第一篇:市区实验用动物管理方案
市区实验用动物管理方案范文
第一条为了规范实验动物管理,保证实验动物质量,适应科学研究、社会发展和对外开放的需要,根据国家有关法律、法规,结合本省实际,制定本办法。
第二条本办法所称实验动物是指依照《实验动物管理条例》规定,经人工饲育,对其携带的微生物和寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。
第三条本办法适用于本省行政区域内从事实验动物的生产、使用和监督管理等活动。
第四条实验动物管理,应当遵循合理规划、资源共享、程序规范的原则。
第五条省科学技术行政部门主管本省实验动物工作。
省卫生、教育、农业、林业、水利、质量技术监督和食品药品监督管理等有关部门,按照各自的职责,做好实验动物管理有关工作。
第六条实验动物许可证分为生产许可证和使用许可证。
生产实验动物应当依照《实验动物管理条例》规定取得实验动物生产许可证。使用实验动物应当依照《实验动物管理条例》规定取得实验动物使用许可证。
未取得实验动物许可证的单位和个人,不得从事实验动物的生产和使用。
第七条省科学技术行政部门负责全省实验动物许可证的发放和管理。
申请实验动物许可证的单位和个人应当具备国家规定的条件,向省科学技术行政部门提出申请,并提交相关材料。省科学技术行政部门应当自收到申请之日起20个工作日内作出决定。符合发放条件的,予以发放;不符合条件的,作出不予发放的决定并说明理由。
第八条实验动物许可证的有效期为5年。
已取得实验动物许可证的单位和个人,应当在许可证有效期届满30日前,向省科学技术行政部门提出换发申请。省科学技术行政部门应当自收到换发申请之日起20个工作日内作出决定。符合换发条件的,予以换发;不符合条件的,作出不予换发的决定并说明理由。
第九条从事实验动物工作的单位和个人,应当加强实验动物管理,制定管理制度和操作规程,配备专业技术人员。
第十条进行实验动物工作的从业人员,应当经过省科学技术行政部门组织的专业培训。
第十一条从事实验动物工作的单位和个人应当采取预防和保护措施,组织从业人员定期进行身体检查,保证从业人员的健康与安全。
对患有传染性疾病、不宜从事实验动物工作的人员,应当及时调换。
第十二条实验动物按照国家标准实行分级分类管理。
第十三条生产、使用实验动物的环境设施,应当符合等级标准要求。
第十四条实验动物种子应当来源于国家实验动物种子中心或者国家认可的种源单位,并保证遗传背景明确。
第十五条本省鼓励和支持培育实验动物新品种、新品系。
为补充实验动物种源、开发新品种品系或者科学研究,需要捕捉野生动物的,应当遵守国家有关法律、法规。
第十六条生产、使用实验动物的单位和个人,应当依据国家标准,定期对实验动物进行质量检测。各项作业过程和检测数据应当有真实、完整、准确的记录。
第十七条运输实验动物应当符合等级标准要求。不同品种、品系、性别和等级的实验动物,不得在同一运输器具内混合装运。
第十八条使用实验动物,应当遵守优化、减少、替代的原则。根据实验目的,使用相应等级的实验动物。
不同品种、不同等级和互有干扰的实验动物,不得在同一实验单元使用。
第十九条从事实验动物工作的单位和个人应当制定实验动物疫情应急预案。
实验动物发生传染性疾病时,应当立即采取隔离、消毒等有效措施,防止疫情蔓延,并及时向当地兽医主管部门、动物卫生监督机构或者动物疫病预防控制机构以及科学技术行政部门报告。
第二十条从事实验动物工作的单位和个人,应当按照国家规定对实验动物尸体和废弃物进行无害化处理。
第二十一条从事实验动物工作的单位和个人,应当关爱实验动物,维护动物福利,不得戏弄、虐待实验动物。动物实验中和实验结束时,在不影响实验结果的条件下,应当避免或者减轻给实验动物造成不安和疼痛。
第二十二条对实验动物进行基因修饰研究,应当执行国家有关基因工程安全管理方面的规定。
使用实验动物开展病原体感染、染毒和放射性实验的,应当遵守国家有关法律法规。
实验动物的进出口管理,应当遵守国家有关法律法规。
第二十三条科技成果鉴定、产品检定检验以及其他科研和实验,应当使用合格的实验动物而未使用,或者注明使用实验动物实际并未使用的,所得出的鉴定意见、实验结果无效。
第二十四条省科学技术行政部门应当对在实验动物工作中作出突出贡献的单位和个人,给予表彰和奖励。
第二十五条省科学技术行政部门应当建立健全监督检查制度,加强对实验动物工作的监督管理,将监督检查情况和处理结果予以记录并向社会公布。
省科学技术行政部门应当建立信用管理制度,公布被许可的实验动物生产、使用单位和个人的有关信息,便于公众查询和监督。
第二十六条任何单位和个人有权对实验动物生产、使用中的违法行为进行举报,省科学技术行政部门应当受理、核实公众举报,对违法行为依法处理。
第二十八条违反本办法规定,从事实验动物工作的单位和个人有下列情形之一的,由省科学技术行政部门予以警告,责令限期改正:
(一)违反制定的实验动物管理制度和操作规程的;
(二)实验动物的生产、使用环境设施不符合等级标准要求的;
(三)实验动物种子来源不清,遗传背景不明确的;
(四)未对实验动物进行质量检测,或者未对作业过程和检测数据进行记录的;
(五)实验动物发生传染性疾病,未采取有效措施,导致疫情蔓延的;
(六)未按照规定对实验动物尸体和废弃物进行无害化处理的。
第二十九条实验动物管理工作人员玩忽职守、滥用职权、徇私舞弊的,由其所在单位或者上级主管部门给予行政处分;构成犯罪的,依法追究刑事责任。
第三十条违反本办法规定,法律法规另有规定的,从其规定。
第三十一条本办法自年月日起施行。
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第二篇:实验动物和动物试验管理规程
1总则
1.1 为保证生物制品生产、检定和科研的质量,必须加强对实验动物和动物试验的科学管理。
1.2 本规程所指的实验动物是指来源清楚或遗传背景明确,符合微生物控制指标要求,用于生物制品生产、检定及科研的动物。
1.3 本规程包括实验动物生产和动物试验两部分。实行国家有关实验动物的认证制度。各单位实验动物部门应根据本规程和具体条件,制定相应的实施细则执行。实验动物设施
2.1 选址:应符合国家和地方对建筑物的要求。此外,应从实验动物卫生防疫的角度充分考虑。周围无家畜、家禽及其他动物饲养场,选择无可能成为中间宿主的昆虫滋生或可以控制滋生的区域。尽量选择无空气污染及噪音干扰的区域。
2.2 实验动物设施分实验动物生产和实验动物试验两类,动物生产和动物试验设施应严格分开。
2.3 应根据实验动物的品种、品系及微生物控制的级别,建造相应的实验动物设施。以防不同品种动物相互干扰,不同品系动物发生遗传污染,以及不同级别动物发生微生物等污染。
2.4 应有足够数量的试验动物饲养间,以利于不同品种、品系,不同微生物控制等级、不同试验目的的动物试验能隔离饲养。
2.5 进行有感染性和放射性等生物危害性试验的动物饲养间,应该与一般性试验的动物房严格分开,且有严格的安全防护措施,以防止生物有害物质的外泄和对工作人员健康的危害。
2.6 设施的建筑要求
2.6.1 应符合国家及地方对建筑物设计、建造的的一般要求,但要充分考虑实验动物设施的特殊性。内墙表面应光滑平整,阴阳角均为圆孤形,易于清洗、消毒。墙面应采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击的材料。地面应防滑、耐磨、无渗漏,下水设计合理,保证水流通畅。天花板应耐水、耐腐蚀。饲养室应有良好的气密性。走廊应有足够宽度、门宽不应小于900mm,送排风应能控制,符合所饲养动物的微生物控制级别要求。应有二路电力供应及备用发电设备,以保证通风设备正常运行。
2.6.2 实验动物设施内应有明显的区域划分。
2.6.2.1 动物饲养区域:动物生产、繁殖、试验期饲养观察。
2.6.2.2 动物试验操作区域:与动物饲养间相邻或相近处,设置与试验种类相应的实验操作室。
2.6.2.3 动物受领、检疫区域:新搬入动物进行检查、检疫。
2.6.2.4 物品搬入、贮存区域:饲料、垫料等消耗性物品、笼器具的搬入及贮存区域。
2.6.2.5 事务管理区域:记录及各种事务管理、更衣、卫生间和浴室等。
2.6.2.6 废弃物处理区域:垃圾、动物尸体无害化处理前的暂存区域。
2.6.2.7 洗刷、消毒、灭菌区域:笼架具的洗涮消毒、饲料、垫料等物品的消毒灭菌。
2.6.2.8 机房区域:空调机房、配电室等设备设置区域。
2.6.2.9 其他区域:走廊、门厅、楼梯、电梯等区域。
2.7 实验动物饲养室的环境条件
根据对实验动物微生物控制要求的不同,饲养室的环境条件分为四类。
2.7.1 开放系统:适用于饲养普通级实验动物。
2.7.2 亚屏障系统:适用于饲养清洁级实验动物。
2.7.3 屏障系统:适用于饲养无特定病原体(SPF)级实验动物。
2.7.4 隔离系统:适用于饲养SPF级及无菌(GF)级实验动物。
2.8 实验动物环境条件标准:按卫生部《医学实验动物环境及设施标准》表1执行。3 实验动物的饲养管理
3.1 实验动物生产种群应遗传背景明确、微生物控制符合卫生部《医学实验动物质量标准》。生物制品生产、检定及科研用大、小鼠的质量应达到清洁级以上标准。为保证动物质量,应定期进行微持物学、病理学、遗传学的监测。不符合标准的应及时更新种群。
3.2 根据生物制品生产、检定和科研的需要,选育、生产不同品种、品系,符合微生物控制要求的实验动物。
3.3 根据动物的品种,品系及微生物等级的不同,严格分开饲养,严格按各自的饲养操作细则加强管理。
3.4 实验动物生产应有能准确反映生产过程和动物繁殖生产能力的各种台帐、笼卡,并认真填写。
3.5 动物试验前应给予一定的适应期,以适应新的饲养环境。患病动物或试验期患病的动物,原则上不作治疗。啮齿类小动物应及时淘汰处理。犬、猴等中型动物在确认治疗不影响试验结果的前提下才能治疗,并应记录治疗所用药剂、方法等。
3.6 在同一动物试验室,使用同种、同品系的实验动物进行不同的试验时,应有明显的区别。动物的饲养架或笼子上应标明试验名称、试验期、动物只数、试验负责人等。同笼动物必要时采取适当的办法区别标记,如刺耳、耳标、烙印、涂色等。进行活菌、活病毒试验的动物应与其他试验动物严格分开。
3.7 垫料要吸水性好,无害并消毒或灭菌后使用。定期换笼、换垫料、保持笼架具清洁卫生、干燥等。
3.8 应定期喂料给水。动物的饲料、水应符合各种动物的营养需要。不能有影响动物健康及动物试验结果的病原体、化学有害物等的污染。严禁饲喂霉变饲料。必须饲喂蔬菜、水果等新鲜饲料时,应保证质量,有防止病原体和毒物污染的措施。饲料的营养水平应符合《医学实验动物全价营养饲料标准》。饮用水须符合城市饮水卫生标准。根据饲喂动物微生物控制等级,应采用相应的消毒、灭菌措施。
3.9 实验动物设施内应进行定期和临时的消毒杀虫。防止传播媒介的滋生。消毒杀虫剂不应对动物健康和动物试验带来不良影响。实验动物的供应和使用
4.1 根据生物制品生产、检定、科研所需的动物规格、遗传及微生物等级要求,供应具有动物质量合格证的动物。
4.2 动物运输应使用符合动物生理及微生物控制级别要求的运输工具。实验动物的检疫和传染病的控制
5.1 实验动物的疾病防治,应以卫生的饲养管理及严格的检疫为原则,以预防为主。原则上不得采取疫苗免疫接种,免疫后的动物不得用于生物制品的生产、检定和科研。
5.2 凡引入实验动物时,必须按检疫制度进行隔离检疫。
5.3 严格控制外来人员及物品出入动物繁育室。
5.4 应建立防疫消毒制度,加强动物饲养室内及院落的卫生消毒工作。定期消灭蚊蝇、野鼠等可能的传染源、传播媒介。
5.5 废弃或淘汰动物应及时处理,尸体及其他废弃物应及时进行无害化处理。
5.6 发生疫情应及时隔离封锁,查明病因,采取措施,慎重处理,必要时全部销毁。
已污染的及可能被污染的动物、环境和物品亦应彻底消毒,并及时上报有关部门。
5.7 邻近地区发生疫情时,必须严格封锁,并加强防疫消毒措施。实验动物工作人员
6.1 从事实验动物生产及试验期动物饲养管理的人员,应经过专门的技术训练并获得上岗证,应有一定数量的技术干部。
6.2 从事动物试验的试验人员,应具备实验动物的有关知识,掌握所用动物的特性、习性、饲养管理要点等。
6.3 实验动物工作者应身体健康,每年体检一次,发现患有人畜共患传染病者,应积极治疗,妥善安排。
6.4 实验动物工作人员作业时必须穿戴工作衣、帽、换工作鞋。且不同微生物等级控制的动物房应穿戴相应的工作衣、帽、鞋。凡进行对人有危害的动物试验,如人畜共患病、传染病、放射性、致癌性、致死性的试验,必须有切实可靠的防护措施。
第三篇:实验动物伦理学
投英国一偏SCI文章,对方要求实验动物的伦理证明,如下:There is no indication in the manuscript that ethical approval had been obtained from a recognized body for the approval of animal experiments.If the experiment was not ethically approved the work cannot be published.请问我该怎么办?
对方只是说你在文章中没有indication实验动物伦理证明,没有问你要证明的原件,你只需要indication一下即可rocedures involving animals and their care were conducted in
conformity with NIH guidelines(NIH Pub.No.85-23, revised 1996)and was approved by Animal Care and Use Committee of the XXX University..如题!我投的文章返修,涉及动物试验伦理问题,不知该如何做答,因为我们这里并没有相关的动物伦理委员会,如果没有,该如何答!多谢!
reviewer的意见:
Quote the agreement of Local Ethics Committee of the Institution on
Laboratory Animal Care in Methods.请各位师兄师姐指教,多谢!
在你们当地医学院或医学研究所应该有动物饲养中心吧,写上他们的实验动物应用伦理法就可以,你的实验动物来源地方就应该有自己的规则。
例:我用的大连医科大学动物中心的小鼠,文章就这样写的:
All experimental procedures were conducted in conformity with institutional guidelines for the care and use of laboratory animals in Dalian Medical University, Dalian, China, and conformed to the National Institutes of Health Guide for Care and Use of Laboratory Animals(Publication No.85-23, revised 1985).All animal work was performed according to the ****** of Health guidelines, and protocols were approved by the University of ****** Institutional Animal Care and Use Committee
第四篇:《动物病理学》实验
实验一 实验性空气栓塞
一、实验目的
了解空气栓塞对机体的影响
二、实验材料
家兔,20ml注射器及针头,解剖刀,剪,镊子,面盒,浸有二甲苯的棉球若干等
三、实验内容:
1.先观察家兔的一般状况:活动状态、呼吸频率、嘴唇颜色及瞳孔大小等。2.用浸有二甲苯的棉球涂擦一侧耳廓,使局部血管扩张,便于穿刺注射。3.用注射器经耳缘静脉注入空气10~15ml,记录时间,并注意观察家兔的表现。
4.待家兔死之后剖创胸并剪开心包,观察左、右心有无泡沫状血液,在胸腔内注入水使之淹没心脏,先后剪开左、右心室,观察有无空气泡逸出。实验结果(报告的主要部分):
1.注射空气后家兔的表现:开始活动增多,呼吸频率加快→继而活动减弱,嘴唇发绀→接着全身抽搐→死亡。
2.剖胸后心腔内的改变:右心房内有泡沫状血液,剪开右心房后有气泡逸出。
讨论与结论(运用所学知识对实验结果进行分析和解释,对实验结果中所能验证的概念、理论,作出简明的概括和总结):
注射的空气进入耳缘静脉以后,迅速到达右心,由于心脏的收缩和舒张,从而将空气和血液搅拌成大量的泡沫血,当心肌收缩时可阻塞肺动脉出口导致猝死(使血液不能到达肺部进行气体交换,从而使机体缺氧→活动增多(烦燥),呼吸加深加快予以代偿→由于是泡沫血→缺氧继续存在→活动减弱,嘴唇发绀,最终致死。
实验二 脱水
一、实验目的
通过不同浓度食盐溶液引起红细胞形态变化实验,推理说明机体脱水对细胞的影响。
二、实验器具与试剂
三、实验材料
抗凝血、带凹载玻片、滴管、10%、0.9%、0.1%氯化钠溶液、显微镜
四、实验内容:
1、将三种浓度氯化钠溶液分别滴入3块玻片的凹内,数滴即可,勿太多,以防溢出。
2、分别向各玻片凹内不同浓度氯化钠溶液中滴入抗凝血1滴。3、片刻后,轮流将载玻片置于低倍镜下,观察细胞状态,直至出现变化为止,然后在高倍镜下观察红细胞的变化。
实验报告:记录不同浓度氯化钠溶液引起红细胞变化的结果,并分析其原因。
实验三 尸体剖检诊断技术
一、实验目的
了解并掌握动物了尸体剖检方法,包括剖检的准备工作、常见动物动物的剖检术式、各器官及其病理变化的检查方法、病理材料的采集、包装和保存方法、病理剖检记录和剖检报告的方法等;培养综合分析病理变化的能力,为临床应用打好基础。
二、实验材料 1、动物 鸡、兔
2、器械 剥皮刀、解剖刀、手术刀、肠剪、骨钳、板锯、骨斧、镊子、手术剪、卷尺、磨刀石、注射器、针头、瓷盘(盆或缸)等采集病料常用器具。
3、药品 0.1%新洁尔灭溶液、3%来苏儿溶液、3%碘酊、70%-75%酒精、10%福尔马林溶液或95%酒精、药棉、纱布等。
三、实验内容:
一、兔子的剖检
1、检验前准备 先用手术刀或剪子沿下颌骨与第1颈椎处切断颈动脉,放血3-4分钟,将兔致死,用水冲洗兔体被毛,然后用刀在颈部、前肢腕关节及后肢跗关节上方1厘米处皮肤作环形切口,再沿两后肢内侧,绕过肛门挑切开皮肤并断尾,再由助手倒提并分开兔两后肢,一人用双手自阴部上方翻转皮肤,采用脱袜式方式把皮自阴部拉头部,剥去皮,断头,截肢。然后放在盘中开膛。自耻骨开始,沿腹中线用小刀切开腹壁,取出胃、肠、脾,取出心、肺、肝,置于盘中,进行同步检验。
2、内脏的检验 依次对胃、肠、脾、心、肺、肝进行感官检查,注意其大小、色泽,有无病变,尤其是蚓突和圆小囊浆膜下是否有灰白色小结节,经检验兔伪结核病。兔蚓突为盲肠的游离端,比较细,壁厚而内管狭窄,长约10厘米,表面光滑,颜色较淡。圆小囊在回肠与盲肠连接处,由肠管膨大形成的厚壁球囊。
3、胴体的检验 检验者左手握有齿镊子,钳住左侧腹壁肌肉,右手持剪刀撑开右侧腹壁,体腔,再检查体表,注意胴体放血程度,有无出血、黄疸、脓肿等变化,如发现颈部,液浅和腹股沟淋巴结肿大,呈深红色并有坏死灶,应考虑野兔热和坏死杆菌病。
二、鸡的剖检 1.胴体检查
(1)检查放血程度 检查胴体体表的颜色和皮下血管(如翅下血管、胸部与鼠蹊部血管)的充盈程度判定放血是否良好。放血良好的健康光禽,皮肤为白色或淡黄色,有光泽,看不到皮下的血管,肌肉切面颜色均匀,切断面无血滴渗出。放血不良的光禽,皮肤呈红色,表层血管充血,皮下血管显露,一切断口有血液流出,肌肉颜色不均匀。
(2)检查头部和肛门 观察鸡冠和肉髯,注意有无肿胀、结痂(鸡痘)和异常变化,鸡冠和肉髯呈青紫色或黑色,应注意检查新城疫或禽流感;观察眼球是否下陷,注意虹膜的色泽、瞳孔的形状、大小以及有无锯齿状的白膜或白环(眼型马立克氏病),眼睛和眼眶周围有无肿胀,眼睑内有无干酪样物质(鸡传染性鼻炎、眼型鸡痘);观察鼻孔和口腔的清洁度,注意有无黏性分泌物或干酪性假膜(鸡传染性鼻炎、鸡痘);观察咽喉和气管有无充血和出血,有无纤维蛋白性或干酪性渗出物(鸡传染性喉气管炎、鸡痘);观察肛门的清洁度,注意是否紧闭,有无炎症。
(3)检查体表 观察皮肤的色泽,注意皮肤上有无结节、结痂和疤(鸡痘、马立克氏病);看胴体有无外伤、水肿、化脓及关节肿大等病变。将白条鸡仰卧放在搪瓷盘中,由胸骨柄到肛门,沿腹中线切开腹壁,并绕肛门一周,在胸前口颈基部切开皮肤,剥离嗉囊,名捕自腹壁开口并取出胃、肠、脾、嗉囊和心、肝等脏器,放在搪瓷盘中待检。2.内脏检查
(1)肝脏 观察其色泽、形状和大小,是否有肿大,有无黄白色斑纹和结节(鸡马立克氏病、鸡白血病、鸡结核病),有无坏死小斑点(禽霍乱等),胆囊有无变化,是否完整。
(2)脾脏 观察是否有充血、肿大、变色和灰白色结节(注意鸡结核病)。(3)心脏 注意心包膜是否粗糙,心包腔是否有积液,心脏是否有出血及赘生物等。
(4)胃 剖检肌胃,剥去角质层,观察有无出血;剪开腺胃,刮去胃内容物,观察腺胃乳头是否肿大,有无出血和溃疡(注意鸡新城疫、禽流感)。(5)肠 视检整个肠管浆膜及肠系膜有无充血、出血、结节,特别注意小肠和盲肠。
(6)卵巢 观察卵巢有无变形、变色、变硬等现象(注意卵黄性腹膜炎),注意卵巢的完整性。
用手术刀钝性剥离肾脏,暴露腰荐神经丛,检查其有无病变,也可自大腿内侧肌肉缝剥离坐骨神经检查。注意神经干的粗细和色泽。检查全净膛光禽体腔内是否有炎性渗出物、赘生物及寄生虫等异常变化。
三、病料的采取
1.剖检前检查 凡发现患畜(包括马、牛、羊及猪等)急性死亡时,必须先用显微镜检查其末梢血液抹片中是否有炭疽杆菌存在。如怀疑是炭疽,则不可随意剖检,只有在确定不是炭疽时方可进行剖检。
2.取材时间 内脏病料的采取,须于死亡后立即进行,最好不超过6h,否则时间过长,由肠内侵入其他细菌,易使尸体腐败,影响病原微生物的检出。
3.器械的消毒 刀、剪、镊子、注射器、针头等煮沸消毒30min。器皿(玻璃制品、陶制品等)可用高压灭菌或-干烤灭菌。软木塞、橡皮塞置于0.5%石炭酸水溶液中煮沸10min。采取一种病料,使用一套器械和容器,不可混用。
4.病料采取 应根据不同的传染病,相应地采取该病常侵害的脏器或内容物。如败血性传染病可采取心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、胃、肠等;肠毒血症采取小肠及其内容物;有神经症状的传染病采取脑、脊髓等。如无法估计是哪种传染病,可进行全面采取。检查血清抗体时,采取血液,凝固后析出血清,将血清装入灭菌小瓶送检。为了避免杂菌污染,病变检查应待病料采取完毕后再进行。各种组织及液体的病料采取方法如下。(1)脓汁 用灭菌注射器或吸管抽取或吸出脓肿深部的脓汁,置于灭菌试管中。若为开口的化脓灶或鼻腔时,则用无菌棉签浸蘸后,放在灭菌试管中。(2)淋巴结及内脏 将淋巴结、肺、肝、脾及肾等有病变的部位各采取1~2cm3的小方块,分别置于灭菌试管或平皿中。若为供病理组织切片的材料,应将典型病变部分及相连的健康组织一并切取,组织块的大小每边约2cm左右,同时要避免使用金属容器,尤其是当病料供色素检查时(如马传贫、马脑炎及焦虫病等),更应注意。(3)血液
血清:以无菌操作吸取血液l0ml,置于灭菌试管中,待血液凝固(经1~2天)析出血清后,吸出血清置于另一灭菌试管内,如供血清学反应时,可于每毫升中加入5%石炭酸水溶液1~2滴。
全血:采取10ml全血,立即注入盛有5%柠檬酸钠lml的灭菌试管中,搓转混合片刻后即可。
心血:心血通常在右心房处采取,先用烧红的铁片或刀片烙烫心肌表面,然后用灭菌的尖刃外科刀自烙烫处刺一小孔,再用灭菌吸管或注射器吸出血液,盛于灭菌试管中。
(4)乳汁 乳房先用消毒药水洗净(取乳者的手亦应事先消毒),并把乳房附近的毛刷湿,最初所挤的3—4股乳汁弃去,然后再采集l0ml左右乳汁于灭菌试管中。若仅供显微镜直接染色检查,则可于其中加入0.5%的福尔马林液。
(5)胆汁 先用烧红的刀片或铁片烙烫胆囊表面,再用灭菌吸管或注射器刺人胆囊内吸取胆汁,盛于灭菌试管中。
(6)肠 用烧红刀片或铁片将欲采取的肠表面烙烫后穿一小孔,持灭菌棉签插入肠内,以便采取肠管粘膜或其内容物;亦可用线扎紧一段肠道(约6cm)两端,然后将两端切断,置于灭菌器皿内。
(7)皮肤 取大小约10cmXl0cm的皮肤一块,保存于30%甘油缓冲溶液中,或10%饱和盐水溶液中,或10%福尔马林液中。
(8)胎儿 将流产后的整个胎儿,用塑料薄膜、油布或数层不透水的油纸包紧,装入木箱内,立即送往实验室。
(9)小家畜及家禽 将整个尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中,装入木箱内,送往实验室。
(10)骨头 需要完整的骨头标本时,应将附着的肌肉和韧带等全部除去,表面撤上食盐,然后包于浸过5%石炭酸水或0.1%升汞液的纱布或麻布中,装于木箱内送到实验室。
(11)脑、脊髓 如采取脑、脊髓作病毒检查,可将脑、脊髓浸入50%甘油盐水液中或将整个头部割下,包人浸过0.1%升汞液的纱布或油布中,装入木箱或铁桶中送检。
供显微镜检查用的脓汁、血液及粘液;可用载玻片作成抹片;组织块可作成触片,然后在两块玻片之间靠近两端边沿处各垫一根火柴棍或牙签十以免抹片或触片上的病料互相接触。如玻片有多张,可按上法依次垫火柴棍或牙签重叠起来,最上面的一张玻片上的涂、抹面应朝下,最后用细线包扎,玻片上应注明口码,并另附说明。
四、病料的保存
病料采取后,如不能立即检验,或需送往有关单位检验,应当加入适量的保存剂,使病料尽量保持新鲜状态。
1.细菌检验材料的保存 将采取的脏器组织块,保存于饱和的氯化钠溶液或30%甘油缓冲盐水溶液中,容器加塞封固。如系液体,可装在封闭的毛细玻管或试管运送。
饱和氯化钠溶液的配制法是:蒸馏水l00ml,氯化钠38~39g,充分搅拌溶解后,用数层纱布过滤,高压灭菌后备用。
30%甘油缓冲盐水溶液的配制法是:中性甘油30ml,氯化钠牛5g,碱性磷酸钠l 0g,加蒸馏水至l00ml,混合后高,压灭菌备用。
2.病毒检验材料的保存 将采取的脏器组织块,保存于50%甘油缓冲盐水溶液或鸡蛋生理盐水中,容器加塞封固。
50%甘油缓冲盐水溶液的配制法是:氯化钠2.5g,酸性磷酸钠0.46g,碱性磷酸钠10.74g,溶于l00ml中性蒸馏水中,加纯中性甘油150ml,中性蒸馏水50ml,混合分装后,高压灭菌备用。
鸡蛋生理盐水的配制法是:先将新鲜的鸡蛋表面用碘酒消毒,然后打开将内容物倾入灭菌容器内,按全蛋9份加入灭菌生理盐水1份,摇匀后用灭菌纱布过滤,再加热至56~58℃,持续30min,第2天及第3天按上法再加热一次,即可应用。
3.病理组织学检验材料的保存 将采取的脏器组织块放人10%福尔马林溶液或95%酒精中固定;固定液的用量应为送检病料的10倍以上。如用10%福尔马林溶液固定,应在24h后换新鲜溶液一次。严寒季节为防病料冻结,可将上述固定好的组织块取出,保存于甘油和10%福尔马林等量混合液中。
五、病料的运送
装病料的容器要一一标号,详细记录,并附病料送检单。病料包装容器要牢固,做到安全稳妥,对于危险材料、怕热或怕冻的材料要分别采取措施。一般病原学检验的材料怕热,应放入加有冰块的保温瓶或冷藏箱内送检,如无冰块,可在保温瓶内放入氯化铵450~500g,加水1500m1,上层放病料,这样能使保温瓶内保持0℃达24h。供病理学检验的材料放在10%福尔马林溶液中,不必冷藏。包装好的病料要尽快运送,长途以空运为宜。实验报告 作尸体剖检报告一份
实验四
大体标本制作
一、实验目的
通过本实验,掌握病理标本的制作方法,了解标本制作的原理,为学习、科研和临床病理诊断 提供依据。
二、实验材料
脱脂棉、胶布、石蜡、毛笔、醋酸钾、甘油、蒸馏水、麝香草酚、10%福尔马林、95%酒精、标本瓶(小的)
三、实验内容:
一、取材→固定→加工处理→处理,瓶送与保存。
取材:取材时必须仔细,防止挤压,标本应带有明显的病变或变化,并可适当的修理,使其便于装瓶和观察,体积较小的器官,可将整个留用。必须保持原组织器官的结构完整性。
固定:固定的目的在于使器官组织不腐败变质,其体积,形态,结构不变,颜色也能长期保存。固定标本的容器应比较宽大,固定液应充足, 其体积至少为标本的5倍。固定标本时,容器底部垫以脱脂棉,漂浮的标本,其上面覆盖浸湿固定液的纱布或脱脂棉,同一容器中不宜同时固定几件标本。胃肠或囊状器官的粘膜病变留作标本时,应剪开展于硬纸上。如需整体固定,保存胆囊或膀胱,可其中填入(注入)固定液或填充脱脂棉。固定标本时间因标本厚度,组织结构不同而异,胃肠壁需固定1~3天,子宫约 3~5天,1~2cm厚的实质器官需5~8天,固定时间不宜过长,否则回色不良,最常用的固定液为甲醛。固定后的标本需经加工处理才能装瓶保存。普通标本制作比较简单,原色标本的制作大多还要进行回色,一般通过酒精回色, 回色时间取决于颜色显现的程度。当颜色显现最鲜艳时即可停止。回色时间一般为1~2h ,回色前标本应在流水中冲洗12~24h。装瓶与保存:这是最后一个步骤,标本应放入大小适当的清结标本瓶(或缸)中,标本装瓶后,注入保存液。原色保存液为甘油,醋酸钾(钠),最后加盖封口,贴标签。原色标本要放在暗处或柜中,应避免阳光照射引起的褪色。
封标本瓶(或缸)口的方法很多: 1.胶布封贴瓶口后,其上再涂一层石蜡。石蜡先溶化, 用毛笔蘸取并迅速涂于胶布表面和边缘。
2.用万能胶(环氧树脂)或白乳胶(聚醋酸乙烯)封口,先将封口胶涂于瓶和盖的磨砂口上,盖紧后其上用较重物品压1~2天。
3.蜂蜡松香封口:将6:4的蜂蜡和松香隔水溶化,用毛笔蘸取并涂于瓶口, 然后将瓶盖在火上烘热在瓶口均匀压紧。冷却后用小刀烤热再将瓶口与瓶盖间的缝隙烫干。
二.普通标本制作法: 首先取材,固定于10%福尔马林溶液(即甲醛用水稀释10倍)中,固定时间可适当加长,一般为1~2周或更长,流水 冲洗12~24h 后,吸去标本表面的水分,装瓶,用留水或清水配制10%福尔马林溶液中保存。最好中性福尔马林溶液(在1000ml10%福尔马林液中,加入磷酸氢二钠6.5克,和磷酸二氢钠4克)。
三.原色标本制作法: 原色标本制作方法有多种,现将常用方法介绍如下: 第一种方法: 固定液:10%福尔马林
回色液:95%酒精
保存液:醋酸钾: 300克 甘油: 500克
蒸馏水: 1000ml 麝香草酚: 0.5克
固定4~6天,流水冲洗 20~30h ,回色后用纱布沾去标本表面上的酒精 ,装入保存液瓶中封存。
第二种方法:(岂氏法)固定液:福尔马林 100ml 醋酸钾 15克
硫酸钾 15克
蒸馏水 500ml 回色液: 95%酒精
保存液:蒸馏水 900ml 甘油 300ml 醋酸钾 200克
麝香草酸 2克
固定1~2周,冲洗 12~24h ,回色约1~2h , 用蒸馏水洗去标本表面上的酒精,放入保存液中封存。
由于实验室没有大体标本和组织切片,以下实验通过网上查找了部分图片让学生观看.实验五 局部血液循环障碍
一、实验目的
通过实训掌握并能识别常见组织器官血液循环障碍的眼观和镜检病理变化.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 充血 一.大体标本
1.肺淤血:多见于左心机能不全。静脉回流受阻,肺体积增大,被膜紧张,色紫红,质地较坚实,切面流出多量暗红色血液。淤血较久时,则易发生肺水肿,此时肺切面流出多量带泡沫的血样液体。肺间质增宽,富含水分。肺组织块投入水中如载重舟。
思考题:用生理学知识分析肺淤血继发水肿的原因。
2.肝淤血:常见于右心衰竭。淤血时体积增大,边缘钝圆,色暗紫红色,切面流出多量暗紫红色血液,淤血较久时,小叶中央部充血呈暗红色,小叶边缘则肿胀或脂变呈黄褐色,形成暗红色与黄褐色相间的斑纹,类似中药槟榔的断面故称“槟榔肝”。
肠淤血:肠壁静脉扩张增粗,充满暗红色血液,形似树枝状。二.切片标本 1.慢性肝淤血
低倍镜下,肝小叶中央部的窦状隙和中央静脉扩张,充满红细胞,肝索受压萎缩甚至消失,小叶周边部肝索排列紊乱;高倍镜下,小叶周边部肝细胞体积增大,胞浆内有大小不等的近圆形空泡(脂肪变性)。2.慢性肺淤血
低倍镜下,肺内小静脉、肺泡壁毛细血管显著扩张,充满红细胞。肺泡及间质内见有淡粉红色的浆液、数量不等的红细胞和有核细胞成分。高倍镜下见肺泡内的细胞成分主要是巨噬细胞,胞浆内吞噬有黄褐色含铁血黄素颗粒的巨噬细胞即“心衰细胞”。3.肾小球动脉充血
低倍镜下找到肾小球皮质部后,转换高倍镜观察,可见肾小球毛细血管扩张,充满红细胞,致肾小球体积膨大,肾球囊狭窄。肾小管间毛细血管也扩张充血。
出血 一.大体标本
1.猪肾点状出血:肾表面及切面上有多数针尖至菜籽大小的出血小点。此标本取至猪瘟病。
2.心内膜斑状出血:心室内膜下出现黑红色斑点,称淤斑。
3.马肝被膜下血肿:肝被膜下与实质之间有大的凝固血块,周围结缔组织增生形成包裹。血肿周围实质受压贫血,呈淡黄褐色。
4.血管破裂性出血:乳牛产后子宫中动脉破裂出血,患畜死于失血过多。此标本示血管破裂处。
5.线状出血:肠粘膜皱壁的顶端出血,呈暗红色的线条,称线状出血。6.出血性子宫炎:子宫内膜弥漫性出血,呈暗紫红色。二.切片标本 1.猪脾出血
镜下可见脾窦扩张,充满红细胞。脾索及白髓内均有大量红细胞出现。思考题:出血的概念。2.鼠肺出血
肺脓肿的另一端,肺泡腔内充满大量红细胞。
血栓形成 一.大体标本
1.牛肺静脉红色血栓:肺内扩张的静脉内有一血块,其中心红色,边缘淡黄,(这是因形成时间较久,边缘血红蛋白崩解之故)因发生血栓软化,血管与血栓界线不清。
2.猪心瓣膜上白色血栓:二尖瓣向血流面有一干燥灰白赘生物附着,表面粗糙不平,呈花椰菜样外观。瓣膜变形、缺损。此标本取自慢性猪丹毒患猪。
4.动脉内白色血栓:马前肠系膜动脉根部管腔扩大,管壁肥厚,内膜粗糙不平,内膜上附着干燥灰白片状血栓物质。通过此标本理解血栓形成的条件。
5.肝内混合血栓:肝内扩张的血管内有一血栓,部分灰白(白色血栓),部分暗红(红色血栓)。此标本为牛肝硬变。二.切片标本 1.羊脾混合血栓
低倍镜下见脾脏充血出血,在一至二个极度扩张的脾窦内见有血栓物质。血栓由粉红色索状物和大量红细胞构成。高倍镜下,粉红色血小板条索间见有少量粒细胞。血栓边缘可见成纤维细胞增生。2.肺微血栓形成
镜下见肺内间质及肺泡隔上小血管及毛细血管扩张充血,多数血管中见有交织成网状的纤维素,其中网罗有红细胞。此为全身弥漫性血管内凝血(DIC)的表现。
思考题:血栓与死后血凝块如何区别? 梗死 一.大体标本
1.马肾贫血性梗死:梗死区呈灰黄色或灰白色,略向表面突起,干燥,质地脆弱,切面呈锥形,锥尖指向肾门部。梗死区与周围组织交界和有红色充血反应带。
2.猪脾出血性梗死:脾脏边缘部有高梁仔至黄豆大小黑红色突起。(质略硬,切面略呈楔形,结构模糊不清)。此标本取自猪瘟。
思考题:从组织学结构分析,脾脏梗死应属贫血性梗死,请分析猪瘟时,脾脏出现出血性梗死的可能原因。
3.肝出血性梗死:肝表面见有大小不等,形状不规则的暗红色斑块,切面不规则。
思考题:用组织解剖学知识解释不同器官的梗死灶具有不同形状的原因。二.切片标本 1.羊脾出血性梗死
低倍镜下见脾脏红白髓界线不清,组织结构被破坏,小血管和血窦扩张充血,大量红细胞堆积于组织内,在一极度扩张的血管内见有一混合血栓。高倍镜下见脾脏淋巴细胞显著减少,大量红细胞之间散在有细胞核碎片。思考题:梗死与坏死的关系。
实验六 水肿
一、实验目的
通过实训掌握并能识别常见组织器官水肿的眼观和镜检病理变化.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 一.大体标本
1.皮下水肿:皮下疏松结缔组织层增宽,有灰白色半透明物质聚集。2.肺水肿:肺体积增大,被膜紧张,重量增加,切块投入水中如载重舟;切面流出大量血色泡沫状液体;肺间质增宽,其间聚集白色胶冻样水肿液。3.胃粘膜水肿:切面见胃粘膜下有灰白色胶冻样浆液浸润。
4.网膜脂肪胶样水肿:网膜脂肪消失,由胶冻样水肿液填充,网膜呈半透明。多见于全身营养不良,网膜脂肪被大量消耗时。
5.肾盂积水:此标本由于膀胱内肿瘤堵塞泌尿道,使尿液淤积于肾盂。眼观见肾盂、肾盏扩张,呈大小不等的空腔,肾实质萎缩。二.切片标本 肺间质水肿
肺胞壁毛细血管扩张充血,肺泡腔内充满淡粉红色浆液和数量不等的细胞成分;间质扩张,胶原纤维解离、断裂,漂浮于水肿液中,淋巴管扩张充满大量淋巴液。
实验七 细胞和组织的损伤
一、实验目的
通过实训掌握并能识别常见组织器官萎缩、变性和坏死的眼观和镜检病理变化.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 萎缩 一.大体标本
1.脂肪的浆液性萎缩:机体营养不足时可发生全身性萎缩,脂肪组织的萎缩最早发生,脂肪组织消耗竭尽,为多量的浆液浸润,呈灰白色半透明胶冻样,故又称脂肪组织的胶样萎缩。标本有网膜和黄骨髓。
2.脾萎缩:脾脏体积缩小,重量减轻,质地变硬,边缘锐薄;被膜皱缩增厚,呈灰白色。切面见脾小梁明显,脾髓显著减少呈红褐色。3.压迫性萎缩:
(1).肝:肝表面突起鸡蛋大小充满透明液体的白色囊泡,此即细颈囊尾蚴,是大泡带状绦虫的幼虫。囊泡周围的肝实质因受压萎缩。
(2).肾:肾体积增大,表面高低不平。切面见皮质和髓质界线不清,肾盏扩张,肾实质萎缩,厚薄不均。此标本为肾盂积水。
(3).脑:此标本为先天性脑积水。左右大脑半球因积水压迫而未发育,尤以右大脑半球明显。
(4).神经性萎缩:鸡腹腔内有一鸡蛋大小的血肿,因血肿压迫腰荐神经,使其支配的一侧腿部肌肉发生营养不良性萎缩。
(5).睾丸萎缩:一侧睾丸体积显著减小,质地变硬,被膜增厚,呈灰白色。另一侧睾丸代谢性肥大。三.切片标本 1.肝压迫性萎缩
肝脏的转移平滑肌肉瘤压迫肝脏引起肝细胞萎缩。镜下见平滑肌肉瘤细胞周围肝细胞索受压变窄,肝细胞缩小,胞浆深染。2.横纹肌萎缩
镜下见肌纤维变细,肌浆减少,横纹不明显,胞核密集。间质增宽,结缔组织增生。3.肾压迫性萎缩
镜下见肾皮质变薄,肾小管上皮细胞变薄。肾小球萎缩及玻璃样变,少数肾小球代偿性肥大。
变性 一.大体标本
1.猪肾肿胀:体积增大,被膜紧张,边缘钝圆,颜色苍白浑浊呈水煮样外观。切面,皮髓质界线不清,质脆易碎。
2.猪皮肤水泡:猪蹄部皮肤上见有黄豆至蚕豆大的浅红色溃疡灶,此为皮肤上水泡破裂后所形成。此为猪水泡病的标本,通过此标本可了解细胞肿胀的发展。
3.猪肝脂肪变性:肝体积增大,质软易碎,呈黄褐色、灰褐色或土黄色。肝脂变可发生在小叶中心或小叶周边。若小叶周边脂肪化,小叶中心区淤血,则形成红黄相间的外观,称槟榔肝。
4.马肝脂肪变性:肝脏体积肿大,质地松软脆弱,整个肝脏呈灰黄色或黄色;切面结构模糊,触之有油腻感,因脂变程度有差异,色彩不均匀。5.鸡脂肝症:鸡肝体积肿大,呈土黄色,质地松软易脆,组织中见有血凝块。鸡脂肝症由嗜脂因子缺乏引起,导致肝弥漫脂化,患鸡常因肝破裂出血死亡。
6.猪肺脂肪浸润:肺小叶间质中多量脂肪浸润,肺表面呈黄白网状花纹。7.鸡心脂肪浸润:心外膜见多量淡黄色的脂肪组织围绕。故称脂肪心。思考题:脂肪变性与脂肪浸润的区别。
8.结缔组织透明变性:肝表面见有多量粟粒至高梁籽大的坚硬、灰白色、半透明小结节。此标本取自马肝沙粒症,肉眼所见结节为马圆形线虫的幼虫及外围透明变性的结缔组织构成。
9.牛肝淀粉样变性:肝体积增大,被膜紧张,边缘钝圆,质软易脆,色灰褐。
牛肺粘液样变性:肺内有儿头大小的灰白色凉粉样物质蓄积。二.切片标本 1.羊肝颗粒变性
低倍镜下病灶区,胞浆嗜伊红着红色加深,肝细胞索之间的窦状隙缩小甚至闭锁。高倍镜下见肝细胞肿胀,胞浆内充满均匀的粉红色颗粒,局部区域肝细胞肿大更明显,胞浆内颗粒粗大稀疏。胞核无明显变化。2.猪肝水泡变性及颗粒变性
低倍镜下见肝细胞索排列紊乱,红色着染不均,肝窦贫血,狭窄闭锁。高倍镜下见某些肝细胞内充满多量微细颗粒,一些肝细胞体积显著增大,胞浆淡染,清亮,其间有残留的胞浆基质。胞核肿大淡染。3.肾小管脂肪变性
在肾皮质部肾曲小管上皮细胞中可见大小不等的近圆形空泡。4.马肝脂肪变性 低倍镜下,肝索排列紊乱,肝窦狭窄或闭锁;肝组织内出现大小不等的空泡。高倍镜下,见肝细胞内有大小不等的近圆形空泡,病变严重者,整个胞浆为脂滴占据,胞核被挤于一侧,呈半月形。5.脂肪变性特殊染色
镜下见细胞内空泡被锇酸染成黑色。在普通石蜡切片中,脂滴被有机溶剂溶解呈空泡状,与水泡变性的空泡不易区别,常用冰冻切片做特殊染色做鉴别诊断。
思考题:脂肪变性与细胞肿胀如何鉴别诊断? 6.结缔组织透明变性
此标本为马圆形线虫幼虫外围的结缔组织透明变性。镜下可见数个大小不等的幼虫结节,结节中心为红染,均质无结构物质,散见有蓝色粉未状钙化物沉着,此为死亡的幼虫;虫体外围有粉红染,均质透明玻璃样外观的物质环绕,其中有少数残存细胞核,此为虫体外结缔组织透明变性。7.肾小球透明变性
此切片组织取自肾盂积水。低倍镜下见肾皮质萎缩,肾小管减少导致肾小球相对集中。高倍镜下见,肾小球的正常组织结构完全丧失,整个肾小球着染伊红呈淡红色均质无结构状态,少量未消失的细胞核浓缩。8.肝淀粉样变
镜下见肝细胞索排列紊乱,肝细胞萎缩,变形,胞核浓缩或消失。在肝索和肝窦之间沉着有均质状的淡红色物质,此为淀粉样物质。新鲜标本制作的切片用碘反应时,此物质呈红褐色,再加稀硫酸溶液,则变为蓝色或紫色,此反应与淀粉遇碘时的反应相似,故称淀粉样物质。
坏死 一.大体标本
1.马肾贫血性梗死:梗死区干燥、坚实、呈灰白色或灰黄色,略向表面突起,切面形成三角椎形,椎尖向肾门,椎底朝表面,梗死区结构模糊,周围出现充血出血的炎症反应带。
2.肌肉蜡样坏死:此标本取自羔羊和牛的硒缺乏症,坏死肌肉浑浊肿胀,干燥坚实,呈灰黄色或灰白色,形似石蜡。
3.结核干酪样坏死:此标本为牛淋巴结结核。眼观淋巴结体积增大,表面有大小不等的圆形或类圆形结节,切面见皮质和髓质中有白色或灰白色的干酪样或豆腐渣样的坏死物质,质地松软易碎。
4.腹腔脂肪坏死:在黄色有光泽的脂肪组织中出现多个白色不透明、硬固,无光泽的斑块和结节,此为脂肪组织坏死后皂化而形成
5.脑液化性坏死:在丙侧脑的矢状切面上见有黄白色乳汁状的液化坏死灶,坏死组织开始被吸收故显有不规则空隙。
6.牛耳尾干性坏疽:牛耳、尾的皮肤组织坏死后,由于水分被蒸发,被毛脱落变成干固皱缩棕黑色,坏死组织与周围组织分界明显,以后可因腐离脱落。
7.肺湿性坏疽:肺坏死处湿润,呈污灰、灰绿或暗褐色,坏死组织有腐败臭味。
8.肌肉气性坏疽:此标本取自马恶性水肿的臀部肌肉。肌肉呈棕黑色,触之有捻发音。二.切片标本 1.坏死组织细胞核变化
先用低倍镜找到肝脏的坏死灶,再用高倍镜仔细观察坏死细胞胞核的如下三种变化: 核溶解:多发生于细胞肿胀的情况下,胞核首先肿大,核染色质溶解,染色变淡,进而仅见核的轮廓,最后完全消失。通过此切片可体会核溶解的全过程。
核浓缩:细胞核体积缩小,染色质浓缩,染色加深呈深蓝色。
核碎裂:染色持集聚集变为小的着色深的不均匀的颗粒状物,散布于核内或靠近核膜,随核膜破裂而分散有胞浆中,呈现大小不等的碎块状。2.肌肉蜡样坏死
坏死的肌肉纤维肿胀、断裂、横纹消失,胞浆均质红染或崩解成颗粒状,胞核消失。间质水肿增宽,可见成纤维细胞增生和单核细胞、浆细胞等浸润。
3.结核结节干酪样坏死
病灶处原有的组织结构崩解消失,成为均质、红染、颗粒状的无结构物质,有的病灶中心已发生钙化,外周有结缔组织包裹。
实验八 炎症
一、实验目的
1.识别各类型炎症的眼观和组织学病理变化.2.识别各种炎性细胞的组织学形态.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 炎症渗出物 切片标本 1.浆液
此切片为浆液性肺炎,镜下见肺泡腔及支气管内充有粉红色均匀一致的蛋白性渗出液。2.纤维素
此切片为大叶性肺炎。在肺泡腔中见有粉红色丝状物质,交织成丝网状,其间有细胞成分。
3.各种炎症细胞的形态观察(1).中性白细胞
多见于急性炎症早期或化脓性炎症,具有活跃的运动和吞噬能力,主要吞噬细菌、死组织碎片抗原抗体复合。胞浆内含有丰富的嗜中性颗粒,H.E染成淡粉红色,细胞幼年时核呈杆状,成熟后分成2-5叶,故又称为多形核白细胞。此切片为肌肉蜂窝织炎。(2).嗜酸性白细胞
主要由骨髓产生,多见于寄生虫病及某些变态反应性疾病的炎症灶中,运动能力较弱,有一定吞噬作用,能吞噬抗原抗体复合。细胞核一般分为两叶,胞浆丰富,内含有粗大的强嗜酸性颗粒。此切片为猪食盐中毒的嗜酸性粒细胞性脑膜脑炎。(3).淋巴细胞
运动能力较弱,没有吞噬作用,多见于急性炎症后期及慢性炎症。细胞体积较小;核较大,圆形,深染;胞浆极少,嗜碱性,在组织切片中不易看见。(4).浆细胞
浆细胞是由B细胞受抗原刺激后演变而来的,主要见于慢性炎症。浆细胞具有合成免疫球蛋白的能力。细胞呈球形或卵圆形,较淋巴细胞略大。胞浆丰富,略嗜碱性,核圆形,常偏于细胞一侧,核染色质致密呈辐射状排列。(5).单核细胞
病灶中的单核细胞主要由血管渗出,也可是组织原性的。主要见于急性炎症的后期、慢性炎症、非化脓性炎症、病毒病、原虫感染等,能吞噬细菌、组织碎片等较大异物,处理抗原后将抗原信息递呈给免疫活性细胞。单核细胞胞体大,胞浆丰富,H.E染成粉红色,核呈卵圆形、肾形或马蹄形,染色质颗粒纤维而疏松,着色较浅。(6).多核巨细胞
多核巨细胞由多个巨噬细胞融合而成,具有强大的吞噬能力。细胞体积大,胞浆丰富,呈淡红色,胞核形态学特点与巨噬细胞相似,但数量较多,从数个到数十个不等。传染性肉芽肿时核排列在细胞周边,或聚于一侧,称朗罕氏巨细胞;异物肉芽肿时胞核不规则地分布在胞浆中,称异物巨细胞。炎症类型 变质性炎症 一.大体标本:
1.急性变质性肾炎:肾肿大,浑浊,质脆,表面散在有小点出血。在眼观上与单纯的变性或出血不易区别,应做组织学确诊。
2.变质性肝炎:肝脏体积肿大,暗红,表面和切面散在有针尖大至粟粒大的黄白色或灰白色坏死灶。二.切片标本 变质性肝炎
低倍镜下可见肝组织内有大小不等的坏死灶,肝窦扩张充血。高倍镜下,见坏死灶内肝组织结构崩解成一片红染无结构物质,上面散见蓝染的细胞核碎片,在坏死灶和周围肝窦内见有少量单核细胞和嗜中性白细胞等浸润,肝细胞肿胀及脂肪变性。渗出性炎症 一.大体标本
1.牛皮肤浆液性炎:标本有口蹄疫患牛的舌、瘤胃。在舌侧面,瘤胃肉柱上可见有大小不等的水泡,呈灰白色突起,部分水泡破裂后形成圆形溃疡,表面覆有黑褐色结痂。
2.猪皮肤浆液性炎:猪发生水泡病时常在蹄叉部和嘴、鼻部皮肤发生浆液性炎,形成突出于皮肤表面的水泡,内含有淡黄色浑浊的液体,水泡破裂后形成烂斑。
3.浆液性肺炎:肺体积肿大,颜色紫红或灰红色,质地变硬、易碎。切面流出多量带血的浆液。支气管潮红充血,间质增宽,水肿。
4.急性卡他性胃炎:胃粘膜潮红,肿胀,常伴有小点出血,粘膜表面覆有大量灰白半透明的粘液性渗出物。
5.浮膜性肠炎:猪大肠粘膜上有多量黄白色纤维素膜,易于剥落,剥落后见粘膜完整,有充血、肿胀等炎症变化。
6.固膜性肠炎:猪大肠粘膜上有多处突起于表面粗糙的痂样物,呈黄白色或灰黄色。结痂为渗出的纤维素与坏死组织的混杂物,因坏死常波及深层组织,故难以剥离,若强行剥离,则形成出血的溃疡面。因膜性肠炎常见于仔猪副伤寒和猪瘟。
7.纤维素性心包炎:此标本为牛创伤性心包炎。渗出的纤维蛋白附着在心外膜上,由于心脏病搏动,纤维蛋白形成无数的绒毛状物覆盖于心脏表面,故称“绒毛心”。
8.化脓性肺炎:肺体积增大,质度较硬,切面上见有黄白、浑浊、大小不等的化脓灶。加压时,由病灶实质和气管中流出黄白浑浊的斑点,即为脓汁。
9.化脓性淋巴结炎:淋巴结体积肿大,切面见淋巴结的正常结构完全消失,被膜增厚,其内充满黄白色豆腐样物质,淋巴组织被脓汁完全取代。10.出血性淋巴结炎:此标本取自猪瘟。淋巴结体积显著肿大,表面呈暗红色,切面呈红白相间的大理石样外观。
11.出血性肠炎:粘膜肿胀、呈暗紫红色,有点状或圆形出血斑块。12.猪出血性子宫内膜炎:子宫内膜弥漫性出血,粘膜肿胀,呈紫红色。二.切片标本 1.浆液性肺炎
肺泡腔内充有粉红色的渗出液,其中混有少数脱落的肺泡上皮细胞及嗜中性白细胞、单核细胞、淋巴细胞等细胞成分。肺胞壁增厚,毛细胞血管充血,肺泡壁上有少数中性白细胞和淋巴细胞浸润。支气管内含有红染炎性渗出液,小叶间质增宽,间质及淋巴管内有大量淡红色浆液,其间浸润有少量中性白细胞。间质胶原纤维肿胀,断裂。2.固膜性肠炎
镜下见病变部粘膜及粘膜下层坏死,正常结构消失,呈均质红染无结构状态。坏死组织中混有淡红色丝网状纤维素,周围组织浸润有多量巨噬细胞、淋巴细胞及少量中性白细胞;粘膜、粘膜下层及肌层血管充血、组织水肿。3.肌肉蜂窝织炎
肌间结缔组织显著增宽,结构疏松,其间浸润有多量中性白细胞、淋巴细胞及巨噬细胞。肌纤维断裂,横纹消失,核浓缩或溶解消失,肌间血管充血、出血。4.化脓性脑炎
由化脓性细胞引起。在脑实质内见有一初期化脓灶,其中浸润有大量中性白细胞,大部分已变性坏死(脓球)。脓肿灶周围小胶质细胞增多,神经细胞变性坏死。脑膜增厚,水肿、充血,其中也有大量中性白细胞浸润。增生性炎症 一.大体标本
1.血吸虫性结肠炎:肠壁显著增厚,粘膜皱壁粗大,表面呈颗粒状。此为肠粘膜及结缔组织增生所致。
2.副结核性小肠炎:标本取自绵羊副结核病。小肠壁增厚,粘膜皱壁粗大形成脑回样外观。
3.寄生虫性胆道炎:因胆道内肝片吸虫寄生,引起胆道慢性炎症。肉眼可见胆管壁及周围结缔组织增厚,表面呈灰白色粗大条纹,断面呈灰白色圆管状。
4.结核性肉芽肿:见大小不等的增生结节,呈灰白色,切面呈灰白色或灰黄色干酪样外观。二.切片标本 1.羊增生性肾小球肾炎
镜下肾小球体积增大充满肾小囊。血管内皮、间质细胞增生,其间有少量中性白细胞浸润,细胞核增多呈富核现象。肾小管上皮细胞轻度变性。2.结核性传染性肉芽肿
镜下见结核性肉芽肿的中心为红染无结构的坏死物质;周围有大量的上皮样细胞、巨噬细胞和朗罕氏巨细胞;再外围为大量增生的成纤维细胞和新生的毛细血管组成的普通肉芽组织,其中浸润有大量淋巴细胞。3.鸡皮肤异物肉芽肿
真皮内有大量角质蛋白形成的包涵囊肿,角蛋白组织接触诱发上皮样细胞与多核巨细胞增生,形成肉芽肿性炎症。
实验十 肿瘤
一、实验目的
1.掌握良性肿瘤与恶性肿瘤的形态结构区别要点.2.掌握动物常见肿瘤评理变化的主要特征.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 肿瘤的生物学特性
一.肿瘤的外形、质度、颜色、大小
1.外形:肿瘤的外形是多样的,这与肿瘤的发生部位、组织来源、生长方式有一定关系。生长在皮肤和粘膜表面的肿瘤常向表面突起,呈结节状、息肉状或乳头状。如胆管腺瘤呈绒毛状,地方性血尿膀胱上的肿瘤呈乳头状或菜花状。恶性肿瘤表面常有出血和坏死,如羊耳皮肤鳞癌标本。深层组织的肿瘤常呈结节状、分枝状或囊状,如脂肪瘤、纤维瘤、平滑肌瘤、恶性黑色素瘤等呈结节状。若肿瘤细胞在器官组织内呈浸润性生长,则不形成明显的肿块,但使该组织器官弥漫性肿大,如鸡淋巴白血病的“大肝病”,神经纤维瘤形成的粗大条索状。有的肿瘤呈囊状,如鸭卵巢囊腺瘤。2.硬度:肿瘤的硬度与肿瘤组织的种类及实质和间质的比例有关。如粘液瘤、脂肪瘤柔软;纤维瘤、软骨瘤则较硬。
3.色泽:肿瘤的色泽与肿瘤的组织种类、色素、有无出血有关。如黑色素瘤呈深黑色,脂肪瘤呈黄色,纤维瘤呈灰白色,淋巴瘤呈淡红色。4.大小:肿瘤的大小不一致。小的在显微镜下才能看到,大的可长到很大,如标本子宫平滑肌瘤有数公斤。二.肿瘤的生长方式 1.膨胀性生长:是多数良性肿瘤的生长方式。如标本脂肪瘤呈结节状,周围有完整包膜,与邻近组织的界线清楚。
2.浸润性生长:是大多数恶性肿瘤的生长方式。如马皮下纤维肉瘤,肿瘤组织向皮下附近组织浸润生长,因而此肿瘤无包膜,与邻近组织无明显界线。
3.外生性生长:是体表、体腔表面或自然管道表面肿瘤的生长方式。如食道乳头瘤,肿瘤由食道内向管腔内生长,呈乳头状结构。三.肿瘤的转移(一).淋巴道转移
1.黄牛恶性间皮瘤淋巴结:此淋巴结为肺门淋巴结,恶性间皮瘤细胞经淋巴液进入肺门淋巴结,引起该淋巴结形成续发性间皮瘤,外观体积肿大,切面呈灰白色。
2.乳腺癌淋巴转移组织切片:可见淋马结的被膜淋巴管扩张,内有肿瘤细胞栓子。(二).血源性转移
马恶性黑色素瘤全身血液性转移:原发瘤常位于尾根部皮下,晚期经血源向远处器官转移,可见肝、心、肺、网膜、淋巴结、肌肉等器官形成转移瘤。
(三).种植性转移
黄牛恶性间质瘤:因种植性转移,在肉膜上可见无数的肿瘤结节。四.肿瘤的组织结构
主要观察肿瘤组织结构的异型性、肿瘤细胞的异型性,良性肿瘤分化程度高,异型性小,恶性肿瘤则相反。1.皮肤乳头瘤 皮肤乳头瘤是来源于鳞状上皮,向皮肤表面呈树枝状生长的良性肿瘤。镜下见纵切为手指样突起,横切则呈圆形。低倍镜下,每一个乳头的表面,覆盖鳞状上皮细胞即肿瘤的实质,其细胞增生旺盛,层次明显增多,角化层也显著增厚及不全角化。指状突起的中心为血管及结缔组织构成,此即肿瘤间质。高倍镜下见肿瘤细胞体积较大,为多边形,核浆比例正常,不见核分裂,有正常鳞状上皮的层次(角化层、颗粒层、棘层和基底层),肿瘤间质中见有少数淋巴细胞浸润,其间缺乏毛发和遥体。因细胞形态和组织结构与正常的皮肤上皮异型性很小,故为良性肿瘤。2.膀胱鳞癌
镜下见膀胱粘膜由移行上皮化生为鳞状上皮并发生癌变。镜下见癌变的鳞状上皮向深层组织浸润生长,被结缔组织间质分割成不规则的巢状或条索状细胞团块,此即为癌巢。癌巢内细胞多面形,相互嵌合,有的癌巢中心可见细胞角化(癌珠),根据以上特点,肿瘤来自鳞状上皮组织。癌巢内细胞形态差异较大,体积大小不等,甚至出现瘤巨细胞,核浆比例上升,核大小、形态不一致,可见大核、双核甚至多核,核深染,染色质呈粗颗粒状,核仁肥大。病理性核分裂相多见,可见不对称双极核分裂、三极核分裂、星形或环形核分裂。肿瘤组织内明显坏死及出血。此肿瘤没有正常复层鳞状上皮的层次结构,细胞异型性大,核分裂相多见,组织内出血坏死,均为恶性肿瘤的特征。3.纤维肉瘤
纤维肉瘤是恶性间叶性肿瘤中最常见的一种。镜下见瘤组织内细胞多,纤维成分少。瘤细胞大小不等,呈椭圆形或胖梭形,核肥大深染,核分裂像多,并见有多核巨细胞。肿瘤间质较少,与实质无明显分界,间质内毛细血管较丰富。通过此切片进一步体会恶性肿瘤细胞形态和结构的异型性。五.常见肿瘤 1.猪淋巴结黑色素肉瘤
此为恶性黑色素瘤转移到淋巴结的转移瘤。镜下见淋巴绝大部分正常组织消失,由肿瘤细胞所取代。瘤细胞松散,呈不规则的片块或条索状,间质疏松。瘤细胞大小不等,形态多样,呈短梭形、多角形、椭圆形或不规则形。核大,圆形,椭圆形或不规则形,深染,易见核分裂,胞浆内有数量不等的棕黑色的黑色素颗粒,密集时把核遮盖。2.淋巴细胞肉瘤
牛肩前淋巴结切片。在低倍镜下见淋巴细胞结构完全消失,为排列松散、形态异常的淋巴瘤细胞代替,被膜上亦有肿瘤细胞浸润。在高倍镜下见细胞呈圆形,胞浆少,核大圆形,染色较深;细胞大小不一,胞浆染色深浅不一致,病理性核分裂像多见。3.鸡卵巢腺癌
镜下见癌细胞排列成大小不等的巢状,癌细胞成立方、柱状或多边形,核深染,胞浆空泡状,癌巢中心常见充有蛋白液的腔隙,周围细胞多层不规则排列,少数呈单层腺管结构。癌巢间有不均匀分布的结缔组织及丰富的平滑肌纤维。癌实质明显侵犯浆膜。4.牛肺癌
先用低倍镜找到病变处,其特点是很多细胞聚集成团,外有多少不等的结缔组织包绕,形成大小不等的巢状结构,癌巢细胞排列成实心团块,或有裂隙,中心常有坏死。高倍镜下,癌细胞形态大小不一致,胞核大而深染,可见核分裂像;胞浆少而淡染。癌组织邻近的肺组织,肺泡腔受压缩小,肺泡壁充血。5.平滑肌肉瘤 镜下见癌细胞丰富呈梭形,纵横交错呈纺织状或漩涡状,核大而深染,椭圆形,两端钝圆,核分裂像多见,胞浆红染。在癌细胞之间有多少不等的纤维组织。
实验十一
心脏病理
一、实验目的
通过实训掌握和识别心包炎、心肌炎和心内膜炎眼观和镜检的病理变化特征.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 一.大体标本
1.猪丹毒溃疡性心内膜炎:猪心脏二尖瓣瓣膜溃烂缺损,其向血液面形成大量灰白色的血栓物质,其炎症实质为固膜性炎。瓣膜附近的心内膜上,见有小的黄色坏死斑。
2.牛创伤性心包炎:心脏因机能加强而显著肥大,心外膜增厚,表面附着多少不等的纤维素,呈“绒毛心”外观。当纤维素被机化后,常引起心包膜和心外膜之间粘连。
3.寄生虫性动脉瘤:马的普通戴氏线虫幼虫常寄生于前肠系膜动脉部的血管内膜下,便该处动脉扩张,胡桃大,切开时见管壁增厚,管腔扩张,内膜粗糙不平,附着红色或灰白色血栓物质及虫体。
4.牛寄生虫性主动脉硬化:牛圆形盘尾丝虫侵犯主动脉,致管壁坏死、钙化,血管壁增厚,变硬,切割有石感。血管内膜粗糙,凹凸不平。5.羔羊白肌病的心肌变性、坏死及钙化:心外膜下心肌变淡,浑浊淡黄色或灰黄色,质地脆弱,以心内膜下特别是右心内膜下、乳头肌及瓣膜附近的心肌最为显著,在心内膜下尚可见乳白色钙化斑点。二.切片标本 1.溃疡性心内膜炎 心瓣膜增厚,瓣膜一侧表面覆盖多量红染物质,其中见有蓝染的细菌丛,这是瓣膜上附着的血栓,血栓下心内膜细胞消失,肉芽组织增生,其中有巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞浸润。2.羔羊白肌病心肌坏死及钙化
镜下见邻近心内膜一侧的心肌纤维凝固性坏死灶,坏死灶及周围间质深积深蓝染的钙盐。坏死灶内多量成纤维细胞增生,并见有单核细胞浸润。3.急性心肌炎
标本为羊链球菌病。心肌间质水肿、增宽,有弥漫性中性粒细胞浸润。受累心肌发生颗粒变性、水泡变性,并见有灶性坏死。4.牛链球菌心内膜炎
牛右心三尖瓣上有血栓团块,其中混有多数蓝色细菌团块及白细胞核碎屑。
实验十二
淋巴结和脾脏病理
一、实验目的
通过实训掌握和识别淋巴结炎和脾炎的眼观和镜检的病理变化特征.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 一.大体标本
1.淋巴结炎是一种极为常见的病理变化,见于局部感染及全身败血症时,根据炎症性质不同,分为几种:
2.单纯性淋巴结炎:多见于某些急性传染病的初期及局部组织器官的急性炎症。淋巴结体积增大,质地柔软,切面湿润多汁,微突起,色潮红,有时有不显著的小点出血,淋巴滤泡明显,呈颗粒状突起。
3.出血性淋巴结炎:见于某些急性传染病,如猪瘟、炭疽等。肉眼见淋巴结轻度肿大,弥漫性暗红或黑红色。切面湿润,暗红色与灰白色相间,呈大理石样外观。
4.化脓性淋巴结炎:见于局部化脓菌感染或全身脓毒败血症时,肉眼见淋巴结肿大,有黄色化脓灶,切面可见脓汁流出。
5.增生性淋巴结炎:常见于结核、副结核、鼻疽、布氏杆菌症等慢性传染病。猪支原体肺炎的肺门淋巴结最为典型,肉眼见肺门淋巴结高度肿大,灰白色,切面灰白色、湿润。
6.急性脾肿大:脾脏显著肿大,暗红或紫红,边缘钝圆,质地柔软,切面突出,结构模糊,红白髓界线不清,脾髓易被刀背刮落。二.切片标本 1.急性淋巴结炎 镜下见淋巴结被膜及实质的小血管和毛细血管明显充血、出血,淋巴窦扩张,充有浆液及大量的中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞,并见有少量红细胞。淋巴细胞增生不明显。2.慢性增生性淋巴结炎
低倍镜下见淋巴组织大量弥漫增生,皮质区扩大,淋巴小结反应中心明显,皮质窦狭窄,髓索增粗,髓质窦中有多量细胞。血管充血不明显。高倍镜下见皮髓质中大量淋巴细胞增生,髓索中有多量浆细胞,淋巴窦内充满单核细胞和淋巴细胞。3.急性脾炎
镜下见脾小体显著减少,残存的脾小体与红髓界限不清。红髓充血,其中有大量含铁血黄素沉着,脾窦、脾索界限不清,小梁平滑肌稀疏、变性。红髓和白髓中均有大量巨噬细胞、中性粒细胞浸润,并可见少数出血性坏死灶。4.慢性脾炎
镜下见脾脏的正常组织结构消失,成纤维细胞和平滑肌细胞大量增生,在增生组织间浸润有嗜酸性粒细胞及淋巴细胞。
实验十三 呼吸器官病理
一、实验目的
通过实训掌握和识别常见肺炎、肺气肿和肺萎陷的病理形态特征.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 一.大体标本
1.纤维素性肺炎:标本为传染性胸膜性肺炎的红色及灰色肝变期。肉眼见肺体积增大,硬度增加,色暗红,切面较干燥,呈颗粒状;切块在水中下沉。肺小叶间质增宽,灰白色,其中可见扩张淋巴管的断面,肺膜显著增厚,灰白色,表面粗糙,有附着的纤维素。
2.支气管肺炎:亦称小叶性肺炎,由多种致病微生物引起。初期常表现为小叶性,以后可发展成大叶性。按其炎症性质可表现为浆液性炎、卡他性炎、化脓性炎及坏疽性炎。
3.浆液性炎症:病变部体积增大,灰红色,质坚实,切面平整,有大量微浑浊带泡沫的浆液性液体流出,切块在水中半沉浮。支气管粘膜红肿,有多量粘液,间质增宽,水肿。
4.卡他性炎症:病变部体积增大,灰红色或灰白色,质度坚实,易碎。切面平整湿润,流出多量灰白色浑浊液体,切块在水中下沉,支气管粘膜红肿,有多量灰白浑浊粘性液体。间质增宽,灰白,多汁。
5.化脓性炎症:且表面、切面见有黄色斑点,加压时可排出粘稠脓液,有时形成大小不等脓肿,并有灰白色脓膜形成,脓液排出后形成空泡。6.坏疽性炎症:肺组织发生坏死和腐败分解,病灶污秽,黄褐或灰红色,外观如粥状。当病灶与支气管相通,腐败分解物排出后,可形成空洞,穿通肺膜时,可造成气胸及脓胸。
7.间质性肺炎:病变部呈黄白色,质地稍变实,表现为结节性、小叶性或大叶性。
牛慢性肺泡气肿:肺体积显著增大,颜色苍白,实质内可见针头至豌豆大小的空泡,切割时发出特殊的爆裂间。切面平滑、干燥、呈海绵状或蜂窝状,切块在水中上浮三分之二以上。
8.牛肺间质气肿:标本为甘薯黑斑病中毒肺,肺体积增大,间质扩张,其中见串珠状排列的小气泡,气泡黄豆至核桃或鸡蛋大,有时可达拳头至小儿头大,肺膜光滑透明,易破裂。二.切片标本
1.纤维素性肺炎红色肝变期
镜下见肺泡壁明显增厚,毛细血管扩张充血,并有一定数量的中性白细胞和少量巨噬细胞浸润。肺泡腔内充满粉红染丝网状的纤维素,并可见纤维素穿过肺泡孔与相邻肺泡内的纤维素网连接,肺泡腔内含有大量脱落的肺泡上皮细胞;细支气管腔内也含有大量纤维素和脱落的支气管上皮细胞。小叶间质增宽,有大量纤维素渗出,胶原纤维肿胀、溶解,间质内浸泣有大量崩解的中性粒细胞,淋巴管扩张充满炎性渗出物。2.化脓性支气管肺炎
镜下见部分肺泡腔内充满红色渗出液,其中有漏出的红细胞、脱落的肺泡上皮细胞和中性粒细胞;肺泡壁毛细血管充血或受压贫血。支气管腔内有粉红色浆液、脱落的支气管上皮细胞和大量的中性粒细胞,支气管壁水肿增宽,支气管周围血管充血。病灶周围肺组织充血。3.间质性肺炎(绵羊梅迪病)
小支气管、细支气管粘膜下层中有大量单核细胞、淋巴细胞灶状聚集,肺泡壁上有大量单核细胞、淋巴细胞浸润使肺泡壁增厚,甚至形成结节状。病灶内大部分肺泡内含有粉红色浆液、中性粒细胞、单核细胞和淋巴细胞,部分肺泡扩张,甚至破裂。
实验十四 消化器官病理
一、实验目的
通过实训掌握和识别胃肠炎炎和肝脏的常见病理变化特征.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 一.大体标本
1.鸡球虫病出血性肠炎:肠壁增厚,质地较硬,粘膜肿胀,广泛出血量暗黑色。
2.纤维素性出血性肠炎:甩壁充血、水肿,出血明显,有大量纤维素附着在粘膜面形成污绿色假膜。
3.副结核慢性增生性肠炎:肠壁增厚,粘膜肥厚折叠成脑回样,不易展平。4.肠穿孔:由直肠检查时引起马直肠破裂,裂口哆开,边缘不整齐。5.胃溃疡:可由微生物、寄生虫或营养因素引起。此标本为猪胃底部溃疡,溃疡大小和形状不一致,表面覆盖污灰色坏死物质,溃疡灶边缘肿胀肥厚。6.肝硬变:主要特征为肝小叶间结缔组织增生呈灰白色网格,小叶轮廓明显。肝脏质地变硬,切开时有抵抗感,体积缩小变形,表面呈颗粒状或结节状。肝常染胆色素,色彩斑驳。有的硬变肝脏体积增大,表面平滑,结缔组织弥漫增生,小叶结节不明显。肝片吸虫引起的肝硬变可见胆道增粗。二.切片标本 1.肝硬化
镜下见纤维结缔组织大量增生,分割肝小叶,使肝小叶成大小不等的圆形小岛,称假肝小叶。假肝小叶无中央静脉、中央静脉偏于一侧或有两个中央静脉。假小叶内肝索排列紊乱,肝细胞肿胀、脂变甚至坏死。假小叶周围增生的结缔组织中有淋巴细胞和单核细胞,可见新生的小胆管,其上皮细胞核染色稍深,还可见肝细胞团块或残存肝细胞再生形成的结节,即假胆管。2.肝坏死
镜下见肝小叶中凝固性坏死灶,其中充满大量红细胞、少量中性粒细胞和单核细胞,坏死灶周边残留的肝细胞肿胀和脂变。3.胃溃疡
镜下见溃疡灶表面由少数炎性渗出物,其下为坏死的胃腺上皮组织,固有膜充血、出血,有中性粒细胞和巨噬细胞浸润。4.急性出血性坏死性肠炎
肠粘膜表面深浅不一的坏死,甚至深达整个粘膜层。坏死灶表面有大量红细胞和纤维素渗出,坏死灶内有大量中性粒细胞和单核细胞浸润,坏死灶内血管轮廓尚存,其内有纤维素性血栓。粘膜下层和肌层水肿,炎性细胞浸润。
5.急性卡他性胃炎
胃粘膜表面覆有粘液,粘膜上皮变性、脱落,粘膜层血管充血,淋巴细胞、巨噬细胞及中性粒细胞浸润。
实验十五 泌尿生殖器官病理
一、实验目的
通过实训掌握和识别各型肾炎、卵巢囊肿、子宫内膜炎、乳腺炎病理变化特征.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 一.大体标本
1.急性渗出性肾小球性肾炎:肾脏体积肿大,黄褐色,质地脆弱。被膜容易剥离,切面皮质增厚,在红褐色背景上有无数呈放射状的灰黄色条纹。2.急性肾小球肾炎:猪肾体积肿大,颜色苍白,切面湿润,皮质增宽,皮髓质分界明显。
3.牛间质性肾炎:肾体积肿大、柔软,颜色苍白,被膜容易剥离。切面苍白湿润,皮髓界限模糊,肾实质较坚实。此为间质性肾炎的亚急性阶段。4.皱缩肾(慢性肾小球性肾炎):是急性肾为的转归。眼观肾体积缩小,颜色苍白,质地坚实,表面不平呈颗粒状,被膜难以剥离。切面苍白,皮质变窄,皮髓界限不清,有时可见灰白色条索贯穿皮质与髓质。5.乳牛肾盂肾炎:是一种化脓性肾炎,常由尿路感染引起。眼观肾体积显著肿大,皮质柔软,表面见淡黄色化脓灶。切面肾盂扩张,各有污浊脓液,部分乳头化脓坏死,髓质部尚可见,皮质中亦可见到黄色脓肿灶,周围有红色炎性反应带。
另一标本,肾高度肿大,被膜难剥离,表面有隆起的黄色化脓灶,切面皮质及髓质内有多个黄色化脓灶,由于结缔组织增生显著,肾苍白,质坚实,肾盂及输尿管扩张积液。6.肾盂积水:肾盂和肾盏扩张,同时肾实质萎缩,肾锥体的尖端变宽,形成囊状扩张,常见于泌尿道阻塞。
7.肾囊肿:多见于猪,亦可见于牛和兔,分先天性及后天性囊肿,一般属前者。眼观肾皮质部有单发或多发性囊肿,小的黄豆大或豌豆大,大的的核桃甚至鸡蛋大。囊壁薄而透明,内壁光滑,内含透明淡黄或略淡红色的清亮液体。
8.出血性子宫内膜炎:浆膜无明显变化,切开子宫,见子宫内膜弥漫性出血,呈紫红色,粘膜变性、坏死,上皮脱落。
9.慢性化脓性子宫内膜炎(子宫积脓):子宫腔内蓄积大量脓液,子宫腔扩张,子宫体增大。切开子宫后,见脓液呈黄白干酪样,子宫粘膜面粗糙,污秽无光,子宫壁增厚或变薄。
10.卵巢囊肿:此标本为卵泡性囊肿,卵巢内有多个大小不等的囊肿,内含清亮液体,囊壁较厚。二.切片标本
1.急性渗出性肾小球肾炎
镜下见肾小囊扩张,充满淡红色的浆液和丝网状纤维素,其中混有中性粒细胞和脱落的壁细胞,一些肾小囊中有漏出的红细胞和渗出的单核细胞。肾小球细胞成分增多,毛细胞血管闭锁贫血。肾小管上皮细胞颗粒变性,管腔内充满蛋白液。肾小管间毛细血管充血或出血。
2.急性增生性肾小球肾炎镜下见肾小于体积增大,充满肾囊腔,肾小球血管丛内细胞增多,呈富核现象,动脉毛细血管受压贫血。增多的细胞主要是血管内皮细胞和间质细胞,及浸润的少量中性粒细胞和淋巴细胞。3.慢性肾小球肾炎镜下见肾小球毛细血管增厚明显,管腔逐渐狭小,最后完全闭塞,肾小球逐渐被结缔组织取代,发生玻璃样变,最后整个肾小球呈粉红染无结构团块,从而使出球小动脉供血的肾小管萎缩、消失。间质纤维组织增生,并有多量淋巴细胞浸润,增生的纤维组织收缩使病变的肾小球互相靠拢,残存的肾单位代偿性肥大。肾小管扩张,上皮细胞由立方形变为扁平。中小动脉壁增厚,要发生玻璃样变,管腔狭窄。4.慢性肾盂肾炎
镜下见肾髓质部有数个脓肿灶,周围有结缔组织增生形成包裹,其中浸润有大量淋巴细胞、浆细胞及单核细胞。有一些集合管和肾小管内均见脓细胞团块。5.间质性肾炎
镜下见肾小球周围及肾小管间结缔组织内有大量成纤维细胞增生,其间有大量淋巴细胞、单核细胞和少量单核细胞、浆细胞浸润。6.中毒性肾病
镜下见近曲小管广泛凝固性坏死。坏死灶周围肾小管管腔内有蛋白液和细胞管型。
实验十六
神经器官病理
一、实验目的
通过实训掌握和识别非化脓性脑炎的病理组织学特征和雏鸡脑软化的特点.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容: 一.大体标本
对各型脑炎一般肉眼难以判别,在重症时可见蛛网膜及软膜水肿增厚,微浑浊,其血管因充血而显露,有时可见暗红色出血点,脑回增厚,略扁平,脑沟狭窄。脑实质松软,切面潮红湿润,并有血液从血管端流出。在剥开颅腔及切开实质时,可见蛛网膜下腔及脑室内有多量浑浊液体。二.切片标本
1.急性非化脓性淋巴细胞性脑炎
血管管套:脑内血管明显扩张充血,血管周围间隙增宽,水肿。在小血管周围有大量淋巴细胞和单核细胞浸润形成管套。血管内皮细胞有肿胀、脱落现象。
神经细胞变性坏死:神经元细胞肿胀、苍白,细胞核偏位,尼氏体溶解。一些神经元表现为嗜伊红深染,核固缩或消失。
神经胶质细胞增生:在变性、坏死的神经细胞周围常有少突胶质细胞增生围绕呈卫星现象,小胶质细胞进入坏死的神经细胞内呈嗜神经元现象。在脑实质的其他部位,可见小胶质细胞结节性或弥散性增生。
脑膜增厚水肿、血管扩张充血出血,部分血管内有血栓形成,脑膜上浸润有大量单核细胞和淋巴细胞,变化以脑沟处最明显。2.急性非化脓性嗜酸性粒细胞性脑炎
脑膜增厚,血管充血,血管壁及周围有许多幼稚性嗜酸性粒细胞和少量淋巴细胞浸润。脑实质血管数量增多,内皮肿胀变圆或脱落。血管扩张充血,周间隙增宽,浸润多量嗜酸粒细胞,围绕血管形成管套。灰质内见有散在的微小海绵状空腔化区。神经细胞变性,小胶质细胞呈弥漫或结节状增生。3.化脓性脑膜脑炎
脑膜特别是脑沟处脑膜增厚,内有大量中性粒细胞及少量单核细胞、淋巴细胞浸润,纤维素渗出,血管扩张充血;可见血管壁纤维素样坏死及管内血栓形成。在脑膜上与脑室附近的脑组织内小血管周围有少量中性粒细胞浸润,血管周间隙水肿增宽。4.化脓性脑炎
镜下见脑灰质内形成化脓灶。
实验十七 营养代谢病病理
一、实验目的
通过实训掌握和识别常见营养代谢病病理特征.二、实验材料
大体标本、切片标本、光学显微镜、香柏油、二甲苯、镜头纸、图画本等
三、实验内容:
一、大体标本
1.横纹肌变性坏死及结缔组织增生(白肌病)
病变多发生于臂、肩胛、胸、背部肌肉及膈肌与腰肌,肉眼见病变肌肉颜色苍白变淡,结构模糊,浑浊蜡样,质度脆弱,有些地方因肌肉结缔组织增生,而出现纵行灰白色条纹。除变性,坏死外,有时可见肌肉出血,在病变都出现暗红色斑块,背腰肌肉最显。2.骨软化与佝偻病
(1).马软骨症头骨:马骨软症时,头骨变化特别明显,由于骨质被破坏,骨样组织增生,因而骨肿胀松软。外观见面骨肿大,下颌骨质增厚,臼齿深埋,骨质易于折断或刺破.干制标本由于结缔纺织已被除去,因而呈现多孔疏松结构。
(2).猪骨软症头骨:头骨扁平,骨肿大,增厚,质度软弱,淡红色;骨质易被刀针等锐器切割或穿透,由于骨质肿大,柔软,尚可见头部肿大,鼻道狭窄及臼齿深埋现象。
(3).仔猪佝偻症:可见长骨短而粗,蘑菇样,骨板增宽不规则,并见出血,骨弯曲易切割,肋骨与肋软骨交界处肿大成肋骨串珠。3.仔猪缺锌病
病变主要见于前后肢、头部、耳和尾部皮肤,病变皮肤因角化不全,显著增厚,起皱、粗糙、呈现裂缝与凹凸不平的褐色厚痂。
二、切片标本 1.骨软症(头骨)
骨组织大部分被破坏、吸收或消失。残留骨质钙盐减少,呈兰色条索或块状,其余大片淡红区域为增生的骨样组织。在淡兰色的骨质残片中可见骨细胞萎缩、消失,仅留下空囊。而染成兰色的钙盐仅在于骨残片的中央,其边缘钙盐已完全消失而成类骨组织,残留骨质的边缘,可见两种细胞:胞浆紫红、核集中一侧或中央。形态不规则的多核破骨细胞和较大而多角形的成骨细跑。表明骨的破坏与再生相互交错进行。残留骨质以外的地方为堆积的骨样组织,、其中有大量的成骨细胞。2.佝偻病(长骨)
软骨细胞肥大区没有钙盐沉着,也没有血管从干骺端侵入此区,缺少这两个条件时,软骨细胞吸收延迟而大量堆积,正常的柱状排列消失,新形成的骨样组织不能钙化而堆积起来,骺板软骨明显增厚。3.化脓性肌炎
肌层有弥散性中性白细胞浸润和多发性小脓肿形成,肌纤维变性、肿胀,局灶性坏死和溶解。中性粒细胞弥散性浸润于坏死灶和脓肿处有大量淡红色的蛋白网丝形成,血管壁纤维素样坏死。4.白肌病(雏鸡)
肌纤维肿胀,横纹与纵纹消失,肌纤维内出现透明变性或空泡变性;严重时见一些肌纤维呈红染均质状,或肌浆破裂,浓缩成团块状的凝固性坏死,胞核固缩、破碎或消失.另一些肌段,肌纤维可呈坏死溶解为空泡网架,在坏死肌段内可见巨噬细胞、假嗜伊红白细胞浸润和成肌细胞、成纤维细胞出现。肌纤维间血管充血、水肿。
第五篇:实验动物总结
非多选:
实验动物:指经人工饲养、繁育,对其携带的微生物及寄生虫实行控制、遗传背景明确或来源清楚,应用于科
学研究、教学、生产和鉴定以及其它科学实验的动物。亦称狭义的实验动物
实验用动物:泛指所有应用于科学实验的动物,包括实验动物、野生动物、经济动物和观赏动物。也称广义的实验动物.实验动物科学诞生于20世纪50年代。国际实验动物科学协会的简称为ICLAS,其网址为 中国实验动物信息网:
我国《实验动物质量管理法》颁布于1997年,由科技部联合技术监督局等单位共同颁布。《实验动物管理条例》
是1988年经国务院批准颁布的。世界最大的实验大、小鼠商品化生产、销售公司:美国查士利华实验室 1961年,ICLA与WHO合作,于1979年改名为ICLAS
20世纪40年代,美、日、法等过相继成立了实验动物学会或类似组织
我国已建立啮齿类动物的种子中心(上海和北京)。国家实验动物质量检测中心挂靠在中国医科院实验动物所 GLP(良好实验室操作规范)是用于新药临床前安全性评价的法规
《实验动物管理条例》规定,实验动物繁育和动物实验不能在同一区域。
实验动物许可证的有效期为5年,生产许可证的申请必须种子来源可靠,有健全的质量管理制度,环境符合国
家标准。许可证的发放向科技部门申请,由科技部门组织专家评审,合格后发放许可证。包括生产和使用许可证两种。国家种子中心、实验动物质量检测机构的主要任务(p82)
近交系:连续20代或20代以上近亲交配所培育而成的品系。如BALB/C,C57BL/6J,DBA,C3H,A/He等(常以F
加数字表示近交代数)。
封闭群:以非近亲繁殖方式,不从外部引入新个体的前提下至少连续繁殖4代以上。引种数目不少于25对。
如KM,SD, Wistar等。杂交群:不同品系或种群间杂交产生的后代
近交系小鼠常选用10个染色体上的13个生化位点作为纯度检测的方法,而大鼠一般选用9个位点;皮肤移植
一般用同系异体移植。同源突变系:两近交系除指明位点外其他基因完全相同
重组近交系:两近交系杂交后再连续20代近交而成(以Χ表示)
同源导入近交系:通过杂交-互交或回交等方式将一基因导入到近交系中
遗传污染:管理疏忽,本品系与其他品系动物交配
遗传漂变:饲养过程中可能发生的随机改变,多由于残留杂合基因的分离
突变:基因组中某个核苷酸碱基的置换、缺失或插入引起等位基因的改变。近交系数:表示近交程度 普通动物:不携带规定的人畜共患病原和烈性传染病病原
清洁动物:除普通动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科研干扰大的病原
无特定病原体动物:除清洁动物应排除的病原外,不携带潜在感染和条件致病、对科学实验干扰大的病原 无菌动物:不可检出一切生命体
普通级兔应排除兔出血症病毒、普通豚鼠应排除淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒、普通猴应排除猴B病毒 实验动物按遗传控制可分为:近交系、封闭群、杂交群和突变系
实验动物按微生物控制可分为:普通动物、清洁动物、无特定病原体(SPF)和无菌动物
3R指的是:减少(Reduction)、替代(Replacement)、优化(Refinement). 动物福利除了生理福利外,还包括心理福利、卫生福利、行为福利、环境福利
普通级、清洁级和SPF级动物微生物和寄生虫的检测频率均为每三个月检测一次。无菌动物为每年至少检测一
次.取样数量:群体〈100,取样〉5只;群体大小为100-500,取样〉10;群体〉500,取样〉20只;无菌动物每个隔离器取样2只
2000年6月,人类基因组计划完成。小鼠是继人之后第二个完成基因测序的哺乳动物。小鼠与人类功能基因的同源性高达90%以上,是最为理想的模式动物,并作为基因改造的材料
动物实验可用R=(A+B+C)×D+E公式表示,其中R表示动物实验中实验动物的总反应; A表示动物种间的共同
反应; B表示动物的品种品系特有反应; C表示动物的个体反应; D表示环境因素; E表示实验误差。(1959年由Russell和Bruch提出动物的表现型受周围环境的影响而出现不同的演出型)
光照对动物的是个强烈的刺激因素,起定时器的作用
屏障设施内,粗效空气过滤器设置在取风口;中效过滤器设置在正压处;高效过滤器设置在系统末端
生物安全柜为活病原微生物的动物实验设施;动植物确实存在或潜在危害的,该实验需在感染性动物实验设施
内进行
普通环境饲养普通级动物;屏障环境饲养清洁级或SPF级动物;隔离环境饲养无菌动物
实验动物环境指标中,只有氨气浓度是动态检测指标;屏障环境的空气洁净度指标为10000级
国标中,生产型和使用型屏障系统大小鼠温度为20-26℃;相对湿度为40%-70%;换气次数为10-20次/h;气流速
度为0.1-0.2m/s;压强梯度为20-50Pa
国标中,使用型屏障系统工作照度为150-300lx;动物照度为15-20lx
实验动物环境检测标准规定,普通犬兔繁育生产设施内(生产型)温度为16-28℃;湿度为40-70%;换气次数为
8-10次/h;气流速度0.1-0.2m/s;工作照度为150-300lx;动物照度100-200lx;(使用型)温度为16-26℃;湿度为40-70%;换气次数为8-10次/h;气流速度0.1-0.2m/s;工作照度为150-300lx;动物照度100-200lx
笼器具产品抽检数量,笼箱及引水瓶为10-15只/次/批;网盖和笼架为3-5只/次/批
动物适宜的温度为21-27 ℃,(相对)湿度为40-70%
国标中规定,实验动物室氨浓度应小于14mg/m3;噪音低于60db;
实验动物设施的空调系统按空气处理设备的设置不同一般分为集中式、局部式和半集中式。集中式即集中冷源,并将全部空气处理设备集中在同一机房内,处理过空气经风道、风口送至屏障设施内。
空气乱流利用稀释作用是室内产生的灰尘均匀扩散而被“冲淡”,一般采用上送下回的形式,使气流自上而下
与尘埃重力沉降方向一致。空气乱流是流向单一,并具有一定的、均匀的断面速度的气流组织形式。
豚鼠和猕猴体内不能合成维生素C,须从饲料中获得
大小鼠、兔目前常用的是颗粒饲料;贮存的颗粒饲料的含水率应低于11%。饲料灭菌的最佳方式是辐照 必须氨基酸只能从饲料中提供,而非必须氨基酸体内能合成,无须从饲料中供给。
碳水化合物是体内能量的主要来源,其中粗纤维可促进胃肠蠕动;无氮浸出物可提供热能并可转化成脂肪 饲料中脂肪有真脂肪(由脂肪酸和甘油组成)和类脂肪(由脂肪酸和甘油及其他含氮物质组成)
饲料抽样数量为0.5Kg/次/批
维生素A维持上皮的形态与功能;维生素D参与钙磷调节;维生素E与生殖泌乳有关
大小鼠饲料水分≤10%;豚鼠维持料蛋白≥17%,繁殖料蛋白≥20%;兔维持饲料粗蛋白≥ 14%,繁殖料粗蛋白
≥ 17%;犬维持饲料粗蛋白 ≥ 20%,繁殖料粗蛋白≥ 24%
一.小鼠:属于啮齿目,初生为红色,12-13天睁眼,妊娠期19-21天,哺乳期为20-22天,雌性有5对乳头,成年体重为18-40克,一般生育期为1年,寿命为1-2年.体温为36.5 ℃,KM鼠每胎产8-15只,维生素A过量可致繁殖紊乱
二.大鼠:啮齿目,新生为红色,约5-6克;8-10天长牙;14-17天睁眼;妊娠期哺乳期均为21天;为常年多发情动物;成年体重为250-450克;寿命为2-3年;封闭群平均产仔数为8只;尾是散热器官;无胆囊;体温37.5℃。近交系大鼠:ACI,F344,SHR,BN,AGUS;封闭群:Long-Evans, Brown-Norway(饲养类),SD, Wistar
三.豚鼠:啮齿目,草食动物,妊娠期为68天,哺乳期21天,刚出生就有视力,初生体重75-100克,有1对乳头,每胎产3-4只,一般寿命为6年;体内缺少合成维生素C的酶(猴),免疫学研究首选动物,是最早获得无菌动物的实验动物。无尾巴
四.地鼠:啮齿目, 有冬眠和假妊娠现象,妊娠期16天,是哺乳动物中妊娠期最短的动物;哺乳期21天;有颊囊,可贮存食物;为全年多发情动物;寿命2-2.5年。中国地鼠无胆囊, 有5对乳腺;金黄地鼠有乳腺6-7对。
五.兔:兔形目;有圆小囊;是眼科研究首选动物;妊娠期32天,哺乳期42天;为刺激性排卵动物(猫);有季节性换毛现象;有乳腺4对;其胸腔构造与其他动物不同;有食粪癖;也有假妊娠现象;对缺钙耐受力强;寿命8年左右;体温为39.2℃
六.犬:食肉目,红绿色盲,几乎没汗腺,春秋季单发情动物,妊娠期60天,哺乳期60天,性周期180天,对脂肪耐受强.对呕吐敏感,成年正常体温是38℃,易建立条件反射
七.猫:除夏季外均可发情,属季节性多发情动物;善攀登和跳跃;妊娠期63天,哺乳期60天;有4对乳头;可根据光线的强弱灵敏的调节瞳孔;喜孤独自由的生活;饲料中重点补充维生素.八.猴:有颊囊;有月经周期,与人的生殖生理非常接近;妊娠期165天左右,哺乳期6个月以上;对呕吐反应灵敏;主要组织相容性抗原(RhLA)与人的HLA相似;能用手操纵工具;是脊髓灰质炎疫苗研究鉴定的动物
九.小型猪:偶蹄目;常年多发情;妊娠期114,哺乳期1个月;是皮肤烧伤实验研究的首选动物;平均体温为38℃
十.沙鼠: 啮齿目,大小介于大、小鼠之间,成年重78克;常年多发情;性成熟10-12月;平均寿命2-4年;有自发性癫痫病;可建立脑缺血模型;应激时肾上腺释放糖皮质激素和黄体酮
十一.其它:牛羊属于偶蹄目,草食性多胃动物。马属于奇蹄目.鼠兔与家兔体形相似,是草食动物;有换毛现象;
动物标记中染色法最简单、适用于小动物短期实验;常用染色液:苦味酸、硝酸银、品红;染色编号方法:先
左后右,先上后下,单一颜色可标记1-10号;烙印常用溶于酒精的黑墨染色;还有耳缘剪孔法
局部麻醉常用浸润麻醉。大小鼠豚鼠肌肉注射部位:大腿外侧面。腹腔注射常选择在腹白线两侧
大小鼠尿液采集适宜用代谢笼,采集未污染尿液则应采用导尿法;大小鼠大量采血常采用股动脉采血
犬、猫的皮下注射一般在大腿外侧,静脉注射不超过10ml
小鼠(20g)一般灌胃不超过0.8ml、腹腔注射不超过1.0ml、静脉注射不超过0.8ml
大鼠一般灌胃不超过5ml、腹腔注射不超过4ml、静脉注射不超过4ml
静脉注射兔:耳缘静脉,最大容量10ml;猴:皮下浅层静脉(小隐、股、头静脉),最大容量20ml;犬最大容
量100ml。肌肉注射最大给药量猴:3ml;犬:4ml。兔少量多次采血一般为耳缘静脉采血
动物实验中,去除被毛的方法有拔毛法、剪毛法、剃毛法和脱毛法;小动物一般采用剪毛法、大动物采用剃毛
法
吸入麻醉常用乙醚、氯仿;腹腔和静脉麻醉一般持续时间长,过程平稳,常用巴比妥类、氯氨酮、水合氯醛、氨基甲酸等;全身麻醉时一般禁食不少于8小时
化学药物致死最好采用CO2、KCl;家兔处死常用空气栓塞法
动物模型按产生原因分为:
自发性模型:应用价值高,与人类相应疾病相似程度高,但来源困难,种类有限
诱发性模型:来源多,条件易控制、但相似程度稍差;诱发性肿瘤模型分为原位和异位诱发
抗疾病模型:特定疾病不在某动物身上发生
生物医学模型:某些动物特殊的生理结构如兔的胸腔结构
按中医分类:阴虚、阳虚、气虚、血虚、肾虚、厥脱症
裸鼠为先天性无胸腺,常用于人体肿瘤移植研究 CBA/CIH为先天性B淋巴细胞功能缺陷。Beige小鼠为先天性NK细胞功能缺陷 SHR为自发性高血压大鼠,适合筛选抗高血压药物 一般幼龄动物对实验因素较为敏感,慢性实验因周期长而通常选用幼龄动物。一般实验都选用成年动物 清洁动物是国内科研标准动物,而SPF动物是国际公认的标准动物 一般来说,淡水中生活的动物尿液是低渗的,海水中生活的动物尿液是等渗的,陆地上生活的动物尿液是高渗的,特别是沙漠中生活的动物,这种倾向性更明显 猪:皮肤结构与人相似、适合做烧伤实验、人烧伤后的敷盖物以及皮肤病的研究;冠状动脉循环与人类似,食用高胆固醇食物易出现动脉粥样硬化典型病灶 猫:刺激性排卵;适合做神经节传导阻滞影响的药物实验及观察药物对循环系统的作用等实验犬 :是红绿色盲,不能以红绿作为条件刺激物来进行条件反射实验;有呕吐反射;长期毒性实验中大动物实验常选;易于调教,短期训练即可较好配合实验,适合慢性实验;适宜实验外科学研究;可用压迫膀胱法集尿 豚鼠:不能合成维生素C;对人型结核杆菌高度易感,是结核病研究首选动物;也是镇咳药筛选试验的首选动物;气管平滑肌对致痉剂和药物最敏感,常作为支气管扩张药物研究选用动物; 家兔:减压神经独立分支,适合观察减压神经对心脏影响试验;适宜做发热和检查致热源研究;刺激性排卵;常用于制备抗血清;家兔的胸腔中央有一层很薄的纵膈膜将胸腔分为左右两部,互不相通,两肺被肋胸膜隔开,心脏又有心包胸膜隔开;也是心血管疾病研究的较好模型;不宜做利尿或抗利尿药物研究;没呕吐反射;食用高胆固醇高脂肪饲料后易形成动脉粥样硬化及高脂血症模型 大鼠:无胆囊,适合做胆管插管收集胆汁,进行消化功能的研究;常选做长期毒性实验 地鼠:中国地鼠易产生真性糖尿病;小鼠:适合于各类唇裂、腭裂研究。青蛙和蟾蜍:反射弧实验 获得遗传工程的基本技术手段:显微注射转基因、基因定位突变技术、基因化学诱变技术。其中显微注射法是将外源目的基因注射到受精卵雄原核内 模式生物:果蝇、线虫、小鼠、斑马鱼、酵母,其中小鼠是研究人类基因功能的理想动物 基因敲除动物中研究最多最深入的是基因敲除小鼠。小鼠是继人之后第二个完成基因组测序的动物 病毒:自然界最小微生物;在PH为7时较稳定;对干燥的抵抗力与病毒的种类及干燥的方法有关;多数能保存于50%的甘油中,确诊病毒可通过检查包涵体等方法来确定。细菌:有球状、杆状和螺旋状;有细胞壁;水是主要成分,固形物主要由C、H、O、N组成,占总重量的75-80%;比重一般大于1;PH值可影响其代谢活动;高温是有效的灭菌方法 实验动物的传染病发展过程分为:潜伏期、前驱期、明显期(发病期)和转归期 传染源、传播途径和易感动物,称为传染锁链。各类动物应分室饲养,以防交叉感染 饲养和兽医人员应每年进行健康检查。实验动物的隔离措施主要用于新引入的动物 隔离是为了控制传染源,隔离场所应离开动物繁殖区。检疫的目的是检查有无潜在性疾病的存在 新引进的动物应有供应商的的实验动物质量合格证书。新引进的灵长类动物要特别防止B型疱疹病毒 新引进的犬必须有犬瘟热、传染性肝炎、犬细小病毒等免疫证明 灭菌方法有热灭菌法、冷灭菌法和Co60辐照灭菌法,消毒不能杀死细菌的芽孢,比灭菌的范围窄 湿热高压灭菌:121℃,15min,干热高压灭菌:160 ℃,45min,预真空高压灭菌: 121℃,3min,低压蒸汽加甲醛灭菌法:70-80℃,2h熏蒸消毒法一般为:15ml/m3福尔马林加7.5克高锰酸钾,熏蒸时室温应保持25 ℃,熏蒸后须静置24-48h,后在通风2-3天。80℃热消毒药水清洗是良好的消毒方法 实验动物饲养或实验室进行喷雾消毒后关闭门窗,保持2-3h;门窗、墙壁等用中性洗涤液洗刷,必要时可用2%的热烧碱水洗涤,在高压水冲洗 鼠痘:又称脱脚病,可经皮肤伤口浸入机体,小鼠感染后肝、脾明显肿大,康复后也会通过粪便长期排毒,从而污染环境能够使病毒广泛传播。淋巴细胞性脉络丛脑膜炎:只有持续感染 的小鼠和急性感染的金黄地鼠才会传播病毒;感染该病毒的小鼠,大脑型最为表现为后肢强直性伸展;小鼠感染并康复后终生含高滴度的病毒,可经唾液、鼻分泌物及尿液向外排毒,同时该小鼠可成为无症状的带毒者,并通过子宫和乳汁传给后代,其后代可成为终生带毒者;人感染主要表现为流感症状和脑膜炎 仙台病毒:动物感染后肺部病变明显,鼠肺呈杨梅色,易与浸润性肺癌相混淆;动物体液免疫和细胞免疫功能普遍下降,妊娠大鼠会出现胚胎死亡;诊断主要通过免疫学方法,可采用过滤帽笼盒及剖宫产方法使动物免受感染 流行性出血热:自然宿主为小型啮齿类动物,污染尘埃飞沫形成气溶胶吸入感染是其最主要传播途径;兔病毒性出血热在自然条件下空气传播是主要传播方式,其主要预防方式为定期注射组织灭活疫苗 肝炎病毒:鼠肝炎多数呈亚临床或隐形感染,可改变各种免疫参数,ELISA及免疫荧光法可作为特异性诊断;症状可见尿色变深等;嗜神经型常引起中枢神经系统坏死;犬病毒性肝炎传染方式很多,但不能通过呼吸道传播 犬瘟热:可通过 消化道、呼吸道传播;主要表现双相热型,即先升高,持续两天后降至正常维持2-3天后再
升高;我国广泛使用的疫苗是鸡胚细胞培养弱毒疫苗
犬细小病毒:表现为急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎,3-4周龄仔犬多呈急性心肌炎症状,病死率高达
80-100%;主要通过直接接触或污染饲料由消化道传播;肠炎型感染后出现腹泻,粪便呈灰黄色液体,最后因心衰和酸中毒而死
狂犬病:流行呈连锁性特征,病犬终因局部或全身麻痹而死;犬一旦发病即扑杀,并对周围环境彻底消毒 B病毒:恒河猴是自然宿主,幼猴感染后可能由于母源抗体免疫而呈现亚临床症状;可引起人致死性脑感染 沙门氏菌:人畜共患病,实验动物中常见感染为鼠伤寒和肠炎沙门氏菌病;患病动物和带菌者是主要传染源 布氏杆菌:可致动物流产。多杀性巴氏杆菌:可使动物发生出血性败血症
支原体:幼龄动物易感,常定居于动物呼吸道和生殖道;环境中氨浓度过高可促进其生长,继而促进肺炎和中
耳炎的发生。志贺氏菌:实验动物中主要危害猕猴,对人可引起细菌性痢疾
真菌生长最适温度为37℃,实验动物皮肤真菌感染的传播方式主要为接触感染,一旦感染后,实验动物须全群
淘汰,环境彻底消毒。寄生虫成虫寄生的宿主为终末宿主。实验动物感染弓形虫后常出现流产或死胎现象 兔球虫病主要以肠道传播,3月龄的家兔最易感,可感染人的球虫叫等孢子球虫
血液寄生虫主要通过节肢动物作为媒介传播。寄生虫感染动物后,常引起血液中嗜酸性粒细胞增多。
多选题
ICLAS的目标、实验动物科学及实验动物医学、比较医学的研究内容、实验用动物范畴、实验动物生产的趋势、功能基因组学的作用、动物福利的内容与要素、从业人员的范畴与要求、比较医学研究目的、种子中心的条件、主要任务、国内实验动物领域的网站、国家实验动物质量控制标准、有关许可证说法不正确的——全选 保种在2000种以上的单位:Jackson实验室、NIH。21世纪动物实验将形成开放性、区域性的服务网络 3R是指:减少、替代、优化。实验动物按遗传控制分为:近交系、封闭群、杂交群、突变系
实验动物按微生物控制分为:普通、清洁、SPF、无菌动物。实验动物许可证包括:生产和使用许可证 我国实验动物质量保证体系包括:国家和地方的质量检测中心、国家种子中心、有关法令规章
由科技部颁发的有关实验动物的管理法规:除《北京市实验动物管理条例》
动物的外貌特征、毛色、品系名称、生活习性、生物学特性、饲养管理注意、应用领域、近交系或封闭群动物、昼伏夜出动物、常年多发情动物、小鼠的发情周期所分阶段、中国地鼠的近交系品系、判断猕猴是否怀孕的方法、长爪沙鼠的别名、动物有什么样的特性、爬行类的食性、鼠类的哺乳期均为21天——全选
关于鱼的生物学特性的说法、鱼在肿瘤学研究的说法、蛙的应用、马的研究应用、马在遗传病研究的应用——
全选。所有鼠类均属于哺乳纲、啮齿目。判断雌性大小鼠交配过的方法:阴道涂片和阴道栓塞检查
雌性大小鼠只有在发情前期与发情期才接受交配行为。不能合成维生素C的是豚鼠与猕猴
没胆囊的动物:大鼠、中国地鼠。冬眠的动物:金黄地鼠、青蛙、旱獭、蟾蜍
青蛙、蟾蜍的生产过程有变态现象。不适宜作为实验用的豚鼠:除英国种外
家兔属哺乳纲、兔形目。金黄地鼠的应用:除不能用作糖尿病研究外。刺激性排卵的动物:家兔、猫 有换毛现象的动物:兔、猫、鼠兔、犬。有假妊娠现象的动物:地鼠、兔
草食性动物:豚鼠、兔、鼠兔、长爪沙鼠。家兔靠耳、呼吸来散热。犬与猫、都属于哺乳纲、食肉目
犬的发情季节:春、秋,属于季节性发情;猫的发情季节:春、秋、冬,也属于季节性发情;除犬、猫外其他
动物都是常年多发情。猕猴属哺乳纲、灵长目。有颊囊的动物:猕猴、地鼠
长爪沙鼠属于:哺乳纲、啮齿目、仓鼠科。鼠兔的换毛季节一般在冬、夏季
旱獭属于哺乳纲、啮齿目、松鼠科。靠呼吸散热的动物:犬、鸡。豚鼠的别名:除黄耗子
群居性好的动物:除兔。树鼩属哺乳纲、灵长目,幼年树鼩对轮状病毒不敏感
可用作人脱发研究的动物:树鼩、稀毛小鼠、裸鼠。鸡属于鸟纲、鸡形目;鸽属鸟纲、鸽形目
猫与鸽的视觉很敏锐。鱼在水中通过皮肤、鳃或肺进行气体交换
牛、羊是草食性多胃动物,也是反刍动物,马、兔则是草食性单胃动物。牛、羊、猪都是偶蹄目,马属奇蹄目 变温动物:鱼、蛇。实验动物病毒的分类、确诊病毒的方法、传染性疾病的危害、传染病流行强度的形式、主
要消毒方式、寄生虫引起的人畜共患病、寄生虫检测方法、水平传播方式、垂直传播的疾病——全选
病毒性疾病:流行特点除B病毒(3)外,其余全选;对实验的影响——全选;临床症状中除淋巴细胞性脑膜
炎、鼠肝炎、狂犬以及B病毒(3)外其余全选。
病毒:对酸碱的抵抗力差别大,对碱更敏感;对一般抗生素不敏感(错的选项)
细菌分为螺旋菌、杆菌以及球菌;其生长需要氧气、二氧化碳气体。传染锁链:传染源、传播途径以及易感动
60物。垂直传播途径:经胎盘、卵及产道传播。主要灭菌方式:热、冷、Co辐照。小鼠淋巴细胞性脉络从脑膜
炎主要症状:没有皮肤型;人感染的症状:流感样、脑膜炎
鼠肝炎的临床症状:除嗜肺型肝炎病毒可引起肝坏死。犬瘟热常用的免疫接种部位:皮下、肌肉
犬细小病毒的实验室诊断:电镜与免疫电镜观察、血凝和血凝抑制试验。狂犬病的临床表现:除极度喜饮水 预防狂犬病措施:接种、一旦发病即报告病情及扑杀动物,消毒环境
犬病毒性肝炎分为:犬肝炎型、犬呼吸道型;其传播途径:消化道、外寄生虫为媒介;检测其抗体的方法:除
荧光法;其危害:不危及实验人员,并不对所有温血动物致病(犬发病或死,改变酶系统及免疫反应) 猴B病毒流行特点:除不同性别感染有差别;其临床症状:除多数猴临床症状明显
细菌性疾病:流行特点中布氏杆菌、沙门菌以及支原体——全选;临床症状——全选;对实验的影响除支原体
(3)外全选;预防措施中结核、支气管败血波氏杆菌——全选 泰泽氏病流行特点:除与气候、饲料因素等无关。巴氏杆菌病临床症状:除神经性疾病 支原体病病原体特征:除营养要求不高。支原体感染动物的影响:除动物大量死亡 肺炎克雷伯杆菌流行特点:除人 不可感染。志贺氏菌病流行特点:除呈散在或地方流行 支气管败血波氏杆菌病的病原菌:除支气管波氏杆菌 棒状杆菌病的流行特点:除各品种间无差异;其预防措施:除对动物定期预防接种 沙门菌常见感染:鼠伤寒、肠炎沙门菌。实验动物易感的支原体:除生殖支原体 隔离措施主要用于:除将要死亡的动物。感染性设施的SOP包括——全选 鸡胚不能生产的疫苗:猪瘟、猪丹毒。真菌按形态学特点分为:丝状及酵母状真菌 致病性真菌中常见:浅部与深部真菌。真菌对机体的影响主要通过:直接影响和污染食物或饲料间接影响 寄生虫按对宿主的选择性分为:单宿主和多宿主;按对宿主及部位的适应性分为:固需和兼性寄生虫;按寄生时间分为:暂时和永久寄生虫;按寄生部位分为:体内和体外寄生虫 寄生虫的成虫和幼虫寄生的宿主分别成为:终末宿主和中间宿主。寄生虫感染的来源:中间宿主,垫料、水和饲料,传播媒介。对寄生虫的预防措施:驱虫、环境卫生及严格的管理制度。实验动物真菌性疾病:皮肤真菌感染、组织胞浆菌感染 实验动物感染的真菌主要有:须发癣、小孢子菌。组织胞浆菌的实验室确诊:荧光抗体查咽喉分泌物、分离培养鉴定病原体。蠕虫病的诊断:生前、死后诊断,死后诊断的手段:全身性蠕虫剖解、个别脏器剖解 实验动物血液寄生虫主要伊氏锥虫、焦虫、住白细胞虫。实验动物粪原虫检测主要是对秋虫卵囊及结肠小袋虫的检查。实验动物中,小鼠、地鼠对弓形虫最敏感;弓形虫诊断:病原学、血清学;治疗:磺胺类药物与抗菌增效剂合用效果好。兔球虫分为:肠球虫、肝球虫; 常见体外寄生虫:螨、虱、蚤等;实验动物感染后会引起:贫血、繁殖力下降 健康动物通过:接触患病动物或带有螨虫的用具而感染螨虫;感染后的症状除皮肤发炎外还有剧痒、脱毛 痒螨寄生于:皮肤表面和外耳道;疥螨寄生于:皮下、腹股沟及被毛深部 血液寄生虫易感动物:犬、猫;实验动物常见血液寄生虫有:钩虫、丝虫 对寄生虫的防控,消除传染源、切断传染途径是行之有效的方法 大小鼠血液采集方法、猴采血方法、动物安乐死原则、实验用药的影响因素、对照的方法、动物实验中注射方式、影响实验结果的环境因素、动物昼夜变化的指标、裸鼠的特征、一般药理研究选用的动物、一般生殖毒性观察的内容、长期毒性的目的、影响实验结果的动物因素、环境因素——全选 染色法错误的是:除单一颜色可标记1-10;染色常用的染色液:除10%的氨基黑溶液 常用编号方法:除拔毛法。去除被毛方法:除烙印法。注射用麻醉药:除安定。豚鼠静脉注射部位:除尾静脉 猪静脉注射:耳静脉、颈静脉。大小鼠、豚鼠皮下注射:颈后肩胛间、腹部两侧 家兔皮下注射:背部、耳根部。家兔肌肉注射:除前肢肌肉。剪尾采血正确的:除大鼠每次可采2ml 眼眶后静脉丛采血:除垂直从眼内角刺入。犬常用采血方法:头静脉、小隐静脉。集尿方法:除 膀胱穿刺 处死动物常用:除击打烙印法。肿瘤研究选择动物注意:除年龄、体重和性别 动物尿液:草食性:碱性、粘度高;肉食性:酸性、特殊臭味;高渗:陆地、沙漠生活的动物 犬不适合眼和血管刺激试验。适合进行外周循环观察的动物及部位:除大鼠耳廓 吗啡对小鼠、猫产生中枢兴奋,其他动物为抑制。药代动力学测定选用动物:犬、猴。药物分布:小鼠、大鼠 一般药理研究观察循环和呼吸不宜用:小鼠、兔。促智药一般用:成年大小鼠 麻醉剂:的卡因、氯胺酮、水合氯醛;复苏与抢救药:美解眠、戊四氮、碳酸氢钠、肾上腺素 镇痛药:成年雄性大小鼠。无呕吐反射:兔、大小鼠、豚鼠。利尿药或抗利尿药研究:大鼠、犬 药物对循环系统作用机制分析:猫、猴。生殖毒性包括:除哺乳期毒性 致畸敏感期毒性观察:除雌性交配能力。围产期毒性观察:除胎仔的外观、骨骼畸形。皮肤病研究:除青蛙 动物模型意义、设计原则、诱发模型的种类、影响模型质量的因素、裸大鼠用于肿瘤移植研究的优势——全选 T淋巴细胞功能缺陷:裸大鼠、裸小鼠。动物肿瘤诱发方式:原位、异位诱发 获得遗传工程动物的技术手段、转基因动物的应用——全选。已完成测序的哺乳动物:小鼠、人 实验动物微生物质量控制的目的、无菌动物的特征——全选