实验室小浮选实验方法

第一篇：实验室小浮选实验方法

试验室小浮选试验方法

一 试验步骤 调试浮选机，使转速、充气量达到规定值。2 称量煤样(称准到0.1克)（144g）。向浮选机内先加入约1/3容积的水，使水位达到第一道标线。开动浮选机，加入称好的干煤样。待搅拌至煤全部润湿后再加入清水，使矿浆液面达到第二道标线。矿浆净体积约1.5升。开动计时器。预搅拌两分钟后，向矿浆液面下加入预先量好体积的捕收剂，1分钟后，再向矿浆页面下加入预先量好体积的起泡剂。10秒钟后，以30次/分的速度，沿浮选槽整个泡沫生成面，按一定的刮泡深度刮泡3分钟，泡沫产品集中于一个器皿中。要控制补水速度，使在整个刮泡期间保持矿浆液面恒定。刮泡阶段后期，应用洗瓶将粘在浮选槽壁上的颗粒清洗至矿浆中 3分钟后，关闭浮选机，并停止补水，把尾煤排放至专门容器内。粘在浮选槽壁上的颗粒要清洗至尾煤容器中。粘在刮板及浮选槽唇边的颗粒应清洗至精煤产品中。向浮选槽加人清水，并开动浮选机搅拌清洗直至浮选槽干净为止。

注 ：各道浮选工序操作时间要严格按照上述规定执行，误差不超过两秒。精煤和尾煤分别脱水（过滤），置于不超过75℃的恒温干燥箱中进行干操。冷却至空气干燥状态后，分别称重、测定灰分，必要时(当浮选人料硫分超过1%时)测定硫分。重复试验一次。

二 试验注意事项 精煤和尾煤重最之和(即计算入料重量)与实际浮选人料重量相比，其损失率不得超过2%，2浮选入料的加权平均灰分与化验灰分之差应符合下列规定: a.煤样灰分小于20%时，相对误差不得超过士5%，b．煤样灰分大于或等于20%时，绝对误差不得超过±0.5%。3 两次平行试验的精煤产率允许误差应小于或等于1.6%。精煤灰分允许误差:当精煤灰分小于或等于10%时，绝对误差小于或等于0.4%，当精煤灰分大于10%时，小于或等于0.5%。4 试验过程中的加药时间要控制好。

第二篇：实验室实验教师岗位职责

实验室实验教师岗位职责

1、实验教师要根据学校的学期工作计划和教研组的教学进度计划，制定本学科的实验教学工作学期计划。

2、根据本学科教材的要求，要保证全部演示实验和学生分组实验的正常开出，并认真落实各项制度。

3、实验教师要刻苦钻研业务。要通读本学科教材，熟练掌握本学科全部演示实验和学生分组实验的操作技术，并对实验现象做出恰当的理论解释。

4、要按时开出实验课，积极协助任课教师辅导好学生的实验课，保证实验课正常进行，并认真填写好实验记录单。

5、与任课教师一起组织好学生的科技活动、实验竞赛、实验复习和考评工作，为学生实验技能的训练和提高，提供有效的服务。

6、熟悉实验室、仪器室、准备室的管理规则，熟悉仪器业务知识，及时编报仪器采购计划，对仪器要精心管理，科学存放，及时维护。掌握一套检测和维修的过硬本领，保证仪器的完好率，要适应新科学、新技术在实验教学中应用的新形势，不断更新自己的业务知识。

7、要积极开展实验教学研究活动，不断改进实验方法，提高实验效果，大力开展自制教具的研制活动，积极自制，代用和改进教具，创造条件，多开实验。

8、注意培养学生良好的、科学的实验习惯，要求他们遵守实验室纪律，爱护设备，精心使用仪器，体现文明礼貌的作风。

9、做好实验室、仪器室、准备室的卫生工作、安全防范和财产保护工作，熟悉防火器材的使用，经常检查安全措施的落实情况。根据仪器设备性能，定期完成维修保养工作。

10、调进或调出实验室，要办好交接手续，及时完成教学仪器帐目管理任务，帐目清楚，实物点清，以保证实验室工作正常进行。

实验室管理规则

一、实验前，学生要做好预习准备。

二、在实验过程中，要仔细观察各种实验的情况。作好记录，认真填写好实验报告。要求自己清楚，数据、曲线、表格应该按规定格式填写、描述。在规定时间内上交。

三、实验时应注意安全，使用玻璃仪器时，当心割破手指。使用易爆、易燃、腐蚀性、有毒性试剂时，应该、听从指导老师的指导，严格操作步骤。防止以外事故的发生。

四、用过的药品、试液应集中到在规定的桶内，不得乱倒乱抛，保持实验室的清洁、卫生。

五、实验完毕后，洗干净所用过的实验器材并整理好，摆放整齐。

六、室内要尽量做好防尘、防潮、防磁场等。

实验员职责

一、忠诚党的教育事业，热爱本职工作，树立全心全意为教学服务的思想。认真学习教学大纲和教材，刻苦钻研业务，积极参加业务进修，不断提高管理水平和实验技能。

二、积极参加教研组活动，熟悉所管年级的教材和各种实验。开学初主动向任课教师了解本学期的实验计划，每学期把它们按年级、按章节写出实验一览表，做到心中有数，及时准备。

三、建立健全教学仪器、设备、药品的保管、使用帐目，做到进出、缺损、消耗登记，做到账物相符，仪器、设备摆放有条理、科学、美观。努力做到三清：账卡清、数量清、质量清。四懂：懂性能、用途、操作、维修保养。经常检查仪器设备情况及存在的问题，及时汇报和解决。保证仪器、模型、标本等的完好率。

四、根据教学计划，独立地提前做好学生实验及演示实验的准备工作，保证实验按时完成。课前认真备好教案，积极协助教师辅导学生上好实验课。实验完毕，认真验收仪器，标本等设备。认真填写实验记录。

五、对易燃、易爆、剧毒等危险品的存放、保管、使用，要按公安部门规定严格管理，并做好实验室的防火、防盗工作，确保师生的人身安生，保护好国家财产。

六、协助教师积极开展科技实验，自制教具和仪器维修等活动，培养学生爱科学、学科学、用科学的积极性。

七、加强责任感，以身作则，严格遵守教学仪器使用、保养的规章制度。坚持原则，对违犯规章制度的行为敢于制止。

八、每学期初，制定实验室工作计划，期末总结实验室工作情况、任课教师实验情况、仪器使用情况及存在的问题，制定下学期购物计划。

九、搞好室内卫生，加强防火、防盗、防破坏安全措施，确保安全。

十、认真遵守实验员守则，遵守作息制度，加强政治学习。努力提高工作能力及思想水平。

实验室学生实验守则

1、做分组实验是学生理论联系实际的重要手段，对提高学生的观察能力、操作能力、分析和解决问题的能力有重要作用。因此，每个学生必须高度重视实验课，珍惜每一堂实验课。

2、学生在实验前要认真作好预习，明确实验目的、要求、原理、步骤以及实验的内容和注意事项。不预习不准作实验。

3、进实验室时要保持良好秩序，按实验小组顺序就座，实验时要遵守纪律，不准喧哗、不打闹。

4、实验开始前要认真听取教师讲解有关实验问题，看清教师的示范。

5、实验开始须首先检查实验用品是否齐全，如发现短缺或损坏，及时向教师报告。

6、实验过程中，要严格遵循实验步骤，操作要规范，仪器的连接和安装要稳固，取用药品要适量，接通电源，点火加热，接触药品或动力时要注意安全。实验时如发现异常现象或仪器损坏等情况后，立即停止实验并及时向教师报告，不得擅自处理。

7、实验过程中要认真观察实验现象，仔细分析思考，实事求是做实验记录。

8、实验结束时要切断电源、水源、火源等，清洗容器，清理实验用品并摆放整齐，遇有损坏、丢失仪器时应及时报告。废液要倒入废液缸，其它废物扔入垃圾箱，严禁将废液倒入水槽中，经教师检查允许后，方可离开实验室。

9、实验要注意安全，节约水电及实验材料，要爱护室内一切设施和用品，未经允许不得擅自动用，要保持实验室的清洁，不要乱扔碎纸和杂物，下课时轮班值日，打扫卫生。

10、实验课后要及时写出实验报告，对失败的实验要申请重（补）做。

第三篇：实验室能力验证方法

实验室能力验证方法

第一条 为建立规范的安全生产检测检验机构能力验证工作机制，根据国家安全生产监督管理总局（以下简称国家总局）赋予省级煤矿安全生产监察局的职责，制定本办法。

第二条 本办法所称的能力验证，是指利用实验室间指定检测数据的比对，确定实验室从事特定测试活动的技术能力。

第三条 能力验证活动应当遵循科学合理、操作可行、非营利性和避免不必要的重复验证的原则。

第四条 安徽煤矿安全生产监察局依照有关国家标准、国际准则制定有关实验室能力验证工作的基本规范和实施规则，统一监管和综合协调能力验证活动。

第五条 能力验证的组织者应当建立并保存能力验证档案及相关记录，包括：

（一）实施能力验证的有关文件；

（二）能力验证的提供者的资质证明；

（三）能力验证的组织者对能力验证的提供者的确认记录；

（四）能力验证的参加者名单；

（五）能力验证的技术报告；

（六）能力验证结果和后续处理文件。

第六条 能力验证的组织者应当于每年年底向国家总局报告下一的能力验证计划，包括：名称、目的、能力验证的内容和关键技术要素设计、组织单位、实施时间、拟参加实验室的范围和数量、能力验证提供者的资质证明和审核材料等。

第七条 能力验证的提供者应当符合相关国家标准或者技术规范的要求，其技术能力在相应领域和关键技术要素方面领先，并具备可持续性。

第八条 安徽煤矿安全生产监察局组织有关方面专家，对能力验证的提供者是否符合相关国家标准或者技术规范的要求进行评价。符合要求的，省局确定其作为能力验证的提供者。

省局鼓励能力验证的组织者利用经过国家认监委确定的能力验证的提供者。

第九条 能力验证的参加者应当向能力验证的组织者及时反馈相关信息，并保存相关记录。

能力验证结果离群的，应当采取相应的纠正措施。

第十条 能力验证的组织者应当及时向国家总局通报能力验证计划的完成情况、能力验证结果、后续处理措施等有关事项。

第十一条

第十二条 省局在能力验证活动完成后向有关方面通报能力验证活动的结果。同时向社会报告能力验证结果，定期公布能力验证满意结果的实验室名单。

第十三条 达到满意结果的安全生产检测检验机构和能力验证的提供者，在规定时间内接受安全生产检测检验机构资质认定评审时，可以免于该项目的现场试验。

鼓励各有关方面利用能力验证的结果，优先推荐或者选择达到满意结果的安全生产检测检验机构承担省局委托、授权或者指定的检验检测任务。

第十四条 能力验证的组织者应当对能力验证的提供者和能力验证的实施过程实施有效管理。

第十五条 对于能力验证的结果可疑或者离群的安全生产检测检验机构机构，能力验证的组织者应当要求其在规定期限内进行整改并验证整改效果，也可视情况暂停或者撤销其相关项目的资质认定或者认可，暂停其承担省局授权、委托或者指定的检验检测任务的资格，直到完成纠正活动并经能力验证的组织者确认后，方可恢复或者重新获得认可以及承担省局授权、委托或者指定的检验检测任务的资格。

第十六条 能力验证的提供者违反职业道德，弄虚作假或者泄露机密的，省局应当取消其承担能力验证的提供者的资格。

能力验证的参加者弄虚作假、进行串通，经查属实的，能力验证组织者视其结果为不满意。情节恶劣的，省局应当取消其相应项目的检测资质资格，并报告国家总局备案。

第十七条 省局可以采取组织专家评议、向实验室征求意见、抽查档案、要求能力验证的组织者和提供者报告能力验证的实施情况等方式，对实验室能力验证活动进行监督。

第十八条 能力验证的参加者对能力验证的结果有异议的，可以向能力验证组织者进行申诉；对违规行为可以向能力验证组织者或者国家总局进行投诉。

第十九条 下列用语的含义：

本办法所称能力验证的提供者，是指从事能力验证的设计和实施的安全生产检测检验机构。

本办法所称能力验证的参加者，是指参加实验室间比对，以确定校准或者检测能力的安全生产检测检验机构。

本办法所称的结果可疑，是指按照有关的技术统计方法确定的能力验证结果界于标准认可值（或者中位值）之间的结果。

本办法所称的离群（即结果离群），是指按照有关的技术统计方法确定的明显偏离标准值（或者中位值）的结果。

第二十一条 本办法由安徽煤矿安全生产监察局负责解释。

第二十二条 本办法自二0一三年十二月一日起施行。

第四篇：《梅毒实验室诊断方法》

梅毒实验室诊断

梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。

一、显微镜检查法

（一）暗视野显微镜检查

【基本原理】

梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。

【仪器材料】

1．暗视野显微镜。

2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。

【标本采集】

1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。

2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。

【操作步骤】

1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。

2．聚光：将标本玻片置载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。

3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。

【结果判读】

XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX、告XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20mm，直径小于0.2mm，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。

【结果报告】

1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。

2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。

【临床意义】

1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。

2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。

3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。

【注意事项】

1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。

2.取材后应立即置暗视野显微镜下观察。

3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。

（二）镀银染色检查

【基本原理】

梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。

【仪器材料】

1．显微镜。

2．罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。

【标本采集】

1.皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液涂片。

2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上。

【操作步骤】

1．涂片干燥：将标本涂于干净载玻片作一薄片，于空气中自然干燥。

2．固定：用固定液将涂片固定2～3分钟。

3．洗涤：用无水乙醇洗涤玻片上的油污。

4．媒染：加媒染剂于涂片上，微加热产生蒸汽，染30秒。

5．银染：水洗，加银染液于涂片上，微加热产生蒸汽，染30秒。

6．镜检：水洗、待干，用油镜检查。

【结果判读】

显微镜下见到染成棕褐色的梅毒螺旋体为阳性结果。

【结果报告】

1．阳性：见到染成棕褐色梅毒螺旋体。

2．阴性：未见到染成棕褐色的梅毒螺旋体。

【临床意义】

同暗视野显微镜检查法。

【注意事项】

应注意与其他螺旋体加以鉴别。

二、血清学检测法

（一）非梅毒螺旋体抗原血清试验

非梅毒螺旋体抗原血清试验，包括性病研究实验室（VDRL）试验、快速血浆反应素（RPR）环状卡片试验、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等。

n

VDRL试验

【基本原理】

梅毒螺旋体感染人体后，宿主会产生抗类脂抗原的抗体（反应素），与一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物抗原反应，可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体。

【仪器材料】

1.水平旋转仪、显微镜。

2.试剂盒：VDRL抗原原液、VDRL缓冲液、抗原滴管及针头、带直径14mm漆圈的玻璃反应板、VDRL试验结果参照图片。

3.30mL平底玻璃小瓶、生理盐水。

【标本采集】

1.血清：抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。也可采用冻存的血清。

2.脑脊液：采用腰椎穿刺术获得，应由相关专业人员操作。

【操作步骤】

1.VDRL抗原配制。

2.VDRL玻片定性试验

（1）灭活：血清标本56℃灭活30分钟。

（2）吸样：吸取0.05mL血清放入反应板圈中，将血清涂布到整个圈内。

（3）加抗原：用标准针头加入1滴抗原。

（4）反应：将反应板置水平旋转仪上旋转4分钟，〔(180±5)次/分钟〕，立即置低倍显微镜下观察。

3.VDRL定量试验

（1）加稀释液：在圈内加入0.05mL生理盐水（根据需要确定稀释度）。

（2）样本稀释：吸取0.05mL样本与各圈中盐水作系列稀释并涂布整个圈内。

（3）以下步骤同定性试验（2）～（4）。

【结果判读】

凝集反应强度分级：

3＋

～

4＋：大的或中等大小的絮状物，液体清亮

2＋：絮状物较小，液体较清亮

1＋：絮状物较小，均匀分布，液体混浊

±：抗原复合物颗粒稍粗

－：抗原颗粒均匀、细小

【结果报告】

1．定性试验：

（1）阳性：镜下可见1＋～4＋的絮状凝集物。

（2）阴性：不产生凝集反应。

2．定量试验：

滴度：镜下可见絮状凝集物的血清最高稀释倍数。

【临床意义】

对一期、二期、潜伏期和晚期梅毒患者的敏感性分别为78%、100%、96%和71%。脑脊液VDRL阳性对神经梅毒有诊断意义。

【注意事项】

1．VDRL用抗原需当天配制。

2．试验反应完毕，应立即观察结果。

n

RPR试验

【基本原理】

RPR试验是VDRL试验的一种改良方法。该法在心磷脂、卵磷脂和胆固醇等组成的抗原中加入活性炭颗粒，与待检血清（浆）中的反应素结合，形成肉眼可见的黑色絮状物。

【仪器材料】

1．水平旋转仪。

2．RPR试剂盒：RPR抗原、直径为18mm圆圈的反应卡片、抗原滴管、针头。

【标本采集】

1．血清：抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。也可采用冻存的血清。

2．血浆：各种抗凝剂制备的血浆。

【操作步骤】

1．定性试验

（1）

加样：吸取0.05mL血清(浆)放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内。

（2）加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头[每毫升（60±1）滴]加1滴抗原。

（3）反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟[（100±5）转/分钟]。立即在亮光下观察结果。

2．定量试验

（1）稀释液准备：在圈内加入0.05mL生理盐水（根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。

（2）加样：吸取0.05mL血清（浆）与各圈中盐水作系列稀释，并涂布整个圈内。

（3）同定性试验（2）～（4）。

【结果判读】

凝集反应强度分级：

3＋

～

4＋：圆圈内出现中到大的黑色絮状物，液体清亮

2＋：圆圈内出现小到中的黑色絮状物，液体较清亮

1＋：圆圈内出现小的黑色絮状物，液体混浊

－：圆圈内仅见碳颗粒集于中央一点或均匀分散

【结果报告】

1．定性试验：

（1）阳性：出现1＋～4＋强度的凝集反应。

（2）阴性：不产生凝集反应。

2．定量试验：

滴度：出现凝集反应的血清最高稀释倍数。

【临床意义】

1．RPR试验适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检查。

2．对未经治疗的一期、二期和潜伏梅毒患者的敏感性分别为86%、100%和98%。

【注意事项】

试验应在23～29℃环境中进行。

n

TRUST试验

TRUST试验是用甲苯胺红颗粒代替RPR试验中的碳颗粒作为指示物，所以阳性结果为红色絮状物。其基本原理、仪器材料、标本采集、操作步骤、结果判读、结果报告、临床意义及注意事项等与RPR试验基本相同。

（二）梅毒螺旋体抗原血清试验

梅毒螺旋体抗原血清试验是以梅毒螺旋体为抗原的特异性的抗原抗体反应，用以检测梅毒抗体，常用的方法有梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）、梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）和梅毒螺旋体蛋白印迹试验（TP-WB）等方法。

n

TPPA试验

【基本原理】

TPPA试验是用超声裂解梅毒螺旋体制备的抗原，致敏明胶粒子，其致敏粒子与待检血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的凝集。

【仪器材料】

1.微量震荡器。

2.试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”未致敏粒子、“E”质控血清。

3．U型反应板。

【标本采集】

同RPR试验。

【操作步骤】

1．试剂准备：试验前将待检样本和试剂应恢复到室温。

2．加稀释液：每份样本做4孔，加B液至反应孔内，第1孔100µL，第2～4孔各25µL。

3．样本稀释：取血清25µL加至第1孔，混匀后取25µL至第2孔，连续倍比稀释至第4孔，最后1孔混匀后弃去25µL。

4．加对照液：第3孔加D液25µL，第4孔加C液25µL。

5．混合：将反应板置震荡器震荡30秒。

6．反应：置湿盒内，孵育2小时后，或放4℃冰箱过夜观察结果。

【结果判读】

观察凝集反应强度，分级如下：

4＋：

粒子光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠

3＋：

粒子光滑覆盖大部分孔底

2＋：

粒子光滑聚集覆盖孔底，周围有一细胞环

1＋：

粒子光滑集聚覆盖孔底，周围有一明显细胞环

±：

粒子沉集孔底，中央形成一小点

－：

粒子紧密沉积孔底中央

【结果报告】

1．阳性：未致敏粒子不出现凝集（第3孔），血清1︰80以上稀释与致敏粒子产生1＋～4＋凝集反应。

2.阴性：未致敏粒子和致敏粒子均不产生凝集反应。

【临床意义】

1.TPPA可作为非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)初筛阳性标本的确证试验。

2．梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPA试验仍可阳性，故TPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。

3．TPPA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。

【注意事项】

1.试验结果为“可疑”时，应选用其他的试验方法进行复验。

2.如未致敏粒子出现凝集反应，样本进行吸收后再进行试验，或改用其他试验方法。

n

TPHA试验

【基本原理】

TPHA试验用超声裂解的梅毒螺旋体菌体为抗原，致敏经醛化、鞣化的羊或禽类红细胞，与抗梅毒螺旋体抗体反应，产生肉眼可见的抗原抗体凝集。

【仪器材料】

1.微量震荡器。

2．TPHA试剂盒：“A”溶解用液、“B”标本稀释液、“C”致敏粒子、“D”

未致敏粒子、“E”质控血清。

3.U型反应板。

【标本采集】

同RPR试验。

【操作步骤】

1．试剂准备：试验前试剂恢复到15～25℃。

2．加稀释液：加B液至反应板，第1孔25mL，第2孔100mL，第3～5孔各加25mL。

3．样本稀释：取血清25mL加至第1孔，混匀后取25mL至第2孔，混匀后取25mL至第3孔，混匀后弃去25mL，再从第2孔取25mL至第4孔，混匀后取25mL至第5孔，混匀后弃去25mL。

4．加对照液：第3孔加D液（未致敏细胞）75µL，第4、5孔加C液（致敏细胞）各75mL。

5．混合：将反应板置震荡器震荡30秒。

6．反应：置湿盒内，15～25℃孵育4小时，或放4℃冰箱过夜观察结果。

【结果判读】

同TPPA试验。

【结果报告】

同TPPA试验。

【临床意义】

同TPPA试验。

【注意事项】

有些采用禽类红细胞为载体的TPHA试验，血清不用吸收，可直接进行试验。

n

FTA-ABS试验

【基本原理】

以完整的梅毒螺旋体作为抗原，与经吸收剂吸收的梅毒血清抗体反应形成抗原抗体复合物，再加入荧光素（FITC）标记的抗人免疫球蛋白，形成带有荧光的抗原抗体复合物，在荧光显微镜下螺旋体显出苹果绿色荧光。

【仪器材料】

1．荧光显微镜。

2．试剂盒：梅毒螺旋体抗原片、吸收剂、荧光素标记抗体、阳性对照血清、PBS缓冲液、固定剂。

3.血清稀释板。

【标本采集】

同VDRL试验。

【操作步骤】

1.血清灭活：将血清标本于56℃灭活30分钟，备用。

2.血清稀释：待检血清用吸收剂1：5稀释，阳性血清及阴性血清分别用PBS缓冲液和吸收剂1:5稀释。置37℃湿盒内，30分钟。

3.加样：每次试验必须设PBS缓冲液、吸收剂、PBS液1︰5稀释阳性和阴性血清及吸收剂1：5稀释阳性和阴性血清共6个对照涂片。每个涂片分别加入10µL稀释后的血清或缓冲液，置37℃湿盒内，30分钟。

4.洗涤：用PBS-

Tween-80液洗玻片2次，每次5分钟，最后用蒸馏水洗一次，冷风干燥。

5.加荧光抗体：每个涂片加10µL按要求稀释的荧光抗体,置37℃湿盒内30分钟。

6.洗涤：同步骤4。

7.封片镜检：用固定剂封片，读片。

【结果判读】

1.阳性对照：无论PBS缓冲液还是吸附剂稀释，荧光强度应相同。

2.阴性对照和空白对照：不产生荧光。

【结果报告】

1.阳性：荧光镜下见到不同程度发绿色荧光的螺旋体。

2.阴性：无荧光或密螺旋体微显淡绿色。

【临床意义】

1.FTA-ABS是梅毒螺旋体抗原血清学试验的“金标准”。

2．对未经治疗的一期、二期、潜伏梅毒和晚期梅毒患者的敏感性分别为84%、100%、100%和96%，特异性均可达97%。

3.其他同TPPA试验。

【注意事项】

1.抗原片每次洗涤要干净，避免其他杂质影响判读结果。

2.试验需有高质量荧光显微镜和技术熟练的操作人员。

n

TP-ELISA试验

【基本原理】

TP-ELISA试验是用包被在固相板条上经超声裂解、纯化处理或重组的梅毒螺旋体抗原，与待检血清中的梅毒特异性抗体结合，再与酶标记的抗人免疫球蛋白单克隆抗体反应，形成抗原抗体复合物而使底物显色。

【仪器材料】

1.酶标仪、洗板机。

2．试剂盒组成：96孔反应板、标本稀释液、洗涤液、酶结合物、底物液、终止液、阳性对照、阴性对照。

【标本采集】

同RPR试验

【操作步骤】

1.加稀释液：取标本稀释液加到反应板孔内。

2.孵育：分别加入阳性、阴性对照和待检血清，置37℃孵育一定时间,洗板。

3.加酶结合物：加酶结合物，置37℃孵育一定时间,洗板。

4.加显色剂：加底物，37℃避光孵育。

5.终止反应：加终止液，酶标仪测OD（光密度）值。

【结果判读】

1．每次试验的阳性、阴性对照应在规定的数值范围内

2．根据阳性、阴性OD值设定阈值（cut-off值）。

【结果报告】

1．阳性：标本OD值大于或等于cut-off值。

2．阴性：标本OD值小于cut-off值。

【临床意义】

（1）适用于流行病学调查或大样本量标本的检测。

（2）ELISA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)结果进行诊断。

【注意事项】

1.不同批号试剂不能混用。

2.温度和时间必须严格控制。

■

TP-WB试验

【基本原理】

用超声粉碎的梅毒螺旋体或梅毒螺旋体重组的不同抗原，印迹至硝酸纤维膜条上。通过酶联反应，可检测梅毒血清中多种特异抗原成分的抗体。

【仪器材料】

1.水平摇床。

2.试剂盒:硝酸纤维膜条、酶标抗体、阳性质控血清、阴性质控血清、底物液、终止液、标准阳性反应带结果参比图谱。

【标本采集】

同RPR试验

【操作步骤】

1．反应：每反应槽加2.0mL工作缓冲液，浸湿膜条5分钟，加入0.02mL待检样本，置水平摇床上(50转/分)，18～25℃反应45分钟。

2．洗涤：弃去反应槽中液体，加入

2.0mL工作缓冲液，置水平摇床洗涤3次，每次5分钟。

3．加酶结合物：

加入酶标抗体，置水平摇床反应30分钟。

4．洗涤：同步骤2。

5．显色：每槽加2.0mL底物，置水平摇床上反应8～10分钟。

6．终止:

待阳性对照带显色清晰，加入1.0

mL终止剂2分钟后弃去槽中液体，用蒸馏水洗2次，用镊子取出反应条，置滤纸上。

【结果判读】

1．根据阳性结果参比图谱判定结果。

2.将试验的硝酸纤维膜条上端标记线与参比标记线对齐。

3．观察45KD、17KD及15.5KD带区显色带。

【结果报告】

1．阳性：

45KD、17KD及15.5KD带区均出现显色带。

2．阴性：

45KD、17KD及15.5KD三个条带均未显色。

【临床意义】

1．同TPPA试验

2．可以用于检测IgM或IgG抗体。

【注意事项】

1．洗涤要充分，否则易造成试验膜条带背景的颜色偏深。

2．硝酸纤维膜条有对照反应条带，在试验中应显示，如未显示，则试验无效。

3．当45KD、17KD及15.5KD中只有一个或两个条带出现明显色带为可疑结果，需重新试验。

n

快速免疫层析法

【基本原理】

利用免疫层析原理，采用吸附有显色标记的梅毒螺旋体重组抗原的滤纸条，快速检测标本中的梅毒螺旋体抗体。

【仪器材料】

试剂盒：测试板、一次性滴管。

【标本采集】

同RPR试验，可用全血。

【操作步骤】

1．加样：用一次性滴管滴加一定量标本于加样孔中。

2．加缓冲液：立即加入一定量的缓冲液。

3．观察结果：规定时间内判读结果。

【结果判读】

1.观察质控条带,判断试验有效性，如没有出现质控条带，说明试验无效，需重复试验。

2．观察标本条带。

【结果报告】

1．阳性:

出现标本条带和质控条带。

2．阴性：无标本条带，出现质控条带。

【临床意义】

1．可以用于标本的快速筛查。

2．快速检测阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验(如RPR等)结果进行诊断。

【注意事项】

1．试剂盒从冷藏环境中取出时，应平衡至室温后方可使用。

2．本试验方法存在一定的假阳性和假阴性。

三、其它方法

（一）梅毒IgM抗体的检测

与其它细菌及病毒感染一样，在梅毒中特异性IgM抗体的合成是第一次感染后的体液免疫应答。在梅毒中螺旋体IgM抗体出现在早期梅毒患者中，在潜伏期及晚期患者也能发现。在自发痊愈的患者中IgM水平下降的速度比治疗痊愈的患者慢。IgM分子大使其不能通过胎盘屏障及完整无损的血脑屏障。因此若在新生儿血中检测到IgM抗体是儿童产前感染的诊断标志；如在患者的完整无损的血脑屏障的脑脊液（CSF）中出现，则表示患有活动性神经梅毒。在最近未接受治疗的患者血液中或CSF中出现抗梅毒IgM抗体均表示需要治疗。

测定IgM抗体方法的基本原理是采用分离柱，使血清中的IgM和IgG按其分子量大小在分离过程中的沉降速度不同，将IgM和IgG分别收集，再进行FTA-ABS等试验。亦可采用抗IgM单克隆抗体的酶标法、蛋白质印迹法等进行检测。目前测定IgM抗体的方法的敏感性还很不理想，但是检查到IgM抗体则有助于对以下病例中的试验结果更可靠的解释：先天性梅毒、早期一期梅毒、晚期梅毒、非梅毒螺旋体试验的血清阳转前的早期感染患者的判愈试验及有梅毒史或其它螺旋体感染史患者的再感染。

（二）胎传梅毒(或先天梅毒)的实验室诊断

具有下列实验室四个指标之一，可诊断为胎传梅毒(或先天梅毒)：①暗视野检查梅毒螺旋体阳性；②患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升；③患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母亲高4倍（低于或等于该值并不排除胎传梅毒）；④患儿检出19S-IgM抗体。

（三）神经梅毒的实验室诊断

1．神经梅毒的实验室诊断标准包括：①梅毒血清学检查阳性；②脑脊液细胞计数或蛋白测定结果异常；③脑脊液VDRL试验阳性。

2．脑脊液VDRL试验是神经梅毒的标准试验，阳性结果可诊断为神经梅毒，但该试验存在假阴性。

3．脑脊液的FTA－ABS试验阴性可排除神经梅毒，但特异性不高，可能产生假阳性。

4．脑脊液检查内容

（1）细胞计数：正常时白细胞数应小于3×106/L，若白细胞数大于10×106/L，提示中枢神经系统有炎症现象。

（2）蛋白质量测定：总蛋白质量正常为0.1～0.4g/L，神经梅毒可稍升高，或高达1.0～2.0g/L。

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END

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第五篇：实验室意外情况及处理方法

1、着火

生化实验室经常使用大量的有机溶剂，如甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等，而实验室又经常使用电炉等火源，因此极易发生着火事故。

闪点：液体表面的蒸汽和空气的混合物在遇明火或火花时着火的最低温度;自燃点：液体蒸汽在空气中自燃时的温度。

由上表可以看出，乙醚、二硫化碳、丙酮、和苯的闪点都很低，因此不得存于可能会产生电火花的普通冰箱内。低闪点液体的蒸汽只需接触红热物体的表面便会着火，其中二硫化碳尤其危险。

2、预防火灾的操作规程

(1)严禁在开口容器和密闭体系中用明火加热有机溶剂，只能使用加热套或水浴加热。(2)废有机溶剂不得倒入废物桶，只能倒入回收瓶，以后再集中处理。量少时用水稀释后排入下水道。

(3)不得在烘箱内存放、干燥、烘焙有机物。

(4)在有明火的实验台面上不允许放置开口的有机溶剂或倾倒有机溶剂。

灭火方法

实验室中一旦发生火灾切不可惊慌失措，要保持镇静，根据具体情况正确地进行灭火或立即报火警(火警电话119)。

(1)容器中的易燃物着火时，用玻璃纤维布灭火毯盖灭。

(2)乙醇、丙酮等可溶于水的有机溶剂着火时可以用水灭火。汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着火时不能用水，只能用灭火毯和砂土盖灭。

(3)导线、电器和仪器着火时不能用水和二氧化碳灭火器灭火，应先切断电源，然后用1211灭火器灭火。

(4)个人衣服着火时，切勿慌张奔跑，以免风助火势，应迅速脱衣，用水龙头浇水灭火，火势过大时可就地卧倒打滚压灭火焰。

3、爆炸 生物化学实验室防止爆炸事故是极为重要的，因为一旦爆炸其毁坏力极大，后果将十分严重。生物化学实验室常用的易燃物蒸汽在空气中的爆炸极限(体积%)见表1—2。加热时会发生爆炸的混合物有：有机化合物～氧化铜、浓硫酸～高锰酸钾、三氯甲烷～丙酮等。常见的引起爆炸事故的原因有：①随意混合化学药品，并使其受热、受摩擦和撞击;②在密闭的体系中进行蒸馏、回流等加热操作;③在加压或减压实验中使用了不耐压的玻璃仪器，或反过于激烈而失去控制;④易燃易爆气体大量逸入室内;⑤高压气瓶减压阀摔坏或失灵。

4、中毒

生化实验室常见的化学致癌物有：石棉、砷化物、铬酸盐、溴乙锭等。剧毒物有：氰化物、砷化物、乙腈、甲醇、氯化氢、汞及其化合物等。中毒的原因主要是由于不慎吸入、误食或由皮肤渗入。

中毒的预防： ①保护好眼睛最重要，使用有毒或有刺激性气体时，必须配戴防护眼镜，并应在通风橱内进行;②取用毒品时必须配戴橡皮手套;③严禁用嘴吸移液管，严禁在实验室内饮水、进食、吸烟，禁止赤膊和穿拖鞋;④不要用乙醇等有机溶剂擦洗溅洒在皮肤上的药品。

中毒急救的方法主要有：①误食了酸或碱，不要催吐，可先立即大量饮水，误食碱者再喝些牛奶，误食酸者，饮水后再服Mg(OH)2乳剂，最后饮些牛奶;②吸入了毒气，立即转移室外，解开衣领，休克者应施以人工呼吸，但不要用口对口法;③砷和汞中毒者应立即送医院急救。

5、外伤

(1)化学灼伤：

①眼睛灼伤或掉进异物：眼内溅入任何化学药品，应立即用大量水冲洗十五分钟，不可用稀酸或稀碱冲洗。若有玻璃碎片进入眼内则十分危险，必须十分小心谨慎，不可自取，不可转动眼球，可任其流泪，若碎片不出，则用纱布轻轻包住眼睛急送医院处理。若有木屑、尘粒等异物进入，可由他人翻开眼睑，用消毒棉签轻轻取出或任其流泪，待异物排出后再滴几滴鱼肝油。②皮肤灼伤：

酸灼伤：先用大量水洗，再用稀NaHCO3或稀氨水浸洗，最后再用水洗。碱灼伤：先用大量水冲洗，再用1%硼酸或2%醋酸浸洗，最后再用水洗。

溴灼伤：这很危险，伤口不易愈合，一旦灼伤，立即用20%硫代硫酸钠冲洗，再用大量水冲洗，包上消毒纱布后就医。

(2)烫伤：使用火焰、蒸汽、红热的玻璃和金属时易发生烫伤，应立即用大量水冲洗和浸泡，若起水泡不可挑破，包上纱布后就医，轻度烫伤可涂抹鱼肝油和烫伤膏等。(3)割伤：

这是生物化学实验室常见的伤害，要特别注意预防，尤其是在向橡皮塞中插入温度计、玻璃管时一定要用水或甘油润滑，用布包住玻璃管轻轻旋入，切不可用力过猛，若发生严重割伤时要立即包扎止血，就医时务必检查伤部神经是否被切断。

实验室应准备一个完备的小药箱，专供急救时使用。药箱内备有：医用酒精、红药水、紫药水、止血粉、创口贴、烫伤油膏(或万花油)、鱼肝油、1%硼酸溶液或2%醋酸溶液、1%碳酸氢钠溶液、20%硫代硫酸钠溶液、医用镊子和剪刀、纱布、药棉、棉签、绷带等。

6、触电

生物化学实验室要使用大量的仪器、烘箱和电炉等，因此每位实验人员都必须能熟练地安全用电，避免发生一切用电事故，当50HZ 的电流通过人体25mA 电流时呼吸会发生困难，通过了100mA 以上电流时则会致死。

(1)防止触电：①不能用湿手接触电器;②电源裸露部分都应绝缘;③坏的接头、插头、插座和不良导线应及时更换;④先接好线路再插接电源，反之先关电源再拆线路;⑤仪器使用前要先检查外壳是否带电;⑥如遇有人触电要先切断电源再救人。

(2)防止电器着火：①保险丝、电源线的截面积、插头和插座都要与使用的额定电流相匹配;② 三条相线要平均用电;③生锈的电器、接触不良的导线接头要及时处理;④电炉、烘箱等电热设备不可过夜使用;⑤仪器长时间不用要拔下插头，并及时拉闸;⑥电器、电线着火不可用泡沫灭火器灭火。