显微镜的使用与维护
班级：
姓名：
学号：
一、实操部分（80分）
序号
内容
评分标准
分值
得分
准备（满分10分）
材料准备充分，中途不得取用非操作台材料
显微镜取用姿势准确，安放位置合理
低倍镜使用（满分25分）
插上电源，打开光源，用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动
使低倍镜对准镜台的通光孔，放置载玻片，标本中间对准通光孔，并用压片夹夹好
调节焦距，从一侧看着向上调节载物台，粗准焦螺旋调节物镜与载物台至最小距离处
双眼视目镜，调节粗准焦螺旋至有模糊的像，然后调节细准焦螺旋至清晰的像，二者不得来回交替使用，且光线强弱适宜（2分）。
高倍镜使用（满分10分）
将观察对象调至视野中央，转动转换器至高倍镜，防止撞到玻片
调节细准焦螺旋至清晰的像，光线调节至强弱适宜
油镜的使用（15分）
转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。
如果不出现物象或者目标不理想要重找，在加油区之外重找时应按：低倍→高倍→油镜程序。在加油区内重找应按：低倍→油镜程序，不得经高倍镜，以免油沾污镜头（3分），至调出清晰的像。
擦拭目镜和物镜上的油污，擦镜纸、二甲苯、(0.5)擦拭方法均要正确(1)
取下玻片，拔下电源，关上开关，载物台调至最大距离处，物镜八字摆开，罩上防尘罩，并认真填写使用记录。
计时
不得超过5分钟，超过者倒扣分，最多扣5分
简单染色评分标准
班级：
姓名：
学号：
序号
考核项目
评分要素
配分
评分标准
检验结果
得分
备注
准备（10分）
着装整洁；实验用物齐全适用，放置合理
少选多选1件扣5分
制片（40分）
无菌操作取菌
无菌操作正确规范，错1处扣5分，涂片区域圆形，直径1cm左右
干燥固定
不可过热、固定操作的规范性，错1处扣2分
染色、水洗
染液滴加的量；染色时间，水洗操作的规范性，错1处扣5分
镜检（35分）
显微镜的预备
显微镜的检查；正确放置打开光源，光路对准，错1处扣2分
涂片镜检
低倍到高倍，到油镜，物镜的转换；物象调节，错1处扣2分
镜检结果
菌体分布均匀，密度合适，明暗合适，对比度合适。错1处扣3分
显微镜的整理
镜头的擦拭；物镜的“八字形”转换；将载物台降到最低，错1处扣2分
其他（5分）
清理用物，环境卫生
清扫实验台及收拾产生垃圾，少1环节扣1分
时间（10分）
操作时间
要求10分钟内完成，每超过1分钟，扣5分。
总分
制备无菌平板评分标准（时间5分钟）
班级：
姓名：
学号：
项目
考核内容
分值
评分细则
扣分
备注
得分
准备
（10分)
物品准备、摆放及酒精擦拭
物品摆放合理、酒精擦手正确，材料准备齐全，得8分
中途不得取用任何物品，取1次扣4分
摆放的物品影响操作，扣2分
取菌前未用酒精擦拭，扣2分
贴标签（培养皿）
贴标签且位置合理，得2分
每漏贴一个，扣1分
每错贴一个，扣1分
三角瓶操作（15）
开塞、瓶口灭菌、持法、盖塞
三角瓶操作正确，得15分
未灼烧，开塞不正确，塞子放置不正确，均扣5分
盖塞前瓶口和塞子不灼烧，均扣5分
三角瓶的瓶口开口处位置不对，扣5分
以上几项合计最多扣15分
倒平板
（40分）
加培养基（培养皿持法、加入量、污染皿壁、混匀、）
正确（单手持皿，平端，两指自如开合皿盖，另一只手持培养基瓶），平板效果优秀，得40分
培养基温度不适宜，皿盖上方水汽过多，扣5分
平板未铺全或高于培养皿高的2/3，一个扣5分，培养基污染皿壁，一个扣10分
三角瓶口接触平皿，一个扣5分
培养基倾斜，一个扣5分
培养基有凝块、不透明，一个扣5分
无菌操作（15）
酒精灯附近区操作
在酒精灯无菌区操作，得15分
所有开口处均应在酒精灯无菌区，出无菌区1次扣5分
操作情况（10分）
操作熟练程度
熟练，得10分
较熟练，得8分
一般，得6分
不熟练，得0分
无菌检查（10分）
培养48h，有无微生物生长
无杂菌生长，且平板无开裂，无干枯部位，得10分
培养皿有杂菌，每个扣5分
平板开裂，共扣5分
平板干枯，共扣5分
血球计数板计数（时间：30min）
班级：
姓名：
学号：
项目
考核内容
分值
考核记录（以“√”表示）
备注
得分
准备（3分）
物品摆放及酒精擦手
0.5
物品摆放合理、酒精擦手正确，得0.5分
摆放的物品影响操作，扣0.5分
取菌前未用酒精擦手，扣0.5分
显微镜的取用
0.5
显微镜的取用与摆放方式准确，得0.5分
取用与摆放方式不正确，扣0.5分
血球计数板的放置与检查
正确放置血球计数板于载物台上，得1分
没用压片夹夹住，扣0.5分
没有放在计数区内，扣0.5分
进行检查或经清洗后确定清洁，得1分
没有进行检查扣1分
清洗后干燥方法不合理，扣1分
加样（2分）
添加酵母菌悬液于血球计数板上
能够正确添加酵母菌悬液2分
加样前未摇匀菌悬液扣1分
未用滤纸吸除多余菌液扣0.5分
盖好玻片后有气泡扣1.5分
显微镜调节（3分）
调整显微镜找到血球计数板上计数网格
40倍镜下找到最左上角的大网格，并将显微镜调清晰，给监考老师看，得3分
未从低倍到高倍转换，扣0.5分
未给监考老师看扣2.5分
未找到最左上角的大网格扣2分
找到最左上角的大网格但不清晰扣1分。
计数（2分）
准确计数，并写出原始数据
2分
准确计数，并写出原始数据，得2分
没有原始数据，扣2分
数据不准确，扣1分
原始数据不合理，扣1分
计算，报告（6分）
计算公式、过程
准确计算，得出菌悬液浓度，得4分
数据处理过程不正确，扣4分
数据处理结果不正确，扣4分
数据不合理，扣1分
报告结果规范、正确
报告清楚、准确、无涂改，得2分
结果报告不准确，扣0.5分
报告填写每改1次，扣0.5分
清洗（2分）
血球计数板清洗，归位
血球计数板清洗，并干燥归位2分
清洗方法不正确，扣1分
干燥方法不合理，扣1分
未将血球计数板归位，扣1分
文明操作（2分）
实验后台面整理，设备归位
整理，得2分
显微镜未整理，扣1分
台面未整理，扣1分
血球计数板损坏，扣2分
盖玻片损坏，扣0.5分
完成时间
(0分)
共用（）分钟
开始：
结束：
0
提前，不加分不扣分
按时，不加分不扣分
超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）
合计
平板划线分离考核标准
班级：
姓名：
学号：
序号
项目
内容
满分(100分)
评分细则
扣分
总分
实验前的准备
准备全所需的所有实验材料
15分
材料准备充分，中途取用物品扣3分
贴标签
未贴扣4分，贴错扣2分；信息不完整扣2分
酒精棉球擦拭手与工作台面
4分
未擦拭扣4分
擦手不彻底最多
2分
擦台面不彻底最多2分
接种针的灼烧是否彻底，拿法是否科学
4分
灼烧不彻底，最多扣3分
接种环拿法不对，扣1分
未灼烧4分
从试管中取样接入培养皿中
试管中取菌（15分）
50分
试管口未灼烧，扣3分
持塞手法不正确，扣2分
接种环未冷却，扣3分
塞塞子时未灼烧塞子与管口，扣4分
试管口离开无菌区，扣3分
手法是否标准(5分)
持平板的手法不当扣1分
开口过大扣4分
分区接种（30）
有离开5cm酒精灯无菌区1次扣2分，最多扣5分
离开无菌区10cm以上一次扣5分
划完1区未灼烧，扣5分
灼烧完未冷却，扣5分
单手旋转平板，有明显的分区操作
划破平板，最多扣10分
接种完毕，台面的处理以及培养等
台面的整理：酒精灯熄灭，各试验器材归位（4分）
10分
1分
熄灭方式不对，扣1分
3分
未归位，扣3分；未整理，扣2分
未带走垃圾，扣2分。最多扣3分
置入培养箱中倒置培养，以及最适培养温度的设置（4分）
4分
未倒置，扣2分
培养温度和时间写在标签上，未注明扣2分
完成实验，酒精棉球擦拭手或者洗手（2分）
2分
未擦拭手或洗手
结果检查
分离效果
20分
10分
10个以上单菌落，少1个扣1分
分区效果
5分
无明显分区，只有一个区，扣5分
平板无菌落区按占的比例扣分
污染情况
5分
有其他杂菌污染，扣5分
用时
5分钟，超过1分钟扣1分
平板涂布分离考核标准（20min）
班级：
姓名：
学号：
项目
考核内容
分值
考核记录（扣分）
备注
得分
准备
（10分)
物品摆放及酒精擦手
物品准备合适，不多不少，得3分
物品摆放合理、酒精擦手正确，得2分
摆放的物品影响操作，扣1分
取菌前未用酒精擦手，扣1分
编号（试管、培养皿），贴标签
都编号且正确，得5分
每漏编（贴）一个，扣1分
每错编一个，扣1分；标签信息不全，一个扣1分
样品稀释
(30分)
样品混匀(原始样品、稀释样品)
进行且操作正确（平摇样品瓶、手心震摇试管），得10分
原始样品没有混匀，扣2分
稀释样品没有混匀，一个扣2分
手心震摇试管时没塞塞子，扣2分
移液过程其他问题，一次扣2分
吸管或移液器使用(打开方式、取液、调节液面、放液、稀释顺序)
吸管或移液器使用正确，得5分
打开吸管包扎纸时手碰到管尖至吸管的1/3处，一次扣2分；枪头盒每取一次都要迅速盖上，注意无菌操作，未盖一次扣2分
放液时若吸管（或移液器）外壁碰到试管口却没有灼烧试管口，一次扣2分
吸取刻度不准确，一次扣2分
稀释时将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中，一次扣2分
移液过程中液体流滴在试管外面，一次扣2分
试管、三角瓶操作（开塞、管口灭菌、持法、盖塞）
试管三角瓶操作正确，得10分
菌种试管三角瓶开塞未灼烧，扣2分
开塞不正确，一次扣2分
盖塞不正确，一次扣2分
持法不正确，一次扣2分
盖塞未灼烧，扣2分
平板涂布（25分）
加样
操作正确，得5分
将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中进行接种，一次扣1分
吸管外壁碰到培养皿壁，一次扣1分
漏接培养皿，一个扣1分
试管被污染，每根扣1分
涂布
涂布棒使用正确，涂布效果好，得10分
涂布棒上酒精未灼烧彻底，扣2分
涂布棒未冷却，一次扣2分
涂布方法不对，扣2分
涂布使平板破，扣4分
单手持皿，平端，两指自如开合皿盖，错误扣2分
酒精灯附近区操作
在酒精灯附近区操作，得3分
未在酒精灯附近区操作，扣3分
空白
进行，得4分
未进行，一个扣2分
操作熟练程度
熟练，得3分
较熟练，得2分
一般，得1分
不熟练，得0分
培养(3分）
培养
正确培养，得3分
培养时未翻转培养皿，一个扣2分
将培养时间与培养温度写在标签上，错误或漏写均扣1分
文明操作
(2分)
实验后台面整理
整理，得1分
未整理，扣1分
器皿破损
未破损，得1分
破损，扣1分
完成时间
(0)
共用（）分钟
开始：
结束：
0
提前，不加分不扣分
按时，不加分不扣分
超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）
合计
结果观察
结果判断（30分）
培养结果观察
菌落无片状，空白无菌落，得10分
有10个以上单菌落，少一个扣1分
空白平板有菌落，一个平板扣5分
精密度
极差与平均值之比(％)
（以计数平板进行计算）
≤10%
得12分
10~15%
得9分
15~20%
得6分
20~30%
得3分
>30%
得0分
准确度
（以计数平板进行计算）
≤10%
得8分
10~20%
得4分
20~30%
得2分
>30%
得0分
培养基的制备与灭菌
班级：
姓名：
学号：
项目
考核内容
分值
考核记录（扣分）
备注
得分
题目
配制50mL牛肉膏蛋白胨培养基，全部分装入试管中，灭菌完毕摆斜面
准备
（10分)
药品准备
药品齐全，类别准确
天平准备
水平，干净
其他
操作所需所有物品，均齐全合适
计算（5分）
准确
所有物品均计算准确，且称量准确
称量（25分）
加水
加水量适宜
顺序准确
按照配方顺序加入样品
方法正确
牛肉膏的称取方法正确
蛋白胨迅速，不至潮解
操作文明
不得有药品撒入天平中，一次扣5分
溶解与
定容（10）
药品溶解
按顺序溶解样品，不糊不溢
准确定容至要求的体积
体积准确，定容方法准确
调节pH（10分）
调制要求值
pH试纸使用准确
调节准确，不过量，不回调
分装（15分）
分装试管，将所有培养基分装完
装量适宜，过大或过小一支扣1分
分装时培养基沾染在试管口上，一支1分
分装过程培养基凝固
灭菌（5分）
高压蒸汽灭菌
温度时间设定合适，写在标签上
灭菌锅使用熟练
摆斜面5分
摆接种斜面
长短适宜
表面整齐
熟练程度（5分）
操作熟练程度
熟练，得5分
较熟练，得3分
一般，得2分
不熟练，得0分
文明操作
(5分)
实验后台面整理
整理，得3分
未整理，扣3分
器皿破损
未破损，得2分
破损，扣2分
完成时间
(5)
共用（）分钟
开始：
结束：
0
提前，不加分不扣分
按时，不加分不扣分
超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）
合计
高压蒸汽灭菌锅的使用与维护
班级：
姓名：
学号：
序号
内容
分值
评分标准
扣分与备注
得分
材料准备
所需菌种、材料齐全，中途无任务新增材料
操作准备
水量适宜、物品摆放合适
加盖方式正确，各旋钮调节适当
灭菌
放气方法准确，时间恰当
旋钮调节
灭菌过程中各旋钮调节准确
压力旋钮
设置改变压力旋钮，方式准确
灭菌结束
灭菌结束，各旋钮和开关调节恰当，维护方法准确
故障处理
在灭菌过程中随机提出问题，
点击咨询