第一篇:人教版教学教案课题1 DNA的粗提取与鉴定预习学案
DNA的粗提取与鉴定
学习目标
1.尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取 2.了解DNA的物理化学性质
3.理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理
学习重点与难点
DNA的粗提取和鉴定方法
自主学习
一基础知识
1.提取DNA的方法
提取生物大分子的基本思路是。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与、和 等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
1)DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
课本图5—1是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线,请根据曲线图,【思考】①在什么浓度下,DNA的溶解度最小?DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?
②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出?
此外,DNA不溶于 溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解,但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80oC的高温,而DNA在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解,但对DNA没有影响。
3)DNA的鉴定 在 条件下,DNA遇 会被染成 色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。2.实验设计
1)实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑,但是选用 的生物组织,成功的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料:
鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌 【思考】哺乳动物的红细胞的特点?
2)破碎细胞,获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的,同时用 搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用 溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的 和,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。【思考】①为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
②加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?
③如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?
④此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?
3)去除滤液中的杂质 阅读课本的三个方案,【思考】为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
方案二与方案三的原理有什么不同?
4)DNA的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积、冷却的,静置,溶液中会出现,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒 搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。
取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为 的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4ml的。混合均匀后,将试管置于 中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变。3.操作提示
以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g,防止。
加入洗涤剂后,动作要、,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。4.结果分析与评价 [疑难点拨] 1. DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系:
当NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时,随浓度的升高,DNA的溶解度降低;当NaCl溶液浓度高于0.14mol/L时,随浓度升高,DNA的溶解度升高。
2. 制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入柠檬酸钠的原因
制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠,防止血液凝固。其原理是柠檬酸钠能与血浆中Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少,血液便不会凝固,因为鸡血红细胞,白细胞都有细胞核,DNA主要存在于细胞核中,所以在离心或静置沉淀后,要弃出上层清液——血浆。
3.提取DNA的第一步是材料的选取,其目的是一定要选取DNA含量较高的生物材料,否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;第二步是DNA的释放和溶解,这一步是实验成功与否的关键,要尽可能使细胞内的DNA全部溶解;第三步是DNA的纯化,即根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大限度地将DNA与杂质分开;最后一步是对DNA进行鉴定,这是对整个实验的结果的检测。
4.在DNA的析出的步骤中用到玻璃棒搅拌时,注意动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。5.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程的DNA的损失。
[典例解析] 本实验中有三次过滤:
⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 ⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液 ⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液 以上三次过滤分别为了获得()
A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液 B含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液 C含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNA D含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液 答案:A 解析:用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜破裂,释放出核物质,此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必须经过实验中其他步骤得相继处理,方能得到较纯的DNA。DNA在0.13mol/LNaCl溶液中溶解度最低,成丝状粘稠物,可经过滤留在纱布上。
随堂练习
1.在研究DNA的基因样本前,采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是()
A.除去血浆中的蛋白质 B.除去染色体上的蛋白质 C.除去血细胞表面的蛋白质 D.除去血细胞中的所有的蛋白质,使DNA释放,便于进一步提纯 2.与析出DNA粘稠物有关的叙述,不正确的是()A.操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度
B.在操作A时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整 C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度,两者均可析出 D.当丝状粘稠物不再增加时,此时NaCl的浓度相当于0.14mol/L 3.洗涤剂能够瓦解(),但对DNA没有影响。A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞核 D.细胞质
4.在沸水浴的条件下,DNA遇()会被染成蓝色。
A.斐林试剂 B.苏丹Ⅲ染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺
5.在DNA提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()
A.不易破碎 B.减少提取过程中DNA的损失 C.增加DNA的含量 D.容易洗刷 6.下列操作中,对DNA的提取量影响最小的是()A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA等核物质 B.搅拌时,要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌
C.在“析出DNA粘稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增加 D.在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却 E在DNA的溶解和再溶解时,要充分搅拌
7.DNA的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的(),静置2—3min,溶液中会出现白色丝状物。A.0.9%的NaCl B.0.14mol/L的NaCl溶液 C.质量分数15%的HCl D.体积分数为95%的酒精溶液
8.以血液为实验材料时,需要向血液中加入(),防止血液凝固。A.醋酸钠 B.龙胆紫 C.柠檬酸钠 D.醋酸洋红
9.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是()
A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解杂质的速度 C.减少DNA的溶解度,加快DNA析出 D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出
10.去除滤液中的杂质时,直接在滤液中加入嫩肉粉,利用嫩肉粉中的()分解蛋白质。A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.肠肽酶
二、非选择题(3个)
1.提取鸡血中DNA时,要除去血液中的上清液,这是因为什么?
2.填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。⑴提取鸡血细胞中核物质 ⑵溶解核内DNA: ⑶析出2mol/LNaCl溶液中的DNA ⑷DNA粘稠物的再溶解
⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物 ⑹DNA的鉴定
3.关于DNA粗提取的实验材料的选择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料的原因是什么?请回答下列问题:
⑴鸡血细胞中红细胞,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中 细胞数目较多,可以提供丰富的。
⑵实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,主要原因是。
⑶生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若他们按实验要求完成实验步骤后,结果是,这是因为这些动物和人一样,成熟的红细胞中,但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利进行。这是因为。
⑷若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加 程序,使组织细胞更易分离。
第二篇:dna的粗提取与鉴定
dna的粗提取与鉴定
实验十一 DNA的粗提取与鉴定
教学目的1、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法
2、观察提取出来的DNA物质
实验原理
1、DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的,dna的粗提取与鉴定。当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2、DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
3、DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
注意事项
1、步骤3析出含DNA的黏稠物中,蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入,不能一次快速倒入。
2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌,但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。
实验用具
鸡血细胞液(5~10mL);体积分数为95%的冷酒精,蒸馏水,质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液,物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液,二苯胺试剂;烧杯(100mL,1个,50mL,500mL,各2个),漏斗,试管(20mL,2个),玻璃棒,滴管,量筒(100mL,1个),纱布,镊子,滤纸,铁架台,铁环,三角架,酒精灯,石棉网,载玻片,试管夹。
课时安排
一课时
课前准备
制备鸡血细胞液,方法是:将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL,置于500mL烧怀中,注入新鲜的鸡血(约180mL),用玻璃棒搅拌,使其充分混合,以免凝血。静置于冰箱内一天,使血细胞自行沉淀。也可以用离心机离心2 min(转速1000转/分)。用吸管吸去上清液。
板书
实验十一 DNA的粗提取与鉴定
实验原理
1、析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2、用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3、DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。
方法步骤:
1、提取鸡血细胞的细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。5 min2、溶解细胞核内的DNA3、析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢
4、过滤:取黏稠物
5、再溶解:顺时针方向搅拌,较慢。3 min6、过滤:取滤液。
7、提取出含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5 min8、DNA的鉴定:沸水浴5min((1)无变化(2)蓝色)
上节课我们通过几个验证性实验,证明了DNA是主要的遗传物质,自我鉴定《dna的粗提取与鉴定》。那么DNA是什么样的物质呢?今天我们就通过实验将它提取出来,进行观察和鉴定。
通过预习,我们知道选用鸡血细胞液作为实验材料。在制备鸡血细胞液时,所用的柠檬酸钠有防止血液凝固的作用。
制备过程中,一定要用刚宰杀的鸡的新鲜血,并且要与抗凝剂充分混合,防止凝血。我们采用静置一天的方法,获得鸡血细胞液。
大家在动手做实验之前先要明确几个需要注意的问题。
1、要严格按照实验指导的方法步骤去操作。
2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌,使用时玻璃棒不要碰到烧杯底,在不同的步骤中玻璃棒的用法不同,每一步的用法参照黑板上的指导去操作。
3、在DNA的鉴定中,所用的二苯胺是一种有毒性的试剂,大家在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位,也不要近距离观察。
下面在实验进行过程中,要思考每一操作步骤要达到什么目的。
在进行步骤1时,利用搅拌的5分钟,做如下提问:
为什么要加蒸馏水?加入蒸馏水后细胞将会怎样?
(让细胞内溶液的浓度大于周围溶液的浓度,细胞会吸水以至胀破)
为什么要用力搅拌?
(可以加速血细胞和细胞核的破裂)
所以下一步骤过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质。
在进行步骤3时,要向全班明确:这一步骤是这个实验成败的关键,注意加蒸馏水的方法和使用玻璃棒的方法,千万不能太快太猛,防止打碎DNA。
观察滤取出来的黏稠物的颜色。
有的同学提取的黏稠物较少,原因可能是在溶解DNA时不充分,也可能是析出黏稠物时搅拌的快了。
将黏稠物再溶解时一定要充分,多搅拌。以免有DNA损失。
加入冷酒精时动作要慢。
当玻璃棒上出现丝状物缠绕时,继续慢慢搅拌。至不再增加时,取出吸干上面的水分。仔细观察丝状物呈什么颜色?(黄色)
这些丝状物要用二苯胺鉴定。使用二苯胺时要注意不要接触到药液。进行沸水浴时,在实验室较为通风的地方集体进行。
利用沸水浴的5 min。
步骤3中加入蒸馏水的目的?与步骤1有什么区别?
(步骤3中加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度逐渐降至0.14mol/L,使DNA的黏稠物析出。而步骤1加蒸馏水是为了让细胞吸水胀破)
步骤7为什么要加50mL的冷酒精?
(因为DNA不溶于冷酒精,而其他物质可以溶解在酒精中,使含杂质较少的DNA丝状物可以析出。悬浮于溶液中)
现在大家从水浴锅中拿出试管,比较两个试管中溶液的颜色有什么不同?
(有丝状物的试管变成蓝色,另一试管还是原来颜色)
这一鉴定结果说明什么问题?
(提取出的丝状物是DNA)
那么你看到的丝状物的粗细是不是DNA分子的直径呢?
(不是。DNA分子直径只有2nm。丝状物是多个DNA分子聚在一起形成的)
下面请同学们将实验用具,按原样摆放整齐,实验桌要保持清洁。
今天我们通过实验将DNA提取出来进行了观察和鉴定,那么DNA的化学组成,分子结构和复制是怎样的?我们下节课再继续研究。
第三篇:DNA粗提取及鉴定教案
《DNA粗提取及鉴定》
一、学习目标:
学生通过对本节内容的探究学习:能
⑴了解DNA的物理化学性质。⑵理解DNA粗提取与鉴定的原理。⑶掌握DNA粗提取及鉴定方法,⑷利用DNA的性质进行实验分析和实验设计。
二、本节内容学习的重点:DNA的粗提取和鉴定原理、方法。
难点:DNA的粗提取和鉴定原理、方法。
三、自主探究
(一)(阅读教材、学案;探究下列问题)
1、提取生物大分子的基本思路?
2、提取DNA的基本思路?
3、用文字和坐标曲线描述DNA的溶解性;并思考该问题在DNA粗提取中将有何应用?
4、DNA在酒精溶液中的溶解性
5、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
6、如何来进行DNA鉴定
自主探究
(二)(阅读教材、学案;探究下列问题)
1、进行DNA粗提取应选择什么样的材料;你的选择的理由?
2、为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
3、如何破碎植物细胞,并获取含DNA的滤液;请举例说明,并告诉自己应注意什么?
自主探究
(三)(阅读教材、学案;探究下列问题)
去除滤液中的杂质
1、此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?
2、方案一中为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
3、方案二与方案三的原理有什么不同?
自主探究
(四)(阅读教材、学案;探究下列问题)
1、DNA析出的原理,DNA析出物是什么颜色?
2、DNA鉴定需要设置对照吗?要注意什么问题? 四:
讨论
(一)你帮助、我改正;我质疑,共提升
小组内讨论自主探究内容并自行改正
讨论
(二)你我同思考,细总结,共同突破难点
小组内讨论:总结
1、本实验的实验原理
2、DNA粗提取与鉴定过程
3、此实验过程中有几次使用蒸馏水?几次过滤,几次析出?分别在哪一步?
五:
小组间质疑,完善 六:课堂小结
七:达标检测;当堂掌握 知识拓展:课下思考总结:
1、在我们的高中生物学习中有颜色反应的实验有那些?
2、DNA在不同浓度氯化钠溶液中溶解度的变化曲线还能表示那些量的关系?
3、还有那些实验中用到了酒精,他们的作用是?
第四篇:《DNA的粗提取与鉴定》的教学设计
《DNA的粗提取与鉴定》的教学设计
教学目标
1、知识方面
理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。
2、能力方面
(1)初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
(2)在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。(3)培养学生的动手能力和学会进行科学实验的一些基本技能。
3、情感态度价值观方面
在科学实验过程中培养学生严谨比较细致、实事求是的科学态度。
4、重点难点
通过实验过程,加强学生实验能力的培养,使学生充分理解实验步骤的原理,有目的地顺利完成实验。教学设计说明
本实验是高中生物教材中难度较大的实验之一,其实验原理复杂,实验步骤繁琐。根据本班学生的基础情况,大部分学生的学习思维、动手操作能力属中等水平。因此在实验前布置学生认真预习实验原理,实验方法和步骤就十分重要。实验教师在课前的实验准备工作也十分繁重。在实验过程中,教师应根据实验材料和DAN理化性质,做好实验设计、分析和推理等一系列探究活动,设计好有针对性的相关问题,让学生在实验中主动探究解决,从而发展了学生的科学思维,培养了学生的动手实践能力。教学过程设计
一、探究实验原理和方法
1、提取和鉴定DNA,提取DNA选择什么实验材料较好?原因?(提示:联系DNA存在细胞的位置说明)
2、简介实验原理,及DNA等实验材料
3、针对每一步骤,教师适时提出探索性问题,让学生在实验中边思考边解决。(以题板形式列出各问题)
(1)为什么用鸡血来作实验材料?用牛、羊血可以吗?为什么?(2)在第1步中,为什么要用玻璃棒沿一个方向快速搅拌?(3)在第1步和第3步中加蒸馏水,的目的有什么不同?(4)仔细观察最后提取出的丝状物是什么颜色?
二、出示本实验操作流程图
步骤:
1、制备鸡血细胞液
2、提取核物质基础
3、溶解核内DNA
4、析出DNA并滤取
5、DNA的再溶解
6、提取较纯的DNA
7、DNA的鉴定
三、实验结果和汇报交流与分析
1、让各组学生观察自己所提取出的DNA,并和相邻组间比较:提取量和DNA颜色。并分析出现不同差异的原因,主要从实验过程的操作差异分析。
2、鉴定DNA的方法操作及原理。
四、布置作业
完成《实验报告册》,对于在实验结果与预期不符者,认真分析原因所在,总结实验操作心得体会。培养严谨的科学思维和操作方法。
第五篇:dna粗提取与鉴定
dna粗提取与鉴定
实验原理
DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氧化钠的浓度的变化而改变的,dna粗提取与鉴定。当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大,浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。
DNA不溶于95%的酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
DNA中含有脱氧核糖,能与二苯胺(沸水浴)反应生成蓝色物质,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
目的要求
1.学会DNA的粗提取和鉴定的方法。
2.观察提取出来的DNA物质的颜色和形状。
材料用具
材料:活鸡或鲜血鸡血。
仪器:离心机、恒温水裕锅、载玻片,玻璃棒,滤纸,滴管,量简(100 mL,l个),烧杯(100 mL,l个,50 mL、500 mL各 2个),试管(20 mL,2个),漏斗,试管夹,纱布。
试剂:酒精的体积分数为95%的溶液(实验前置于冰箱内冷却24 h),蒸馏水,柠檬酸钠的质量浓度为 0.1g/mL的溶液,氯化钠的物质的量浓度分别为 2 mol/L和0.015 mol/L的溶液,二苯胺试剂。
方法步骤
实验前需要制备鸡血细胞液(由教师完成),制备的方法是:取柠檬酸钠的质量浓度为 0.1 g/mL的溶液(抗凝剂)100 mL,置于500 mL烧杯中。将宰杀活鸡流出的鸡血(约180 mL)注入烧杯中,同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸钠溶液充分混合,以免凝血。然后,将血液倒入离心管内,用 1000 r/min的离心机离,鉴定材料《dna粗提取与鉴定》。2min,此时血细胞沉淀于离心管底部。实验时,用吸管除去离。心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液。
1.提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL~10mL,注入到50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒充分搅拌5 min,使血细胞加速破裂。然后,用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至500mL。取其滤液。
2.溶解细胞核内的DNA
将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol的溶液40mL加入到滤液中,并摇动烧杯,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态。
3.析出含DNA的粘稠物
沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色。继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水(这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于0.14 mol/L)。
4.滤取含DNA的粘稠物
用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液至 500mL的烧杯中,含 DNA的粘稠物被留在纱布上。
5.将DNA的粘稠物再溶解
取 1个 50 mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液 20mL。用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻璃择不停地搅拌,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中。
6.过滤含有DNA的氯化钠溶液
取1个100 mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液。取其滤液,DNA溶于滤液中。
7.提取含杂质较少的DNA
在上述滤过的溶液中,加入冷却的、酒精的体积分数为 95%的溶液 50mL(使用冷却的酒精,对DNA的凝集效果较佳),并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现含杂质较少的丝状物。用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分。这种丝状物的主要成分就是DNA。注意观察丝状物是什么颜色的。
8.DNA的鉴定
取两支20 mL的试管,各加入氯化钠的物质的量浓度为0.015 mol/L的溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5 min,待试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。将观察的结果填写在《实验报告册》上。
结论
步骤8的2支试管中溶液颜色的变化说明了什么?将得出的结论填写在《实验报告册》上。
讨论
1.提取鸡血中的DNA时,为什么要除去血液中的上清液?
2.步骤回和步骤3中都需要加入蒸馏水,两次加入的作用相同吗?为什么?
3.DNA的直径约为20×10-10 m,实验中出现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的大小?