2012实验材料与试剂总结

第一篇：2012实验材料与试剂总结

实验专题

常用方法技术与药品试剂

一、基本的实验方法和技术（补充）

1.植物叶片生成淀粉的鉴定技术（1）适用于光合作用的有关实验

（2）主要步骤：光照 酒精脱色加碘检验等 2.同位素示踪技术

（1）噬菌体侵染细菌实验

（2）光合作用中氧原子、碳原子转移的研究实验（3）半保留复制实验

（4）分泌蛋白的形成过程 3.植物杂交技术

（1）雌雄同花：花蕾期去雄 + 套袋 + 开花期人工授粉 + 套袋（2）雌雄异花：花蕾期雌花套袋 + 开花期人工授粉 + 套袋 4.育种技术

（1）杂交育种（2）人工诱变育种（3）单倍体育种（4）基因工程育种（5）细胞工程育种等。

二、实验中常用器材和药品的使用

1.斐林试剂与班氏试剂：可溶性还原糖的鉴定砖红色沉淀（水浴加热）2.双缩脲试剂：鉴定多肽（蛋白质）与双缩脲紫色

3.苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ：脂肪的鉴定（脂肪被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色，用显微镜

观察；也可向待测样液中滴加）

4． 酒精：用于洗去浮色，配制解离液，叶片脱色，析出DNA（冷酒精），提取叶绿体中的色

素，消毒处理，冲洗卡诺是固定液。5.碘液：鉴定淀粉（蓝色）

6． 吡罗红甲基绿（混合染色剂、现配现用）：甲基绿使DNA呈现绿色（细胞核，面积小），吡罗红使RNA呈现红色（细胞质，面积大）

7.HCl：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；使染色质中DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合；解离；改变溶液pH

8.NaCl：配制生理盐水（0.9%的氯化钠溶液，维持动物细胞的正常形态）及其他不同浓度的盐溶液，可用于测定动物细胞内液浓度；溶解(2mol/L)或析出DNA（0.14mol/L）9.NaOH：用于吸收CO２或改变溶液的pH，模拟细胞大小与物质运输关系实验中应用

10.健那绿染液 ：专一染线粒体的活细胞染料（健那绿溶解在生理盐水中制成健那绿染液，使

活细胞中的线粒体呈现蓝绿色）

11.蔗糖：配制蔗糖溶液，用于测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原

12.台盼蓝：台盼蓝使死细胞染成蓝色（正常的活细胞，细胞膜结构完整具有选择透过性能够

排斥台盼蓝，区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性）

13.20%的肝脏研磨液、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁溶液：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。

14.可溶性淀粉、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用

实验（应该用斐林试剂检测，不能用碘液进行检验，因为蔗糖及其水解产物与碘均不变色）15.3%可溶性淀粉、2%的新鲜淀粉酶溶液：探究温度对酶活性的影响（①先分别保温再混合，②不能用斐林试剂检测，只能用碘液检测，③不能用H2O2做本实验）

16.20%的肝脏研磨液、3%的过氧化氢：探究Ph值对酶活性的影响（不能用淀粉酶催化淀粉

探究探究Ph值对酶活性的影响）17.Ca(OH)2（澄清的石灰水）：鉴定CO２（混浊程度不同可说明有氧呼吸与无氧呼吸产生二氧

化碳的多少

18.溴麝香草酚蓝水溶液：可检测CO2（由蓝变绿再变黄）19．重铬酸钾溶液：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色（可

以检测酵母菌的呼吸方式，也可检验酒驾）20．乙醇或丙酮：用于提取叶绿体中的色素

21．层析液：可用于色素的分离，即将色素在滤纸上分离开。22.滤纸 ：过滤或纸层析

23.二氧化硅：在色素的提取和分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分

24.碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏25.NaHCO3 ： 维持环境中CO２浓度的恒定

26.改良苯酚品红染液、龙胆紫染液、醋酸洋红溶液（碱性染料）：用于染色体染色

27.秋水仙素：阻断纺锤体的形成,使染色体加倍（人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或

幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制纺锤体的形成）（低温也可抑制纺锤体的形成）28.卡诺氏液：把经诱导处理的根尖放入卡诺氏液中浸泡0.5-1h，以固定细胞形态 29.二苯胺：鉴定DNA（蓝色，沸水浴）30.柠檬酸钠：防止血液凝固，抗凝剂

31.洗涤剂：提取植物细胞中DNA时瓦解细胞膜 32.琼脂：激素的转移或配制固体培养基

33.PEG试剂：促融剂（灭活的病毒也可作为促融剂）34.氯化钙： 增大细菌细胞壁的通透性 35.胰蛋白酶（胶原蛋白酶）：可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散开 36.木瓜蛋白酶：嫩肉粉的主要成分，催化水解蛋白质

37.蒸馏水：①在观察DNA、RNA分布中配染色剂；缓水流冲洗载玻片

②质壁分离及复原实验中，使发生质壁分离的细胞浸浴在蒸馏水中发生复原（引流法）

③临时装片的制作（擦、滴、取、放、展、盖）④有丝分裂实验中漂洗解离液

⑤DNA粗提取与鉴定实验中使血细胞吸水涨破；稀释NaCl溶液 ⑥制备细胞膜时使细胞吸水涨破（引流法、差速离心法）

三．注意取材问题

(1)观察DNA、RNA在细胞中的分布不能选用哺乳动物成熟的红细胞(无细胞核，也就几乎不含DNA、RNA)；

(2)不能用观察叶绿体的材料来观察线粒体(叶绿体中的色素颜色会掩盖健那绿染色后的颜色变化)；

(3)观察细胞的有丝分裂或低温诱导植物染色体数目的变化时，应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞(长方形的细胞可能是根尖的伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力)；

(4)观察细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢和植物的雄蕊，而不宜选用动物的卵巢和植物的雌蕊(雄配子的产生数量远远多于雌配子，更容易观察到减数分裂的细胞)；

(5)观察叶绿体时，若选用菠菜叶则取稍带些叶肉的下表皮(靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少)；

(6)观察植物细胞的质壁分离与复原应选取活的成熟的植物细胞(含有大的液泡)。四．实验中注意问题 1.有关蛋白质的鉴定

①若用蛋清进行蛋白质鉴定时，需将鸡蛋清用水稀释，通常是0.5 mL蛋白液加入5 mL水，搅拌均匀。如果蛋白液稀释程度不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不容易刷洗干净。

②鉴定蛋白质时，向样液中加入2 mL双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入3～4滴双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B不能过量，因为过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，从而掩盖生成的紫色。

2.探究温度(pH)对酶活性的影响时，必须在达到预设的温度(pH)的条件下，再让反应底物与酶接触，避免在未达到预设的温度(pH)时反应底物已与酶接触发生反应，影响实验结果。

（1）温度对酶活性影响实验中

①不能用过氧化氢酶来完成此实验，因为过氧化氢受热易分解

②不能用斐林试剂检测，因为斐林试剂的使用需要加热，加热会改变0℃组的实验结果（2）pH对酶活性影响实验中：不能用淀粉、淀粉酶做此实验 3.探究酵母菌的呼吸方式时：

（1）①新配制的质量分数为5%的葡萄糖溶液先加热煮沸(杀死里面的微生物、除去溶液中的氧

气)，等冷却(防止高温杀死酵母菌)后再将食用酵母菌加入；

②酵母菌培养液应封口放置一段时间后，待酵母菌将瓶内的氧气消耗完，再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶，以保证检测到的一定是酵母菌无氧呼吸产生的CO2使澄清的石灰水变混浊。

（2）实验结果的检测

①检测CO2（观察石灰水混浊的程度、溴麝香草酚蓝溶液变成黄色的时间长短）

②检测酒精的产生（酸性的重铬酸钾）4.探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度

①装置的设计应有利于观察，如观察促进生根的实验可以用水培法。

②所设组别除不同浓度的生长素类似物处理外，还要增加一组蒸馏水处理的做空白对照。5.探究培养液中的酵母菌种群数量的动态变化

①从试管中吸出培养液进行计数之前，要轻轻震荡几次，使酵母菌均匀分布，以确保计数准确，减少误差。

②该探究不需要设置对照，因为随着时间的延续，酵母菌种群数量的变化，在时间上形成前后自身对照

③该探究不用重复，只要分组实验，求得平均值即可。

④对于压在小方格界线上的酵母菌，应只计算相邻两边及其顶角的酵母菌。⑤实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是错误的，正确的方法是浸泡和冲洗。6.观察叶绿体、线粒体

①选用藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮（稍带叶肉）作观察叶绿体的实验材料是实验成功的关键，因为藓类叶片仅为一层细胞，菠菜叶的下表皮的叶肉细胞叶绿体大且数目少，便于观察。）

②线粒体、叶绿体均需保持活性。

③叶绿体，不需染色，可直接观察；线粒体用健那绿染色（活体染色剂）

④观察线粒体一般选用动物或人体细胞，而不选用植物的叶肉细胞，其原因是经健那绿染

色的线粒体颜色为蓝绿色，与叶绿体颜色相近，会掩盖影响对对线粒体的观察

7.采用差速离心法的实验有

①细胞膜的提纯②分离各种细胞器

8.研究DNA的复制方式用（答案：密度梯度离心法、同位素标记法）9.引流法的应用

①细胞膜的制备②质壁分离与复原 10.紫色洋葱可做哪些实验

有丝分裂（根尖）、低温诱导染色体数目加倍（根尖）、质壁分离（洋葱鳞片叶外表皮）、观察DNA、RNA的分布（洋葱鳞片叶内表皮）、观察线粒体（洋葱鳞片叶内表皮）

11、植物种群密度调查用

蚯蚓（活动能力比较弱的动物）的种群密度调查用调查动物丰富度用 取样器取样法）

统计动物丰富度（目测估计法、记名计算法）

12、关注酵母菌的常考知识点和注意问题

（1）酵母菌是单细胞真菌，即属于真核生物（2）代谢类型异养兼性厌氧型（3）生殖方式无性生殖和有性生殖

（4）具有的核酸种类有DNA和RNA，其中遗传物质是DNA，是否遵循

遗传规律是（有性生殖）

（5）能发生的可遗传变异有基因突变、基因重组和染色体畸变（6）酵母菌不是种名，代表的是一类生物。

（7）在生态系统中的地位：大多数腐生，属分解者； 少数寄生，属消费者，如葡萄表面的野生酵母。

（8）有细胞壁但成分既不是纤维素和果胶（植物），也不是肽聚糖（细菌）。

第二篇：高中生物实验常用的试剂总结

高中生物常用的试剂及其作用

1.斐林试剂： 成分：0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法：将斐林试剂甲液和乙液混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。

2.双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。

3.苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。

4.二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。

5.甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。

6.吡罗红：检测RNA，呈红色 7、50%的酒精溶液：用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。8、70%的酒精溶液：用于医学临床上的消毒灭菌。

9、95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA 10、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。

11.龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色 改良苯酚品红染液：检测染色体，红色

健那绿：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色。活体染色剂

12.20%的肝脏研磨液、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

14.碘液：用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红

15.丙酮：用于提取叶绿体中的色素

16.层析液：(成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油)可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。

17.二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。

18.碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。19、0.3g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。

20、氯化钠溶液：①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、0.015mol/L时DNA的溶解度最高，在氯化钠浓度为0.14 mol/L时，DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。

21、胰蛋白酶：①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散于。

22、秋水仙素：人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制正在分裂的细胞纺缍体的形成。

23、氯化钙：增强细菌细胞壁的通透性，可用于基因工程。

24、NaHCO3/ Na2CONa2HPO4/ NaH2PO4：酸碱缓冲对→调节ＰＨ

25．NaCl：配制生理盐水（0.9%）或用于提取DNA（0.14M或2M)

26．溴麝香草酚蓝水溶液：检测CO2，由蓝变绿再变黄

27.酸性重铬酸钾溶液：检测酒精，橙色变为灰色

常用的实验方法

化学物质的检测方法

1、淀粉————碘液

3、CO2————Ca(OH)2

5、O2 ————熄灭、复燃

2、单糖、麦芽糖———斐林试剂

4、乳酸————石蕊试剂

6、蛋白质——双缩脲反应

实验结果的显示方法

1.光合速度——CO2吸收量

6.甲状腺激素作用——饲喂法

2.呼吸速度——O2消耗量

7.生长素作用——向光性

3.原子途径——同位素示踪法

8、胰岛素作用—先给小鼠注射胰岛素，再注射葡萄糖4.细胞液浓度大小——质壁分离和复原

溶液5.细胞是否死亡——质壁分离的复原

第三篇：高中生物实验常用的试剂(归纳总结)

生物学中常用的试剂：

1.斐林试剂： 成分：0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法：将斐林试剂甲液和乙液混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。

2.班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。

3.双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。

4.苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。

5.二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。

6.甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。

吡罗红：检测RNA，呈红色 7、50%的酒精溶液：用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。

8、70%的酒精溶液：用于医学临床上的消毒灭菌。9、95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA 10、15%的盐酸：和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。

11.龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色 改良苯酚品红染液：检测染色体，红色

健那绿：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色

12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

14.碘液：用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。遇糖原变红

15.丙酮：用于提取叶绿体中的色素

16.层析液：(成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油)可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。

17.二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。

18.碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。

19、0.3g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合，防凝血

21、氯化钠溶液：①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、0.015mol/L时DNA的溶解度最高，在氯化钠浓度为0.14 mol/L时，DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。

22、胰蛋白酶：①可用来分解蛋白质。②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散于。

23、秋水仙素：人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制正在分裂的细胞纺缍体的形成。

24、氯化钙：增强细菌细胞壁的通透性，可用于基因工程。

25．石磊试剂：检验溶液酸碱性→判断光合速率与呼吸速率快慢的关系；

26、NaHCO3/ Na2CO3

Na２HＰＯ４/ NaH２ＰＯ４：酸碱缓冲对→调节ＰＨ

27．NaCl：配制生理盐水（0.9%）或用于提取DNA（0.14M或2M)28．溴麝香草酚蓝水溶液：检测CO2，由蓝变绿再变黄 常用的实验方法

化学物质的检测方法

1、淀粉————碘液

2、麦芽糖———斐林试剂

3、CO2————Ca(OH)2

4、乳酸————石蕊试剂

5、O2 ————熄灭、复燃

6、蛋白质——双缩脲反应

实验结果的显示方法

1.光合速度——CO2吸收量

2.呼吸速度——O2消耗量

3.原子途径——同位素示踪法

4.细胞液浓度大小——质壁分离和复原

5.细胞是否死亡——质壁分离的复原

6.甲状腺激素作用——饲喂法

7.生长素作用——向光性

8、胰岛素作用—切除、移植胰腺

实验条件的控制方法

1、增加水中氧气——增加水生植物、通O2

2、减少水中氧气——减少水生植物、通N2

3、除去容器中的CO2——NaOH

4、除去叶中原有的淀粉_______暗处理

5、除去叶中叶绿素——脱色处理

6、除去光合对呼吸的干扰——遮光处理

7、如何得到单色光——棱镜折射

8、血液抗凝——加柠檬酸钠

试剂

检验物质

反应颜色 斐林（要加热）

还原糖

砖红色沉淀 双缩尿

蛋白质

紫色 苏丹三/四

脂肪

橘黄/红 碘

淀粉

蓝色 DNA

二苯胺（加热）

蓝色 DNA

甲基绿

绿色 RNA

吡啰红

红色

线粒体

健那绿（唯一的活体染色剂）蓝绿色 染色体

龙胆紫

紫色

染色体

醋酸洋红

红/紫红色 乙醇

重铬酸钾

灰绿色

二氧化碳

溴麝香草酚蓝

由蓝变绿再变黄

第四篇：高中化学实验常用试剂性质总结

高中化学实验常用试剂性质总结

1.甲烷

（1）甲烷通入KMnO4酸性溶液中

实验：把甲烷通入盛有KMnO4酸性溶液的试管里，观察紫色溶液是否有变化？

现象与解释：溶液颜色没有变化。说明甲烷与KMnO4酸性溶液不反应，进一步说明甲烷的性质比较稳定。

（2）甲烷的取代反应

实验：取一个100mL的大量筒，用排饱和食盐水的方法先后收集20mLCH4和80mLCl2，放在光亮的地方（注意：不要放在阳光直射的地方，以免引起爆炸），等待片刻，观察发生的现象。

现象与解释：大约3min后，可观察到量筒壁上出现油状液滴，量筒内饱和食盐水液面上升。说明量筒内的混合气体在光照下发生了化学反应；量筒上出现油状液滴，说明生成了新的油状物质；量筒内液面上升，说明随着反应的进行，量筒内的气压在减小，即气体总体积在减小。

2.乙烯

（1）乙烯的燃烧

实验：点燃纯净的乙烯。观察乙烯燃烧时的现象。

现象与解释：乙烯在空气中燃烧，火焰明亮，并伴有黑烟。乙烯中碳的质量分数较高，燃烧时有黑烟产生。

（2）乙烯使KMnO4酸性溶液褪色

实验：把乙烯通入盛有KMnO4酸性溶液的试管里，观察试管里溶液颜色的变化。

现象与解释：KMnO4酸性溶液的紫色褪去，说明乙烯能被氧化剂KMnO4氧化，它的化学性质比烷烃活泼。

（3）乙烯使溴的四氯化碳溶液褪色 实验：把乙烯通入盛有溴的四氯化碳溶液的试管里，观察试管里溶液颜色的变化。

现象与解释：溴的红棕色褪去，说明乙烯与溴发生了反应。

3.乙炔

（1）点燃纯净的乙炔

实验：点燃纯净的乙炔。观察乙炔燃烧时的现象。

现象与解释：乙炔燃烧时，火焰明亮，并伴有浓烈的黑烟。这是乙炔中碳的质量分数比乙烯还高，碳没有完全燃烧的缘故。

（2）乙炔使KMnO4酸性溶液褪色

实验：把纯净的乙炔通入盛有KMnO4酸性溶液的试管里，观察试管里溶液颜色的变化。

现象与解释：KMnO4酸性溶液的紫色褪去，说明乙炔能与KMnO4酸性溶液反应。

（3）乙炔使溴的四氯化碳溶液褪色

实验：把纯净的乙炔通入盛有盛有溴的四氯化碳溶液的试管里，观察试管里溶液颜色的变化。

现象与解释：溴的红棕色褪去，说明乙炔也能与溴发生加成反应。

4.苯和苯的同系物

实验：苯、甲苯、二甲苯各2mL分别注入3支试管，各加入3滴KMnO4酸性溶液，用力振荡，观察溶液的颜色变化。

现象与解释：苯不能使KMnO4酸性溶液褪去，说明苯分子中不存在碳碳双键或碳碳三键。甲苯、二甲苯能使KMnO4酸性溶液褪去，苯说明甲苯、二甲苯能被KMnO4氧化。

5.卤代烃

（1）溴乙烷的水解反应 实验：取一支试管，滴入10滴～15滴溴乙烷，再加入1mL5%的NaOH溶液，充分振荡、静置，待液体分层后，用滴管小心吸入10滴上层水溶液，移入另一盛有10mL稀硝酸溶液的试管中，然后加入2滴～3滴2%的AgNO3溶液，观察反应现象。

现象与解释：看到反应中有浅黄色沉淀生成，这种沉淀是AgBr，说明溴乙烷水解生成了Br—。

（2）1，2-二氯乙烷的消去反应

实验：在试管里加入2mL1，2-二氯乙烷和5mL10%NaOH的乙醇溶液。再向试管中加入几块碎瓷片。在另一支试管中加入少量溴水。用水浴加热试管里的混合物（注意不要使水沸腾），持续加热一段时间后，把生成的气体通入溴水中，观察有什么现象发生。

现象与解释：生成的气体能使溴水褪色，说明反应生成了不饱和的有机物。

6.乙醇（1）乙醇与金属钠的反应

实验：在大试管里注入2mL左右无水乙醇，再放入2小块新切开的滤纸擦干的金属钠，迅速用一配有导管的单孔塞塞住试管口，用一小试管倒扣在导管上，收集反应中放出的气体并验纯。

现象与解释：乙醇与金属钠反应的速率比水与金属钠反应的速率

慢，说明乙醇比水更难电离出H+。

（2）乙醇的消去反应

实验：在烧瓶中注入20mL酒精与浓硫酸（体积比约为1:3）的混合液，放入几片碎瓷片。加热混合液，使液体的温度迅速升高到170℃。

现象与解释：生成的气体能使溴的四氯化碳溶液褪色，也能使高锰酸钾酸性溶液褪色。

7.苯酚

（1）苯酚与NaOH反应

实验：向一个盛有少量苯酚晶体的试管中加入2mL蒸馏水，振荡试管，有什么现象发生？再逐滴滴入5%的NaOH溶液并振荡试管，观察试管中溶液的变化。

现象与解释：苯酚与水混合，液体呈混浊，说明常温下苯酚的溶解度不大。当加入NaOH溶液后，试管中的液体由混浊变为澄清，这是由于苯酚与NaOH发生了反应生成了易溶于水的苯酚钠。

（2）苯酚钠溶液与CO2的作用

实验：向苯酚与NaOH反应所得的澄清中通入CO2气体，观察溶液的变化。

现象与解释：可以看到，二氧化碳使澄清溶液又变混浊。这是由于苯酚的酸性比碳酸弱，易溶于水的苯酚钠在碳酸的作用下，重新又生成了苯酚。

（3）苯酚与Br2的反应

实验：向盛有少量苯酚稀溶液的试管里滴入过量的浓溴水，观察现象。

现象与解释：可以看到，立即有白色沉淀产生。苯酚与溴在苯环上的取代反应，既不需加热，也不需用催化剂，比溴与苯及其同系物苯环上的取代反应容易得多。这说明受羟基的影响，苯酚中苯环上的H变得更活泼了。

第五篇：高中生物实验方法及试剂总汇

高中生物实验方法及试剂汇总

1．实验方法

实验方法是整个实验设计的精髓，是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下：

(1)化学物质的检测方法：

①淀粉——碘液

②还原糖——斐林试剂、班氏试剂

③CO2——Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂

④乳酸——pH试纸

⑤O2——余烬复燃

⑥无O2——火焰熄灭

⑦蛋白质——双缩脲试剂

⑧染色体——龙胆紫、醋酸洋红溶液

⑨DNA——二苯胺试剂

⑩脂肪——苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液

(2)实验结果的显示方法：

①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量

②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量

③原子途径——放射性同位素示踪法

④细胞液浓度大小——质壁分离

⑤细胞是否死亡——质壁分离

⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量，发育速度等

⑦生长激素作用——生长速度(体重变化，身高变化)

⑧胰岛素作用——动物活动状态

⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度

⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基

(3)实验条件的控制方法：

①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物

②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水

③除去容器中CO2——NaOH溶液

④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境

⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热

⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光

⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光

⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠

⑨线粒体提取——细胞匀浆离心

⑩骨的脱钙——盐酸溶液

⑩灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌，对不同材料,灭菌方法不同：培养基用高压蒸气灭菌；接种环用火焰灼烧灭菌；双手用肥皂洗净，擦干后用75％酒精消毒；整个接种过程都在实验室无菌区进行。

(4)实验中控制温度的方法：

①还原糖鉴定：水浴煮沸加热

②酶促反应：水浴保温

③用酒精溶解叶中的叶绿素：酒精要隔水加热

④DNA的鉴定：水浴煮沸加热

⑤细胞和组织培养以及微生物培养：恒温培养

2．斐林试剂、班氏试剂与尿糖试纸

这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在，在医学上用来检验糖尿病，其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同：

斐林试剂：即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝色混合溶液。分为斐林试剂A和斐林试剂B，A为CuSO4溶液，B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液，使用时将A、B等体积混合即成斐林试剂。

班氏试剂：即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液，又叫本尼迪克特(Benedict)试剂，它与醛反应的结果是与斐林试剂一致的，只是比斐林试剂更稳定，所以在临床化验中更常使用。

尿糖试纸：又叫硫酸铜试纸，呈白色,带蓝色斑点，用于糖尿病患者的尿糖测试。每片含硫酸铜20毫克,枸橼酸300毫克,碳酸钠80毫克，氢氧化钠235毫克。尿糖试纸法快速、方便，试纸的正确使用方法为：将试纸条放在尿液中浸湿，一秒钟后取出，在一分钟内观察试纸的颜色，并与标准色板对照，根据不同的颜色来确定尿糖阳性的程度。

3．斐林试剂和双缩脲试剂的比较

相同点：①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成；

②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0．1g/mLNaOH溶液。不同点：①CuSO4溶液浓度不一样：斐林试剂乙液为0．05g/mLCuSO4溶液，双缩脲试剂B为0．01g/mLCuSO4溶液。

②配制比例不一样。

③使用方法不一样：斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用，双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后，再加入试剂B。

④鉴定的对象不一样：斐林试剂鉴定的是还原糖，双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。

⑤反应本质及颜色反应不一样。

4．苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较

都是用来鉴定脂肪。苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同时要求染色时间更短。

生物学中常用的试剂：

1、斐林试剂： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。

2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。

3、双缩脲试剂：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。

4、苏丹Ⅲ：用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。

5、二苯胺：用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。鉴定DNA的试剂——二苯胺试剂

A液：1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，用棕色瓶保存。B液：乙醛的体积分数为0.2。

配制：将0.1mLB液加到10mLA液中，现配现用。

6、甲基绿：用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。（甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。）

7、苔黑酚——乙醇溶液（用于RNA的鉴定）

溶解6克苔黑酚于是100毫升95%乙醇中，（可在冰箱中保存1个月）

8、50%的酒精溶液：在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。

9、75%的酒精溶液：用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。

10、95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。

11、龙胆紫溶液：(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。

（也可以用醋酸洋红染色：冰醋酸45ML＋55ML蒸馏水＋0.5克洋红

先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸 10分钟，待冷却后，即可使用。）

12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的三氯化铁：用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）

13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

14、碘液：用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。

15、丙酮：用于提取叶绿体中的色素。

16、层析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油）可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。

17、二氧化硅：在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。

18、碳酸钙：研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。

19、0.3g/mL的蔗糖溶液：相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分离实验。20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液：与鸡血混合，防凝血。

21、班氏试剂：

溶85克柠檬酸钠及50克无水碳酸钠于400毫升水中。另溶8.5克硫酸铜于500毫升热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中，边加边搅拌。如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。

22、氯化钠溶液：①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、0.015mol/L时DNA的溶解度最高，在氯化钠浓度为0.14 mol/L时，DNA溶解度最高。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。

23、有丝分裂细胞染液 医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合 配成染色液。

24、有丝分裂细胞解离液

38%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。

24、卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）

酒精：冰醋酸=3：1（体积比）

25、20%肝脏研磨液

1份肝脏4份水。用剪子迅速将肝脏剪碎，先加少量的水研研磨，用剩余的水冲洗。

26、鉴定CO2试剂——澄清石灰水（Ca(OH)2溶液）；酸碱指示剂。

取饱和石灰水澄清过滤，密封备用。