实验室常用的细菌作用及其选择5篇

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第一篇:实验室常用的细菌作用及其选择

第一篇:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别 1:DH5a菌株

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1

2:BL21(DE3)菌株

该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)

3:BL21(DE3)pLysS菌株

该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS,Camr

4:JM109菌株

该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株

基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]

5:TOP10菌株

该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F-,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1,araΔ139Δ(ara-leu)7697,galU,galK,rps,(Strr)endA1,nupG

6:HB101菌株

该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验

基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1

第二篇:JM110或 SCS110 大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。常用的菌株都会产生dam,dcm,从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。

大多数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响,如XbaI, BclI等。而且甲基化只发生在特定序列,以XbaI为例,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。

而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法:

(1)选用上述酶的同功酶,如Sau3AI,DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲基化影响;

(2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备,如E.coli JM110和链霉菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。

E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110

如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化.第三篇:各种感受态细胞的区别 用途 特征 Xl1-Blue菌株

基因型:endA1 gyrA96(nalR)thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK-mK+)。

特点:具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。用途:分子克隆和质粒提取。

BL21(DE3)菌株

基因型:F– ompT gal dcm lon hsdSB(rB-mB-)λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5])。特点:该菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。用途:蛋白质表达。

BL21(DE3)ply菌株

基因型:F-ompT gal dcm lon hsdSB(rB-mB-)λ(DE3)pLysS(cmR)。

特点:该菌株带有pLysS,具有氯霉素抗性。此质粒还有表达T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能够降低目的基 因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达。适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。

用途:蛋白质表达

DH5α菌株

基因型:F-endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, λ–

特点:一种常用于质粒克隆的菌株。其Φ80dlacZΔM15基因的表达产物与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和 endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。

JM109菌株

基因型:endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proA e14-[F‘ traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]hsdR17(rK-mK+)。特点:部分抗性缺陷,适合重复基因表达, 可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。

用途:分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。

第四篇:

E.coli Electro-Cells E.coli Electro-Cell JM109

制品名 TaKaRa Code 包装量 价格(人民币元)E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set(50 μl×10支)300 ■ Genotype E.coli JM109 recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17, supE44, relA1, Δ(lac-proA/F'[traD36, proAB+, lac Iq, lacZ ΔM15]

■ 细胞浓度

1~2×1010 Bacteria/ml

■ 保存-80℃

■制品说明

用高电压脉冲电流瞬间击穿大肠杆菌,从而导致DNA转入大肠杆菌内的转化方法称为电穿孔法。电穿孔法是各种转化方法中效率最佳的方法之一,比Ca2+处理的感受态细胞的转化效率高,在转化少量DNA时,特别能发挥其特有的威力。TaKaRa使用独自开发的菌体培养法,制作出了效果极佳的E.coli Electro-Cell JM109。■细胞种类

α-互补性选择宿主E.coli JM109 E.coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时, 由于载体DNA产生的LacZα多肽和JM109 F'编码的lacZΔM15的结合,显示β-半乳糖苷酶活性(α-互补性)。利用这一特性,可以很容易鉴别重组体菌株。因为具有F'质粒,除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外,也可作为M13载体DNA的宿主,调制单链DNA。

■质量标准

使用10 pg的质粒DNA进行转化时:

μl E.coli JM109 Electro-Cell/10 pg pUC19 plasmid转化时产生的菌落数

>1×109 transformants/1 μg pUC19 plasmid F'质粒的稳定性检测

对E.coli JM109使用pUC19 DNA进行电穿孔法转化后,在含有100 μg/ml的Ampicillin、0.2 mM的IPTG, 40 μg/ml的X-Gal的L-琼脂平板培养基上,产生的白色菌落在1%以下。

μl的E.coli JM109 Electro-Cell在含有100 μg/ml的Ampicillin L-琼脂平板培养基上不产生菌落。

-BL21(DE3)pLysS细菌菌株

BL21(DE3)pLysS细菌菌株可以表达T7控制并核糖体结合位点的高效蛋白表达。BL21(DE3)pLysS对λDE3(1)是溶源性的。λDE3含有T7噬菌体基因I,编码的T7 RNA聚合酶受lac UV5启动子的控制。BL21(DE3)pLysS含有pLysS质粒,他携带编码T7溶菌酶基因。在T7启动子控制下,T7溶菌酶降低靶基因的背景表达但并不干扰由IPTG诱导的表达水平。

包装:

P9811 500μl http://www.xiexiebang.com/tbs/tb095/tb095.pdf

第五篇:JM109,DH5a,BL21感受态有何区别 1:DH5a菌株

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1

2:BL21(DE3)菌株

该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3)

3:BL21(DE3)pLysS菌株

该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal,dcm(DE3,pLysS,Camr

4:JM109菌株

该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株

基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]

5:TOP10菌株

该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

基因型:F-,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC),φ80,lacZΔM15,△lacⅩ74,recA1,araΔ139Δ(ara-leu)7697,galU,galK,rps,(Strr)endA1,nupG

6:HB101菌株

该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验

基因型:supE44,hsdS20(rB-mB-),recA13,ara-14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1

M110或 SCS110 大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。常用的菌株都会产生dam,dcm,从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。

大多数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响,如XbaI, BclI等。而且甲基化只发生在特定序列,以XbaI为例,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。

而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法:

(1)选用上述酶的同功酶,如Sau3AI,DNA识别切割位点与MboI相同;但不受甲基化影响;

(2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备,如E.coli JM110和链霉菌等,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。

E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响,需要用特定的dam-,dcm-的菌株,如JM110

如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒,则不会被甲基化 ============================= 实验室的一般大肠杆菌拥有4288条基因,每条基因的长度约为950bp,基因间的平均间隔为118bp(基因Ⅷ)。E.coli基因组中还包含有许多插入序列,如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段,这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的,由此表明了基因组具有它的可塑造性。

利用大肠杆菌基因组的这种特性对其进行改造,使其中的某些基因发生突变或缺失,从而给大肠杆菌带来可以观察到的变化,这种能观察到的特征叫做大肠杆菌的表现型(Phenotype),把引起这种变化的基因构成叫做大肠杆菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表现出不同的特性。

分子克隆中常用的大肠杆菌及其遗传标记按Demerec等1966年提出的命名原则,采用的菌株所有的基因都假定处于野生型状态,除非在基因型上另外注明。

大肠杆菌基因型的表示方法(Demerec, et, al.1966): 一、一般规则:

1、根据基因产物或其作用产物的英文名称的第一个字母缩写成 3个小写斜体字母来表示。例如:DNA Adenine Methylase→dam。

2、不同的基因座,其中任何一个突变所产生的表型变化可能相同,其表示方法是在 3个小写斜体字母后加上一个斜体大写字母来表示区别。例如:Recombination→recA、recB、recC。

3、突变位点应通过在突变基因符号后加不同数字表示。如 supE44(sup基因座E的44位突变)。如果不知道几个等位基因中哪一 /几个发生了功能性突变,则用连字符“-”代替大写字母,如 trp-31。

4、细菌的基因型中应该包含关于其携带的质粒或附加体的的信息。这些符号包括菌株携带的质粒或附加体、质粒或附加体上的突变基因座和突变位点。其基因符号应与基因座的表示符号明显区别,符号的第一个字母大写、不斜体并位于括号内;质粒或附加体上的突变基因座和突变位点的基因符号的表示方法与染色体上突变基因座、突变位点的符号相同。

5、对于携带附加体的菌株的完整基因型描述应包括附加体的状态(游离或整合)。以 F因子为例,F-:F因子缺失; F+:自主性 F因子,不携带任何遗传可识别染色体片段; F':携带有遗传可识别细菌染色体片段的自主性 F因子;Hfr:整合到染色体上的 F因子(high frequency of recombination)。当这些质粒或噬菌体片段变异或缺失时,用()“或 ”/“等以区别。例如:/F' [traD36、proAB、lac I q、lacZ.M15]

6、某个基因或某个领域缺失时,在其基因型前面加上“ ”表示。例如: lac-proAB基因缺失时它的基因型表示为(lac-proAB)。

7、由于某种基因的变异导致大肠杆菌可以明显观察到特征变化,有时也用其表现型代替基因型进行表示。例如:某些抗药性的获得或丧失,用如下方式表示: Streptomycin抗性→Str +或 Str r,Ampicillin敏感性→ Amp-。(第一个字母要大写,“+”或“r”表示有抗性,“-”表示无抗性或敏感)。

8、根据某些特异性蛋白的变异及其导致的结果变化进行表示。例如:TH2菌株上有一种基因型表示如下:hsdS20(rB-、mB-),其中 S20代表特异性识别蛋白发生变异,()中的 rB-、mB-表示由于 S20的变异而导致 B株来源的 hsdR和 hsdM的功能缺失。

9、蛋白质的名称与对应的基因或等位基因相同,但不用斜体,且首字母大写,如,UvrA、UvrB。

三、主要的基因型说明

1、基因重组相关的基因型 recA(Recombination)

功能:recA基因表达 ATP依赖型 DNA重组酶,它在λ-噬菌体与基因组 DNA的溶原重组时起作用,同时具有对 DNA放射性损伤的修复功能。由 recA基因的变异所产生的基因型使同源或异源 DNA的重组不能进行,保持插入 DNA的稳定性,对 DNA的转化有利。一个菌株的基因型如果是 recA,则说明此菌株的表现型是重组缺陷的。

recB(Recombination)

功能:recB基因表达 ATP依赖型 DNase和核酸外切酶V的一个亚基,对recA的DNA重组酶起辅助和促进作用。DNase催化双链DNA的解旋和解链,核酸外切酶V催化单链DNA的裂解,在DNA的重组和损伤修复中发挥重要作用。recB基因的变异导致其DNA重组和修复功能丧失,保证了外源DNA的稳定,有利于DNA转化。

recC(Recombination)

功能:recC基因表达四种酶,即核酸外切酶V,ATP依赖型的核酸内切酶,解旋酶及ATP酶,它们和recA, recB所表达的酶相互协调作用,在DNA的重组及放射性损伤的修复中发挥作用。recC基因的变异导致DNA重组功能缺失,保证外源DNA的稳定性。

2、甲基化相关的基因型

dam(DNA adenine methylase)

功能:dam基因表达DNA腺嘌呤甲基化酶,它能催化特异序列GATC中A的甲基化,保证DNA免受限制性核酸内切酶Mbo I的切断,同时在 DNA复制时也起一定的辅助作用。dam基因的变异导致腺嘌呤(A)甲基化酶活性的缺失,使腺嘌呤(A)不被甲基化,易于获得非甲基化质粒。

dcm(DNA cytosine methylase)

功能:dcm基因表达DNA胞嘧啶甲基化酶,它能特异性识别DNA双链上的CCWGG序列,并使第二个C甲基化,即CmCWGG,避免 DNA受到相关限制酶的切断。dcm基因的导致胞嘧啶甲基化酶活性缺失,使外源DNA上的C不被甲基化,易于获得非甲基化质粒。

mcrA(Modified cytosine restriction protein a)

功能:mcrA基因表达大肠杆菌防御体系中起重要作用的mcrA酶,这种酶能特异性地作用于外来DNA上的被甲基化的胞嘧啶序列,即 C5mCGG特异序列,使之分解,对大肠杆菌本身起保护作用。mcrA基因的变异,导致上述功能缺失,对外来DNA中被甲基化的胞嘧啶特异序(C5mCGG)失去作用,有利于限制酶及甲基化酶的克隆体的稳定。

mcrB, C(Methyl cytosine-specific restriction)

功能:mcrB, C基因表达两种特异性蛋白,即mcrB蛋白和 mcrC蛋白,它们在大肠杆菌的防御系统中起重要作用。一般情况下,只有这两种蛋白同时存在时才表现出活性,mcrC具有识别和调节功能,它能特异性的结合到外源 DNA上被甲基化的胞嘧啶(C)的特异序列 G5mC上,然后由 mcrB蛋白切断(mcrB蛋白是特异性切断外来 DNA中 G5mC序列的限制性核酸内切酶),防御外来 DNA的侵入。mcrB, C基因的变异,使上述的对外来 DNA的防御作用缺失,对质粒的转化有利。

mrr(Methylation requiring restriction)

功能:mrr基因是大肠杆菌细胞防御系统中重要的基因之一,它能严格限制被甲基化的外源DNA的介入。另外,它对限制酶AccⅠ,CviR Ⅰ,Hinf IⅠ(Hha Ⅱ),Nla Ⅱ,Pst Ⅰ以及 N6-腺嘌呤甲基化酶和C5-胞嘧啶甲基化酶活性有明显的抑制作用。mrr欠损株(基因型)可用于含有N6-mA和C5-mC的DNA的转化。另外,含有此基因型的菌株也可用于限制酶和甲基化酶的克隆体。

hsdM(Host specificitive defective)Map position: 99 min 功能:hsdM基因所表达的DNA甲基化酶是 I型限制酶复合体(具有对 DNA切断和修补的双重功能)的一部分,它能使DNA双链上的AA(双腺嘌呤)甲基化,保护宿主DNA不被分解。hsdM的变异使细胞内的DNA不被甲基化,易于获得非甲基化质粒。

3、点突变相关的基因型 mutS(Mutator)

功能:mutS基因表达的蛋白具有识别DNA上错配序列的功能,并能修复其错配序列(GC→AT),防止基因突变。mutS基因的变异导致DNA的错配序列不能得到修复,容易发生基因突变,这对于利用点突变进行基因改造是有利的。

mutT(Mutator)

功能:野生大肠杆菌在进行DNA复制时,细胞中的8-OXO-dGTP插入模板DNA中的DA位点的效率几乎与插入DC位点的效率相同,导致 A-T转换成 G-C,使DNA产生变异。而mutT蛋白就是特异性地降解8-OXO-dGTP成为单磷酸盐(8-OXO-dGMP),这种单磷酸盐状态的G(鸟嘌呤)不能作为底物进行 DNA合成,从而防止了上述的基因突变。mutT基因的变异使细胞中8-OXO-dGTP浓度增高,A→C的突变几率增大,有利于利用点突变进行基因改造。

dut(dUTPase)

功能:dut基因表达脱氧尿嘧啶三磷酸核苷酸水解酶(dUTPase),它能水解dUTP成为dUMP,使细胞体内dUTP的浓度维持在较低的水平,尿嘧啶(U)就不易掺入到DNA中,避免了基因发生 A→U的突变。dut基因发生突变使dUTPase活性缺失,导致dUTP浓度升高,碱基U(尿嘧啶)极易掺入到DNA中,使其发生A→U的基因突变,有利于利用点突变进行基因改造。

ung(Uracil DNA glycosylase)

功能:ung基因表达尿嘧啶-N-糖苷酶,这种酶能特异性识别DNA单链或双链上发生突变的尿嘧啶残基,并从DNA上水解去除尿嘧啶残基,防止 DNA发生突变。ung基因的变异导致上述功能缺失,有利用点突变。

uvrB(Ultraviolet)

功能:uvrB基因表达核酸外切酶中的b亚基,这种核酸外切酶具有DNA的切补功能,对紫外线损伤的DNA有修补作用。uvrB基因的变异使细胞中核酸外切酶切除变异碱基的活性缺失,有利于点突变。

4、核酸内切酶相关的基因型 hsdR(Host specificity defective)

功能:hsdR基因表达 I型限制酶EcoK(K12株)或 EcoB(B株),在大肠杆菌细胞中起到一种”抗体“的作用,对外来的各种 DNA有严格的限制。HsdR基因的变异导致菌株细胞内的 I型限制酶 EcoK或 EcoB活性缺失,这对于外来基因的导入及质粒转化是有利的。

hsdS(Host specificitive defective)

功能:hsdS所表达的特异性蛋白是 I型限制酶EcoK或EcoB复合体中的一部分,它专门负责hsdR酶和hsdM酶对DNA序列的特异识别。hsdS基因的变异使hsdR和hsdM不能正确识别其作用的特异DNA序列,可以保持插入DNA的稳定性。

endA(Endonuclease)

功能:endA基因表达非特异性核酸内切酶Ⅰ,它能使所有DNA双链解开,在DNA的复制和重组中起重要作用。endA基因的变异将使插入的外源 DNA更加稳定,提取的质粒纯度更高。

5、停止密码子相关的基因型 supE(Suppressor)

功能:supE基因表达的阻遏蛋白与停止密码子UAG结合,使蛋白质合成停止。supE基因发生变异时,不能表达正常的阻遏蛋白,即使遇到停止密码子 UAG,蛋白质合成仍能继续,并使 UAG作为一个密码子来编码谷氨酰胺(Glutamine),从而使发生了琥珀突变(AAG→UAG)的基因对蛋白质表达得以延续,因此称 supE为琥珀突变抑制因子。

supF(Suppressor)

功能:supF基因表达的阻遏蛋白与停止密码子UAG结合,使蛋白质合成停止。supF基因变异时,不能表达正常的阻遏蛋白,即使遇到停止密码子 UAG,蛋白质合成仍能继续,并使 UAG作为一个密码子编码酪氨酸(Tyrosine)。

第二篇:细菌实验室检查项目

细菌室常规检测项目:

一形态学检查(Morphological Examination)

(一)各种染色

1革兰染色(Gram stain):将细菌分为革兰阳性菌如葡萄球菌属,链球菌属等;革兰阴性菌如大肠埃希菌沙门菌,志贺菌等。

2抗酸染色(Acid-fast stain):通过染色将细菌分为两大类:抗酸性细菌和非抗酸性细菌,抗酸性细菌种类较少,如结核分枝杆菌,麻风分枝杆菌等。正常:未见。抗酸染色,找到红色分枝杆菌,及报告“找见抗酸分枝杆菌”,量可以用加号表示:

++++每个视野>10根

+++每个视野发现1~10根

++100个视野发现10~99根

+300个视野发现3~9根

±300个视野发现1~2根

3异染颗粒染色(Metachromatic granula stain):用于检查棒状杆菌。

4墨汁染色(Indian ink negative staining):用背景着色,而细菌本身不着色的染色方法,用于脑脊液中查找新生隐球菌。正常:未见。

5鞭毛染色(Flagella stain):鞭毛的数目和位置随细菌种类而不同,可分为周毛菌、单毛菌、双毛菌和丛毛菌,是细菌分类和鉴定的重要依据。如霍乱弧菌是单鞭毛菌。

6荚膜染色(Capsules stain):荚膜是细菌壁外一层粘液性多聚物,赋予致病菌的侵袭力。染色将荚膜染成与菌体不同颜色,可作为细菌鉴定的依据。如肺炎链球菌。

(二)涂片检测(smear)

1便球杆比检查(stool cocus/bacillus):即革兰阳性球菌与革兰阴性杆菌之比。

正常值:便球杆比:1:3

临床意义:健康人肠道内寄居着大量厌氧菌和小部分需氧菌。除人乳喂养的婴儿肠道内以革兰阳性球菌为主外,其余人均以革兰阴性杆菌占绝对优势。在肠道发生致病菌如沙门、志贺、弧菌感染时往往由于使用抗生素而是革兰阴性杆菌受到抑制,此时球菌/杆菌比值有可能变大。若比值显著增大,常提示肠道菌群紊乱或发生二重感染。

2标本真菌涂片(fungi):经革兰染色如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝,可初步报告为:找到真菌孢子和菌丝。

正常值:未见真菌。

3痰涂片检查(sputum smear):

临床意义:目的确定标本是否适合做细菌培养,初步判定是否有致病菌存在。首先应确定标本是否为来自下呼吸道的痰,其标准为革兰染色WBC>25/LPF(低倍视野),上皮细胞<10/LPF。有些细菌可做初步判断:

1)肺炎链球菌:革兰染色为阳性球菌,成双或短链状排列

2)结核分枝杆菌:抗酸染色,找到红色分枝杆菌,及报告“找见抗酸分枝杆菌”,量可以用加号表示:++++每个视野>10根

+++每个视野发现1~10根

++100个视野发现10~99根

+300个视野发现3~9根

±300个视野发现1~2根

3)真菌:经革兰染色如发现革兰阳性卵圆形芽生孢子或假菌丝,可初步报告为:找到真菌孢子和菌丝。

4)放线菌及奴卡菌:革兰染色后,插件中央部分菌丝为革兰阳性,而四周放射的末梢菌丝为革兰阴性,切部分菌株有抗酸性。可报告:找见疑似放线菌或奴卡菌。

4淋球菌涂片检查(Neisseria gonorrhoeae)

临床意义:标本:男性以灭菌盐水清洗尿道口,取尿道脓性分泌物涂片;女性尿道炎患者清洗尿道口后从阴道后壁从后向前方压迫尿道使分泌物排出,涂片。子宫颈炎患者先用灭菌盐水清洗宫颈口和阴道壁,再用阴道窥镜压迫子宫阴道部使分泌物排出。涂片革兰染色后镜检,中性粒细胞内有革兰氏阴性双球菌具有诊断价值。报告结果:“中性粒细胞内(或/和)外见到革兰阴性双球菌”。正常:未见。

二细菌分离培养(Isolation and Culture of bacteria)

1血培养(blood culture):临床意义:正常人体的血液是无菌的,当人体局部感染向全身播散和出现全身感染时,血液中可出现细菌,依据程度不同称为菌血症或败血症.菌血症往往需要以多次血培养证实,如表皮葡萄球菌,即可是致病菌,也是较常见的污染菌.正常:无菌生长。最终阴性报告时间为7天。亚急性心内膜炎患者标本如5~6天无菌生长,应继续培养至2周方可报告阴性结果。布鲁氏菌培养第3周做出最终阴性报告。厌氧菌培养应在第2周做出最终阴性报告。真菌血症应在第3周做出最终阴性报告。结核血培养应在第6周做出最终阴性报告。

2尿液培养(urine culture):临床意义:正常人体膀胱中的尿液是无菌的,用膀胱穿刺取出的尿液应是无菌的。当尿液经尿道排出体外,受到尿道中细菌的污染而混有细菌。取经尿道排出的中断尿,细菌数不会超过10ml,因而,以此界限作为诊断泌尿道系感染的依据。

尿液培养反映肾脏、尿道、前列腺等的炎症变化,帮助临床选择有效抗菌药物。正常48小时仍无菌生长可做最终阴性报告。24小时如有细菌生长即做细菌鉴定及药敏。

3痰培养:(sputum culture):临床意义:痰中的病原菌不少属于机会致病菌,与正常菌群同在,在报告时应做说明。对于机会致病菌,一般仅当其数量超过正常菌群时才可报告鉴定结果及药敏试验结果。

检出致病菌时,除报告该菌的鉴定名称外,还需同时报告正常菌群情况。通常以报告甲型链球菌和奈瑟氏菌作为正常菌群存在的指标。

如:甲型链球菌+

奈瑟氏菌+

肺炎克雷伯氏菌2+

此报告表明肺炎克雷伯氏菌在数量上多于正常菌群,诊断为病原菌。未检出致病菌时,应报告“正常菌群”。

4咽拭子培养(pharynx swab culture):临床意义:鼻、咽部的细菌感染病原菌源于口腔,口腔中既有需氧菌,也有厌氧菌。同痰培养一样,病原菌不少属于机会致病菌,与正常菌群同在,要正确区分。未检出致病菌时,应报告“正常菌群”。

5穿刺液标本(包括胸腹水、关节液、心包液)的培养(Serous Cavity Effusion culture):临床意义:正常的穿刺液是无菌的,有感染的情况下,只要检出细菌,通常都可视为是病原菌。正常:无菌生长。6粪便培养(stool culture):临床意义:一方面从肠道大量细菌中找出致病菌,对肠道疾病进行病原学诊断并通过药敏试验为临床提供合适的用药;另一方面可对肠道菌群进行监测,在疾病治疗中预防菌群紊乱。正常:未检出致病菌。

7脑脊液培养(CSF culture):临床意义:正常人体脑脊液是无菌的。

当人体患有脑脊髓膜炎时,在脑脊髓液中可以出现病原菌。常见的病原菌有细菌、真菌和结核菌等。正常:无菌生长。

8化脓及创伤感染标本的培养(Purulent Secretion Culture): 临床意义

组织或器官的化脓性感染,其病原菌的来源可以分为两类

内源性:感染源是炎症局部周围的器官中的正常菌群(常在菌群),由于损伤等因素造成常在菌群进入无菌4-

5状态的组织内,发生感染.外源性:感染源是存在于人体外部自然界的微生物,由于外伤和直接接触,外界微生物通过人体表面进入人体,造成感染.常见细菌有金黄色葡萄球菌、链球菌、消化链球菌;阳性杆菌有炭疽芽孢杆菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、溃疡棒状杆菌;阴性杆菌有肠杆菌、嗜血杆菌、产碱杆菌、假单胞菌、无色杆菌、拟杆菌、弧菌、气单胞菌;其他有放线菌、奴卡氏菌、念珠菌、结核分枝杆菌。

三手工试验

1触酶试验(catalase test):具有触酶(过氧化氢酶)的细菌,能催化过氧化氢,放出新生态氧,继而生成分子氧出现气泡。

2凝固酶试验(coagulase test):金黄色葡萄球菌产生的结合凝固酶,结合在细胞壁上,使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白附着于细菌表面,发生凝集反应。CAMP试验:B群链球菌具有“CAMP”因子,能促进葡萄球菌β溶血素的活性,使两种细菌在划线处呈现箭头形透明溶血区。Optochin敏感试验:Optochin(ethylhydrocupreine,乙基氢化去甲奎宁的商品名)可干扰肺炎链球菌叶酸的生物合成,抑制该菌的生长,故肺炎链球菌对其敏感,其他链球菌对其耐药。

5氧化酶试验(oxidase test): 该试纸条适用于G-杆菌的氧化酶实验。具有氧化酶的细菌,首先使细胞色素C氧化,再由氧化型细胞色素C使盐酸对二甲氨基苯胺氧化,并与α萘酚结合,生成靛酚蓝而成蓝色。用于初步判断奈瑟氏菌属及肠杆菌科的非发酵菌。

6超广谱β-内酰胺酶的测定(ESBLS检测):有些大肠和肺克能产生超广谱β-内酰胺酶,他不仅能水解第一代和第二代头孢菌素,还能水解第三代头孢菌素类抗生素,如头孢他啶、头孢噻肟等和单酰胺酶,使其失去抗菌作用,但对碳青霉烯类无明显作用。MRSA和MRS检测:用30ug纸片的头孢西丁的药敏结果及新的折点能预测mecA介导的耐药。8 D-试验:大环内脂类耐药的葡萄球菌可以改变、诱导克林霉素耐药。由erm基因导致 23S rRNA 甲基化耐药,与大环内脂类, 林可霉素, 和 链霉素 B型有交叉,又叫 MLSB 耐药,或只耐大环内脂类(msrA 基因编码的泵出机制)

四血清学检测

1肥达氏反应(Widal):

正常值:H:<1:80;O:1<:80;甲:<1:80;乙:<1:80;丙:<1:80

临床意义:用标准伤寒、副伤寒菌液与稀释的待检测血清反应,根据凝集效价判定血清中有无抗伤寒或抗副伤寒杆菌的抗体。在病程的不同时期相隔5-7天,连续进行血清学检查,如果血清滴度随之增高4倍或4倍以上就更有诊断价值。

2外斐氏反应(Weil-Felix):

正常值:OX19:<1:80;OXK: <1:80

临床意义:

用与立克次氏体有共同的抗原成分的变形杆菌X19、X2、Xk菌株的O抗原与被检血清作交叉凝集反应,借以诊断斑疹伤寒、恙虫病等立克次氏体病。一般认为凝集价>1:80即有诊断意义.更为重要的是此种试验的凝集滴度随病程发展而很快上升(在发病两周末可升高数倍),到恢复后期又明显下降。3结核抗体的检测(TB-CHECK-1)

正常值:阴性

临床意义:

快速、定性的过筛试验,能特异性地检测出活动性结核病人血清、血浆或全血中的抗结核杆菌抗体。主要检测IgG和IgA,高浓度的IgM亦可被检出。接种过疫苗的人体试验不起反应。

4支原体培养(解脲支原体UU或人型支原体MH)

正常值:阴性

临床意义:现已从人类泌尿生殖道分离出来7种支原体,其中分离率较高而与泌尿生殖道疾病有关,是解脲支原体,其次是人型支原体。人型支原体(M.humenis,MH)、解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,UU)和生殖器支原体(M.genitalium,MG)都会引起泌尿生殖道感染。UU与新生儿疾病与成人泌尿生殖道系统炎症疾病有关,传播途径为性接触和母婴接触,因此UU感染列为性传播疾病常引起非淋菌性尿道炎,慢性前列腺炎和附睾炎,不育不孕,妊娠期感染等。MH主要引起泌尿生殖系统感染包括盆腔炎,急性肾盂肾炎,阴道炎及宫颈炎等。在健康人群中,可能有U.u或M.h寄生,但<10CCU/ml,故本试剂盒检测结果为阴性。检测到≥10CCU/ml 的 U.u或M.h有较明确临床意义,一般需用药治疗。10~10CCU/ml的 U.u或M.h,提示支原体轻度感染,供医生诊断治疗时参考。7革兰阴性菌脂多糖(LPS)检测:体液内毒素测定(鲎试验)

正常范围:<10Pg/ml临床意义:细菌内毒素作为革兰阴性菌细胞壁最外层结构之一,具有多种生物效应,微量内毒素进入机体后,将会产生发烧、休克及内毒素血症等临床症状。以鲎实验来检测内毒素,能对内毒素血症、革兰氏阴性细菌败血症和革兰氏阴性细菌感染的病人做出早期诊断和治疗。

8真菌(1-3)-β-D-葡聚糖检测(G试验)正常范围:<10Pg/ml临床意义:所有真菌的细胞壁上都含有(1-3)-β-D-葡聚糖,而其他微生物、动物及人的细胞成分和细胞外液都不含这种成分,因此在机体的体液中检测到(1-3)-β-D-葡聚糖时诊断侵袭性真菌感染的有效依据。

9嗜异性凝集检试验:

正常值:阴性或凝集价<1:8

临床意义:传染性单核细胞增多症的病原体是EB病毒,病人血清中可测到嗜异性凝集和抗EB病毒的抗体,此试验可诊断此病。凝集价有较大增高见于:血清病、何杰金氏病和日本血吸虫感染的急性期。当凝集价达到1:224以上时可结合病人临床症状确诊为传染性单核细胞增多症。约10%的病人试验为阴性,以儿童和婴儿为主。

10布氏杆菌凝集试验(Bacterium burgeri agglutination test):正常值:阴性

临床意义:是应用已知菌株检测血清中特异性抗体,目前仍是国际标准诊断布氏病的血清学方法。感染2周后阳性率可达90%,3~5周时,效价最高,1:160以上有诊断意义,动态观察升高4倍以上更有意义。其对人体感染的阳性检出率为:急性期为94.85%;亚急性期为87.50%;慢性期为61.11%。随着病程的延长和康复,血清中特异性抗体效价逐渐降低,但亦有持续高效价达数年之久。影响该实验的因素除影响抗原抗体反应常见因素外,严格掌握诊断菌的浓度十分重要.诊断菌液的浓度越大,敏感性越低,反之敏感性提高。另外,某些细菌感染,如伤寒、霍乱等可有交叉反应。

11新型隐球菌抗原检测(Cryptococcus neoformans antigen detect)临床意义:定性和半定量检测新型隐球菌在血清和脑脊髓液中的荚膜多聚糖抗原。隐球菌抗原经常存在于肺部隐球菌病人的血清中以及中枢神经系统病人的血清和脑 脊液中。现在所有隐球菌病例中几乎50%是发生在HIV阳性患者身上。除了AIDS患 者之外,隐球菌还会很罕见的发生在普通人身上,以及由于有红斑狼疮、肉样瘤病、白血病、淋巴瘤、库欣病等潜在疾病或因皮质激素、细胞毒素药物和移植实验等抑制性治疗而消弱免疫系统的人身上。3434

第三篇:实验室的作用

当今世界,经济全球化深入发展,国际竞争日趋激烈,知识越来越成为提高综合国力和国际竞争力的决定性因素。人才的培养教育是整个国家建设和发展的基础,随着我国各项社会事业全面发展,国家对高等教育的重视程度和投入逐步加大,中国的高等教育面临着巨大的机遇与挑战。

培养高级专门人才、发展科学技术以及社会服务是高等学校的三大职能。实验室是高等学校进行实践教学和从事科学研究的重要场所,在培养创新型人才和发展科学技术中具有重要的地位和作用,实验室的建设水平体现了学校教学水平、科学水平和管理水平。正如教育部周济部长在第三届中外大学校长论坛的讲话中指出的:“高水平实验室是培养创新人才的重要阵地,是科技创新的主要场所,实验室的数量与水平是一所大学科技创新能力的基本标志之一”。

因此。可以说实验室是最能体现高等学校三大职能的平台。

一、实验室在高等教育中的地位和作用实验室是培养高级专门人才的重要保障

随着高等教育的发展,培养理论与实践并重,具有较高综合素质与创新能力,适应社会发展需要的人才,是高等学校在新形势下面临的新任务。

实验室是开展实验教学,培养学生实践能力与综合素质的主要场所,也是实现高等学校培养高级专门人才的目标和学生完成学业的必备条件。在高等学校的教学资源配置体系中,实验室建设的资金投入量和固定资产额占有相当大的比例,可以说,实验室集中了学校主要的技术装备与教学资源,特别是许多具有较高技术水平和功能的高、精、尖仪器设备,对教学、科研、技术开发等形成了强大的支撑。学生通过对这些设备的使用了解,可以亲身并直观感受到现代科学技术的成果与发展趋势,感受到浓厚的学术、技术氛围。实验室是科技创新的基地

科学技术是第一生产力,发展现代科学、知识创新有两个必要条件:一是人才,二是装备。高等学校创新人才聚集。有良好的基础设施、自由的学术氛围和多学科交叉的影响,这些特点使高等学校成为产生新知识、新思想的沃土,是科技知识生产和传播的重要摹地。

“十五”期间,高等学校研究与开发人员总数保持在25万左右。承担了2/3左右的国家自然科学基金项目和大量的“863计划”等项目,依托高等学校建立的国家重点实验室占全国总数近2/3。实践已经表明,高等学校是我国实施自主创新战略的一支十分重要的力量。

大多数的科研成果是在实验室产生的,而新的成果也需要仪器的检测作为支撑。据统计,“十五”期间。“863计划”、“973计划”和国家科技攻关计划等科技计划经费的20%左右用于购置科学仪器,“985工程”、“211工程”以及知识创新工程更将大量的经费用于科学仪器购置。实验室是社会服务的基础

高等学校利用自身的知识(智力)和技术优势,直接为社会解决迫切的生产实际问题和社会发展服务问题,以满足社会各方面对高等学校的需求。相关统计表明,高等学校是我国科技活动的重要力量,尤其在基础研究活动中占有十分重要的地位。2005年,高等学校参加R&D活动的人员达到22.7万人年,用于R&D活动的经费为242.3亿元,其中133.1亿元来自政府,88.9亿元来自企业,16.3亿元来自国内其他机构,4.0亿元来自国外。高等学校在技术市场签订的技术转让合同为4.2万项,其中68%被转让到各类企业,合同成交金额达122.6亿元(2005年高等学校的科学技术活动)。2006年高等院校输出技术项目18 401项,输出技术交易额65.0亿元(2006年全国技术市场统计分析报告),而这都离不开实验的支持。

二、目前国内各高等学校实验室建设急需解决的问题高等学校实验室队伍存在的主要问题

长期以来,我国一直存在着重理论轻实践的现象,导致实验室工作得不到应有重视。实验室队伍也普遍存在着年龄老化;职称、学历结构不尽合理;高水平人员流失严重;实验室工作人员积极性不高等诸多问题。这些问题的存在不仅直接影响到学校实践教学活动的开展,同时也对科技创新和大型仪器设备的使用管理等工作造成了很大的冲击。

根据教育部2004年统计报表数据显示,目前全国在实验室工作的人员总数为157598人,队伍构成情况见表1。

其中实验教师的数量占全国高等学校实验室队伍的56.4%,实验室技术人员为35%,技术工人和其他人员为8.6%。由此可见,实验教师在实验室工作中占有极重的分量。在全国高等学校实验室队伍中,具有高级职称的人员数量为37207名,占总人数的23.6%;其中实验教师为24799名,占总人数的15.7%:实验室技术人员为12408名,仅占总人数的7.9%。

教育部实验室建设指导委员会于2006年10月组织委员进行了全国实验室队伍建设情况调研,返回有效调研报告15份,涉及国内如浙江大学、上海交通大学、中山大学、武汉大学、电子科技大学等近百余所高等学校,调研结果如表2所示。

由表2中可以看出,目前在所调研的各高等学校的实验室队伍中,中级以下职称的人员为3072人,占人员总数的66.5%;学历在本科及以下的人员为3796人,占人员总数的82.1%:年龄在45岁以上的人员为2171人,占人员总数的48.5%。

从以上统计数字中可以得出如下结论:目前,实验室队伍建设的严重滞后已经成为各高等学校发展的瓶颈,而实验室人员职称、学历层次偏低、年龄老化表现得尤为突出。上述现象存在的原因,主要体现在以下几个方面:

(1)实验室工作长期得不到应有重视,实验室队伍积极性不高

受我国历史条件和传统观念的影响,实验人员被看作是附属于理论教学的“教辅”,在职称评定、工资待遇标准等方面与一般教辅人员等同。这种做法的弊端是显而易见的,首先,这样定位降低了实验室队伍的重要性,与理论教学师资队伍建设相比,实验室队伍建设摆在了次要的地位,不利于实验队伍的建设、培养和提高;其次,忽视了实验室队伍在教学及科研中的作用,实验室工作人员中不乏兵强将,这种以偏概全的做法,打击了高水平实验室工作人员的热情和积极性,容易造成人员流失和队伍不稳定。目前,实验系列没有正高职称,无论实验室技术人员具有多高的技术水平和优秀的业务水平,都与正高职称无缘,在实验室工作的人员没有“奔头”。也严重地挫伤了实验室工作人员的积极性。

(2)实验室队伍力量相对薄弱,缺乏培养

各高等学校实验室队伍中,本科以下的技术人员占绝大多数,且所学专业十分繁杂,专业对口的少,整体力量相对薄弱;学校为了引进各方面的人才,将大量的家属收入实验室队伍,使得实验室队伍整体状况更为复杂,在专业结构上比例严重失调;而实验室人员学习、进修的机会很少,很多高等学校愿意花钱引进先进的教学、科研设备,却舍不得在实验室人员的培训上加大投入,造成了实验室队伍整体水平偏低。

(3)实验室岗位缺少竞争,没有合理的人员流动

由于我国长期以来重理论、轻实践观念的影响以及职称、待遇、职务等种种方面的原因,高素质、有能力专长的人员不愿意到实验系列队伍中来,而在岗的年轻高学历实验人员往往思想不稳定,积极性不高,想转岗或调动。大型仪器设备开放共享存在的问题

随着我国“211工程”、“985工程”的实施,高等学校中重点学科、重点实验室建设在全面推进,教学科研设备增长速度很快,据统计,2006年高等学校的教学科研仪器设备有大约1100多万台件,总金额超过4000亿,与“十五”相比,增加的幅度是184%和160%。高等学校教学、科研条件明显改善,大型精密贵重仪器设备不仅在数量上有了提高,在结构和性能上也在不断地发生变化。

在我国目前财力、物力和人力尚不充裕的情况下,在充分发挥大型精密贵重仪器设备的资源优势方面仍存在一些问题,主要表现在:

(1)设备重复购置

高等学校所拥有的大型仪器设备大部分是由国家投入购置的,设备购置经费来自建设项目、重点学科、重点实验室、“211工程”和“985工程”建设投资。使用权归申请单位和基层使用单位,这样就易产生“不要白不要”的错误思想,造成设备的重复购置;大型仪器设备的使用情况与设备所在单位及个人的利益没有联系,用好用不好一个样,缺乏竞争、激励机制。

(2)封闭式管理,没有资源共享观念

大型仪器设备只用于本校甚至基层单位的教学科研工作,对校内外的开放使用不够甚至不开放,缺乏明显的经济约束机制,造成使用效益低下,同时引发改造和正常运行的费用不足等问题。

(3)管理技术队伍明显不足

大型仪器设备在结构和性能上发生了变化,对操作人员的整体素质、专业水平要求也越来越高,但由于部分高等学校对实验室管理技术队伍的认识程度不足,缺乏必要的激励措施,人才流失严重,造成了先进设备没人会用或者只能使用部分功能,不仅影响了大型仪器设备的正常运行,而且无法进行深层次的功能开发,设备利用率不高。

(4)缺少外检测资质

大型、精密、贵重仪器设备大部分都集中在高校各级科研实验室中,其测试数据具有相当高的精确度和可信度,能够为使用者提供真实可靠的数据。但目前高校实验室中很少有取得认证资质的(如CMA认证,据了解目前在北京取得强度检测CMA认证的高等学校只有北京工业大学强度检测所一家),没有取得法定检测的授权,从而导致数据的可信度不高,影响了利用大型设备对外服务的能力。

三、对当前实验工作的建议充分认识实验室队伍在高等学校发展中的地位,切实解决在实验室队伍发展中所遇到的问题

实验室队伍目前所存在的诸多问题,其根本原因是对实验室的地位和作用认识不足。随着我国科教兴国、创新型国家战略方针的实施,实验室的地位更加重要,而创新性高素质人才的培养、科研项目的研究和成果转化以及实验室的建设和管理都离不开实验室人员的参与。没有高素质的实验室队伍,就不可能有高水平的实验室。因此,必须采取各种办法加强实验室队伍的建设。

(1)完善职称晋升与岗位聘任,调动实验室人员的积极性

实验室系列职称没有正高级职称,而实验室人员大量的时间都在从事实验教学、进行仪器设备的管理与维护以及相应的技术改革工作,很少能够在科研、论文等方面有所提高。因此,从稳定实验室工作队伍的角度出发,在岗位聘任、职称评定时应对实践能力较强和工作业绩较好的实验室技术人员在政策上予以倾斜。

目前,国内部分高等学校已经开始在这方面进行积极的探索,使那些理论基础扎实、技术水平高、成果多、确实在工作中做出突出贡献的实验人员享受到相应的待遇。如上海大学在校内设立实验技术总监岗位,清华大学实验室技术队伍可以晋升正高“研究员级高工”。中南大学评正高级实验技术人员,职称评定按照实验系列进行评审。武汉大学实验室队伍采取特殊政策设立了教授级实验师。

(2)建立资格认证体系和培训机制

建立实验室技术人员资格认证制度(可仿照公务员资格考试、教师资格认证制度),对实验室技术人员上岗的要求和人员素质采取资格认证。

对现有实验室工作人员的技术培训,通过学历教育,提高实验室人员的专业知识层次;通过短期培训、进修学习、会议交流等方式。开展多层次、多渠道、多形式的业务知识、先进技术和专业技能等方面的培训活动。强化实验技术队伍的服务意识、创新意识;提高实验技术水平,也能够为培养高素质创新人才和做出高水平科研成果提供技术支撑。

(3)引入激励与竞争机制,鼓励教师到实验室工作

①制定科学、完善的实验技术队伍考核办法。实验技术人员的考核要以业绩与成果为主,并与技术水平、理论水平、职业道德相结合。考核结果作为实验技术人员的奖惩、专业技术职务评聘、选拔重点培养对象等方面的重要依据。

②建市“人员能进能出、岗位能上能下、待遇能高能低”的用人机制和考核不称职人员的退出机制。对于不符合实验技术队伍发展需要且接近退休年龄的人员,可安排提前离岗;对考核不称职的人员要逐步退出实验技术队伍,鼓励并帮助他们应聘适合自己的岗位;确实无法安排的,应将人事关系转至校人才交流中心。同时,应鼓励青年教师到实验室工作,熟悉实验室的管理、实验仪器设备和实验教学的要求。

③设立实验技术成果奖,鼓励实验技术人员致力于实验技术的研究与探索、实验设备的功能开发与利用、大型仪器设备的开放与共享、特色设备的研制、积极参与实践教学的创新与改革、实验教材编写和科研活动等,奖项与校级教学、科研成果奖同等对待。搭建大型仪器设备共享平台,加强大型仪器设备的管理,充分发挥大型仪器设备在教学、科研中的作用

(1)进一步完善大型仪器设备优质资源信息平台

在高等学校仪器设备和优质资源共享系统的基础上,进一步整合目前各高等学校的大型仪器设备资源,利用现代信息与网络技术对设备的购置论证、信息共享、使用考核等实现信息网络化传递,建立跨校、跨地区的大型设备共享平台,促进联合、共建、共享、共用,血向社会开放,努力提高其投资效益,更好地为新世纪的高层次人才培养、科学研究以及社会经济发展服务。

(2)建立大型仪器设备专用基金

大型仪器设备维修及运行维持费用不足是各高等学校面临的主要问题。因此,应抓好设备购置的前期论证工作,建议各校建立设各维修专用账号,对6%的设各维护费用由学校统一管理,做到专款专用,同时采取多种渠道筹集资金,建立维修基金、分析测试基金等辅助基金。保障大型仪器设备的正常运行,提高设备完好率,以此保证提高使用效益。

(3)加强实验室技术人员队伍的建设

高、新、尖的大型仪器设备,需要既懂技术又懂管理的高级专业人才进行管理。建立激励机制,提高实验室技术人员的业务素质、工作待遇,鼓励实验室人员进修,不仅可以带动大型仪器设各使用效率的提高,使设备的原有功能得到充分利用,而且可以带动大型仪器设备深层次功能的开发。

实验室是大学整体实力的体现,做好实验室工作是一项长期而艰苦的工作,而做好实验室工作的基础是人,只有真正建立一支基础知识扎实、业务水平突出;结构合理、严谨治学:勤于服务、乐于奉献的高素质实验室队伍,才能使高等学校的教学、科研工作真正得到发展,才能适应当前高等教育的发展和科教兴国战略、创新型国家方针的实施所提出的要求,真正做到为社会服务。

让我们共同努力,加强对实验室工作的重视,充分发挥实验室在高等教育中的作用,为建设一流的大学而共同努力!

第四篇:实验室台面参数及台面选择

实验室台面参数及台面选择

不同类型的实验环境,适用不同的实验台面;选择正确的台面,既可以合理支付开支,又可以大大提高实验室的操作舒适度和使用寿命。

实验室中常用的台面有陶瓷、环氧树脂、实心理化板、不锈钢四种。

一、陶瓷台面

陶瓷台面在外观设计、色泽和形状方面供任意选择。

陶瓷台面的特点及性能参数:

◆ 耐化学品的腐蚀

◆ 无毛细孔,容易清洁

◆ 耐冲击,耐刮

◆ 耐火,耐高温800~1000℃

◆ 质地坚硬,承重好

◆ 抗老化

◆ 不含溶剂和有毒物质

二、环氧树脂台面

美国DURCON生产的环氧树脂是世界认可高品质环氧树脂之一,其产品通过SEFA美国科学设备和家具协会标准、通过英国NNC辐射评估中心BS4247测试,结论“极佳”、通过美国测试材料ASTM标准、通过美国国家卫生协会标准、通过中国国家化学建材测试中心测试。

DURCON板有多种修边方式,L形边条镶边、阻水边、3mm双倒角边、6R圆弧边、13R圆弧边、假厚边。

DURCON板具有优异的性能,是目前市场上综合性能最好的实验室台面材料之一。

◆ 抗高温——DURCON板耐600℃以上高温,遇明火不可燃,不起跑,不断裂,特别适用于长时间放置燃烧电炉的通风柜中。

◆ 抗化学试剂——DURCON板系惰性材料,对大多数腐蚀性化学试剂具有很强的抵抗力。

◆ 绝对防潮、不脱层——DURCON板不含任何纸质成分,有效抵御空气中的潮气,特别适用于操作台溅水区。另外DURCON板真正一体透芯的均质材料,不脱层、不膨胀、不龟表面刮伤厚可翻新修复。

◆ 耐污染——DURCON板表面平滑,绝无毛细孔,不会藏污纳垢,有效抑制细菌滋生,如SARS病毒等,特别适用于医药喝生物实验室。

◆ 安全可靠——DURCON板安全环保,不含石棉成分,不可燃,不导电,受热时不产生有毒气体,不会侵害操作人员的安全健康。

◆ 性价比高——DURCON板独有15mm厚度,是市场上性价比最高的实验室台面系统。

◆ 颜色均一——DURCON板保证不同批次产品颜色恒久均一。实心理化台面板

三、不锈钢台面

不锈钢台面板,材质为316,厚度为1.2mm,内衬30mm刨花板。

不锈钢台面的性能特点: ◆ 无毛细孔,无细菌残留,易清洁。

◆ 拉伸强度好;

◆ 耐温性强;

◆ 不锈钢台面的抗腐蚀性能不好,所以不适合用于化学实验室,但是,适合于药品、食品等行业,特别适合于无菌生物实验室。

四、理化板

耐蚀理化板包括薄型的耐蚀理化板和厚型的贴面理化板,在高温高压下由植物纤维与热固树脂聚合而成它们是各项检,测结果都超过美国NEMA标准的优质面材,值得您给予足够的信赖。

理化板除了耐潮、耐刻刮、抗撞击的性能外,还有很多其他的特点:

◆ 24小时的耐化学腐蚀——可以承受多种强酸强碱物质的腐蚀,在24小时内清除这些腐蚀性化学物质将不会在板的表面留下任何痕迹。

◆ 耐高温——TRESPA TOPLAB高压层理化板可以长时间地暴露在超过140℃的使用温度下,在极端情况下可在至180℃的环境中持续20分钟而不损坏,而且板材的机械强度也不会减少。

◆ 强度高——可用来放置重负荷的仪器。

◆ 易清洗——由于TRESPA TOPLAB实验室台面减少了接缝的数量,所以避免了污染的危害,简化了清洗程序。

◆ 卫生——TRESPA TOPLAB高压层理化板的表面光滑、致密无孔,该材料不会助长微生物和真菌的滋生,微生物不能穿透芯材。

使用理化板的注意事项:

耐蚀理化板包括薄型的耐蚀理化板和厚型的贴面理化板,它们是各项检 测结果都超过美国NEMA标准的优质面材,值得您给予足够的信赖,可是您 如若使用不当,仍会对它们造成损坏,所以敬请留意下列使用中的注意事项:  不要让浓度超过95%的硫酸或硝酸与耐蚀理化板长时间接触,尤其不 要进行超过4小时以上的接触。

 超过180℃的高温会使耐蚀理化板的表层纸产生颜色变化或者起泡现 象,所以不要让融化的金属、火花和无法确知温度的物体与之接触。

 当使用过热的玻璃皿或使用煤炉、电炉、气炉、酒精炉时,应将这些 热源放在隔热瓷片或三角支架上,而不能直接与台面接触。

 清洁耐蚀理化板时不要使用有磨料、含有酸性、碱性或腐蚀的清洁剂,以免影响表面,一般情况下可用清水冲洗,对于顽固的污渍,可用次 氯酸 清洗后立即用清水冲洗。

 严禁用尖锐金属物体划伤台面。

五、佰克板

佰克板是威盛亚生产的第三代理化板,它具有独特的构造: 1. 化学膜 Chemical-resistant Film 2. 表层纸 Overlay Paper 3. 色纸 Deco Paper 4. 特殊专用牛皮纸(多层)Kraft Paper 因为独特的构造,威盛亚耐蚀理化板拥有卓越的抗弯和抗冲击的性能,相比于其它结构的理化板,是更能承载重物且不易受压弯曲的结实台面。

威盛亚佰克板的特点

◆耐149种包括酸类、碱类、溶剂等在内的化学试剂 ◆经过美国权威机构SGS检测,佰克板具有稳定的抗菌性能,可以稳定抑制四种常见细菌:葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌和克莱伯西艺勒肺炎菌的生长

◆耐刻划性能达到4N,最大程度减少由于操作不当造成的台面的损害,使实验室台面适用寿命更长,更美观。

◆贴面佰克板可进行弯曲收边,消除了接缝难以抵抗化学物质侵蚀的困扰 ◆共深色系、浅色系14个花色可供选择。◆耐磨、耐辐射、耐高温、耐冲击、易清洁

◆佰克板通过国家化学建筑材料测试中心的甲醛含量的测定,为绿色环保产品。

第五篇:浅析混凝土搅拌站实验室的作用

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摘 要:随着建筑工程行业的不断发展,商品商品混凝土也越来越多的出现在人们的视线当中。随之而来的就是商品混凝土商砼站的不断增多。由于商品混凝土搅拌对质量有着较为严格的要求,所以商品混凝土搅拌实验室的建设不容忽视。本文详细的介绍了商品混凝土商砼站实验室的作用,并且对商品混凝土商砼站实验室的设计做出了一定的改进,希望对提高商品混凝土商砼站产品的质量提供一定的指导。

一、商品混凝土商砼站实验室

商品混凝土的集中搅拌是当前建筑生产工艺的一个较大进步,从现场搅拌到集中搅拌,实现了从半成品到工业化生产成本的根本性跨越,现代商品混凝土行业已经达到了初步成熟的阶段。当前基本上较为大型的建筑施工项目都已经开始使用商品混凝土商砼站提供的集中搅拌的商品混凝土。集中搅拌商品混凝土具有施工速度较快,效率高、质量更加稳定、并且节约大量的人力物力的优势。当前搅拌商品混凝土的使用已经成为衡量一个建筑施工项目先进程度的标志之一,而搅拌商品混凝土的质量也成为建筑工程质量的决定性因素之一。各级施工建筑单位都对搅拌商品混凝土的质量有着较高的要求。作为商品混凝土商砼站,想要保证商品混凝土具有较高的质量,就必须对商品混凝土商砼站实验室有着较为清晰的认识。

二、商品混凝土商砼站实验室的重要作用

(一)质量预控制作用

商品混凝土商砼站实验室对于商品混凝土质量的控制起到关键性的作用。由于商品混凝土在生产出之后的质量只有通过多天的标养才能得到准确的数据,也就是说商品混凝土质量的好坏反馈较为落后,需要长时间的等待。但是一旦等到标养完成,此时商品混凝土早已成型,就已经无法对商品混凝土的质量进行控制。所以要求通过商品混凝土商砼站实验室在商品混凝土生产之初,就对商品混凝土的质量进行全面的检测和分析,起到对商品混凝土质量的控制作用。把不合格的因素控制在商砼站内,避免不合格的商品混凝土流入到市面当中,保证出站的商品混凝土质量100%合格。商品混凝土是由水、沙石、水泥、掺加剂综合搅拌而成,想要保证商品混凝土质量,首先要从材料的把关做起。对于商品混凝土的搅拌,水泥起到的是关键性的作用,商品混凝土的强度直接由水泥决定,水泥的质量好坏直接影响到了商品混凝土的质量。水泥的具体强度同样也需要一定时间的标养期,所以要求实验室人员对水泥质量进行全面的检测和控制。掺加剂对于商品混凝土的质量同样有着较为重要的影响作用。随着建筑行业的不断发展,各种掺加剂的应用能够使得商品混凝土的质量得到提高。但是个别掺加剂的添加也有可能对商品混凝土的质量造成一定程度的不良影响。所以商砼站实验室也应当对掺加剂进行控制。骨料对商品混凝土的质量也有着一定程度的影响。如果骨料的配比达不到要求,就容易导致商品混

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凝土质量的失控。商砼站实验室还应当对水进行控制。水对商品混凝土质量产生影响也是不容小视的,例如氯离子超标的水就容易对商品混凝土的质量造成根本性的影响。水温也能对商品混凝土质量产生影响,较高或者较低的水温都会对商品混凝土的凝结造成影响,商砼站实验室应当对搅拌的水进行检测和控制。

(二)质量控制作用

在商品混凝土的实际搅拌当中,商品混凝土商砼站实验室要充分地发挥对质量的控制作用。

1、保证正确的配比

在正式的搅拌之前,实验人员应当认真的符合配合比率,确保采用正确的配合比,避免人为的失误造成的商品混凝土质量的不合格。实验人员还应当按照规定对沙石的含水率进行检测,然后对配比进行调整,以确保商品混凝土的质量。

2、控制坍落度

商品混凝土的质量合格与否,只有通过一定的标养期才能够得出准确的数据。商品混凝土的信息反馈是非常滞后的,并且刚刚生产出的商品混凝土无法准确的检测其质量,只能通过坍落度来确定其质量的好坏。只要原材料的使用无误、配比无误,搅拌出的商品混凝土坍落度应当与实验时的坍落度相似。所以实验室应当重视坍落度,并且对坍落度记性详细的对比分析,确保商品混凝土的质量得到保障。在坍落度的检测环节当中,还应当注意坍落度的损失问题,在夏季施工时,由于蒸发量较大,商品混凝土失水较多,和易性较差。为了方便浇灌,许多施工人员采取浇水的方式来保证顺利浇灌。但是由于在商品混凝土中加入的水量得不到控制,使得水灰比发生了变化,商品混凝土的强度会发生改变。这就要求实验人员通过坍落度的检测及时的发现坍落值,并且针对问题采取正确的应对措施,保证商品混凝土的质量。

3、质量追溯

商品混凝土商砼站实验室在质量的追溯方面也起到了较为重要的作用。质量的追溯要求实验室人员将具体的质量工作都记录下来,做到备查。这样可以通过较好记录的查询来发现及总结较高质量产品的配比、工艺等数据,为以后生产的精益化打下基础,同时总结成功的经验。一但出现质量问题,也可以通过质量追溯来查找出现问题的原因。并且针对这些原因采取积极的改进措施。

4、技术的开发与储备

商品混凝土商砼站实验室在日常的工作中,应当根据实际的工作需要,不断的对商品混凝土的搅拌进行总结,并且设计出一套完整的配比比例,做好商品混凝土技术的储备。通过不断的积累,来实现技术的开发与储备。

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三、如何有效地设计商品混凝土商砼站实验室

(一)实验室设计总则

商品混凝土商砼站实验室的设计主要是为了保证商品混凝土的质量,所以实验室的实验主要涉及到物理、化学检测,实验的对象主要是水泥、沙石、掺加剂、粉料钢筋等。所以实验室的设计要充分的覆盖以上各个方面。并且实验室的设计可以分为以下几个主要的模块:集料模块、水泥模块、商品混凝土模块、力学模块、化学模块、试样模块等。这样就能全面的满足对于商品混凝土检测的要求。

(二)集料模块

集料模块的主要实验对象是骨料,骨料又分为细骨料和粗骨料,主要包括沙石。由于集料模块需要对物料进行多批量的实验,为了保证实验数据的准确性,往往采集的样本较多,这就要求集料模块在设计之初就应当有足够的放料空间。

(三)水泥模块

水泥模块主要负责对水泥的检测,同时也包括了一些粉料的分析,比如煤灰等。这就需要水泥模块拥有足够的设备仪器:胶砂拌合机、净浆拌合机、胶砂流动测定仪、压力试验机、高温电阻炉、沸煮箱等等。其中,室内的各仪器都应当保持在水平状态,否侧会对实验的结果造成不良影响。对于胶砂流动测定仪,在运行过程中会产生振动,所以这类仪器应当单独放置,以防对其他试验造成影响。

(四)商品混凝土模块

商品混凝土模块所需要的空间是最大的,一方面是商品混凝土试验所需要的机器较大,另一方面也要为适配留出一定的空间。商品混凝土模块需要商品混凝土拌合机、抗渗仪、商品混凝土振动台、含气量测定仪、压力泌水仪等。

(五)力学模块

力学模块需要的仪器主要有万能材料试验仪、压力试验仪。

(六)化学模块

商品混凝土搅拌实验室中所需要的化学实验不是很多,但是为了保证商品混凝土的质量,我们也应当建立一个完整的化学模块实验室。

(七)试样室

试样室应当划分为待检材料区与材料留样区,这样才能更好的对试样进行区分。总 结:

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为了保证商品混凝土商砼站产品的质量,商砼站应当充分地重视实验室的作用,并且积极的建立一个完整的商品混凝土实验室,保证所生产产品的质量。

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