论离体病理组织、病理切片和组织块的归属

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第一篇:论离体病理组织、病理切片和组织块的归属

【摘要】 本文综合围内外现有的医疗法律、法规规定和案例,对离体的病理组织、病理切片和组织块的所有权及

其处分权.以及研究这些材料产生可能的商业利益后的利益归属问题进行概述,认为生物性的材料一经离体,按照相关

法规应南医院保管并遵守一定的保管时限:病人有权复阅作为其部分医学记录的病理资料,但是没有这些离体的生物

料的直接所有权。病理学家及其实验室将这些病理组织、病理切片和组织块用于研究或其他非治疗目的时要保护病

人的隐私:获得病人的知情同意和授权是保护患者隐私和病理学家利益的最好的办法,也是解决由于研究这些材料产

生的商业利益的归属问题的可行办法。尽快制定各相关行业的行为规范和法律法规,予以法律的效力,是解决上述问题的根本措施。

【关键词】病理组织;病理切片;所有权;处理权;利益归属

【中图分类号】d913:r36

【文献标识码】b

【文章编号】 1007—9297(2005)01—0032—06

随着我国医学知识的普及和人们法律意识的逐

渐提高.医疗诉讼呈现越来越多的趋势,其范同涉及

医学各个领域。在我国目前的医疗纠纷诉讼中,涉及

病理组织、病理切片和组织块的所有权问题尚无案例

报道。当患者要求到另一家病理研究机构会诊时,他

有权获得其病理资料及其原始组织吗?这就引发了病

理组织、病理切片和组织块这些离体的生物材料的所

有权的问题:(1)它们究竟归属患者本人还是病理实

验室?(2)病理学家及其实验室对处理这些离体生物

材料具有什么样的权限?(3)在处理这些离体生物材

料时如何保护病人的隐私?(4)谁有权从研究切片、组

织中获益?由于我国法制建设尚处于发展阶段,有关

病理切片、组织等的保存也无统一的法规规定,本文

就我国目前的法规及规章制度,参考国外的相关立

法,对以上4个问题概述如下

一、关于离体的病理组织、病理切片和组织块的归属问题

在2002年发布的《医疗机构病历管理规定》第2条规定:病历是指医务人员在医疗活动过程中形成的文字、符号、图表、影像、切片等资料的总和。由此可

见.病理切片等属于病历资料的一部分,理应由医院

归档保管。任何与治疗和诊断相关联的切片和组织块

都是病人医学记录的一部分,按照该规定,医院、实验

室或者制作这些记录的科室都被要求保存并维护这

些医学记录.这表明患者对其病理组织、病理切片和

组织块不具所有权。笔者认为,这些离体的生物性的材料对患者而言毫无专业价值,它们是在病理学家的专业知识基础上制备而成,是专业技术的产物,在病

理学家等专业技术人员从事专业研究的时候才具有

临床价值。因此,由医院保管更能体现其价值和实用

性.并且理应由原制备单位进行保管。

当然,病人有获知这些保存在医学记录中的信息的权利,包括会诊中使用其组织块和切片。我国允许

患者为求会诊时可以复印或复制病历资料。然而,在《医疗机构病历管理规定》第15条规定中,医疗机构

可以为申请人复印或者复制的病历资料包括:门(急)

诊病历和住院病历中的住院志、体温单、医嘱单、化验

单(检验报告)、医学影像检查资料、特殊检查(治疗)

同意书、手术同意书、手术及麻醉记录单、病理报告、护理记录、出院记录。在该条例中,仅有病理报告属于

可复制的范畴,病理组织、病理切片和组织块不包括

在内。这意味着当患者要求到另一家病理研究机构会

诊时,他(她)也不能获得其病理组织、病理切片和组

织块 但现行的医院工作制度允许患者可以凭会诊单

位的借条用借病理切片,并规定借出切片应于1个月

内归还:【1j而蜡块原则上不能借出,如会诊单位认为切

片质量不理想、影响诊断,而原单位又无法保证切片

质量时应予借出:如会诊单位要求做特殊染色或免疫

组化等检查时,原单位不能完成或不能保证质量时,也应予以借出。同意出借的蜡块原则上只能做一次切

片,以不超过10张为宜,蜡块用后应及时归还。[1

1因此,尽管病人所指定的会诊单位、医生可以从

i作者简介】谢英(1971一),女,四川省内江市人,在读硕士研究生,从事法医病理学研究。

tel:+86—028—85446597:e—mail xieyingl 024@1 26 com

法律与医学杂志2005年第12卷(第1期)

原医疗机构中获得原始切片.病人一般不可能直接拥

有这些离体材料。至于借 的这些生物材料的保管和

护职责限定,我国目前尚无具体规定。管理条例允

许医院向借方收取一定的押金,如果逾期不还者,可

以没收押金,并未限定保管和维护职责,这可能导致

切片借出后的管理混乱。如果切片因此而丢失,谁承

担责任呢?关于这点,笔者认为可以借鉴国外相关法

律,如美国康涅狄格f州)的法律要求,在有病人、病人的代理

人或病人指定的健康保护人的书面要求时,医

院或实验室应“直接分送原始保存的组织切片或者碎

片给病人指定具有许可资格的机构、医生或实验室”;

l|“如果原始切片或组织块不能提供或者他们的新切

部分能够完全代替原始的切片或碎片组织块”时.允

许医院或文验室分送新的切片给病人的健康保护人:

这些材料的接收者独自对保护和返还给医院或实验

室负责,任何发出原始切片或碎片或者新切片的医院

或实验室,这些材料损坏或者丢失承担任何责任:它

们还允许医疗机构收取“必要的费用来支付这些材料的关于提供原始保存切片、原始组织块或者保存的病

理组织碎片中新切的切片而产生的费用”。

在该领域有一个案例可以明确地表达出上述观

点:在connelio v stamford医院,一个同意进行多张涂

片检查的病人要求重新得到这些涂片,以作为误诊证

据向其医师索赔,3康涅狄格的最高法院认为该病人

不具备“直接拥有这些切片的”资格。该法庭认为原告的这些涂片是她医疗记录中的一部分.因此,当然属

于医院拥有。法庭推断医院没有被要求直接发出这些

原始切片给病人,而只能给被病人指定的健康保护

人。“一个可假定的知道怎样处理这些切片的人。

二、关于病理学家及其实验室对处理这些离体生

物材料的权限问题

病理学家及其实验室在保管这些病理组织、病理

切片和组织碎片应该有什么样的权、责呢?主要包括:

(1)保管的时限。(2)病理学家及其实验室是否可以随

意分发这些生物材料给其他医疗机构或者用于治疗、诊断以外的其他目的(一)保管时限

某职_t二医院一位60多岁的女性心包积液患者,(美)corm general statutes annotated§19a一49oh(a).(美)corm general statutes annotated§19a一49oh(a).

connelio、stamford hospital,246 corm 1 998;45.

connelio、stamf ord hospital,246 corm 1 998;45.

(美)42 code of federal regulations~493.1257—1259

(美)42 code of federal regulations~493.1257—1259

· 33 ·

其心包穿刺液检查发现有“癌细胞”,1周后该患者出

院到另一家医院诊治.此时患者的病况不允许再进行

心包穿刺,当患者家属要求原医院提供细胞涂片会诊

时,原医院病理科已将涂片丢弃。那么,这些生物性检

材究竟该保存多长时间呢?

在我国的相关条例中,关于病理组织、病理切片

和组织碎片保管时限的规定尚不明确。在1991年发

布的《医药卫生档案管理暂行办法》中,仅提及病理切

片应该归档管理,无时间限定:在一些医院管理或制

度、职责或规范的书著中,对病理组织、病理切片的时

限有一些规定,但并不确切。如:活检大体标本一般保

存1个月.而后根据需要,分别保留或丢弃:凡有教学

研究价值或凶其他原因而必须保留的标本,可制作永

久性的标本保存:蜡块应长期保存:切片等予以归档

存放。⋯又如:1982年卫生部制定的《医院] 作制度》

规定:病理切片应编号长期保存 有价值的病理标本

要妥善保管。活检大体标本一般保存半年,组织切片

和蜡片以及有科研、教学价值的标本应分类长期保

存。这些规定不统一,时间限定模糊,病理学家及其实

验室实际操作起来有一定的肓目性 凶此,参考美国

1998年的临床实验室提高修正案(clia)和美国病理

学学会(cap)制定的条款对我国相关法规的制定有

一定的指导作用。

美国临床实验室提高修正案(ci ia)规定:实验室

必须保存“被染色的切片至少10年(从被检之日起).

而碎片标本至少2年”: 湿组织应该存放给出最后的报告结果后保存至少2周:[31保存所有的细胞切片制

本自检查之日起.不管诊断与否,至少5年:

美国病理学学会(cap)提 实验室保存切片、组

织碎片和手术病理报告至少10年:湿组织应该在被

给出最后的报告结果后保存至少2同;保存所有细胞

切片5年,好的针吸切片和细胞报告至少20年;cap

还推荐实验室应该保存细胞遗传学切片3年,任何诊

断影像(被数字化的资料或底片)和最后的报告至少

20年。[

21在美国不同的州法律和其他的联邦法律还可能要

求将这些材料保存更长的时间。例如,纽约要求“组织

病理切片应保存20年”。另外.⋯丁学术或研究目的· 34 ·的切片可能值得被特别的实验室更长时间的存储。

f二)病理学家及其实验室是否可以随意分发这些

生物材料给其他医疗机构或者用于治疗、诊断以外的其它目的在我国目前的病理机构现状中。病理组织会诊是

一种常见的运作方式。除此之外。病理组织还可能会

用于治疗、诊断以外的其他目的而分送出原保管机

构,如研究、健康保险、上报给国家医疗机构等。由于

分发这些生物材料可能涉及患者的个人健康信息的隐私,原保管机构能否随意支配这些材料呢?在我国

目前的法律、法规中尚无任何明确规定。严格说来,原

医疗机构理应保护这些材料中包含的患者的隐私不

被泄露,在分发这些病理材料给其他机构时,不管出

于什么目的,原则上都应得到患者本人的同意才能体

现出对患者隐私权的尊重。由于病理学家通常被认为

是间接治疗者,他们一般为其他医生进行检测并且为

他们报告结果。因此。作为间接治疗者,病理学家可能

会使用或公开带有个人识别信息的病理组织、病理切

片和组织碎片用以治疗、支付或健康照顾操作目的、质量保险计划中使用而不经过病人的任何允许。①因

此.限定其处理权责对保护患者隐私有重要意义。

笔者认为,如何支配这些材料应据他们分发病理

组织、病理切片和组织碎片的具体目的而定。例如在美国,当分发病理组织、组织碎片和病理切片用以研

究时,以下情况可以不经患者同意:(1)公开是被社会

公共机构调查部门或有特别检查明确保密要求的保

密部门所赞同的。(2)该个人健康信息将被用于发展

一个研究记录。(3)公开的个人健康信息仅限于死者的信息。(4)公开局限于去除了可以识别个人健康信

息的数据且遵从数据使用协议。②除以上情况外,病

理学家及其实验室分发这些病理组织、病理切片和组

织碎片都应该获得病人的同意或授权后才可以实行。

三、在处理这些离体生物材料时如何保护病人的个人隐私

《中华人民共和国执业医师法》要求医师在执业

活动中不得泄露病人的隐私.这要求病理学家及其实

验室分发这些病理组织、病理切片和组织碎片时要保

护病人的隐私。当一名癌症患者要求对他的癌症诊断

法律与医学杂志2005年第12卷(第1期)

进行病理会诊时,必然会涉及其个人信息的转移。原

保管机构如何才能在这种操作环境下保护患者的隐

私呢?关于个人健康信息的隐私权标准,我国尚未明

确界定。本文仍以美国的现行法案为参照。对这一领

域进行概述,希望对国内可能出现的类似情形起一定的借鉴作用。

美国1996年的健康保险的可携带性和责任法

案,publ04—191(hipaa),建立的关于个人健康信息的隐私保护的权力标准可供我们参考。个人可识别的健康信息(phi)就是以下信息:(1)被健康提供者、健

康计划、雇主或健康保护票据交换所建立或接受的信

息。(2)与一个人身心健康或状态相关的、一个人健康

保护提供、或支付个人健康保护提供相关的信息。(3)

鉴别个人或提供一个合理的基础以相信这些信息能

够被用于个人识别。③具体而言,个人可识别的健康

信息既是携带有18个指定的识别符的信息,这些被

hipaa指定的识别符包括:名字、地点、日期(尤其是

年份)和年代早于1989年、电话号码、传真号码、邮件

地址、社会保障号码、医学记录号码、健康计划受益人

号码、账户号码、证书或执照号码、机动车识别号码和

连续号码、设备识别号码和连续号码、统一资源土地、国际互联网原始地址、生物统计识别符包括指纹、声

纹、全脸的照片以及任何其他独特的识别号码或特

征。

按照hipaa.病理组织、组织碎片和病理切片本

身不是被保护的健康信息,但当其被公开。与公开伴

随的信息基于法律条款的规定则可能是受保护的健

康信息。例如,一个人提供细胞给研究者,并且告诉研

究者这些是可识别的个人的癌细胞,与之伴随的情形

就是被保护的关于个人的健康信息。⑤因此如果一个

实验室分送切片用以会诊。这个切片必然包括个人的可识别的数据。在这种场合下,实验室必须遵从关于

个人健康信息相关的hipaa条款。

获得授权是保护和尊重患者隐私权的一种重要

且有效的手段。美国1996年的健康保险的可携带性

和责任法案条例提出大量关于授权的要求。病理学家

和研究室为了研究目的,在分发带有任何可识别信息的病理组织、组织碎片和病理切片前,必须从病人处

健康照顾操作包括品质评价和改善活动、委派证书、执照,或委任行为、医学检查、法律服务、或审核功能{或商业计划、发展、管理、和一般的行

政活动。see:(美)45 code of federal regulations§1 64.506(a)and 45 c f r§1 64.520(c)(2)(ii)

(美)conn general statutes annotated§1 64.5 14(e).

④(美)45 code of federal regulations§164.501—514.

(美)45 code of federal regulations§164.501—514.

(美)65 federal register 82462,82533(december 28,2ooo).

法律与医学杂志2005年第l2卷(第1期)

获得有效的授权。病理学家可能会使用这些早年收集的材料用以研究,如果他们获得病人的知情同意形式的表示,即使这个同意没有符合现行的hipaa应允

授权的要求,它们也可以被用于研究。然而,如果没有

获得知情同意.而病理学家又希望使用这些材料用于

研究,他们要么从病人处获得授权(这可能是不切实

际甚至不可能的,有赖于这个材料获得有多长的时

间),要么在2003年4月14日以前(hipaa条例的应用时间),通过社会公共机构审查部门获得一个明

确同意的弃权证书,以便使用这些材料。

在一些少见的场合下,病理学家是应病人要求进

行检测并出报告结果给病人,此时实验室及病理学家

被认为是直接的处理供体。在这种情况下,在使用病

人的个人可识别的健康信息用以治疗、支付或健康照

顾操作前,病理学家必须获得病人书面的保密准则通

知的确认书,该确认书要按照hipaa条例罗列出提

供者的保密要点。②

美国1996年的健康保险的可携带性和责任法案

规定的授权在以下情况可以不予实行:④(1)公开个

人可识别的健康信息是因为公共健康的原因,如在国

家法律要求下报告新癌症病例给国家癌症调查机构。

(2)作为调查的一部分公开个人可识别的健康信息、发给许可证或纪律的行为或法律行政行为。(3)响应

传审或发现要求公开个人可识别的健康信息。

四、谁有权从研究切片、组织或组织碎片中获益

随着医学技术和病理学的快速发展,对病理组

织、切片进行研究可能会与商业利益联系起来,这时

势必涉及利益的分配问题。在被美国医学机构提出的5个专利申请中,其中一个发明来自于病人的体液或

细胞。i4]如moore对加利福尼亚大学董事的诉讼案5_

中.一个细胞系的来源也是得益于对患者已切除的脾

脏组织的研究。由于医学科学技术的发展和科研手段的提高,从研究切片、组织或组织碎片中获益的事例

会越来越多,分清谁有权从研究切片、组织或组织碎

片中获益显得尤为重要,病理学家应该怎样做才能更

好地保护他们在使用其用于研究或其他非治疗目的时的利益呢?我国目前无相关规定,也无此类案例发

生。在国外,目前也只有很少法律、法规明确了病人具

有其组织的所有权.如美国乔治亚州明确规定基因信

息是个人的财产。同但是,这些法律没有直接陈述谁

有权从研究组织、切片和组织碎片中获益的问题。在· 35 ·

这个问题上,分析moore对加利福尼亚大学董事的诉

讼这一典型案例对病理学家及其实验室以后的实际

操作有重要的示范和指导作用。

原告john moore,是加利福尼亚大学洛杉矶医学

中心的一名多毛细胞白血病患者。凶为moore的病况

很少见且具有特征性,医生确信其组织有着重要的研

究价值。医生告知moore,切除他的睥脏是临床治疗

所必需的,并收集这些标本进行研究 moore不知道

他的医生使用其脾脏并非用于治疗目的.而他的医生

和一名研究者用这些组织来发展出一个细胞系.他们

凭此取得淋巴因子产生方法的专利权 这些专利的市

场评估价值是l0亿美元。而研究者,moore的医生、加利福尼亚董事与一生物技术公司签定了股份合同.

并且从来自moore的组织的研发产品中获益 在法庭

上,moore辩称他的组织以及由其组织产生的细胞系

是他的财产,因此他有权从研究产品中获益。moore

还起诉他的医生没有得到其本人的完全同意而使用

其组织进行研究的欺诈行为。

受理诉讼的加利福尼亚法院认为,财产法也适用

于组织内容物及研究结果,moore有权提出诉讼。然

而,在上诉中,加利福尼亚的高等法院驳回财产诉讼,并因此推翻了初审法院的庭审结果。高等法院主要从

3个领域驳回初审法院财产权的裁决 第一,高等法

院认为,缺乏条例或案例来支持moore对人类异常的组织成分的财产权的申诉。第二,根据加利福尼亚的法律,该州有权决定怎样处理组织。尽管条例提到公

共健康和安全目的,加利福尼亚的高等法院解释了这

个条例作为一个病人对离体组织的所有权力的普遍

性的缩减。第三,加利福尼亚高等法院发现这个细胞

系及其任何伴随产品都不是moore的财产,因为他们

不同于那些自然发生的细胞。当然,发展自moore组

织的细胞系和方法的专利是“人类创造性”的产品。该

专利被当作法律上的重要手段来区分来自moore原

始细胞的细胞系。因此,即使moore曾一度拥有他的细胞.但他的所有权不会扩展到源自他的或这些细胞的细胞系和产品。加利福尼亚高等法院以强调公共政

策的正当理由来驳回moore的财产诉讼,认为通过阻

止令人心寒的责任承担方向的影响,促进研究是公共的最好利益。它认为moore和其他潜在的原告应该经

由其他法理为这种违法类型寻求法律援助,例如,违

背信用职责(应诉欺诈行为)和知情同意权法律(应诉

①(美)45 code of federal regulations~164.501—514.

②(美)45 code of federal regulations~164.506(a)and 45 c f r~164.520(c)(2)(ii)

③(美)45 code of federal regulations~164.501—514.

· 36 ·

隐瞒使用moore的细胞的目的)。加利福尼亚高等法

院表达了他们的担心:应允这类类型的案件可能会在财产权力上扩张得过多,而不是在有价值的研究的代

价上。因此,在该案例中,加利福尼亚高高等法院认为

病人无权从用于研究的组织应用中获益。然而,加利

福尼亚高等法院也通过声明把他的结论限制在具体的场合下,“我们并不支持持有这样的观点:那些离体

细胞在任何情况下都不能作为财产”。

到目前为止,只有少数案例明确了诸如谁有权从

研究病人的组织中获益等问题。它们多集中在移除的器官(如角膜)和生殖材料(如精子)的财产权上。尽管

这些案例引发了法律讨论,他们还没有直接应用到最

近的涉及病理学家的问题上.即关于拥有组织、切片

和组织块的权利和从研究它们而获益的权利。

由于在这个领域里尚缺乏可解决的法律,一些职

业协会已经寻求制定“从使用组织获益的问题上和关

于组织所有权的一般法律及伦理关系”指导标准。这

些指导尽管没有法定约束力,但可能会帮助病理学家

了解怎样实际对付这些问题。美国医学协会(ama)出

版了一个针对目前医学问题的伦理守则和观点——

《关于人类组织的商业使用》的伦理准则规定:[刀(1)

在使用器官或组织进行临床研究时,必须获得病人的知情同意。(2)在利益被实现成生物源性材料的产品

之前,具潜在商业价值的应用必须对病人公开。(3)没

有得到提供原始细胞材料的病人的同意,人类组织及

其产品不得用于商业目的。(4)使用人类组织及其产

品获得的商业利益可以被病人分享,要与法律合同协

议一致。(5)医生提供给病人的诊断和治疗的选择应

当符合良好的医学实践标准,而不应当受到病人组织的潜在商业价值的影响 虽然这些美国医学协会的伦

理准则还没有直接地指明利益的归属权.但它们强调

了当从事具潜在商业价值的应用性研究的时候.尊重

病人的知情同意权显得尤其重要。美国病理学学会关

于《使用人类组织用于研究、教育和质量控制》的法规

也强调知情同意权的重要性,[81他们尤其建议承诺的形式应该是书面的而非空白的承诺,以便病人明确地

表示接受或拒绝捐献其组织用于教育或研究目的。

而病理学家能做些什么才能最好地保护他们在使用组织、切片或碎片用于研究或其他非治疗目的时的利益?正如moore对加利福尼亚大学董事的诉讼案

所提倡以及专业协会的观点,获得病人的使用其组织的完整的知情同意.是病理学家和实验室回避职责和

保护病人在研究方面的利益的最好的方式 [5_对于已

经被实验室拥有的组织标本.得到知情同意可能太

法律与医学杂志2005年第l2卷(第l期)

迟,然而,病理学家可能希望使标本匿名化来保护捐

献者的隐私.病理学家也应该咨询社会公共机构审查

部门的公共机构来决定怎样处理这些材料。

为了寻求获得标本,病理学家应决定适当的公开

和承诺尺度,也就是真正的知情同意。例如,合适的公

开范围可能依赖于:(1)组织标本最初被用来治疗还

是研究目的。(2)组织标本是独特的(也就是moore似的组织标本),还是普通的(也就是做常规检查的组织

标本)。[61通过更多的向病人公开,病理学家和实验室

能够更好地确保他们在实际操作中遵守知情同意的要求 例如,根据美国医学协会指导准则,医生应该公

开:(1)标本将被用于研究,和(2)从研究中获取的经

济利益的可能性的范围。[7]

在类似moore对加利福尼亚大学董事的诉讼案

中,在病人的组织是特别的情况下,医生可能希望向病

人揭示它的独特性和他们组织潜在的价值和研究的特

别目的。可能的经济利益的公开,应该小心地用词,既

不夸大商业获利的可能性,也不强制参与。医生可能会

在利益的驱使下加入病人放弃所有关于他们组织离体

以后的权利的条款,这样的解决方案应当避免,因为如

果放弃的条款太宽广(即病人放弃太多权利),法庭可

能会认为他们是不能执行的条款。[91另外,实验室可

能还希望考虑到一个可能的决定退出的策略。

在以上关于知情同意要求的建议内,病理学家应

该做什么?病理学家可能希望得到以下保证:(1)病人

已被告知参与研究的可能的风险和利益。(2)病人已

经同意使用其标本进行研究。(3)病人已被告知在其

研究中可能的任何商业利益。(4)已经被实验室保存的组织是匿名制备的或被授予社会公共机构审查部

门弃权的五、结论

综上所述,笔者认为,生物性的材料一经离体,按

照相关法规应由医院保管并遵守一定的保管时限:病

人有权复阅作为其部分医学记录的病理资料,但是没

有这些离体的生物材料的直接所有权。当病人要求进

行病理会诊时,医院应当直接提供原始切片、组织块

或者是足以代替原始切片的重新切片给病人指定的会诊单位.而不应交给患者本人;病理学家及其实验

室分发这些病理组织、病理切片和组织碎片用于研究

或其他非治疗目的时要保护病人的隐私:获得病人的知情同意和授权是保护患者隐私及病理学家利益的最好的办法,也是解决由于研究这些材料产生的可能的商业利益后的利益归属问题的可行办法。因为在这

个领域尚无明确的法律法规规定,病理学家在实际操

法律与医学杂志2005年第l2卷(第1期)

作中具有一定的盲目性,病理学家应小心遵循我国的医院工作制度、职责及规范,让自己熟悉在其权限内的法律要求,寻求专业协会的意见指导,使之顺从涉

及科学和商业研究目的之间的伦理关系。在处理实际

工作中谨慎行事,以免为自己带来不必要的麻烦。同

时,尽快制定各行业的行为规范,予以法律的效力,才

能最大限度地保护病理学家和患者双方面的利益,推

动我国医学事业发展。

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(收稿:2004—06—17,修回:2004—09—22)

第二篇:病理组织工作站

快速石蜡切片病理诊断

我院病理科引进的钧镒超声组织处理仪(病理组织工作站),病理常规石蜡切片诊断报告一般需时3~5天,在病人病情危急或者是肿瘤病人的诊断中,临床活检,用常规石蜡制片法制作,病理报告如没特殊情况,一般都需要三天才能发出。其程序基本是活检当天下午取材,晚上组织脱水及浸蜡,第二天上午包埋切片及染色,当切片送达医生手里时,已是第二天的上午,下午看阅切片,至复检医生手里时,已是第三天的时间了。这是一般的工作时间,可这对于急需获得病理结果的患者来说,三天时间确实太长,尤其是门诊病人,远道求医的患者,或者外地的患者,三天的时间就意味着等待,住宿及消费。为了解决上述的问题,减少患者的经济负担,为患者蠃来保贵的治疗时间,超声波快速石蜡制片法可胜任此项工作。最新超声波快速石蜡制片机,开展了快速石蜡切片病理检查。

超声波快速石蜡制片机能提高组织内分子和溶剂分子的运动速度,它能使组织的蛋白质迅速发生凝固并保持细胞原结构,因而能快速固定组织并保持组织的外形和柔韧性,有利于切片。超声波快速石蜡制片具有操作简便,时间短不易误诊,病理切片资料可长期保存等优点,目前病理科经过一段时间的前期准备及试验工作,该项目质量可靠,结果稳定,制片质量近似于常规石蜡切片技术,完全符合病理诊断的要求,大大地提高了工作效率。

应用超声波快速石蜡制片机,一般可以在6小时工作时间内发出常规病理诊断报告(上午11点前送检标本,当天下午5点前发出报告;下午4点前送检标本,次日上午12点前发出报告)。该项目按淄博市物价收费标准收费,如科室病人有需要做快速石蜡病理检查,请医生及时将其标本送到病理科。

开展快速石蜡切片病理诊断技术,既能使患者得到尽早诊断,从而得到及时治疗,减轻痛苦,同时又能使病人缩短就诊时间及住院天数,减轻医疗费用,方便了病人,实为一种优质、简便、安全、快速的好方法。

医生申请快速石蜡切片病理检查的注意事项:

1、如需做快速石蜡病理检查,请在申请单上注明快速石蜡病理检查。

2、如送检标本为少见疑难病例,需要进一步做免疫组化检查,在6小时内发出初检报告,免疫组化报告3工作日内发出。

3、为保证工作顺利进行,请需做快速石蜡病理切片的标本,离体后立即用福尔马林固定,并由专人快速送到病理科检查。

4、骨组织及淋巴结组织建议做常规石蜡病理切片检查。

5、周六、日不做快速石蜡切片检查。

计划首先开放科室:胃肠镜活检,耳鼻喉活检,宫颈活检,子宫内膜刮出组织。

第三篇:组织病理切片的制作流程

组织病理切片的制作流程

1. 取材

组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:

(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。

(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。

(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。

(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。

(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。

(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。

(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。为此可将组织展平,以尽可能维持原形。2.固定

(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。(2)注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部,或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管,经血管分支到达整个组织和全身,从而得到充分的固定。

(3)蒸汽固定法:比较小而厚的标本,可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。

3.脱水透明标本经过固定和冲洗后,组织中含有较多的水分,必须将组织块内的水分置换出来,这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去组织中所含水分,因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容,常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。

脱水的步骤是:80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时,此过程可用脱水机自控完成。

丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂,但因其脱水能力很强,对组织有剧烈收缩作用,在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于石蜡,还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等。

4.浸蜡、包埋

(1)使石蜡浸入组织中,取代组织中含有的透明剂。

(2)包埋:将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中,石蜡凝固后,组织即被包在其中,称蜡块,此过程称为包埋。5.切片和贴片

(1)修整蜡块:可视其组织的大小,在组织边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分,否则易造成组织皱缩不平。

(2)准备好切片用具:切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪(3)安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。

(4)安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上,把刀台上的紧固螺丝旋紧,使切片时不产生振动,能保持一定的切片厚度。

(5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意选择其厚度,石蜡切片的厚度一般在4~6μm。(6)切片(7)铺片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上,借水的张力和水的温度,将略皱的蜡带自然展平。

(8)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后,将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水,置入60~65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟,脱去溶化组织间隙的石蜡。

6.染色和封片常用的染色方法是苏木素-伊红(Hematoxylin-Eosin)染色法,简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质等;伊红是一种酸性染料,可使组织中的嗜酸性物质染成红色,如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。

H.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固

常规苏木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美国家的一些实验室则采用焰红(phloxine),此外也有用桔黄G(OrangeG)、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。1.取材

取材的好坏,直接影响切片的质量。医生在取材时,首先要有一把锋利的取材刀,在切割组织时要避免取材刀来回拖拉,切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度以0.2 ~0.3cm为适,较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点,而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些;淋巴结应修掉两侧球冠,并尽量剔除周围的脂肪组织。在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织,如碰到不可避免的钙化组织,应与技术室讲明,在切取纤维组织、肌肉、组织、胃肠道时,应注意纤维及肌肉的走向,取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。2.固定

固定是技术室工作的第一步,也是在整个制片过程中无法补救的一步。所谓“固定”,就是组织离体后,用各种办法使其细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置的过程。固定的目的是为了防止组织细胞自溶与腐败,防止了细胞内的酶对蛋白质的分解作用,使细胞内的各和成分如蛋白质、脂肪、碳水化合物或酶类转变为不溶性物质,以保持原有的结构与生活时相仿。另外,组织固定后,均呈一定的硬化状态,增加组织 韧性,而且不易变形,有利于以后的组织处理。所以组织一旦离体必需及时固定,固定液的量应为组织的5倍。固定的关键主要与固定的及时性、固定液的选择、固定液的浓度、固定的温度和时间有关。最常用的固定液为10%福尔马林。笔者认为,10%福尔马林由于受到福尔马林的质量、使用时的挥发和取材时带入的水分影响,浓度被降低致组织固定不足,而高浓度的福尔马林,降低了对组织的穿透性,形成周围固定好而中央固定不到的现象。通过实践,本人认为以酸性12~15%的福尔马林最佳。大标本(2cm厚)一般需要6~12个小时,小标本一般需要3~6个小时;当室温低18℃时,可在37℃以下的温箱内加温4~6个小时。由于HE染色最佳着色PH为3.5~4.5, 中性福尔马林对苏木素染色有一定影响,细胞核容易发灰,核染色质不佳。所以, 尽管中性福尔马林对抗原有很好的保存作用,但酸性福尔马林对绝大多数抗原来说也有很好的保存作用,所以在没有特别处理的情况下常规HE用12~15%酸性福尔马林也可以(每100毫升12~15%福尔马林液内加5毫升冰醋酸)。骨髓、结缔组织固定以Bouin液为佳,经Bouin液固定后的组织必须流水冲洗4小时以上。有条件的单位可根据不同要求选用二种或二种以上的固定液;少数单位还可建立组织冷冻库,以便适应各种特殊的处理要求。3.水洗

固定后水洗(10~20分钟),通常被很多人所忽视,而水洗不彻底,容易造成脱片和染色不鲜艳。对需做免疫组织化学的组织,更不应当忽视。福尔马林不利于组织块内抗原的保存.脱水和透明

所谓脱水就是利用脱水剂将组织内的水分置换出来,以利于有机溶剂的渗入,这一过程称为脱水。脱水是否彻底,直接关系到组织是否能充分透明,而脱水过度(原因是组织在纯酒精内时间过久,发生组织质地发生变化)容易造成组织发脆。造成组织发脆的原因还有加温(温度超过35℃)、脱水剂内加有丙酮、浸蜡用的石蜡中二甲苯过多等等。一般我们总认为组织发脆跟高浓度酒精有关,而忽视了与低浓度的酒精关系,其实低浓度的酒精具有强大的穿透力,比纯酒精更容易渗透到组织块内部使之脱水,组织如果在低浓度酒精里充分脱水,在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份,因此,仅需短时间就可完成,如果这时不缩短纯酒精的时间,便会引起组织发脆;如果脱水时加温,使用丙酮,还可引起组织收缩,并影响免疫组织化学的标记。为了使石蜡浸入到组织块内,必须经过一种既能与脱水剂混合,又能与石蜡相溶的媒介物质,这个过程称透明。目前最好的透明剂是二甲苯。很多人认为二甲苯极容易使组织发脆,这个 观点很片面,在常温下,如果不是时间过长(超过24小时以上)二甲苯并不会引起组织过份发脆,相反会使某些组织结构比较质韧的组织:比如子宫肌瘤等相当好切),但是当二甲苯温度超过35℃以后,极易引起组织发脆。所以本人认为,大小标本最好分开脱水,一般情况下,大标本脱水时间(室温18℃)以80%酒精2小时、95%酒精(2道)各1个半小时至2小时、纯酒精(3道)各1个半小时至2小时,二甲苯(2道)各30-60分钟为宜;小标本脱水时间应相应缩短。脱水时间长短,与室温高低有密切的相关。我们在实践中发现,室温在12~15℃时,可作为一个临界温度范围。当室温高于此温度范围时,组织容易脱水,可适当缩短脱水时间;而室温低于该温度范围时,应适当延长脱水时间(如能保证在一个恒定的温度下最佳)。更换试剂,应以量为基础,定量更换,不能等到切片不好时再去更换。否则,至少会有2~3批组织切片不好。根据我科经验,如试剂用量为500ml,每500个蜡块更换一次为宜。5.浸蜡

组织透明后,在熔化的石蜡内浸渍的过程称为浸蜡。用其他浸透剂(如火棉胶、明胶等)渗入组织内部的过程可称为浸透或透入。浸蜡温度过高(超过60℃),在蜡内加入二甲苯蜡或由于透明时带进的二甲苯过多,都会导致组织发硬,还会使组织内的抗原受到破坏;所以作者主张浸蜡用的石蜡熔点在56℃(三道),第一道:石蜡30分钟;第二道:石蜡90分钟;第三道:石蜡,90分钟。浸蜡温度控制在56~58℃左右。(第一道也可用硬脂酸石蜡1:3混合浸蜡,不仅可软化组织,特别适用于比较韧、硬的组织,而且由于硬脂酸是弱酸性的,对细胞核有媒染作用,核浆比鲜明,但容易脱片;同时对疏松组织容易散片)。有条件的可以每天打开第一道石蜡的盖子,让二甲苯挥发。浸蜡所用的石蜡如有杂质尽可能过滤,以防附在组织上,造成切片刀刀口受损,或切片破碎和划痕增多。6.包埋

用包埋剂来支持组织的过程称包埋。最常用的是石蜡包埋法。包埋的关键一是平整,二是方位。要求在包埋时,应采用镊子轻压组织块拱起部份,使之平贴于底部,通常采用组织的最大面包埋。囊壁、管腔组织应竖直包埋。小块多颗组织,应尽量放在一起,并保证在一个平面上。修去两边的余蜡(所谓的两边,指切片时与切片刀垂直的两侧)。包埋时还应注意有无缝线,纸絮,如有一定要去除。胃黏膜活检标本,不能按一般的规律取最大包埋面,应采取窄面竖起包埋。包埋的蜡更应过滤,留有杂质的石蜡,容易造成污染或刀口受损。蜡的熔点应在56~58℃之间选择,不提倡在冬天使用软蜡。因为用 软蜡包埋的蜡块,到了夏天,会粘在一起,不利于资料的保存,而且即使在冬天,用硬蜡包埋的蜡块也比用软蜡包埋的蜡块要好切。7.磨刀

要想切好一张切片,首先要有一把锋利的切片刀。磨刀是从事切片技术人员的一项最基本技术,刀磨的好坏,直接关系到切片的质量。磨刀的手法各人不同,但都要求用力均匀,使刀口和磨刀石全面接触,两手的用力点应在刀口上,而不是在刀背上。切片刀应用一次磨一次,每次仅需10~15分钟,过长时间的磨刀,容易把已经磨出的锋刃磨掉,检查切片刀是否锋利,用手试摸刀口的方法并不十分科学,不仅不能证明切片刀是否真正锋利,而且容易损害刀口,最简单的办法是每次磨好后拿一个蜡块试切一下。每次磨好刀后,应将磨刀石用盖子盖好,以防灰尘掉在磨刀石上,用有灰的磨刀石磨刀,会使切片刀产生许多细小的缺口。现在很多单位都买了磨刀机,磨刀机用来开刀锋和磨缺口的确不错,但由于磨刀的角度和时间不易精确掌握,故效果并不理想。根据我们的经验,真正的锋刃很难用机器磨出来。一次性刀片在很大程度上解决了这个问题。如用一次性刀片,必须及时更换刀口。一个刀口切小标本不应超过20~25只蜡块,切大标本不应超过10~15只蜡块。8.切片

切片的第一步必需粗切。粗切的厚度大约在50~100微米左右,质地较硬的组织或较小的组织应再薄一些,粗切致组织全部暴露后,才进行细切。细切至组织块表面均匀一致,无白点后,再把切的蜡片放入温水中。切片时要求用力均匀、柔和,摇速不易过快或过慢。过快会导致切片厚薄不均,机器磨损;过慢会使切片增厚。切片厚度一般为3~5微米。切片的要求是完整、薄、均匀。切下的片膜其大小形状应与组织块一致,切片的不完整,常会将重要病变遗漏,导致误诊、漏诊。在切片放蜡块时,应注意组织包埋的方向,组织的层次,纤维、肌肉等的走向应与切片刀平行,较难切的部分应放在上面,如皮肤的表皮,肿块的包膜,胃肠道的浆膜等,这样可以减少组织的断裂现象。操作切片机时应用力均匀,避免用力过重。对脱钙组织、骨髓,以及已知的钙化组织,应选用固定的刀口,以减少其他部位出现缺口的可能性。在使用毛笔展片时要防止笔丝进入刀口,因为每切到一根笔丝,就会增加一个缺口。切片厚度一般为4~6微米,有人认为:只要切片机刻度标着几个微米,切出来的片子就是几个微米。其实不然,当切片刀不锋利,或切片时速度不匀,或切的较慢时,切的片子都会变厚,只有在切片刀十分锋利、切片匀速的情况下,才能真正保证其厚度。下面是切片时碰到的问题的原因及可 能处理的方法:(1)组织发脆:一般是脱水、透明、浸蜡时间过长、温度过高,并与组织本身质地也有关,在切片时,边切边用嘴向蜡片吹气,可能会好些。(2)切片卷起,可能是刀不锋利,或刀锋在另一面,或刀角度过大,切片太厚等等。(3)蜡片弯曲:可能是刀锋不均,切片刀未磨直,切片刀与蜡块不平行。(4)透明、浸蜡时间过长、温度过高,并与组织本身质地也有关(5)厚薄不均:可能是刀、刀座及蜡块未夹紧,组织太硬,或切片机主轴太向前,或切片机已磨损。(6)切片出现裂痕:可能是刀有缺口,石蜡内有杂质,组织内有钙化、骨片或有线结, 也可能会有棉纸纤维等。(7)切片不连片,切不下片,切片很厚,或者切片后蜡块发白,内陷:组织脱水不佳。补救办法:可先将蜡块溶解,取出组织,放入加热水浴的丙酮内(80℃),30~60分钟,再进行透明浸蜡包埋切片,也许会好一点。9.展片与捞片

展片水温应在42℃至47℃之间,这主要和包埋蜡的熔点有关,水温过高,会引起组织细胞散开,水温过低,切片皱摺无法摊平。包埋蜡中如有二甲苯,也会造成石蜡溶解现象。而用一次性刀片切的片子,一碰到热水,片子上的皱摺就无法再展开,这有二个方法可以解决:第一、可以在切片时边切边向蜡片吹气,这样的片子就会非常平整,放到热水里就会自然展开,比较方便快捷,但这样的片子会略微厚一点;第二、在切完片子后,先把切片放在30%酒精水溶液中,让酒精的张力自动把皱摺展开,然后再将切片移到热水,这样的片子会较薄;如酒精浓度过高,容易引起切片破碎,出现裂隙,像脂肪之类细胞间粘附性较小的组织一碰到酒精就会散开,故不能用此法。最后捞片时玻片要干净,要选择那些完整、无皱摺的切片,粘贴于玻片中1/3和下1/3的中间。10.烤片和脱蜡

烤片,一般在60℃的温箱内烤片0.5~1小时左右,温度过高,会引起切片细胞收缩;时间太短(少于20分钟),容易造成脱片。脱蜡也相当重要,如果脱蜡不干净,切片不易着色或着色不匀,所以,脱蜡用的二甲苯要经常更换,一般用3道二甲苯,每500ml液体,处理500张切片后更换一次为宜。当室温低于18℃时,必须将切片从温箱拿出后立即放入二甲苯中脱蜡,或将二甲苯放入温箱内预热(37℃左右)脱蜡,最高不得超过60℃。然后经高浓度的酒精到低浓度的酒精洗去二甲苯,至水。11.染色

苏木素染色时间要根据染料的新旧、温度、切片的类型而定,一般为5-15分钟。经水略洗后,用盐酸酒精分化,分化程度必须用显微镜控制。分化水洗后,可用温水或 自来水蓝化,并充分水洗(流水冲洗5分钟以上),以防盐酸残留导致切片褪色。我们不提倡使用碱性溶液(释氨水、肥皂水等)促蓝,尽管蓝化效果很好,但从实践的结果来看,用碱性溶液促蓝的切片不能长期保存,容易褪色。最后入伊红复染(5-20秒)。HE染色的关键在于深浅适度,对比鲜明,一般有经验的,肉眼就能判断,但偶而也会出现失误,所以用显微镜控制是最保险的方法。其关键的步骤在于苏木素染好后的分化及蓝化过程,在蓝化结束后,应在显微镜下观察细胞核着色是否合适,核结构是否清晰,胞浆内是否有残留的苏木素等等。染色理想的切片在显微镜下应是:细胞核与细胞浆应蓝红相映,鲜艳美丽;核浆对比明显,核膜及核染色质颗粒清晰可见。12.脱水和封片

切片脱水应从低浓度的酒精到高浓度的酒精,80%酒精1道,95%酒精2道,纯酒精2道,(正丁醇1道),二甲苯2道。浓度低的酒精比浓度高的酒精更容易脱水,但也容易使伊红退色,故脱水时间可短一点,每道3-5分钟,纯酒精每道10分钟。为增加酒精与二甲苯的相融性,可在二甲苯前面增加一道正丁醇;石碳酸-二甲苯液也有此效,但用石碳酸时如不洗净,可引起切片退色,不利于切片久存,故不作推荐。切片经二甲苯透明后,用中性树胶封固。为增加切片的透明度,防止细胞收缩、龟裂或切片出现黑色结晶样小点。所以我们规定切片必须湿封,不得用温箱烤干或电吹风吹干后干燥封片。在南方冬春、霉雨季节,封片时要防止口鼻呼出的气体接触到切片;在天气较潮湿的日子里,不宜一次将多张切片取出待封,以免切片“还潮”,形成透明不佳,出现云雾状水珠。脱水剂的更换也应有一定的时间规定。一般是每500ml液体,处理500张切片后更换一次为宜。封片树胶不能过稀,封片时树胶要均匀充满盖玻片且树胶不及外溢为佳。要将组织全部覆盖,也不能有气泡。最后,粘贴标签,标签必须贴于玻片左侧,编号书写清楚,最好能打印。

第四篇:组织病理切片的制作过程上

组织病理切片的制作过程上

1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。为此可将组织展平,以尽可能维持原形。

2.固定(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。(2)注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部,或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管,经血管分支到达整个组织和全身,从而得到充分的固定。(3)蒸汽固定法:比较小而厚的标本,可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片,则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。2

3.脱水透明标本经过固定和冲洗后,组织中含有较多的水分,必须将组织块内的水分置换出来,这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去组织中所含水分,因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容,常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。脱水的步骤是:80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时,此过程可用脱水机自控完成。丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂,但因其脱水能力很强,对组织有剧烈收缩作用,在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于石蜡,还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等。

第五篇:论组织

论组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件的执法理念

论组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件的执法理念

[摘要]组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件具有复杂性高、牵连面广、社会危害大等特点。这些特点需要侦办此类案件侦查人员具有较高的业务素质和法律意识,能够全面了解办案的具体程序,熟练掌握运用侦办类似案件的具体措施。同时能够注意办案过程中的各类问题。本文根据对侦办组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件的办案程序、注意问题、启示等方面对其执法理念进行分析、探究。

关键词:卖淫案件 执法理念 办案程序

引言:随着我国社会经济的高速发展,中国梦理念的提出,人民群众对于精神文明建设迫切要求。公安机关对卖淫嫖娼类案件急需新的指导思想和解决办法。尽快树立此类案件的执法理念以应对具体办案过程的各种问题。

一,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件的内容

我国刑法第六章第八节规定了组织卖淫、强迫卖淫、协助组织卖淫、引诱、容留、介绍卖淫、引诱幼女卖淫、传播性病、嫖宿幼女等七个卖淫相关联的犯罪行为。七个罪名涉及的行为都侵犯了社会风尚这一共同客体。但在罪质、量刑情节和幅度等方面又存在很大差异。

二,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件的特点

首先,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件具有组织严密的特点。其表现在三个方面。第一,涉案人员数较多,但幕后组织者往往是少数的几个人甚至一个人。第二,内部分工细致,相互之间上通下达,衔接无缝。第三,管理规范,制度健全,运行机制流畅。

其次,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件具有活动隐蔽的特点。第一,招工方式隐蔽,多以招聘普通职员为旗号,以高薪吸引应招者。第二,招嫖方式以网络、移动通信、即时聊天工具为主。第三,卖淫活动分地、分时间进行,流动性较大。

然后,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件具有暴利性的特点。卖淫活动,投入低,获益多,并且往往能够带活其他经营活动。

并且,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件往往是“案中案”。该类案件一般会牵连出强奸、非法拘禁、传播淫秽物品、涉黑案件、故意杀人、故意伤害等案件。

最后,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件具有腐蚀性的特点

在此类案件中组织卖淫行为人为了更顺利地实施犯罪、逃避法律制裁,会收买一些国家工作人员给予保护,特别是向公安民警行贿,为自己寻求“保护伞”

三,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件的具体办案程序

(一)线索搜集

随着经济的不断发展,卖淫嫖娼现象也是日益严重,分布广泛。犯罪“黑数”十分巨大。公安机关发现、打击的知识很少的一部分。很多卖淫嫖娼的组织和活动都还未发现。因此要注重对于卖淫嫖娼案件的线索搜集。

为此,可以通过场所管理进行搜集,对酒吧、洗浴中心、旅馆、饭店等敏感场所 1

加强日常管理,规范这些场所的日常管理制度。还应该对城乡结合部、公园等地区进行巡查管理。同时,注重群众的举报,实地调查发现。并且,发挥好治安联防组织和治保组织的作用,了解辖区的治安状况。还有可以通过以案寻案,依靠之前办理的案件进行线索搜集。最后结合网监部门、秘密力量搜集到有效的信息。

(二)认真受案

受案记录要清晰,关于案件的要素尽可能问全、问细。全面把握案件的具体情况。其次询问其他涉案人员或知情人。记下举报人、控告人、报案人的通讯方式等联系方式以及家庭地址。

还要注意案件的管辖,此类案件归案件发生地管辖。

(三)初查(明查暗访)

1,暗访。

(1)暗访需要经过公安机关领导的批准。

(2)同时制定暗访工作的预案。包括任务、时间、地点、参加人员、取证工具、经费预算等。

(3)宣布和遵守暗访纪律,包括暗访人数的要求、人员性别年龄要求、化妆的标准。以及暗访人员心理素质、身体素质、业务素质的要求。还有暗访工作中的具体分工以及行动流程。

(4)暗访后及时形成暗访报告、反馈意见。并且详细绘制现场平面图。

(5)走访证人,做好证人及其亲属的保护工作。

(6)调查涉案场所和组织行为人的资产和账户。

2,明查(扩大初查战果)

(1)制定预案,行动方案。

(2)部署充分、精干的警力。包括警力的人数、性别、职能。

(3)通信联络器材、移动终端、联络暗号。一定要保障高效畅通。

(4)参加清查、搜查队伍自身要强化自身防范意识、安全意识。责任意识。准备充分。

(5)随身携带的武器要锁好保险,防止发生意外。

(6)准备好搜查场所、人身的法律工具、行动要走法律程序。符合法律的相关规定。包括适用法律的条件、法律的相关手续以及法定程序。要亮明身份、不许异性搜身。扣押物品要经过指挥员决定,开具《扣押物品清单》同时要有见证人见证。

(7)及时收集卖淫行为发生的证据和组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫刑事犯罪的证据。取证方向是,控制涉案人员、控制重点位置、控制重点物品以及冻结账户。重点的位置包括服务台客房内的“暗门”和“暗铃”。重点人物是指“妈咪”和“领班”

(8)慎用技术侦查措施,使用技术侦查手段要严格履行审批手续。音像资料要避开化妆侦查人员的身影和声音。注意暗访资料向合法证据的合理转化。

3,证据的收集。

(1)收集关于犯罪主体方面的证据,包括犯罪嫌疑人的居民身份证和旅店的营业执照

(2)收集关于组织卖淫的客观方面的证据,包括现场勘查笔录和现场照片(暗道、报警设备等)广告、宣传册(服务项目表,价格表)发票、收据、账单。参与嫖娼人员的证人证言。联系的电话记录、通信记录。犯罪嫌疑人的口供。押金和票据。

(3)讯问犯罪嫌疑人,首先要制定讯问提纲、确定讯问战术。其次,告知犯罪嫌疑人的法律权利。坚决禁止任何方式的刑讯逼供。问清犯罪嫌疑人是否属于未成年人、精神病人和怀孕或正在哺乳自己的未满一周岁婴儿的妇女。为聋哑人、外国人、需要翻译的配备哑语翻译、外语翻译和方言翻译。必要时可以要求犯罪嫌疑人自行书写供词或犯罪嫌疑人自己提出书写供词。

4,侦查终结。

(1)侦查终结的条件。首先,侦查终结的条件有案件事实清楚,主要事实查清,包括犯罪嫌疑人的身份、具体实施组织、策划、指挥行为的组织卖淫犯罪的首要分子、在卖淫犯罪中起协助作用的保镖、打手、管账人等。卖淫行为是否存在、时间、地点和手段以及造成的严重后果。其次,证据确实充分。要把关于卖淫案件的书证、物证、证人证言等各项证据收起。保证证据量,形成足够证明力的证据链。再而,案件性质和罪名认定正确。区分好此罪彼罪,这样侦查部门对案件作出的处理才能具有实体法的依据。最后,法律手续完备。即对法律规定的办案程序和应履行的法律手续必须完备,在适应技术侦查手段时要经过必要的审批程序。

(2)对侦查终结的案件处理。首先,对案件的处理。对侦查终结的案件,侦查人员应提起诉讼意见,并制作起诉意见书,经县级公安机关负责人批准后,连同案卷材料。证据,一并移送同级人民检察院审查起诉。其次,对扣押武平的处理。对能够证明犯罪事实的物品,淫秽器具、收入账目等书证、视听资料等,应当移送检察机关。移送时,侦查人员应当制作随案移交物品清单,注明物品的名称、数量、特征等。不宜移送的犯罪嫌疑人的财物,可以进行没收后上交国库,违禁物品应当拍照随卷后进行销毁。与案件无关的物品应当发还给当事人。

四,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件侦办中应该注意的问题

(一)在卖淫案件中,要注意组织他人卖淫,情节严重;强迫不满十四周岁的幼女卖淫;强迫多人卖淫或者多次强迫他人卖淫;强奸后迫使卖淫;造成被强迫卖淫的人重伤、死亡或者其他严重后果。这几种情节特别严重的情况。

(二)在协助组织卖淫案件中要注意伴有的其他犯罪行为。如抢劫、强奸、伤害、介绍卖淫等犯罪行为。以配合、呼应、协助组织卖淫者的组织、策划、指挥活动。

(三)在引诱、容留、介绍卖淫案件中要注意与拐卖人口贩毒卖淫嫖娼案件之间的联系。

(四)在引诱幼女卖淫案件中。其罪的主观方面是否以牟利为目的,不影响罪的成立。

(五)在传播性病案件中,经查是卖淫嫖娼的再进行性病检查。其中,犯罪嫌疑人必须是明知自己有性病的。认定“明知”一是有证据证明曾到医院就医,被诊断为患有严重性病的。二是根据本人的知识和经验,能够知道自己患有严重性病的。三是通过其他方法能够证明犯罪嫌疑人是明知的。

(六)在嫖宿幼女案件中,主观上必须是知道或可能是不满十四周岁幼女而嫖宿的。

五,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件的执法理念的启示。

在近年来,公安部门所发现的组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件,如东莞打丑、北京“天上人间”郑州的“皇家一号”等案件。都呈现出规模大,隐蔽强,管理企业化,经营产业化,有高官充当保护伞的特点。这就需要我们公安机关能

够建立相对应的警务决策机制、执行机制、监督机制、反馈机制。建立专门的队伍。开展各项专项行动。对此类犯罪行为预防打击。

结语,组织、强迫、引诱、容留、介绍卖淫案件的执法理念应该紧随时代潮流。打击此类案件刻不容缓,不仅是建设社会主意法治社会的要求,也是人民群众的共同期待。

参考文献

《治安部门管辖刑事案件侦查教程》 商小平主编

《治安案件查处》 商小平主编

《中华人民共和国刑事诉讼法注释本》 夏红主编

《治安部门管辖刑事案件侦查》 彭文主编

《侦查理论与实务研究》 程小白主编

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