第一篇:【微生物生物学】第10章考点总结微生物的分类
第十章微生物的分类
任务:研究和比较生物界不同类群、层次之间的异同,将整个生物界纳入一个多层次的分类系统中,界定各层次类群的共同属性,以及与同层次的其他类群的区别。
意义:研究生物的系统发育,探索各类生物在演化过程中的亲缘关系,力求按生物系统发育的自然历史,编制生物多层次的分类系统。
自然分类是生物分类的最高境界。
生物鉴定:根据实验获得的结果, 确定研究对象归属于已知的低级类群层次(科、属、种或种以下的水平)或新定的类群之内。
种:一个种是由一群具有高度表型相似的个体组成,并与其它具有相似特征的类群存在明显的差异。DNA同源≥70%,△Tm值≤5℃的种群
亚种:在种内,有些菌株如果在遗传特性上关系密切,而且在表型上存在较小的某些差异,一个种可分为两个或两个以上小的分类单元,称为亚种。是细菌分类中具有正式分类地位的最低等级。
亚种以下的等级:非正式分类等级。具有相同或相似特性的一个菌株或一组菌株,并作为一个分类类群看待。
生物型(biovar)表示具有特殊的生化或生理特性的菌株群 化学型(chemovar)产生特殊化学物质的菌株群 血清型(serovar)具有特殊抗原特征的菌株群 噬菌型(phagovar)对噬菌体特异反应的菌株群
致病型(pathovar)对一种或多种寄主具有致病性的菌株群
菌株:从自然界分离纯化所得到的纯培养的后代,经过鉴定,归属于某个种。常用个人姓名、地点或编号表示。
分离物:只经分离而未经鉴定的纯培养物。
三、双名法和命名法则 种名:属名+种名加词
尚未鉴定到种: 属名+ sp.(spp.)新发表种: 种名后+ nov.sp(novel species)亚种: 种名和亚种名之间+ subsp.(subspecies)
一、传统分类法
以形态特征和生理生化特征为依据,即:个体形态(形状、大小、颜色、特殊结构等),细胞化学组分,生态条件,血清学反应,对噬菌体和药物的敏感性等。
二、化学分类法
用化学物理技术来研究微生物细胞的化学组成三、数值分类法
细菌数值分类的支持技术:
* 计算机技术 * 多点接种技术
* 传统分类的实验方法 1.定义: 用统计学方法根据大量表型性状将有机体分群。
2.主要原理:1)最大限度地包容信息,即: 对所有的供试个体做所有可能的实验;
2)数据的收集与分析应是客观和公正的,结果应以专家的经验为基础,每项实验结果都给以同等重视,具有相同的权重; 3)依据表型分析结果得出的相似性来确定表观群。
3.运筹分类单位(OUT):用于分类研究的个体,在细菌分类中指菌株。4.表观群:建立在表观相似性基础上的类群(数值分类得到的类群)
工作步骤:收集数据;数据编码;计算机分析;解释结果;表观群描述
• 相似性计算:相似性系数是用来描述被比较的OTUs 间相似程度的量值(相似系数和相异系数)• 系统聚类:按相似性系数或相异性系数的大小逐次将试验菌株(OTU)归群。数值分类方法小结:
是现代细菌分类的一种基本方法,适合于大量未知菌株的初步分类归群,可获得大量表型特征信息;
测定项目的筛选和实验需标准化(各类菌株尚无统一标准); 实验方法的可靠性,尽量避免人为(操作和观察)误差;
表观群的确切分类地位还需依据 DNA-DNA杂交分析和16s rDNA同源性分析来确定
四、遗传学分类法
(G+C)mol% 的测定*
DNA-DNA 杂交*
DNA-rRNA杂交
16s rDNA序列* 1.DNA 碱基组成:每个有机体DNA的(G+C)mol % 均有较稳定数值 1)DNA 碱基组成在细菌分类中的作用 ①是描述种、属的必需特征 ②有助于界定细菌种、属
③可作为判定细菌科属间亲缘关系参考标准 2)常用测定(G+C)mol % 的方法
热变性法*;纸层析法;高效液相色谱法;浮力密度法 GC含量高,Tm值也高 2.DNA杂交
1)原理:变性DNA在溶液中复性(杂交)时,同源DNA 的复性速率比异源DNA快。同源性愈高,复性速率愈快。2)杂交率的计算
计算复性速率(分别计算)零时吸光值(A0)减去30 min 的吸值(At),除以总时间(t = 30min),得出直线斜率,即DNA复性速率(V)
V=(A0-At)/ △ t = △ A / △ t A0:
零时260nm吸光值
At :
t 时260nm吸光值△ t: 从零时到t 时的时间间隔 3)DNA-DNA杂交的作用
* 明确界定细菌种;
* 可对新种、或表型性状差别很小而难于肯定的菌株作出可靠判断 * 修正其他方法的分类和鉴定错误。
3.16S rDNA序列分析
1)原理:16S rDNA的核苷酸序列高度保守,这些碱基顺序在进化过程中变化很慢,它们能够较精确地指示细菌之间的亲缘关系。
保守性:
功能保守,核糖体组分,参与蛋白质合成 碱基组成保守,50%(G+C)左右 一级结构保守,16S rRNA变化不大
高级结构保守,原核生物rRNA空间构型一致(核糖体蛋白结合位点处的二级结构相同)
rDNA序列分析作用:
• Woese根据几百个细菌的16S rDNA序列分析,提出总生物进化树; • 为第三生命(古菌)分类地位确立了有力证据;
• 从系统进化的角度统一了细胞生物分类,使动物、植物和微生物分类有了共同的基础。
第十章小结
1.微生物分类学是研究微生物分类理论和方法的学科,包括鉴定、命名和分类。
2.传统分类法、化学分类法、数值分类法和遗传学分类法等多相分类方法互相补充。自然分类是人们追求的最高境界。
3.数值分类的工作步骤是:收集数据,数据编码,计算机分析,解释结果,表观群描述。4.通常可采用热变性法测定细菌的碱基组成,采用液相复性速率法测定细胞间DNA同源性。
5.细菌16 S rDNA和真菌18 S rDNA核苷酸序列高度保守,能够较明确地指示细菌或真菌之间的亲缘关系。
6.利用脉冲电泳的方法,可以分析真核生物基因组的核型。
7.目前细菌分类权威参考书是伯杰细菌鉴定手册(伯杰系统细菌学手册),而真菌则主要以真菌字典(第八版,1995)和真菌概论(第四版,1996;第五版,2004)为主要参考书。
第二篇:山大微生物生物学总结.JSh
一、绪论
1990年,美国Carl R.Woese等对生物界进行了16S.rRNA和18S.rRNA的寡核苷酸测序,提出三域分类系统,即细菌、古生域和真核生物域。(Bacteria, Archaea, Eukarya)微生物的特点:
个体小,比表面积大;吸收多,转化快;生长旺盛,繁殖快;适应强,易变异;种类多,分布广
列文虎克用自制的单式显微镜观察河水、雨水、牙垢等中的生物,进行了记录和描述。巴斯德根据曲颈瓶试验否认了自然发生学说,认为微生物来自空气。
二、原核微生物
原核微生物主要有,细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体 1.细菌
形态有,球菌、杆菌、螺旋菌
基本结构有,细胞壁、细胞膜、核体、细胞质和内含物 特殊结构由,荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢、伴孢晶体 &&细胞壁
革兰氏染色:结晶紫初染、碘液媒染、乙醇脱色、蕃红复染
革兰氏阳性菌:呈深紫色,如金黄色葡萄球、链球菌。细胞壁由厚的肽聚糖和磷壁酸组成。肽是四肽侧链和五肽交联桥,D型氨基酸出现,青霉素、环丝氨酸可以抑制氨基酸单体的聚合。聚糖是NAM, NAG,由beta-1,4-glycoside 键连接,容易被溶菌酶水解。
革兰氏阴性菌:呈红色,如大肠杆菌。由薄的肽聚糖,脂多糖LPS,磷脂,脂蛋白等构成。LPS是外膜的主要成分,L是类脂A,P是核心多糖,S是O-特异侧链。L有内毒素的特性,S有抗原的特性。G-外膜上有水孔蛋白porin,lipoprotein连接着外膜和肽聚糖层。G-肽聚糖层没有五肽交联桥,四肽侧链第三个氨基酸是meso-diaminpimelic acid, DAP。
缺壁细菌:L菌,G+经溶菌酶或青霉素处理得到的原生质体,G-经溶菌酶处理得到的原生质球。
G染色的机制?要点是肽聚糖的厚度,LPS的脂溶性。&&间体,mesosome,细胞膜内陷形成的囊泡、囊管结构。&&内含物
50S + 30S 组成的70S细菌核糖体 PHB,PHA,聚羟基烷酸 异染颗粒,多聚磷酸盐颗粒
硫粒、磁小体、羧酶体、气囊壁完全由蛋白质组成的气泡 ***特殊结构
荚膜、微荚膜、粘液层、菌胶团,可从中提取葡聚糖,多糖。鞭毛的结构有L,P,S,M环状结构。赋予细菌运动特性以及驱性。菌毛短赋予细菌粘附特性。
性毛赋予细菌DNA物质接合特性。
芽孢由内部结构和胞外结构组成,胞外结构属于内部孢体的特殊结构。胞外结构由孢外壁,芽孢衣,皮层组成。孢体结构有芽孢壁,芽孢膜,芽孢质,芽孢核区。皮层中渗透压大,皮层吸水膨胀,孢体失水活性降低,芽孢质内的DPA,吡啶二羧酸钙盐稳定大分子。
人工芽孢萌发采用破坏胞外结构的方法。伴孢晶体,碱溶性蛋白晶体,是一种内毒素。
&&细菌主要以裂殖方式繁殖。注意形成芽孢并不是繁殖的一种方式。2.古生菌 3.放线菌
结构基内菌丝,气生菌丝,孢子丝。是抗生素的来源。4.蓝细菌
水华、G-、异形胞和静息孢子
5.支原体 无细胞壁可独立生存的最小细胞生物 6.衣原体 “大形病毒”,G-
三、真核微生物
1.酵母菌 单细胞真菌
细胞壁有三层,甘露聚糖,蛋白质,葡聚糖
细胞膜中有麦角淄醇
酵母菌中的假菌丝。
无性繁殖,芽殖、裂殖、无性孢子,如掷孢子,节孢子,厚垣孢子
有性繁殖,形成子囊孢子,如八孢子子囊,在发酵工业上常用二倍体酵母进行生产。
2.霉菌 丝状真菌
在营养基质表面形成绒毛状、棉絮状、蜘蛛网状的菌体又不产生大型肉质子实体结构的真菌。用于生产酶制剂,提取有机酸,生产青霉素。霉菌为菌丝体由菌丝组成。
菌丝又将霉菌可分为低等真菌和高等真菌。根霉,毛霉属菌丝结构,且细胞呈多核结构,细胞间无隔,及为低等真菌。有些菌丝真菌细胞不是多核结构,细胞间有隔,为高等真菌。
菌丝体由营养菌丝体,气生菌丝体。&&常见霉菌 1.根霉
低等霉菌,营养菌丝体称为假根,营养菌丝体在基质表面上分出匍匐枝。顶端气生菌丝特化产生球形孢子囊且有囊托。根霉的淀粉酶活性强。2.毛霉
低等霉菌,无假根和匍匐枝,无囊托。可提取淀粉酶和蛋白酶。3.曲霉
高等霉菌。特化的气生菌丝体顶端是足细胞,顶囊表面又辐射出小梗,小梗产生分生孢子。4.青霉
高等霉菌。无足细胞,顶囊不膨大,分生孢子成扫帚状。可从中提取有机酸,青霉素,维生素。
3.伞菌
蘑菇,能形成大型子实体
伞菌、木耳、灵芝、马勃。三级菌丝上特化出担孢子。
5.藻类 6.原生动物
鞭毛为9+2型
四病毒和亚病毒
1.病毒粒子的对称性
立体对称、螺旋对称、复合对称 2.繁殖
吸附,侵入,脱壳,合成,装配,释放 3.噬菌体 phage 微生物病毒。E.coli T4系,复合对称。有烈性和温和两种。4.亚病毒
类病毒,拟病毒,蛋白质病毒
五、微生物营养
1.碳源,氮源,生长因子,无机盐,水,能源
2.营养类型
光能无机自养,光能有机自养,化能无机自养,化能有机异养
3.吸收方式
扩散,主动运输,膜泡运输
5.营养基
天然培养基,合成,半合成;固体,半固体,液体;基础,加富,鉴别,选择。
六、微生物特殊代谢
&&固氮作用
根瘤菌、弗兰克氏菌、鱼腥草;藻类,固氮菌
&&肽聚糖的合成
七、微生物的生长
1.生长曲线:
延滞期,对数期,稳定期,衰亡期
2.纯培养的方法
固体培养基:平板划线,稀释倒平板,涂布平板
液体培养基:大的细菌,原生动物和藻类用稀释法。
单孢子分离法
3.菌种保藏
蒸馏水悬浮法,斜面传代培养,矿物油浸没保藏,冷冻保藏,寄主保藏。
八、微生物生态
&&土壤微生物类群,细菌,放线菌,真菌,(藻类,病原微生物)
&&微生物与微生物之间的关系
互生:可单独生活,共同生活时总的利益更大。如自身固氮菌和纤维素分解菌。
共生:互相提供必要的生活条件,如地衣,真菌和蓝细菌共生;菌藻,真菌和藻类共生。
寄生:一种微生物生活在异种生物体表或体内,对异种生物不利
拮抗:一种微生物代谢产物对环境中的异种微生物的生长不利
竞争:微环境中的微生物为了同一种资源最终的结果对彼此都不利。
捕食:主要和原生动物有关。
&&微生物和植物之间的关系
共生:菌根菌(真菌)和植物形成的菌根结构,根瘤菌和豆科植物
&&氮循环
固氮作用,有关系的为共生固氮,联合固氮,内生固氮
硝化作用:氨变成硝酸
反硝化作用:硝酸盐变成氮和氧化二氮
&&硫循环
分解作用,同化作用,硫化作用,反硫化作用(H2S)附:习题简解
真核微生物细胞质核糖体的沉降系数:80S;质体的为70S 杆菌的显微镜表示方法:宽 X 长,如E.coli0.5um X 2.0 um 对数生长期生长速率(一次导)高适合做遗传、代谢研究 葡聚糖和甘露聚糖是酵母细胞壁的主要成分 温和噬菌体和烈性噬菌体
食用菌菌丝分类有营养菌丝和生殖菌丝 细菌C:N 大概是6 加富培养基就是一种营养的浓度特别高 几丁质是霉菌细胞壁的主要成分
土壤中微生物丰度为:细菌>放线菌>真菌
拮抗关系在微生物中更常见,而竞争关系这个名词不常用 干热灭菌的一个适宜条件是 160度,2h 根毛有匍匐菌丝
病毒的繁殖方式叫增殖 放线菌在微碱性条件下生长 酵母菌的只要繁殖方式是芽殖 T4噬菌体的对称方式属复合对称 霉菌的无性孢子有粉孢子
半固体琼粉质量分数是0.2~0.7% 霉菌适合在微酸性pH下生长
微生物的五大特性:小,简单;多样性;繁殖快;变异快;易培养 根霉:有假根、匍匐菌丝,有囊托无囊领,分解淀粉和蛋白质 毛霉:无假根、匍匐菌丝,无囊托有囊领,…
湿热灭菌温度和时间都比干热灭菌的小。湿热灭菌高温的水蒸气遇菌体瞬间放出大量的热,菌体灭活快。
微生物的硫代谢:1.分解含硫蛋白质 2.无机硫,单质硫的氧化 3.硫酸盐的氧化 菌根的类型?
菌膜是好氧微生物繁殖的现象 干燥是指微生物含水量30% 弗兰克氏菌和木本植物发生共生固氮关系 青霉和曲霉的区别有顶端膨大成为顶囊
生长素类似物有:氨基酸,维生素,嘌呤碱基 病毒特征? 细菌生长曲线?
有效根瘤:主根和第一侧根上,数量少个体大,内部有红色 N循环?
霉菌的基本形态是分支丝状体 担孢子属于霉菌有性孢子
土壤中固氮菌和纤维素分解菌之间是互生关系 细菌主要繁殖方式是裂殖
大肠杆菌是革兰氏阴性菌,呈红色 孢囊孢子里是无性孢子
细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖和磷壁酸 大型真菌有锁状联合 诺卡氏菌属产抗生素 比较青霉和根霉的异同
第三篇:微生物总结 大学生物学
一、名词 1菌落:是在固体培养基上(内)以母细胞为中心的一堆内眼可见的,有一定形态、构造等物征的细胞集团。
2芽孢:某些细菌在其生长发育的后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠结构,称为芽孢,又称内生孢子。3裂殖:一个细胞经过分裂形成两个子细胞的过程。二分裂、三分裂和复分裂。
4芽殖:指在母细胞表面先形成一个小突起,待长到与母细胞相仿再相互分离并独立生活的一种生活方式。
5放线菌:一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物。或一类主要呈丝状生长和以孢子繁殖的革兰氏阳性细菌。
6糖被:位于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。
7鞭毛:生长在某些细菌表面的波浪弯曲的丝状物,称为鞭毛,是细菌的运动器官.8菌毛:一些比鞭毛更细、较短、直硬、数量也较多的细丝,称为菌毛。
9温和噬菌体:噬菌体感染细胞后,将其核酸整合到宿主的核DNA上,并且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制,在一般情况下,不引起寄主细胞裂解的噬菌体。称之为温和噬菌体。
10溶源菌:是一类能与温和噬菌体长期共存,一般不会出现有害影响的宿主细胞。11 溶源性:温和噬菌体的侵入并不引起宿主细胞裂解,此即称溶源性或溶源现象 12生长因子:调节微生物生长所必须、需要量很小、一般不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物,称为生长因子。
13选择性培养基: 根据某种或某一类微生物的特殊营养需要或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。
14自养微生物: 以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源,以无机物氧化释放的化学能为能源,利用电子供体如氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等使CO2还原成细胞物质。
15异养微生物:多数微生物属于化能异养型,其生长所需要能量和碳源通常来自同一种有机物。16生长限制因子: 对于较低浓度范围内可影响生长速率和菌体产量的营养物。
17灭菌 :采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施,称为灭菌。杀菌(菌体虽死,但形体尚存)溶菌(菌体杀死后,其细胞发生溶化、消失的现象)
18消毒:采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌,而对被处理物体基本无害的措施,称为消毒。
19防腐 :利用理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖,从而达到防止物品发生霉腐的措施,称为防腐。
20化疗 :即化学治疗。利用具有高度选择毒力的化学物质抑制宿主体内病源微生物的生长繁殖,以达到治疗该传染病的一种措施。21野生型:从自然界分离到的任何微生物在其发生突变前的原始菌株。
22营养缺陷型:野生型菌株经诱变剂处理后,由于丧失了某酶合成能力的突变,因此只能在外加该酶合成产物的培养基中才能生长。
23基本培养基(MM)[-]:凡是能满足野生型菌株营养要求的最低成分的合成培养基。
24完全培养基(CM)[+]:满足一切营养缺陷型菌株生长的天然或半合成培养基。
25补充培养基(SM)[x]:在MM中有针对性地加入一或几种营养成分以满足相应营养缺陷型菌株生长的合成培养基。26限量补充培养法:把诱变处理后的细胞接种在含有微量(小于0.01%)蛋白胨的基本培养基平板上,野生型细胞就迅速长成较大的菌落,而营养缺陷型则因营养受限制故生长缓慢,只形成微小菌落。若想获得某一特定营养缺陷型的突变株,只要在基本培养基上加入微量的相应物质就可达到。
27转化:受体菌直接吸收来自供体菌的游离DNA片段,并把它整合到自己的基因组中,而获得部分新的遗传性状的基因转移过程,称为转化
28转导:借助缺陷噬菌体为媒介,把供体细胞中DNA片段携带到受体细胞中,从而使后者获得前者部分遗传性状的现象,称转导。
29缺陷噬菌体:具有噬菌体的正常形态,但不能引起寄主细胞裂解性感染的一类温和噬菌体的突变体 30F因子:又称F质粒、致育因子或性因子,是E.coli等细菌决定性别并有转移能力的质粒。
31BOD5:即五日生化需氧量。一般指在20℃下,1L污水中所含的有机物在进行微生物氧化时,5日内所消耗的分子氧的毫克数。
32COD:即化学需氧量。用强氧化剂使1L污水中器、分生孢子座和分生孢子盘三种。的有机物质迅速进行化学氧化时所消耗氧的毫克
5、酵母菌细菌中DNA数。存在于线粒体、2um质粒和线状质粒。33硝化作用:氨态氮经硝化细菌的氧化,转变为硝
6、现代微生物学实验室培养厌氧菌的“三大件”酸态氮的过程。技术是指:厌氧罐技术、厌氧手套箱技术和亨34反硝化作用:又称脱氮作用,指硝酸盐转化为气盖特滚管技术。态氮化物(N2和N2O)的作用。
7、微生物细胞吸收营养物质时,不需载体参与方35抗毒素:将类毒素注射机体后,可使机体产生相式为:单纯扩散。消耗能量的是:主动运输和对应外毒素具有免疫性的抗体,称抗毒素 基团移位。36补体:是存在于正常人体或动物血清中的一组非
8、对玻璃器皿进行干热菌时,温度为:特异性血清蛋白,主要是β球蛋白。具有补充抗体作用的功能,因此称为补体。
9、37种:微生物的种是一个基本分类单位,它是一大成熟(装配)、裂解(释放)五步。群表型特征高度相似、亲缘关系极其接近、与同属
10、评价化学杀菌剂或治疗剂的药效和毒性内其他种有明显差异的一大群菌株的总称。关系时,三个指标是: 38学名:是某一菌种按“国际命名法规”进行命名并最低抑制浓度、半致死剂量、最低致死剂量。受国际学术界公认的通用正式名称。便于交流、避
11、细胞壁分内外两层,外层称为外膜,成分免混淆,有一个统一的命名法则,为大家公认的科为:脂多糖、磷脂、和若干种外膜蛋白。学用名。1239一步生长曲线:定量描述烈性噬菌体生长规律的染、脱色和复染。最关键的是:脱色 实验曲线,称作一步生长曲线或一级生长曲线。
13、病毒三种对称机制:螺旋对称、二十面体对称、40抗生素:是一类由微生物在其他生命活动过程中复合对称。
合成的次生代谢产物或人工衍生物,它们在很低浓14 度时就能抑制或干扰它种生物的生命活动,因而可做优良的化学治疗剂。1641: 评定某化学药物药效强弱的指营养态。标,指在一定条件下,某化学药剂抑制特定微生物17的最低浓度。支原体。42 评定某药物毒性强弱的指标,指18在一定条件下,某化学药物能杀死50%试验动物时转化快;生长旺、繁殖快;适应强、易变异;分布的剂量。广,种类多4319标,指在一定条件下,某化学药物能引起试验动物行芽殖 群体100%死亡率的最低剂量。2044细菌:是一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、适宜、经济节约。多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。21集团移位、典型生长曲线、纯培养物、热死温度。
一、填空
22、细菌的鞭毛三部分结构为:基体、钩形鞘和鞭
1、毛丝。
外还有少数的丝状和三角形。23 2、243、25、G+前者
壁酸;革兰氏阴性菌。的双糖单位是由一个N-乙酰葡萄糖胺通过β-1,44、糖苷键与另一个N-乙酰胞壁酸相连构成,这一双糖
单位易被溶菌酶水解,而导致细菌细胞壁“散架”而死亡。
26生、共生、寄生、拮抗、捕食。
27胞和B细胞。
28、胞质和核区等。
29、酵母细菌细胞壁结构呈“三明治”结构主要指:甘露聚糖(外层)、蛋白质(中层)、葡聚糖(内层)三种成分。
30、真菌、细菌和病毒的直径比例为:31以维生素为主;高等真菌细胞壁以几丁质 为主。32名。
33、LPS糖、O-特异侧链。
A抗菌谱B抗菌活性C耐药性D抗菌机制
8、常用高压灭菌的温度是(A)A.121℃B.200℃C.63℃D.100℃ 9、对生活的微生物进行计数的准确方法是(D)
A比浊法B显微镜直接计数C干细胞重量测定D平板菌落计数
10、下列属于生长因子的是(D)A葡萄糖B蛋白胨C NaClD维生素
11、霉菌产生的孢囊孢子属于(C)A 有性孢子B结合孢子C 无性孢子D厚垣孢子
12、专性厌氧微生物是由于其细胞缺少(D),从而不能解除分子氧对细胞的毒害。A.BODB.CODC.NODD.SOD
13、不属于细菌的特殊结构的是(C)A 荚膜B芽孢C 汽泡D鞭毛
四、判断×√
1、霉菌产生孢囊孢子属于有性孢子。(X)
2、麦芽汁培养基是一种适合培养酵母的天然培养
三、选择
1、下列不属于霉菌复杂的有性子实体(D)基。(√)A闭囊壳B子囊壳C子囊盘D孢子囊
3、放线菌和酵母菌的结构相同。(X)2.酵母菌细胞的大小(A)
4、螺菌是螺旋状菌的一类,叫螺旋体。(X)A2.5-10到4.5-21umB1.5-2到0.5-1um5、氨基酸自养型微生物生长过程中不需要外界提C1.5-2到0.5-1nmD2.5-10到4.5-21nm 供有机氮源。(X)
3、供体菌与受体菌通过缺陷噬菌体效价的媒介,6、溶源菌细胞中的病毒DNA是有游离态的。从供体菌传递部分染色体至受体细胞的现象称为(X)(B)
7、肽聚糖的4肽尾的连在N-乙酰胞壁酸分子上的。A转化B转导C接合D转染(X)
4、使用高压锅灭菌打开排气阀的目的(D)
8、放线菌是一类陆生性较强的原核微生物,孢子A防止高压锅内压力过高,是培养基成分受到破坏不长鞭毛。(×)B排尽锅内有害气体
9、支原体对抑制剂细胞壁合成的抗生素敏感。C防止高压锅内压力过高,造成灭菌过爆炸(×)D排尽锅内冷空气
10、厌氧菌需要生活在氧化还原是较低的环境中。
5、适合所有微生物特殊特征(C)(√)A它们是多细胞的B细胞有明显的核
11、真核微生物细胞膜上都含甾醇。(√)C只能用显微镜才能观察到
12、细菌和放线菌为单细胞生物,霉菌为多细胞生D可进行光合作用 物。(×)
6、粘质沙雷氏菌:在25摄氏度,产生深红色的灵
13、在适合温度下,微生物繁殖较快,因此生产单杆菌素;在37摄氏度培养下,不产生色素,如温细胞蛋白的发酵温度应选择最适生长温度。度降到25摄氏度,又恢复产色素的能力,叫(×)(C)
14、鞭毛和纤毛都是运动器官。(√)A遗传型B表型C 饰变D 突变
15、古细菌细胞壁含假聚糖。(√)
7、药物的抗菌范围称(A)
16、固体培养基在配置时不需加入水分。(×)
17、GC含量越近,则微生物亲缘关系越近。答:营养菌丝:密布在固体营养基质内部,主要执(X)行吸取营养功能的菌丝体而伸展到空间的菌丝体。
18、烟草花叶病毒是十面体对称。营养菌丝特化结构:假根、匍匐菌丝、吸器、附着(X)胞、附着枝、菌核、菌索、菌环和菌网;气生菌丝
19、当E.coil的F+与F_发生结合时,F因子由供体特化结构:简单子实体:分生孢头(青霉、曲霉)、菌进入受体菌,从而使F+变成了F-,而使F-变成孢子囊(根霉、毛霉); 复杂子实体:分生孢子器、了F+。(X)分生孢子座和分生孢子盘。20、卫生部规定,细菌总数不超过100个,每1L3、什么是微生物典型生长曲线?简述各时期特点。自来水中大肠杆菌不超过3个。(X)答:定量描述液体培养基中无分枝单细胞微生物群
21、在筛选营养缺陷型时,在完全培养基中加入青体生长规律的实验曲线,称为生长曲线。以细胞数霉素,可有效杀死大量生长繁殖的野生型,从而达目的对数值作纵坐标,以培养时间作横坐标,就可到浓缩营养缺陷型的目地。(X)画出一条由延滞期、指数期、稳定期和衰亡期4个
22、细菌的类毒素经0.3—0.4%的甲醇处理后,可阶段组成的曲线,这就是微生物的典型生长曲线。成为治疗用的抗毒素。(X)①延滞期特点:生长速率常数 R=0;(每小时分裂
23、半抗原是一类只有免疫反应性而没有免疫原性次数R); 细胞形态变大或增长; 细胞内RNA物质,当他与适应蛋白载体结合后,也可组成一个(rRNA)含量增高;合成代谢活跃:核糖体、酶类、完全抗原。()ATP; 对外界不良条件反应敏感。
24、碳源对配置任何微生物的培养基都必不可少。②指数期——细胞以几何级数速度分裂的一段时(X)期
25、用低m.o.i的高频转导裂解物去感染受体菌,特点:生长速率常数R最大,分裂时间最短;细胞可获得大量高频转到子。(√)平衡生长,菌体内各成分均匀;酶系活跃、代谢旺
26、“大肠埃希氏菌”才俗称“大肠杆菌”的学名。盛;对理化因素敏感。菌体量X2=X1· 2 n(√)③稳定期特点:生长速率常数R=0,即新繁殖的细
27、一个病毒的毒粒既含DNA又含RNA。(X)胞数与衰亡相等,这时菌体产量达到了最高点;细胞
28、在最适生长温度下,微生物生长繁殖速度最快,开始贮存各种储藏物:异染颗粒等;芽孢,次级代因此生产单细胞蛋白的发酵温度因选择最适生长谢产物开始合成。温度。(X)④衰亡期:死亡数>新生数;群体中活菌数目急剧
29、主动运输是广泛存在微生物中的一种主要物质下降;细胞出现多态、畸形、芽孢释放,R<0;运输方式。(√)衰亡期比其它各期时间更长(菌种及环境条件); 30、细菌分离繁殖一代所需的时间为倍增时间。
4、什么是效价?简述测定噬菌体效价的双层平法。(X)答:效价(噬菌斑形成单位数或感染中心数.):表
31、病毒大小用微米表示,不通光学显微镜看不到。示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子(X)数。双层平板法:
32、放线菌孢子和细菌的芽孢都是繁殖体。(X)1)、操作步骤:预先分别配制含2%和1%琼脂的底
33、固体培养基配置时不需加水。(X)层培养基和上层培养基。先用底层培养基在培养皿
上浇一层平板,待凝固后,再把预先融化并冷却到
四、问答
1、微生物五大共性是什么?基本是那个?为什45°以下,加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬么? 菌体样品的上层培养基,在试管中摇匀后,立即倒答:体积小、面积大(因为一个小体积大面积系统,在底层培养基上铺平待凝,然后再37°C下保温。必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排一般经10h后即可对嗜菌斑计数。泄面和环境信息的交换面);吸收多、转化快;生2)长旺、繁殖快;适应强、易变异;分布广,种类多 ① 加底层培养基,可弥补玻璃皿不平的缺陷;②
2、霉菌的营养菌丝和气生菌丝有何特点?它们分所形成全部噬菌体斑都接近于同一平面上,噬菌斑别可以特化出那些特化结构? 的大小接近、边缘清晰,而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象;③ 上层培养基中琼脂较稀,故形成的噬菌斑较大,更有利于计数。
5、简述G+与G-在细胞壁结构和化学组分上异同点
答:G+细菌细胞壁特点厚度大,化学成分简单,一般含90%肽聚糖和10%磷壁酸。三维立体结构。
G-细菌细胞壁特点厚度较G+细菌薄,层次较多,成分较复杂,肽聚糖很薄,机械强度比G+细菌低。二维平面结构。
6.微生物产生抗药性原因? 答:(1)产生一种能使药物失去活性的酶;(2)把药物作用的靶位加以修饰或改变;(3)形成“救护途径”;(4)使药物不能透过细胞膜;(5)通过主动外排系统把进入细胞内的药物泵出细胞;
机理:作为菌细胞基本生长因子的竞争性抑制剂,因此只有当正常代谢产物的量少或不存在时,抗代谢物才有用。
7、营养物质进入细胞膜4种方式,各有什么特点? 答:
一、单纯扩散——指疏水性双分子层细胞膜(包括孔蛋白在内)在无载体蛋白参与下,单纯依物理扩散方式让许多小分子、非电离分子尤其是亲水性分子被动通过的一种运输方式。(O2、CO2、乙醇等)
特点:高浓度—>低浓度;无特异载体、运送速度慢;运送动力是膜内外浓度差;运送终点是膜内外浓度相等;运送前后溶质分子的结构不变。
二、促进扩散——指溶质在运送过程中,必须借助存在于细胞膜上的底物特异载体蛋白的协助,但不消耗能量的一类扩散性运输方式。
载体蛋白:诱导产生,借助自身构象的变化,加速把膜外高浓度的溶质扩散到膜内,直至膜内外该溶质浓度相等。
运送物质:氨基酸、维生素等
特点:高浓度——>低浓度;有特异载体、运送速度快;运送动力是膜内外浓度差;运送终点是内外浓度相等;运送前后溶质分子的结构不变
三、主动运送——指一类必须提供能量(包括ATP、质子动势或“离子泵”等)并通过细胞膜上特异性蛋白质构象的变化,而使膜外环境中低浓度的溶质运入膜内的一种运输方式。
运送物质:无机离子、有机离子等
度快;运送动力是消耗能量ATP 运送终点:内部运送前后溶质分子:结构不变。
四.基团移位——指一类既需要特异性载体蛋白的参与,又需要耗能的一种物质运输运送方式,其特点是溶质在运送前后还会发生分子结构的变化,因此不同于一般的主动运输。(各种糖类、核苷酸等)特点:低浓度——>高浓度;有特异载体、运送速度快;运送动力是消耗能量ATP;运送终点是内浓
8、简述利用核酸在微生物分类鉴定的应用?
9、什么是鉴别培养基,并以EMB为例分析其鉴别作用的原理?
答:鉴别性培养基:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目地菌菌落的培养基。
用途—饮用水、牛奶中的大肠菌群的细菌学检验 机制:伊红美蓝+苯胺染料,抑制G+菌;低酸下--两种染料结合;大肠杆菌分解乳糖产酸;菌落深紫色、菌落表面有绿色金属光泽
10、为什么说土壤是人类最丰富的“菌种资源库”?如何从中筛选所需菌种?
答:由于土壤具备了各种微生物生长发育所需的营养,水分、空气、酸碱度、渗透压和温度等条件。所以成了微生物生活的良好环境,可以说土壤是微生物的天然培养基,也是它们的大本营,对人类来说,是最丰富的菌种资源库。
土壤中含有大量的有机质,矿物质,水分;含有一定的空隙;土壤具有保温性;土壤的pH值一般为5.5-8.5之间
11、简述放线菌的繁殖方式? 答:
12、酵母菌的生活史有哪几种,以酿酒酵母为例说一下其生活史特点?
答:答:生活史即整个生命周期:上代个体经一系列生长、发育阶段而产生下一代个体的全部历程,就称为该生物的生活史或生命周期。各种酵母的生活史可分为三种类型:1.单倍体型2.双倍体型3.单双倍体型
单双倍体型——酿酒酵母。生活史的特点①一般以营养体状态出芽繁殖;②营养体既可以单倍体形式存在也可以二倍体形式存在;③在特定的条件下进行有性繁殖(如在含醋酸钠的情况下)。
单倍体型——八孢裂殖酵母。特点:① 营养细胞为单倍体;② 二倍体营养细胞不能独立生活,此
阶段很短;③ 无性繁殖为裂殖。
双倍体型——路德氏酵母。特点:①营养体为二倍体,此阶段较长,不断进行芽殖;②单倍体的子囊孢子在子囊内进行结合;③单倍体阶段仅以子囊孢子形式存在,故不能进行独立生活。
13、以链霉菌为例图示放线菌的形态结构。
14、革兰氏染色的步骤及原理
革兰氏染色的步骤:新鲜纯培养--无菌涂片--固定--染色先用草酸胺结晶紫液初染:1min再用碘液进行媒染:1min继而用95%乙醇脱色;30s最后用蕃红(沙黄)复染:1min
革兰氏染色的机理:与细菌细胞壁的化学组成及结构有关,G+和G-间的区别在细胞壁的物理性质。肽聚糖本身不被染色,渗透性屏障
15、利用微生物实验证明核酸是遗传物质的三个经典转化实验。
(一)经典转化实验:
⑴动物实验⑵细菌培养实验⑶S型菌的无细胞抽提液实验
以上实验说明:加热杀死的S型细菌细胞内可能存在一种转化物质,它能通过某种方式进入R型细胞并使R型细胞获得稳定的遗传性状,转变为S型细胞,S型菌株转移给R型菌株的不是遗传性状本身,而是以DNA为物质基础的遗传信息。
(二)噬菌体感染实验
在噬菌体侵染过程中,其蛋白质外壳根本未进入宿主细胞。进入宿主细胞的虽只有DNA,但却有自身的增殖、装配能力,最终会产生一大群有DNA核心、又有蛋白质外壳的完整的子代噬菌体粒。这就有力的证明,在其DNA中,存在着包括合成蛋白质外壳在内的整套遗传信息。
(三)植物病毒的重建实验
当用由TMV-RNA与HRV-衣壳重建后的杂合病毒去感染烟草时,烟草上出现的是典型的TMV病斑。再从中那个分离出来的新病毒也是未带任何HRV痕迹的典型TMV病毒。反之,用HRV-RNA与TMV-衣壳进行重建时,也可获相同的结论。这就充分证明,在RNA病毒中,遗传的物质基础也是核酸。通过这三个经典实验,只有核酸才是负载遗传信息的真正物质基础。
16、芽孢:某些细菌在其生长发育的后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠结构,称为芽孢,又称内生孢子。由于每一个营养细胞仅形成一个芽孢,故芽孢不是繁殖
体。
芽孢研究意义:1)细菌分类、鉴定中的重要形态学指标2)提高芽孢产生菌的筛选效率3)芽孢菌的长期保藏4)各种消毒灭菌手段的最重要的指标
五、论述题
营养缺陷型菌株筛选的主要步骤和方法 答:①诱变处理;
② 淘汰野生型【抗生素法(包括青霉素法和制霉菌素法)、菌丝过滤法】;③检出缺陷型(夹层培养法、限量补充培养法、逐个检出法、影印平板法)
④ 鉴定缺陷型(生长谱法)
4.一步生长曲线的几个参数和时期:反映每种噬菌体的三个最重要的特性参数:
潜伏期:①隐晦期(指在潜伏期前期人为地(用氯仿)裂解细胞,裂解液仍无侵染性的一段时间。细胞内正处于复制噬菌体核酸和合成其蛋白质衣壳的阶段
②胞内累积期又称潜伏后期,在隐晦期
后,如人为地裂解细胞,其裂解液出现侵染性的一段时间。噬菌体开始装配的时期,在电镜下可观察到已初步装配好的噬菌体粒子。
裂解期:紧接在潜伏期后的一段宿主细胞迅速裂
解、溶液中噬菌体粒子急剧增多的一段时间。
平稳期:指感染后的宿主已全部裂解,溶液中噬菌体效价达到最高点后的时期。
裂解量:平均每一个宿主细胞裂解后所产生的子代噬菌体数称作裂解量。
第四篇:微生物总结
微生物:一类分布广泛、体积微小、结构简单、肉眼直接看不到,微小生物的总称。
细菌L型:细菌细胞壁的肽聚糖结构受理化或生物因素直接破坏或合成被抑制,这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活,称细菌细胞壁缺陷型或L型。
质粒:是染色体外的遗传物质,控制某些特定的生物学性状,不是细菌生长所必需。
荚膜:是细菌合成分泌的包绕于细胞壁外的一层粘液性物质。界限清晰性质稳定结合牢固。培养基:由人工方法经灭菌后制成,专供微生物生长使用的混合营养制品。一般pH为7.2-7.6。
兼性厌氧菌:兼有需氧呼吸和无氧发酵两种功能,无论在有氧或无氧环境中都能生长,但以有氧时生长较好,大多数病原菌属于此。菌落:在固体培养基中,经过十八到24小时培养后,单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细红细胞吸附:流感病毒等感染细胞后,由于细胞膜上出现了血凝素(HA),具有吸附脊椎动物红细胞的能力,这一现象称为红细胞吸附。抗毒素:通常是用细菌类毒素给马多次注射后,取其免疫血清提取免疫球蛋白精制而成抗生素:微生物来源的抗菌药物,以及人工化学修饰或半合成的衍生物
无菌:就是指没有活菌的意思。
1:细胞壁结构、化学组成及功能?答:化学组成:G+①肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥②磷壁酸:粘附功能,与致病性有关;抗原性很强③其他成分:如A群链球菌的M蛋白G-①肽聚糖:聚糖骨架;四肽侧链②外膜:脂蛋白;脂质双层;脂多糖:脂类A(毒性成分,无种属特异性);核心多糖;特异多糖。功能:①维持细菌固有形态②保护细菌抵抗低渗环境③物质交换④决定菌体的抗原性。2:G-菌与G+菌细胞壁的异同点及其意义?答:兼性厌氧菌、专性厌氧菌。
11:与医学有关的合成代谢产物?答:① 毒素与侵袭性酶:外毒素和内毒素②热原质:G-菌细胞壁的脂多糖,耐高温,250℃干烤破坏。③抗生素:某些微生物代谢中产生的一类能抑制或杀死其他微生物或肿瘤细胞的物质。④维生素:如VitK、B族维生素。⑤色素:脂溶性和水溶性色素。⑥细菌素:无治疗应用价值。13:病毒的形态、结构与化学组成。答:多数病毒呈球形或近似球形,少数呈杆状(植物病毒)、丝状(初分离的流感病毒)、弹状(狂犬病毒)、砖块状(如痘类病毒)和蝌蚪状(噬菌体)。病毒的核心和衣壳,二者构成核衣壳,病毒包膜和其他辅助结构。化学组成:核心:主要为核酸,化学组成为DNA或RNA。衣壳:包绕在核心外面的一层蛋白质,由许多蛋白质亚单位(壳粒)组成。包膜:化学组成: 脂质蛋白质糖类。
答:单细胞真菌呈圆形或卵圆形。多细胞真菌
结构:菌丝和孢子,菌丝:分为营养菌丝、气中菌丝、生殖菌丝;孢子:是真菌的繁殖体。结构:细胞壁外成分;细胞壁;隔膜;其他结构。
25:真菌培养特性。答:最常用的培养:沙保弱培养基。温度:多数都在22 ~ 28oC,但深部感染真菌最适温度为37oC,pH4.0 ~ 6.0病原菌通常生长缓慢,1~4周。
26:真菌繁殖方式。答:①无性生殖:①由菌丝断裂形成新个体②细胞直接分裂产生子细胞③产生芽生孢子④产生孢子囊孢子和分生孢子②有性生殖:指经过两性细胞配合产生新个体的繁殖方式。
27:真菌抵抗力答:①对干燥、阳光、紫外线及常用消毒剂有强抵抗力②不耐热,菌丝与孢子60℃ 1小时均可杀死③2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感④抗真菌药物:菌集团。
纯培养基:挑取一个菌落,移种到另一培养基中,生长出来的细菌均为纯种。
毒性噬菌体:在宿主菌细胞内噬菌体增殖产生子代噬菌体,宿主菌被裂解,形成溶菌性周期。温和噬菌体:噬菌体基因与宿主菌染色体整合,成为前噬菌体,噬菌体DNA能随细菌DNA复制而复制,并随细菌的分裂而传到子代细菌的基因组中,变成溶原性细菌,形成溶原性周期。前噬菌体:整合在细菌染色体上的噬菌体基因。转座子:细菌基因组中的一段DNA序列,可以在染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的遗传成分,伴随转座子的移动,会出现插入突变。基因转移:遗传物质由供体菌转入受体菌的过程为基因转移。
重组:转移的基因与受体菌DNA整合在一起称为重组,重组使受体菌获得供体菌的某些性状。转化:细菌通过性菌毛相互连接沟通,将质粒或染色体等遗传物质从供体菌转移给受体菌的过程。
接合:是受体菌直接摄取供体菌DNA片段,从而获得新的遗传性状的过程。
转导:以噬菌体为载体将供菌的DNA片段转移到受菌体内使受菌获得供菌的部分遗传性状。溶原性转换:某些前噬菌体可导致细菌基因型和性状发生改变,例如白喉棒状杆菌产生白喉毒素的机理,温和噬菌体感染细菌时,其基因可整合于宿主菌染色体中,使宿主菌获得噬菌体基因赋予的新的性状,称溶原性转换。原生质体融合:将两种不同的细菌经溶菌酶或青霉素等处理,失去细胞壁成为原生质体后进行融合的过程。融合后的染色体之间发生重组。病毒的自我复制:以病毒核酸为模板,经过复杂的生化过程,复制子代病毒的核酸并通过转录翻译产生病毒蛋白质,装配成熟后释放到细胞外,这种增殖方式称为病毒的自我复制。顿挫感染:被病毒侵入的细胞如不能为病毒增殖提供必需成分,则病毒不能合成本身成分,或能合成但不能组装和释出有感染性的病毒颗粒。非容纳细胞与容纳细胞
缺陷病毒:病毒基因组不完整或某一基因位点改变,不能正常增殖,不能复制出完整有感染性的病毒颗粒,此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+辅助病毒完成复制
干扰现象:当两种病毒感染同一宿主细胞时,发生一种病毒的增殖抑制另一种病毒增殖的现象。某些病毒感染细胞时不出现CPE或其他易于测出的变化(如HAd),但能干扰其后感染的另一病毒的增殖,从而阻抑后者所特有的CPE 芽孢:某些细菌在一定环境条件下,胞质脱水浓缩,在菌体内部形成的一个圆形或卵圆形小体。
正常菌群:正常人的体表和与外界相通的眼结膜,口腔、鼻腔、肠道、泌尿生殖道等腔道粘膜中的不同种类和数量及对人体无害而有益的微生物。正常微生物群通称为正常菌群
细菌群体:细菌附着在有生命或无生命的材料表面后,由细菌及其所分泌的胞外多聚物共同组成的呈膜状的细菌群体。机会性感染:由正常菌群在机体免疫功能低下、寄居部位改变、菌群失调等特定条件下引起的感染。
毒力:致病性的强弱程度。
侵袭素:某些细菌的基因编码一些具有侵袭功能的蛋白多肽,促进该病原菌向邻近组织扩散甚至介导进入邻近黏膜上皮细胞内。
包涵体:细胞浆或细胞核内出现光镜下可见的斑块状结构
G+ 菌:①肽聚糖:聚糖骨架,四肽侧链,五肽交联桥,三维立体②磷壁酸:重要表面抗原,与粘附致病有关,加强稳定细胞壁G-菌:①肽聚糖:聚糖骨架,四肽侧链组成二维结构, ②外膜(脂蛋白、脂质双层、脂多糖组成)功能:屏障结构LPS是G-菌的内毒素。细胞壁结构异同:G+菌/G-菌--强度:较坚韧/较疏松--厚度:厚20-80nm/薄10-15nm--肽聚糖层数:多可达50层/少,1-2层--肽聚糖结构:聚糖骨架,四肽侧链,五肽交联桥,三维立体/聚糖骨架,四肽侧链,二维平面--脂类含量/少/多--磷壁酸:有/无--外膜:无/有,由脂蛋白、脂质双层、脂多糖组成3:细菌L型,特殊结构种类、化学组成、抗原性及意义?答:定义:细菌细胞壁的肽聚糖结构受理化或生物因素直接破坏或合成被抑制,这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活,称细菌细胞壁缺陷型或L型。种类:G+菌细胞壁缺失后,仅有胞膜,称原生质体,G--菌肽聚糖层受损,尚有外膜,称原生质球。抗原性及意义:高度多形性,大小不一;大多染成G-;高渗低琼脂含血清培养基—油煎蛋样菌落;去除诱因后,有些可回复为原菌;某些L型仍有致病性,引起慢性感染。作用于胞壁的抗菌性药对L型感染治疗无效
4:细菌的特殊结构?答:①荚膜:多糖或多肽的多聚体。功能a抗吞噬b黏附作用c抗有害物质的损伤d有抗原性,用于细菌的鉴定和分型②鞭毛:蛋白质,由基础小体丝状体钩状体组成,高度抗原性。功能a是细菌的运动器官b某些细菌的鞭毛与致病性有关c根据鞭毛的动力和鞭毛的抗原性可用以细菌的鉴别和分类③菌毛:由亚单位菌毛蛋白构成。功能a黏附作用b传递遗传物质④芽孢:生产芽孢的细菌都是革阳菌。功能:a增强抵抗力b不直接致病c鉴定。
5:细菌的遗传物质?答:细菌染色体,质粒,噬菌体:
6:基因转移与重组方式的种类及定义?答:定义:基因转移:遗传物质由供体菌转入受体菌的过程为基因转移。重组:转移的基因与受体菌DNA整合在一起称为重组,重组使受体菌获得供体菌的某些性状。分类:转化,接合,转导,融合,转换.【表格】类型:基因来源/转移方式--转化:供菌游离的DNA片段/直接摄入--接合:供菌质粒DNA/ 性菌毛--转导:供菌任意DNA或噬菌体与供菌特定DNA/噬菌体--融合:两菌原生质体的DNA/融合--转换:温和噬菌体/吸附穿入
7:噬菌体及其相关概念。答:1)毒性噬菌体:在宿主菌细胞内噬菌体增殖产生子代噬菌体,宿主菌被裂解,形成溶菌性周期。2)温和噬菌体:噬菌体基因与宿主菌染色体整合,成为前噬菌体,噬菌体DNA能随细菌DNA复制而复制,并随细菌的分裂而传到子代细菌的基因组中,变成溶原性细菌,形成溶原性周期。
8:细菌生长繁殖的条件?答:营养物质/酸碱度 多数病原菌最适pH为7.2~7.6/温度 多数病原菌生长最适温度为37℃/气体 据代谢时对分子氧的需要与否,专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌/渗透压。
9:细菌群体的生长繁殖?答:生长曲线:一定数量的细菌接种到定量的液体培养基中,连续定时取样测定活菌数量,以培养时间为横坐标,以活菌数的对数为纵坐标作图,得到的一条曲线。迟缓期:适应阶段。对数期:对抗生素敏感,细菌鉴定选此期。稳定期:代谢产物形成(如外毒素、抗生素、芽胞等)。衰亡期:菌体细胞呈现多种形态。
10:按细菌对氧需要的分类?答:据代谢时对分子氧的需要与否,专性需氧菌、微需氧菌、14:双链DNA病毒的复制周期?答:vDNA(RNA聚合酶)→早期mRNA(翻译)→早期蛋白(酶)→ vDNA(酶)子代DNA → mRNA→结构蛋白.→子代DNA+结构蛋白→子代病毒。简要过程:吸附,穿入,脱壳,生物合成,组装、成熟与释放。
15:顿挫病毒,缺陷病毒的概念?答:顿挫病毒:被病毒侵入的细胞如不能为病毒增殖提供必需成分,则病毒不能合成本身成分,或能合成但不能组装和释出有感染性的病毒颗粒。非容纳细胞与容纳细胞。缺陷病毒:病毒基因组不完整或某一基因位点改变,不能正常增殖,不能复制出完整有感染性的病毒颗粒,此病毒即缺陷病毒。缺陷病毒+辅助病毒=完成复制 16:细菌的感染与致病。答:感染:在一定条件下,微生物与机体相互作用并导致机体产生不同程度的病理过程。★
17:细菌的毒力比较,外毒素与内毒素生物学特性。答:【表格】种类:内毒素★外毒素。来源:G-菌★G+菌部分G-菌。编码基因:染色体基因★质粒或前噬菌体或染色体基因。存在部位:细胞壁成分、细菌裂解后释出★活菌分泌或细菌溶解后散出。化学成分:脂多糖★蛋白质。稳定性:好(160℃2~4h才破坏)★差(60~80 ℃30m可破坏)。毒性作用:弱、各种内毒素作用大致相同★强、对机体组织器官有选择性。抗原性:弱,甲醛处理后不能形成类毒素★强,能刺激机体形成抗毒素,经甲醛脱毒后能形成类毒素。
18:细菌感染的类型答:①不感染②隐性感染③潜伏感染④显性感染:急慢性感染;局部、全身感染⑤带菌状态。
19:病毒感染类型。答:①隐性感染②显性感染:急性病毒感染:潜伏期短,发病急,数日或数周回复,病原消灭型感染。持续性病毒感染:慢性病毒感染;潜伏性病毒感染;慢发病毒感染。
20:细菌的致病机制。答:细菌的致病性强弱取决于毒力,细菌的毒力因子:①侵袭力:致病菌突破宿主生理屏障,进入机体并在体内定植、繁殖和扩散的能力包括黏附素、荚膜和微荚膜、侵袭性物质②毒素:细菌产生的损伤宿主引起生理功能紊乱的毒性物质,包括内毒素和外毒素。
21:正常菌群的生理作用。答:①生物拮抗:竞争粘附(占位性保护)作用;产生有害代谢物质;营养竞争②营养作用③免疫作用④抑癌作用⑤抗衰老作用。
22:病毒分离鉴定方法及病毒在培养细胞中的增殖的指标。答:病毒的分离:①动物接种②鸡胚培养;流感病毒初次分离接种于羊膜腔;流感病毒的再培养接种于尿囊腔③组织培养④细胞培养 — 病毒分离鉴定中最常用的方法单层细胞培养;原代细胞培养;二倍体细胞培养;传代细胞培养。指标:1)细胞的变化①细胞病变效应:有些病毒在细胞内增殖时引起的特有的细胞病变,如细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落②多核巨细胞形成:有些病毒如麻疹病毒、巨细胞病毒等作用于细胞膜,使邻近的细胞融合,形成多核巨细胞③胞质或核内包涵体的形成狂犬病病毒、巨细胞病毒。2)红细胞吸附流感病毒等感染细胞后,由于细胞膜上出现了血凝素,具有吸附脊椎动物红细胞的能力,这一现象称为红细胞吸附。常用来鉴定具有血凝素的黏病毒或副黏病毒的增殖3).红细胞凝集检测含血凝素病毒的方法4)干扰现象5)空斑形成试验。
23:病毒成份的检测(抗原、核酸检测)答:1.病毒抗原的检测2.病毒核酸的检测
24:真菌的形态结构(单细胞和多细胞真菌)。
灰黄霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑;对抗生素不敏感。
28:抗菌药物的种类与作用机制。答:杀菌药和抑菌药。机制:①抑制细菌细胞壁的合成②抑制细菌
细胞膜功③抑制细菌蛋白质合成④抑制细菌核酸合成。29:细菌耐药的机制。答:产生钝化酶;细胞通透性的改变;靶位结构的改变;建立代谢旁路;代谢酶分子的改变
30:医院感染的定义。答:由医院的病原生物或其毒素导致的局部或全身感染性疾病。
31:细菌分离培养和鉴定、生化试验、血清学试验?答:细菌分离培养和鉴定:原则上应对所有送检标本做分离培养,以便获得单个菌落后进行纯培养,从而对细菌做进一步的生物学、免疫学、致病性或细菌的药物敏感性等方面的检查,最终获得确切的报告。生化试验:得到细菌的纯培养物后,用糖发酵试验,吲哚试验,硝酸盐还原实验等对细菌的酶系统和其代谢产物的检查,是鉴别细菌的重要方法之一。血清学实验:利用含已知的特异性抗体的免疫血清,对细菌进行群和型的鉴别。
微生物种类名称★生物学性状★致病物质、致病机理及所致疾病
破伤风梭菌:菌体细长,芽胞正圆比菌体粗,位于菌体顶端菌体鼓槌状★不发酵糖类,不分解蛋白质。条件:局部伤口需形成厌氧微环境,伤口窄而深,有泥土或异物污染,大面积创伤,坏死组织多,局部组织缺血,同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感染的伤口。防治原则:特异性预防:注射破伤风类毒素主动免疫;迅速对伤口清创扩创,防止形成厌氧微环境;紧急预防:TAT(精制破伤风抗毒素);治疗: 早期足量使用TAT,抗生素。产气荚膜梭菌:G+粗大杆菌,芽胞位于次极端,椭圆形,直径小于菌体形成明显荚膜★血平板:双层溶血环,代谢十分活跃,牛奶培养基:“汹涌发酵”现象。增加血管通透性,组织坏死,气性坏疽,食物中毒,坏死性肠炎。
肉毒梭菌:G+粗短杆菌,芽胞位于次极端,椭圆形,菌体呈网球拍状,严格厌氧,分型多,生化反应复杂★肉毒毒素,抑制乙酰胆碱释放,引起运动神经末梢失调→肌肉麻痹;食物中毒,婴儿肉毒中毒。
支原体:菌落油煎蛋型,高度多形态型,细胞膜含高度固醇,无细胞壁,对青霉素有抵抗作用★支原体肺炎,病变为间质性肺炎,可合并支气管肺炎。称为原发性非典型性肺炎。不规则发热,刺激性咳嗽,头痛。婴幼儿病情严重,发病急,病程长,以呼吸困难为主。有些合并其他系统病变,如循环系统等。飞沫传播。立克次体:是一类体积微小,绝大多数为自身代谢不完善,严格细胞内寄生的原核细胞型微生物★流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病、Q热
衣原体:严格细胞内寄生,有独特发育周期,能通过细菌滤器,原核细胞型微生物★ 沙眼:感染眼结膜上皮细胞→增殖,包涵体→局部炎症→早期流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生→后期结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜损害→影响视力或致盲包涵体结膜炎、泌尿生殖道感染、沙眼衣原体肺炎、性病淋巴肉芽肿
螺旋体:是一类细长、柔软、弯曲、运动活泼的原核细胞型微生物基本结构及生物学形状与细菌相似★梅毒,人是唯一传染源,致病物质为荚膜样物质,透明质酸酶;后天通过性接触传播或者先天经过母体传播。
第五篇:微生物总结
第一章、绪论
巴斯得的贡献:
1、彻底否定了“自生说”
2、免疫学—预防接种
3、证实发酵是由微生物引起的3、巴斯德消毒法
柯赫贡献:
1、证实炭疽病菌是炭疽病的病原菌
2、发现了肺结核病的病原菌
3、提出了证明某种微生物是否为某种疾病病原体的病原菌——柯赫原则
4、固体培养基分离纯化微生物的技术
5、配制培养基
微生物的5大共性:
1、体积小、面积大
2、吸收多、转化快
3生长旺、繁殖快
4、分布广、种类多
5、适应性强、易变异 第二章、微生物的纯培养和显微技术
一、涂布平板法作用:用于纯种分离、筛选菌落、得到单菌落,对一些细菌进行计数 五区划线发作用:纯化菌种、得到单菌落
摇瓶实验作用:菌种筛选、发酵实验、种子培养等 穿刺法的作用:保藏厌氧菌种、研究微生物的动力 之字划线法的作用:保藏菌种、单菌落的获取
二、斜面菌种保藏法:保藏期限3个月以内,沙土管保藏法:保藏期限1~10年主要适用于产孢子的,如芽孢杆菌、放线菌 石蜡油封藏法:保藏期限1~2年
真空冷冻干燥法:保藏期限5~10年,液氮超低温病结法:保藏期限5~10年 第三章
一、细胞壁:根据细胞壁将原核生物分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两种。
1、革兰氏阳性菌细胞壁的特点:厚度大(20~80nm)和化学组分简单,一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。
革兰氏阳性菌的机械阻拦与保护作用有肽聚糖完成。磷壁酸:是结合在革兰氏阳性菌细胞壁上的一种酸性多糖,主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。
磷壁酸为革兰氏阳性菌所特有。对于革兰氏阳性菌而言,抗原性由磷壁酸完成。磷壁酸的主要生理功能:1)、其磷酸分子上较多的负电荷可提高细胞周围镁离子的浓度进入细胞后就可以保证细胞膜上一些需镁离子的合成提高活性 2)储藏磷元素 3)、增强某些致病菌如A族链球菌对宿主细胞的黏连、避免被白细胞吞噬以及补抗体的作用 4)赋予革兰氏阳性菌以特异的表面抗原 5)可作为噬菌体的特异性吸附受体
6)调节细胞自溶素的活力,借以防止细胞自溶而死亡
2、革兰氏阴性菌:由肽聚糖和外膜组成,外膜中的脂多糖是革兰氏阴性菌所特有的 外壁层可分为3层:外层为脂多糖层,中层为磷脂层,内层为脂蛋白 革兰氏阴性菌外膜的作用:1)控制细胞透性
2)提高镁离子浓度 3)决定细胞的抗原性
4)类脂A是类毒素的主要成分
脂多糖:是位于革兰氏阴性菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖物质,由类脂A、核心多糖和O-特异侧链
脂多糖的功能:1)其中类脂A是革兰氏阴性菌致病物质——内毒素的物质基础 2)因其负电荷较强,有吸附镁离子、钙离子等阳离子以提高其在细胞表面的浓度作用 3)由于LPS结构多变,决定了革兰氏阴性菌细胞表面抗原决定族 4)是许多噬菌体在在细胞表面的吸附受体 5)具有控制某些物质进出细胞的部分选择性屏障功能
3、革兰氏染色机制:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞膜内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚,肽聚糖网层次多和交联致密,故与乙醇与丙酮作脱色处理时因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其任呈紫色。反之革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层的类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差,遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出,因此,通过乙醇脱色后细胞退成无色。这时,再经沙黄等红色染料进行复染,就使革兰氏阴性菌呈现红色,而革兰氏阳性则保留紫色。
二、芽孢
芽孢:某些细胞在生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体
芽孢的特点:1)芽孢内新陈代谢几乎停止,处于休眠状态,但保持潜在萌发力
2)芽孢不具生殖能力,仅只是一种休眠体 3)抗逆性最强的生命体之一,有抗热、抗化学药物、抗辐射和抗静水压能力 4)含水量低,壁厚而致密,通透性差,不易着色,折光性强
5)一个孢子萌发只产生一个营养状态的细胞 芽孢的耐热机制:芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差和皮层的离子强度很高,从而是皮层产生极高的渗透压去夺取芽孢核心中的水分,其结果造成皮层的充分膨胀,而核心部分的细胞质却变得高度失水,因此,导致核心具极强的耐热性。第四章微生物的营养要求
一、营养物质:能够满足微生物机体生长、繁殖和完成各种生理条件所需的物质 营养:微生物获得U和利用营养物质的过程
二、1、碳源:是在微生物生长过程中为微生物提供碳素来源的物质。为微生物提供碳元素与能量
2、氮源:为微生物提供氮元素来源,只有少数自养微生物能利用铵盐、硝酸盐同时作为氮源与能源(是构成细胞中核酸和蛋白质的重要元素)氮源的类型:无机氮、有机氮、气体氮
3、无机盐:作用:作为酶活性中心的组成部分、维持生物大分子和细胞结构的稳定性、调节并维持细胞的渗透压、控制细胞的氧化还原电位和作为某些微生物生长的能源物质。
4、生长因子:通常是指那些微生物生长所必需的的且需量很少,但微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物
5、水:生理功能:1)起到溶剂与运输介质的作用
2)参与细胞内一系列的化学反应
3)维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象
4)是良好的导热体,调节细胞温度 微生物的营养类型分类(P84表格)
三、1、培养基的配制原则:1)目标明确
2)营养协调
3)物理化学条件适宜
4)原料来源的选择
2、C多有助于次生物质分泌,N多有助于个体生长发育
3、PH:细菌:7.0~8.0
酵母菌:4.0~6.0
放线菌:8.0~9.0
霉菌:4.0~5.8
4、维持培养基PH的方法:1)加缓冲剂一氢和二氢磷酸盐的混合物
2)备用碱:CaCO3、CaHCO3 3)弱酸盐:柠檬酸盐、乳酸盐
4)液氨或盐酸
5、原料来源:1)经济节约原则:以粗代精、以废代好、以简代繁
2)原料来源要广泛
3)原料药易处理、处理成本要低
4)原料处理后废物、废液、废气要少
6、选择和配制培养基的方法四种:生态模拟、查阅文献、精心设计、实验比较
四、培养基的分类
1、按成分不同划分:天然培养基:优点为取材方便,营养丰富,种了多样,配制方便合成培养基:优点:组分精确,重复性好确定:较昂贵,一般用于研究
2、根据物料状态划分:固体培养基:一般用于进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏半固体培养基:用于观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定液体培养基:用于大量培养微生物,研究生理代谢
3、按用途划分:基础培养基:用于培养野生型微生物和原养型微生物 加富培养基(营养培养基):在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基作用一般为分离某种微生物而专门设计或培养营养要求严谨的异样微生物 鉴别培养基:在培养可中加入某种特殊化学物质 选择培养基:根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同,在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质,抑制不需要的微生物的生长,有利于所需要微生物的生长,有利于所需微生物的生长 第五章、微生物代谢
微生物发酵过程的三个阶段:脱氢(电子)、递氢(或电子)和受氢(或电子)发酵:是指微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某些中间产物,同时释放能量并产生各种不同的代谢产物
代谢:生命存在的基本特征,是微生物体内所进行的全部生化反应的总称。主要由分解代谢和合成代谢两个过程组成。分解代谢:是指将大分子物质降解成小分子物质,并在这个过程中产生能量(都是氧化反应)合成代谢:是指细胞利用简单的小分子物质合成复杂大分子,在这个过程要消耗能量(都是还原反应)
代谢途径都是有一系列连续的酶促反应构成的
P102~P105EMP HM ED途径的特点功能以及途径路线
根据氧化还原反应电子受体的不同可将发酵和呼吸分为有氧和无氧呼吸两种 P108 TCA途径图
TCA循环特点:1)氧虽然不直接参与其中反应,但必需在有氧条件下运行
2)每个丙酮酸产生15个ATP 3)位于一切分解代谢与合成代谢的枢纽地位,可为生物合成提供各种碳价原料
TCA的生理意义:1)为细胞提供能量
2)各种能源物质彻底氧化的共同代谢途径(对于微生物来说)3)物质转化枢纽
无氧呼吸:电子受体不是氧气而是外源无机物与部分简单小分子有机物
发酵作用:没有外源电子受体,底物具有的能量只释放一小部分,合成少量ATP 三种磷酸化:底物水平磷酸化,高能磷酸化,氧化磷酸化
光合磷酸化的特点:1)光驱使下电子自菌绿素上逐出后经类似呼吸链又回到菌绿素
2)产还原力[H]和产ATP分别进行,还原力来自于H2O等无机物
3)不产生氧气 合成代谢:微生物利用能量代谢所产生的能量、中间代谢产物以及从外界吸收的小分子合成复杂细胞物质的过程
P118~P119 CO2固定路线图
蓝细菌孤单的抗氧化保护机制:1)分化出特殊的还原性异形胞
2)非异形胞蓝细菌固氮酶的保护将固氮与光合进行时间上分隔
微生物固氮反应6要素:1)ATP的供应
2)还原力[H]及传递氢载体
3)固氮酶
4)还原底物——氮气
5)镁离子
6)严格厌氧微环境
联合固氮菌:指必需生活在植物根茎叶,动物肠道等处才能进行固氮的微生物,不形成类似根瘤的共生结构 微生物的代谢调节主要有两种类型:一是酶活性的调节,即调节已经存在的酶分子的活性,是酶在化学水平的变化。另一类是酶合成的调节,即调节酶分子的合成量,是遗传水平发生的变化 第六章
一、生长曲线延滞期
特点:1)生长速率常数为零,细胞数目不增加或增加很小
2)细胞形态变大或 增长许多杆菌可长成丝状
3)合成代谢十分活跃,核糖体、酶类和ATP 的合成加速产生各种诱导酶
4)对外界不良条件如NaCl溶液,温度和抗 生素等理化因素反应敏感
出现原因:1)微生物接种到一个新的环境,暂缺乏足够的能量和必需的生长因子
2)“种子”老化即处于未对数期或种子未活化
3)接种时损伤
影响其长短的因素与实践意义:1)接种龄:对数期种子延滞期短,延滞期或衰亡期的种子延滞期较长
2)接种量:接种量大,延滞期较短,接种量小,延滞期较长
3)培养基成分:培养基成分丰富的延滞期较短,培养基成分与种子培养基一致的延滞期较短
二、生长曲线指数期
特点:1)生长速率最快,细胞呈指数增长
2)生长速率恒定
3)代谢旺盛,细胞组分平衡发展
4)群体的生理特性一致
影响指数期的意义:1)菌种:不同菌种代时差异极大
2)营养成分:营养越丰富代时越短
3)营养物浓度:影响微生物的生长速率和生长总量
4)培养温度:影响微生物的生长速率和生长总量
指数期的实践意义:1)是代谢、生理研究的良好材料
2)是增殖噬菌体的最适宿主菌龄
4)革兰氏染色是采用此期微生物
生长曲线稳定期特点:1)活细胞总数维持不变即新增殖的细胞数与衰亡的细胞数相等,菌体总数达到最高点
2)细胞生长速率为零
3)细胞生理上处于衰老,代谢活力钝化,细胞成分合成缓慢,革兰氏染色发生变化
三、生长曲线衰亡期
特点:细胞以指数速率死亡,有时细胞速率的降低是由于抗性细胞的积累,细胞变形退化,有的发生自溶,革兰氏染色发生变化
影响衰亡期的因素及实践意义:1)与菌种的遗传特性有关:有些细菌的培养经历所有的各个生长时期,几天以后死亡,有细菌培养基个月乃至几年以后任然有一些货细胞
2)与是否产芽孢有关:产芽孢的细菌更易幸存下来
3)与营养物质和有毒物质有关:补充营养和能源,以及中和环境毒性,可以减缓死亡细胞的死亡速率,延长细菌培养物的存货时间
四、分批培养:是指将微生物置于一定容积的的培养基中,经过生长培养,最后一次收获培养方式 连续培养:在一个恒定容积的的流动系统中培养微生物,一方面以一定速率加入新的培养基,另一方面又以相同的速率流出培养物(菌体和代谢产物)
连续发酵的优点:1)高效
2)产品质量较稳定
3)节约了大量动力、人力、水和蒸汽,且使水、汽、电的负荷均衡合理
连续发酵的缺点:1)菌种易退化
2)易污染杂菌 3)营养物质的利用率一般 同步生长:就是指在培养物中所有微生物细胞都同一生长阶段,并都能同时分裂的生长方式 同步培养法包括诱导法与选择法
诱导法:是采用物理、化学一男子使微生物生长到某一阶段而停下来,使所有细菌都达到这个阶段时再使其生长 恒浊器:根据培养器内微生物的生长密度并借光电控制系统来控制培养液流速,以取得菌体密度高,生长速度恒定的微生物细胞的连续培养
恒化器:与恒浊器相反,是一种设法使培养液流速保持不变 最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装置 装置
控制对象
培养基
培养基流速
生长速率
产物
应用范围
恒浊器
菌体密度(内控制)
无限制生长因子
不恒定
最高速率
大量菌体或与菌体平行的代谢产物
生产为主
恒化器
培养基流速(外控制)
有限制生长因子
恒定
低于最高速率
不同生长速率的菌体、并使微生物始终在低于其
实验室为主
五、防腐:是在某些化学物质或物理因子作用下防止或抑制微生物生长的一种措施,它能防止食物腐败或防止其他物质霉变 消毒:利用某种杀死或灭活物质或物体中所有微生物的一种措施,它可以起到防止感染或传播的作用
灭菌:利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有微生物的一种措施 第七章
1、病毒的特点:1)形态及其微小,一般能通过细菌滤器必须自电镜下才能观察
2)没有细胞构造,主要成分仅为核酸与蛋白质
3)每一种病毒致含有一种核酸
DNA和RNA 4)依靠自身的核酸进行复制,一病毒的核酸和蛋白质等原件实现装配,实现繁殖
5)严格细胞内寄生,缺乏完整的酶和产能系统,只能利用宿主细胞的现成的代谢系统合成病毒自身的核酸和蛋白质
6)在离体条件下,能以无生命力的大分子状态存在,并可长期保持器侵染力
7)对一般抗生素不敏感,但对干扰素敏感
8)有些病毒的基因可以整合到宿主的基因中去
2、病毒与活细胞的区别:1)结构简单,没有细胞结构
2)几乎所有的毒粒中只有DNA或RNA一种类型的核酸
3)在细胞外不能增殖
3、得到一步生长曲线的实验:二院培养系统:1)低浓度病毒宿主细胞(给几分钟时间侵染)2)高倍稀释病毒与细胞的培养物
3)保湿培养
4)不同时间取样,涂布平板,得到效价
5)以时间为横坐标,病毒浓度为纵坐标绘图
4、烈性噬菌体:感染宿主后增殖裂解宿主 溶原性噬菌体(温和性细菌):感染后大多数可整合到宿主基因中少数以染色体外独立存在
5、病毒分为真病毒和亚病毒,亚病毒又分为类病毒、卫星病毒、卫星RNA、朊病毒 类病毒:是一种只包含RNA的病毒,只在植物中出现,分质量极小,不能编码蛋白质 卫星病毒:寄生于与之无关的辅助病毒的基因产物的病毒 卫星RNA:是指必需依赖一些辅助病毒进行复制的小分子单链RNA,他们被包藏在辅助病毒的壳体中
朊病毒:是一类能引起哺乳动物亚急性海绵样脑病的病原因子 第八章
P204页Griffith转化实验等3个实验
基因组:是指位于细菌或细胞中的所有基因 大肠杆菌基因组的特点:1)遗传信息的连续性
2)功能相关的结构基因组成操纵子结构
3)结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝
4)基因组重复序列少而短
质粒:是一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质遗传因子,主要存在于各种微生物中
转座子:是位于染色体或质粒上的一种能改变自身位置的DNA序列,广泛分布于原核和真核细胞中
质粒的主要类型:致育因子、抗性因子、Col质粒、毒性质粒、代谢质粒、隐秘质粒
致育因子:又称F质粒,其大小约100kb,这是最早发现的一种与大肠杆菌的有性生殖现象(结合作用)有关的质粒
抗性因子:是另一类普遍而重要的质粒,主要包括抗药性和抗重金属两大类,简称R质粒 Col质粒:该质粒含有编码大肠菌素的基因,大肠菌素是一种细菌蛋白,只杀死近缘且不含Col质粒的菌株,而宿主不受其产生的细菌素的影响
毒性质粒:致病菌中携带的能引起致病性的质粒,这些质粒具有编码毒素的基因 代谢质粒:携带有能降解某些基质的酶的基因的质粒
隐秘质粒:不显示任何表型效应,它们的存在只有通过物理方法检测出来 原核生物中对的转座因子有3种类型:插入顺序(IS)、转座子(Tn)、病毒(Mu)转座的遗传学效应:插入突变、产生染色体畸变、基因的移动和重排
基因突变:一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变包括一对或几对碱基的缺失、插入或置换,而导致的遗传变化
碱基变化对遗传信息改变的四种类型:同义突变,错义突变,无义突变,移码突变 同义突变:是指某个碱基的变化没有改变产物氨基酸序列的密码子变化
错义突变:是指碱基序列的改变引起了产物氨基酸的改变(可能为致死突变)无义突变:是指某个碱基的改变,使代表某种氨基酸的密码子变为蛋白质的合成的终止密码子,蛋白质的合成提前终止,产生短截的蛋白质
移码突变:由于DNA序列中发生1~2个核苷酸的缺失或插入,使翻译的阅读框发生改变,从而导致改变位置以后的氨基酸序列的完全变化(一般为致死突变)
表型变化的突变型:营养缺陷型,抗药性突变型,条件致死突变型,形态突变型 营养缺陷型:缺乏合成其生存所必需的营养物的突变型,只有从周围环境或培养基中获得这些营养或前体物才能生长 影印平板P218 抗药性突变型:是由于基因突变使菌株对某种或某几种药物,特别是抗生素产生抗性的一种突变型
条件致死突变型:是指在某一条件下具有致死效应,而在另一条件下没有致死效应的突变型 形态突变型:是指造成形态改变的突变型(包括菌落形态、颜色一件噬菌斑形态)
自发突变的缘由:1)NDA复制过程产生的错误
2)碱基互变异构体的相互转变
3)转座子的随机插入基因
自发突变的特性:1)非对应性
2)稀有性
3)规律性
4)独立性
5)遗传和回复
6)可诱变性
诱发突变:碱基类似物、插入染料、直接与DNA其化学反应的诱变剂、辐射和热、生物诱变因子
DNA损伤修复:光复活作用、切除修复、重组修复、SOS修复 光复活:由phr基因编码的光解酶进行
切除修复:又称暗修复,该修复系统除了碱基错误配对和单核苷酸插入不能修复外,几乎其他DNA损伤均可修复,是细胞内主要修复系统
重组修复:是一种越过损伤而进行的修复,这种修复不将损伤碱基除去
SOS修复:是DNA分子受到较大范围的重大损伤时诱导产生的一种应急反应 P226~227 高频重组菌等
转导:是由病毒介导的细胞间进行遗传交换的一种方式
供体DNA进入受体的命运:1)发生稳定的转导子
2)流产转导:即不被降解,又不被整合,也不被复制
3)外源DNA被降解,转导失败
遗传转化:是指同源或异源的游离DNA分子被自然或人工感受态细胞摄取,并得到表达的水平方向的基因转移过程
4个影响供体DNA与受体细胞间的最初相互作用:1)转化片段的大小
2)形态:双链DNA 3)浓度:在在临界值出现之前成正比
4)生理状态:感受器——刚停止DNA合成 微生物育种:诱变育种、代谢育种、体内基因组育种 代谢育种:改变代谢途径、扩展代谢途径、构建新的代谢途径 体内基因组育种:原生质体融合,杂交育种
融合子的判别:1)亲本遗传标记的互补的2)亲本灭活后性状的恢复
3)具有双亲本的荧光标记 第九章
顺式作用元件:位于基因的旁侧,可以调控影响基因表达的核酸序列。其本身并不编码蛋白质
反式作用因子:通常为蛋白质或RNA,其特征是可以合成并扩散到目标场所发挥作用 正调控:控制因子通过与启动子原件结合来激活基因的表达 负调控:抑制物与操纵基因结合起来阻止基因表达 P248 操纵子的结构
P249图
P250 图
启动子:是RNA聚合酶和CAP的结合位点,控制着转录的起始,一个启动子可以启动多个基因的表达
操纵基因:DNA上的一个结合位点,阻抑物能与之结合抑制相邻启动子的起始转录,操纵基因不表达任何东西 终止子:控制转录结束
转录因子:转录起始过程中RNA聚合酶所需要的辅助因子
转录水平的调控:1)DNA的结构
2)RNA聚合酶的功能
3)蛋白质因子及其他小分子配基的相互作用