第一篇：癌细胞有哪些特征
2癌细胞有哪些特征 ？
3我国对癌症是如何预防的 ？ 在人类各种疾病中，癌症可谓是“头号杀手”。据世界卫生组织报告，每年世界上有900万新的癌症病例发生，500万人死于癌症。尽管有先进的医疗技术，由于平均寿命的延长，生活方式的改变以及抽烟等原因，如果没有进一步抑制癌症的措施，预计到2020年每年将有2000万新的癌症病例发生，而癌症患者死亡人数将突破1000万人。为了全人类的健康，世界卫生组织把每年的2月4日定为世界抗癌日，以联合全球共同攻克癌症。2010年世界癌症日主题：癌症同样可以预防 701******20世纪70年代20世纪90年代21世纪初死于癌症的人数单位:万我国癌症死亡人数不断增加1环境因素：致癌因子烟草、亚硝酸盐、黄曲霉毒素等紫外线、X射线等物理致癌因子：化学致癌因子：病毒致癌因子：肝炎病毒等
一、癌细胞的形成2主要内因：原癌基因与抑癌基因的变异（1）原癌基因与抑癌基因的作用原癌基因：人体正常细胞中的一类基因。其很多产物都是细胞生长、增
第二篇：浅析影响直肠癌细胞增值的因素
浅析影响直肠癌细胞增值的因素
一、细胞培养
人结肠癌细胞系CaCo2、HT29、HCT116、SW480、SW620、SW1116、LoVo均购自ATCC，并由上海消化外科研究所传代保存。LoVo采用含10％胎牛血清的F-12K培养传代；CaCo2、HT29、HCT116、SW480、SW620、SW1116均使用含10％胎牛血清的RPMI1640培养液，置于37℃、5％CO2的培养箱中，以1∶2至1∶4的比例传代培养。
二、方法
1.样本收集及免疫组化染色：结肠直肠肿瘤标本取自上海市微创外科临床医学中心手术室。手术标本切除后生理盐水清洗，打开肠腔，剔除瘤体表面坏死及炎性肉芽组织；取肿瘤中心部位及距肿瘤5cm以上的正常肠黏膜全层组织，切成1cm块状后置入样本管。组织标本经4%甲醛溶液充分固定后，制作蜡块，切片、贴片。随后采用链霉素亲和素-过氧化酶复合物（SP）法进行免疫组化染色，DAB显色。TMPRSS4多克隆抗体购自美国Proteintech公司，1∶50稀释。
2.半定量RT-PCR：采用Trizol试剂（Invitrogen，美国）提取细胞总RNA。电泳鉴定RNA完整性，分光光度计260nm处测定RNA浓度，使用逆转录试剂盒（Takara，日本）在ABIPrismSDS7000中进行逆转录cDNA合成。上海吉玛生物有限公司合成如下引物：TMPRSS4上游引物5′-TCCAAGGACCGATCCACACT-3′，下游引物5′-AAGTTGTCGAAACAGGCAGAG-3′；GAPDH上游引物5′-GACATCAAGAAGGTGGTGAA-3′，下游引物5′-TGTCATACCAGGAAATGAGC-3′。cDNA在PCR仪(AppliedBiosystems，美国)中进行反应，50℃2min、95℃10min、95℃15s、60℃30s、72℃30s，共35个循环；然后，72℃10min，扩增产物于1％琼脂糖凝胶中，130V、30min条件下电泳并在紫外灯下摄片，成像保存。
3.Western印迹法：细胞在10cm培养皿（Corning，美国）中生长融合约90%时，PBS清洗2次后加入300μLRIPA，置冰上30min裂解充分后煮沸10min，随后13000r/min离心5min。取上清液，BCA法测定蛋白质浓度。每孔上样量100μg，加入5×上样缓冲液、去离子水至总体积一致后变性电泳（积层胶80V，分离胶120V），半干转法转膜（15V）70min后脱脂牛奶室温封闭2h，4℃下一抗（兔抗人TMPRSS4多抗，112831-AP，Proteintech，美国，1∶600稀释）孵育过夜。TBST洗膜3遍后加入一定比例稀释的相应二抗室温孵育1h，TBST洗膜2次，PBS洗膜1次后荧光发光显色。
4.siRNA瞬时转染：细胞生长至70%融合时胰酶消化，计数后按每孔3×105细胞铺6孔板，过夜。24h后按照Lipofectamine2000（Invitrogen，美国）说明书操作进行细胞转染。由上海吉玛生物有限公司设计并合成TMRPSS4-siRNA序列：5′-AAGUUGUCGAAACAGGCAGAGAACC-3′（si组）。仅转染Lipo2000的细胞为空白对照组，转染阴性对照序列的细胞为阴性对照组（NC组）。转染48h后用Trizol试剂提取细胞总RNA，72h提取总蛋白质。
5.CCK-8测细胞增殖：取转染后SW480细胞计数后铺于96孔板，每孔100个；设干扰组、阴性对照组和空白对照组，每组6个复孔。在第0、24、48、72、96和120h，分别于各孔加入CCK-8试剂（cellcountingkit-8，Dojindo,日本）10μL，37℃孵育2.5h，酶标仪测定各孔在450nm的吸光度值。以时间为横坐标、吸光度值为纵坐标绘制细胞生长曲线。6.AnnexinⅤ/PI流式检测细胞凋亡：转染48h后收细胞，取100μL细胞悬液（1×106个/mL）至流式管，用PBS洗涤1次，离心后加入300μL结合缓冲液，混匀，再加入5μL的AnnexinⅤ-FITC和5μL的PI，孵育15min后用流式细胞仪（BD，美国）上机检测。
7.划痕试验：6孔板转染，待细胞铺满后，用无菌枪头每孔笔直划线，PBS清洗3次，加入无血清培养液置培养箱孵育。24h后在显微镜下每孔随机选取视野观察摄片。
8.transwell迁移试验：取转染24h后细胞，无血清RPMI1640培养液重悬后计数，调至终密度为5×105个/mL。24孔板每孔内加入900μL含10%胎牛血清的RPMI1640培养液，随后置入transwell小室（Corning，美国），小室内加入200μL细胞悬液（105个细胞）。培养箱孵育24h后取出，棉签拭去内室面细胞，甲醇固定小室外穿出细胞10min，1%结晶紫染色10min，PBS清洗3遍后，显微镜下观察摄片。
三、统计学方法
采用SPSS11．0软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验。P<0．05为差异有统计学意义。
1.免疫组化检测TMPRSS4蛋白在结肠直肠癌组织和正常肠上皮中表达标本免疫组化染色显示，TMPRSS4蛋白定位于细胞膜上，本人系天天论文网就职11年的资深论文编辑；工作中与各大医学期刊杂志社进行学术交流过程中建立了稳定的编辑朋友圈，系多家医学杂志社的特约编辑，常年为医学期刊杂志供稿，负责天天论文网医学论文·分检·编校·推送·指导等工作！工作企鹅1:1550116010工作企鹅2：766085044在肿瘤组织和转移淋巴结中均染色阳性，且转移淋巴结中TMPRSS4蛋白染色更强。表明TMPRSS4表达可能与肿瘤细胞迁移能力有一定相关性。
2.半定量RT-PCR和Western印迹检测TMPRSS4在结肠癌细胞株中的表达通过半定量RT-PCR检测发现，TMPRSS4基因在7株结肠癌细胞中有不同程度的表达，其中在HT29、SW480、SW620、SW1116中的表达相对较高。Western印迹检测亦有类似结果，有细胞均不同程度表达TMPRSS4蛋白，而HCT116、SW480和SW1116蛋白表达量相对较高。因此，本研究决定选用SW480细胞进行下一步试验。
三、siRNA瞬时转染后SW480细胞中TMPRSS4蛋白表达下调在转染siRNA48h后，Western印迹法检测发现，与空白对照组和NC组相比，siRNA干扰组（si组）的TMPRSS4蛋白表达明显下降。
3.TMPRSS4下调可显著抑制SW480细胞的增殖能力siRNA处理SW480细胞株后，采用CCK-8法测定细胞增殖能力。在第1、2、3、4、5天不同时间点分别测定吸光度值，吸光度值可间接反映细胞增殖能力的强弱。与空白对照组和NC组相比，si组细胞增殖能力在48~96h时受到明显抑制（P<0.05)。
4.下调TMPRSS4诱导SW480细胞凋亡SW480细胞株转染TMPRSS4siRNA后孵育48h，收集细胞，用AnnexinⅤ/PI双染色法检测细胞周期，si组细胞凋亡比值为14.0%，而空白对照组和NC组分别为10.4%和10.1%，有统计学差异（P<0.05）。提示下调TMPRSS4可能有诱导结肠癌细胞凋亡的作用。
5.siRNA干扰TMPRSS4表达显著影响SW480细胞的迁移能力采用siRNA处理SW480细胞后，进行细胞划痕及transwell迁移试验。结果显示，si组的SW480细胞在划痕试验中的运动能力比对照组显著降低(P<0.05)；si组在transwell试验中的穿膜细胞数亦比对照组显著降低(P<0.05)。
四、讨论
Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶是一类新近发现的特殊蛋白酶，具有明显的组织表达特异性，且与耳聋、贫血、高血压和肿瘤等的发生相关。本研究探讨该家族成员TMRPSS4在结肠直肠癌组织中的表达及其对增殖、凋亡、迁移等方面的影响。采用siRNA干扰TMPRSS4表达后，发现肿瘤细胞的增殖能力减弱，同时细胞运动迁移能力也降低，这与Jung等先前的研究结果相一致。针对该蛋白质的其他研究表明，TMPRSS4可能通过作用于细胞间黏附分子或激活其他蛋白酶在组织发育和细胞分化中发挥重要作用；并通过发挥其蛋白酶的水解作用裂解病毒表面的红细胞凝集素，促进病毒在肺部的扩散而致病。因此，推测该基因可能通过靶向作用于细胞外基质及细胞-细胞间连接分子而在调控SW480细胞的增殖及迁移中发挥作用，具体机制尚有待后续研究来揭示。同时，流式细胞凋亡检测显示，在siRNA干扰后，SW480细胞的凋亡比例明显增加，这与干扰后细胞的增殖能力降低相一致，表明敲除TMPRSS4基因可能通过诱导细胞凋亡而抑制增殖。最近有研究表明，乳腺癌中TMPRSS4表达与淋巴结转移、病理分期差、肿瘤体积大以及总生存率和无病生存率低相关。本研究初步显示，TMPRSS4在结肠直肠癌组织和转移淋巴结中有不同程度表达，且转移淋巴结染色强度略高。因此，有必要进一步探讨TMPRSS4与结肠直肠癌病理分期、分级、淋巴结转移及病人预后间的相关性，为其作为预后预测因素提供依据。我们将继续探讨TMPRSS4对于结肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭方面的具体作用机制，揭示这一基因对于结肠直肠癌发生、发展的作用。
第三篇：2012-2-3CCTV《走进科学 扼杀癌细胞》报道神奇CIK免疫治疗
2012-2-3CCTV《走进科学 扼杀癌细胞》报道神奇CIK免疫治疗
近日，央视科教频道《走近科学》栏目报道了胃癌患者王治祥经诊断属于弥漫大B淋巴瘤后，经历了手术、化疗、靶向治疗、自体干细胞移植+局部放疗等众多治疗，却难逃癌症短期内复发、癌细胞大面积扩散的噩运。而在经过8个疗程的CIK细胞免疫治疗后，王治祥的病情完全缓解，影像学显示：肿瘤完全消失！央视《走进科学》揭秘生物免疫疗法治愈癌症。
什么是CIK细胞？
CIK细胞是指自体细胞因子诱导的杀伤细胞，它是一种强有力的抗肿瘤或者是抗感染的免疫细胞。CIK细胞能够通过三种途径杀灭肿瘤细胞和病毒感染细胞：①CIK细胞对肿瘤细胞和病毒感染细胞的直接杀伤：CIK细胞可以通过不同的机制识别肿瘤细胞，释放颗粒酶/穿孔素等毒性颗粒，导致肿瘤细胞裂解。②CIK细胞释放的大量炎性细胞因子具有抑瘤杀瘤活性：体外培养的CIK细胞可以分泌多种细胞因子，如IFN-γ、TNF-α、IL-2等，不仅对肿瘤细胞有直接抑制作用，还可通过调节机体免疫系统反应性间接杀伤肿瘤细胞。③CIK细胞能够诱导肿瘤细胞的凋亡：CIK细胞在培养过程中表达FasL（Ⅱ型跨膜糖蛋白）通过与肿瘤细胞膜表达的Fas（Ⅰ型跨膜糖蛋白）结合，诱导肿瘤细胞凋亡。
什么是DC-CIK免疫治疗？
生物DC-CIK免疫治疗是联合运用DC细胞和CIK细胞来治疗肿瘤的全新生物治疗技术。DC细胞又名树突状细胞，是机体功能最强的专职抗原递呈细胞，DC细胞像“雷达”，能主动搜索、识别肿瘤细胞，并把信息传递给免疫细胞，激活免疫细胞杀灭肿瘤；CIK细胞则像“导弹”，精确杀死肿瘤细胞，且不损伤正常细胞。两种免疫细胞相互配合，各司其职，可以带来1+1＞2的抗肿瘤效果。最新研究显示DC细胞与CIK细胞共培养后,提高了细胞的增殖速度和杀伤活性,且使其对肿瘤细胞的杀伤作用更具特异性。而且DCCIK细胞对于血液、消化、呼吸、泌尿及生殖系统等多个系统肿瘤细胞均有杀伤作用。
肿瘤生物治疗是多种治疗策略和治疗手段的总称，是应用各种生物治疗制剂和手段来调节（增强）机体的免疫力和抗癌能力，维护机体生理平衡，抗御肿瘤的一种肿瘤治疗新方法。肿瘤生物治疗按照作用机理来分类，主要包括肿瘤免疫治疗、肿瘤分子靶向治疗、肿瘤基因治疗、肿瘤干细胞相关治疗等。其中生物DC-CIK免疫治疗技术近年来已取得明显突破，已在临床治疗上广泛应用。
上海肿瘤生物治疗中心是上海首家开展应用生物免疫治疗的国家级肿瘤生物治疗中心，拥有生物DC-CIK免疫治疗、生物BLK免疫治疗等技术。生物DC-CIK免疫治疗是通过调动人体免疫系统杀灭肿瘤，发挥长期监视的作用，克服了手术、放化疗“不彻底、易转移复发、毒副反应大”的弊端。不仅让广大肿瘤患者看到重生的希望，更为他们带来了实实在在的效果。上海肿瘤生物治疗中心自成立以来，已成功救治了千余位恶性肿瘤患者，患者平均5年生存率提高近一倍，并最终实现长期生存，创造了无数抗癌奇迹!
相关内容：2012-2-3CCTV《走进科学 扼杀癌细胞》节目视频
临床实例：生物治疗有效阻止乳腺癌复发转移
上海肿瘤生物治疗中心咨询热线：400-6128-399
第四篇：青春期特征
青春期心理特征
★独立性增强。随着少男少女自我意识的形成，他们的独立性急剧增强，他们不再被动地听从父母的教诲和安排，而是渴望用自己的眼睛看世界，用自己的标准衡量是非曲直。这种从被动到主动，从依赖到独立的转变，对于青少年来说是成长的必由之路。
★情绪两极化。青春期孩子情感浓烈，热情奔放，情绪的两极性表现得十分突出。他们既会为一时的成功而激动不已，也会为小小的失意而抑郁消沉。他们情绪多变，经常出现莫名的烦恼、焦虑。
★心理上“锁”。进入青春期，少男少女结束了“少年不知愁滋味”的孩童时代，进入了“多事之秋”。此时由于心理的不断发展，他们的情绪自控能力比孩提时有了较大的提高，学会掩饰、隐藏自己的真实情绪，出现心理“闭锁”的特点。过去爱说爱笑的孩子，进入青春期可能会变得沉默寡言。他们常把自己关在房间里，很少和父母交谈，甚至拒绝父母的关爱。★心理向成熟过渡。青春期是长大成人的开始，是由不成熟向成熟的过渡。这一过程对他们来说是漫长而痛苦的。此时，他们既非大人，又非儿童，原来的孩童世界已被打破，但新的成人世界又尚未建立。因此，他们的内心充满了矛盾和冲突。比如，生理成熟提前和心理成熟滞后的矛盾；独立意识增强与实际能力偏低的矛盾；渴望他人理解，但又心理“闭锁”的矛盾。
★行为易冲动。美国和加拿大学者的最新研究指出，青春期青少年的大脑中，负责控制感情和冲动的神经尚未发育成熟，这是他们易冲动的原因。
（一）身心发展时差错位
在青春期，生理发育迅速成熟，而心理发育则相对迟缓，从而造成人的心理成熟水平、社会阅历积累与急剧的生理成熟不相适应，出现了心理年龄与生理年龄相脱离的现象。从而会产生许多心理矛盾：个人要求与依赖关系，自我设计与师长要求，理想目标与现实可能，个人消费与经济能力，意识与社会行为，这种主观上欲求与客观上可能的心理矛盾，引起了他们内心的烦恼与不安。因此青春期容易产生心理不平衡和身心功能障碍。
（二）智力发展迅猛活跃
所谓智力，一般说来，是指人的心理特征，包括观察、记忆、思维、想象以及创造性地解决问题的能力。
众所周知，人总是在年轻的时期最有活力。不少事实证明，有很多人在他们未成年时会迸发出智慧的火花，而成年之后却反而平淡了。这说明，青少年时期在一个人智力发展中有着极其重要的地位。
由于青春期的思维发生了质变－－抽象逻辑思维开始占主要地位，也必然会影响和制约其他心理现象发生质的变化。
（三）情绪发展强烈多变
心理学认为，人的需要是否得到满足会引起对事物的好恶态度，从而产生肯定或否定的情绪体验。我国古人称这为，人有喜怒哀惧爱恶欲七种情绪。
心理学研究表明，人的情绪虽与人体的生理唤醒状态有着密切的关系，但也受社会生活所影响，受人的认知过程的特点所制约。
青春期情绪发展的特征是：(1)易于波动并潜藏不安，表现为寂寞与孤独，忧虑与不安，以及苦闷与忧郁；(2)憧憬未来并富于幻想；(3)情绪多样并反应强烈。
可以认为，人到了青春期，既像一轮冉冉升起的朝阳，充满无限的生命力，又象一艘航行在变幻莫测大海里的航船，随时都有遭到风暴袭击的危险。这种难以驾驶的情绪和由于生理上的迅速发展变化所带来的恼闷心情，就构成了青春期男女情绪和情感的典型特征。
（四）个性发展可变可塑
所谓个性，是指个人稳定的心理特征（包括气质、性格、兴趣、能力等）的总和，也就是平常所说的一个人的精神面貌。
心理学认为，在青春期，自我评价和社会评价对形成独特的个性起着重大的作用。青春期的个性特征表现为：(1)认同感逐渐扩大；(2)价值取向开始形成；(3)闭锁心理开始出现；(4)兴趣范围逐渐扩大；(5)评价能力不断发展；(6)行为方式发生变化。
（五）自我发展突出高涨
人的自我发展受到自我意识的影响与制约。而自我意识则是人们对人生对自己逐渐形成一定型式的自我价值观、自我认识能力，能按照自己的需要不断去探求人生道路和选择自己的发展方向，具体表现为：企图和要求摆脱父母和教师的管束，自行其事：不承认自己是小孩，要求长者平等相待，希望父母和教师充分理解和尊重他们的人格。
总之，到了青春期，人们开始注视自我、关心自我、发现自我、突出自我、独立自我。
（六）情爱发展单纯幼稚
在青春期，情爱包括友情、育情等多个方面。
友情，反映为对同学、同志的情爱。青春期与儿童期相比，有了很大的专注性和稳定性。到了后期，友情甚至会具有一定的神秘性和浪漫性，讲“义气”，较“虔诚”。
育情，反映为对父母、师长和抚养、教育过他们的人的情爱。青春期，表现为有一定的感恩性和真诚性。
（七）交际发展自主自锁
在青春期，交际逐渐扩大。由于自我意识的增强，自我价值观的逐步形成，他们开始按照自己的价值观来评判与自己交往的人，选择与自己投合的朋友，且常常会排斥旁人的议论、影响与干预。因此带有明显的自主性、自锁性。
一般说来，青春期的交际发展中，起作用的是兴趣相同、性情相投、思想共鸣、甘苦共享等思想感情因素。
（八）理想发展起伏不定
所谓理想，是指有实现可能性的对未来事物的想象和希望。富于幻想、探索人生、憧憬未来是青春期的心理特征之一。他们渴望走向社会，确立个人和社会的理想，勇于开拓创造，敢于冲锋陷阵。
理想受到人生的制约。理想的产生有赖于个人生理的成熟、社会的要求和个人认识水平的发展这三个基本条件。
第五篇：散文诗特征
散文诗特征： 散文诗兼有诗与散文特点的一种现代抒情文学体裁。它融合了诗的表现性和散文描写性的某些特点。在本质上它属于诗﹐有诗的情绪和幻想﹐给读者美和想象；在内容上它保留了有诗意的散文性细节；在形式上它有散文的外观﹐不像诗歌那样分行和押韵﹐但不乏内在的音韵美和节奏感。散文诗一般表现作者基于社会和人生背景的小感触﹐注意描写客观生活触发下思想情感的波动和片断。这些特点﹐决定了它题材上的丰富性﹐也决定了它的形式短小灵活。
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