第一篇：液相色谱培训小结
高效液相色谱培训小结
分析：XXX 我来研究院已经一年多，主要做基本分析操作，需要负责液相，为了严格保证分析数据的准确性，必须以严谨科学的态度对待，从制备样品过程到仪器采集过程都要非常谨慎、认真。
这次有幸得到公司提供的培训机会，去上海Agilent科技大学培训中心参加了为期四天的液相色谱培训。培训期间老师讲述了从硬件、软件及维护保养各个方面的问题，让人一下充实了不少。
通过这次的学习培训，使我对分析过程有了深入的理解，并对高效液相色谱仪的使用和维护有了更全面的了解和更多的认识，现在做总结如下：
液相色谱主要分为：溶剂柜、脱机机、泵、自动进样器(手动进样器）、柱温箱、检测器。各个模块由CAN 线进行通讯连接，使得各个模块形成一整套系统。化学工作站和仪器系统之间用LAN线连接。
一、硬件
1、在线脱气机
2、泵（我公司使用的是四元泵，当使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到四元比例阀下面的通道上（A或D），有机溶剂接到上面的通道上（B或C）。如果经常使用盐溶液，建议定期用水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐沉淀。）
3、进样器（我公司为标准自动进样器。进样体积重复性高，进样动态范围宽，连续冲洗流路并有洗针功能，降低样品残留，可以容纳不同规格的样品瓶。灵活的进样程序编程可以进行样品前处理，使用旁路可以降低延迟体积。）
4、柱温箱
5、检测器（我公司使用的是VWD检测器用于产品开发及质量控制。）
二、化学工作站
1、方法的编辑和保存
2、谱图处理及优化
3、积分参数优化
4、光谱功能
5、校正表建立，设定报告，报告设计
三、日常维护和常见色谱故障
1、溶剂准备：溶剂过滤是要防止固体颗粒损伤仪器或柱头。常用0.45um的滤膜，使用色谱纯的溶剂。定期更换溶剂，避免溶剂瓶直接日照，每两天更换或过滤溶剂，用滤膜过滤溶剂去除微生物，在使用时一定要脱气。
2、保护色谱柱
①过滤所有的溶剂和样品 ②使用保护柱
③仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中缓冲液 ④在适当的溶剂中保存柱子 ⑤柱子在不使用时，两端密封保存 ⑥注意色谱柱的pH值使用范围 ⑦不要高压冲洗柱子
⑧不要高温下过长时间使用硅胶键合相
3、常见色谱故障 ① 双峰
原因：柱头塌陷或柱床运动、柱前滤芯堵塞、样品量过大、进样器流路存在分叉流路。
② 基线噪音、基线漂移
原因：检测池脏、灯能量下降、流动相脏、温度不稳定。③ 鬼峰、柱外扩散、峰扩展、拖尾峰、前伸峰、负峰 原因：流动相尤其水脏、连接接头不匹配、进样体积大、色谱柱过载、溶解样品溶剂通过色谱柱时平衡破坏。
④ 压力过高、压力过低、压力波动
原因：色谱柱过滤芯被污染、毛细管进样针或针座阻塞、阀失灵、密封垫老化、泵内有气泡。
⑤ 常规维护区域：溶剂入口、泵、检测器
四、Agilent Lab Advisor 软件
Agilent Lab Advisor是独立化学工作站之外的一个工具，这个工具提供维护、诊断、监控及警告功能。
经过这次的培训学习，使我对分析过程有了全新的认识，也解决了以前检测分析操作中遇到的问题，重新认识了许多应用方法，对仪器的操作使用维护有了新的认识，为以后的工作中更好地使用、养护仪器提供了更多理论依据。在此感谢领导，同事们对我的关心和支持，给我一个如此好的学习机会。
第二篇：高效液相色谱基本概念和术语
高压液相色谱HPLC培训教程(一)I．概论
一、液相色谱理论发展简况
色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。
色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也称现代液相色谱。
二、HPLC的特点和优点 HPLC有以下特点：
高压-压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。高速-流速为0.1~10.0 ml/min。
高效-可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。高灵敏度-紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。HPLC与经典液相色谱相比有以下优点：
速度快-通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min内即可完成。分辨率高-可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。
灵敏度高-紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。柱子可反复使用-用一根色谱柱可分离不同的化合物。
样品量少，容易回收-样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。
三、色谱法分类
按两相的物理状态可分为：气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC)，其中以GLC应用最广。液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。LC同样可分为液固色谱法(LSC)和液液色谱法(LLC)。此外还有超临
为2.5~7.5（2~8），太高的pH值会使硅胶溶解，太低的pH值会使键合的烷基脱落。有报告新商品柱可在pH 1.5~10范围操作。
正相色谱法与反相色谱法比较表
正相色谱法 反相色谱法 固定相极性 高～中 中～低 流动相极性 低～中 中～高 组分洗脱次序 极性小先洗出 极性大先洗出
从上表可看出，当极性为中等时正相色谱法与反相色谱法没有明显的界线（如氨基键合固定相）。3．离子交换色谱法
固定相是离子交换树脂，常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架，在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基（称阳离子交换树脂）或季氨基（阴离子交换树脂）。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换，根据各离子与离子交换基团具有不同的电荷吸引力而分离。
缓冲液常用作离子交换色谱的流动相。被分离组分在离子交换柱中的保留时间除跟组分离子与树脂上的离子交换基团作用强弱有关外，它还受流动相的pH值和离子强度影响。pH值可改变化合物的解离程度，进而影响其与固定相的作用。流动相的盐浓度大，则离子强度高，不利于样品的解离，导致样品较快流出。离子交换色谱法主要用于分析有机酸、氨基酸、多肽及核酸。4．离子对色谱法
又称偶离子色谱法，是液液色谱法的分支。它是根据被测组分离子与离子对试剂离子形成中性的离子对化合物后，在非极性固定相中溶解度增大，从而使其分离效果改善。主要用于分析离子强度大的酸碱物质。
分析碱性物质常用的离子对试剂为烷基磺酸盐，如戊烷磺酸钠、辛烷磺酸钠等。另外高氯酸、三氟乙酸也可与多种碱性样品形成很强的离子对。
分析酸性物质常用四丁基季铵盐，如四丁基溴化铵、四丁基铵磷酸盐。
离子对色谱法常用ODS柱（即C18），流动相为甲醇-水或乙腈-水，水中加入3~10 mmol/L的离子对试剂，在一定的pH值范围内进行分离。被测组分保时间与离子对性质、浓度、流动相组成及其pH值、离子强度有关。5．排阻色谱法
固定相是有一定孔径的多孔性填料，流动相是可以溶解样品的溶剂。小分子量的化合物可以进入孔中，滞留时间长；大分子量的化合物不能进入孔中，直接随流动相流出。它利用分子筛对分子量大小不同的各组分排阻能力的差异而完成分离。常用于分离高分子化合物，如组织提取物、多肽、蛋白质、核酸等。
第三篇：仪器设备(液相色谱)购置报告
仪器购置申请
学院财务处、资产管理中心：
鉴于“江苏省食品安全快速检测工程技术研究开发中心”项目进展的实际需要，统筹考虑研发、社会服务和生物技术（制药）专业的资源建设，申请购置一台兼具荧光和二极管阵列检测的高效液相色谱仪，相关报告附后，请予以批准，谢谢！
食品科学系
二O一三年三月十六日
江苏省食品安全快速检测工程技术研究开发中心
液相色谱仪购置报告
一、申购背景
申请购置一台兼具荧光检测和二极管阵列检测的高效液相色谱仪，基于以下原因：
1.该台仪器的购置，是“江苏省食品安全快速检测工程技术研究开发中心”项目建设的预定计划之一，是工程中心研究、开发、第三方服务的主要设备。投入使用后，将满足新版国家标准“GB2762-2012 食品污染物限量”，“GB 2760-2011 食品安全国家标准”食品中污染物、添加剂检测的要求，其精度、准确度和检测限量是第三方检测的必须装备。
新版国家标准GB2762-2012 食品污染物限量标准自2013年6月1日正式施行。新标准逐项清理了以往食品标准中的所有污染物限量规定，整合修订为铅、镉、汞、砷、苯并[a]芘、N-二甲基亚硝胺等13种污染物在谷物、蔬菜、水果、肉类、水产品、调味品、饮料、酒类等20余大类食品的限量规定。其中对食品污染物“苯并[a]芘”规定运用高效液相色谱-荧光检测测定可以达到很好准确性、重现性和较低的检测限，达到食品中“苯并[a]芘”痕量检测的要求。
新版国家标准GB 2760-2011 食品安全国家标准“食品添加剂使用标准”对食品添加剂使用进行了严格的规定，卫生部发布的“食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单”中如罗丹明B、碱性嫩黄等禁用物质，没有国家标准检测方法。应用高效液相色谱-二极管阵列检测（可实现三维立体）可以更好更便揵的研究食品添加剂检测方法，并可同时准确定性定量。
2.该台仪器，对接香港中文大学生命科学学院“天然产物与功能食品”研究项目组，将系统开展辣椒素、花菁素、芝麻素、姜醇等天然抗氧化剂在脂肪酸、胆固醇、血脂氧化等方面的研究与应用开发。我院承担的省“六大人才高峰”项目“天然辣椒素对血脂代谢的影响研究与开发”、江苏省教育厅“青蓝工程”科技创新团队“农业投入品的监控与筛选”等相关研究内容，将主要依赖这台设备，相关合作，已于香港中文大学签署科研合作协议。
3.兼顾院级重点建设专业“生物技术及应用（制药）”需要。该专业是我院重点建设专业，2012年9月第一批学生已经入校，但是，实训资源建设缺口较大，特别是涉及到药物中间体、活性成分、功能因子等成分的分离与鉴定，高精度荧光和二极管阵列检测的高效液相色谱仪是必备工具。
二、预期效益
这台装备，是“江苏省食品安全快速检测工程技术研究开发中心”科研项目二期建设的既定内容，主要服务对象是科研、第三方检测和部分必须的专业实践，其效益主要体现在如下方面：
1.执行“江苏省食品安全快速检测工程技术研究开发中心”项目建设计划。投入运行后，我系将新增2-3个固定就（创）业岗位，满足5-7名学生的顶岗实践，全年将新增第三方检测服务营业额20-30万元。
2.提升科研质量。“天然辣椒素对血脂代谢的影响研究与开发”、“农业投入品的监控与筛选”等相关研究内容，将主要依赖这台设备，国际顶尖SCI期刊的研究报告，主要依赖这台设备，社会效益较大，价值难以量化。
3.提升专业建设水平。生物技术及应用（制药）专业实训中，涉及药物中间体、活性成分、功能因子等分离、鉴定，高精度荧光和二极管阵列检测的高效液相色谱仪是必备工具。具有培养学生的功能，是实验（训）资源建设的有效补充。
三、建议型号与附件
1.主机系统：SHIMADZU-LC20A（与香港实验室相同，数据同步）；
2.附件：二元泵，脱气机，荧光检测，二极管阵列检测，自动进样，柱温箱，氮吹仪，超声波，恒温水谷振震荡仪等。
四、经费来源
1.学院“校中园”建设专项20万元。
2.剩余款项（约20万元）拟从“食品安全快速检测工程技术研究开发中心”项目经费列支。
食品科学系 二O一三年三月十六日
第四篇：液相学习心得
反冲色谱柱是否会降低柱效呢?
1.简单来说，绝大多数硅胶基质的色谱柱,正用反用都是一样,没有多大区别.反着用也不会对色谱柱柱效产生影响。
2.小心起见的话，建议大家看随色谱柱来的一小页的说明.上面可能都有注明该色谱柱是否可以反冲.如果没说，一般都是可以反冲的。
3.还有一个问题,就是反冲后，是把柱子调回来用，还是就这么反着用呢？
在有些色谱柱压力高的时候，反冲一段时间后，压力下降到正常。换回正常的方向没多久又开始升高，这个时候，可以考虑就将色谱柱反着用。
4.有一种情况下，色谱柱不能长期反冲，就是色谱柱前后筛板孔径不一致的时候。有些3u色谱柱入口筛板孔径可能是2u，出口0.5u。这样可以让色谱柱承受更大的压力(因为出口比较小)。这种情况下，反冲一小段时间问题不大，但是时间长了以后，可能造成有些填料被冲出色谱柱，造成柱效下降的情况。如何防止这个问题出现呢？ 还是那句话，看说明书，看手册。
RTFM！与大家共勉：）
2011.5.22 要重新开始学习色谱的一些原理和故障诊断，开这个帖子，跟大家分享一下学习笔记。欢迎大家交流。也算是对自己的一种监督。学习资料来自LCGC杂志的各个专栏。
做液相的同学基本都会碰到分叉峰.很多时候,这都意味着硬件或者方法某些地方可能出现问题.这里我们一起看看导致峰分叉的原因以及如何解决这个问题的一些指导性的方法.1.首先,我们需要判断,这到底是一个峰,还是两个峰?
A图主峰前面有一个肩峰.这到底是峰形不好,还是另外一个化合物没分开呢?
判断办法:降低该成分在样品中的浓度.B图是降低该成分浓度后,进样后得到的色谱图.如果这是一个峰,那肩峰也应该响应变小.但是,这个例子里,肩峰没有变小,这应该是另外一个化合物.这时候,我们就要考虑如何改变方法,将这两个东西分开.2.所有峰的峰形都不好.一般来说,一个样品都会出多个峰.峰形不好,绝大多数时候,在每个峰上面都会出现.比如像下面这样:
A图是所有峰都拖尾.B 图是所有峰都有肩峰,也可以说峰分叉.这种情况一般都是色谱柱头塌陷或者柱头的筛板被堵导致的.为什么导致峰型问题呢? 请看下面的图.A图是正常的柱头.B图是筛板被堵的柱头.正常情况下,所有样品分子都是均匀通过色谱柱的,形成一个对称的峰形.堵塞得情况下,有一部分样品分子进入色谱柱就会收到阻扰,导致时间拖后,形成拖尾.对于色谱柱塌陷的情况,用同样的方法,大家也不难理解.只不过这时候,是一些样品分子可能跑的比正常的快了一些.如何解决这个问题呢:
1.反冲.柱出口放空，冲20-30ml流动相。虽然柱子上都有表明使用方向, 但是对于硅胶基质的色谱柱,基本都可以反冲.将柱头污染物(泵密封圈的碎屑，样品中的污染等)冲走，就能解决问题。当然，还是要提倡大家注意样品上机之前的前处理和及时更换磨损的泵密封圈。有条件的，还是用保护柱，大不了就换保护柱，也比换色谱柱强。
2．更换或清洗筛板。现在估计做这个事情的人不多，但是谁有废柱子，想练练也未尝不可。
案例分析：
我们一起看看一个实际的例子。
根据之前说的，可能是柱头堵了，或者塌陷了。但是进一步检查，发现另有原因。方法用的150 mm 4.6 mm, 5-um C18 柱子，78% 乙腈，1.5ml/min，等度方法，进样10ul，100%乙腈溶解的样品。
一般来说，虽然10ul的纯乙腈不会引起峰形不好，但是有时候样品溶剂的极性跟流动相差异较大时，的确会引起峰形的问题。
我们怎么办呢：
1． 从最容易的办法做起，降低溶剂乙腈的比例。降到50%看看。从下图B，4min的峰可以看出，没啥改观。
2． 接下来反冲柱子，结果图C，基本没变化。算，每天再说吧。
3． 第二天来到实验室，还能干嘛呢？ 更换筛板？ 算了，直接换柱子吧。结果如D，噢，好很多噢。之前柱子肯定有问题，扔了。但是峰还是有点宽，估计还是哪儿有问题。
4． 手上忙，没时间管这个。几天过后，重新配了流动相，一跑，好了。如图E。
虽然到底什么原因导致的之前峰形的问题已经无从查找(柱子扔了，旧流动相也没了)，但是也给我们一个解决问题的步骤：
1． 确定峰形问题是所有峰都有问题，还是就是某一个峰有问题。如果所有峰都有问题，基本都是色谱柱，或者仪器管路连接的问题。如果是某一个峰有问题，那就要从方法上来考虑，是否需要改变流动相比例，pH值，色谱柱温度等等。
2． 从最简单的做起，从不需要换什么东西的方法做起。比如改变样品溶剂，反冲色谱柱等等。
3． 换东西。换保护柱，换色谱柱，换流动相(新配)。一步一步的换，有助于找到问题的根本。
4． 问题解决后，想想需不需要采取什么措施，防止类似问题的发生，比如说常换流动相啦，即时更换密封圈啦，记录进样次数了解什么时候色谱柱就不行了啊之类的
基线噪音是做液相的同学经常感到头疼的问题, 特别在做痕量分析时候.这次我们从物理,化学到电子等各个方面看看噪音的来源,以及如何减小和消除噪音.1.流动相的在线混合.所有的流动相在线混合都是从方便出发的结果, 流动相混合的不充分是基线噪音的一个重要来源.混合方式主要两种:
a.低压混合：采取时间脉冲的方式，利用比例阀，将不同流动相按一定比例混合。
b.高压混合：利用多个泵头，控制每个泵的流量，来将流动相按一定比例混合。
在流动相混合后，一般都有一个混合器(Mixer),来帮助混合的更加充分。从流动相开始混合在一起，到流动相到达色谱柱头，这一段体积叫做延迟体积(Delay Volume).Mixer体积越大，混合越好，但是相应延迟体积就越大，造成梯度的延迟。换句话说，就是流动相的变化，需要一定时间后，才能真正到达色谱柱，对分离产生影响。
a.这个现象在使用UPLC或者UHPLC的时候，会有比较明显的作用。
b.为什么相同梯度方法，在不同仪器，或者不同品牌的仪器之间转化时，保留时间可能不一样？ 其主要原因就是延迟体积的不同。
在线混合很难做到非常均一的混合效果，这个在示差检测器（RID）上的效果最明显。这也是为什么示差检测器都要求将流动相预混到一个瓶子里，不能走梯度的原因。
那如何减小因为混合而造成的基线噪音呢？
a.对于等度的方法，非常简单，预混流动相就可以了。
b.对于梯度的方法，部分预混流动相也会帮助更好的混合，怎么做呢？看下面的例子。
方法要求乙腈/水比例从10%走到85%。那可以将流动相A配成10%的乙腈，流动相B配成85%的乙腈，然后A/B梯度从0%走到100%。这就是部分预混。
c.增大Mixer的体积。一般mixer的体积从几百ul到几个ml都有，在允许的延迟时间下，更换一个体积更大的Mixer，能够有效提高混合的效率。每个色生产厂家的Mixer体积都不一样,基本都可以混用.有碰到过一个Agilent的1100基线噪音大,后来换成1050的mixer就好了,因为1050的mixer比较大一些.2．液相硬件问题造成的基线噪音。
如果液相系统某些地方的工作不正常，也可能造成基线的噪音。
a.系统有漏。特别是肉眼无法发现的微漏或者泵的内漏，会造成流速的变化和混合比例的变化，从而导致基线噪音。检查的方法就是对系统进行压力测试：将系统从某个地方用死堵堵上，如泵出口，或者自动进样器出口，将压力升高到350bar后停泵，监测压力下降的情况。一般的标准是2-3bar/min的下降是正常水平。或者15%/10min的下降。
b.梯度比例问题。可以对系统进行一个梯度测试，来检查梯度混合是否准确和一致。将A配成0.1%的丙酮，B是水。在265nm的波长下，将A的比例10%，20%，30%这样一个一个的升高，每个比例走3min。可以根据计算，看每个基线台阶上升是否准确。也可以从0-100%走一个连续的梯度，看基线上升的平滑性和线性。
3．流动相脱气不好造成的基线噪音。
对流动相进行脱气，不仅仅是为了防止系统里面气泡的产生。流动相脱气越好，基线就会越好。如今最常用的脱气方式是在线脱气机，但是有的时候脱气并不彻底。所以当有基线噪音问题是，可以考虑采取多种的脱气方式。
4．系统洁净程度。
前面1-3点讲的都是内在原因，造成的基线噪音或者波动。如果你前面的原因都找过了，问题还没有解决，就得考虑一下是不是流动相里面是否有杂质了。如何检查判断是否为流动相的问题呢？
a.每次更换一种流动相，看基线结果。
b.重新配置所有流动相。这种方式比较快，但可能无法找到根本原因。
要特别注意在流动相的配置过程中，是否引入了污染，比如使用了不干净的玻璃器皿什么的。更换溶剂的品牌和批次也是方法之一。
色谱柱长期使用造成的污染有时候也会造成基线波动。有些时候样品里面可能有些保留非常强的组分，可能在色谱柱上很长时间才慢慢被冲出来，这时候已经不是一个峰了，而是基线的干扰或者波动了。
避免这种问题的方法：在每批样品后，用甲醇或者已经长时间冲洗色谱柱。另外，专柱专用也是一个好的习惯。如果一根色谱柱上作很多不同的样品，也可能导致互相之间的污染和影响。
5．电路的噪音。
对于UV检测器来说，就是采样频率不合适而产生的噪音。现在随着超高效液相的普及，检测器的采样频率也越来越高，有的可以达到80Hz以上。但是如果一味追求高采样频率，可能对灵敏度没有任何帮助，反倒产生比较大的噪音。(我们后面可能会有一起专门检测器的时候,会更详细的讨论这个的原因)
一般来说，我们需要保证一个色谱峰上面有15-20个点，来保证比较平滑的峰形和比较准确的定量结果。如果我的一个峰的时间宽度是0.5min，就是是30s，那只要保证1Hz的采样频率就足够了。如果在UPLC上面，一个峰的时间宽度是0.05min，也就是3s,就需要10Hz以上的采样频率。那80Hz的采样频率什么时候用呢？ 你的一个峰只有0.5s的时候。
理论上的计算是这样的
N=16（T/W）^2
N是柱效。T是保留时间。W是峰宽。
一般色谱如果柱效12000的塔板数。在5min的时候，出峰宽度大概计算出来时11s。你可以根据计算结果来调整检测器的合适的采样频率。
第五篇：气相色谱培训教材
气相色谱仪培训教材
第一章
气相色谱简介
气相色谱仪的组成2
气相色谱仪的原理
基本术语
常用概念
气相色谱应用的领域
气相色谱仪的组成1.气体
载气：用于传送样品通过整个系统的气体。
检测器气体：某些检测器所需要的支持气体。
2.进样系统
将样品蒸汽引入载气
3.色谱柱
实现样品组分的分离
4.检测器
对流出柱的样品组分进行识别和响应
5.数据系统
将检测器的信号转换为色谱图，并进行定性、6.气相色谱的原理
在色谱法中存在.两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。
7.气相色谱的原理
色谱法的分离原理：.就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。按顺序离开色谱柱进入检测器，产生离子流信号经放大后，在工作站中描绘出各组分的色谱峰。
8.基本术语
保留时间（Retention
time）：.组分从进样到出现最大值所需要的时间；
峰面积（Peak
Area）：从峰的最大值到峰底的距离；
峰高（Peak
Heigh）：峰与峰底之间包围的面积；
9.基本术语
分离度（resolution）：又称分辨率，两个相邻峰的分离程度，两个组分保留时间之差与其平均半峰宽值比值。
R＝2(tR2－tR1)/(W1＋W2)
固定相、柱温及载气的选择是气相色谱分离条件选择的三个主要方面，用于提高相邻两组分的分离度，在作定量分析时，为了能获得较好的精密度与准确度，应使R≥1.5。
10.常用概念
噪声：由于各种原.因引起的基线波动，称为基线噪声。无论在无组分流出还是有组分流出时，这种波动均存在。它是一种背景信号。噪声分短期和长期噪声二类。
漂移：基线随时间单方向的缓慢变化，称基线漂移。
响应值：组分通过检测器产生的信号。该值取决于组分的性质和浓度。气相色谱分析是用各组分的响应值（峰面积或峰高）来定量的。为此，必须掌握各组分在不同检测器上的响应特征。
相对响应因子：又称相对响应值（s）就是表明组分响应特征的指标。它是指某一组分与相同量参比物质，两者响应值之比。
灵敏度：指通过检测器物质的量变化时，该物质响应值的变化率。
.检测限：将产生两倍噪声信号时，单位体积的载气或单位时间内进入检测器的组分量
称为检测限。
线性：不同类型检测器的响应值与进入检测器组分浓度、质量或质量流量之间的关系。
线性范围：进入检测器的组分量与其响应值保持线性关系，或是灵敏度保持恒定所覆
盖的区间。
11.气相色谱应用的领域
GC是一种极为广泛.和重要的分析方法，范围从石油化工、环境保护，到食品分析、医疗卫生等
第二章
气相色谱仪的主要组成部分
气路部分
进样口
色谱柱
检测器
1.气路
气体：载气（用于.传送样品通过整个系统的气体）和检测器气体（部分检测器所需要的支持气体）。
载气纯度要求99.999%以上
气体的选择
根据检测器类型而选择.（不同检测器使用载气不同效果不同，FPD
和ECD可以选择氮气、氦气及氩气做载气，但是氮气效果更好）
惰性（所使用的气体不能和样品发生反应）
纯净（气体的纯度可避免背景因素的影响）
干燥
捕集阱
脱水管：用来脱去气体中微量的水分。
烃类捕集阱：用于捕集气源中少量烃类。起源中的烃类会提高检测器本底输出，增大噪声。
脱氧管：用来脱去气体中微量的氧气。微量的氧气会破坏色谱柱，特别是毛细管柱，同时，氧气也会降低电子捕获检测器的性能。
捕集阱的安装
安装捕集阱尽量靠近仪器位置。
安装之前先将管路吹扫干净防止没必要的消耗。
安装顺序先脱水再脱烃后脱氧（脱烃和脱氧管可以捕集水份，成本比脱水管高，且难再生），定期更换
减压阀压力：推荐0.4MPa
1kPa=0.145psi=0.01bar
管路的选择
使用铜管和不锈钢管连接管路。
管路使用前应用溶剂冲洗并使用载气干燥。
定期对外加接头检漏。
塑料管不能用于管路连接（会渗透氧气及其他污染物，同时会对检测组分有干扰）
2.进样口
进样口类型
进样口：使样品以一种可重复的方式注入的装置
填充进样口
分流/不分流进样口
程序升温气化进样口
挥发进样口
冷柱头进样
2.1
分流/不分流进样口——分流模式
分流模式用于含量较高组分分析
载气进入进样口后经总流量阀控制分两部分，一部分通过隔垫表面吹扫流出，另一部分经进样口进入衬管，在衬管中与样品气体混合后小部分进入色谱柱，大部分经分流出口放空，分流是通过分流平板的凹槽流出的。分流比为分流流量与柱流量的比值。
优点
防止柱污染
适用范围广
灵活性大
分流比可调
分流歧视
在分流比一定条件下，不同样品组分实际的分流比是不同的，这样就会造成进入色谱柱的样品组成不同于原来的样品组成，从而影响定量分析的准确度。
造成分流歧视的原因有：
.不均匀汽化
.不同样品组分在载气中的扩散速度不同
.分流比的大小
.注意色谱柱的初始温度，防止样品发生部分冷凝
.还要保证色谱柱安装时柱入口端超过分流点。
分流进样口参数设置
.温度：接近或等于组分中最重组分的沸点，保证组分快速汽化
.载气流速：氮气20-40cm/s
.分流比：20:1-200:1
分流比小分流歧视效应小，溶剂峰变宽，分流比大溶剂峰窄分流歧视效应大
衬管的选择
分流进样口可采用多种衬管，用于分流进样的衬管大都不是直通的，常见的管内都填充玻璃毛。
填充玻璃毛主要为了:
.增大与样品接触的比表面积，保证样品完全汽化。
.减小分流歧视。
.防止固体颗粒和不挥发组分进入色谱柱。
2.2
分流/不分流进样口——不分流模式
不分流模式用于痕量组分分析
不分流进样和分流进样采用同一个进样口，将分流气路的电磁阀关闭，使样品全部进入色谱柱。不分流进样不仅可以提高分析灵敏度，而且可以消除分流歧视。然而，在实际工作中，不分流进样应用远没有分流进样普遍，只有在分流进样不能满足分析要求时（主要是灵敏度要求），才考虑使用不分流进样。
这就要引入溶剂效应的概念。
溶剂效应
样品汽化后的体积相对于柱内载气流量太大，汽化的样品中溶剂是大量的，不可能瞬间进入色谱柱，结果溶剂峰就会严重拖尾，使早流出组分的峰被掩盖在溶剂溶剂拖尾峰中，加大分析难度，这一现象被称为溶剂效应。
为了消除溶剂效应，可以采用瞬间不分流技术，在进样开始时关闭分流阀，使系统处于不分流状态，待大部分样品在衬管中汽化进入色谱柱后，在某指定时间开启分流阀，使系统处于分流状态，这样，将衬管中剩余的蒸汽吹扫出衬管。就可以很大程度消除进样体积大和柱流量小引起的溶剂拖尾。所以说不分流进样不是绝对的不分流，而是分流与不分流的结合。
瞬间不分流时间的确定
这里，确定一个从进样到开启分流阀的时间是很关键的。这一时间（称瞬间不分流时间或分流延迟时间、溶剂吹扫时间）应足够长，以保证绝大部分样品进入色谱柱，避免分流歧视影响；同时又要尽可能短，以最大限度地消除溶剂拖尾，使早流出峰的分析更为准确。在实际工作中，常常是根据待测组分沸点和浓度等来确定一个优化的折中点。大多采用0.75分钟（即从进样到开启分流阀的时间为0.75分钟），通常能保证95%以上的样品进入色谱柱。
衬管的选择
选择直通式衬管，以保证样品在衬管中尽可能少地稀释。
对于相对“脏”的样品，为保证分析的重现性和保护色谱柱不被污染则需填充玻璃毛。但由于不分流进样时样品在衬管中滞留的时间比分流进样长，热不稳定化合物的分解可能性大，玻璃毛必须经过硅烷化处理，且及时清洗更换。
溶剂的选择
由于进样口温度、色谱柱初温、溶剂吹扫时间和进样体积都与溶剂沸点有关，所以不分流进样对样品溶剂有严格要求，一般来讲，使用高沸点溶剂比低沸点溶剂有利，因为溶剂沸点高时，容易实现溶剂聚焦，且可使用较高的色谱柱初始温度，还可以降低针尖歧视及衬管的压力突变。另外，溶剂的极性一定要与样品的极性相匹配，且要保证溶剂在所有被测组分之前出峰，溶剂还要与固定相匹配，才能实现有效的溶剂聚焦。
溶剂聚焦
.主要使溶剂峰变窄
.峰型美观
.不会脱尾及变宽
.影响分离效果
.不分流进样是分析高沸点痕量组分的首选方法。
不分流进样口参数设置
.温度：可以比分流进样稍低，但要保证待测组分瞬间完全汽化。温度过低会造成高沸点组分损失，温度过高会造成样品分解。
.载气流速：流速应高一点，分流出口的流量一般为30
至60ml/min
.溶剂吹扫时间：0.75分钟。
分流/不分流进样口——维护
.定期更换进样垫。
.更换或清洗衬管。
.更换O型环。
.清洗分流平板。
.清洗更换进样针
3.色谱柱
填充柱以一些材料.填充来吸附或吸收，由铜、不锈钢或硅酸硼玻璃制成，内径大约2-4mm，长度为0.5-10m。
.毛细管柱内壁覆盖一种吸附或吸收材料，由熔融石英制成，内径细0.05-0.75mm，长度最长可达150m。
.气相色谱中，固定相是一种固体材料，称为气固色谱法，用于永久气体和低分子量的烃类分析。固定相是粘性液体时（一般是聚合物），称为气液色谱法，气液色谱法占整个气相色谱分析应用的90%左右。
.通过样品在固定相的分配或不同溶解度实现分离.组分基于不同的极性而分离（偶极力的作用），固定相可由其化学结构不同而引起的不同极性排序。
.通常遵循“相似相溶”或同极性相互作用。
.色谱柱越长分离效果越好。
.分离指标
.柱效：色谱柱形成尖锐峰的能力
.分离度：色谱柱将两个峰彼此分开的能力
.选择性：色谱柱确认两个峰化学或物理性质差别的能力
.影响分离指标的因素
.柱内径
.长度
.柱流量
.炉箱温度
.柱子固定相类型。
.确保所分析组分与柱子的固定相有相互作用的能力。
.理论塔板：分离理论假定色谱柱被分为一些板，简单理解为组分与固定相之间有相互作用的时刻
.如何提高柱效
.使用内径更小的色谱柱。
.减小固定相百分组成。
.减小固定相液膜厚度。
.减小进样量。
.选用更长的色谱柱。
.使用程序升温改善后流出组分峰形。
.长度：色谱柱的柱效与色谱柱的长度成正比，分辨率是色谱柱长度的平方根，保留时间与长度称正比。
.直径：色谱柱的直径越小，效率越高，可加快分析速度；色谱柱的直径越大，可容纳的样品量越大，但效率会下降。
.液膜厚度：液膜厚度影响分离的质量，膜厚越厚，色谱柱样品的容量越大，保留时间越长，峰越宽，效率越低，柱流失越大。
柱温操作
.恒温
在整个分析过程中，柱箱温度保持恒定，升温速率为零，导致后流出的峰展宽。
.程序升温
针对组分有较宽的沸点范围时使用，减少分析时间并使峰变窄，可设定多阶程序升温，导致增加了柱流失，引起基线漂移。
.保存
.色谱柱不使用时要密封保存。
.堵上柱子两端，以保护柱子中固定液不被氧气和其他污染物所污染。
.重新安装色谱柱时注意安装方向，.安装时从柱头截去少许以确保隔垫碎屑不会堵塞在柱子内。
以下情况需老化：
.新柱应老化除去残留的溶剂。
.色谱柱中残留有杂质。
.长期不用的色谱柱应老化去除存放过程中变性的固定相。
.步骤：
.将检测器端色谱柱取下，用接口堵住检测器入口；通入载气，设定程序升温循环老化（最高温度比色谱柱的温度上限低20℃），老化时间为2-3小时。
.设置老化温度及时间时考虑的因素：温度足够高以除去不挥发物质，温度足够低以延长柱寿命和减小柱流失，老化温度越低老化时间应越长。
安装色谱柱
.选择尺寸合适的密封垫材料；
.在色谱柱安装前对柱端口进行切割，保证柱端口清洁平整；
.根据仪器制造厂商的指标，确定色谱柱安装于进样口和检测器时插入适当的距离；
.毛细柱必须固定在柱架上，任何部分都不能接触柱箱壁；
.安装好后确保所有接头不泄露。
3.检测器
气相色谱检测器.是一种能检测气相色谱流出组分及其变化的器件。检测器通常由传感器和检测电路组成。传感器是利用被测物质的各种物理性质、化学性质以及物理化学性质与载气的差异，来感应出被测物质的存在及其量的变化。检测电路是将传感器产生的各种信号转变成电信号的装置。从传感器送出的信号是多种多样的，有电阻、电流、电压、离子流、频率、光波等。检测电路的作用是测定出这些参数的变化，并将其变成可测量的电信号。
常用检测器的工作原理
.热导检测器：把载气流分为两部分，分别流经一对参比热导丝，当样品通过其中一根热导丝时，样品稀释了载气而使热导丝升温，其电阻相对于参比热导丝发生了变化，它对所有与载气的热电导有差异的化合物均有响应。
.氢焰检测器：样品在氢气、空气火焰中燃烧产生离子，离子被收集后转换成电流。氢焰检测器对大多数有机物都有响应，而多数无机物和一些带杂原子的有机物响应很小或没有响应。
.电子捕获检测器：通过Ni63放射源发射的低能电子被阳极收集产生电流，化合物捕获这些电子导致电流降低而产生一个信号。电子捕获检测器对碱金属化合物响应非常灵敏。
.火焰光度检测器：硫、磷化合物在氢气、氧气火焰中燃烧产生光发射。带有滤光片的光电倍增器只选择需要的波长来检测这种发射。火焰光度检测器对农药检测尤其有用。
.氮磷检测器：当燃烧的样品通过氮磷检测器中铷盐珠时，产生离子。氮磷检测器对农药中含N、P的检测非常灵敏。
.质量选择检测器：样品被电子流轰击后产生离子，这些离子按它们的质荷比（M/Z）被分离后，测量器质量数和丰度值。这种检测器可以通过选择适当的质量而使其选择性强。
.响应指标：
.灵敏度：单位含量样品的响应值，组分响应值与含量构成的直线的斜率，直线的最小值定义为最低检出限，响应高灵敏度大。
.选择性：衡量检测器对某些类型化合物是否有响应。检测器区分不同类别组分的能力。FID会识别任何烃的存在，ECD只可检测电负性较大的物质类型，如氟化物、氯化物、溴化物或碘化物等。NPD更具选择性，只可检测出有机氮或磷组分的存在，其他组分被忽略。
.动态范围：检测器提供的能正确定量的样品浓度范围，含量与电子捕获检测器。。
.电子捕获检测器是一种具有高灵敏度的离子化检测器。它的选择性高，仅对其有电负性的物质有信号，电负性越强，灵敏度越高。.当电负性组分进入检测器时，与电子碰撞并捕获电子导致电流改变并产生信号
电子捕获检测器操作注意事项：
.尾吹气不可采用氢气或氦气，一定使用氮气；
.微量的氧气会影响基线稳定性；
.将检测器出口通向室外；
.一旦检测器污染，只能热清洗。
.热清洗步骤：
.关闭炉温，从检测器端取下色谱柱。
.用色谱柱螺母塞住检测器连接口。
.检测器温度设定为350℃-375℃，尾吹气设为60ml/min。
.保持热清洗几小时后将系统冷却至正常操作温度。
火焰光度检测器
.原理
.利用富氢火焰使含硫或磷杂原子的有机物分解，形成激发态分子，当它们回到基态时，发射出一定波长的光，此光强度与被测组分量成正比，所以它是以物质与光的相互关系为机理的检测方法，属于光度法。火焰光度检测器是一种高灵敏度和高选择性的检测器。
.对于硫采用394nm或384nm滤光片，对磷用526nm滤光片，然后经光电倍增管把光强度变成电讯号进行测量
.气体设置
.尾吹气：尾吹气是从色谱柱出口处直接进入检测器的一路气体，又叫辅助气，毛细管柱大都采用尾吹气。.这是因为毛细管柱的柱内载气流量太低（常规柱为1-3ml/min），不能满足检测器的最佳操作条件（一般检测器要求20ml/min的载气流量）。在色谱柱后增加一路载气直接进入检测器，就可保证检测器在高灵敏度状态下工作。尾吹气的另一个重要作用是消除检测器死体积的柱外效应。经分离的化合物流出色谱柱后，可能由于管道体积增大而出现体积膨胀，导致流速缓慢，从而引起谱带展宽，加入尾吹气后就消除了这一问题。
.操作的注意事项
.更换滤光片前，关闭光电倍增管电压；
.最高操作温度严格按照厂商指标设置；
.避免使用腐蚀性强的氯化有机溶剂。
氮磷检测器
.原理
.在一个氢气/空气等离子体环境下，氮磷检测器的铷珠被电加热至600-800℃，形成了催化活性的固体表面，有机氮或有机磷化合物分子被导入到催化活性表面周围，被催化称负离子及电子形成微电流，输出的电流正比与收集到的离子数，用静电计测量并将其转化为数字形式，传输到一个输出设备。
.参数设置
.推荐温度设为325-335℃，设置较高的检测器温度好处：灵敏度有所提高，检测器上端的绝缘环和密封圈的污染减轻，检测器系统包括废气出口保持干净，铷珠可以在较低的电压下激发。
.操作注意事项
.安装新铷珠初期手动调节铷珠电压，选择较小的铷珠电压；
.设置较小的氢气流量；
.溶剂峰通过铷珠时关闭氢气；
.如果检测器长期未使用，先烘烤然后再加电压；
.使用高纯氮气、氢气和空气以确保检测器的正常使用（纯度99.999%以上）；
.如果灵敏度异常，不要轻易增加铷珠电压，检测收集极、喷嘴、陶瓷环和金属密封圈是否需要清洗。
第三章
校正与定量
校正
定量
定量的方法
校正
.概念：是利用某个峰的峰高或峰面积来确定其对应组分的浓度或含量。
.必要性：当检测器灵敏度针对不同的组分而变化时需要进行校正。
.检测器对同一组分不同含量响应值发生变化时需要进行校正。
.校正的过程：
.首先准备混合标样，准确知道组分浓度；
.运行混合标样；建立校正表；
.运行待测样品并用校正表分析它；
.需要时进行重新校正。
*
对于需要时进行重新校正可以理解为使用质控样品衡量
.单级校正
.对每个峰只做一次校正。
.单级校正即单点校正，仅有一个浓度的标样。
.单级校正定量结果不准确，但其简单、快速。
.单级校正适用以下情况：
.做简单的粗定量；
.当未知样品的浓度小于且接近于标样浓度时，所得定量结果较准确；
.主要用于检出实验，即不需要准确定量未知样品含量，只关心未知样品是否达标。
.多级校正
.对每个峰需要做至少两次校正。
.多级校正即多点校正，纠正了单级校正的缺点，可以进行准确定量，将标样等梯度稀释，运行每一级稀释好的标样，在每一级上进行校正，先准备一个浓度必须高于未知样品浓度，而且最终标样的浓度范围应包含未知样品浓度。
定量
定量是利用峰面积或峰高来确定样品中化合物的含量。
.定量分析过程
.了解你所分析的化合物；
.建立一个分析的方法；
.运行一个或多个已知浓度的样品，得到相应的响应值；
.分析未知浓度的样品，得到相应的响应值；
.将未知浓度样品的响应值与已知浓度的该样品的响应值进行比较，确定其浓度。
.定量的方法
.百分比法
.归一化法
.外标法
.内标法
.外标百分比法
.内标百分比法
.响应因子
.响应因子与组分的含量及其他组分的存在无关；在分析条件一定的条件下，响应因子为物质的特性；响应因子可以校正检测器响应。
.百分比法
.常用于粗定量，或组分简单、结构相似的混合物分析，并且不需要建立校正表。
.外标法
.当校正样和未知样品在同样的条件下分析时，未知样品的结果与校正样的结果相比较从而计算出未知物的含量，该方法是基本的定量方法，使用该方法时每次运行的进样量必须是一致的。
.使用此法的前提假设是标样中、未知样品中待测组分的响应因子相同。这就要求仪器必须具有良好的稳定性，而且应定期进行重新校正，否则标样的响应因子和未知样品的响应因子不相等，就无法进行准确定量。
外标法优、缺点
.优点：
.可以校正检测器的响应。
.只对欲分析的组分峰做校正。
.无需所有峰都能被检测到。
.缺点：
.进样量必须准确。
.仪器必须有良好的稳定性。
.需定期做重新校正。
.内标法
.内标法是将内标物加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析。
内标法优、缺点
.优点：
.进样不严格要求。
.只对欲分析的组分峰做校正
.校正检测器的响应
.缺点：
.必须加一个组分进到样品。
内标物的选择
.选择的标准
.样品中不存在该组分。
.可迅速容易得到。
.化学性质和样品相似。
.与样品有相似的响应值（浓度范围）。
.不会与样品发生反应。
.在感兴趣组分附近流出。
.可得到分离良好的峰。
.色谱性质稳定。
外标法与内标法比较
外标法是用标准品.的峰面积或峰高与其对应的浓度做一条标准曲线,测出样品的峰面积或峰高,通过该标准曲线上查对应的浓度,内标法是对应外标法说的,外标法是用样品和标准品对比,但是有时我们很难保证样品和标准品进的体积是一样的,毕竟要有误差,这时候就用内标法,就是在外标法的基础上,在样品和标准品里在加入一种物质,通过加入物质的峰面积或峰高的变化,就可以看出我们标准品和样品进样体积的差别,如果进样体积很难掌握,就用内标法,可以消除进样体积的误差。内标法工作曲线的横、纵坐标分别为含量比和峰面积比；而外标法工作曲线的横、纵坐标分别为含量和峰面积。
定量的方法
.归一化法
.假定
–
所有组分都流出。
–
所有组分都被检测到。
.优点
缺点
进样量不要求严格。
所有组分峰都要流出。
需测量所有的组分。
必须校正所有的峰。
第四章
仪器故障排除
不出峰与灵敏度降低
基线问题
色谱峰问题
分辨率降低
保留时间不重复
不出峰与灵敏度降低
.不出峰故障
.在选定操作条件下，给色谱仪注入规定的样品，在记录的谱图上没有相应的色谱峰出现的现象。
.灵敏度异常故障
.虽然出峰，但大小却与原来的已知谱图相差甚大。
.排除故障步骤
.操作条件重复性检查：核实操作条件是否与原条件接近。
.检查检测器有无反应：检测器响应检查应检测器类型而异。
.进样针及进、取样技术检查：进样针有无泄漏，抽取样品时抽取了空气或抽取样品后没及时进样造成样品挥发。
.载气堵、漏检查。
.进样口安装不当，载气样品流入不合理。
.仪器启动后零点基线的调整检查。
.检测器连线及工作条件检查。
基线问题
基线漂移一般是指基线向单方向持续升高或降低，最常见的原因是色谱柱固定性流失，色谱柱固定相流失是当色谱柱在其使用温度上限时基线的升高。在较低的柱温下如果有色谱峰，噪声过高，基线漂移或基线升高等现象，就不是色谱柱的流失造成的。此类现象主要是由于柱效降低，例如柱污染等引起的。
.基线波动
.基线波动的原因比较多，进样口、色谱柱、检测器、载气问题等都有可能导致基线的波动。
.基线噪声
.基线噪声增加最主要的原因
–
进样口、色谱柱和检测器污染
–
检测器相关部件老化、设置不正确。
色谱峰问题
.色谱峰问题出现的表现
.前伸峰
.拖尾峰
.鬼峰
.分裂峰
.色谱峰大小改变
.拖尾峰
.色谱峰系中最常见的问题
.鬼峰
.气相色谱分析中出现鬼峰，也就是色谱图中的“
额外峰”，一般不是由于柱流失所引起，通常是由于污染引起的。另外在评价鬼峰时考查其峰宽是很重要的。宽的峰，有时候是原先样品中的组分在色谱柱中慢慢洗脱导致的；窄的峰，可能是由于进样口污染等引起的。
分辨率降低
.分辨率与分离度及峰宽有关
保留时间不重复
保留时间的重复性是.指3次或5次进同一样品，其保留时间与它们的平均值的相对偏差值。如果这一相对偏差值超过了可接受的范围，就认为保留时间不重复。
.引起保留时间不重复的最可能原因
.一个是柱温不稳定
.另一个是流速有变化
.其他原因还有
.进样技术不佳
.进样量过大及柱损伤等
.检测器的故障不会造成保留时间的不重复
农残检测技术
有国标法，行标法，我们经常用的是行业标准检测，这里以NY/T761-2008为例。
.试样制备，按GB/T
8855标准抽取样品，取可食部分粉碎后制成待测样，在-20℃—-16
℃条件下保存
.农药标准溶液配制
.单一农药标准溶液：准确称取一定量的农药标准品，用溶剂配制成大浓度的单一标准储备液，储存在-18
℃以下冰箱中，使用时根据各农药在对应检测器上的响应值，稀释成所需的标准
工作液
.农药混合标准溶液：对于多组分农药，可根据各农药在仪器上的响应值，将各组分的单个农药储备液按一定量注入同一容量瓶中，稀释成所需质量浓度的标准工作液。
有机磷类农药的测定
.原理
.试样中有机磷类农药经乙腈提取，提取液经过滤、浓缩、净化后，用丙酮定容，经毛细柱分离，火焰光度检测器磷滤光片检测，通过保留时间定性，外标法定量。
.提取
.经乙腈提取的试样通过高速匀浆后过滤，滤液经分层后，收集一定量的上层乙腈相。
.净化
.将提取的上层乙腈相蒸发近干后，用丙酮多次冲洗并转移后定容，供测定。
.如果定容后的样品溶液过于浑浊，应用0.2μm滤膜过滤后再进行测定。
有机氯及拟除虫菊酯菊酯类农药的检测
.原理
.试样中有机氯、拟除虫菊酯类农药用乙腈提取，提取液经过滤、浓缩后，采用固相萃取柱分离、净化，淋洗液经浓缩后，通过毛细柱分离，电子捕获检测器检测，保留时间定性，外标法定量。
.提取
.试样经乙腈提取，过滤、浓缩后待净化。
.净化
.将待净化溶液通过固相萃取柱（弗罗里矽柱）后收集洗脱液，准确定容，待测。
.固相萃取柱
.活化（使用活化试剂活化萃取柱）、上样（将样品注入）、淋洗（用淋洗液将杂质洗掉）、洗脱（用洗脱液洗脱样品）
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