

正确操作法：当车辆需原地转向或转大弯方向盘打到底时（感觉有阻力产生），请勿再持续施力，应将方向盘稍微回转约1/8圈，如此可减少引擎负荷并可延长动力方向机之使用寿命。

VW动力方向机油使用一种绿色特别的矿物油，车主切勿以一般红色(ATF)自动变速箱油取代以免 造成损坏。

Q17：为何水箱内要添加水箱精?

A17：防止引擎内部锈蚀，此点尤其对铝合金引擎更为重要，不当的水箱精会造成锈蚀，不但损坏引擎，更会因锈屑阻塞散热水箱造成高温

防冻，在极寒地带，水因低温而结冰，体积膨胀，导致水箱甚至引擎体破裂，此点在台湾也许不很重要，但是冬季赴合欢山赏雪也可能发生。

提高冷却水沸点，由于引擎工作效率在适当温度（约95℃～105℃）才能发挥；故一般清水并不适合，水箱精可提高沸点至约120℃。

水箱精与水温合比约为1:1，过多的水箱精反而会降低散热效果（水的比热为所有物质中最大）。

VW的原厂水箱精分G11（棕色）及G12（红色），效果相同，但使用上不可混用，否则会损坏引擎。

Q18：为什么雨刷跳动产生噪音？

A18：雨刷片是一支橡皮刮刀，终其一生除了下雨外大部份时间是闲置的，所以在长期雨刷臂重压下会歪斜变形，当向上刮除时，雨刷片会跳动产生噪音，但向下时则安静无声，排除方法很简单，只要扭转雨刷臂至适当角度补偿雨刷片的变形即可克服。

Q19：为什么雨刷总是刮不干净？

A19：雨刷片是一支橡皮刮刀，当使用日久后，会因磨损而不再锐利，所以雨刷片是一种须更换的消耗品。

如果雨刷片使用短时间即刮不干净，则须仔细检查前挡玻璃表面是否有粒状污染物黏着，必要时刮除之，此点很难避免，但尽量不要将爱车停在工地附近可减少损害的机会，另外一点是行车中路面砂石被前车扬起经高速碰撞后导致玻璃表面损伤凹陷而刮伤雨刷片，损伤后很难补救，严重者只有更换前挡玻璃一途，所以高速行车时，应避免紧跟在大卡车（尤其是砂石车）后面。

大众原厂提供一支雨刷精加入雨刷水中可清洁玻璃表面油污，溶解附着小颗粒，改善雨天视线，且不流污渍，车主可多加利用。

Q20：何谓EBD？EDL？ESP？ASR？为什么有ABS还不够？

A20：何谓ABS?ABS是英文“Anti Lock Break System”的简写，中文为“防死锁煞车 系统”。当汽车紧急煞车时，车轮会死锁致车轮打滑，不但产生噪音及机件、轮胎的磨损，并且会导致方向盘失灵，如果发生在湿滑路面则煞车距离反而更长。而ABS即为克服上述问题所设计的：它运用高速反应的电子系统，当打滑产生时自动控制煞车油压，以确保车轮在任何路面状况下(尤其是湿滑路面)不会死锁，故紧急煞车时，驾驶可放心的踩下煞车踏板而专心操控，闪避危险路况，大幅提升行车安全。

为什么ABS需搭配EBD系统？

ABS煞车系统虽能在湿滑路面情况下缩短煞车距离、减少轮胎磨损，并避免轮胎因死锁而失去转向能力，但是ABS须在踩下煞车至车轮死锁时才发挥作用，而EBD则在煞车踩下后即开始运作，可有效辅助ABS，增大保护范围。

何谓EBD？

英文原文：“Electronic Braking-pressure Distribution”（EBV、EBD或EPBD为同 一装置的德文/英文简称），其中文名称为“电子煞车自动分配系统”。EBD为ABS的附加系统，其作用先于ABS，以减少不必要的ABS动作。在车辆煞车时，由于重心转移会导致车头下压、车尾上扬，幅度视车主踩煞车踏板的力道大小而定，前后轮煞车力量的需求会不断改变，如果不加以控制，后轮会先死锁导致失控，而当左右转弯时，离心力作用也会导致车身倾斜致内侧车轮较易死锁；EBD系统即用来监控四轮转速，将各车轮煞车油压自动调节至最恰当的程度，以防止ABS作用前的任何死锁现象，增大保护范围，减少不必要的ABS动作。

何谓EDL？

英文原文：Electronic Front-axle differential（EDS、EDL为同一装置的德文 /英文简写）

中文名称：电子防滑差速器。

运作原理：为ABS的附加系统功能，作用与ABS相反，也就是说ABS与EDL不会同时作用。当大马力车辆及加速与路面湿滑不平，轮胎附着不良时，动力轮会产生打滑现象，不但丧失动力影响操控且制造噪音加速轮胎损耗，EDL设计目的即为避免此现象的发生。

当加速时，ABS/EDL计算机比较左右轮胎转速，当转速差异过大时，表示产生打滑，计算机控制转速较高侧车轮之煞车分泵，以煞车作用降低其转速至左右相等，藉以防止打滑，此作用运作于起步到40公里。

使用车辆：VW全车系1800c.c.以上之车型皆具此装置。

注意事项：ABS或EDL在作用时，液压泵皆会运转产生噪音，但ABS作用时由于车速高及驾车者专注路况，故不易听到；而EDL作用的时机为加速情况易被注意，此为正常现象，不必担心。

何谓ESP？

英文原文：Electronic Stability Program

中文名称：电子行车稳定系统。

运作原理：ESP为高科技功能，它是一种主动性安全设备。当因路面湿滑，或因转向过度，甚至驾驶操作不当导致失控时，不需踩煞车即可经由三组感知器测知，计算机能迅速判断，当界定为即将失控时，计算机即主动介入操控，藉由调整引擎、变速箱的运作，并控制特定车轮煞车分泵，恢复平衡，避免失控的发生。

使用车型：Beetle2.0

何谓ASR？

英文原文：Anti Slip Regulation(Traction Control System)

中文名称：加速防滑装置。

运作原理：功能与EDL类似，但方法不同。当大马力车辆急速起步或路面湿滑时，动力轮会打滑而导致失控丧失马力，ASR系统会比较左右动力轮之转速，当任一侧轮胎转速过高时，即界定为发生打滑，ASR系统即通知引擎控制计算机，调整引擎动力输出，避免动力轮打滑，且能维持引擎最大限度的输出（此限度取决于路面所能提供的最大摩擦力）所以此系统一般用于高马力跑车上，以发挥最大的引擎动力。

常见例子：（轮胎起步间叫声表示车主控制不当，动力浪费且加速反而慢）。

使用车辆：Passat2.8

为什么有ABS还不够？

ABS煞车系统只在驾驶者踩煞车时作动，虽能缩短煞车距离、减少轮胎磨损、避免因轮胎死锁而失去转向能力。但对于车辆加速行驶时可能产生之失控（即EDL或TCS、ASR）及转向过弯时防止车辆失控（即ESP）并无帮助。有EDL、ASR、TCS及ESP为主动安全的防护系统，可防止意外事件发生。一辆好的车子除乐能享受驾驶乐趣外还要顾及到安全。

Q21：冬天是否应关闭冷气？

A21：冷气配合暖气系统组成空调系统，它能调整车内温度并能除湿，防止雾气及异味产生，即使在冬天，正确的使用法还是应打开冷气，您可能认为这样作太浪费能源，但实际上，大众汽车自1992年Golf以上车型即使用可变容积式压缩机，它能根据不同的热负荷，容积自动由5%～100%之间变化，也就是热天时相当于一具大型压缩机，但冷天或夜间，则自动变成一具很小的压缩机，所以设计上非常适合全年运转。如果冬天时不使用，系统闲置到隔年夏天，可能反而产一此问题，也比较容易产生异味现象。

Q22：我需要加装防盗器吗？

A22：大众汽车自96年起所有车型皆安装所谓的智能防盗系统（immobolizer），此系统好比使用身份辨识磁卡，当刷卡后计算机会比对身份，合格者才能进入，所不同者您看不见磁盘，它使用整合在车匙内的特别传送器（Transponder），此系统能随机数跳号，安全性非常高，几乎无法破解！即使修车高手直接接线也无用。

智能防盗系统可允许配用最多8支车匙，如果车主遗失车匙或要增加，请带齐所有现存车匙及车主手册，经服务厂重新配对即可，而遗失的车匙因未进行配对将自动失效。

由于汽车科技日新月异，系统几乎都自动化，复杂性超乎想象，非原厂防盗系统一般皆为万用型，任意由不熟悉系统的人剪线加装防盗器实在非常危险，经验得知，汽车故障有很大部份由此产生，不可不慎。

Q23：为什么开车门会电人？

A23：汽车在移动中会感应产生静电，当车主开车门时，会经人体传导而触电，此为物理现象并非汽车故障漏电，这种现象在干冷的冬天特别容易发生，但湿度较高时，则自动消失。可能因各人体质之差异，某些人较易感电。

在汽车底盘上安装静电带，避免穿着人造纤维衣服，不要使用塑料椅垫可减少感电的可能。

Q24：小孩将可乐饮料打翻在车内地毯怎么办？

A24：最简单的方法就是泼清水于翻倒处，再用可吸水的桶型吸尘器吸干，如果状况许可，使用家庭除湿机，关起车门除湿一至二晚即可。

Q25：为何原厂的零件要比外面保养厂的零件贵？

A25：VW原厂零件是专门为VW车系之车辆设计，其规格品质、安全性及耐用度

在VW严格要求之下均较外厂优良，加上进口的成本(须课征约25%之进口税，再加上包装、运送、保险等费用)，所以价格较贵一点，但有工资及另件一年无限里程保固比较有保障。

外厂零件充斥仿制品、或来路不明的货源，虽然零件价格相对比较便宜，但这种零件品质与正厂相比较，有极大差异，且大部份未提供售后保证，只怕您反受其害而得不偿失。

VW原厂零件特性: VW 正厂零件特性

产品特性 客户利益

严格产品品质测试 所有VW正厂零件均经过VW原厂品管单位严格产品品质测试，车主至服务厂可享有高稳定性及可靠性之零件。除人车安全可获得完全保障外，更可使相同零件再次故障发生之机率大为降低。

不断研发改进 VW原厂每投入巨额之人力与预算研发及改良零件产品，车主至服务厂换修之零件均为原厂最新设计出厂零件，使车主享有更具经济性与耐久性之零件服务。

使用寿命长 非正厂零件为求降低成本常采用低成本之材质或替代品，耐用程度较差，常于非正常维修频率发生零件故障或造成周边零组件不正常耗损。惟有使用VW正厂零件可降低非正常维修频率，使车主更经济、省时及安心地拥有VW汽车。

超高精密度

(符合德国国家标准)正厂零件均受严格德国国家标准规范，符合德国各项汽车零件相关法规，使VW车主人车安全享有欧洲先进国家同等之安全保障。

全省经销体系零件不限哩程一年保固服务 VW原厂提供正厂零件换修一年产品保固，可至全省任一台凤VW经销商办理零件保固换修，因此使用正厂零件可不限地区限制享有『入厂维修，全省保固』之专属VIP服务。

VW 非正厂零件特性

非正厂零件来源 缺点 无原厂零件包装盒

OEM厂受VW原厂委托代工生产零件，因未符合原厂品管规范遭拒绝之退货。产品本身即有瑕疵，安装后同样故障问题可能随时发生，更甚者造成相关零件故障。无原厂零件包装盒

行车无安全保障。

因安装非正厂零件造成汽车其它零件故障时，无法申请保固。

未经授权之制造厂模仿原厂零件设计制造之零件 由于无原厂设计平面图，尺寸外观相近而非100﹪相符。安装后可能造成汽车运作异常，影响行车安全。无原厂零件包装盒

未经原厂品管检验，车主购买不良品零件机率增加，亦即爱车相同故障再次发生之机率提高。

使用低成本之替代原料，使零件使用寿命减短。

行车无安全保障。

因安装非正厂零件造成汽车其它零件故障时，无法申请保固。

OEM厂生产之多厂牌车型共享零件 OEM厂为市场销售及成本考量所生产之多厂牌车型共享零件。由于非针对特定车型量身订制，易有尺寸不完全兼容或安装时需修改原车设计。无原厂零件包装盒

行车无安全保障。

因安装非正厂零件造成汽车其它零件故障时，无法申请保固。

Q26：如何辨识大众各车型生产地？

A26：车身号码WVWZZZ3BZ1P271232之第11码为'P'，即表示这部车是大众在德国Mosel厂所生产。

车身号码WVWZZZ1JZ1W680496之第11码为'W'，即表示这部车是大众在德国Wolfsburg厂所生产。

对照表由德国大众总厂提供。

Q27：大灯为什么会有雾气?是否进水?

A27：大灯产生雾气有两种可能：

1.进水：由于密封不良，在雨天或洗车时进水，导致雾气产生，灯具需检查更换

2.温差及高湿度环境下造成雾气：空气中一般皆有60%~70%的湿度，当下雨时，湿 度可达95%以上，此时温度变化就可能产生水气凝结，例如：

A.将可乐从冰箱中取出便可马上在包装瓶罐上发现有雾气产生，时间稍长甚至水滴流下。

B.开冷气行车时，车窗玻璃外侧有雾气凝结，原因是车厢内温度低导致空气中水气凝结在玻璃外侧。这种热力学现象，在炎热的下雨天时因湿度高情形会更严重。

大灯灯具的构造在下方皆设有通气孔，以平衡因开大灯后灯具内空气膨胀所产生的压力，所以即使在大灯密封完全正常下，空气中的湿气也可能会由通气孔进入大灯内(尤其是长时间停车于地下室)，当灯具内外的温度差异大时就可能产生雾气，这种现象在反射式大灯上不容易产生，因为大灯玻璃整面皆有光线通过而被加热，因此湿气无法附着，故只有边缘部分可能产生雾气，易被忽略。

现代汽车为追求更好的照明效果，大灯采用透镜式(如：New Beetle、Lupo、Bora、Passat车型)设计，因透镜式大灯光线集中，故大灯镜面上只有小区域会被加热，其它区域的温度较低，所以湿气特别容易集中在灯光区外侧的镜面上，由于目标明显常被误认为是大灯进水。

进水与雾气的分别如下：

A.进水的影响范围大且水滴巨大，会有向下流动现象。

B.湿气造成的雾气范围小且轻微，在洗车或长时间停车于地下室时最易发生，但 随大灯开启使用一段时间温度升高后，雾气即会消散。

Q28：VW车系,若于新车保固期内,因原厂问题而汰换之非消耗性零件,其是否享有自更换日起,一年无限里程保固呢?

A28：依据VW 原厂保固政策之非消耗性零件保固是必须车主有付费行为购买或更换 该零件,则自当日起即享有一年无限里程保固;依此原则,若于新车保固期内您也有付费购买或更换非消耗性零件,该零件当然即享有一年无限里程保固;否则新车一年保固到期, 即保固终止。

第三篇：销售常见问题解析

1、网上了解价格

这类客户通常会连续转过几家店后才会决定是否购买，例如：在网上了解的是N518 来店后直接会问N518多少钱，销售员在这时千万不要直接报价，因为我们在价格方面没有优势，当客户问这个问题的时候是一个非常好的转型的一个机会，通常我会说您好，电纸书N518系列有三款型号，不知道您说的是哪款，此时要看是什么样的客户，如果是那种比较强势的就不要吞吞吐吐的，要自信一些很有底气的报价：N518我们全国的统一价格是XXXX当客户转身要走时一定不要放弃，紧跟一句您就看中518了吗？我们最新的产品您了解一下吧，我给您介绍一下好吗？通常客户都会停下脚步 等待你介绍，这时的机会很大，接下来你可以问客户问题，先要了解客户对产品到底了解多少，根据他所了解的一些产品相关的东西你在给出相应的问题和解决方案，切忌：想尽一切办法给客户惊喜，最后让他觉得你给介绍的产品才是他最需要的2、长期关注价格 经常在卖场里询价

这类客户通常会给销售员一个假象，路过我们店面的时候会顺嘴问一句你家XX电纸书多少钱，你说什么都不理你就让你报下价格，然后转身就走。

如果遇到类似这样的客户大家不要慌，越是这样的客户说明他越是谨慎，越是谨慎就越经不住我们吓，这时最好的武器就是我们的形象，案例：我遇到过这样的一个客户，产品是N518我报的价格是2980 当时他就很生气说了一句你们怎么这么贵，当时我就觉得有希望，我说不是我们价格贵，是全国都是这个价格 我又问他您问到多少钱啊 他很不情愿的告诉我2600 我就笑了一下您被骗了 应该是2300当我说完这句话的时候客户就是满脸的疑问紧接着我就很热情的把请进店里 跟他说产品售后，给他赠值服务，跟他讲为什么价格乱为什么什么价格都有在问他相关的需求为他提出其他的方案，有的时候即使你知道客户就是要高端你也要适当的推下低端很真诚的和他说：其实您用510就可以了完全不用那么高端的，让客户觉得你是在为他着想，是客户更加信任你 最后价格绝对不是问题。

备注（请专卖店的销售人员利用好自己的形象，我们的专业术语，一定把讲客户和谈客户区分开，朋友式的聊天和买卖式的交易谈话给人的感觉是完全不一样的，一切为客户着想 最后肯定是谈客户，而不是讲客户）

3.预算有限

我比较喜欢转型，我相信每个人都有自己的销售方法 我最喜欢的还是转型，因为在转型的过程当中你又机会和客户走的更近，让客户更加信任你，主要表现就是你在不停的为他解决问题，最后你选出的产品肯定是可以满足他需求的产品。转型的前提 对产品要非常了解，任意拿出几款产品都要说出各自的优势 无论高端低端都有个自得特点 用心就能想的出来 简单列举几个低端比高端价格除外。1 N510D20510待机时间超长 一定比d20长 稳定性好体积小 比D20更方便携带n517n518单手持的时候517明显比518要舒服，518指示灯亮影响看书，体积比517重，笔没有517的舒服

3d21f21我想每个人对这两款产品都很尴尬 有 D21的时候针对个人用户F21就不知道该怎么推了 不过个人发

现F21翻页速度要比D21快很多

请大家根据个人需求去推相应的产品，不要一味的推高端，一切为客户着想才是一个成功的销售员该做的。

产品技巧的演示

位置: 这里的位置是指你和客户所站的位置，1、你要站在一个不容易让客户很轻松就出店的位置可以理解为客户前面让他不容易摆脱你

2、尽量的和客户站的近一些 特别是中老年人 因为卖场一般都比较杂乱 有的时候你在介绍产品的时候容易听不清对你销售产品有影响

3、尽量让客户正面对着一个死角这样的话在你给他演示的过程中避免它看见代理商的店 让他的注意力集中在你的店里防止出去询价

演示内容:产品演示前尽量装一些市面上比较畅销的书籍，或比较不错的有声读物，来吸引客户，初步让客户产生兴趣，尽量找一些比较不错的PDF文件或者反复试验不出问题的 WORD文档，在演示带手写的电子书的时候一定要让客户体会到汉王手写识别的功能，在演示OCR软件的时候尽量用公司提供的演示样张。根据需求演示功能 给自己留有余地：销售过程中要问清客户需求了解需求后在演示相应的功能，在没有确定成交的情况和已经满足客户的初步需求的时候 剩下的产品特点先不要说，因为这一点可能成为我们和客户谈判最后的底牌，同时也是为转型做铺垫

销售过程中要问的问题

其实在销售过程中有很多问题，并不是固定的 我总结的这点也只不过是平时比较常问的，主要的目的还是要引导客户，帮助客户发现自己需求，但在问问题之前请销售员一定不要刻意的去问，是在两个人聊天聊的挺投机的时候去问，比如第一句就在客户进店点名电子书的时候去问，主要起两个作用 1、看客户是否对我们的产品有所了解，如果说听说过 或者直接说了解过那这个人很可能就知道产品的价格在报价的时候就要多加注意

2、如果说没了解过 那我们就可以热情主动的和客户说那您坐 我给您详细介绍下，紧接着拿出演示机给客户讲解。第二问题就是要近一步的锁定客户的目标。看客户到底需求什么样的产品，第三个问题主要还是在同客户沟通的时候去提出来这个问题的目的是吧客户引开，当客户说出喜欢看什么书时可以把我们准备好的资源给客户看，近一步交流 了解客户。当客户自己不知道该选择什么，或者你和客户已经谈的很好的并且很信任你你可以这样去发问 您觉得这款怎么样？ 可能客户已经有理想的选择 可你提出这个问题可能会给他一个新的惊喜。第五个问题当客户被你说东心了在犹豫的时候千万不要和停下来。这个时候问这句话是最合适的 因为如果你帮他解决完他担心的问题他基本没有退路了当你给客户介绍完产品，并且很全面客户仍以言不发 起身要走 这时一定要上前问一句，肯定是你之前某个细节出了问题不要放弃近一步了解。在销售过程中没有固定话术，大家记住一点引导客户 不停的抛出问题和难题，然后在不停的解决你所给客户抛出去的难题。@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@2

首先，卖产品就是在卖自己，顾客之所以会选择购买你的产品就是因为相信你，相信从你口中介绍出来的产品，你在推销你的产品的同时也是在推销你自己，所以想做好销售就要先学会做人。

销售是一门学问，不是简单的介绍产品，报个价，这样的事情任何人都能做得来，就像“轻松销售法”里面所说的以明确、清楚、只锁定一个目标为一个方向。每一句就是要达到一个目的为一个单位。比如如果顾客正在询问产品可以这样主动反问顾客问题：“先生/小姐，请问您是个人用还是单位用”这样问的目的是要了解顾客是个人用户还是单位采购。

做销售最重要的一点就是要“强势”，在有些人看来强势是厉害一点，态度

蛮横一点，其实不然。强势是让你在跟顾客交流时能占有主动权，主动去引导顾客，使顾客跟着你的思路走下去，不要出现顾客带着你走的局面，这样销售产品会显的比较被动，换句话说顾客会欺负你，比如讨价还价，索要赠品等。如果你不能满足他的要求他就会拿不买来要挟你。

总的来说今天再看轻松销售法要比第一次看理解的更透彻一点，因为这毕竟是自己做零售的这一年来亲身经历的事情，想说的还有很多现在就分享到这里。@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@@2222

将客户依照其个性分解为17种类型，根据这些客户类型的谈话特点，我们相应采取一些沟通谈话的对策

1、健谈型

 客户可能只顾自己的感受畅谈，不要让夸夸其谈的顾客将你引入和销售会谈毫不相关的其他话题中，要抓住一切机会礼貌地将谈话引入正题。(经常会有被说晕的感觉,听对方滔滔不决的讲他们公司和公司的产品)

2、少言寡语型

这种客户说得太少，甚至你问一句他就答一个字，不然就是用“哼”、“啊”作答。然而，你不要失去耐心，尽量不要用封闭式的提问，提出一些不能仅仅用“是”或“否”回答的问题，选择开放式的提问打开他的话匣子。话语要显示出你获得信息的热情，来调动客户的积极性。要比平日更具耐性，直至客户开尊口，并示意客户说下去。（说了半天对方没音，还要来一个喂？一定不要出现这个景象,一定要多问客户）关键字“什么”、“哪里”、“告诉”、“怎样”、“为什么”、“谈谈”、“如何”

3、因循守旧型

 这种客户会聆听，但会在购买决策上磨蹭，如果不及时采取促成交易的行动或条件，时间消耗下去也将会失掉这单生意。要向客户指出信息带来的帮助，如果有非常合适的项目也可以提供给他，或提出来更好的方案。如果这次你的提案和以往有些不同也可以强调新方案的优势，说明与以往的不可比性。

4、反对型

 往往客户上来先表示反对，来挫你的锐气。事实上是要争取谈判的主动地位。有可能反对是无理的，但你尽量不要与其争论和回击、保持冷静，听他把话说完，同时面带微笑表示谈判还可以进行下去。一方面你抓住客户提出的需要（主要是执行效果的）表示可以调整方案

如果你能够现场就把方案调整过来了，马上再来询问“如果这样如此--------可不可以？”；另一方面把客户的意见加到方案中，来确认“您看是不是这样？”。＊若客户再反对，你可能要重新思考方案的价值了，＊给自己留后路先撤回来＊，请客户再给机会进行下一个方案＊。

5、胆怯型

这类客户往往是没有经验或没有决策权，不愿意负责。如果是他没有经验，要提供引导、保证和支持，帮助客户克服成交的担心心理，鼓励客户，证明他决策的正确，使其放松压力，表示你可以成为他信任的朋友。若是他没有决策权，一方面可以陈述方案的要点与效果的描述令他确信这是个好生意；再有就是请他引见

能够决策的人物出场。

6、自我为中心型

 这种客户具有优越感、愿意用以上对下的口吻讲话。保持上下的距离会令他有良好的感觉。仔细地聆听并且恭维他，在合适的时候，向他征询意见，把他的主意变成你的生意。（如果您的业务可以辅射到河北，天津就建议您用个北方区更划算，您看呢？）

7、果断型

 这类客户很自信，知道将要得到什么。如果方案得到认同不要给客户过多的销售解释，尽快将注意力提到合同要求上。对客户关心的内容只给必要的细节，要严格忠于事实，因为他可能是通过细节来验证他的判断。

8、精明型

 这类客户善于搬出不同方案进行比较，或用一方的信息销售人员的方案对付另一方信息销售人员，要应用巧妙的恭维来表达对他的判为讨价能力的赞赏，同时表示在象他这样如此精明的客户面前，你就遇到了识货的人/懂行的人/专家。这类客户是砍价的专家，甚至胡砍一通，你就更要采用“示弱”的姿态，点明对方的精明已经使你无利可图，要对方手下留情。（您可真是高手，我们从来没有过您这么多的增值服务，希望您今年用的好，能与您长期合作我非常荣幸）

9、质疑型

 这类客户会找到方案中的问题点提出怀疑，不要躲避问题，对他的反对做出反应，但不要和他争论，确实是你的问题就坦然承认，也别做过多解释，否则你越描越黑，给他感觉问题越来越大。若不是你的问题，只是对方虚张声势或小题大做，要敢于说话，应用逻辑和已证明的事实，有可靠的数据支持最好。

10、牢骚型

 这是个事事不顺心的客户，牢骚是他发泄和减压的方式。你要特别快乐，不要被他的心情所影响，力图找到困扰他的麻烦是什么，搞清是与你方案有关的原因还是除此之外的原因。是与你有关的原因，要听清楚，表示同情和关切。是你能解决的不妨表示可以帮忙试试，千万别都揽下来！有些你做不到。若不是你的原因，客户他发完了牢骚可能就好了。别让客户陷在牢骚里，乐观开导，转移话题，为了继续谈你的事。(立邦)

11、条理型

 这类客户做事缓慢，似乎对你提出的每句话都在权衡，你急他不急。你表示很急切，可能他会采取更保守的态度，或用你急切的心态压制你。调整你的步伐，和他保持一致，放慢速度，你可能还可以获取对方更多的需求信息，在给对方的方案还可以尽量向细节上扩展，使他有充分的时间接受如做些宣传方面的信息。最好在见面前就给他方案，留时间让他消化，但也要注意方案的周全性。

12、依赖型

 这类客户在做决定时需要有人帮助、参谋，来证明他决定的正确。你最好把参谋的角色担当起来。为了解客户的需要，在你可以在首次接触时就问他一些问题，然后在后面跟进时说明你的产品方案就是为他量身订做的，能最好地满足他的需要。在谈话时将上一次的结果作为这次的开始，“您上次要我做一个有关某某的计划，我给您做好了”“我把和您沟通的内容

做了一个方案,我给您发过去您看一下?”。在细节的处理上，可以解释为就是围绕客户的要求制定的13、挑剔型

 这类客户看好信息可能也不会说OK，因为至少他要与你讨价还价，还会提出一些不满意，实际上，他需要你的东西才会花精力与你谈判，你必须强调信息的好处,后期的增值服务,证明我们的信息值这个价钱，而且不要把你能守住的底价过早地报出来，留有还价的余地。再有，做让步的时候要让对方感到，你的每次让步都是不容易的。而且可以让对方付出一些代价，例如你答应客户提出的优惠的价格，但要让对方介绍几个客户等。

14、冲动型

这类客户很容易下结论，谈判的节奏也比较快。见面要直接步入正题，不要绕圈子，可以提出建议，通过这个建议客户就能直接提出结果。就是说结论要从客户的嘴里说出来。你要注意的是把合同带上，能签就签，不往后拖。

15、分析型

 这类客户喜欢数据、事实和详尽的解说，这种客户富有条理，如果对客户提案需要做些数据支持的准备，在提案过程中注意你的条理性，给客户的信息越多越好。结论最好是清楚的，不要模棱两可。(一般在和市场部策划部负责人谈判时会遇到这样的问题,特别是一些大企业)

16、感情型

 这类客户对个人感情看得极重，你应该和这类客户逐渐熟识，每次通话都带给他一个好消息或提到一个好消息，让他能高兴起来。全身心地投入谈话并且保持你对他的专注。和他建立日常联系，建立私人友谊对工作深有益处。

17、固执型

这类客户总是装出很重要的样子，摆老大的派头。他如果对方案明显地表示出错误和不专业也不要指出来，向客户表明你是极尊重他的，抬高客户，同时也抬高你自己，有可能的话向他致以真挚的夸奖。注意他流露出来的意向，抓住他的意思，把你的主意变成是他的主意通过的可能性就会大大提高。

 一流的公司卖标准

 二流的公司卖品牌

 三流的公司卖服务

 四流的公司卖产品差导化

 五流的公司在同质化的产品下打价格战

只要用心,一切皆有可能

销售是一份灵活的工作,只要用心去分析和维护每一位新老客户,那么一定可以做出卓越的成绩

第四篇：播放器使用常见问题

播放器常见问题..................................................................................................................................1

1、浏览器IE7、IE8及以上版本与播放器不兼容，导致播放器无法打开的问题...................1

2、看点播时，总是提示“安装播放器”，如何解决？............................................................1

3、重复的提示，“发现以前安装的版本，必须先将其卸载以后才能安装新的版本，是否继续？”..............................................................................................................................................2

4、关于个别浏览器不能正常播放的问题....................................................................................2

5、点播节目时画面很卡，有什么解决的方法？........................................................................2

6、安装了瑞星防火墙，如何收看网络电影？............................................................................3

7、收看电影时发现其对白既有粤语又有国语，或是既有英语又有国语，而我只想听国语对白，该怎么办？..............................................................................................................................4

8、如何在做其他事情的时候同时观看影片？............................................................................4

9、提示“Error 0x800401f0 occur when Error at RenderVideo Pin”.这是怎么回事呢?.4

10、点播影片后提示：“error 0x8007007e occur when initgraph”，点击确定后提示“error at initdshow instance0x8007007e”。......................................................................................5

11、点播部分影片提示“Explore.exe 遇到问题需要关闭”然后整个页面会被关闭。...........5

12、点击影片后播放器“一直显示正在连接”，屏幕黑屏没有反应。..................................5

13、为何点播影片没有声音只有图像？......................................................................................5

14、点击影片播放按钮后，没有弹出播放窗口？......................................................................6

15、为什么一出画面就停止？......................................................................................................6

16、总是显示“正在连接服务器”怎么办？..............................................................................6

17、安装了卡巴斯基杀毒软件如何观看网络影片？..................................................................6

18、安装了诺顿防火墙，如何收看网络电影？..........................................................................8

播放器常见问题

1、浏览器IE7、IE8及以上版本与播放器不兼容，导致播放器无法打开的问题 答：这种情况多是由于播放器版本低造成了，请到http://10.0.2.100下载最新版webplay2010，将老版本卸载，然后安装webplay2010即可。

2、看点播时，总是提示“安装播放器”，如何解决？

答：请将学院视频资源站点（http://10.0.2.100）添加到浏览器的可信任站点列表中。具体办法为：点击IE浏览器中“工具”—“Internet选项”—“安全”选项卡—“可信站点”—“站点”—添加，如不能正常添加请将“对该区域中的所有站点要求服务器验证”项目前的对钩去掉。

/ 8

3、重复的提示，“发现以前安装的版本，必须先将其卸载以后才能安装新的版本，是否继续？”

答：您以前使用Webplayer，在卸载时，没有将进程中的WebP2P.exe、WebPlayerDeamon.exe等关闭。您只需在进程中，将这两个进程关闭，就可以重新安装了。

4、关于个别浏览器不能正常播放的问题

答：Webplayer播放器目前可以支持大多数的浏览器（IE、360、世界之窗、遨游、腾讯TT等），但是也存在个别浏览器无法观看的问题，所以在无法观看时可以更换其他的浏览器观看。

5、点播节目时画面很卡，有什么解决的方法？ 答：有以下几种解决方法：

1）查看Directx是否为9.0的版本，如果不是，请到本站相关下载区下载安装。2）点击任务管理器查看CPU占用率和内存占用率，如果过高的话建议关掉那些没用的进程，并且定时重新启动该服务。3）如果安装的是卡巴斯基杀毒软件，请按如果步骤更改设置 ：打开卡巴斯基面板，将反间谍和网页反病毒两项设置停止即可。

/ 8

6、安装了瑞星防火墙，如何收看网络电影？

答：首次点播时允许其访问网络。如果不行，就鼠标右键点击瑞星防火墙在系统托盘的图标，点退出，直接退出瑞星防火墙。

/ 8

7、收看电影时发现其对白既有粤语又有国语，或是既有英语又有国语，而我只想听国语对白，该怎么办？

答：您看的影片应是多声道影片，您可以尝试换一下声道设置（如图）：

在播放器屏幕中，点击右键，选择音频，进行声道切换。

8、如何在做其他事情的时候同时观看影片？

答：如果你一边聊天一边看电影，我们的播放器有个很好的功能合适你，鼠标右键点一下播放中的屏幕，选择“总在最前”，这样你就可以电影聊天两不误了。

9、提示“Error 0x800401f0 occur when Error at RenderVideo Pin”.这是怎么回事呢? 答：部分组件没有注册成功，您可以尝试：选择“开始”＝>>“运行”程序＝>>输入“regsvr32 quartz.dll”，确定后系统将提示“成功”。再尝试您的播放器观看在线影院。

/ 8

10、点播影片后提示：“error 0x8007007e occur when initgraph”，点击确定后提示“error at initdshow instance0x8007007e”。

答：解决方法：首先点击“开始——程序——附件——系统工具——系统信息”，在出现的系统信息框内点击“工具”菜单栏，里面的DirectX诊断工具。查看一下DirectX是否为9。0的版本，若不是，请到本站的相关下载区里下载Direct 9.0的版本。若版本已是9.0，请点击“DirectX文件”里是否有少了quartz.dll文件，请重新安装。

11、点播部分影片提示“Explore.exe 遇到问题需要关闭”然后整个页面会被关闭。

答：可能您的IE出现问题或播放器安装不正确，请先更新播放器。

12、点击影片后播放器“一直显示正在连接”，屏幕黑屏没有反应。答：请您按照下面的步骤来做：

1）您是否开启防火墙，如果有请关闭.如“norton internet security”等。

2）您是否使用代理服务器，若是，鼠标右键点击弹出菜单里选择“代理设置”然后输入您代理服务器的IP和端口，点“确定”后再重新点播。

13、为何点播影片没有声音只有图像？

2.）如果所有节目均是只有图像而没有声音，请检查一下您本机的音响功能是否正常。先放任意一个声音文件试试。如果音响可以正常发声，请您检查一下播放器是否处于静音状态，并检查一下音量滑动块的位置。

/ 8

3）您还可以查看点播的影片是否是单声道，双击您屏幕右下角系统栏的声音图标，接下来会出现“音量控制”设置面板，请您将“音量控制（Master)”和“波形（Wave）”两栏的“平衡”游标左右滑动以查看声音是否存在其它声道。

14、点击影片播放按钮后，没有弹出播放窗口？

答：打开IE浏览器，鼠标右键点击浏览器置顶“工具”栏，在弹出的对话框里选择“Internet 选项” 并切换到“隐私选项卡”，去掉“阻止弹出窗口”栏前的勾。

15、为什么一出画面就停止？

答：个别用户没有安装DX9，或者版本过高，在显卡的模式32位的情况下，会出现无法播放的现象，出画面以后就停止，建议用户安装DX9，如果出现上述问题，也可以按照以下设置尝试：“桌面——鼠标右键——属性——设置——颜色质量——更改为16位”。

16、总是显示“正在连接服务器”怎么办？

答：一般用户安装了卡巴斯基7.0以下版本软件会引起此现象外，还有可能是您的IE浏览器中了恶意插件，请去您修复IE浏览器，用扫描一下隐蔽控件以及修复IE，还可以检查一下系统的启动项有没有不正常的程序随机启动，可以通过进程管理器及时的杀掉恶意进程。某些恶意插件可能无法通过此方法完全删除，可以在系统的“服务”里直接禁用掉不正常的服务。

17、安装了卡巴斯基杀毒软件如何观看网络影片？

答：1）建议安装最新的卡巴斯基杀毒软件，（卡巴斯基7.0以上版本）2）如果您是7.0以下版本，请按如下设置：

点击右键选择设置——网络设置——仅检测选择的端口——去掉常规http 80前面的对钩即可。

/ 8

/ 8

18、安装了诺顿防火墙，如何收看网络电影？

答：鼠标右键点击诺顿防火墙在系统托盘的图标，点退出，直接退出诺顿防火墙。

/ 8

第五篇：质粒提取常见问题解析

质粒提取常见问题解析

涂布棒在酒精蘸一下，然后烧一下，能不能保证把所用的菌烧死？

参考见解：涂布棒可以在酒精中保藏，但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会，烧的是酒精而不是涂布棒。建议涂布棒还是干烧较长时间后，冷却了再涂。同时作多个转化时，应用几个涂布棒免得交叉污染。

原先测序鉴定没有问题的细菌，37℃摇菌后发现质粒大小或序列出现异常? 参考见解：这种情况出现的几率较小，常出现在较大质粒或比较特殊的序列中。解决办法：

1、降低培养温度，在20～25℃下培养，或室温培养可明显减少发生概率。

2、使用一些特殊菌株，如Sure菌株，它缺失了一些重组酶，如rec类等，使得质粒复制更加稳定。

3、质粒抽提有一个酶切不完全的原因就是溶液Ⅱ中的NaOH浓度过高造成的，请大家注意一下！

【有两种方法可以在提质粒前判断菌生长是否正常：

1、利用你的嗅觉。只要平时做实验仔细点就能闻出大肠杆菌的气味，新鲜的大肠杆菌是略带一点刺鼻的气味，但不至于反感。而在泥水状的菌液中你只要一凑过去就感觉到其臭无比或者没有气味，可以和正常菌液对照。

2、肉眼观察活化菌株。对于生长不正常的菌液进行划板验证或者稀释到浓度足够低涂板，第二天观察单克隆生长情况，LB平板生长的DH5A正常形态在37℃16h后直径在1mm左右，颜色偏白，半透明状，湿润的圆形菌斑，如果观察到生长过快，颜色又是泛黄的话基本上不正常了。】

未提出质粒或质粒得率较低，如何解决？ 参考见解：

1、大肠杆菌老化：涂布平板培养后，重新挑选新菌落进行液体培养。

2、质粒拷贝数低：由于使用低拷贝数载体引起的质粒DNA提取量低，可更换具有相同功能的高拷贝数载体。

3、菌体中无质粒：有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在，经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如，柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定，因此不要频繁转接，每次接种时应接种单菌落。另外，检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。

4、碱裂解不充分：使用过多菌体培养液，会导致菌体裂解不充分，可减少菌体用量或增加溶液的用量。对低拷贝数质粒，提取时可加大菌体用量并加倍使用溶液，可以有助于增加质粒提取量和提高质粒质量。

5、溶液使用不当：溶液2和3在温度较低时可能出现浑浊，应置于37℃保温片刻直至溶解为清亮的溶液，才能使用。

6、吸附柱过载：不同产品中吸附柱吸附能力不同，如果需要提取的质粒量很大，请分多次提取。若用富集培养基，例如TB或2×YT，菌液体积必须减少；若质粒是非常高的拷贝数或宿主菌具有很高的生长率，则需减少LB培养液体积。

7、质粒未全部溶解(尤其质粒较大时)：洗脱溶解质粒时，可适当加温或延长溶解时间。

8、乙醇残留：漂洗液洗涤后应离心尽量去除残留液体，再加入洗脱缓冲液。

9、洗脱液加入位置不正确：洗脱液应加在硅胶膜中心部位以确保洗脱液会完全覆盖硅胶膜的表面达到最大洗脱效率。

10、洗脱液不合适：DNA只在低盐溶液中才能被洗脱，如洗脱缓冲液EB(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA，pH8.5)或水。洗脱效率还取决于pH值，最大洗脱效率在pH7.0-8.5间。当用水洗脱时确保其pH值在此范围内，如果pH过低可能导致洗脱量低。洗脱时将灭菌蒸馏水或洗脱缓冲液加热至60℃后使用，有利于提高洗脱效率。

11、洗脱体积太小：洗脱体积对回收率有一定影响。随着洗脱体积的增大回收率增高，但产品浓度降低。为了得到较高的回收率可以增大洗脱体积。

12、洗脱时间过短：洗脱时间对回收率也会有一定影响。洗脱时放置1min可达到较好的效果。

细菌离心加入溶液I蜗旋振荡后，发现菌体呈絮状不均匀或呈细砂状？ 参考见解：

1、很可能是细菌发生溶菌，可减少培养时间或者试试平板培养，质粒提取前用PBS将菌落洗下，相较来说固体培养基上细菌生长的要好一些。

2、质粒抽提过程很大程度上是受细菌生长情况决定的，刚活化的菌比负80℃保存菌种所培养出来的菌液状态好，保存久的菌株可能会造成质粒浓度低，质粒丢失等不明原因。

3、判断生长的菌液是否正常，可以用肉眼观察，在光线明亮处摇荡新鲜培养液，如果发现菌液呈漂絮状，情况很好。如果发现呈泥水状，即看不到絮状，只是感觉很浑浊，则可能提不出好的质粒，或者没有质粒。

4、菌液不宜生长太浓，摇床速度不宜过高。达到OD600 1.5就可以了，（尤其是对于试剂盒提取要注意）另外如果只是简单的酶切验证根本无需酚氯仿抽提（安全考虑，慎重），只要溶液I/ II /III比例恰当，转管过程仔细吸取不会有太多杂志。

为什么加了溶液Ⅱ后，菌体没有逐渐由混浊变澄清？提出来的条带几乎没有，但是RNA很亮（没加RNA酶）？

溶液Ⅱ主要就是NaOH，如果菌液没有由混浊变澄清，参考见解：

1、可能是因为溶液储存不当，或屡次操作没有及时盖好溶液瓶盖，导致其吸收空气中的CO2失效。RNA在菌体中量较多，相对少量的菌体裂解，可有较DNA明显的条带。

2、可能是菌量大，加溶液Ⅱ后，菌体并不能完全裂解，所以没有变清，这也会导致质粒产率低下．

3、可能是质粒的拷贝数不高，质粒产率不高．如果是使用自己配的试剂，建议做中提或大提；或者买试剂盒提．用自己配的试剂，不加RNA酶，最后RNA是很亮的，要去除干净就要用比较好的ＲＮＡ酶。

4、如果不是试剂的原因，可能是质粒表达的过程中使膜蛋白变化（数量变多），很难使用碱裂解法，可以尝试用其他比较剧烈的方法(比如高温或者低温研磨等),然后使用一般的发放。

5、可能质粒随乙醇一起倒掉了。

加入溶液II后，菌液仍然呈浑浊状态，或者混浊度没有明显的改变？ 裂解不完全,参考见解：

1、问题可能是发生在溶液II上。首先看看10％SDS是否是澄清的？NaOH是否是有效的？如果使用的是试剂盒，也要首先确认溶液II是否澄清没有沉淀？

2、可能是细菌浓度很高，适当调整增加溶液I/II/III的体积。

3、可能是“杂菌”污染，如果菌液生长异常快，就有可能被杂菌污染。这种情况一般表现为和目的菌有相同的抗性，生长速度异常，能够提出质粒，跑胶的条带也异常的亮，但产物不是自己想要的质粒，要特别注意一下。抽提DNA去除蛋白质时，为什么要是酚/氯仿混合使用？怎样使用酚与氯仿较好？ 参考见解：酚与氯仿都是非极性分子，水是极性分子，当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时，蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去，使蛋白失去水合状态而变性。经过离心，变性蛋白质的密度比水的密度大，因而与水相分离，沉淀在水相下面，从而与溶解在水相中的DNA分开。而酚与氯仿有机溶剂比重更大，保留在最下层。

作为表面变性的酚与氯仿，在去除蛋白质的作用中，各有利弊，酚的变性作用大，但酚与水相有一定程度的互溶，大约10％～15％的水溶解在酚相中，因而损失了这部分水相中的DNA，而氯仿的变性作用不如酚效果好，但氯仿与水不相混溶，不会带走DNA。所以在抽提过程中，混合使用酚与氯仿效果最好。经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚，由于酚与氯仿是互溶的，可用氯仿第二次变性蛋白质，此时一起将酚带走。也可以在第二次抽提时，将酚与氯仿混合（1:1）使用。

呈粉红色的酚可否使用？如何保存酚不被空气氧化？

参考见解：保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色的，这样的酚容易降解DNA，一般不可以使用。为了防止酚的氧化，可加入疏基乙醇和8-羟基喹琳至终浓度为0.1％。8-羟基喹琳是带有淡黄色的固体粉末，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性，它是金属离子的弱螯合剂。用Tris pH8.0水溶液饱和后的酚，最好分装在棕色小试剂瓶里，上面盖一层Tris水溶液或TE缓冲液，隔绝空气，以装满盖紧盖子为宜，如有可能，可充氮气防止与空气接触而被氧化。平时保存在4℃或－20℃冰箱中，使用时，打开盖子吸取后迅速加盖，这样可使酚不变质，可用数月。

为什么用酚与氯仿抽提DNA时，还要加少量的异戊醇？

参考见解：在抽提DNA时，为了混合均匀，必须剧烈振荡容器数次，这时在混合液内易产生气泡，气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力，可以降低抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25：24:1（不必先配制，可在临用前把一份酚加一份24：1的氯仿与异戊醇即成），同时异戊醇有助于分相，使离心后的上层水相，中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定。加入酚/仿抽提，离心后在水相和有机相间没有出现变性蛋白相层，在随后的乙醇沉淀步骤中却出现大量的半透明沉淀，溶解后发现蛋白浓度很高？

乙醇沉淀时，较纯的质粒沉淀是白色的（PEG纯化的沉淀是透明的肉眼不易发现），如沉淀是半透明的凝胶状，则应是蛋白含量高。参考见解：首先看看平衡酚是否已被氧化？pH是否是8.0？其次检测溶液III反应完成后的离心上清pH是否在8.0左右？有时由于溶液III配置的问题，会出现溶液III反应后离心的上清pH与8.0偏差较大的现象，这会降低平衡酚抽提蛋白抽的有效性，pH偏差过大也会导致水相和平衡酚互溶。使用酚仿抽提方法，质粒的纯度很好，但酶切不能完全切开? 参考见解：

1、确认酶的有效性。

2、平衡酚是否被氧化（正常是黄色，而氧化后是棕色的）。

3、是否不小心吸入了痕量的酚。

4、乙醇沉淀后，70%乙醇漂洗的是否充分（残留的盐类会影响酶切）。

5、乙醇漂洗后是否完全干燥（残留的乙醇会影响酶切）。

碱裂解法提取的质粒DNA进行琼脂糖电泳进行鉴定时，看到的三条带分别是什么？ 参考见解：碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA，得到的三条带是以电泳速度的快慢排序的，分别是超螺旋、开环和复制中间体（即没有复制完全的两个质粒连在了一起）。如果你不小心在溶液II加入后过度振荡，会有第四条带，这条带泳动得较慢，远离这三条带，是20-100kb的大肠杆菌基因组DNA的片断。提取质粒中RNA没有去除？ 可能是RNase失效或效率不高。参考见解：

1、更换RNase A，并保证其储存条件是正确的

2、手工提取质粒的，可单独增加一步去除RNA的步骤，溶液III反应后，在离心的上清中加RNase，室温下去除RNA 10min～30min（需要保证RNase A是经过失活DNase的），同时较高温度（如50℃）会更加快速完全的去除RNA，经验所得经过高温处理的质粒质量不是很高。

提取的质粒电泳后，为连续的一片火箭状？ 参考见解：

1、质粒如果盐离子多，会有走胶变形的现象，如果提到的质粒不够纯，会有电泳条带不平齐的现象。

2、当电压太大时，容易出现火箭状，而降解应该是弥散状。

3、可能是宿主菌影响的，质粒抽提好后，用酚-氯仿处理一下再酶切，若有改善，则为宿主菌影响。转化到其它宿主菌再切。

4、NaOH的浓度过高，会出现火箭状的结果。

用碱裂解法提取质粒，裂解5分钟，没有用酚 / 氯仿抽提，最后用灭菌水溶解质粒DNA15min。双酶切后跑胶一条带都没有，原因是什么？ 参考见解：

1、溶解时间稍微短了点，但是根据各个实验室RNase不同，这个条件是不同的。在溶解的过程要涡旋处理促进溶解。

2、确认一下酶切过程中是不是有DNA酶的污染，比如酶切体系的Buffer或者是水，特别是水中；其次是酶切体系的问题；建议再把提取的产物用70%酒精重新洗涤一遍，也可以用酚 / 氯仿重新抽提一下。

3、也可能在用乙醇洗时把质粒倒掉了。

4、没有用RNase消化，不要用放久的 RNase否则会有DNA酶的污染；

5、在没有进行酶切时,把所提的质粒跑一下核酸电泳看看,如果是提核酸的问题那这一步电泳结果应该没有大于三千的条带,这样可以先排除核酸提取的问题.若是没有酶切时间过长等其他问题的话可以那可以检查一下所用的溶解DNA的溶液是否有DNAse污染的问题，建议将超纯水换成TE。

用碱裂解法提取的质粒,取3ul转化感受态大肠杆菌涂amp抗性平板，却出现阳性克隆较少（含绿色荧光蛋白，阳性克隆应该显绿色，在紫外灯下非常明显，就几十个菌落）大部分菌落不发绿，这些菌落比发绿的菌落小一些的现象，为什么？ 参考见解：

1、做一次阴性对照,拿空白菌涂布在含amp的平板上,如生长,说明amp过期,一般这种情况不多见。一般粉末状的amp不容易失效,如果amp有效的话,可以配制远高于标准的浓度,如果细菌耐药的话,也能生长良好,如不耐药,则放置数天仍不见细菌生长。

2、拿阴性和阳性的细菌各取数个放于高浓度的amp液体培养基中,如能生长,说明空白菌中带有耐药菌,建议换菌.3、提质粒的菌受污染了，重新划线挑单克隆。

培养基、抗生素、质粒提取都没有问题，而细菌菌液提取不到质粒？

参考见解：如果是氨苄抗性的，有可能是质粒丢失造成的。主要是培养时间较长，导致培养基中的beta-内酰胺酶过多，作用时间过长，同时培养基pH值降低，氨苄青霉素失活，从而使无质粒的菌株大量增殖。解决的办法：可以添加葡萄糖，缩短培养时间，改用羧苄青霉素。|||谢谢楼主,还有什么专题也要贴出来啊!|||谢谢分享

到一个小tips。转帖过来和菜鸟分享。大虾凭手感就可以了,我们还是要学学的,受益匪浅

1．溶液I—溶菌液：

溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。

EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。

2．溶液II－NaOH－SDS液：

NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。

SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。（2）解聚细胞中的核蛋白。（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-„R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。

3.溶液III--3mol／L NaAc（pH4.8）溶液：

NaAc的水溶液呈碱性，为了调节pH至4.8，必须加入大量的冰醋酸。所以该溶液实际上是NaAc-HAc的缓冲液。用pH4.8的NaAc溶液是为了把pH12.6的抽提液，调回pH至中性，使变性的质粒DNA能够复性，并能稳定存在。而高盐的3mol／L NaAc有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和核酸上的电荷，减少相斥力而互相聚合，后者是因为钠盐与SDS－蛋白复合物作用后，能形成较小的钠盐形式复合物，使沉淀更完全。

4．为什么用无水乙醇沉淀DNA？

用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般实验中，是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合，其乙醇的最终含量占67％左右。因而也可改用95％乙醇来替代无水乙醇（因为无水乙醇的价格远远比95％乙醇昂贵）。但是加95％的乙醇使总体积增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA损失也增大，尤其用多次乙醇沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95％乙醇代替无水乙酵，最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15－30分钟即可。

5．在用乙醇沉淀DNA时，为什么一定要加NaAc或NaCl至最终浓度达0.1～0.25mol/L？ 在pH为8左右的溶液中，DNA分子是带负电荷的，加一定浓度的NaAc或NaCl，使Na+中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀，当加入的盐溶液浓度太低时，只有部分DNA形成DNA钠盐而聚合，这样就造成DNA沉淀不完全，当加入的盐溶液浓度太高时，其效果也不好。在沉淀的DNA中，由于过多的盐杂质存在，影响DNA的酶切等反应，必须要进行洗涤或重沉淀。

6．加核糖核酸酶降解核糖核酸后，为什么再要用SDS与KAc来处理？

加进去的RNase本身是一种蛋白质，为了纯化DNA，又必须去除之，加SDS可使它们成为SDS-蛋白复合物沉淀，再加KAc使这些复合物转变为溶解度更小的钾盐形式的SDS-蛋白质复合物，使沉淀更加完全。也可用饱和酚、氯仿抽提再沉淀，去除RNase。在溶液中，有人以KAc代替NaAc，也可以收到较好效果。

7．为什么在保存或抽提DNA过程中，一般采用TE缓冲液？

在基因操作实验中，选择缓冲液的主要原则是考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用。磷酸盐缓冲系统（pKa＝7.2）和硼酸系统（pKa=9.24）等虽然也都符合细胞内环境的生理范围(pH)，可作DNA的保存液，但在转化实验时，磷酸根离子的种类及数量将与Ca2＋产生Ca3(PO4)2沉淀；在DNA反应时，不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同，有的要求高离子浓度，有的则要求低盐浓度，采用Tris-HCl（pKa=8.0）的缓冲系统，由于缓冲液是TrisH+/Tris，不存在金属离子的干扰作用，故在提取或保存DNA时，大都采用Tris-HCl系统，而TE缓冲液中的EDTA更能稳定DNA的活性。

8．如何选择聚乙二醇（6000）的浓度来沉淀DNA？

采用PEG（6000）沉淀DNA，大小不同的DNA分子所用的PEG的浓度也不同，PEG的浓度低，选择性沉淀DNA分子量大，大分子所需PEG的浓度只需1％左右，小分子所需PEG浓度高达20％。本实验选择性沉淀4.3kb的pBR322质粒DNA，每毫升加入0.4毫升的30％ PEG，其最终PEG浓度为12％。PEG选择性沉淀DNA的分辨率大约100bp。

9．抽提DNA去除蛋白质时，怎样使用酚与氯仿较好？

酞与氯仿是非极性分子，水是极性分子，当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时，蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去，使蛋白失去水合状态而变性。经过离心，变性蛋白质的密度比水的密度为大，因而与水相分离，沉淀在水相下面，从而与溶解在水相中的DNA分开。而酚与氯仿有机溶剂比重更大，保留在最下层。

作为表面变性的酚与氯仿，在去除蛋白质的作用中，各有利弊，酚的变性作用大，但酚与水相有一定程度的互溶，大约10％～15％的水溶解在酚相中，因而损失了这部分水相中的DNA，而氯仿的变性作用不如酚效果好，但氯仿与水不相混溶，不会带走DNA。所以在抽提过程中，混合使用酚与氯仿效果最好。经酚第一次抽提后的水相中有残留的酚，由于酚与氯仿是互溶的，可用氯仿第二次变性蛋白质，此时一起将酚带走。也可以在第二次抽提时，将酚与氯仿混合（1:1）使用。

10．为什么用酚与氯仿抽提DNA时，还要加少量的异戊酵？

在抽提DNA时，为了混合均匀，必须剧烈振荡容器数次，这时在混合液内易产生气泡，气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25：24:1（不必先配制，可在临用前把一份酚加一份24：1的氯仿与异戊醇即成），同时异戊醇有助于分相，使离心后的上层水相，中层变性蛋白相以及下层有机溶剂相维持稳定。

11．为什么要用pH8的Tris水溶液饱和酚？呈粉红色的酚可否使用？如何保存酚不被空气氧化？

因为酚与水有一定的互溶，苯酚用水饱和的目的是使其抽提DNA过程中，不致吸收样品中含有DNA的水分，减少DNA的损失。用Tris调节至pH为8是因为DNA在此条件下比较稳定。在中性或碱性条件下（pH5～7），RNA比DNA更容易游离到水相，所以可获得RNA含量较少的DNA样品。

保存在冰箱中的酚，容易被空气氧化而变成粉红色的，这样的酚容易降解DNA，一般不可以便用。为了防止酚的氧化，可加入疏基乙醇和8-羟基喹琳至终浓度为0.1％。8-羟基喹琳是带有淡黄色的固体粉末，不仅能抗氧化，并在一定程度上能抑制DNase的活性，它是金属离子的弱螯合剂。用Tris pH8.0水溶液饱和后的酚，最好分装在棕色小试剂瓶里，上面盖一层Tris水溶液或TE缓冲液，隔绝空气，以装满盖紧盖子为宜，如有可能，可充氮气，防止与空气接触而被氧化。平时保存在4℃或－20℃冰箱中，使用时，打开盖子吸取后迅速加盖，这样可使酚不变质，可用数月。