2015年污水处理站菌种驯化方案

第一篇：2015年污水处理站菌种驯化方案

南宁良庆东糖糖业有限公司

2015/2016榨季污水处理站菌种驯化方案

污水处理菌种驯化方案是利用公司污水处理系统在上榨季生产后遗留在氧化沟里的淤泥进行驯化调试，指导规划菌种调试工作展开，争取在短期内完成菌种驯化和系统调试工作，渐进正常的污水处理系统运营阶段。

一、菌种培养前的准备工作

1、菌种驯化前，污水处理系统的各种电器、机械、管路等设备联动试机要全部正常运行，并且可以投入使用。

2、均衡池、氧化沟、二沉池要达到设计负荷90%以上水量。

3、PLC各控制系统正常。

4、具备充足的基料（废糖、废蜜）提高氧化沟COD浓度，根据处理水质状况备足必需的营养物（尿素、磷酸三钠）。

5、化验室具备检测水质条件；包括（COD、PH值、污泥浓度，如有条件对水质总氮、总磷进行监测。

6、人员到位，落实具有独立基本操作人员，自培养和驯化后一般应使系统连续运行，不能脱人。

二、驯化与启动

驯化是利用氧化沟原有淤泥驯化期间，必须满足微生物生命所需的各种条件。一是保证足够的溶解氧和保持微生物食微比和营养物平衡；二是水温和PH值要在最适范围内（水温20-30℃，PH值保持6-9之间）；三是有机负荷要由低而高、循环渐进。培菌驯化初期每日要对氧化沟混合液的污泥浓度、污泥指数、溶解氧含量进行分析，同时检测水质的COD、PH值、SS并且做好泥观镜检记录等指标，根据检测结果及时加以对工艺调整。

1、污水处理菌种驯化采用间歇驯化方式，将氧化沟灌注水量设计达到90%负荷后，停止进水，开始启动表曝机进行闷曝，闷曝期间化验项目指标进行分析，闷曝数天后，停止曝气，静置沉淀1-1.5小时后，然后排出池内约1/5的上层废水，并注入相同等量的新鲜污水，如此反复进行循环闷曝、静沉和进水三个过程，但每次进水量应比上次有所增加，而每次闷曝时间应比上次缩短（具体视驯化情况再进行调节）。采用间歇法经过培养10-15天左右，观察氧化沟混合的污泥沉降比（SV）达到15%―20%左右，就可连续进水和曝气，并且对二沉池的污泥开始回流，最初污泥回流量应当小些，可以按设计25%左右进行回流，当污泥浓度达到工艺所需的浓度后，即可开始正常运行，按工艺要求进行控制。

三、溶解氧控制

闷曝期间溶解氧要灵活控制，在污泥浓度较低的调试设备比较高，表曝机全开在短时间内溶解氧从0.00mg/L提到4.00mg/L.因此在此阶段密切监控溶解氧的变化，根据实际变化调整表曝机的开机数量。

四、剩余污泥控制

当污泥浓度接近或达到一定要求时（按1000 mg/L-2000 mg/L，实际视系统处理负荷状况决定）是否需要进行排泥，以便系统正常运行。在运行初期，由于生产情况未能掌握处理情况，应采取间歇排泥方式，应根据目前系统运行情况排泥，然后根据污泥浓度变化逐步调整。

污水处理总体进程从公司生产实际情况出发，在此菌种驯化方案中，一切实际出发应做到切实、可行和调整。

五、具体人员安排由制炼车间负责；菌种驯化时间从2015年12月1日开始执行。

生产技术科

二〇一五年十一月二十四日

第二篇：微生物实验菌种保藏方案

一、石蜡油低温保藏法

本方法的原理是在长好的斜面菌上覆盖灭菌的液体石蜡，达到菌体与空气隔绝，使菌处于生长和代谢停止状态，同时石蜡油还防止水分蒸发，在低温下达到较长期的保藏菌种的目的。保藏温度要求在-4～4℃下。液体石蜡法适用于不产孢子的菌种。具体操作是：菌种为斜面培养菌种，斜面不宜过长；选择纯净优质石蜡油，置三角烧瓶中经过121℃高压蒸汽灭菌1～2h，将其放烘箱中(160℃左右)干热处理，去除灭菌时渗入的水分，待石蜡油变得清澈透明后冷却即可加入斜面，斜面上不能出现气泡，液蜡添加量以高出斜面顶部约1cm为宜。

二、甘油管冷冻保藏法

1．试验方法介绍本法也是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。其方法是，将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液(108～1010/ml)。取1ml灭菌甘油放入与甘油充分混匀，使甘油浓度约为10%-30%，于-70℃下冻存。-20℃保存时间较短。或采用体积比为8：2的甘油－生理盐水，加入新鲜培养的菌体肉汤，混合均匀后至-20℃冰箱保存。

2．效果该法适用于一般细菌的保存，同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种，适用范围广，操作简便，效果好，无变异现象发生。甘油－生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液，其原因可能是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用，且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分，从而更好地保护了待保存的菌株。

三、真空冷冻干燥法

1．试验原理

真空冷冻干燥保藏法是兼具低温、干燥、除氧三方面菌种保藏的主要因素，除不宜于丝状真菌的菌丝体外，对病毒、细菌、放线菌、酵母及丝状菌孢子等各类微生物都适用，不宜用冻干法保存的微生物不到2%。冷冻干燥法是在低温下快速将细胞冻结，然后在真空条件下干燥，使微生物的生长和酶活动停止。为了防止在冷冻和水分升华过程中对细胞的损害，要采用保护剂来制备细胞悬液，使菌在冻结和脱水过程中起到保护作用的溶质，通过氢键和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。即是使样品中的水分在冰冻状态下，抽真空减压，使冻结的冰直接升华为水蒸气，使样品达到干燥。干燥后的微生物在真空下封装，与空气隔绝，达到长期保藏的目的。

2．试验步骤

1）安瓿管准备选取规格约直径为8mm，高100mm的中性玻璃安瓿管，先用2%盐酸浸泡8～10h，再经自来水冲洗多次，用蒸馏水涮洗2～3次，烘干；在每管内放入打好菌号及日期的标签，字面朝向管壁，管口塞好棉塞，灭菌备用。

2）保护剂的选择及制备冷冻干燥保藏法使用的保护剂种类很多，效果不尽相同，通常采用高分子化合物与低分子化合物混合使用效果更好。在配制时注意比例、浓度、pH和灭菌方法。一些对热敏感的保护剂如血清等用过滤除菌，牛奶、葡萄糖及乳糖等要控制灭菌温度。一般情况下，多数菌种可以用脱脂乳糖等要控制灭菌温度。一般情况下，多数菌种可以用脱乳为保护剂。

3）菌种准备及分装菌种要求为生长良好的纯种，菌龄以处于稳定期为好，孢子是新鲜的。每支长好的斜面加2～3ml保护剂，用接种环将菌苔轻轻刮起(注意勿刮起培养基)，制成菌悬液。如用液体培养的菌种，则需经离心收集和用灭菌生理盐水洗涤细胞，收集的菌体用保护剂悬浮制成菌悬液。悬液中菌数要求达到108～1010cfu/ml为宜。悬液制备完成尽快分装和冻结。分装安瓿时可用灭菌的长滴入安瓿管底部，装量可依据冷冻干燥机效能而定。

4）预冻分装好的安瓿管需要进行预冻，即放在-30～-40℃下冻结20～60min，也可以用干冰和无水乙醇冻5～10min。

5）冷冻干燥经预冻的安瓿放入干燥箱中开始抽真空干燥。此时干燥箱温度控制在-30℃以下，并尽快使真度达到66Pa以下。此后可还渐升温以加速水分升华，但升温不宜过快，以

免引起样品融化。干燥时间视冻干机效率、样品装量及性质等而定，以样品最终水分含量达到1%～3%为准。具体操作时是根据冻干样品呈酥块工松散片状；真空度接近空载时最高真空；样品温度与管外温度接近。

干燥完毕将安瓿管在真空下用火焰烧熔密封，并用高频真空检测真空度。

6）保藏及冻干管的启用密封好的冻干管在4℃或-18℃下保藏。当需用冻干菌种时，取出安瓿管用酒精表面消毒，用小砂轮在无菌条件下打开，或将安瓿顶部在酒精灯火焰上灼烧，迅速滴上冷的无菌水，使管破裂，然后用镊子等轻轻敲碎管口，加入0.3～0.5ml液体培养基溶解冻干菌块成为悬液，用无菌滴管或接种环移至斜面或液体培养基进行培养。

7）影响菌株生长因素

①菌的质量：保藏的菌种应培养在营养丰富的最适条件下，使之进入稳定期，稍老一些的菌体对环境抵抗力强。另处，作为冷冻干燥的菌悬液细胞浓度要高不同的菌对冷冻干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液细胞浓度不高，就会使以后传种造成困难，保存期也会受到影响。

②保护剂：不同种类的保护剂对不同微生物的作用是不同的，如个别菌种在脱脂乳作保护剂的情况下死亡率高达99.99%，而采用葡聚糖等混和保护剂时死亡率大大减少。一般情况下，那些容易保存的菌种对保护剂的要求不很严格，而不易保存的菌种对保护剂的要求却很苛刻。因此，选择好的保护剂是冷冻干燥保存菌种的关键因素。

③干燥速度：实验表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率为67.3%，而3h为59%。

④空气的影响：冷冻干燥后空气对细菌细胞影响较大，可导致细胞损伤进而死亡，故在冻干后应立即在真空下融封，才有利于长期保存。

⑤温度的影响在干燥和真空状况下温度的影响远没有上述几项因素重要，因此可以在室温下保存，但许多微生物在4℃保存的存活率要比在室温下高1倍。⑥含水量的影响：水分含量过高对菌存活不利，完全脱水也不利于保存，一般把干燥后的细胞含水量控制在3%以下(1%～3%)。⑦复苏培养：打开安瓿管后加入无菌水使 冻干菌融化，融化速度慢比快速融化的成活率要高。

菌种能否适宜于冻干保存，需经过实验来证明，一般是在保存1个月进行复苏培养，如果菌的成活率高于10%，即认为可用冻干保存法保存，以后6个月、2年、5年、10年再进行检查存活情况，以确定保存期的上限。

冻干保藏的效果因微生物种类而异，一般是细菌＞放线菌＞真菌＞藻类，而菌丝体不宜用此法保存。

3．试验效果冷冻干燥保存的菌种存活时间长、效果好，一般菌种可保存5年以上，有的可保藏15年以上不发生变异。还具有体积小、不易污染、便于运输等优点，是一种用得最为广泛的菌种保藏方法。

4．试验仪器及试剂冷冻干燥备有不同型号和类型，但都由四个部分组成：干燥箱、蒸汽捕集器、真空泵、冷冻系统。干燥箱可控制温度范围为-40～40℃。

四、液氮超低温保存

1．试验原理本方法是近年推广使用的一种菌种保存法。大多数微生物如病毒、噬菌体，立克氏体，各种细菌、放细菌、支原体，各种丝状菌、酵母、藻类和原虫，特别是一些无法用冻干保存的微生物，都可用此法长期保存。工业微生物高产菌种也逐步采用此法保存。液氮保存的原理是微生物在-130℃以下温度时，它的新陈代谢作用停止，化学反应也消失，而液氮温度可达-196℃，在这种情况下可以长期保存。

2．试验步骤

1)安瓿管准备一般要求用95%料或GG17的玻管制作，以能承受巨大的温差变化而不破损，大小根据需要而定。用印同在管壁上书写菌号，160℃烘干，加棉塞灭菌备用。

2)菌种准备在最适培养基斜面上培养得到健壮菌种，制成悬浮液，如为不产孢子的真菌，则采用斜面或液体振荡培养，制成菌丝片段。将菌悬淮分装至灭菌安瓿管中，每管0.2～0.5ml，然后用火焰将安瓿熔封。

3)冻结将熔封后的安瓿管入大慢速冻结器上，以每分钟下降1℃的速度冷冻，当安瓿管温度下降至-35℃时，即可把安瓿管移入液氮内作长期保藏。

4)菌种的复苏培养直至全部溶化为止，当溶化后即开启安瓿移至培养基内培养，扣作时应特别注意安全，防止爆炸或冻伤，不宜戴线手套，要戴皮手套操作

3．试验仪器及试剂

1）保护剂与冷冻干燥保存一样，液氮保存菌种也需要有保护物质，可以用10%的甘油，使用方便、效果好，但有些菌对甘油敏感，效果不佳，可选用其他保护剂，常用的有5%～10%(V/V)二甲基亚砜；20%二甲亚砜加1%蛋白陈；吐温80及0.4mmol聚乙烯氮戊环等，糖类也可作为一种保护剂，但浓度适当加以控制。

2）液氮罐

第三篇：生化污泥驯化方案[小编推荐]

生化污泥驯化方案

氧化池

根据目前车间排水水量：，排水指标，做出以下污泥驯化方案：

1、生化污泥投加量：

根据设计进水量400m3/d，进水COD按1600mg/L，生化池有效体积210m3，活性污泥有机负荷F/M按0.2，则正常运行时污泥的浓MLSSQCODFMVa度MLSS为：40016000.2210

15238mg/L1523821010003换算成脱水污泥(按含水率80%计算)量为：

V80%

4m接种调试投加量为V/2，即2m3，污泥浓度可达7.5g/L。

2、污泥驯化：

目前水温低于15℃，不利于生化污泥的培养，初步拟定驯化时间30天左右，具体驯化过程如下：

1)因现生化池中已进满污水，将污泥投加后，对其闷曝3天(即：不进水，每天24小时连续曝气)；

2)根据现场出水情况，若3天后，出水COD去除率达40%，则从第四天开始实行每天进水100m3（每5小时进水1小时）,24小时连续曝气，持续10天（即：第四天至第十三天）;

3)从第十四天，对生化池实行每天增加进水量30m3,24小时连续曝气，持续十天；

4)第二十五天开始为稳定生化系统期，实行满负荷运行，24小时连续曝气，持续7天。

鉴于现场对污水各指标检测条件的实际情况，其他方面按驯化实际情况进行变更。

第四篇：污水处理整改方案

贞丰县挽澜乡岔河联营煤矿 环保自查自纠隐患

整改方案

矿 长：黄世超 总工程师：赖根华 编 制 ：赖根华 编制时间：2017年5月17日 岔河联营煤矿环保自查自纠隐患整改方案

我矿于4月28日进行了环保隐患自查活动，查出井下污水处理隐患共计1条。

针对查出的隐患，我矿于当日成立了隐患整改领导小组，根据“五落实”原则制定了如下隐患整改方案：

一、隐患整改领导小组 组

长：陈金祥（总经理）副组长：黄世超（矿长）

成员：、赖根华（总工）

赵贤军（生产矿长）许杰华（安全矿长）

赵必卿（机电矿长）李定荣（环保员）

刘涛（环保员）张增飚（机修）

1、职责：

隐患整改领导小组具体负责隐患整改工作及资金投入、人员组织及调遣、整改方案及措施的制订、实施情况的督促、并收集整理隐患整改工作过程中的相关资料。

2、分工：

陈金祥

全面负责隐患整改工作，包括隐患整改工作的资金、设备购置及人员调配等。

黄世超

在总经理授权、指导下，负责隐患整改现场的全面统筹、指挥工作。

成员

在副组长指挥下，整改各项具体隐患，对各安全隐患整改工作进行具体落实。

三、查出的环保隐患及整改措施

1、井下污水处理池沉淀物未及时清理，影响污水处理效果。整改措施：在副井增建一个污水沉淀池，现有沉淀池及时清理沉淀物，并将沉淀物运至指定地点进行无害化处理。

负责人：李定荣 陈友书 整改期限：2017年5月26日 整改资金：2.2万元

第五篇：污水处理整改方案

伊川县妇幼保健院 污水处理系统整改方案

医院污水处理时医院控制院内感染的重要环节之一，是医院的重要组成部分，规范医院污水处理设施，严格做好医院污水的消毒与检测，保证医院污水达标排放，对提高医院医疗服务质量，保障人体健康具有极其重要的意义。由于我院住院病人的增加，经环保局检查后，原有污水处理系统已经不能满足污水处理的需要，我院领导对此非常重视，特意委托洛阳市绿环环保工程有限公司设计了一套污水整改方案，预计近期内改装并投入运行，报告如下：

一：整改后设计参数

1、原水性质：医院污水

2、设计处理量：60张床位，1吨每小时

3、处理后污水排放达到《医疗机构水污染物排放标准》GB18466-2005中相关要求。

二、整改工艺设计特点

根据医院水质特点，采用生化+消毒的工艺处理医院污水。具体流程为：调节池—酸化池—生化池---沉淀池---消毒池---排放

三、整改后处理流程介绍

1、调节池

用格栅去除大块悬浮杂物，保护水泵叶轮，避免堵塞。同时均衡水量水质，使处理效果更稳定。

2、酸化池

酸化发酵，使污水中难降解的有机物转化为易降解的有机物，提高废水可生化性，以利于后期处理

3、生化池

生化池中的微生物利用酸化的有机物，分解后进入下一环节

4、沉淀池

去除悬浮物，进入消毒池。

5、消毒池内加入二氧化氯消毒剂，杀灭水中的大肠杆菌、结核菌、病毒等，并且可以防止池内清水二次变质。

四、整改完成后我院成立专门的污水处理领导小组，定期检查督导。同时有专人负责污水处理系统的正常运转。

伊川县妇幼保健院 2010年7月12日