细胞计数(推荐)

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第一篇:细胞计数(推荐)

细胞计数

注意事项:

1.最大的计数量程是107,如果超过量程考虑十倍稀释后计算

2.焦距的调节对于计数的影响较大,需要反复调节不同的小窗口来确定。

3.如果焦距不精确,可能增加死细胞的数量。

第二篇:微生物细胞数量的显微镜直接计数法

南京林业大学实验报告

食品科学与工程专业1201091年级120109112姓名:马天柔日期:2014/04/20 实验六 微生物细胞数量的显微镜直接计数法

一.实验目的:

掌握实用血球计数板进行微生物细胞数量的计数办法。

二.实验器材:

显微镜,血球计数板,盖玻片,酵母菌悬液,滴管。

三.实验方法:

1.将细胞悬液加适量的无菌水充分混匀并稀释至每小格约有5-10个菌体为宜。2.制片:

先将血球计数板和盖玻片用纱布或绸布擦干净后,把盖玻片盖在计数板的刻度上,用滴管取少量稀释的菌体从盖玻片的一端注入,使菌液沿两玻片空隙间渗入,注意不可有气泡产生,用吸水纸吸干沟槽中流出的多余菌液,切勿将盖玻片抬高。3.镜检计数:

静置几分钟后,将血球计数板置于载物台上,先用低倍镜找到计数室所在位置,然后转换成高倍镜进行计数,按对角线方向数5中格即80小格,计数每一小方格细胞的平均数。由于菌体细胞在血球计数室中处于不同的位置,要在不同焦距下才能看到,因为要求观察时要不断调节微调螺旋,防止遗漏,如菌体细胞位于小格的线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以减少误差。4.结果计算:

每小格的室容积=(1×1×0.1)/(16×25)=0.1ul/400 计数:数5个中方格(80个小格)每小格的平均细胞数=A/(5×16)=A/80 每ul细胞数=(A/80)×4000 5.清洗:

血球计数板用完后,一定要用清水冲洗干净,晾干后保存,注意不可用粗糙物品擦中央平板,以免损坏小格刻度。

用血球计数板在显微镜下直接计数微生物细胞的数量是一种比较方便而快速的计数方法,但只能测得微生物细胞的总数,分辨不出活细胞还是死细胞。

四.实验结果:

每小格的室容积=(1×1×0.1)/(16×25)=0.1ul/400 计数:数5个中方格(80个小格共有406个)每小格的平均细胞数=A/(5×16)=A/80=406/80≈5.075 每ul细胞数=(A/80)×4000=20300 五.心得体会:

1)取待测稀释菌悬液像血球计数板加样前,必须将菌悬液充分摇匀; 2)加样过程中,应避免将菌液滴在盖玻片;

3)由于菌体在计数室中处于不同空间位置,须在不同焦距下才能观察到,故观察时续不断调节微调,计数菌液中全部菌体,尽量避免遗漏。

第三篇:白细胞计数实验报告

白细胞计数和分类

目的:掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、原理:各种白细胞必须经过染色,才易于区分其类别。常用者为瑞氏(Wright’s)染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。测定外周血液中各种白细胞的相对比值,以观察其数量、形态和质量变化,通过显微镜观察染色血涂片,计算血液中各类白细胞的百分率,称为白细胞分类计数。利用白细胞总数和各类白细胞的百分率,即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。

实验器材: 香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针 1ml刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。20ul刻度移液管、推片

实验步骤

白细胞分类

1.血片制作:

取一滴血,滴于洁净无油脂的玻片一端。左手持玻片,右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。将推片边缘置于血滴前方,然后向后拉,当与血滴接触后,血即均匀附在二玻片之间。此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。推时角度要一致,用力应均匀,即推出均匀的血膜(血膜不可过厚、过薄)。将制好的血涂片晾干,不可加热。

注:(1)良好涂片标准:

1)呈头、体、尾舌形 2)血膜厚薄适宜 3)两边留有空隙

(2)涂片好坏与下列因素有关: 1)血滴大小

2)推片与玻片之间角度 3)推片速度

2、血涂片的染色步骤:

(1)用蜡笔在血膜两端各划一道线,以免染料外溢,置涂片于染色架上。

(2)滴加瑞氏染液,共计七八滴数,以盖满血膜为度,静置1分钟。

(3)再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液,轻轻摇动,并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀,静置15分钟。

(4)用清水冲洗。切勿先倾去染液再冲洗,否则沉淀物附于血膜上不宜出去。冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。或先用滤纸吸取水分迅速干燥,即可镜检。

3、白细胞分类计数:先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处(一般在体尾交界处),在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数,计数移动时避免重复。根据所见到的100个白细胞,记录各种白细胞所占的百分数。

4、各类白细胞的形态特征

嗜中性白粒细胞:圆形,胞浆淡红色,胞浆内有多量紫红色细小颗粒(染色不佳时则看不清楚)。核为蓝紫色。

嗜酸性白细胞:大小、形态与中性白细胞大体相似,唯胞浆内含有粗大的鲜红色颗粒。核多数为两叶。

嗜碱性白细胞:大小、形态与中性白细胞大体相似,但胞浆内含有粗大的深蓝色,常遮盖在核上。核分叶不明显

淋巴细胞:分大小两种,小淋巴细胞圆形,核染成深紫色,圆形或肾形,胞浆很少,常呈一小片月牙状,染成蓝色。大淋巴细胞,核圆形或肾形,胞浆相对较多,染成天蓝色,在胞浆与核之间有淡染带。有时内含少数紫红色大颗粒。

单核细胞: 核染成紫色,其染色质疏松,核形不规则。胞浆较多,染成浅灰蓝色 白细胞计数

加稀释液 用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。

吸取血液 用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul,擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次

混匀 冲池 将试管中血液与稀释液混匀,待细胞悬液完全变为棕褐色

再次将小试管中的细胞悬液混匀。用滴棒蘸取细胞悬液1滴,充入改良Neubauer计数板的计数池中,室温静置2-3min,待白细胞完全下沉。

计数 在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞总数

计算

白细胞总数 =4大格白细胞数(N)/4×10 ×20 ×10^6

= N÷ 20 ×10^9/L

注:计数板上下各一个计数池计数区域分为9个大方格,四角的大方格各划分为16个中方格,中央大方格划分为25个中方格。四角的大方格为白细胞计数区,大方格四边压线细胞计左不数右,计上不数下

实验结果

白细胞总数

白细胞=(35+42+39+37)/20*10^9=7.65*10^9/L 中性粒细胞65个,占65%

单核细胞5个,占5% 淋巴细胞:27个,占27%

嗜酸性粒细胞3个,占2% 嗜碱性粒细胞1个,占1%

注意事项

1、.采血时针刺深度必须适当,不能过度挤压,防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。

2、白细胞总数在参考范围内,大方格间的细胞数不得相差10个以上,两次重复计数误差不得超过10%。

3、按一定顺序移动视野。

4、染色时切勿使染液干涸,否则发生不易去掉的沉淀。

5、水冲洗时间不宜过长,否则会脱色。

6、血涂片不可过厚 思考题

1.白细胞核不着色可能是因为操作中那种误差引起的?

第四篇:古人计数案例doc

《古人计数》教学设计

教学内容:北师大版一年级数学上册第七单元《加与减

(二)》第一课时。教学目标:

1、能正确地数出数量在11~20的物体个数,知道这些数是由几个十和几个一组成,初步认识“十位”、“个位“,了解进制。

2、通过引导学生操作数学模型的活动,培养学生的动手能力,丰富学生的数学感知。

3、了解数的起源以及数的符号化经历,培养学生的学数学的生活意识。教学重点:使学生认识11~20各数,理解11~20各数的组成。教学难点:对数位的理解。教学过程:

一、复习旧知,引出新知 师:孩子们,我们已经学过了1-10这些数,今天我们来学习一些新的数。(板书:11~20各数的认识)

师手指着标题问:这11~20中间这条短线表示哪些数?(生口述)

师出示11~20的卡片:11~20中间的数都藏这张卡片中,大家仔细观察是不是刚才他说的这些数呢?(师将卡片贴在黑板上)让我们一齐来读一读吧!

(设计意图:尊重学生原有的认知基础,从实际出发,通过读出11~20这些数,让学生感觉到今天要学习的内容并不陌生。)

二、情境引入,展示认知

师:大家读得可真好,看来,你们对这些数并不陌生。接下来老师也想给大家讲一个和数有关的小故事,你们愿意听吗?在很久很久以前的古时候,人们并不认识数,他们在记录物品的数量时,就摆一些小木棍或者是小石头。(演示《古人计数》的主题图)今天,我们也来学习古人用小棒来记录羊的只数,好吗?为了方便大家记录,这些羊都关在羊圈里,老师放一只羊,你们就摆1根小棒,老师再放一只羊,你们就摆几根小棒?(生口答:再摆一根)如果老师放2只羊,你们就要摆几根小棒?(摆2根)老师这儿也有小棒,谁愿意上来摆一摆?(指名1人)准备好小棒了吗?老师可要放羊了。(师环视确认学生准备好后再开始)

展示学生摆小棒的结果,师:让我们一起来数一数他一共摆了多少根(生齐数:11根)师鼓励:你们的眼睛和小手配合得可真好。

(设计意图:学生用一一对应的方法数出羊的只数,让学生体会到数学知识来源于生活,提高学生学习数学的生活意识。)

师:以前我们只学到了10这个数,可是,现在羊的只数比10还多,所以,我们就要学习一些新的数。

三、引导探究,建立模型

1、认识“10个一就是1个十”

老师要变魔术了,小眼睛看好了(拿掉一根小棒)问:现在有多少根小棒?(10根)师:你们没数呀,是怎么知道的?(生:11根减掉1根就是10根)师:老师告诉你们,1根小棒就表示1个一,那10根小棒表示几个一?(生:10个一)

我们来数数好吗?(演示课件生齐数)

师:10个一是几?(生:是10)师相机板书:10个一

师:现在老师把这10个一捆成一捆(演示课件)变成了1个十,这1个十 是几?(10)

师:10个一是10,1个十也是10,那我们能不能说,10个一就是1个十?(能)

师相机板书后,指名学生读这句话,再齐读。

师:你们想不想也捆出一个十来?(想)在捆之前,老师想采访一下同学:要捆出一个十,得先怎么做?(数出10个一)然后呢?(捆起来)开始。

师巡视,并提醒:还不会用皮筋的同学可以请同桌帮忙。

(设计意图:初步培养学生动手操作的能力,让学生体验获取数学知识的过程;同时,又让学生在合作中体验快乐,进行合作学习的启蒙教育。)

2、介绍计数器,初步建立数位的概念

下面老师要为大家介绍一位新的学习伙伴,(出示计数器)它叫计数器,请跟老师说一遍。计数器有两面,后面的珠子是计数用的,这些珠子可不能乱拨哟,不同位置上的珠子表示的意思是不一样的,我们学了这一课之后就会明白。那都有哪些位置呢?(师指着计数器的数位读:个位、十位、百位)这些叫数位。在使用计数器时,要把写有数位的这一面正对着我们。请孩子们检查一下自己的计数器是否摆放正确。

(设计意图:尊重学生的年龄特征,“蹲下来,等一等”,既让学生学会正确使用计数器的方法,又为达成教学目标做好准备。)

(在黑板上画一个计数器,边画边说)从右边起,第一位叫个位,第二位叫,第三位叫百位,现在我们还是一年级的学生,只要认识个位和十位就可以了。个位上有几个珠子就表示几个一,十位上的几个珠子就表示几个十。

师示范拨5。生仔细观察,说说老师在什么位上拨?拨了几个?表示几? 学生学着拨5、6、7 一齐拨出10个一。师:刚才我们用小棒把10个一捆成一捆变成1个十,那能不能把10个珠子串成一串也变成1个十呢?

师边演示边问:这变成的1个十该在计数器上如何表示呢?(引导学生明白:在十位上拨1个珠子就表示1个十)

请孩子们在计数器上把10个一变成1个十拨给同桌看。

师再用课件演示一遍。指名在黑板上画珠子表示1个十,评议后,师标出10这个数学符号。并让学生明确,个位上一个也没有就用0表示。

(设计意图:突出小棒——计数器——数学符号之间的联系,让学生经历数学知识由具体形象到逐步抽象的过程。)

3、体会数的组成

还记得刚才我们数了几只羊吗?(11只)谁能用小棒快速地拿出11。请同学说为什么这样拿。(1个十和1个一,合起来就是11)师相机演示课件。

你们能在计数器上拨出11吗?生拨珠子,再请学生展示。集体评议后,师:这2个1表示的意思一样吗?

看来呀,不是珠子神奇,而是数位太重要了,不同的数位表示的意思是不同的。

小游戏:比比谁最快:用小棒拿出13、17、19,指名说为什么这么拿,体会数的组成。

(设计意图:教学进行到这儿时,一年级的孩子已经会出现很大程度的疲劳,适时设计一些竞赛的小游戏,能激发学生的学习兴趣,这是符合低年级学生的心理特征的,同时又巩固了数的组成。)

4、初步感受“满十进一”

师板演19,这时师再添1根小棒问:现在是几?你怎么知道?

师手指着散的10根问,有没有同学要提醒老师又得干嘛了?(又满十个了要捆成一捆)

师动手捆,问:现在是几捆,也就是几个十?(2个十)2个十是几?(20)师相机板书:2个十是20。生齐读

你们能在计数器上拨出20吗?生动手拨珠子。集体评议 师特别展示拨得不对的,说说为什么拨的不对,应该怎么拨

(设计意图:在师生与生生的交流中,培养学生说和听的学习习惯。)

四、开放练习,提高认识

1、书本第75页练一练的第1、第2题。集体评议。

2、孩子们,你们还记得吗?刚才我们就用2个珠子在计数器上表示了11,又用2个珠子表示了20(相机演示课件),谁还能在计数器上用2个珠子表示不同的数呢?

(设计意图:开拓学生的思维,培养学生的创新意识,并让学生进一步体会到不同数位上的数表示的意义是不同的。)

第五篇:《古人计数》教案

《古人计数》教案

教学内容

古人计数(教材74页)。

教学目标

1、在具体的操作活动中,让学生认、读、写11~20各数,掌握20以内数的顺序,初步建立数位的概念。

2、培养学生能够准确地用数学语言对概念进行表达的能力。

3、培养学生勤于动手和勤于动口的习惯。

教学重难点

11~20这些数的个位和十位上各数的含义是重点;对“数位”的理解是难点。

教学方法

实物演示法。

课前准备

小棒,计数器。

教学过程

同学们,你们看,老师今天给大家准备了这么多精美的礼品,一会儿将把它们奖给今天表现最好的那些同学,我们来看看老师准备了多少个奖品。(师生一起数,个数大于10)咦?这大于10的数该怎样表示呢?今天我们就来研究一下。

一、活动一:建立数位概念。

数一数,有几只羊,用小棒代表羊的只数,需要几根小棒?(课件:主题图)

1、数小棒。

2、一根一根数,有10根小棒,也就是10个1。现在我们把它捆成一捆,它就成了1个十。

3、学生自己数出10根小棒,并将10根捆成一捆,体会10个一就是1个十。

4、让学生再拿出1根小棒。(1)现在是几根小棒?

(2)它是由什么组成的?(是由1个十和1个一组成的)(3)它里面有几个十和几个一?(它里面有1个十和1个一)

5、介绍计数器及数位。

(1)从右边起,第一位是个位,第二位是十位,十位上的1就表示是10。

(2)让学生在计数器上拨出11。一边拨一边说:“在个位上拨几,在十位上拨几。”(3)同样的方法让学生学会数、认、读、写12~20各数。

二、活动二:快速拨数。

1、师生互练。

(1)教师说数,学生快速在计数器上拨出。(2)说一说它的含义及是怎么拨的。

2、生生互练。

一人说数,另一人拨出,并说一说。两人互换再练。

三、活动三:对口令。

1、师生互对。

例:教师说16,学生对1个十和6个一。教师说1个十和7个一,学生对17。

2、生生互对。

四、活动四:填、读尺子上的数。(课本75页试一试第一题)

1、出示图片:写一写,师生一起将尺子上的数补充完整。

2、教师提问:

(1)比15小比11大的数有那些?(2)17的前面是几?后面是几?(3)你还能提出那些数学问题?

五、课堂小结。

同学们,今天我们学习了古人计数,那么谁来总结一下我们今天具体学习了哪些内容呢?(先点名回答,教师补充)

六、作业布置。课本练一练

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