第一篇：微生物检验员考核指标及方案
微生物检验员考核指标及方案
一、对公司所有物料、产品的微生物检验工作，并作好记录。
二、对所有微生物检验用仪器、设备的维护保养与清洁，并做好记录。
三、负责对生产洁净车间和无菌室洁净度的测定，并做好记录，出具检验报告。
四、负责对留样样品稳定性考查中的微生物检验。
五、协助相关部门对生产工艺验证、设备验证及质量管理提供微生物检测数据。
六、负责菌种的保管、传代、接种工作，并作好记录；负责微生物检验的准备工作及培养基的配制。
七、及时完成各项检验任务，并于规定的工作日内出具报告。
八、做好上级领导分配的临时性工作。
九、每月至少做到80－90个检品的微生物检验。
十、在车间没有那么多检品时加强学习新技术和新的检验方法。
十一、保证产品检验成功率95﹪。
十二、做好每月一次做好无菌室清洁、消毒灭菌；
十三、做好每月一次做好准备室、空调室、培养室清洁维护工作；
十四、做好每周一次做好无菌服、工作服、鞋清洗、消毒灭菌；
第二篇：微生物检验员培训资料
一.基础知识
（一）微生物基础知识
1.培养基
培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。但多次反复融化，其凝固性降低。
任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。
（二）消毒与灭菌知识 5.2灭菌方法
灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微生物，灭菌的方法分物理和化学灭菌法两大类。本实验主要介绍物理方法的一种，即加热灭菌。
加热灭菌包括湿热和干热灭菌两种。通过加热使菌体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。蛋白质的凝固变性与其自身含水量有关，含水量越高，其凝固所需要的温度越低。在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，因为在湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固；同时湿热的穿透力强，可增加灭菌效力。
（三）洁净室行为规范
（四）实验室安全知识
二.基本操作
（一）培养基配制、灭菌、使用和保藏
1.配制
1.1 按照培养基瓶签所示，准确称量一定培养基干粉于合适的容器，加纯化水溶解。
1.2 根据培养基对pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液调至所需pH。1.3 如需分装，应先加热搅拌，待培养基完全溶解并均一后进行。分装时注意不要使培养基沾染在管口或瓶口，以免污染。液体分装高度以试管高度的1/4左右为宜。固体分装装量为管高的1/5，半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜；分装三角瓶，其装量以不超过三角瓶容积的一半为宜。
1.4 培养基经灭菌后，如需要作斜面固体培养基，则灭菌后立即摆放成斜面，斜面长度一般以不超过试管长度的1/2为宜；半固体培养基灭菌后，垂直冷凝成半固体深层琼脂。
2.灭菌
2.1 按照培养基瓶签所示的灭菌条件（温度和时间）对配制好的培养基进行高压灭菌。配制好的培养基应在2小时内进行灭菌。3.保藏和使用 3.1 液体培养基管
置专用不锈钢筒内，2～25℃避光保存，3周内使用。在不锈钢筒贴标签，标明培养基名称、培养基配制日期、高压灭菌编号等信息。不同批次培养基不得置于同一不锈钢筒内。3.2平板和接触皿
置专用不锈钢筒，标明培养基名称、制备日期、培养基的灭菌编号，用保鲜膜密封筒口后，2～25℃避光保存，3周内使用。不同批次平板和接触皿不得置于同一容器内。
3.3 培养基使用之前应预培养，合格后方可使用。
营养琼脂培养基：25-35℃，预培养3天。硫乙醇酸盐液体培养基：25-35℃，预培养2天。
虎红琼脂培养基和改良马丁培养基：23-28℃，预培养3天。
（二）消毒剂配制和使用
1.0.1%新洁尔灭溶液的配制和使用
1.1基准处方：5%新洁尔灭溶液20ml ＋
注射用水980ml 1.2 作为手部和衣服浸泡消毒，设备、操作台面和洁净室六面擦洗消毒以及地漏消毒用，有效期为3个月。2.75%酒精的配制与使用
2.1 基准处方：95%乙醇790 ml ＋ 纯化水210 ml 2.2 作为消毒双手（手套），擦洗设备、操作台等表面消毒剂，有效期为14天。
3.2%来苏儿（甲酚皂）溶液的配制和使用
3.1 基准处方：50%来苏儿（甲酚皂）溶液40 ml ＋ 纯化水960 ml 3.2 拖擦地面用，临用前配制。4.甲醛熏蒸 作为环境空气和表面消毒剂。
操作步骤：关闭风机→无关人员撤出消毒区，操作人员戴防护手套和防毒面具→将设备及器具暴露于空气中→将盛有甲醛溶液的不锈钢饭盒置不锈钢台面→上层饭盒倒入需要体积的甲醛（10ml/m3，每只饭盒不得多于250ml），下层饭盒倒入300ml 95%或无水乙醇→点燃下层饭盒内乙醇，操作人员迅速离开→保留被消毒空间的甲醛气体至少8小时→消毒结束后，开启风机，直至消毒空间无甲醛刺激性气味，方可进入工作。
5.臭氧消毒
5.1 作为环境空气和表面消毒剂。
5.2 操作步骤：关闭风机→无关人员撤出消毒区，操作人员戴防护手套和防毒面具→将设备及器具暴露于空气中→设定消毒时间，开启臭氧法生器面→操作人员迅速离开→保留被消毒空间的臭氧气体至少8小时→消毒结束后，开启风机，直至消毒空间无臭氧气味，方可进入工作。6.消毒剂交替使用
6.1 隔周交替使用0.1%新洁尔灭溶液和75%酒精进行手部消毒。6.2 隔周交替使用0.1%新洁尔灭溶液和2%来苏尔溶液拖擦地面。6.3 洁净区每月对空气消毒一次，甲醛消毒6个月一次，其余时间采用臭氧消毒。
（三）微生物室设备与设施
1.高压灭菌器
1.1原理：高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽,待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。1.2 操作步骤：向高压灭菌器灭菌舱内加水至排泄管口高度→放入待灭菌物品，关闭灭菌器盖→开启电源，设置灭菌温度和时间以及排气温度→按start键开始灭菌（依次经历：升温—排气—升压—保压—降压—排气—降温）→灭菌结束后，取出灭菌物品，关闭电源→清洁灭菌舱。1.3 注意事项
待灭菌物品间应留适宜间隙，便于蒸汽穿透。
当温度在80℃以上时，盖将不会被打开；当温度低于60℃时，即可开盖。每次灭菌前应保持灭菌舱内水位在规定线以上。
干热灭菌法常用于空玻璃器皿、金属器具的灭菌。凡带有胶皮的物品，液体及固体培养基等都不能用此法灭菌。
5.2.2.2干燥箱灭菌
将包扎好的物品放入干燥烘箱内，注意不要摆放太密，以免妨碍空气流通；不得使器皿与烘箱的内层底板直接接触。将烘箱的温度升至160～170℃并恒温1～2h，注意勿使温度过高，超过170℃，器皿外包裹的纸张、棉花会被烤焦燃烧。如果是为了烤干玻璃器皿，温度为120℃持续30分钟即可。温度降至60～70℃时方可打开箱门，取出物品，否则玻璃器皿会因骤冷而爆裂。
用此法灭菌时，绝不能用油、蜡纸包扎物品。
5.2.2.3火焰灭菌
直接用火焰灼烧灭菌，迅速彻底。对于接种环，接种针或其它金属用具，可直接在酒精灯火焰上烧至红热进行灭菌。此外，在接种过程中，试管或三角瓶口，也采用通过火焰而达到灭菌的目的。
2.烘箱（干热灭菌）
2.1 原理：通过使用干热空气杀灭微生物。一般是把待灭菌的物品放入电烘箱中烘烤，加热至160～170℃维持2h（除热原要求250℃维持1h）。2.2 操作步骤：将待灭菌物品正确包扎与加塞，以免灭菌后被外界污染→将包扎好的物品放入干燥烘箱内→ 3.超净工作台 4.培养箱 5.集菌仪 6.传递窗 7.洁净室
（四）平板和接触皿制备
将需倒平板的培养基，于水浴锅中冷却到45～50℃,立刻倒平板。
（五）微生物数量测定
三.检验项目
（一）微生物限度检查
（二）无菌检查
（三）环境监控检查
（四）模拟灌装检查
（五）培养基灵敏度检查
（六）菌株传代与保藏
四.其它
（一）微生物形态观察（菌落形态、染色与镜检）
（二）微生物分离纯化培养
（三）API法鉴定微生物
（四）PCR法鉴定微生物
7思考
7.1制备培养基的一般程序是什么？
7.2做过本次实验后，你认为在制备培养基时要注意些什么问题？
7.3灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义？
4试述高压蒸汽灭菌的操作方法和原理。
5高压蒸汽灭菌时应注意哪些事项？
标准菌种的保藏形式
我国提供的标准菌种通常是以冻干粉的形式包装于熔封的厚玻璃容器中。在这种容器中，微生物通常与赋形剂共存，由于缺乏生长必须的环境条件，一般呈休眠状态。
纯培养
所谓微生物的纯培养是指在一个微生物的菌落形成单位中，所有的微生物细胞或孢子都属于生物学的同一个种。严格地说，纯培养是在培养基上由一个细胞或孢子分裂、繁殖而产生的后代。在该细胞或孢子的生长过程种，不受其他微生物的侵犯，不会在培养物中产生另外微生物种的后代，在整个生长过程中不发生变异或死亡。获取纯培养的工作环境
1、洁净工作室：环境洁净度10000级下的局部100级的单向流空气区域内，全过程必须无菌操作，防止微生物污染。
2、无菌隔离舱 获取纯培养的接种工具
1、接种环
2、接种针
3、接种铲
4、接种钩
5、其他玻璃器械 获取纯培养的其他器具
1、玻璃器皿：如各种规格培养皿。
2、微生物实验室常用的设备，如高压灭菌锅、恒温培养箱等 获取纯培养的主要技术－移植（又称接种）
微生物的移植（或称接种）是指将微生物接种在培养基上的操作。移植（又称接种）的两种方式－划线 和穿刺
1、划线法是指用接种工具将微生物细胞移植在固体培养基斜面或平板上的一种方法。
2、穿刺法是指用接种工具将微生物细胞移植到固体或半固体培养基内的一种方法。影响集菌培养效果的若干因素
温度 渗透压 氧气 光 pH值和氧化还原电位
培养基 抗生素
验证纯培养的主要依据
1、用显微镜观察时，全部的生物个体是相似的，如果是细菌，对革兰氏染色反应应当是一致的。
2、将培养物制成悬液，重新倾注平板，或平板划线培养后，所形成的全部菌落的形态应该是相似的。如果是细菌，将重新形成的菌落各作穿刺培养，其培养特征应当是一致的。
3、从重新分离的各菌落作生理特征观测时，如对氮源的利用，对糖类的发酵或同化以及其他生理生化的测定，应呈现出一致性。定期移植保藏法
一般步骤为：将菌种接种在所要求的培养基上，置最适温度下集菌培养。得到健壮的菌体（如有性孢子、无性孢子或细胞等）后，放于温度较低、干燥处保藏，并且每隔一定时间重新移植培养一次。定期移植保藏法
1、细菌置4～6℃保藏，芽孢杆菌每3～6个月移植一次，其他细菌每月移植一次。
2、放线菌于4～6℃保藏，每3个月移植一次。
3、酵母菌于4～6℃保藏，每4～6个月移植一次。
4、丝状真菌于4～6℃保藏，每3个月移植一次。
5、担子菌于4～6℃保藏，每3个月移植一次。
6、保藏的湿度通常在50％～70％为宜。定期移植保藏法
1、需定期检查
2、移植进行时，应仔细核对
3、集菌培养完成后，应比较培养特征
4、应注意观察各代之间的变化 琼脂斜面低温保藏法
1、菌种的典型菌落接种至斜面，规定的温度和时间培养，充分生长，硅胶塞换成无菌橡胶塞。4～6 ℃冰箱保藏
a:1～3个月移植一次，继续保藏。
b:用半固体高层培养基穿刺培养，可保藏半年至一年。琼脂斜面低温保藏法
适用细菌、霉菌、酵母菌及放线菌保藏 优点：简便、大多数微生物适用
缺点：保藏期短；传代次数多；容易发生变异及污染。
生孢梭菌用硫乙醇酸盐培养基、乙型溶血性链球菌及肺炎球菌用血肉汤（琼脂）培养基
液体石蜡保藏法
一般步骤为：准备液体石蜡并灭菌去水备用。获得需要保藏菌种的纯培养，将液体石蜡注入培养容器中，并完全覆盖培养基。
液体石蜡液面以高出培养基上端0.5～1cm为宜 4～6 ℃冰箱保藏
液体石蜡保藏法 甘油冷冻保藏法
将保藏菌种接种琼脂斜面上，适宜温度下培养适宜时间，用无菌接种环轻轻刮取菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦使菌种充分扩散到无菌水中，调证菌液浓度，向已制备好的菌悬液加入等体积的20％无菌甘油，轻轻振试管管，使内容物充分混合，分装于无菌小管。甘油冷冻管最好在-30 ℃贮存。沙管保藏法 制备沙管 培养接种 制备菌悬液 混菌 干燥 保藏
适合保藏芽孢杆菌、梭菌、放线菌和一些丝状真菌。
土壤保藏法
用土壤替代沙管保藏法中的河沙，其余操作与沙管保藏法相同 适合保藏土壤细菌、放线菌和丝状真菌，时间为
2～6年。
硅胶保藏法
用硅胶替代沙管保藏法中的河沙，其余操作与沙管保藏法相同 适合保藏酵母菌和某些丝状真菌
滤纸保藏法
保藏微生物细胞或孢子的载体为滤纸。
对细菌、酵母菌、丝状真菌等都有一定的效果，有些菌种最长可达
17年明胶片保藏法
制备无菌营养明胶 制备无菌石蜡滤纸
微生物培养并制成浓厚的悬液 在悬液中加入营养明胶
将含微生物细胞或孢子的营养明胶滴于石蜡滤纸表面 干燥
将形成的明胶片密封保藏
麸皮保藏法
我国历史悠久的微生物保藏法
适于保藏根霉、曲霉、青霉、红曲霉等属和赤霉菌
梭氏真空干燥保藏法
在小试管中放置菌悬液
。小试管在大试管中放置 大试管在真空状态下干燥 密封大试管
液体直接干燥保藏法
需要加入保护剂 干燥之前不需冻结
在干燥过程中为增大蒸发面积，可加入多孔材料 干燥后的容器应熔封
蒸馏水保藏法
最为简便的微生物保藏法
微生物细胞或孢子保藏在蒸馏水中 保藏的容器应密封
适于保藏棒状杆菌、土壤杆菌和假单孢菌等
液氮冰箱超低温保藏法
需专用设备－液氮超低温冰箱 菌悬液密封于安瓿管内，控速冻结 国外已普遍采用 保藏时间长
冻结真空干燥保藏法
历史悠久，又称冻干法
不产生孢子只产生菌丝体的丝状真菌不宜采用该法 适用面广 保藏时间可达10年以上
多为菌种保藏机构采用
冻结真空干燥保藏法
密封性好，可避免保藏期间的污染 保藏容器体积小，方便携带和贮藏 保藏时间更长，变异概率更低
普通微生物实验室适用的保藏技术
琼脂斜面低温保藏法 液体石蜡保藏法 低温冷冻保藏法 甘油冷冻保藏法
琼脂斜面低温保藏法
细菌置4～6℃保藏，芽孢杆菌每3～6个月移植一次，其他细菌每月移植一次。4～6℃保藏，每3个月移植一次。4～6℃保藏，每4～6个月移植一次。4～6℃保藏，每4个月移植一次。放线菌于酵母菌于丝状真菌于担子菌于4～6℃保藏，每3个月移植一次。
50％～70％为宜。保藏的湿度通常在菌种保藏的一般规定
1、菌种“代”的确定：2005版药典规定，以干燥菌种管为第“0”代，由此得到的第一批子代为第一代，以此类推。
2、菌种传代次数规定：2005版药典规定不超过5代。
3、菌种应专人保藏、专柜贮藏，认真做好登记，统一编号，按期传代，并做好有关检验记录。
4、保存菌种传代或冻干均应填写专用记录，菌种管上应有标签，表明菌种编号、代次、批号、日期。
5、过期菌种应及时处理、登记，经121 ℃30分钟灭菌消毒。实验室菌种传代操作步骤
1、接种前用1：1000新洁尔灭擦拭工作台面，然后开紫外灯消毒30分钟。
2、自冰箱取出保存工作用菌种，室温放置20分钟；温度平衡后才能传代。
3、实验人员进入缓冲间，换鞋、穿无菌衣、戴口罩，用1：1000新洁尔灭溶液消毒双手，并将培养基及菌种移入阳性菌接种室。
4、点燃酒精灯，将菌种管塞子，通过火焰转动使稍稍松动，以免接种时粘着打不开。
5、接种操作：左手拿住菌种管，将管口靠近火焰旁，右手拿接种棒，将白金耳烧红约30秒，杆部通过火焰灭菌。挑取少量菌苔；另取，照上述方法在火焰旁打开塞子，将白金耳伸入管内斜面培养基的底部，从下到上将白金耳轻贴斜面培养基的表面作曲折移动。
5、接种后，将斜面置规定温度、时间培养。取出观察，菌种生长良好，换橡皮塞，贴上标签，放入冰箱保存。
6、细菌一个月传代一次，枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉可三个月传代一次。菌种管理
1、标准菌种必须从认可的菌种收集途经获得；实验室必须建立和保存所有菌种的收集、贮藏、保存、确认试验的记录。
2、实验室应有文件管理标准菌种（从原始菌种到工作用菌种）。该程序应包括：
a:标准菌种必须定期传代，并做确认试验，包括实验室在所需要关键诊断指标，实验室必须记录并保存。
b：每一子菌种都应以适当标签、标记来表示名称、标准号、接种日期和传代日期。
C:每一子菌种都应以标记从原始菌种传代到工作用菌种的代数；记录菌种生长的培养基及培养条件；菌种生存条件等。过期菌种处理
过期菌种应及时清理、登记，并经
℃、30分钟高压消毒灭菌。
例1：金黄色葡萄球菌传代保藏技术
1、购置金黄色葡萄球菌（如我所提供的菌种为第二代菌种），假定购置日期为5月21日。
2、准备10支营养琼脂斜面，其中2支用于保藏，其余8支用于当月实验。
3、于5月22日打开菌种管，接种菌种至上述10支斜面，35 ℃培养16～18小时。
4、将10支第三代菌种管做好标签，置适宜温度保藏。5、5月22日至6月22日，可以使用上述第三代菌种管。
6、至6月22日，重复步骤2，得第四代菌种管。
7、至8月22日前，重新购置原种管。
例2：黑曲霉的传代技术
1、制备孢子悬液：取灭菌水或生理盐水
3～5ml，分2～3次小心滴加至菌种管内（试管斜面），反复振摇。倾取孢子悬液置另一灭菌试管。
2、涂布接种：用灭菌滴管吸取悬液滴加至改良马丁琼脂培养基斜面，每管滴加2～3滴，转动试管，使悬液与斜面表面充分接触 菌种确认试验
包括以下几个方面：
1、菌落生长情况：目测
2、染色镜检：
3、生化试验；(1)糖醇代谢试验
（2）氨基酸和蛋白质代谢试验
（3）碳源和氮源利用试验
（4）酶类试验
（5）其他试验 短小芽孢杆菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，为不呈链状排列的杆菌，革兰氏染色为阳性。
2、营养琼脂斜面上菌苔光滑，薄，闪光，蔓延，不粘着，常常是浅黄色。
3、生化试验可选做明胶穿刺、淀粉水解和硝酸盐还原，结果为明胶缓慢液化，淀粉水解阴性，硝酸盐还原阴性。
枯草芽孢杆菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，为呈链状排列的杆菌，不形成荚膜，革兰氏染色为阳性。
2、营养琼脂斜面上菌苔生长丰厚，粗糙，不透明，不闪光，蜡质，蔓延，奶油色至微褐色。
3、生化试验可选做明胶穿刺、淀粉水解和硝酸盐还原，结果明胶呈漏斗形至层状液化，淀粉水解阳性，硝酸盐还原阳性。大肠埃希菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，为成对和呈短链排列的近球形的杆菌，一般不形成荚膜，革兰氏染色为阴性。
2、营养琼脂斜面上菌苔通常白色，有时带黄白色，湿润，闪光，蔓延生长。
3、生化试验可选做明胶穿刺和靛基质试验、甲基红试验、V.P.试验和柠檬酸盐利用试验，结果不液化明胶，靛基质试验和甲基红试验阳性，V.P.和柠檬酸盐利用试验阴性。大肠埃希菌
该菌为微生物限度检查规定不得检出的控制菌，有一整套完整的鉴定手段，也可参考该方法用于判断所保藏的菌种有无发生变异。
该鉴定方法主要内容即为经典的IMViC试验，结果为++--。
铜绿假单孢菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，为单个，成对或呈短链排列的杆菌，有运动性，革兰氏染色为阴性。
2、营养琼脂斜面上菌苔生长旺盛，薄，白色，闪光，培养基变为绿色至暗褐色或黑色，发荧光。
3、生化试验可选做明胶穿刺、吲哚和硝酸盐还原试验，结果迅速液化明胶，液体呈浅黄绿色或浅蓝绿色，吲哚试验阴性，硝酸盐还原试验阳性。
铜绿假单孢菌
该菌为微生物限度检查规定不得检出的控制菌，可利用氧化酶试验和绿脓菌素试验迅速判断所保藏的菌种有无发生变异。乙型副伤寒沙门菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，为单个出现的杆菌，有运动性，革兰氏染色为阴性。
2、营养琼脂斜面上菌苔浅灰色，湿润，光滑，半透明。
3、生化试验可选做明胶穿刺、吲哚、硫化氢和硝酸盐还原试验，结果不液化明胶，吲哚试验阴性，硫化氢阳性，硝酸盐还原试验阳性。
乙型副伤寒沙门菌
该菌为微生物限度检查规定不得检出的控制菌，可利用三糖铁琼脂斜面和血清试验迅速判断所保藏的菌种有无发生变异。藤黄微球菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，为呈堆团排列的球菌，革兰氏染色为阳性。
2、营养琼脂斜面上菌苔硫黄色到酪黄色，光滑，软。
3、生化试验可选做明胶穿刺、硫化氢和硝酸盐还原试验，结果缓慢液化明胶成漏斗形，硫化氢阳性，硝酸盐还原试验阳性。
金黄色葡萄球菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，为单个或成对呈短链和不规则堆团状排列的球菌，革兰氏染色为阳性。
2、营养琼脂斜面上菌苔生长茂盛，半透明，光滑，平坦，湿润，白色至浅黄色或橙色。
3、生化试验可选做明胶穿刺、硝酸盐还原和过氧化氢酶试验，结果明胶呈囊状液化，硝酸盐还原试验阳性，过氧化氢酶试验阳性。金黄色葡萄球菌
该菌为微生物限度检查规定不得检出的控制菌，可利用血浆凝固酶试验迅速判断所保藏的菌种有无发生变异。生孢梭菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，菌体粗大单独存在或呈短链排列，芽孢比菌体宽，芽孢呈梭形，革兰氏染色为阳性。
2、过氧化氢酶试验阳性。白色念珠菌
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，可见卵形细胞，有多边芽殖现象，有假菌丝。
2、改良马丁琼脂斜面上菌苔生长茂盛，光滑，湿润，菌落呈乳白色。黑曲霉
确认该菌未发生变异的主要方法为：
1、通过显微鉴别，可见分隔菌丝体，分生孢子穗球形，黑色。
2、改良马丁琼脂斜面上菌苔呈黑褐色厚绒状，色泽均一，无杂色，菌落呈黑色。
第三篇：微生物检验员岗位职责
1.负责微生物限度检验并出具检验报告。
2.负责包装材料质量检査并出具检验报告。
3.负责工艺用水监测、洁净度监控。
4.负责卫检室现场管理。
5.负责相关岗位操作规程等文件的起草。
6.完成主管临时交办的工作。
第四篇：检验员的考核方案
检验员的考核方案
1.目的：
1.1 为了保证来料、生产过程、最终产品的质量，对各过程的质量进行有效
控制，制定本考核方案。
2.适用范围：
适用于公司的所有质量检验人员。
3.职责：
本制度由质量部编制，并由质量经理或主管组织考评；
人事行政部负责执行考评结果；
总经理负责审批。
4.检验员的组成：
质量部的检验员包括进厂检验（IQC）、过程检验（IPQC）、最终检验
（FQC）。
5.考核方法
考核指标及权重比：安全（10%）、工作态度（20%）、工作任务（20%）、工作质量（20%）、出勤率（10%）、顾客满意度（20%）
考核标准：满分100分
安全性（10分）：
考核目标：安全性目标为0；
考核方法：每发生一次违纪事件减5分，发生安全事故或安全事故隐患该项为0分。
工作态度（20分）：
考核目标：工作努力认真，做事积极勤快，责任感强，与本部门同事和相关部门沟通配合良好；周会、晨会正常进行，并按照计划实施；
考核方法：工作态度不符要求一次减5分；每周没有召开例会，减5分；没有召开晨会，减2分；每月计划完成率减少10%，降低2分，少于60% 0分。工作任务（20分）：
考核目标：按时按量按要求完成；
考核方法：未完成部门安排的工作一次减5分；直至该项为0分。
工作质量（20分）：
考核目标：（客户退货、各种检查结果以及现场问题的报告和控制等）；考核方法：每发生一起错检或漏检，减5分；每周没有信息的及时反馈或沟通减5分；检验或各项报告不及时和不正确减5分，直至该项为0分。
出勤率（10分）：
考核目标：每月出勤率要求达到96%；
考核方法：出勤率未达96%时，每降低一个百分点减2分，直至该项为0分。顾客满意度（20分）
考核目标：内部顾客投诉为0，外部顾客投诉为1；
考核方法：因工作态度造成内部顾客投诉每起发生减5分，直至该项为0分；外部顾客投诉超出本月目标后，每起发生减5分，直至该项为0分。
强调每月检验员的考核需结合质量人员的工作技能评估结果作参考，最终由质量部主管或经理组织考评，人事执行考评结果，总经理负责审批。
6.相关处罚的规定
进厂检验：在生产使用过程中，发现物料出现异常质量问题，而且此异常问题是检验规范中要求的，实际未检测到或漏检的，由部门经理及总经理酌情给予XX～XXX元的处罚，同时由质量工程师和检验组共同制定纠正和预防措施。
过程检验：在成品检验过程中，发现因质量异常而批量返工的，其异常原因是规范中明确规定而实际又超出本目标的，由部门经理和总经理酌情给予XX～XXX元的处罚，同时由质量工程师和检验组共同制定纠正和预防措施。
最终检验：经证实属于最终检验责任（检验规范中规定的，我们也能够检测到的产品要求，实际未检测出来或漏检的）的客户投诉，其次数超过考核目标，由部门经理和总经理酌情给予XX～XXX元的处罚，同时由质量工程师和检验组共同制定纠正和预防措施。
第五篇：考核指标
一、项目经济承包合同中安全生产文明施工指标分解（月指标）：
（1）杜绝死亡事故和重伤事故，月轻伤频率 ＜0.5‰。
（2）确保每月施工安全检查和评价达优良等级。
（3）确保每月文明施工检查和评价达优良标准，确保市级文明工地。
二、奖惩办法
（1）奖励办法
①按每月考核实现文明施工及安全目标时，奖励项目经理300 元，项目班子其他成员按80％计取；
②年终考核实现项目文明施工及安全目标指标时，奖励项目经理年收入的30%，项目班子的其他成员按 20%计取。
③最终考核实现项目文明施工及安全目标指标时，奖励项目经理年收入的40%，项目班子的其他成员按30%计取。
（2）惩罚办法
①施工生产缺少防护设施、存在事故隐患
a.对随意拆毁生产施工设备设施、安全防护设施的责任者不采取处罚措施的项目管理人员，罚款 100-200元； b.工程已开工无施工组织设计或施工组织设计中无安全措施，对工程项目技术负责人罚款 200元；
c.对存在重大事故隐患，且接到《停工通知书》逾期不解决的，对工程项目经理罚款300-500元；对事故隐患整改不彻底的，对工程项目工长罚款100-200 元；
d.对现场有毒有害产品无防护措施，并未提供技术指导或协助解决防护措施的，对工程项目经理处以 200-500元罚款。
②.现场管理及检查
a.对不戴安全帽，电气人员不穿绝缘鞋，高处作业不挂安全带等违纪者，不采取制止纠正措施的，项目经理及管理人员罚款 50元。
2、加强项目考核的建议
针对项目考核中存在的一些现象和问题，笔者认为我们的项目考核应该在以下一些方面重点加强。
2.1科学的制定考核指标
目前，我们的项目考核指标主要是：目标成本、目标利润、进度控制、质量指标、安全指标、项目部管理费等六项指标。其中质量、安全指标的制定都有完整的体系文件支持，形成了完整了定性考评体系。进度控制指标在项目合同或者授标文件内也有约定。目标利润指标实际上受制于目标成本指标，如果明确了目标成本，那利润指标也就相应的确定了。所以，只有目标成本、项目部管理费指标构成考核体系中的关键指标。随着管道施工形势的变化及我局项目管理的发展，我们的考核指标也要相应的进行科学调整。
2.1.1增加施工组织设计考核指标
施工组织设计是对项目施工的全过程实行科学管理的重要手段。通过施工组织设计的编制，可以全面考虑项目的各种具体施工条件，扬长避短地拟定合理的施工方案，确定施工顺序、施工方法、劳动组织和技术经济的组织措施，合理地统筹安排拟定施工进度计划，保证项目按期投产或交付使用；也为项目的设计方案在经济上的合理性，在技术上的科学性和在实施工程上的可能性进行论证提供依据；还为我们制定项目目标成本提高依据。设立施工组织设计考核指标，加强对施工组织设计的考核管理，是推进项目考核工作的重要环节。
2.1.2以定额为基础确定目标成本指标
项目管理的出发点和落脚点是实现项目效益最大化，使项目达到质量优、效率高、工期短、消耗低、安全好等目标，而项目的成本就是这些目标经济效果的一个综合性指标。作为项目运作最高成本控制额的目标成本指标，决定着项目的贡献、企业的收益，牵动着项目管理者和参与者的神经，所以这一指标的制定最值得研究。有人说，最完美的指标体系应该是跳起来能够摘到苹果的水平。如果指标制定的太高，怎么跳也够不到，那么他就丧失了跳起来的热情；如果指标制定的太低，他不跳就能轻易的摘到，那无形中就形成了一种浪费。所以最完美的指标应该是能够完成但是必须付出一定的努力才能实现的目标。
为了减少人为因素，公平、公正、公开的制定项目成本指标，最重要的就是编制、出台一套完整的局内部施工定额，包括长输管道敷设工程、储罐安装工程、定向钻穿越工程、盾构穿越工程、大型场站安装、地下储库等施工的劳动定额、机械定额、物资定额、工期定额和费用定额等。有了内部定额，也就有了统一的制定项目目标成本的标准，这对加大成本管理力度，建立科学的成本考核体系，把项目考核管理做精做细起到至关重要的作用。有了全局性的内部定额，我们核定单位产品（标段成本或者单台储罐成本等）就做到了有法可依，可以更加清晰的掌握项目以及项目中各公司的收益。
按阶段分解成本考核指标，为加强过程考核做好准备。根据施工组织设计中确定的工程进度及阶段性施工方案等对成本指标进行阶段分解。可以考虑开工准备阶段、项目主体完成一半阶段、项目主体完工阶段、项目竣工阶段等。成本考核指标分解后对于分阶段进行成本考核打下基础，对缩短考评时间，及时地反馈成本控制情况，促进项目部调整成本管理重点，提高项目收益起到很好的作用。
2.2及早出台考核指标
项目考核指标在某种意义上说是项目管理的奋斗目标，目标明确，项目管理才有努力方向。在这个层面说，我们考核指标的出台应该在项目启动前。但是，当前我们的管道施工却存在着一些自身的特点，那就是我们的建设项目多是由集团公司（股份公司）投资建设，事关国家能源安全的战略性、政治性工程，工期安排短，准备时间短，建设周期短，带有很强的指令性色彩。这在一定程度上造成了我们边设计、边采办、边施工的局面，同时也出现了项目合同的签订滞后于工程进展，我们的项目已经进行一段时间了但合同还没有签订的现象。这给我们项目指标的出台制造了极大地障碍，也增加了我们项目考核的难度。
面对这种特殊的局面，我们的项目考核也要与时俱进。我们可以根据项目初设的相关信息以及预期合同额进行事前规划，尽早出台项目考核指标。在项目运行的过程中，我们再根据实际项目情况对考核指标进行修正，这样有了大的方向，我们的项目管理也就有的放矢了。
2.3强化过程考核
施工过程中的成本控制是成本管理的最主要阶段，也是成本目标能否实现的关键环节，工程项目的一次性特点，决定了工程项目成本管理也是一次性的行为，因此，在施工过程中，项目成本能否降低，项目能否获得最好的经济效益，都取决于成本控制的好坏。由于影响项目成本的因素很多，在不同的情况下，采取不同的控制方法，将会产生不同的效果。因此，项目考核执行的关键是过程考核。光布置，不检查，什么工作也不能落实。围绕考核指标，强化考核过程，对项目阶段性管理过程及成果进行监督、检查和指导，是确保项目设定目标实现的保证，是决定项目考核能否收到实效的最重要环节。项目考核过程不是消极的限制与监督，而是要积极创造条件，着眼于工作的指导。考核的过程是加强局本部与项目部的工作职能，促进项目管理团队的团结协作，提高项目运作水平的过程。项目的考核过程也会使项目进展中每个参与的个人、单位、部门都更加明晰自己责任、权力和义务，以保证项目按照运作计划运转，实现预定的目标。
强化考核过程首先要得到上层领导的重视支持与各部门的配合。项目考核参与单位要把考核的监督职能与服务职能结合起来，营造出良好的考核环境。
强化考核过程应明确考核时间表，不同的考核指标考核时间应该有所不同。我们的项目考核应该按照项目的计划工期，在下达考核指标的同时非常明确的下达考核时间表，而不用模糊的、变数较大的考核时间。这一方面传递给被考核方一个准确的检查、衡量的时间表，提醒、督促项目参与人员关注考核的相关内容，自觉地为目标的实现积极的努力。另外一方面传递给考核方一个信息，就是在既定的时间去查验自己设定的指标完成情况，尽自己的职责或者说是能力去帮助项目完成相关的考核任务。对于不同的考核指标，考核时间应该不同。比如，施工组织设计的考核应该在项目开工之初进行，安全、质量等考核应该每月都有等。强化考核过程应提高对考核人员的要求。考核人员不但要熟悉自己所负责的考核指标的相关知识，还要加强对工程预算、工程施工、工程技术等基本知识的学习，要加强对企业管理知识的学习。只有不断增加各方面的知识，才能在项目考核工作中得心应手，取得好的考核效果。由于施工现场一般都远离局所在地，项目考核人员就要经常深入现场，了解具体情况，平时注意积累考核材料，这样到了既定考核时才会缩短考核时间，提高考核质量。
2.4严格兑现考核结果
当设定的考核期限到达的时候，我们就要对项目考核实施后所获得的成果进行考评。认真做好考核成果的考评工作，客观公正地评价项目部及项目经理，及时地反馈、通报考核结果并严格兑现考核承诺，对于提高员工士气、加强团结、总结经验、改进工作、促进项目考核管理工作的循环和提高都具有十分重要的意义。
考核结果的兑现要严格。坚决兑现既定的承诺，包括风险抵押金、效益工资、成本节余、利润超额等的奖励数额或者是出现成本超支、质量问题、安全问题等的惩罚措施都不能含糊，要让人看到项目考核的刚性。
考核结果的兑现要讲究实效性。在项目考核体系中要对项目考核结果的兑现时间做出明确规定，每次考核都要有相应的明确考核结果兑现时间。及时兑现考核结果，一方面让项目考核的激励作用适时发挥，提高项目参与人员的工作热情、工作积极性以至最终提高项目效益。另一方面让项目考核的监督管理作用及时发挥效能，以改进项目管理，堵塞管理漏洞。总之，考核结果兑现的实效性是项目考核作用发挥的重要影响因素。
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