检验员四级 微生物检验技术+答案

第一篇：检验员四级 微生物检验技术+答案

微生物检验技术

一、判断题（将判断结果填入括号中，正确的填“√”，错误的填“×”）： 1.微生物可分为细菌、放线菌、霉菌和酵母菌四大类。（×）2.具有荚膜的肺炎双球菌其毒力强。（√）

3.食用前将食品充分加热可以防止一些食物中毒的发生。（√）4.细菌在不同生长条件下，形态可能有变化。（√）

5.根据细菌所含DNA的不同，可以将细菌分为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性 菌两大类。（×）

6.所有细菌仅需20~30分钟即可繁殖一代。（×）

7.菌落是指一群在固体培养基表面繁殖形成肉眼可见的集团。（×）8.大肠杆菌是食品和饮用水卫生检验的指示菌，（×）9.真菌进化程度高于细菌，所以真菌为多细胞的微生物。（×）10.在微生物中，只有霉菌才能以菌丝体的形式进行生长。（×）11.酵母菌是一种多细胞的微生物。（×）

12.霉菌主要是通过产生各种有性孢子进行繁殖的。（×）

13.在固体培养基上生长时，霉菌的菌落较大，比较湿润粘稠，不透明，呈现或紧或松的蜘蛛网状、绒毛状或棉絮状。（×）

14.霉菌往往在干燥的环境中大量生长繁殖，有较强的陆生型。（×）15.微生物营养物质中氮源的功能是：提供氮素和能量来源。（×）

16.微生物吸收营养物质，单纯扩散是利用浓度差，从浓度低的向浓度高的进行扩散。（×）

17.任何微生物培养基中均需含有碳源、氮源、无机盐、生长因子和水分等五种营养物质。（×）

18.微生物在生命活动中需要的能量主要是通过生物氧化而获得。（√）

19.微生物的分解代谢就是将复杂的大分子物质降解成小分子的可溶性物质。（√）

20.微生物的酶具有特殊的催化能力。可以在发酵工艺上利用任何一种酶来进行生产。（×）

21.细菌生长达到稳定期，菌体生长速度等于零，细菌停止生长。（×）22.不断加温可以增加细菌的生物化学反应速率和细菌的生长速度。（×）23.食品的主要营养成分各不相同，造成腐败变质的微生物却基本相同。（×）24.根据食品pH值范围，可将食品划分为酸性食品和碱性食品。（×）

25.结合水是以物理引力吸附在大分子物质上，不能作为溶剂或参与化学反应，因此也不能被微生物利用。（√）

26.微生物有嗜冷、嗜温、嗜热型，而每一群微生物又各有其最适宜生长的温度范围。（√）

27.渗透压与微生物的生命活动有一定关系。少数的耐盐菌、嗜盐菌、耐糖菌、嗜糖菌可在多糖或多盐的食品中生存。（×）

28.水在食品加工中是不可缺少的，水源或输水管道、水箱发生污染，有可能造成食品的微生物污染蔓延。（√）

29.空气的含菌量与空气的含尘量呈非线性关系。（×）

30.用于盛放易腐败食品的容器，不经清洗和消毒而连续使用，很容易引起食品的交叉污染。（√）31.在食品加工过程中，微生物的数量一般出现明显的上升的趋势。（×）32.食品被产毒霉菌菌株污染，就能检测出霉菌毒素。（×）33.快速风干比缓慢风干对防止产生黄曲霉素有力。（√）

34.微生物检验接种是指将微生物的纯种或含有微生物的材料转移到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体被的过程。（√）

35.微生物检验倾注接种方法是取少许纯菌或少许含菌材料（一般是液体材料）。先放入无菌的培养皿中，而后倾入已溶化并冷却至40℃左右含有琼脂的灭菌培养基上，使它与含菌材料均匀混合后，冷却至凝固。（×）

36.微生物检验时，对已打开包装但未使用完的器皿，可以重新包装好留待下次使用。（×）

37.所有的微生物培养时都需要氧气的参与。（×）

38.细菌检验的培养基中加入胆盐可抑制革兰氏阳性菌的生长，以有利于革兰氏阴性菌的生长。（√）

39.在制备某些微生物检验培养基时需加入一些煌绿、玫瑰红酸、孟加拉红等物质作为培养基的指示剂。（×）

40.微生物检验培养基可根据配方，称量于适当大小的烧杯中，由于其中干粉易吸潮，故称量时要迅速。（√）

41.消毒是用物理、化学或生物学的方法杀死微生物的过程。（×）

42.由于微生物体积很小，细胞又较透明，不易观察到其形态，故必须借助于染色的方法使菌体着色，增加与背景的明暗对比，才能在光学显微镜下较为清楚地观察其个体形态和部分结构。（√）

43.微生物染色的染料按其组成成分可以分为自然染料和人工染料。（×）44.微生物染色时按照所用染料种类的不同，可把染色法分为单染色法、复染色法和特殊染色法。（√）

45.G+细菌经革兰氏染色菌体呈红色。（×）

46.微生物实验室布局应采用单方向工作流程，避免交叉污染。（√）

47.无菌室的无菌程度测定方法：将已制备好的3~5个琼脂平皿放置在无菌室工作位置的左中右等处，并开盖暴露15min，然后倒置于36℃培养箱培养24小时，取出观察。（×）

48.用于微生物检验所采的样品必须有代表性，按检验目的采取相应的采样方法。（√）

49.微生物检验的采样方法，重量法通常用于采集中样，拭子法用于采集一定面积的样品。（√）

50.微生物检验采样时，散装食品的采样是无菌采样器采集5倍或以上检验单位的样品，放入无菌容器内，总量应满足微生物指标检验的要求。（√）51.微生物检验采样时，盛样容器的标签上必须标明样品名称和样品顺序号以及其他需要说明的情况。（√）

52.微生物检验样品制备的全部过程均应遵循无菌操作程序。开启样品容器前，先将容器表面擦干净，然后用75%酒精消毒开启部位及其周围。（√）53.微生物检验时，含有二氧化碳的液体检验前，应用无菌操作程序先将液体倒入小瓶中，然后覆盖纱布，轻轻振摇，使气体完全逸出。（×）54.食品加工设备卫生检验的样品采集方法有称量法、刷子刷洗法。（×）55.表面擦拭法采样检出的活菌总数不高，同时常导致检验的结果不一致。所以需二人共同进行采样工作。（√）56.食品加工环节卫生检验，如在清洁消毒或加工前后各取一份样品，对卫生管理的评估更适合。（√）

57.空气中霉菌检验是为了防止霉菌孢子引起皮癣、鹅口疮、过敏性哮喘等疾病，以及对物品的污染。（×）

58.菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及其卫生质量，它反映食品在生产加工过程中是否符合卫生要求，以便对被检食品做出适当的卫生学评价。（√）

59.具备培养微生物的设备即能满足菌落总数检验的需要。（×）60.菌落总数检验所用的培养基时营养琼脂培养基。（×）

61.菌落总数检验在制10倍递增稀释液时，每递增稀释一次即用1支10ml灭菌吸管。（×）62.菌落总数培养时，如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在倾注凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基，凝固后翻转平板，按培养条件培养。（√）

63.菌落总数报告时，若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每克（或毫升）中菌落总数结果。（√）

64.大肠菌群是一群在36℃条件下培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。（×）

65.大肠菌群检验所用恒温培养箱的温度是37℃±1℃。（×）66.大肠菌群检验中所用的盐酸浓度是10mol/L。（×）

67.大肠菌群检验初发酵的程序是：检样制备→10倍系列稀释→选择任意三个稀释度接种大肠菌群初发酵肉汤管。（×）

68.大肠菌群检验时样品均液的pH应用盐酸或氢氧化钠调节至中性。（√）69.大肠菌群初发酵使用的培养基是月桂基胰蛋白胨肉汤。（×）70.霉菌和酵母菌检验时，橡胶乳头和洗耳球是必备的实验材料。（√）71.食品中霉菌和酵母菌检验的稀释液与细菌检验的稀释液完全相同。（×）72.霉菌和酵母菌的检验程序与细菌检验程序相同。（×）

73.霉菌、酵母菌检验样液加入后，将冷至46℃左右的培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。（×）

74.霉菌、酵母菌计数的稀释度选择及菌落报告方式可参考国标的菌落总数检验方法。（√）

一、单项选择题（选择一个正确的答案，将相应的字母填入题内的括号中）： 1.一部分微生物与人类形成共生的关系，在自然界达到（C）A、动态平衡 B、数量增多 C、生态平衡 D、数量减少

2.影响食品安全的主要因素除了化学性污染、物理性污染外，还有（D）A、土壤污染 B、水源污染 C、空气污染 D、生物性污染 3.细菌属于原核细胞型微生物的理由是（D）

A、简单的二分裂方式繁殖 B、单细胞生物 C、较其它生物小得多 D、核外无核膜包裹，核内无核仁

4.（C）不属于非细胞型微生物的结构成分。A、DNA B、RNA C、脂肪 D、蛋白质 5.用纳米作为度量单位的微生物是（A）A、病毒 B、霉菌 C、酵母菌 D、细菌 6.食品微生物检验的目的就是要为生产出安全、卫生、（C）的食品提供科学依据。

A、美观 B、美味 C、符合标准 D、营养丰富

7.由微生物引起食品变质的基本条件是食品特性、环境条件、以及（C）。A、人员因素 B、加工因素 C、微生物的种类及数量 D、以上都是 8.螺旋菌按其弯曲程度不同分为螺菌、（D）和螺旋体。A、长杆菌 B、短杆菌 C、球菌 D、弧菌 9.细菌的基本形态是球菌、杆菌和（C）。

A、葡萄球菌 B、放线菌 C、螺旋菌 D、芽孢菌

10.细菌的细胞结构必须用光学显微镜的（C）才能观察清楚。A、低倍镜 B、高倍镜 C、油镜 D、聚光镜 11.球菌的直径一般约在（B）之间。A、（0.5~2）nm B、（0.5~2）um C、（0.5~2）mm D、（0.5~2）cm 12.细菌细胞壁的主要成分是（D）。

A、蛋白质 B、磷脂 C、几丁质 D、肽聚糖

13.细胞膜的主要功能是控制细胞内外一些物质的（B）。

A、存储遗传信息 B、交换渗透 C、传递遗传信息 D、维持细胞外形 14.因为（D），所以芽孢不是细菌的繁殖体。

A、绝大多数产生芽孢的细菌为革兰式阳性细菌 B、不是所有细菌都产生芽孢 C、芽孢只在体外产生 D、一个芽孢发芽只能生成一个菌体 15．细菌芽胞内的耐热性物质是（D）。

A、二氨基庚二酸 B、N—乙酰胞壁酸 C、β—羟基丁酸 D、2，6—吡啶二羧酸

16.细菌常以（B）进行繁殖。

A、断裂增殖 B、二分裂法 C、通过孢子 D、通过芽孢 17.细菌与其它生物相比，繁殖速度快。这主要是因为（B），有利于和外界进行物质交换。

A、食谱杂、分布广 B、体积小、表面积大 C、结构简单、种类多 D、适应强、易变异

18.有芽孢的细菌菌落表面表现为（C）。

A、湿润透明 B、湿润光滑 C、干燥皱折 D、隆起皱折 19.细菌在液体培养基中，不会出现的现象是（C）。

A、使培养基浑浊 B、在液体表面形成膜 C、可能形成菌落 D、出现沉淀 20.在自然界中，微生物的种类繁多，其中（C）分布最广。A、真菌 B、霉菌 C、细菌 D、病毒

21.真菌没有叶绿素，因而不能利用（D）通过光合作用来制作食物，靠寄生或腐生生存。

22.从生物学的观点来看，（B）不属于真菌的特点。

A、没有叶绿素 B、没有完整的细胞核构造 C、无根、茎、叶分化 D、能通过有性或无性繁殖 23.酵母菌的基本形态为（A）。

A、卵形 B、杆形 C、方形 D、弧形 24.酵母菌和霉菌通常生长在（A）。

A、室温下 B、37℃ C、55℃ D、这些都不是 25.霉菌菌丝由分支或（B）的菌丝组成。A、不分裂 B、不分支 C、分裂 D、分离 26.霉菌菌丝分为无隔膜和有（D）两种。A、荚膜 B、菌膜 C、细胞膜 D、隔膜 27.酵母菌的繁殖方法主要是（D）。

A、孢子 B、断裂增殖 C、二分裂法 D、芽殖

28.霉菌的繁殖方式多样，但（C）不属于霉菌的繁殖方法。A、断裂增殖 B、有性孢子 C、芽殖 D、无性孢子 29.酵母菌在液体培养基中生长时，（B）是不应该出现的现象。A、变浑浊 B、不同色泽 C、产生沉淀 D、形成菌膜 30.酵母菌比较不易在（D）中生长繁殖。A、水果 B、蜜饯 C、蔬菜 D、肉类

31.微生物常会引起食物变质，但（C）在传统发酵及近代发酵工业中，起着积极的作用。

A、细菌 B、蓝细菌 C、霉菌 D、放线菌 32.磷酸盐缓冲液、（C）等，是实验中常用的无机盐。A、牛肉膏 B、葡萄糖 C、氯化钠 D、蛋白胨 33.微生物在渗透酶和提供能量的前提下，将体外的营养物质逆浓度运送至体内，这就是（C）的作用。

A、单纯扩散 B、促进扩散 C、主动运输 D、基团移位 34.营养物质最后必须透过（B）才能被微生物吸收。A、细胞壁 B、细胞膜 C、核质体 D、渗透酶 35.微生物中（A）属于自养型微生物。

A、蓝细菌 B、霉菌 C、腐生菌 D、寄生菌

36.微生物的氧化作用可根据最终电子受体的性质，分为有氧呼吸作用、无氧呼吸作用和（C）三种。

A、氧化作用 B、代谢作用 C、发酵作用 D、渗透酶作用 37.微生物体内的能量转变就是（B）

A、新陈代谢 B、能量代谢 C、氧化作用 D、发酵作用 38.微生物必须通过胞外酶把蛋白质分解成（C），才能被吸收利用。A、丙酮酸 B、脂肪酶 C、氨基酸 D、乳酸

39.酶是由活的微生物体产生的、具有特殊催化能力和高度（B）的蛋白质。A、统一性 B、专一性 C、稳定性 D、系统性

40.微生物代谢的调节，实际上就是控制酶的（D）和活性的变化。A、种类 B、质量 C、能量 D、数量 41.外毒素是主要化学组成是（B）。

A、脂质 B、蛋白质 C、肽聚糖 D、脂多糖 42.微生物在代谢过程中能产生毒素，（C）不属于细菌内毒素的主要化学组成。A、磷脂 B、脂多糖 C、蛋白质 D、脂蛋白 43.菌体最佳收获期是在（C）。

A、延迟期 B、对数期 C、稳定期 D、衰亡期 44.大多数细菌、放线菌和霉菌都属于（B）。

A、厌氧微生物 B、需氧微生物 C、兼性厌氧微生物 D、微需氧微生物 45.食品中含有蛋白质、糖类、脂肪、无机盐、维生素和（A）等，这正契合了微生物生长的需要。

A、水 B、葡萄糖 C、钙 D、磷

46.肉、鱼等食品容易受到（C）分解能力很强的变形杆菌、青霉等微生物的污染。

A、脂肪 B、糖类 C、蛋白质 D、明胶 47.腌菜、酸泡菜是（B）微生物发酵制成的。A、大肠杆菌 B、乳酸菌 C、霉菌 D、细菌

48.酸性食品的腐败变质主要是由（C）和霉菌引起的。A、芽孢杆菌 B、乳酸菌 C、酵母菌 D、细菌

49.食品的Aw值在0.60以下，则认为（D）不能生长。A、细菌 B、霉菌 C、酵母菌 D、微生物 50.将食品贮存在6.5℃环境中有利（A）生长。A、嗜冷菌 B、嗜温菌 C、耐温菌 D、耐冷菌

51.高温微生物造成的食品变质主要为分解（C）而引起。A、脂肪 B、蛋白质 C、糖类 D、有机物

52.当食品中糖或盐的浓度越高，渗透压就越大，食品的Aw值则（B）。A、越大 B、越小 C、一样 D、不一定

53.酵母菌和霉菌一般能耐受较高的渗透压，常引起糖浆、（C）、果汁等高糖食品的变质。

A、水果 B、饮料 C、果酱 D、奶酪

54.一般来讲，在有氧的环境中，食品变质速度（D）。A、减慢 B、不变 C、不一定 D、加快

55.把含水量少的脱水食品放在湿度大的地方，表面的水分（B）。A、缓慢增加 B、迅速增加 C、不会增加 D、迅速减少

56.相当一部分食品的原料都来自田地，而土壤素有（D）的“大本营”之说。A、蛋白质 B、矿物质 C、维生素 D、微生物

57.土壤中的（A）相对于其他微生物而言，所占比率最高，危害最大。A、细菌 B、酵母菌 C、霉菌 D、放线菌

58、水在食品加工中是不可缺少的，它是食品的（C）、清洗、冷却、冰冻等生产环节中不可缺少的重要物质。

A、消毒 B、灭菌 C、配料 D、卫生

59.食品质量安全市场准入制度（QS）中对（A）用水有严格要求。A、工业 B、农业 C、民用 D、军用 60.空气中常见的微生物主要是（C）、耐紫外线的革兰氏阳性球菌、芽孢杆菌以及酵母菌、霉菌的孢子等。

A、耐酸 B、耐冷 C、耐干燥 D、耐热

61.空气中的微生物与土壤和污水中的微生物相比（B）。A、数量多，分布极不均匀 B、数量少，分布极不均匀 C、数量多，分布均匀 D、数量少，分布均匀 62.食品制造储藏的场所是鼠、蝇、蟑螂等动物出没的场所，这些动物体表及（B）均有大量微生物，经常是微生物的传播者。A、口腔 B、消化道 C、毛发 D、肢体

63.食品在加工前，原料大多营养丰富，在自然界中容易受到微生物的污染，加之运输、储藏等原因，很容易造成微生物的（A）。A、繁殖 B、减少 C、死亡 D、休眠 64.食品在加工过程中，要进行（A）、加热或灭菌等工艺操作过程。这些操作过程若正常进行，可以使食品达到无菌或菌群减少的状态。A、清洗 B、分级 C、拣选 D、包装

65.企业的卫生管理包括环境卫生、生产设备卫生、食品从业人员卫生以及食品的（D）、销售、运输等环节的卫生。A、加热 B、灭菌 C、采购 D、储藏

66.真空或充氮包装，可以减弱（B）的生长。

A、厌氧腐败微生物 B、需氧腐败微生物 C、耐氧腐败微生物 D、需养兼性厌氧微生物

67.反映粪便污染程度的指示菌是大肠菌群、粪大肠菌群和（B）。A、志贺氏菌 B、大肠杆菌 C、沙门氏菌 D、变形杆菌 68.霉菌毒素通常具有（B）、无抗原性，主要侵害实质器官的特点。A、耐低温 B、耐高温 C、耐碱 D、耐酸

69.人畜一次性摄入含有大量霉菌毒素的食物，往往会发生（C）中毒，长期少量摄入会发生慢性中毒。

A、爆发性 B、慢性 C、急性 D、多发性 70.通常产生毒素的霉菌种类有：黄曲霉、（A）、镰刀菌等中的一些种类。A、青霉 B、根霉 C、毛霉 D、黑曲霉

71.食品中为防止霉菌生长和毒素产生，通常采取驱除（B）的方法。A、CO2 B、O2 C、N2 D、H2 72.（A）不是食品工艺中霉菌毒素去除法。

A、煮沸法 B、活性炭法 C、酸性白土法 D、微生物去毒 73.微生物检验常用的分离工具有：接种钩、接种圈和（A）等。A、接种针 B、玻璃平板 C、三角烧瓶 D、试管

74.接种针常用于微生物检验操作时的（D）接种方法。A、涂布 B、倾注 C、划线 D、穿刺

75.微生物检验常用的接种和分离方法有点值、穿刺、浸洗和（B）等方法。A、标定 B、涂布 C、滴定 D、中和

76.微生物检验接种食品样品前，先用肥皂洗手，然后用（B）酒精棉球将手擦干净。

A.100% B.75% C.50% D.95% 77.微生物检验在接种前，接种环应经火焰烧灼全部金属丝，可一边转动接种柄一边慢慢地来回通过火焰（B）。A.二次 B.三次 C.四次 D.一次

78.微生物培养时用焦性没食子酸、磷等用以（C）。

A.除去氢气 B.除去二氧化碳 C.吸收氧气以除氧 D.降低氧化还原电位 79.用于细菌检验的半固体培养基的琼脂加入量为（D）%。A.0.5~1.0 B.0.5~0.8 C.0.1~0.5 D.0.2~0.5 80.微生物检验培养基中常见的酸碱指示剂有：酚红、中性红、溴甲酚紫、煌绿和（A）等。

A.甲基红 B.美兰 C.孟加拉红 D.伊红

81.琼脂其本身并无营养价值，但是应用最广的凝固剂。但多次反复融化，其凝固性会（C）。A.增加 B.不变 C.降低 D.消失

82.配制微生物检验培养基分装三角瓶时，以不超过三角瓶容积的（A）为宜。A.2/3 B.1/3 C.1/2 D.3/5 83.灭菌是杀灭物体中或物体上所有微生物的繁殖体和（B）的过程。A.荚膜 B.芽孢 C.鞭毛 D.菌毛

84.干热灭菌法一般是把待灭菌的物品包装后，放入干躁箱中加热至（A）。A.160℃，维持2h B.170℃，维持2h C.180℃，维持2h D.160℃，维持4h 85.（D）是能损伤细菌外膜的阳离子表面活性剂。A.福尔马林 B.结晶紫 C.漂白粉 D.新洁尔灭 86.甲醛通常适用于（D）。

A.室内喷雾消毒地面 B.擦洗被污染的桌 C.排泄物 D.空气熏蒸消毒（无菌室）。

87.影响灭菌与消毒的因素有很多，最主要是（B）、微生物污染程度、温度、湿度的影响尤为重要。

A.微生物所依附的介质 B.微生物的特性 C.消毒剂剂量的大小 D.酸碱度

88.待灭菌的物品中含菌数越多时，灭菌越是（D）。A.显著 B.容易 C.好 D.困难

89.微生物染色时酸性物质对于（C）染料较易吸附，且吸附作用稳固。A.中性 B.酸性 C.碱性 D.弱酸性

90.微生物染色的染料按其电离后染料离子所带电荷的性质，分为酸性染料、碱性染料、（B）燃料和单纯燃料四大类。

A.简单 B.中性（复合）C.天然 D.人工（合成）91.微生物染色时一般常用碱性染料进行单染色，如（B）、孔雀绿、碱性复红、结晶紫等。

A.品红 B.美兰 C.胭脂红 D.煌绿 92.微生物单染色的基本步骤是（A）。

A.涂片、固定、染色、水洗 B.涂片、染色、水洗、固定 C.涂片、染色、固定、水洗 D.涂片、水洗、固定、染色

93.革兰氏染色法将细菌分为G+G-两大类，这是由他们的（D）结构和组成不同决定的。

A.鞭毛 B.细胞质 C.细胞膜 D.细胞壁 94.革兰氏染色应选用（A）的菌染色。

A.幼龄期 B.成熟期 C.生长期 D.成长期

95.实验设备应放置于适宜的环境条件下，便于维护、清洁、消毒和校准，并保持（C）的工作状态。

A.整洁 B.良好 C.整洁与良好 D.正常

96.无菌室的要求：无菌室（包括缓冲间、传递窗）每3m2的面积应配备一根功率为（B）瓦的紫外线灯 A.25 B.30 C.40 D.60 97.安装在无菌室内的紫外线灯应无灯罩，灯管距离地面不得超过（C）m。A.2.0 B.2.2 C.2.5 D.2.8 98.无菌室用的紫外线灯管每隔（B）需用酒精棉球擦拭，清洁灯管表面。以免影响紫外线的穿透力。

A.1周 B.两周 C.一月 D.二月

99.无菌室每次使用前后应用紫外线灭菌灯消毒，照射时间不低于（A）min。关闭紫外线灯30min后才能进入。A.30 B.45 C.60 D.130 100.无菌室霉菌较多时，先用5%石炭酸全面喷洒室内，再用（A）熏蒸。A.甲醛 B.乳酸 C.甲醛和乳酸交替 D.丙二醇溶液 101.无菌室细菌较多时，可采用（C）熏蒸。

A.甲醛 B.乳酸 C.甲醛和乳酸交替 D.丙二醇溶液

102.微生物检验采样后，为防止样品中原有微生物的（D）发生变化，样品在保存和运送过程中，应采取必要的措施。A.种类 B.特性 C.大小 D.数量

103.微生物检验样品的中样式从样品（A）取得的混合样品。A.各部分 B.一部分 C.大部分 D.指定部分 104.微生物检验样品的大样是指（B）样品。A.一部分 B.一整批 C.全部 D.一件

105.微生物检验采样时，即食类预包装食品按（A）取样，取的是最小零售预包装。

A.相同批次 B.不同批次 C.相同原料 D.不同班次

106.微生物检验采样时，非即食类预包装小于500g的固态食品的取样，是取相同批次的（A）零售预包装。采样总量应满足微生物指标检验的要求.A.最小 B.最大 C.相同 D.类似

107.微生物检验采样时，盛样容器的标签应（D）、清楚。A.清洁 B.清晰 C.整洁 D.完整 108.微生物检验采样时，采样标签应（B），具防水性，字迹不会被擦掉或脱色。A.固定 B.牢固 C.稳固 D.耐久磨损 109.微生物检验采样后，易腐和冷藏样品的运送与保存时，应将样品置于（A）℃环境中（如冰壶）保存。

A.0~4 B.2~5 C.4~8 D.8~10 110.微生物检验采样后，冷冻样品运送与保存时应始终处于冷冻状态。可放入（C）℃以下的冰箱内，也可短时保存在包膜塑料隔热箱内（箱内有干冰可维持在0℃以下）。

A.-20 B.-18 C.-15 D.-10 111.微生物检验时从样品的均质到稀释和接种，相隔时间不应超过（A）。A.15min B.30min C。45min D.60min 112.微生物检验时，半固体或粘性液体在样品制备时，应将灭菌容器称取混匀后的检样与预热至（D）℃的灭菌稀释液充分振摇混合。A.35 B.37 C.42 D.45 113.用于微生物检验的奶油、冰淇淋、冰棍和（B）等检验样品制备时，应将称取后的样品与预先置于45℃水浴中的稀释液混合，待溶解后（控制时间在15min内）再按操作程序检验。A.奶酪 B.糖果 C.酸奶 D.奶粉

114.用于微生物检验的液体样品的制备时以无菌吸管吸取25ml样品，加入置盛有225ml稀释液内，制成1:10的样品均液。饮料和（B）可以直接吸取原液。

A.酱油 B.酒类 C.牛奶 D.糟卤

115.食品加工使用的一般容器和设备的卫生检验，是用一定量（A）反复冲洗与食品接触的表面，采集、收集冲洗液作微生物检验。A.无菌生理盐水 B.生理盐水 C.无菌营养液 D.营养液

116.生产小用具表面擦拭法采样作菌落检验时，检验结果报告用（D）营养液。A.cfu/100cm² B.cfu/10cm² C.cfu/1cm² D.cfu/个

117.消毒后原有菌落总数减少（B）以上食品加工环节卫生检验清洁消毒效果评价良好。

A.90% B.80% C.70% D.60% 118.（C）不是空气采样的采样方法。

A.过滤法 B.直接沉降法 C.气流吸附法 D.气流撞击法 119.空气中霉菌检验是为了防止霉菌孢子引起皮癣、鹅口疮、过敏性哮喘等疾病，以及对（D）的污染。

A.环境 B.呼吸道 C.物品 D.食品

120.空气中霉菌检验，可用马铃薯琼脂培养基或（A）琼脂培养基暴露在空气中作直接沉降法检验。

A.玉米 B.血液 C.营养琼脂 D.伊红美兰

121.菌落总数是指在（C）条件下，在中温、一定时间内，在平板计数琼脂培养基上生长的细菌菌落总数。

A.厌氧 B.微需氧 C.需氧 D.无菌

122.菌落总数检验所用恒温培养箱的温度是（A）。

A.36℃±1℃ B.36℃±2℃ C.42℃±1℃ D.42℃±1℃ 123.菌落总数检验的材料主要有：酒精灯、（B）、吸管、广口瓶或三角瓶等。A.三角架 B.试管 C.滴定管 D.PH计

124.菌落总数检验所用的稀释液有生理盐水、蒸馏水和（D）等。A.肉浸液 B.BP缓冲液 C.酵母浸液 D.磷酸盐缓冲液 125.菌落总数检验所用无菌生理盐水的浓度是（B）。A、0.75％ B、0.85％ C、85% D、75% 126.菌落总数检验从制备样品匀液到样品接种完毕，全过程不得超过（A）min。A、15 B、20 C、25 D、30 127.菌落总数检验在样品制备、稀释时，称取25g样品置盛有（C）ml磷酸盐缓冲液的无菌均质杯内均质。A、175 B、200 C、225 D、250 128.碳酸饮料在做菌落总数检验时，1:10的样品均液是以无菌吸管吸取（C）制备的。

A、1ml样品沿管壁缓慢注于盛有9ml稀释液的无菌试管中 B、10ml样品沿管壁缓慢注于盛有90ml稀释液的无菌试管中 C、25ml样品置盛有225ml稀释液中 D、25ml样品置盛有250ml稀释液中

129.菌落总数检验样液接种后，及时将凉至（C）平板计数琼脂培养基倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。

A、40℃ B、44℃ C、46℃ D、48℃

130.水产品的菌落总数检验所用恒温培养的温度是（A）。A、30℃±1℃ B、30℃±2℃ C、36℃±1℃ D、36±2℃ 131.水产品的菌落总数检验所用恒温培养的时间是（D）。A、48h±2h B、48h±3h C、72h±2h D、72h±3h 132.菌落计数以菌落形成单位（B）表示。A、cfu B、CFU C、UFC D、ufc 133.菌落总数计数适当平板上若有蔓延菌落生长，其片状不到平板的一半，而其中一半中菌落分布又很均匀，即可计算（B），代表一个平板菌落数。A、其中菌落分布很均匀菌落的总和 B、半个平板后乘以2 C、将片状菌落与分布很均匀菌落相加

D、将两个平板上片状菌落与分布很均匀菌落相加，除以2 134.菌落总数报告时，若有三个连续稀释度的平板菌落数，在1:10稀释度的菌落是多不可计;在1:100稀释度的菌落是325,330;在1:1000稀释度的菌落是25,28，则样品中菌落数为（A）。

A、27000 B、26500 C、32800 D、30000 135.大肠菌群主要来源于人畜粪便，作为（B）指标评价食品的卫生状况。A、污染物 B、粪便污染 C、有害物质 D、致病菌

136.大肠菌群作为食品的卫生指标，其意义是推断食品中有否污染（A）的可能。

A、肠道致病菌 B、肠道非致病菌 C、沙门氏菌 D、志贺氏菌 137.大肠菌群检验所用天平的感量是（B）g。A、1 B、0.1 C、0.01 D、0.001 138.大肠菌群检验初发酵所用的培养基是（A）。A、LST B、SS C、EMB D、BGLB 139．大肠菌群检验所用的培养基每管应分装（B）ml。A、5 B、10 C、15 D、20 140.大肠菌群检验复发酵培养时间到，观察颜色变化和导管内是否有气泡产生，如（C）则可以作样品中大肠菌群阳性结果报告。

A、产酸不产气 B、产气不产酸 C、产酸产气 D、不产酸不产气 141.大肠菌群检验样液中和用的盐酸浓度是（A）。A、1mol/L B、10mol/L C、1% D、10% 142.大肠菌群检验样液中和用的氢氧化钠浓度是(C)。A、1% B、10% C、1mol/L D、10mol/L 143.大肠菌群检验初发酵肉汤最长培养时间是（C）。A、24h±2h B、24h±3h C、48h±2h D、48h±3h 144.大肠菌群检验接种处发酵肉汤时每个稀释度接种（B）管初发酵肉汤 A、2 B、3 C、4 D、5 145.大肠菌群检验福发酵试验所用的培养基是（D）。A、LST B、SS C、EMB D、BGLB 146.大肠菌群检验复发酵试验是在36℃±1℃培养，所需最长时间是（C）观察生长情况。

A、24h±2h B、24h±3h C、48h±2h D、48h±3h 147.大肠菌群检验结果报告，时证实为大肠菌群阳性管数，查MPN检索表，报告（A）A、每克（或毫升）样品中大肠菌群的MPN值 B、CFU/g C、CFU/ml D、每100克（或毫升）样品中大肠菌群的MPN值 148.大肠菌群检验结果报告时，以（C）（MPN）报告，是对样品或菌密度的估测。

A、最大值 B、最小值 C、最可能数 D、95%的可能数

149.霉菌和酵母菌检验原理是依据霉菌和酵母菌通常在pH低、湿度高、（C）、低温储存等，并含有抗生素的食品中出现而制定的检验方法。A、高氮低盐 B、高氮低糖 C、高盐高糖 D、低糖低盐

150．霉菌和酵母菌检验的意义是：在某些情况下，霉菌和酵母菌不仅造成食品的腐败变质，有些霉菌还能够合成有毒代谢产物（D）。A、抗生素 B、内毒素 C、外毒素 D、霉菌毒素 151.霉菌和酵母菌检验所用恒温水浴锅的温度是（A）。

A、45℃±1℃ B、45℃±2℃ C、47℃±1℃ D、47℃±2℃ 152.霉菌和酵母菌检验所用的平板的直径是（C）㎜。A、50 B、70 C、90 D、110 153.食品中常用于霉菌和酵母菌检验的培养基有马铃薯-葡萄糖琼脂、孟加拉红琼脂和（B）培养基等。

A、巧克力平板 B、高盐察氏 C、改良马丁琼脂 D、玫瑰红钠琼脂 154.孟加拉红培养基中添加的孟加拉红具有抑制霉菌菌落的蔓延生长，同时还具有（B）的作用。

A、指示剂 B、抑制细菌 C、显色剂 D、营养素

155.霉菌、酵母菌检验稀释时，根据对样品污染状况的估计，选择2—3个适宜连续稀释度的样品均液，（B）无菌培养皿内。A、每个稀释度分别吸取1mL样品均液加入两个

B、在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1mL样品均液加入两个 C、每个稀释度分别吸取1mL样品均液加入一个

D、在进行10倍递增稀释时，每个稀释度分别吸取1mL样品均液加入一个 156.霉菌和酵母菌检验制备样品时，以无菌操作将检样25g（或25mL），放于225 mL稀释液的玻塞三角瓶内，振摇（D）min，即为1:10的稀释液。A、10 B、15 C、20 D、30 157．霉菌、酵母菌检验稀释时，取1mL1：100稀释液注入含有9mL灭菌水的试管内，振摇试管混合均匀，另换一支1mL灭菌吸管吹吸(D)次，制成1:1000的稀释液。

A、50 B、30 C、10 D、5 158.霉菌、酵母菌检验稀释时，用灭菌吸管吸取1:10稀释液10mL，注入另一支无菌空试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸管反复吹吸（B）次。A、80 B、50 C、30 D、5 159．霉菌、酵母菌检验接种时，待琼脂凝固后，翻转平皿，置（B）温箱内培养。

A、20~25℃ B、25~28℃ C、25~30℃ D、28~32℃

160.霉菌、酵母菌检验接种，待琼脂凝固后，翻转平皿，置一定温箱内培养，培养时间为（B）。

A、2d后开始观察，共培养4d。B、3d后开始观察，共培养5d。C、3d后开始观察，共培养6d。D、4d后开始观察，共培养7d。

161.霉菌、酵母菌培养过程中菌落观察时要注意轻拿轻放，避免（A）散开，造成结果偏高。

A、孢子 B、菌丝 C、鞭毛 D、芽孢

162.霉菌、酵母菌数结果报告时，每克（或毫升）食品中所含数量以（A（ML）163.霉菌、酵母菌报告时，若有三个连续稀释度的平板菌落数，霉菌在1：10稀释度的菌落数为多不可计；1：100稀释度的菌落是110，111；在1:1000稀释度的菌落是9,8。则样品中霉菌数为（B）。A、11100 B、11000 C、11050 D、110

第二篇：微生物检验员培训资料

一.基础知识

（一）微生物基础知识

1.培养基

培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。

琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。但多次反复融化，其凝固性降低。

任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。

（二）消毒与灭菌知识 5.2灭菌方法

灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微生物，灭菌的方法分物理和化学灭菌法两大类。本实验主要介绍物理方法的一种，即加热灭菌。

加热灭菌包括湿热和干热灭菌两种。通过加热使菌体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。蛋白质的凝固变性与其自身含水量有关，含水量越高，其凝固所需要的温度越低。在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，因为在湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固；同时湿热的穿透力强，可增加灭菌效力。

（三）洁净室行为规范

（四）实验室安全知识

二.基本操作

（一）培养基配制、灭菌、使用和保藏

1.配制

1.1 按照培养基瓶签所示，准确称量一定培养基干粉于合适的容器，加纯化水溶解。

1.2 根据培养基对pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液调至所需pH。1.3 如需分装，应先加热搅拌，待培养基完全溶解并均一后进行。分装时注意不要使培养基沾染在管口或瓶口，以免污染。液体分装高度以试管高度的1/4左右为宜。固体分装装量为管高的1/5，半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜；分装三角瓶，其装量以不超过三角瓶容积的一半为宜。

1.4 培养基经灭菌后，如需要作斜面固体培养基，则灭菌后立即摆放成斜面，斜面长度一般以不超过试管长度的1/2为宜；半固体培养基灭菌后，垂直冷凝成半固体深层琼脂。

2.灭菌

2.1 按照培养基瓶签所示的灭菌条件（温度和时间）对配制好的培养基进行高压灭菌。配制好的培养基应在2小时内进行灭菌。3.保藏和使用 3.1 液体培养基管

置专用不锈钢筒内，2～25℃避光保存，3周内使用。在不锈钢筒贴标签，标明培养基名称、培养基配制日期、高压灭菌编号等信息。不同批次培养基不得置于同一不锈钢筒内。3.2平板和接触皿

置专用不锈钢筒，标明培养基名称、制备日期、培养基的灭菌编号，用保鲜膜密封筒口后，2～25℃避光保存，3周内使用。不同批次平板和接触皿不得置于同一容器内。

3.3 培养基使用之前应预培养，合格后方可使用。

营养琼脂培养基：25-35℃，预培养3天。硫乙醇酸盐液体培养基：25-35℃，预培养2天。

虎红琼脂培养基和改良马丁培养基：23-28℃，预培养3天。

（二）消毒剂配制和使用

1.0.1%新洁尔灭溶液的配制和使用

1.1基准处方：5%新洁尔灭溶液20ml ＋

注射用水980ml 1.2 作为手部和衣服浸泡消毒，设备、操作台面和洁净室六面擦洗消毒以及地漏消毒用，有效期为3个月。2.75%酒精的配制与使用

2.1 基准处方：95%乙醇790 ml ＋ 纯化水210 ml 2.2 作为消毒双手（手套），擦洗设备、操作台等表面消毒剂，有效期为14天。

3.2%来苏儿（甲酚皂）溶液的配制和使用

3.1 基准处方：50%来苏儿（甲酚皂）溶液40 ml ＋ 纯化水960 ml 3.2 拖擦地面用，临用前配制。4.甲醛熏蒸 作为环境空气和表面消毒剂。

操作步骤：关闭风机→无关人员撤出消毒区，操作人员戴防护手套和防毒面具→将设备及器具暴露于空气中→将盛有甲醛溶液的不锈钢饭盒置不锈钢台面→上层饭盒倒入需要体积的甲醛（10ml/m3，每只饭盒不得多于250ml），下层饭盒倒入300ml 95%或无水乙醇→点燃下层饭盒内乙醇，操作人员迅速离开→保留被消毒空间的甲醛气体至少8小时→消毒结束后，开启风机，直至消毒空间无甲醛刺激性气味，方可进入工作。

5.臭氧消毒

5.1 作为环境空气和表面消毒剂。

5.2 操作步骤：关闭风机→无关人员撤出消毒区，操作人员戴防护手套和防毒面具→将设备及器具暴露于空气中→设定消毒时间，开启臭氧法生器面→操作人员迅速离开→保留被消毒空间的臭氧气体至少8小时→消毒结束后，开启风机，直至消毒空间无臭氧气味，方可进入工作。6.消毒剂交替使用

6.1 隔周交替使用0.1%新洁尔灭溶液和75%酒精进行手部消毒。6.2 隔周交替使用0.1%新洁尔灭溶液和2%来苏尔溶液拖擦地面。6.3 洁净区每月对空气消毒一次，甲醛消毒6个月一次，其余时间采用臭氧消毒。

（三）微生物室设备与设施

1.高压灭菌器

1.1原理：高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽,待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。1.2 操作步骤：向高压灭菌器灭菌舱内加水至排泄管口高度→放入待灭菌物品，关闭灭菌器盖→开启电源，设置灭菌温度和时间以及排气温度→按start键开始灭菌（依次经历：升温—排气—升压—保压—降压—排气—降温）→灭菌结束后，取出灭菌物品，关闭电源→清洁灭菌舱。1.3 注意事项

待灭菌物品间应留适宜间隙，便于蒸汽穿透。

当温度在80℃以上时，盖将不会被打开；当温度低于60℃时，即可开盖。每次灭菌前应保持灭菌舱内水位在规定线以上。

干热灭菌法常用于空玻璃器皿、金属器具的灭菌。凡带有胶皮的物品，液体及固体培养基等都不能用此法灭菌。

5.2.2.2干燥箱灭菌

将包扎好的物品放入干燥烘箱内，注意不要摆放太密，以免妨碍空气流通；不得使器皿与烘箱的内层底板直接接触。将烘箱的温度升至160～170℃并恒温1～2h，注意勿使温度过高，超过170℃，器皿外包裹的纸张、棉花会被烤焦燃烧。如果是为了烤干玻璃器皿，温度为120℃持续30分钟即可。温度降至60～70℃时方可打开箱门，取出物品，否则玻璃器皿会因骤冷而爆裂。

用此法灭菌时，绝不能用油、蜡纸包扎物品。

5.2.2.3火焰灭菌

直接用火焰灼烧灭菌，迅速彻底。对于接种环，接种针或其它金属用具，可直接在酒精灯火焰上烧至红热进行灭菌。此外，在接种过程中，试管或三角瓶口，也采用通过火焰而达到灭菌的目的。

2.烘箱（干热灭菌）

2.1 原理：通过使用干热空气杀灭微生物。一般是把待灭菌的物品放入电烘箱中烘烤，加热至160～170℃维持2h（除热原要求250℃维持1h）。2.2 操作步骤：将待灭菌物品正确包扎与加塞，以免灭菌后被外界污染→将包扎好的物品放入干燥烘箱内→ 3.超净工作台 4.培养箱 5.集菌仪 6.传递窗 7.洁净室

（四）平板和接触皿制备

将需倒平板的培养基，于水浴锅中冷却到45～50℃,立刻倒平板。

（五）微生物数量测定

三.检验项目

（一）微生物限度检查

（二）无菌检查

（三）环境监控检查

（四）模拟灌装检查

（五）培养基灵敏度检查

（六）菌株传代与保藏

四.其它

（一）微生物形态观察（菌落形态、染色与镜检）

（二）微生物分离纯化培养

（三）API法鉴定微生物

（四）PCR法鉴定微生物

7思考

7.1制备培养基的一般程序是什么？

7.2做过本次实验后，你认为在制备培养基时要注意些什么问题？

7.3灭菌在微生物学实验操作中有何重要意义？

4试述高压蒸汽灭菌的操作方法和原理。

5高压蒸汽灭菌时应注意哪些事项？

标准菌种的保藏形式

我国提供的标准菌种通常是以冻干粉的形式包装于熔封的厚玻璃容器中。在这种容器中，微生物通常与赋形剂共存，由于缺乏生长必须的环境条件，一般呈休眠状态。

纯培养

所谓微生物的纯培养是指在一个微生物的菌落形成单位中，所有的微生物细胞或孢子都属于生物学的同一个种。严格地说，纯培养是在培养基上由一个细胞或孢子分裂、繁殖而产生的后代。在该细胞或孢子的生长过程种，不受其他微生物的侵犯，不会在培养物中产生另外微生物种的后代，在整个生长过程中不发生变异或死亡。获取纯培养的工作环境

1、洁净工作室：环境洁净度10000级下的局部100级的单向流空气区域内，全过程必须无菌操作，防止微生物污染。

2、无菌隔离舱 获取纯培养的接种工具

1、接种环

2、接种针

3、接种铲

4、接种钩

5、其他玻璃器械 获取纯培养的其他器具

1、玻璃器皿：如各种规格培养皿。

2、微生物实验室常用的设备，如高压灭菌锅、恒温培养箱等 获取纯培养的主要技术－移植（又称接种）

微生物的移植（或称接种）是指将微生物接种在培养基上的操作。移植（又称接种）的两种方式－划线 和穿刺

1、划线法是指用接种工具将微生物细胞移植在固体培养基斜面或平板上的一种方法。

2、穿刺法是指用接种工具将微生物细胞移植到固体或半固体培养基内的一种方法。影响集菌培养效果的若干因素

温度 渗透压 氧气 光 pH值和氧化还原电位

培养基 抗生素

验证纯培养的主要依据

1、用显微镜观察时，全部的生物个体是相似的，如果是细菌，对革兰氏染色反应应当是一致的。

2、将培养物制成悬液，重新倾注平板，或平板划线培养后，所形成的全部菌落的形态应该是相似的。如果是细菌，将重新形成的菌落各作穿刺培养，其培养特征应当是一致的。

3、从重新分离的各菌落作生理特征观测时，如对氮源的利用，对糖类的发酵或同化以及其他生理生化的测定，应呈现出一致性。定期移植保藏法

一般步骤为：将菌种接种在所要求的培养基上，置最适温度下集菌培养。得到健壮的菌体（如有性孢子、无性孢子或细胞等）后，放于温度较低、干燥处保藏，并且每隔一定时间重新移植培养一次。定期移植保藏法

1、细菌置4～6℃保藏，芽孢杆菌每3～6个月移植一次，其他细菌每月移植一次。

2、放线菌于4～6℃保藏，每3个月移植一次。

3、酵母菌于4～6℃保藏，每4～6个月移植一次。

4、丝状真菌于4～6℃保藏，每3个月移植一次。

5、担子菌于4～6℃保藏，每3个月移植一次。

6、保藏的湿度通常在50％～70％为宜。定期移植保藏法

1、需定期检查

2、移植进行时，应仔细核对

3、集菌培养完成后，应比较培养特征

4、应注意观察各代之间的变化 琼脂斜面低温保藏法

1、菌种的典型菌落接种至斜面，规定的温度和时间培养，充分生长，硅胶塞换成无菌橡胶塞。4～6 ℃冰箱保藏

a:1～3个月移植一次，继续保藏。

b:用半固体高层培养基穿刺培养，可保藏半年至一年。琼脂斜面低温保藏法

适用细菌、霉菌、酵母菌及放线菌保藏 优点：简便、大多数微生物适用

缺点：保藏期短；传代次数多；容易发生变异及污染。

生孢梭菌用硫乙醇酸盐培养基、乙型溶血性链球菌及肺炎球菌用血肉汤（琼脂）培养基

液体石蜡保藏法

一般步骤为：准备液体石蜡并灭菌去水备用。获得需要保藏菌种的纯培养，将液体石蜡注入培养容器中，并完全覆盖培养基。

液体石蜡液面以高出培养基上端0.5～1cm为宜 4～6 ℃冰箱保藏

液体石蜡保藏法 甘油冷冻保藏法

将保藏菌种接种琼脂斜面上，适宜温度下培养适宜时间，用无菌接种环轻轻刮取菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦使菌种充分扩散到无菌水中，调证菌液浓度，向已制备好的菌悬液加入等体积的20％无菌甘油，轻轻振试管管，使内容物充分混合，分装于无菌小管。甘油冷冻管最好在-30 ℃贮存。沙管保藏法 制备沙管 培养接种 制备菌悬液 混菌 干燥 保藏

适合保藏芽孢杆菌、梭菌、放线菌和一些丝状真菌。

土壤保藏法

用土壤替代沙管保藏法中的河沙，其余操作与沙管保藏法相同 适合保藏土壤细菌、放线菌和丝状真菌，时间为

2～6年。

硅胶保藏法

用硅胶替代沙管保藏法中的河沙，其余操作与沙管保藏法相同 适合保藏酵母菌和某些丝状真菌

滤纸保藏法

保藏微生物细胞或孢子的载体为滤纸。

对细菌、酵母菌、丝状真菌等都有一定的效果，有些菌种最长可达

17年明胶片保藏法

制备无菌营养明胶 制备无菌石蜡滤纸

微生物培养并制成浓厚的悬液 在悬液中加入营养明胶

将含微生物细胞或孢子的营养明胶滴于石蜡滤纸表面 干燥

将形成的明胶片密封保藏

麸皮保藏法

我国历史悠久的微生物保藏法

适于保藏根霉、曲霉、青霉、红曲霉等属和赤霉菌

梭氏真空干燥保藏法

在小试管中放置菌悬液

。小试管在大试管中放置 大试管在真空状态下干燥 密封大试管

液体直接干燥保藏法

需要加入保护剂 干燥之前不需冻结

在干燥过程中为增大蒸发面积，可加入多孔材料 干燥后的容器应熔封

蒸馏水保藏法

最为简便的微生物保藏法

微生物细胞或孢子保藏在蒸馏水中 保藏的容器应密封

适于保藏棒状杆菌、土壤杆菌和假单孢菌等

液氮冰箱超低温保藏法

需专用设备－液氮超低温冰箱 菌悬液密封于安瓿管内，控速冻结 国外已普遍采用 保藏时间长

冻结真空干燥保藏法

历史悠久，又称冻干法

不产生孢子只产生菌丝体的丝状真菌不宜采用该法 适用面广 保藏时间可达10年以上

多为菌种保藏机构采用

冻结真空干燥保藏法

密封性好，可避免保藏期间的污染 保藏容器体积小，方便携带和贮藏 保藏时间更长，变异概率更低

普通微生物实验室适用的保藏技术

琼脂斜面低温保藏法 液体石蜡保藏法 低温冷冻保藏法 甘油冷冻保藏法 

琼脂斜面低温保藏法

细菌置4～6℃保藏，芽孢杆菌每3～6个月移植一次，其他细菌每月移植一次。4～6℃保藏，每3个月移植一次。4～6℃保藏，每4～6个月移植一次。4～6℃保藏，每4个月移植一次。放线菌于酵母菌于丝状真菌于担子菌于4～6℃保藏，每3个月移植一次。

50％～70％为宜。保藏的湿度通常在菌种保藏的一般规定

1、菌种“代”的确定：2005版药典规定，以干燥菌种管为第“0”代，由此得到的第一批子代为第一代，以此类推。

2、菌种传代次数规定：2005版药典规定不超过5代。

3、菌种应专人保藏、专柜贮藏，认真做好登记，统一编号，按期传代，并做好有关检验记录。

4、保存菌种传代或冻干均应填写专用记录，菌种管上应有标签，表明菌种编号、代次、批号、日期。

5、过期菌种应及时处理、登记，经121 ℃30分钟灭菌消毒。实验室菌种传代操作步骤



1、接种前用1：1000新洁尔灭擦拭工作台面，然后开紫外灯消毒30分钟。

2、自冰箱取出保存工作用菌种，室温放置20分钟；温度平衡后才能传代。

3、实验人员进入缓冲间，换鞋、穿无菌衣、戴口罩，用1：1000新洁尔灭溶液消毒双手，并将培养基及菌种移入阳性菌接种室。



4、点燃酒精灯，将菌种管塞子，通过火焰转动使稍稍松动，以免接种时粘着打不开。



5、接种操作：左手拿住菌种管，将管口靠近火焰旁，右手拿接种棒，将白金耳烧红约30秒，杆部通过火焰灭菌。挑取少量菌苔；另取，照上述方法在火焰旁打开塞子，将白金耳伸入管内斜面培养基的底部，从下到上将白金耳轻贴斜面培养基的表面作曲折移动。



5、接种后，将斜面置规定温度、时间培养。取出观察，菌种生长良好，换橡皮塞，贴上标签，放入冰箱保存。



6、细菌一个月传代一次，枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉可三个月传代一次。菌种管理



1、标准菌种必须从认可的菌种收集途经获得；实验室必须建立和保存所有菌种的收集、贮藏、保存、确认试验的记录。



2、实验室应有文件管理标准菌种（从原始菌种到工作用菌种）。该程序应包括：

a:标准菌种必须定期传代，并做确认试验，包括实验室在所需要关键诊断指标，实验室必须记录并保存。

b：每一子菌种都应以适当标签、标记来表示名称、标准号、接种日期和传代日期。

C:每一子菌种都应以标记从原始菌种传代到工作用菌种的代数；记录菌种生长的培养基及培养条件；菌种生存条件等。过期菌种处理

过期菌种应及时清理、登记，并经

℃、30分钟高压消毒灭菌。

例1：金黄色葡萄球菌传代保藏技术



1、购置金黄色葡萄球菌（如我所提供的菌种为第二代菌种），假定购置日期为5月21日。



2、准备10支营养琼脂斜面，其中2支用于保藏，其余8支用于当月实验。

3、于5月22日打开菌种管，接种菌种至上述10支斜面，35 ℃培养16～18小时。



4、将10支第三代菌种管做好标签，置适宜温度保藏。5、5月22日至6月22日，可以使用上述第三代菌种管。

6、至6月22日，重复步骤2，得第四代菌种管。

7、至8月22日前，重新购置原种管。

例2：黑曲霉的传代技术



1、制备孢子悬液：取灭菌水或生理盐水

3～5ml，分2～3次小心滴加至菌种管内（试管斜面），反复振摇。倾取孢子悬液置另一灭菌试管。



2、涂布接种：用灭菌滴管吸取悬液滴加至改良马丁琼脂培养基斜面，每管滴加2～3滴，转动试管，使悬液与斜面表面充分接触 菌种确认试验

包括以下几个方面：

1、菌落生长情况：目测

2、染色镜检：

3、生化试验；(1)糖醇代谢试验

（2）氨基酸和蛋白质代谢试验

（3）碳源和氮源利用试验

（4）酶类试验

（5）其他试验 短小芽孢杆菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，为不呈链状排列的杆菌，革兰氏染色为阳性。

2、营养琼脂斜面上菌苔光滑，薄，闪光，蔓延，不粘着，常常是浅黄色。

3、生化试验可选做明胶穿刺、淀粉水解和硝酸盐还原，结果为明胶缓慢液化，淀粉水解阴性，硝酸盐还原阴性。

枯草芽孢杆菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，为呈链状排列的杆菌，不形成荚膜，革兰氏染色为阳性。

2、营养琼脂斜面上菌苔生长丰厚，粗糙，不透明，不闪光，蜡质，蔓延，奶油色至微褐色。

3、生化试验可选做明胶穿刺、淀粉水解和硝酸盐还原，结果明胶呈漏斗形至层状液化，淀粉水解阳性，硝酸盐还原阳性。大肠埃希菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，为成对和呈短链排列的近球形的杆菌，一般不形成荚膜，革兰氏染色为阴性。

2、营养琼脂斜面上菌苔通常白色，有时带黄白色，湿润，闪光，蔓延生长。

3、生化试验可选做明胶穿刺和靛基质试验、甲基红试验、V.P.试验和柠檬酸盐利用试验，结果不液化明胶，靛基质试验和甲基红试验阳性，V.P.和柠檬酸盐利用试验阴性。大肠埃希菌

该菌为微生物限度检查规定不得检出的控制菌，有一整套完整的鉴定手段，也可参考该方法用于判断所保藏的菌种有无发生变异。

该鉴定方法主要内容即为经典的IMViC试验，结果为++--。

铜绿假单孢菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，为单个，成对或呈短链排列的杆菌，有运动性，革兰氏染色为阴性。

2、营养琼脂斜面上菌苔生长旺盛，薄，白色，闪光，培养基变为绿色至暗褐色或黑色，发荧光。

3、生化试验可选做明胶穿刺、吲哚和硝酸盐还原试验，结果迅速液化明胶，液体呈浅黄绿色或浅蓝绿色，吲哚试验阴性，硝酸盐还原试验阳性。

铜绿假单孢菌

该菌为微生物限度检查规定不得检出的控制菌，可利用氧化酶试验和绿脓菌素试验迅速判断所保藏的菌种有无发生变异。乙型副伤寒沙门菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，为单个出现的杆菌，有运动性，革兰氏染色为阴性。

2、营养琼脂斜面上菌苔浅灰色，湿润，光滑，半透明。

3、生化试验可选做明胶穿刺、吲哚、硫化氢和硝酸盐还原试验，结果不液化明胶，吲哚试验阴性，硫化氢阳性，硝酸盐还原试验阳性。

乙型副伤寒沙门菌

该菌为微生物限度检查规定不得检出的控制菌，可利用三糖铁琼脂斜面和血清试验迅速判断所保藏的菌种有无发生变异。藤黄微球菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，为呈堆团排列的球菌，革兰氏染色为阳性。

2、营养琼脂斜面上菌苔硫黄色到酪黄色，光滑，软。

3、生化试验可选做明胶穿刺、硫化氢和硝酸盐还原试验，结果缓慢液化明胶成漏斗形，硫化氢阳性，硝酸盐还原试验阳性。

金黄色葡萄球菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，为单个或成对呈短链和不规则堆团状排列的球菌，革兰氏染色为阳性。

2、营养琼脂斜面上菌苔生长茂盛，半透明，光滑，平坦，湿润，白色至浅黄色或橙色。

3、生化试验可选做明胶穿刺、硝酸盐还原和过氧化氢酶试验，结果明胶呈囊状液化，硝酸盐还原试验阳性，过氧化氢酶试验阳性。金黄色葡萄球菌

该菌为微生物限度检查规定不得检出的控制菌，可利用血浆凝固酶试验迅速判断所保藏的菌种有无发生变异。生孢梭菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，菌体粗大单独存在或呈短链排列，芽孢比菌体宽，芽孢呈梭形，革兰氏染色为阳性。

2、过氧化氢酶试验阳性。白色念珠菌

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，可见卵形细胞，有多边芽殖现象，有假菌丝。

2、改良马丁琼脂斜面上菌苔生长茂盛，光滑，湿润，菌落呈乳白色。黑曲霉

确认该菌未发生变异的主要方法为：

1、通过显微鉴别，可见分隔菌丝体，分生孢子穗球形，黑色。

2、改良马丁琼脂斜面上菌苔呈黑褐色厚绒状，色泽均一，无杂色，菌落呈黑色。

第三篇：2014微生物检验技术试题2013真题

病例标本送检，一般常规进行的检验包括

A.直接涂片镜检，分离培养，生化反应和血清学试验 B.药敏试验，动物实验，生化反应和血清学试验 C.直接涂片镜检，分离培养，药敏试验，动物试验 D.直接涂片镜检，药敏试验，动物试验和血清学试验 E.染色镜检，药敏试验，动物试验和血清学试验 答案: A 解析: 医疗机构污水微生物样品应采集 A.各科室冲洗流入下水道的污水 B.患者使用后流入的污水 C.污水贮存池内的污水

D.该机构污水最终排放口的污水 E.手术室流出的污水 答案: D 解析: 能形成草绿色溶血环的细菌是 A.甲型溶血性链球菌 B.表皮葡萄球菌 C.炭疽杆菌

D.丙型溶血性链球菌 E.嗜血杆菌 答案: A 解析: 同一水源，同一时间采集多类检测指标的水样时，应先采集哪项指标的水样 A.挥发性酚 B.金属 C.有机物 D.微生物 E.放射性 答案: D 解析: 用于PCR实验的仪器称为 A.色谱仪 B.质谱仪 C.酶标仪 D.紫外透射仪 E.DNA扩增仪 答案: E 解析: 6 PCR是

A.补体结合试验 B.血凝抑制试验 C.聚合酶链反应 D.酶联免疫吸附分析 E.肥达反应 答案: C 解析: 不会使医疗机构污水中总游离余氯结果偏低的因素是 A.水样经强光照射 B.水样经过振荡 C.水样经过高温 D.水样立即检测

E.水样放置一段时间后检测 答案: D

这是2013年微生物检验技术考试原题，因为时间匆忙，刚刚整理完50道题，请考生关注我的空间或者百度“新浪博客 卫生资格考试”，另有复习指导书电子版免费赠！游泳池水细菌总数培是 A.36℃，24h B.37℃,48h C.28℃,24h D.28℃,48h E.44℃,24h 答案: B 解析: 醋酸纤维膜电泳主要用于 A.小分子多肽分离 B.抗原或抗体分离 C.免疫球蛋白分离 D.盐的分离 E.糖的分离 答案: C 解析: 生活饮用水采样后如不能立即检验，其保存温度和时间为 A.﹣2℃,4h B.﹣4℃,6h C.0℃,4h D.2℃,4h E.4℃,4h 答案: E 解析: 在做证实试验时，挑取蜡样芽胞杆菌在选择性培养基上的典型菌落的数目为 A.5个 B.10个 C.15个 D.20个 E.25个 答案: A 解析: 紫外分光光度计测量蛋白浓度采用波长是 A.190nm B.220nm C.250nm D.280nm E.300nm 答案: D 解析: 高速离心机的转速范围是 A.2000～9000转/分钟 B.5000～10000转/分钟 C.10000～40000转/分钟 D.10000～60000转/分钟 E.8000～50000转/分钟 答案: C 解析: 关于病原微生物实验活动管理，正确的是

A.从事病原微生物实验活动在单位应具有相应等级的生物安全实验室 B.生物安全三级，四级实验室应通过国家生物安全认可

C.生物安全一级，二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动

D.实验室从事与高致病性病原微生物有关的科研项目，无需生物安全实验室

E.实验结束后，非保藏机构应及时将病原微生物就地销毁或者移交保藏机构保管 答案: 解析: 分子筛层析法的原理是 A.凝胶介质形成多孔网状结构 B.介质带电荷不同 C.蛋白质的溶解度不同

D.蛋白质与介质吸附能力不同

E.蛋白质分子与其对应的配体异性结合 答案: A 解析: DNA用EB染色后，用何种光线激发观察 A.目光 B.荧光 C.可见光 D.紫外光 E.激光 答案: D 解析: 琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段的最佳范围为 A.10bp至50bp B.200bp至50kb C.500bp至100kb D.900bp至100kb E.1kb至100kb 答案: B 解析: 食品卫生微生物检验中，对进口食品的阳性检测样本保存期限是 A.3天 B.1个月 C.三个月 D.六个月 E.十个月 答案: D 解析: 在油性液体化妆品供检样品制备过程中，乳化条件是 A.28～32℃水浴中乳化 B.35～39℃水浴中乳化 C.40～44℃水浴中乳化 D.45～49℃水浴中乳化 E.50-54℃水浴中乳化 答案: C 解析: 对生活饮用水进行水质微生物检测时，采集样品的聚丙烯容器灭菌最常用的方法是 A.紫外线消毒 B.干热灭菌 C.巴氏消毒 D.高压蒸气灭菌 E.次氯酸灭菌 答案: D 解析: 副溶血性弧菌在三糖铁培养基中的反应不包括 A.底层变黄葡萄产酸产气 B.斜面不变色 C.不产硫化氢 D.有动力 E.不分解蔗糖 答案: A 解析: 关于化妆品微生物检验，错误的是 A.进口产品应为市售包装 B.产品应在有效期内 C.检验前样品应保存在阴凉干燥处 D.检验时从2个以上包装中取混合样品 E.检验时用样总量一般为5g或5ml 答案: E 解析: 民航飞机座舱内的臭氧主要来源是 A.大气环境 B.机内仪器 C.机内座椅 D.机内人员活动 E.乖客携带的行李 答案: B 解析: 做ELISA反应时，用酶标比色测定的指标是 A.激发光 B.透射光 C.滤光度 D.透光度 E.吸光度 答案: E 解析: 《医疗机构污水排放要求》GB18466-2001，规定经处理和消毒后的医疗机构污水需检测的指标不包括 A.总余氯 B.粪大肠菌群 C.肠道致病菌

D.结核病医疗机构增测结核杆菌 E.金黄色葡萄球菌 答案: E 解析: 在医疗工作中，对青霉素的耐药株高达90%以上的菌株是 A.链球菌 B.肺炎球菌

C.金黄色葡萄球菌 D.伤寒杆菌 E.四联球菌 答案: C 解析: 公共场所中无需进行细菌总数检测的是 A.空气

B.茶具，餐具 C.毛巾，床上卧具 D.理发用具

E.浴盆，脸（脚）盆 答案: 理发用具 解析: D 28 我国《病原微生物实验室生物安全条例》中对病原微生物的分类和危害等级的描述是 A.分为三类，第三类危险程度最高 B.分为四类，第四类危险程度最低 C.分为四类，第一类危险程度最低 D.分为四类，第四类危险程度最高 E.分为三类，第一类危险程度最高 答案: B 解析: 沙门菌检验中使用的增菌液TTB是指 A.缓冲蛋白胨水

B.亚硒酸盐胱氨酸增菌液 C.氯化镁孔雀绿增菌液 D.四硫酸钠煌绿增菌液 E.碱性蛋白胨水 答案: D 解析: 以下观察结果中，不符合志贺菌的是 A.在TSI琼脂上不发酵乳糖和蔗糖 B.在TSI琼脂上发酵葡萄产酸不产气 C.在TSI琼脂上不产H2S D.动力阳性 E.革兰阴性杆菌 答案: D 解析:

茶具及餐具微生物检测样品的测定中，错误的是 A.采用涂抹法采样

B.采样对象为清洗消毒后准备使用茶具或餐具 C.采样面积为25c㎡大小 D.口唇接触处

E.送检时间为4h以内 答案: C 解析:

采集自来水常用的中和试剂是 A.硫代硫酸钠 B.甘氨酸 C.卵磷脂 D.吐温-80 E.卵磷脂和吐温-80 答案: A 解析:

建立生物安全管理体系的主要目的不包括 A.防止病原微生物污染仪器 B.防止病原微生物污染环境 C.防止实验室发生意外事故

D.防止病原微生物实验者的自身感染 E.防止出现阴性实验结果 答案: E 解析:

关于实验室记录管理要求，错误的是 A.实验室记录可输入计算机或书面记录 B.可将记录保存于实验室供留底查询 C.输入计算机的记录应定期整理 D.书面记录保存5年后可销毁 E.相应的影像资料应长期保存 答案: D 解析:

关于食品采样的叙述，错误的是 A.用无菌刀、勺和无菌容器采样 B.每一个独立包装为一件 C.大样为一整批样品 D.中样为200g E.小样为25g 答案: B 解析:

单核细胞增生李斯特菌在哪个温度范围内易见到动力 A.37～42℃ B.35～37℃ C.20～25℃ D.10～20℃ E.0～4℃ 答案: 解析: C 37 医疗机构污水粪大肠菌群监测频率是 A.每周不少于1次 B.每月不少于1次 C.每3月不少于1次 D.每半年不少于1次 E.每年不少于1次 答案: B 解析:

在核酸电泳中，不同构象DNA泳动率通常是 A.线性＞切口环状＞超螺旋 B.超螺旋＞线性＞切口环状 C.超螺旋＞切口环状＞线性 D.线性＞超螺旋＞切口环状 E.切口环状＞超螺旋＞线性 答案: B 解析:

鉴定金黄色葡萄球菌重要的试验是 A.吲哚试验 B.嗜盐性试验 C.血浆凝固酶试验 D.链激酶试验 E.肝菌肽试验 答案: C 解析:

HEPA过滤器一般采取的消毒方式是 A.戊二醛 B.甲醛熏蒸 C.电离辐射 D.75%乙醇 E.氯己定消毒 答案: B 解析:

对流电泳试验中，常用的缓冲液是 A.巴比妥缓冲液 B.碳酸盐缓冲液 C.醋酸盐缓冲液 D.磷酸盐缓冲液 E.硫酸盐缓冲液 答案: A 解析:

微生物实验室常用的测定细菌浓度的仪器名称是 A.蛋白测序仪 B.紫外分光光度计 C.可见分光光度计 D.酶标仪 E.色谱仪 答案: C 解析:

对微生物实验室废弃物的处理，正确的做法是 A.高压蒸汽灭菌或干烤处理 B.化学消毒剂或干烤处理

C.阴性检测结果的标本不需处理可直接丢弃 D.高压蒸汽灭菌或化学消毒剂处理 E.仅化学消毒剂处理 答案: D 解析:

关于食品中粪大肠菌群检验的叙述，错误的是 A.采用多管发酵法 B.将处理好的检样接种乳糖胆盐培养基 C.将初发酵阳性培养物接种EC肉汤

D.将EC肉汤管中产气者分别转种于伊红美蓝平板 E.取典型菌落接种乳糖发酵管进行证实试验 答案: E 解析:

滤膜集菌法监测医疗污水的结合杆菌时，需要抽滤的样品量是 A.50ml B.100ml C.200ml D.300ml E.500ml 答案: C 解析:

检验食品中的志贺菌，首选的条件是 A.接种营养肉汤，36℃±1℃培养8h B.接种营养肉汤，36℃±1℃培养24h C.接种GN增菌液，36℃±1℃培养8h D.接种GN增菌液，36℃±1℃培养24h E.接种亚硒酸盐胱氨酸增菌液，36℃±1℃培养18～24h 答案: C 解析:

进行食品的小肠结肠炎试验时，所有的生化反应培养温度是 A.20℃ B.26℃ C.30℃ D.36℃ E.42℃ 答案: 解析:

下列不属于肠杆菌科的是 A.枸橼酸杆菌属 B.克雷伯菌属 C.爱德华菌属 D.鲍特菌属 E.肠杆菌属 答案: D 解析:

制备细菌外膜蛋白可用 A.SDS裂解 B.酚、氯仿作用 C.PEG6000作用 D.超声波破碎

E.SDS及氯仿作用 答案: A 解析:

关于离子交换层析法的叙述，错误的是 A.主要用于分离和纯化蛋白质 B.常用的介质是纤维素

C.原理是介质形成的筛孔网状结构 D.流动相是梯度离子缓冲液

E.分步收集洗脱液使物质分离纯化 答案: B 解析:

第四篇：微生物检验技术总结

微生物检验技术总结

一．名词解释

1.微生物：一群肉眼看不见的微小生物，如细菌、真菌、病毒。必须借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍，千倍，甚至数万倍才能观察到的低等生物体。

2.细菌：是一类体积微小，结构简单，以二分裂的方式繁殖，对抗生素敏感的原核细胞型单细胞微生物。

3.细菌的生化反应：利用生化试验检测细菌对各类基质的代谢作用及其代谢产物的试验方法。

4.内毒素：是革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，当菌体死亡崩解后，才可释放到菌体外。5.外毒素：是由革兰阳性菌及部分革兰阴性在生活过程中合成并可释放到菌体外的毒性蛋白质，毒性强而且有高度的选择性。

6.抗生素：是由某些微生物在代谢过程中产生的、能抑制或杀灭某些其他微生物和肿瘤细胞的微量生物活性物质。

7.正常菌群：在正常情况下，人体的体表及其与外界相通的腔道，（上呼吸道、口腔、泌尿生殖）都有一定种类和数量的微生物寄生，这些微生物通常对人体是无害的，甚至有益，8.条件致病菌：在正常情况下不致病，但在特定条件下能引起疾病的菌群，称为条件致病或机会致病菌。

9.菌群失调：是指宿主某些部位正常菌群中各菌群之间的比例发生了大幅度的变化，由生理性组合转变为病理性组合的状态。

10.消毒;是指杀死物体上的病原微生物但不一定能杀死细菌芽孢的方法。

11.灭菌：是指杀灭物体上所有的微生物（包括病源微生物、非病源微生物、和细菌芽孢）的方法

12.无菌：是指没有活的微生物存在。

13.无菌操作：防止微生物进入机体或其他操作对象的方法，二．填空题

1.微生物的类型：非细胞性微生物（病毒），原核细胞型微生物（细菌、放线菌、衣原体、支原体），真核细胞性微生物（真菌）2.寄居于人类的微生物可分为：（1）正常微生物群或正常菌群（2）条件致病微生物（3）病源微生物

3.革兰阳性菌细胞壁特有组分

a)磷壁酸;由核糖醇和甘油残基经磷酸二酯键交联而成的多聚物。b)磷壁酸功能：抗原性强，是阳性菌表面重要抗原（分型），并与细菌的黏附（致病）有关。

c)表面蛋白：致病和抗原性有关。4.革兰阴性菌细胞壁特殊组成

 外膜：位于肽聚糖层外，由内向外依次为： 脂蛋白、脂质双层、脂多糖 5革兰阴性菌细胞壁特殊组成

脂蛋白:外膜最内层，连接肽聚糖和外膜层。

脂质双层：结构类似细胞膜，中间镶嵌有外膜蛋白——孔蛋白

6、革兰阴性菌细胞壁特殊组成

 脂多糖:由脂质A、核心多糖和O-特异多糖组成，又称细菌内毒素。——外膜最外层  周浆间隙 膜磷壁酸

Ｇ＋ 菌细胞壁

壁磷壁酸

特殊结构

表面蛋白：SPA、M蛋白

Ｇ－

脂质双分子层

特殊结构

脂蛋白

类脂Ａ：毒性部分

(外膜)

脂多糖（LPS，内毒素）：

核心多糖：属和组特异

特异多糖：种和型特异

7.。革兰阴、阳性细菌细胞壁的比较

 特征

革兰阳性

革兰阴性  肽聚糖层次

～50

1～2  化学组成肽聚糖

外膜

磷壁酸

肽聚糖

 厚度

厚

薄

(20~80nm)

(10~15nm) 外膜

无

有  周浆间隙

存在于某些菌种

存在于全部菌种  孔蛋白

无

有  分子渗透性

高渗透性

低渗透性 8.细胞壁的功能

1.维持细菌细胞固有外形，保护细菌。2.和细菌细胞膜共同完成物质的交换。

3.细胞壁上的多种抗原决定簇，决定了抗原性。

9.细菌L型

 即细胞壁缺陷细菌，细胞壁部分或完全缺陷的细菌

 革兰阳性菌的L型细菌称为原生质体,必须在高渗环境中才可存活。 革兰阴性菌的L型称原生质球,因其肽聚糖层受损后外膜仍存在，在低渗环境中仍有一定的抵抗力。

10.细菌L型特性

 染色性发生改变，多为革兰阴性。 形态发生改变，呈多形性。 仅能在高渗环境中存活

 菌落表现为：油煎蛋样、颗粒样、丝状 11.荚膜的功能

1、抗吞噬作用，与毒力有关。

2、抗有害物质损伤作用。

3、具有粘附作用，有助于细

菌的定植(和致病有关)

4、鉴定细菌

5、免疫原性

6、抗干燥作用

12.细菌的特殊结构  鞭毛

 附着于多种细菌（如大多数杆菌、少数球菌、全部弧菌及螺菌）菌体上的细长而呈波状弯曲的丝状物。

 分为单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌

 菌毛（详见后述）

 比鞭毛更为纤细、短而直的丝状蛋白附属物。 分为普通菌毛、性菌毛

13.芽胞的功能和作用

1.对热力、干燥、辐射、化学消毒剂等具有强大抵抗力； 2.可以是否杀死芽胞作为物品消毒灭菌判断效果的指标；

3.芽胞在菌体的位置和直径大小随菌种不同有 助于细菌鉴别。14.细菌的菌毛(Ⅰ)

 化学成分：菌毛蛋白，具有抗原性。 功能：

普通菌毛：是一种粘附结构，又称定植抗原，与致病性有关。

性菌毛：接合时传递遗传物质

第五篇：2015年微生物检验技术高级职称考试模拟题及答案

2015年微生物检验技术高级职称考试模拟题及答案

单项选择题每题1分以下每道考题有五个备选答案请选择一个最佳答案。

1、CPE于普通光镜下可见 A、染色质边移

B、膜蛋白被病毒编码蛋白取代 C、细胞变圆、脱落 D、膜通透性增加 E、核仁结构发生变化

正确答案C

2、包涵体检查在下列哪种病毒感染中有重要意义 A、流感病毒 B、巨细胞病毒 C、呼吸道合胞病毒 D、EB病毒 E、副流感病毒

正确答案B

3、保藏病毒毒种最好的方法是 A、-20℃冷藏 B、液氮保存

C、50中性甘油保存 D、冷冻真空干燥法 E、动物接种

正确答案D

4、病毒包膜 A、是病毒的基本结构 B、是由病毒基因编码的产物 C、不被脂溶剂除去 D、具有宿主细胞脂类的特性 E、与致病性无关

正确答案D

5、病毒不同于衣原体的特点是 A、能通过细菌滤器 B、对抗生素不敏感 C、可引起机体多部位感染 D、严格地细胞内寄生 E、在感染细胞内可形成包涵体

正确答案B

6、病毒的测量单位是 A、厘米 B、毫米 C、微米 D、纳米

正确答案D

7、病毒的基本化学组成为 A、DNA蛋白质 B、RNA蛋白质 C、DNARNA蛋白质 D、DNARNA蛋白质包膜 E、核酸蛋白质

正确答案E

8、病毒的结构蛋白不包括 A、衣壳蛋白 B、早期蛋白 C、包膜蛋白 D、核蛋白 E、基质蛋白

正确答案B

9、病毒的特征中下述哪一项是不正确的 A、非细胞结构 B、只含一种核酸 C、必须在活细胞内增殖 D、二分裂法繁殖 E、对干扰素敏感

正确答案D

10、病毒的遗传信息储存部位在 A、染色体 B、质粒 C、DNA或RNA D、DNA E、RNA

正确答案C

11、病毒的增殖方式是 A、复制 B、二分裂 C、分枝 D、减数分裂 E、芽生

正确答案A

12、病毒分类的依据通常不包括 A、核酸 B、衣壳 C、包膜 D、刺突 E、形态

正确答案D 答案解析

对病毒分类的原则是 ①核酸类型与结构 ②病毒体的形状和大小

③病毒体的形态结构衣壳的对称性型、有无包膜

④对脂溶剂的敏感性等。病毒可根据传播途径或感染部位分为虫媒病毒、肠道病毒、肝炎病毒、呼吸道病毒、性传播病毒等。

13、病毒复制过程中可产生RNA-DNA杂交体的是 A、ssRNA病毒 B、dsRNA病毒 C、dsDNA病毒 D、逆转录病毒 E、一ssRNA病毒

正确答案D

14、病毒复制周期中隐蔽期是指 A、吸附 B、穿入 C、脱壳 D、生物合成 E、成熟装配

正确答案D

15、病毒核衣壳的化学组成主要是 A、核酸 B、蛋白质 C、核酸和蛋白质 D、脂蛋白和糖蛋白

E、核酸、蛋白质、脂类和糖类

正确答案C

16、病毒可通过以下哪种途径在体内传播 A、胎盘或产道传播 B、沿神经传播 C、虫媒传播 D、水平传播 E、消化道传播

正确答案B

17、病毒灭活是指在理化因素作用下使病毒失去 A、血凝特性 B、抗原性 C、感染性 D、细胞融合特性 E、诱生INF的特性

正确答案C

18、病毒侵入细胞需首先吸附于细胞膜上特异受体下述哪一项是不正确的

A、病毒与受体相互作用决定了感染的细胞亲嗜性 B、病毒与受体相互作用决定了病毒核酸是否具有感染性 C、病毒与受体相互作用可被中和抗体阻止

D、若宿主细胞表面的受体已被结合可出现病毒感染干扰现象 E、各种病毒的受体不同

正确答案E

19、病毒所合成的晚期蛋白的功能是 A、抑制宿主细胞蛋白质的合成 B、合成包涵体的基质蛋白 C、构成病毒衣壳蛋白 D、抑制宿主细胞核酸的合成 E、合成子代核酸所需要的DNA多聚酶

正确答案C

20、病毒特征的描述不正确的是 A、非细胞微生物 B、考复制方式增殖 C、多对抗生素不敏感 D、多对干扰素敏感 E、以出芽方式繁殖子代病毒

正确答案E

21、病毒体的基本结构为 A、核心 B、衣壳 C、包膜 D、核衣壳 E、核酸 正确答案D

22、病毒体是

A、有感染性的病毒颗粒 B、脱壳后仍有感染性的病毒核酸 C、有包膜的病毒颗粒 D、仅含核酸和衣壳的病毒颗粒

E、成熟的、完整的、具有感染性的病毒颗粒

正确答案E

23、病毒条件性突变株产生的原因是 A、病毒基因组突变 B、病毒基因交叉复活 C、病毒基因重组 D、病毒间互补作用 E、病毒间的加强作用

正确答案A

24、病毒以何种方式繁殖 A、二分裂繁殖 B、复制方式增殖 C、裂殖方式 D、芽生方式 E、孢子形成

正确答案B