2013.12.02.保健食品稳定性试验指导原则

第一篇：2013.12.02.保健食品稳定性试验指导原则

保健食品稳定性试验指导原则

保健食品注册检验机构应按照国家相关规定和标准等要求，根据样品具体情况，合理地进行稳定性试验设计和研究。

一、基本原则

（一）保健食品稳定性试验是指保健食品通过一定程序和方法的试验，考察样品的感官、化学、物理及生物学的变化情况。

（二）通过稳定性试验，考察样品在不同环境条件下（如温度、相对湿度等）的感官、化学、物理及生物学随时间增加其变化程度和规律，从而判断样品包装、贮存条件和保质期内的稳定性。

（三）根据样品特性不同，稳定性试验可采取短期试验、长期试验或加速试验。

1.短期试验：该类样品保质期一般在6个月以内（含6个月），在常温或说明书规定的贮存条件下考察其稳定性。

2.长期试验：该类样品一般保质期为6个月以上，在说明书规定的条件下考察样品稳定性。

3.加速试验：该类样品一般保质期为2年，为缩短考察时间，可在加速条件下进行稳定性试验，在加速条件下考察样品的感官、化学、物理及生物学方面的变化。

二、试验要求

（一）样品分类。

1.普通样品。对贮存条件没有特殊要求的样品，可在常温条件下贮存，如固体类样品（片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂等）；液体类样品（口服液、饮料、酒剂等）。

2.特殊样品。对贮存条件有特殊要求的样品，如益生菌类、鲜蜂王浆类等。

（二）样品批次、取样和用量。应符合现行法规，满足稳定性试验的要求。

（三）样品包装及试验放置条件。稳定性试验的样品所用包装材料、规格和封装条件应与产品质量标准、说明书中的要求一致。

1.普通样品。加速试验应置于温度37±2℃、相对湿度RH75±5%、避免光线直射的条件下贮存3个月。短期试验、长期试验应在说明书规定的储存条件下贮存，贮存时间根据产品质量标准及说明书声称的保质期而定。

2.特殊样品。在说明书规定的贮存条件下贮存。

（四）试验时间。稳定性试验中应设置多个考察时间点，其考察时间点应根据对样品的性质（感官、理化、生物学）了解及其变化的趋势设定。

1.普通样品。长期试验一般考察时间应与样品保质期一致，如保质期定为2年的样品，则应对0、3、6、9、12、18、24个月样品进行检验。0月数据可以使用同批次样品卫生学试验结果。

加速试验一般考察时间为3个月，即对放置0、1、2、3个月样品进行考察。0月数据可以使用同批次样品卫生学试验结果。

2.特殊样品。在说明书规定的贮存条件下进行考察。保质期在3个月之内的，应在贮存0、终月（天）进行检测；保质期大于3个月的，应按每3个月检测一次（包括贮存0、终月）的原则进行考察。

（五）考察指标。应按照产品质量标准规定的方法，对申请人送检样品的卫生学及其与产品质量有关的指标在保质期内的变化情况进行的检测。

（六）检测方法。应按产品质量标准规定的检验方法进行稳定性试验考察指标的检测。

三、结果评价

保健食品稳定性试验结果评价是对试验结果进行系统分析和判断，检测结果应符合产品质量标准规定。

（一）贮存条件的确定。应参照稳定性试验研究结果，并结合保健食品在生产、流通过程中可能遇到的情况，同时参考同类已上市产品的贮存条件，进行综合分析，确定适宜的产品贮存条件。

（二）直接接触保健食品的包装材料、容器等的确定。一般应根据保健食品具体情况，结合稳定性研究结果，确定适宜的包装材料。

（三）保质期的确定。保健食品保质期应根据产品具体情况和稳定性考察结果综合确定。采用短期试

验或长期试验考察产品质量稳定性的样品，总体考察时间应涵盖所预期的保质期，应以与0月数据相比无明显改变的最长时间点为参考，根据试验结果及产品具体情况，综合确定保质期；采用加速试验考察产品质量稳定性的样品，根据加速试验结果，保质期一般定为2年；同时进行了加速试验和长期试验的样品，其保质期一般主要参考长期试验结果确定。

第二篇：保健食品原料及相关问题解答

保健食品原料及相关问题解答

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2006年01月25日 9:43:23

《保健食品注册管理办法（试行）》实施以来，以新资源食品或食品新资源为原料的保健食品日渐增多，申请人对保健食品新原料的应用、申报要求和审评原则等存在疑问，为方便申请注册申请，现将有关问题解答如下:

一、根据《保健食品注册管理办法（试行）》、《关于实施<保健食品注册管理办法（试行）>有关问题的通知》的有关规定，在国家局发布新规定之前，保健食品原、辅料的使用和审批暂按照卫生部发布的《卫生部关于进一步规范保健食品原料管理的通知》（卫法监发［2002］51号）文件执行。

二、根据《卫生部关于进一步规范保健食品原料管理的通知》（卫法监发[2002]51号）文件规定，按以下原则审评：

（一）普通食品可作为生产保健食品的原辅料。

（二）申请注册的保健食品中涉及食品添加剂的，应符合《食品添加剂使用卫生标准》的规定，即所用品种为列入《食品添加剂使用卫生标准》（GB2760）、《食品营养强化剂使用卫生标准》（GB14880）或卫生部公告名单中的食品添加剂新品种。

（三）真菌类保健食品是指利用可食大型真菌和小型丝状真菌的子实体或菌丝体生产的产品。申请注册的保健食品中涉及真菌物品的，除长期袭用的可食真菌的子实体及其菌丝体外，可用于保健食品的真菌种名单应为国家食品药品监督管理局公布的《可用于保健食品的真菌菌种名单》中的菌种，经过基因修饰的菌种不得用于生产保健食品。

（四）益生菌类保健食品是指能够促进肠道菌群生态平衡，对人体起有益作用的微生态产品。申请注册的保健食品中涉及益生菌物品的，益生菌菌种必须是人体正常菌群的成员，可利用其活菌、死菌及其代谢产物，可用于保健食品的益生菌菌种名单应为国家食品药品监督管理局公布的《可用于保健食品的益生菌菌种名单》的菌种，经过基因修饰的菌种不得用于生产保健食品。

（五）卫生部批准的食品新资源或新资源食品（仅限于食品新资源或新资源食品生产批件中载明的申报单位使用）。

（六）申请注册的保健食品涉及动植物物品的，该物品应为卫生部发布的《即是食品又是药品的物品名单》和《可用于保健食品的物品名单》内规定的物品。

（七）在我国新研制、新发现、新引进的无食用习惯或仅在个别地区有食用习惯的，符合食品基本要求的物品，称之为食品新资源或新资源食品，申请注册保健食品中涉及食品新资源或新资源食品的，应按照《新资源食品卫生管理办法》的有关规定执行，申请人应按以下要求提供该物品相应的安全性毒理学评价试验报告及相关的食用安全资料：

1、根据卫法监发[2002]51号文件规定，申请注册的保健食品中含有动植物物品（或原料）总数不得超过14个，允许使用《既是食品又是药品的物品名单》（附件1）、《可用于保健食品的物品名单》（附件2）之外的动植物物品（或原料），总个数不得超过1个，且该物品（或原料）应参照《食品安全性毒理学评价程序》（GB15193.1-1994）及《保健食品检验与评价技术规范（2003）》的有关要求进行安全性毒理学试验，原则上应进行第一、二、三个阶段毒性试验，及必要的人群流行病学调查，必要时应进行第四阶段试验。具体规定如下：

（1）国内外均无食用历史的原料或成分作为保健食品原料时，应对该原料或成分进行四个阶段的毒性试验。

（2）仅在国外少数国家或国内局部地区有食用历史的原料或成分，原则上应对该原料或成分进行第一、二、三阶段的毒性试验，必要时进行第四阶段毒性试验。

（3）若根据有关文献资料及成分分析，未发现有毒或毒性甚微不至构成对健康损害的物质，以及较大数量人群有长期食用历史而未发现有害作用的动植物及微生物等，可以先对该物质进行第一、二阶段的毒性试验，经初步评价后，决定是否需要进行下一阶段的毒性试验。

（4）凡以已知的化学物质为原料，国际组织已对其进行过系统的毒理学安全性评价，同时申明我国产品的质量规格与国外产品一致，则可对该化学物质先进行第一、二阶段毒性试验。若试验结果与国外产品的结果一致，一般不要求进行进一步的毒性试验，否则应进行第三阶段毒性试验。

（5）在国外多个国家广泛食用的原料，在提供安全性评价资料的基础上，进行第一、二阶段毒性试验，根据试验结果决定是否进行下一阶段毒性试验。

2、根据国家食品药品监督管理局发布的《真菌类保健食品申报与审评规定（试行）》的规定，申请注册的保健食品使用《可用于保健食品的真菌菌种名单》之外真菌菌种的，除按要求提供确定的菌种属名、种名、培养条件、保藏方法、菌种鉴定报告及菌种的安全性评价（包括毒力试验）等资料外，还应提供以下资料：

（1）菌种具有功效作用的研究报告（试验报告或文献资料）；

（2）菌种在国内外长期食用的安全性资料；

（3）菌种及其代谢产物不产生任何有毒有害作用的资料。

3、根据国家食品药品监督管理局发布的《益生菌类保健食品申报与审评规定（试行）》的规定，申请注册的保健食品使用《可用于保健食品的益生菌菌种名单》之外益生菌菌种的，除按要求提供确定的菌种属名、种名、培养条件、保藏方法、菌种鉴定报告及菌种的安全性评价（包括毒力试验）等资料外，还应提供以下资料：

（1）菌种具有功效作用的研究报告（试验报告或文献资料）；

（2）菌种在国内外长期食用的安全性资料；

（3）菌种及其代谢产物不产生任何有毒有害作用的资料。

4、提供省级以上行政管理部门出具的该食品新资源或新资源食品具有广泛食用历史的证明文件。证明文件中应包括食用地区、涉及人口数量及食用时间等内容。

5、提供省级以上专业机构出具的该食品新资源或新资源食用安全、食用历史、不良反应等情况的检索报告。检索报告应为食用的相关内容，有关药用的内容不予认可。

6、其它有助于该食品新资源或新资源食品安全性评价的文献资料。

三、食品新资源或新资源食品安全性毒理学试验（包括菌种毒力试验）应由确定的检验机构完成。

四、申请注册的保健食品涉及的食品新资源或新资源食品，虽在已批准的保健食品中使用过，但以下情况仍应按照《新资源食品卫生管理办法》的规定进行安全性毒学评价：

（一）未列入国家食品药品监督管理局公布的可用于保健食品的或卫生部公布可食用的名单内；

（二）未列入卫生部公布或批准的食品新资源或新资源食品名单内；

（三）卫生部已批准为食品新资源或新资源食品，但保健食品注册申请人与食品新资源或新资源食品生产批件中载明的申报单位不一致。

五、申请注册的保健食品中涉及食品新资源或新资源食品时，由国家食品药品监督管理局组织保健食品审评专家，在审评保健食品的同时对涉及的食品新资源或新资源食品进行审评，并从严掌握，基本原则如下：

（一）食品新资源或新资源食品未按照《新资源食品卫生管理办法》的有关规定进行安全性毒理学评价的，申请注册的保健食品不予批准。

（二）已按要求提了供食品新资源或新资源食品安全性评价试验报告及相关资料的，按以下原则审评：

1、经专家审评后认为，该食品新资源或新资源食品保健功能确切，符合食品的基本要求，可以食用且安全，申报资料完整规范，可用于保健食品。

2、经专家审评后认为，该食品新资源或新资源食品安全性评价试验不完整、不规范，或主要为药用，不符合食品的基本要求，不能食用的，食用安全性判定依据不足，则不可用于保健食品，申请注册的保健食品不予批准。

3、经专家审评后认为，该食品新资源或新资源食品保健功能确切，安全性评价试验规范、完整，符合食品的基本要求，可以初步判定其安全性，但仍需提供广泛食用证明、检索报告等其它证明资料或文献资料，以进一步证实其食用安全的，允许补充相关资料后再审。

第三篇：关于印发保健食品样品试制和试验现场

关于印发《保健食品样品试制和试验现场

核查规定（试行）》的通知

国食药监注[2005]261号

各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局(药品监督管理局)：

根据《保健食品注册管理办法（试行）》，为规范申请注册的保健食品样品试制和试验现场核查工作，我局制定了《保健食品样品试制和试验现场核查规定（试行）》，现予印发并于2005年7月1日起正式实施。

鉴于《保健食品注册管理办法（试行）》制定颁布前，未明确规定申请注册国产保健食品所需样品，应当在符合《保健食品良好生产规范》的车间生产，其加工过程必须符合《保健食品良好生产规范》的要求，因此，对于在2005年7月1日以前已经由卫生部、省级卫生行政管理部门认定的检验机构正式受理试验，但在2005年7月1日以后向我局申请注册的产品，其样品试制单位的生产资质核查只供审查时参考。

特此通知。

附件：保健食品样品试制和试验现场核查规定（试行）

国家食品药品监督管理局 二○○五年六月十日

附件：

（试

行）

第一章 总则

第一条 为规范申请注册的保健食品样品试制和试验现场核查工作，根据《保健食品注册管理办法（试行）》，制定本规定。

第二条 保健食品样品试制/试验现场核查是指国家食品药品监督管理局或省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门根据规定的核查内容对申请注册的保健食品的样品试制/试验的现场进行核查，并提出核查意见。

试验现场核查包括安全性毒理学试验、功能学试验、功效成分和标志性成分检测、卫生学试验和稳定性试验等现场的核查。

第三条 省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门受国家食品药品监督管理局的委托，负责对申请注册的国产保健食品样品试制和试验现场进行核查并抽取检验用样品。

国家食品药品监督管理局负责对申请注册的进口保健食品生产现场和试验现场进行核查。

第二章 国产保健食品现场核查内容

第四条 样品试制现场核查的内容：

（一）样品试制单位的生产资质证明；

（二）按照申报资料的工艺流程图核查样品的生产工艺过程；

（三）样品的原料来源和投料记录；

（四）抽取检验用样品；

（五）其它需要核查的内容。保健食品样品试制和试验现场核查规定

第五条 样品试验现场核查的内容：

（一）样品试验报告是否由该检验机构出具；

（二）与试验相关记录，包括试验样品受理、传递及管理记录，试验原始记录，仪器设备使用记录以及与试验相关的其他内容；

（三）必要时，抽取检验用样品。

第六条 食品药品监督管理部门可对试验行为规范，管理严格的检验机构简化核查内容。

第三章 国产保健食品现场核查程序

第七条 现场核查应当由样品试制现场所在地的省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门负责组织进行，并提出现场核查意见。

样品试验现场不在样品试制现场所在地的，样品试制现场所在地的省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门可以商试验现场所在地的省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门协助进行样品试验现场的核查。

第八条 省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门应当在保健食品注册申请受理后的15日内组织并完成现场核查。

第九条 现场核查小组由2—3人组成，并指定一人为组长。成员应当熟悉申报资料中相关内容，具有相应的专业知识和现场核查经验。

第十条 现场核查小组开展核查工作前，应当提前通知被核查单位；核查时应当出示省、自治区、直辖市食品药品监督管理部门的书面委派函。

第十一条 被核查单位接到核查通知后，应当指派专人协助核查工作。

第十二条 核查人员可以采取交谈、查看现场，调阅相关资料等方式进行现场核查；必要时也可以对相关现场、资料进行照相或者复制，并要求被核查单位确认。

第十三条 核查小组在试制现场抽样时，应当随机抽取连续三个批号产品样品，抽样数量应为检验所需量的三倍；在试验现场抽取的样品量应当根据检验项目确定。抽样后应当在样品外包装上加贴盖有抽样单位公章的封条，并注明样品名称、封样日期、封样人及被核查单位签字。

第十四条 抽样时，核查人员应当填写《现场样品抽样单》，并要求被抽样单位进行现场确认。

第十五条 现场核查结束时，核查人员根据现场核查的情况提出初步核查意见并告知被核查单位；被核查单位对初步核查意见有异议的，可以当场进行陈述、申辩并提供相关资料。核查小组在听取被核查单位意见后填写《样品试制/试验现场核查表》，并交被核查单位签署意见。

第十六条 组织核查的食品药品监督管理部门在此基础上提出核查意见，报送国家食品药品监督管理局，并向确定的检验机构发出检验通知书，提供检验用样品及产品质量标准。

第四章 附则

第十七条 对申请注册的进口保健食品产品的生产现场、试验现场的核查参照上述规定执行。

第十八条 申请益生菌、真菌等保健食品注册的样品试制现场核查，应结合国家食品药品监督管理局制定的有关规定进行。

第十九条 核查过程中涉及被核查单位的有关资料和信息不得对外泄露。

第二十条 本规定由国家食品药品监督管理局负责解释。

第二十一条 本规定自二○○五年七月一日起实施。

第四篇：环孢素滴眼液稳定性的长期试验考察

0.05%环孢素滴眼液稳定性的长期试验考察

1.前言

环孢素（Cyclosporine，CS）是一种真菌源性、由11个氨基酸组成的亲脂性环状多肽类物质，也是一种高效免疫抑制剂。它广泛地应用于器官移植和多种自身免疫性疾病的治疗中[1]，也是国际上认可的可以治疗干眼症的处方药[2]。其药理作用主要通过选择性、可逆性地抑制T淋巴细胞而实现，通过转导作用，作用于T细胞活化过程中信号，抑制神经钙蛋白，进而抑制T细胞增长与分化[3]，最终达到免疫抑制效果。在临床上多用于治疗器官移植后的免疫排斥反应、类风湿性关节炎[4]等自身免疫疾病，并且可提高存活率。环孢素用于眼表疾病也具有显著的疗效。其在眼科的应用分为全身用药和局部用药两种方式。然而全身用药受到血-眼屏障等因素不易进入眼内，并且会带来严重的不良反应[5]，因此多为眼局部用药。

角膜移植排斥反应是由供体角膜的特殊抗原引起的一种炎性反应。环孢素作为一种强效免疫抑制剂，可有效抑制角膜移植后的免疫排斥反应[6]，在临床的治疗方面仍以糖皮质激素和环孢素为主，但是长时间应用激素会产生多种不良反应。环孢素抑制T细胞由G0期向G1期转变，从而抑制T淋巴细胞的抗原呈递并抑制白介素2和γ-干扰素的产生，减轻术后的排斥反应[7]。

蚕蚀性角膜溃疡又名Mooren＇s溃疡，是一种慢性、进行性、疼痛性角膜溃疡，初发于角膜周边部位，沿角膜周边部延伸，并向角膜中央匍行发展，最终累及全角膜。术后常规应用激素和环孢素滴眼液及环磷酰胺等免疫抑制剂药物治疗。该术后药物维持治疗研究结果[8]证明局部环孢素滴眼液单独或联合板层角膜移植术可以有效治疗难治性蚕蚀性角膜溃疡。

腺病毒感染引起的流行性角膜结膜炎（Epidemic

keratitis

conjunctivitis，EKC）是一种世界性广泛流行的眼部传染病，但可通过自身免疫系统的建立，很快自愈。其临床特点是急性滤泡性或假膜性结膜炎，伴有角膜上皮下浸润，常由免疫反应所引起。通常需要历时一定时间才会吸收，长达数月、甚至数年溃疡不会形成[9]，如果瞳孔区发生了病变，定会对该病人的视力造成的伤害较为严重。Jeng[10]等报道应用环孢素联合糖皮质激素点眼对其进行治疗较为理想，应用环孢素进行治疗会显得更加有效、安全、无副作用。

此外，环孢素多用于治疗临床中常见的干眼症(DES)[11]，干眼症多为种复杂原因所致泪液质和量及动力学的异常从而导致泪膜不稳定性和或眼表面异常、并伴有眼部不适症状的一类疾病。在临床方面用药效果较好，可以有效缓解干眼等不适症状，且不良反应小，可以长期使用。干眼症又名角结膜干燥症(KCS)，是因为眼表泪液减少、黏液分泌异常等原因引发的泪液蒸发较多，分布异常的综合征。其大致可分为四种类型：①由于泪腺功能低下所致的水样夜缺乏性干眼病；②由于沙眼、化学伤所致的黏性蛋白缺乏性干眼病；③由于眼睑缺损、配带角膜接触镜等导致泪液分布不均匀而引起泪液动力学异常；④由于睑板腺功能障碍引起脂质缺乏性干眼症；在普通人群中的发病率为0.3%[12]，干眼症的治疗应着手于去除病因，减少眼表和泪腺的炎症，改善泪膜的结构和功能。

DES的发病率与多种因素有关，其中50岁以上女性患病率约为男性的2倍。

在某些疾病中，其发病率更高，如在糖尿病患者和风湿性关节炎患者中分别为54.3%和46.7%[13]。环孢素滴眼液疗效好，且无全身性不良反应，近年来在欧美国家临床得到了广泛应用。对于斯耶格伦氏综合征(Sjorgren＇s

syndrome)这类与炎症相关的干眼症，可使用环孢素等消炎药进行治疗[14]。各类临床试验也证明，使用环孢素滴眼液能增加患者眼泪量。环孢素较人造眼泪的疗效要好，某些患者经人造眼泪治疗数月无效，但使用环孢素后效果显著，且增强了患者角膜及结膜知觉的敏感度[15]。患有家族性淀粉样多发性神经病变的患者，通过环孢素治疗后干眼症状明显减轻，且无任何不良反应[16]。环孢素的作用是有效缓解慢性干眼症潜在的炎症过程，局部应用环孢素能阻止某些患者干眼进程，对治疗干眼症有良好的疗效。

滴眼剂是眼病治疗常用途径。环孢素具有脂溶性，易溶于植物油中，现如今环孢素的眼用剂型为普通乳剂型滴眼剂。由于环孢素的相对分子质量大且呈疏水性，眼内通透性差，难以达到治疗水平，影响疗效。

微乳（microemulsion,ME）系指粒径为10～100nm的乳滴分散在另一种液体介质形成的热力学稳定的胶体溶液。微乳一般在一定条件下可自发（或轻度振摇）形成，其乳滴多为大小比较均匀的球形，呈透明或半透明状。微乳是由油相、表面活性剂（SF）、助表面活性剂（CoSF）以及水相组成的，在一定温度长时间放置或离心(1300

r/min，30min)均较稳定。

我们按照《中国药典》关于溶液颜色检查法的方法、澄清度检查法以及制剂稳定性指导原则的要求对该制剂的稳定性进行长期试验考察。按药物制剂稳定性重点考察项目，考察滴眼液性状、可见异物、含量、PH值、有关物质及无菌情况。为0.05%环孢素滴眼液的生产、包装、贮存、使用条件提供科学依据。

仪器与试药

2.1

仪器

数显无极恒速搅拌器

（巩义市英峪予华仪器厂）

日本岛津产LC-10AVP型高效液相色谱仪

SPD-10AVP型紫外检测器

LC-10AVP泵

CTO-10AVP柱温箱

Class-up工作站

Shim-packvp-ODS色谱柱（150mm*4.6mm）

日本岛津产紫外分光光度计UV-2450

隔膜真空泵GM-0.33

(天津市津腾实验设备有限公司）

电子分析天平AG135

(梅特勒-托利多仪器有限公司）

实验室pH计FE20

(梅特勒-托利多仪器有限公司）

Model

C3860A超声仪

(CBL

Photoelectron

Technology

Co．Lid．)

渗透压摩尔浓度测定仪SMC

30B

(天河医疗仪器有限公司）

针头式微孔滤膜过滤器

(天津市双

吉色谱仪器经营部）

一次性使用无菌注射器

(浙江京环医疗用品有限公司）

灯检装置

A．带有遮光板的日光灯光源

B．不反光的黑色背景；

C．不反光的白色背景和底部

D．反光的白色背景（指遮光板内侧）。

药品光照试验箱

温度

XMTA908

光照强度XMTA808

（重庆汉瞻仪器有限公司）

调温调湿箱

（天津天宇机电有限公司）

2.2

试药

环孢素

(福建科瑞药业有限公司，批号：140201（N）)

环孢素对照品

（中国药品生物制品鉴定所，含量为98.8%）

大豆油

(新兴（铁岭）药业有限公司，批号：15050106-2-01)

聚乙二醇PEG400

（江西益普生药业有限公司，批号：20141001）

聚山梨酯80

（四川金山制药有限公司，批号：150502）

羟苯乙酯

（广州市广谱医药有限公司，批号：141102）

甲醇

（色谱纯，天津市康科德科技有限公司）

乙腈

（特级品，天津市康科德科技有限公司）

磷酸

（化学纯，石家庄市试剂厂冀都化学试剂有限公司）

水为纯化水

三乙胺为分析纯

0.05%环孢素滴眼液

（自制三批：160203,160204,160205）

色谱用试剂为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为注射用水。

方法

3.1

样品的制备：

取羟苯乙酯0.3g加入700ml纯化水，加热使之溶解，加入60ml聚乙二醇-400，搅拌，混匀；取0.5g环孢素至乳钵中，加10

ml大豆油，80

ml聚山梨酯80，充分研磨，倒入上述溶液中，快速搅拌，加纯化水至1000ml，混匀，0.45µm微孔滤膜过滤，无菌分装，即得。

3.2

色谱条件及方法学研究：

3.2.1色谱条件：

色谱柱：

Shim-packvp-ODS色谱柱（150mm*4.6mm）

流动相：

乙腈：甲醇：水：三乙胺（200：600：200：0.5），用磷酸调pH到2.93

检验波长：

210nm

柱温：

°C

流速：

1.2

ml/min

进流量：

饱和进样

进样量：

20μL

3.2.2样品预处理：

取C18固相萃取小柱两个，串联使用并将其活化（活化顺序为：甲醇-水-水-甲醇，每次各5ml），用5ml的移液管精密吸取样品5ml至小烧杯中，用注射器全部吸取并缓慢打入小柱，收集滤液，用注射器二次吸取完全，再次通过小柱，弃去滤液，后用5ml纯化水冲洗杂质，再用乙腈、水的混合液（1：1）洗脱样品于10ml的容量瓶中定容，混匀。过滤（孔径0.45µm），作为供试品。

3.2.3系统适应性实验：

用移液管精密量取该样品5ml，按照3.2.2的处理方法操作，再3.2.1的色谱条件下进样，记录色谱图，计算理论塔板数,分离度。比较标准品、样品和空白微乳的色谱图。

3.2.4标准曲线的绘制：

精密称取环孢素对照品25mg于50ml容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度使成储备液。再分别精密移取储备液3，4，5，6，7ml于10ml容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，配成0.15,0.2,0.25,0.3,0.35µg/ml的溶液，并按上述色谱条件分别进样，记录对应的峰面积。以峰面积（Y）与对照品浓度（X）回归，观察其是否呈良好的线性关系，计算其回归方程。

3.3

制剂稳定性的长期试验考察：

3.3.1溶液的性状：

本品为淡黄色澄明液体。照《中国药典》溶液颜色检查法，配制黄绿色调标准比色液。分别取6℃±2℃条件下，于0月，1月，2月，3月的环孢素滴眼液样品直接与标准比色液比较，样品与标准色体积相等，同置白色背景前，平视观察。

3.3.2鉴别

在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间与对照品主峰的保留时间分别一致。

3.3.3无菌情况的检测：

取本品0.05%环孢素滴眼液，采用薄膜过滤法处理，用0.1%无菌蛋白胨水溶液冲洗（每膜不少于100ml）,以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依照法检查（中国药典），应符合规定。

3.3.4pH和渗透压的检查：

本品pH值应在5.0～6.5之间，渗透压摩尔浓度应在290～430mOsmol/kg范围内。分别取6℃±2℃条件下0月，1月，2月，3月的0.05%环孢素滴眼液样品适量，测定其pH值、渗透压并观察制剂理化性质是否稳定。

3.3.5可见异物检查：

分别取6℃±2℃条件下0月，1月，2月，3月的环孢素滴眼液样品20支，去除容器标签，把容器外壁清洁干净，调节光照度至2000~3000lx，将供试品置于遮光板边缘处，并在人眼的清晰观测距离内（约为25cm），分别置于黑色和白色背景下，手持供试品颈部轻轻旋转和翻转容器使药液中可能存在的可见异物悬浮（但应避免产生气泡），轻轻翻摇后即用目检视，重复3次，总时限为20秒。

样品制剂在静置一定时间后轻轻旋转时应无烟雾、状微粒柱，且没有检出金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2mm的纤维和块状物等明显可见异物；也没有检查出微细可见异物（如点状物、2mm以下的短纤维和块状物等）。根据检测结果，观察该0.05%环孢素滴眼液样品的可见异物检查是否符合标准。

3.3.6样品含量的测定：

取0.05%环孢素滴眼液样品，按照3.2.2样品预处理方法项下操作，供试品20µl进样，使用外标法根据峰面积计算样品的含量。要求该制剂含环孢素（C62H111N11O12）的含量应在90%～110%的范围内。

3.3.7有关物质检测：

分别取6℃±2℃条件下0月，1月，2月，3月的0.05%环孢素滴眼液样品适量，进行精密称定。按照3.2.2的操作步骤完成样品预处理后，然后用乙腈定容，制成每1ml中含0.25mg的溶液，作为供试品溶液；同理制成每1ml中约有2.5µg的溶液，作为对照液。照含量测定项下的色谱条件，取对照液20µl注入液相色谱仪，调节灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20%。精密量取供试品溶液与对照品溶液各20µl，分别进样，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，供试品溶液色谱图中，单个杂质峰面积不得大于对照液主峰面积的7/10

(0.7%)，测得的各个杂质峰面积之和不得大于对照液主峰面积的1.5倍（1.5%），按照处方制备的要求制作出不含环孢素的空白微乳，做为对照空白；供试品溶液中和空白对照重合的峰应被扣除。

结果与分析

4.1

系统适应性试验结果：

经证明，在此实验条件下能达到环孢素与制剂中其他组分的的分离，按环孢素主峰的保留时间及峰宽计算出理论塔板数n=2328.30>600，分离度R=3.018>1.5,均符合药典要求。如图4-1、4-2、4-3

图4-1

环孢素色谱图

图4-2

空白色谱图

图4-3

标准品色谱图

4.2

标准曲线绘制：如图4-4

图4-4标准曲线图

以峰面积（Y）与对照品浓度（X）回归,在0.15-0.35µg范围内，呈良好的线性关系。回归方程为Y=2×107x+201893.5(r2=0.9996)。

4.3稳定性考察结果：

取3批环孢素滴眼液，置于6℃±2℃环境中放置，分别于第0，1，2，3月取样检测，考察性状、可见异物、无菌情况、pH、渗透压、及药物含量等指标。

结果表明，3批样品在6℃±2℃环境中放置，分别于第0，1，2，3月取样检测，各指标均符合规定，如表4-6稳定性考察结果：

表4-6稳定性考察结果

4.4

样品含量测定

表4-6中数据显示，三批样品的标示量百分含量分别均在90.0%～110.0%的范围之内，该制剂含量符合相关规定。

4.5

有关物质的检查：

在6℃±2℃条件下0月，1月，2月，3月自制0.05%环孢素滴眼液的有关物质测定结果：如表4-6。经过长期的试验观察，测得的单个杂质峰面积均小于对照液主峰面积的7/10，各杂质峰面积的和均小于对照液主峰面积的1.5倍，符合规定。

表4-7

有关物质测定结果

综上试验结果表明：0.05%环孢素滴眼液在6℃±2℃的储存条件下，经过0月，1月，2月，3月的稳定性考察其性状，pH值、渗透压、有关物质、含量等理化性质均合格，符合《中国药典》标准。

讨论

5.1

微乳型制剂确定：

眼部生理结构复杂，具有高度的敏感性和独特的保护屏障，因此眼部给药存在较大的差异，眼部药物传递系统的设计存在很大的困难。微乳乳滴由油相、SF、CoSF和水相组成，适合作为水中溶解度较小的药物的载体，其界面膜具有两亲性，有利于药物穿过角膜屏障进入眼内，提高药物在眼部的生物利用度。环孢素眼用制剂在临床上通常使用0.05%的浓度，且低浓度环孢素对眼部的刺激很小，患者的耐受性较佳。微乳是一种安全、稳定、刺激性小的新型给药系统，且兼具制备方便、易于灭菌、生产成本低等优势，正在被科研工作者投以越来越多的关注。

微乳与传统的滴眼液相比具有显著的优点。传统眼用制剂目前在市场上应用虽然广泛，但是这些传统剂型的主要缺点是眼部的生物利用度很低。在眼球运动和鼻泪系统的作用下会导致药物在角膜前停留时间变短,药物的跨角膜转运也会因药物自身的理化性质和角膜的屏障作用而受到影响。一般情况下只有小于5%的药物才可以进入眼睛的前房组织。患者使用滴眼液要重复多次给药,对于术后的患者应用更为不便。因此，研究新型眼部药物载体来促进眼部的吸收、提高眼部的生物利用度是相当重要的。本制剂0.05%环孢素滴眼液用油性基质制成微乳型滴眼液，具有安全、缓释、稳定、刺激性低的优点。

5.2

样品的预处理原因：

本试验的样品为水包油型微乳，加之大量辅料，不能直接进样，必须通过破乳或者固相萃取小柱，使药物暴露出来才能进行检测。本实验曾试过用乙腈破乳，破乳效果良好，但由于辅料聚山梨酯80与药物溶解性相似，不易分离，且聚山梨酯80的含量远远大于药物环孢素，聚山梨酯80对药物的检测有很大的影响。后使用固相萃取小柱，水洗时可将大部分的辅料和聚山梨酯80洗去，大大降低了聚山梨酯80的干扰。为了防止萃取小柱本身对样品的吸附，减少检测过程中所造成的干扰，需对萃取小柱进行活化，即用5ml甲醇和5ml纯化水分别通过萃取小柱，并吹干。通过活化过的C18固相萃取小柱，先用水将大部分辅料和聚山梨酯80洗去，再用乙腈将药物洗脱出来进样，这样可以减少杂质造成的干扰。

5.3

流动相的配比：

本实验曾试过的流动相有乙腈：甲醇：水：三乙胺（200：600：200：1.0）；乙腈：甲醇：水：三乙胺（180：620：200：1.0）；乙腈：甲醇：水：三乙胺（220：580：200：1.0）；乙腈：甲醇：水：三乙胺（200：620：180：0.5）；乙腈：甲醇：水：三乙胺（200：580：220：0.5）；乙腈：甲醇：水：三乙胺（220：600：180：0.5）；乙腈：甲醇：水：三乙胺（180：600：120：0.5）；乙腈：甲醇：水：三乙胺（200：600：200：0.25）；乙腈：甲醇：水：三乙胺（200：600：200：1.0）；等等。多组流动相的配比，最终考虑基线，保留时间，峰形等各个方面的因素，选择

乙腈：甲醇：水：三乙胺（200：600：200：0.5），用磷酸调流动相的pH到2-3之间。

5.4

柱温的确定

本实验的柱温定为65

℃，有充分的理论与实践意义。若柱温过高，会使仪器的稳定性降低，产生基线的漂移；若柱温过低，则会严重影响到峰形以及出峰时间。由于环孢素相对分子质量大，脂溶性高，采用色谱柱分离时需用较高的柱温才能使其有效分离，否则峰形很宽，呈丘陵状。本实验分别尝试使用了55，60，65，70，75

℃的柱温，发现随着柱温升高，峰宽逐步减小，峰形改善明显，考虑到柱温太高会影响色谱柱寿命，故最终确定柱温为65

℃。因此，经试验证实，65

℃为本实验的最佳柱温。

5.5

流速的选择

流速主要决定出峰的时间，该实验过程中进行了三个流速的测定，分别为1.0

ml/min、1.2

ml/min、1.5

ml/min。在流速低的情况下，会出现出峰时间拖后的现象；若是流速较高的话，分离度则会受到影响。出峰时间最好控制在10-20

min之间，综合考虑，最终决定使用流速为1.2

ml/min。

5.6

药物制剂稳定性的意义

药物制剂稳定性是指药物制剂从制备到使用期间质量发生变化的速度和程度，是评价药物制剂质量的重要指标之一。药物制剂的稳定性通过进行实验来观察药物的理化性质，对药品在制备过程中及保存期间可能发生的物理化学变化进行相关考察，探讨其影响因素，寻找避免或延缓药物降解、增加药物制剂稳定性各种措施，预测制剂在贮存期间质量标准的最长时间。药物制剂稳定性研究的意义在于保证药品的质量，作到安全、有效、稳定。还可以用于指导新药及其剂型的研制和开发，在某种定程度上也可以减少经济损失。因此，药物制剂的稳定性研究对于保证产品质量以及安全疗效方面具有重要意义。对药物制剂稳定性的研究是为了提高药品的内在质量，应全面地考虑各种因素对药物制剂稳定性所产生的影响，从而筛选出最佳处方为临床提供安全，稳定，有效的药物制剂。

5.7

pH的稳定性观察

正常泪液的pH值在7.2～7.4之间（患眼病时有所改变）。滴眼液的pH过低会因刺激而大量分泌泪液，从而稀释药液并将药物冲出结膜囊，影响药物作用效果。同时，过于偏酸的药液可凝固眼黏膜，造成损害；pH值过高可使眼黏膜上皮细胞硬化或膨胀，导致组织坏死。所以在配置滴眼液时，常加入缓冲物质以调节溶液pH值，使其与泪液大体相近，减少刺激性。正常人眼可耐受的pH值范围为5.0～9.0之间。通过对0.05%环孢素滴眼液pH值的稳定性观察，发现其pH值均在5.0～6.5范围内，在实验观察过程中无明显变化，符合眼用制剂的要求。

5.8

渗透压稳定性观察

在涉及溶质的扩散或通过生物膜生物膜的液体转运各种生物过程中，渗透压都起着极其重要的作用。因此，在制备眼用液体制剂等药物制剂时，需要观察其渗透压的稳定性。溶液的渗透压，依赖于溶液中溶质粒子的数量，是溶液的依数性之一通常以渗透压摩尔浓度来表示。本实验使用SMC

30B渗透压摩尔浓度测定仪对0.05%环孢素滴眼液的进行渗透压稳定性观察，对6℃±2℃条件下的0月，1月，2月，3月的0.05%环孢素滴眼液分别进行测定，其结果显示渗透压摩尔浓度值均在290~430

mOsmol/kg范围内，达到了滴眼剂的质量标准，且多次测量渗透压值保持稳定，长期放置该药物稳定性较好。

5.9

高效液相色谱法测定药物含量

高效液相色谱法测定药物含量准确性高，重现性好，近年来多种眼科制剂均采用此种方法测定其含量。多次实验证明，该方法科学有效，测定结果稳定。高效液相色谱法通常用来测定0.05%环孢素滴眼液的含量，通过高效液相色谱法测定，0.05%环孢素滴眼液制剂样品含量等指标均合乎医院制剂的质量标准，其各项理化性质检测指标均令人满意。

5.10

有关物质的考察

有关物质考察中，首先将制剂样品环孢素按照3.2.2的处理方法操作作为供试品，但同上述方法所制成的对照品溶液的浓度应低于最低检测限（0.01

mg/ml）。因此，我们采用10倍浓度的环孢素样品按照3.2.2的处理方法操作作为供试品，能更好的检测出环孢素滴眼剂产生的杂峰。

在1月、2月、3月后的考察中出现了1-2个杂峰，说明环孢素滴眼剂有降解物。据文献报道环孢素含有的杂质有：环孢素C、环孢素B、环孢素G、环孢素H、异环孢素H和异环孢素A，其中环孢素H、异环孢素H、异环孢素A均可为降解产物，但通过计算有关杂质含量符合药典规定标准。

小结

干眼症是眼科门诊的常见病和多发病，临床上可用0.05%环孢素滴眼液对其进行治疗。0.05%环孢素滴眼液能够有效缓解干眼症的症状,提高患者的生活质量，而且对多种眼表疾病的治疗也具有较好的治疗效果。

本试验通过对0.05%环孢素滴眼液的稳定性进行了长期的试验考察，在6℃±2℃储存条件下，通过0月，1月，2月，3月的稳定性考察其性状，pH值、渗透压、有关物质、含量等理化性质均合格，全都符合《中国药典》的标准，充分说明了0.05%环孢素滴眼液的稳定性较好，参数指标合格，为0.05%环孢素滴眼液的生产、包装、贮存、使用条件提供科学依据。

总之,环孢素滴眼液是是眼科医生治疗干眼症的一种较为安全、有效的药物。

第五篇：上海市食品（保健食品）原辅材料采购合同

合同编号：_________

供方：_________

住所：_________

邮编：_________

营业执照号码：_________

电话：_________

法定代表人：_________

传真：_________

需方：_________

住所：_________

邮编：_________

营业执照号码：_________

电话：_________

法定代表人：_________

传真：_________

供需双方依据《中华人民共和国合同法》、《中华人民共和国产品质量法》、《食品卫生法》及其他有关法律、法规的规定，在平等、自愿、协商一致的基础上，就原辅材料的采购事宜，订立本合同。

第一条　产品名称、商标或品牌、规格、计量单位、单价及数量、金额（含税价）、交货（时间）和地点

┌────┬───┬──┬──┬─────┬──┬──┬────┬────┐

│产品名称│商标　│规格│计量│单价（元）│数量│金额│交货时间│交货地点│

││或品牌││单位││││││

├────┼───┼──┼──┼─────┼──┼──┼────┼────┤

││││││││││

││││││││││

└────┴───┴──┴──┴─────┴──┴──┴────┴────┘

第二条　产品质量要求

1．产品质量标准，按下列第_________项履行：

1．1　按国家标准_________履行。

1．2　按行业标准_________履行。

1．3　按供需双方约定的质量要求履行，但卫生要求不能低于国家相关标准（可另写附件）。

2．保质期限：

供方所提供的产品，保质期限不少于_________个月（自产品出厂之日起计算）。

第三条　产品包装

1．包装要求：在外包装上应注明产品名称、规格、配料、产品批准号、生产厂名、地址、生产日期、保质期、净含量、贮藏要求等。

2．包装物由_________方提供，费用由_________方承担。

3．包装物处理按下列第_________项执行。

3．1　包装物不回收。

3．2　包装物由供方回收。

第四条　交提货方式

交提货方式，按下列第_________项履行。

1．供方送货：产品运输由供方负责办理，供方送至_________，运费由供方承担。

2．供方代办运输：供方根据双方约定的协议代办运输，运费由需方承担（代办运输协议另订附件）。

3．需方自提：需方前往供方指定地点_________，自行提货、自行运输。

第五条　验收方法

1．供方提供的每一批产品都须附随根据双方确认的质量标准进行检验的检验合格报告，但若有下列情况之一，必须附随计量认证合格的检验

机构出具的检验合格报告。

1．1　供方首次向需方所销售的产品（不包括同品牌不同规格的产品）；

1．2　供方停产一个生产周期又恢复生产的产品（一个生产周期为_________月）；

1．3　供方所供产品，在生产制造时工艺及原辅材料（有较大）改变的；

1．4　其他。

2．产品到达目的地后，需方应指定专人按双方约定的质量标准（应包括主要卫生指标、内外包装、保质期、标识感官等）及时进行抽样检验，完成验收程序。如有质量问题，需方应在收货后天内书面通知供方，同协商处理办法。如对产品质量认定发生异议，由（以）方所在地供需双方共同认可的经计量认证的机构检验报告为准。

3．需方根据合同规定或要货通知单及供方送货单做好收货工作，并及时通知质量验收员验收产品。

第六条　付款方式

需方选择下述第_________种方式付款，并按该方式所定时间如期足额将货款支付给供方。

1．一次性付款方式：

_________年_________月_________日支付全部货款，计人民币_________元，大写_________。

2．分期付款方式：

2．1　签署本合同时，支付货款全部的_________%，计人民币_________元，2．2　_________年_________月_________日前支付货款全部的_________%，计人民币_________元，大写_________。

2．3　_________年_________月_________日前支付货款全部的_________%，计人民币_________元，大写_________。

3．预付款条款：_________。（如无此项请划去。）

4．其他约定的付款方式：_________。

第七条　违约责任

1．供方如未履行本合同约定的义务，应承担违约责任，并赔偿由此给需方造成的经济损失。需方要求继续履行本合同的，供方应继续履行本合同。

2．需方若未按第六条第2款在规定时间内付款，须承担下列第_________项违约责任。

2．1　向供方支付违约金人民币_________元。

2．2　自延期之日起至实际付款日止，按银行同期贷款利率向供方支付违约金。

3．供方应承担因产品质量问题造成需方的直接经济损失。

4．需方违约拒收产品或在验收期间保管不妥造成产品损失的，需方应当承担由此所造成的相应的损失。

第八条　不可抗力

任何一方由于不可抗力且自身无过错造成的不能履行或部分不能履行本合同的义务将不视为违约，但应在条件允许下采取必要的补救措施，以减少不可抗力造成的损失。遇有不可抗力的一方，应在_________日内将事件的情况以书面形式通知对方，并在事件发生后_________日内，提交不能履行或者部分不能履行本合同以及需要延期履行的理由的证明。

第九条　解决争议的方法

1．供需双方在履行本合同过程中发生争议，应协商解决。协商不成，选定下面_________种方式解决：

A、申请仲裁。□

B、依法起诉。□

2．双方选择仲裁方式的，约定向下列其中之一的仲裁机构申请仲裁：

A、上海仲裁委员会。□

B、中国国际经济贸易仲裁委员会上海分会。□

C、仲裁委员会。□

3．双方选择诉讼方式的，约定向下列其中之一的人民法院依法起诉：

A、本合同签订地人民法院。□

B、供方住所地人民法院。□

C、需方住所地人民法院。□

D、交货地人民法院。□

E、人民法院。□

第十条　其他

1．供方应向需方提供如下文件的复印件，并承诺保证复印件与原件一致，否则应承担相应的法律责任：（选定的打√，不选的打×。）

1．1　营业执照□

1．2　税务登记证□

1．3　卫生许可证（保健食品生产企业须符合GMp要求）□

1．4　印刷许可证□

1．5　检疫证明□

1．6　产地证明□

1．7　每批产品的检验合格报告□

1．8　有关产品质量认证证书□

1．8　．1绿色食品认证书□

1．8　．2有机食品认证书□

1．8　．3产品质量标准文本□

1．8　．4保健食品批准证书□

1．8　．5危害分析与关键控制点认证书（HACCp）□

1．8　．6质量安全认证书（QS）□

1．8　．7供需双方约定的其他□

2．需方应向供方提供如下文件的复印件，并承诺保证复印件与原件一致，否则应承担相应的法律责任：（选定的打√，不选的打×。）

2．1　营业执照□

2．2　税务登记证□

2．3　组织机构代码证□

2．4　其他□

3．本合同有效期自_________年_________月_________日起至_________年_________月_________日止。

合同履行期内，双方不得随意变更或解除合同。合同若有未尽事宜，须经双方共同协商，签订补充协议；补充协议与合同具有同等效力。

4．双方约定的其他条款_________。

5．本合同一式两份，供需双方各执一份。自双方签字或盖章之日起生效。

购货单位（需方）（公章）：_________供货单位（供方）（公章）：_________

委托代理人（签字）：_________委托代理人（签字）：_________

地址：_________地址：_________

开户银行：_________开户银行：_________

帐号：_________帐号：_________

电话：_________电话：_________

_________年____月____日_________年____月____日

附件

1．本合同文本是根据《中华人民共和国合同法》、《中华人民共和国产品质量法》、《中华人民共和国食品卫生法》及其他有关法律、法规制定的示范文本，供食品、保健食品行业原辅材料买卖合同双方当事人参照使用。

2．本合同主要为确保产品质量和食品安全的有关条款的实施而制定。

3．经双方当事人协商确定，可以对本示范文本的条款内容（包括选择内容、填写空格部分的内容）进行选择、修改、增补或删减。

4．为更好地维护双方当事人的权益，签订合同时应当慎重，订立具体条款，需要约定的必须表述清楚，力求具体、严密。

5．如果是非法定代表人签字，需要有法定代表人出具的授权委托书。