氨基酸的离子交换色谱分离-上课讲稿

第一篇：氨基酸的离子交换色谱分离-上课讲稿

同学们好！下面开始上课。

今天我们的实验内容是“氨基酸的离子交换色谱分离”。大家翻到书本第69页。我们的实验目的有三个：

1）了解层析法的概念、特点和分类； 2）复习氨基酸的理化性质；

3）掌握离子交换层析分离生物大分子的原理和方法。

今天实验题目是氨基酸的离子交换色谱分离。所以首先向同学们介绍离子交换色谱。顾名思义，离子交换色谱，就是分离过程是基于离子交换的原理而进行的。具体来说，就是基于带相反电荷的分子的相互吸引。也就是异种电荷相互吸引、同种电荷相互排斥。所以，按照带电荷的正负，离子交换层析一般分为两种类型，一种是阳离子交换色谱，填料上结合有带负电荷的基团，可以与溶液中带正电荷的样品结合；另一种是阴离子交换色谱，填料上结合带正电荷的基团，可以与溶液中带负电荷的样品结合。那么，我们今天使用的是阳离子交换柱，就是你们桌子上的黄色填料。

离子交换色谱是利用样品的带电性质进行的分离。那么，氨基酸的带电性是怎么样的呢？这是基于氨基酸的组成。氨基酸是一种兼性离子。什么是兼性离子呢？就是在溶液中既可以带正电荷，又可以带负电荷。氨基酸包含一个氨基，可以作为氢离子的受体，这是氨基酸成为阳离子；氨基酸又带有一个羧基，可以作为氢离子的供体，这时氨基酸成为阴离子。有这个性质，引申出一个等电点的概念，也就是氨基酸所带净电荷为0的状态。在PH小于等电点时，氨基酸带负电荷，当PH大于等电点时，氨基酸带正电荷。

如何利用离子交换色谱分离两种不同的氨基酸？

因为离子交换色谱根据“同种电荷相斥，异种电荷相吸”原理分离样品，而不同的氨基酸具有不同的等电点，它们在溶液中可能携带相反电荷。所以，我们将溶液调到一特定pH值，让一种氨基酸携带正电荷，使之与离子柱结合；同时，让另一种氨基酸携带负电荷，使之保留在溶液中。

在我们的实验中，我们需要分离天冬氨酸与赖氨酸，天冬氨酸的等电点时2.97，赖氨酸的等电点时9.74。我们可以看到，存在三种情况：

1）pH < 2.97，Asp与Lys均带正电荷

2）2.97 < pH < 9.74，Asp带负电荷，Lys带正电荷 3）pH > 9.74，Asp与Lys均带负电荷 是不是只有第二种情况符合我们之前说的方案？

因此，我们的实验基本步骤是：上样，样品液：0.005 mol/L 的Asp与Lys溶于0.02 mol/L HCl中形成的混合液（pH < 2）。1）先用pH5.3的柠檬酸缓冲液洗脱；2）pH 12 的氢氧化钠溶液洗脱。

1）平衡，向层析柱加入pH 5.3的柠檬酸缓冲液，直到流出液的pH与洗脱液的pH相同为止，用pH试纸检查。

2）上样。降低液面至填料表面上方1 厘米左右，加入0.5毫升氨基酸混合液样品。

3）向层析柱加入pH 5.3的柠檬酸缓冲液进行洗脱。

4）用短试管收集天冬氨酸。每管5毫升，收集1-5管。

5）向层析柱加入pH 12的NaOH缓冲液进行洗脱。每管5毫升，用短试管收集6-12管。

6）测定。取0.5毫升收集液于长试管中，加入1毫升pH5.3柠檬酸缓冲液，0.5毫升茚三酮，混合后在100℃加热25分钟，然后水冷却5-10分钟，加入3毫升60%乙醇稀释，用分光光度计在570 nm处检测。

7）绘制洗脱曲线。

8）再生色谱柱：用蒸馏水洗至流出液为中性。

注意事项：

1）柱子不能干。始终保持柱面上方有液体。

2）液体流速与柱面上方液面高度有关，液面越高，流速越快。可以适当增高液面，加大流速，对结果没有影响，可以节省时间。

3）建议大家分工合作。一组进行分离实验，一组进行后面的检测实验。思考题：

1.何为色谱法？其特点是什么？

2.离子交换树脂有几类，各类有何特点？

3.我们这次用的是阳离子交换色谱，假如使用阴离子交换色谱，该如何设计实验？

4.是不是所有的氨基酸都能用离子交换色谱进行分离？

第二篇：氨基酸的离子交换柱色谱分离实验教案

氨基酸的离子交换柱色谱分离

【实验目的】

1.2.3.掌握离子交换树脂分离氨基酸的基本原理； 掌握离子交换柱层析法的基本操作；

掌握氨基酸和茚三酮显色反应机理及洗脱曲线的绘制。

【实验原理】

1.离子交换层析原理

离子交换层析是一种用离子交换树脂做支持剂的层析法.离子交换树脂是具有酸性或碱性基团的人工合成聚苯乙烯和苯二乙烯等不溶性高分子化合物.树脂一般都制成球形的颗粒.阳离子交换树脂含有的酸性基团如磺酸基(一S03H),磷酸基(一P03H),亚磷酸基(一PO2H),羧基(一COOH),酚羟基(一OH)等,可解离出H离子,当溶液中含有其他阳离子时,例如在酸性环境中的氨基酸阳离子,它们可以和H离子发生交换而“结合”在树脂上

本实验采用磺酸型阳子交换树脂（732型）分离酸性氨基酸（天冬氨酸Asp pI=2.97）和碱性氨基酸(赖氨酸Lys pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下，由于pH低于Lys的pI值，Lys可解离成阳离子，吸附在树脂上；又由于pH高于Asp的pI值，则Asp可解离为阴离子，不能被树脂吸附而直接流出色谱柱。在pH12条件下，因pH高于Lys的pI值，Lys又解离为阴离子从树脂上被交换下来，这样通过改变洗脱液的pH值可使它们被分别洗脱而达到分离的目的。

2.茚三酮反应机理

在弱酸条件下（pH5-7），蛋白质或氨基酸与茚三酮共热，可生成蓝紫色缩合物。此反应为一切蛋白质和α—氨基酸所共有(亚氨基酸如脯氨酸和羟脯氨酸产生黄色化合物)。含有氨基的其他化合物亦可发生此反应。该反应颜色产物在570nm处有最大吸收峰。

【仪器与试剂】

1.仪器：

层析柱（20cmX1cm）；铁架台；恒流泵；部分收集器；分光光度计；移液枪；恒温水浴锅；试管玻璃棒烧杯等常用器材。

2.试剂： A．732型阳离子交换树脂

B．2mol/L氢氧化钠溶液

1mol/L氢氧化钠溶液

0.01mol/L氢氧化钠溶液 C．2mol/L盐酸溶液

D．混合氢基酸溶液：天冬氨酸、赖氨酸均配制成2 mg／mL的柠檬酸缓冲液溶液。将上述天冬氨酸、赖氨酸溶液按1：1.5的比例混合 E．柠檬酸缓冲液（pH5.3，钠离子浓度为0.45mol/L）F．茚三酮显色剂

【实验步骤】

1.树脂的处理（小老师完成）

将干的强酸型树脂用蒸馏水浸泡过夜，使之充分溶胀。用4倍体积的2mol/L的盐酸浸泡1小时，倾去清液，洗至中性。再用2mol/L的氢氧化钠处理，做法同上。（检验中性用试纸即可）

2.树脂的转型与保存（小老师完成）

以1mol/L氢氧化钠溶液浸泡处理后的树脂1h，使树脂转化为Na型，用蒸馏水洗至中性，多余树脂放入1mol/L氢氧化钠溶液保存，需使用的用欲使用缓冲溶液浸泡。

3.装柱

取（20cm X 1cm）层析柱，检验气密性。验得气密性良好后，将柱垂直夹于铁架上。用夹子夹紧柱底出口处橡皮管，在柱顶放一漏斗并向柱内加入2-3cm高的缓冲溶液。用小烧杯取少量树脂及浸泡液，将其搅拌成悬浮状，通过漏斗缓慢倒入柱内。待树脂在底部沉降时，慢慢打开出口夹子，放出少许液体，持续加入树脂，直至树脂高度达到10cm。

注意：装好的柱要求连续、均匀，无纹格、无气泡，表面平整，否则倒回烧杯，重新装柱。整个过程液面不可低于树脂床面。

4.平衡

层析柱装好后，缓慢加入适量缓冲液至液面高于树脂面2-3cm。取一烧杯盛有25ml缓冲液，装好柱子，柱上端胶皮管通过恒流泵浸入烧杯液面以下，柱下端置另一烧杯收集洗出液。后开启泵，调节流速，以0.5ml/min（10滴/min）流速进行平衡，待25ml缓冲液基本用尽时即可加样。平衡过程大约40-50分钟。

5.加样

关闭恒流泵，打开层析柱上端，缓慢打开柱底出口夹子，放出层析柱内液体至层析柱内液体凹液面与树脂上表面约距1mm，立即关闭出口。由上端缓慢加入氨基酸混合液0.5ml（用吸量管沿柱壁四周均匀加入）。加样后打开止水夹，使液缓慢流出至凹液面与树脂上表面约距1mm，立即关闭止水夹。再加入0.5ml缓冲液（用吸量管沿柱壁四周均匀加入），打开止水夹，使液体缓慢流出至凹液面与树脂上表面再次约距1mm，重复此加入缓冲液操作2-3次，最后加缓冲液至液面高于柱顶2cm左右。

6.洗脱

将层析柱装好并使下端对准部分收集器上的一号小试管口，用PH5.3柠檬酸钠缓冲溶液以0.5ml/min（10滴每分钟）流速开始洗脱，小试管收集洗脱液，每管收集1ml，收集10管后，关闭恒流泵，同时夹住下端，改用0.01mol/L氢氧化钠溶液洗脱，同法继续收集11-35管。收集完毕后，关闭止水夹和恒流泵。(实验时柱内液体不可流干，柱子气密性不好时易出现流干情况)7.氨基酸色谱的测定

向各管收集液中加入2.5ml柠檬酸钠缓冲溶液，混匀后加入1ml茚三酮显色剂，在沸水中加热15min，取出冷却10min。以收集液第1管为空白，测定570nm波长处各管的光吸收值。以光吸收值为纵坐标，以洗脱管号（洗脱体积）为横坐标绘制氨基酸色谱图。（比色时请戴手套，避免将液体粘在手上或衣服上，实验完毕后请将树脂倒入指定回收处，并清洗所有实验用具）

8.树脂的回收与再生（小老师完成）

树脂回收后，用1mol/L氢氧化钠洗涤浸泡，再用蒸馏水洗至中性后，可再次使用。

【数据处理】

以光吸收值为纵坐标，洗脱管号（洗脱体积）为横坐标绘制氨基酸色谱图。

【思考题】 1.2.3.若实验结果的图谱中出现拖尾现象，试分析其原因。树脂的预处理中为何要将树脂转变为钠型？ 试简述平衡的作用及流速快慢对实验结果的影响。

第三篇：柱色谱分离技术

实训操作规程

柱色谱分离技术操作规程

1．装柱

装柱的好坏直接影响分离效率。装柱之前，先将空柱洗净干燥，然后将柱垂直固定在铁架台上。如果色谱柱下端没有砂芯横隔，就取一小团脱脂棉，用玻璃棒将其推至柱底，再在上面铺上一层厚0.5~1cm的石英砂，然后进行装柱。

装柱的方法有湿法和干法两种。

①湿法装柱：将吸附剂用洗脱剂中极性最低的洗脱剂调成糊状，在柱内先加入约3/4柱高的洗脱剂，再将调好的吸附剂边敲打柱身边倒入柱中，同时打开柱子的下端活塞，在色谱柱下面放一个干净并干燥的锥形瓶，接收洗脱剂。当装入的吸附剂有一定的高度时，洗脱剂流下速度变慢，待所用吸附剂全部装完后，用流下来的洗脱剂转移残留的吸附剂，并将柱内壁残留的吸附剂淋洗下来。在此过程中，应不断敲打色谱柱，以使色谱柱填充均匀并没有气泡。柱子填充完后，在吸附剂上端覆盖一层约0.5cm厚的石英砂或覆盖一片比柱内径略小的圆形滤纸。

②干法装柱：在色谱柱上端放一个干燥的漏斗，将吸附剂倒入漏斗中，使其成为细流连续地装入柱中，并轻轻敲打色谱柱柱身，使其填充均匀，再加入洗脱剂湿润。

2．加样

液体样品可以直接加入到色谱柱中，如浓度低可浓缩后再进行分离。固体样品应先用少量的溶剂溶解后再加入到柱中。在加入样品时，应先将柱内洗脱剂排至稍低于石英砂表面后停止排液，用滴管沿柱内壁把样品一次加完。在加入样品时，应注意滴管尽量向下靠近石英砂表面。样品加完后，打开下旋塞，使液体样品进入石英砂层后，再加入少量的洗脱剂将壁上的样品洗脱下来，待这部分液体的液面和吸附剂表面相齐时，即可打开安置在柱上装有洗脱剂的滴液漏斗的活塞，加入洗脱剂，进行洗脱。

3．洗脱

在洗脱过程中，样品在柱内的下移速度不能太快，如果溶剂流速较慢，则样品在柱中保留的时间长，各组分在固定相和流动相之间能得到充分的吸附或分配作用，从而使混合物，尤其是结构、性质相似的组分得以分离。但样品在柱内的下移速度也不能太慢(甚至过夜)，因为吸附剂表面活性较大，时间太长有时可能造成某些成分被破坏，使色谱带扩散，影响分离效果。因此，层析时洗脱速度要适中。通常洗脱剂流出速度为每分钟5~10滴，若洗脱剂下移速度太慢可适当加压或用水泵减压，以加快洗脱速度，直至所有色带被分开。

4．收集

如果样品中各组分都有颜色时，可根据不同的色带用锥形瓶分别进行收集，然后分别将洗脱剂蒸除得到纯组分。如果没有颜色的，只能分段收集洗脱液，再用薄层色谱或其他方法鉴定各段洗脱液的成分，成分相同者可以合并。

1.吸附剂的选择及处理

吸附剂分为无机吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙，有机吸附剂如纤维素、淀粉、蔗糖、聚酰胺等。一般来说，所选择吸附剂应有较大的比表面积和足够的吸附能力：对欲分离的不同物质应有不同的吸附能力，即有足够的分辨力；与洗脱剂、溶剂及样品组分不会发生化学反应；吸附剂颗粒均匀。吸附剂一般先经过筛获得均匀的颗粒（100-200目），对含有杂质的吸附剂可用有机溶剂如甲醇、乙醇、乙酸乙酯等浸泡处理或提取除去，有些吸附剂可用沸水洗去酸碱使呈中性，有些需经加热处理活化。2.溶剂与洗脱剂

两者常为同一组分,但用途不同。习惯上把用于溶解样品的溶液称为溶剂，把用于洗脱洗脱柱的溶液称洗脱剂。原则上所选的溶剂和洗脱剂要求纯度高，与样品和吸附剂不起化学反应，对样品的溶解度大，粘度小，易流动，易与洗脱的组分分开。常用的溶剂和洗脱剂有饱和碳氢化合物、醇、酚、醚、卤化烷、有机酸等。

3．柱的装填和样品的加入

色谱柱一般为玻璃或有机玻璃管制成，柱下端装上一块2-4号烧结玻璃或垫一层玻璃丝以支持吸附剂，管内装吸附剂。有条件可附加压或减压装置，使流速保持恒定，色谱柱外也可配恒温管套。

装柱的方法通常是将一种在适当溶剂中的吸附剂调成糊状，慢慢地倒入关闭了出水口的柱中，同时不断搅拌上层糊状物，赶去气泡，并使装填物均匀的自然下降，装置所需要的高度后，打开出水口，让溶剂流出。注意柱的任何部分不能流干，即是说、再柱的表面始终保持着一层溶剂。

小心地用移液管把样品液绕柱内壁小心地加入，不要冲击着吸附剂的表面。加样的另一个办法是用一个注射器和蠕动泵把样品直接送到柱表面上。4.洗脱

在整个洗脱过程中，要使洗脱液通过柱时保持恒定的流速，可以用调节“操作压”来调控（操作压相当于在柱上面的贮液瓶中溶剂的水平和柱出口位置的水平之差）。另一个方法是时用蠕动泵。

洗脱过程中柱内不断发生溶解（解吸），吸附，在溶解，在吸附。被吸附的物质被溶剂解吸，随着溶剂向下移动，又遇到新的吸附剂又把该物质自溶剂中吸附出来，后来流下的新溶剂又在使该物质溶解而向下移动。如此反复解析，吸附，经过一段时间后，该物质向下移动至一定距离，此距离的长短与吸附剂对该物质的吸附力及溶剂对该物质的溶解能力有关，分子结构不同的物质溶解度和吸附能力不同，移动距离也不同,吸附较弱的就易溶解，移动距离较大。经过适当时间后，各物质就形成了各种区带,，每一区带可能是一种纯物质，如果被分离物质是有色的，就可以清楚地看到色层。随着洗脱剂向下移动，最后各组份按吸附力的不同顺序流出色谱柱，以流出体积对浓度作图，可得由一系列峰组成的曲线，每一峰可能相当于一个组分。

第四篇：氨基酸的一般代谢讲稿

第十章 蛋白质的分解代谢 第四节氨基酸的一般代谢

一、氨基酸脱氨基 【目的与要求】 掌握：

1、转氨基的概念、转氨酶的特点、重要的转氨酶及其临床意义

2、氧化脱氨基的概念、L-谷氨酸脱氢酶的特点

3、联合脱氨基的概念、方式及与糖代谢的关系 熟悉：

1、其他非氧化脱氨基的特点 了解：

1、转氨酶辅酶的作用机制

2、嘌呤核苷酸循环的过程 【重点、难点】 重点：

1、转氨基的概念、转氨酶的特点、重要的转氨酶及其临床意义

2、氧化脱氨基的概念、L-谷氨酸脱氢酶的特点

3、联合脱氨基的概念、方式及与糖代谢的关系 难点：

1、联合脱氨基与糖代谢的关系

2、转氨酶辅酶的作用机制

3、嘌呤核苷酸循环的过程 【课时要求】

1课时（40min）【授课内容】

复习氨基酸代谢库的概念以及氨基酸的来源与代谢去路，引出氨基酸的脱氨基作用。

（一）转氨基

1、概念：指在氨基酸转移酶（转氨酶）的催化下，将氨基酸的α-氨基转移到一个α-酮酸的羰基位置上，生成相应的α-酮酸和一个新的α-氨基酸的过程。

2、转氨酶具有的特点：（1）活性高、分布广

（2）所催化的反应只发生氨基转移不产生游离氨

（3）发生的反应最终将氨基转移到α-酮戊二酸的羰基生成谷氨酸（4）转氨酶的辅酶为维生素B6的活性形式：磷酸吡哆醛或磷酸吡哆胺（5）不能使赖氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸发生转氨基

3、重要的转氨酶

（1）天冬氨酸转氨酶（AST / GOT），AST在心肌细胞内活性最高，血清AST的升高，有助于急性心肌梗死的诊断。

（2）丙氨酸转氨酶（ALT / GPT），ALT在肝细胞中的活性最高；血ALT升高，有助于急性肝炎等肝细胞受损疾病的辅助诊断。

故临床上常用AST和ALT作为疾病的诊断和预后的指标。

4、生理意义

（1）其逆反应合成非必需氨基酸

（2）AST和ALT作为疾病的诊断和预后的指标。

（二）氧化脱氨基

1、概念：指在酶的催化下，氨基酸氧化脱氢、水解脱氨基，生成氨和α-酮酸，反应在线粒体中进行。

2、L-谷氨酸脱氢酶具有以下特点：

（1）分布广，活性强（除肌组织外）；它只能催化L-谷氨酸氧化脱氨基，生成氨和α-酮戊二酸

（2）是以NAD+或NADP+为辅酶的不需氧脱氢酶，产生的NADH可通过氧化磷酸化推动合成2.5个ATP（3）反应可逆，逆反应合成谷氨酸

（4）是变构酶，激活剂：ADP；抑制剂：ATP、GTP

3、生理意义

（1）逆反应合成谷氨酸

（2）NADH可通过氧化磷酸化推动合成2.5个ATP

（三）联合脱氨基

1、概念：氨基酸的转氨基作用与谷氨酸氧化脱氨基作用的结合，被称作联合脱氨基作用，即氨基酸将氨基转移给α-酮戊二酸，生成谷氨酸，谷氨酸再氧化脱氢生成氨。

2、联合脱氨基的特点

（1）是体内氨基酸脱氨的主要方式，此反应过程可逆

（2）由于L-谷氨酸脱氢酶在肌肉组织中活性低，故在肌肉组织中主要以嘌呤核苷酸循环脱氨基。

3、生理意义

（1）逆反应可生成谷氨酸、延胡索酸、草酰乙酸

（四）其他非氧化脱氨基

其他非氧化脱氨基主要是微生物的脱氨基方式，在人体内发生较少。【小结】

1、转氨基的概念、转氨酶的特点、重要的转氨酶AST、ALT，生理意义

2、氧化脱氨基的概念、L-谷氨酸脱氢酶的特点

3、联合脱氨基概念、生理意义 【思考题】

1、体内重要的转氨酶有哪两种？其催化反应及组织分布特点是什么？有何临床意义？

2、体内主要的脱氨基方式是什么？试写出反应过程？

第五篇：上课讲稿

《雪》鲁迅

第一部分：情境导入

1出示幻灯，播放歌曲《塞北的雪》，师：一首宛转悠扬的《塞北的雪》，让我们看到的不仅是银装素裹的塞北高原，更深深的体会到雪的纯洁无暇。雪，自古以来就是文人墨客手中的珍宝，那么今天我们来学一篇鲁迅的《雪》，（板书课题），从中可以体会到这位文学巨匠带给我们的是怎样的人生启示。

2出示目标，教师解读 学习目标：

1、理清作者思路，把握文章内容。

2、理解作者笔下江南的雪与朔方的雪的特点以及作者在描写中所寄寓的情感。

3、品味文章精练传神的描写语言,学习鲁迅先生敢于直面惨淡人生的不屈精神。3出示鲁迅先生图片，问：大家对鲁迅先生有多少了解？ 学生说一说，议一议

教师总结：出示有关鲁迅先生的基本知识

鲁迅，浙江绍兴人，原名：周树人。字豫才。我国伟大文学家、思想家、革命家。他是中国现代文学的奠基人。

主要作品：

小说集《呐喊》《彷徨》

散文集《朝花夕拾》《野草》

杂文集《二心集》

《南腔北调集》 《雪》一文选自散文集《野草》 4写作背景

师：为了便于大家学习这篇文章，我们可以从写作背景入手 首先大家齐读

《野草》创作时，正是蒋介石发动的“四.一二”反命政 变后，白色恐怖非常严重时期，现实的环境异常地严酷 在这部散文集中，鲁迅表现了他对黑暗势力的反抗和斗 争，也表现了他对美好生活和光明未来的憧憬与追求，热烈赞颂现实中的叛逆，不屈服的勇士。《野草》共收 录了鲁迅的散文诗句23篇,是1924年9月至1926年4 月在北京所作

1924年岁暮,北方降雪,鲁迅身处北国,眼前“大风吹雪

盈空际”，作者萌发了创作冲动，从眼前的飞雪联想到江 南的雪景，思绪在回忆和现实中不断变幻和翻腾。指名读第二部分：

.（女生）江南是作者的故乡，是鲁迅童年生活的地方。在作者 记忆中，对故乡有许许多多回忆。那记忆是温暖的，是美 好的。正如江南的雪，雪中美好的景色，让人回味和留念。故乡永远是鲁迅温暖的家，美好的理想是鲁迅永远的向 往和追求。

（男生）北国，是鲁迅现在生活的地方，现实严酷的环境，作为战士，故乡固然十分美好，让人眷恋，但现在更需要坚定、勇敢、不屈不挠的抗争精神。正因为如此，才有《雪》中描写的绝妙的江南、江北雪景图。5有关散文诗 介乎诗与散文之间,兼有诗与散文特点的一种现 代抒情文学样式.从本质上看,它有诗的意境，诗的情绪和幻想； 从形式上看，它和散文不一样，不分行，不押韵，语言比较自由。

鲁迅的散文诗集《野草》是其中成就最高、影 响最大者 6检测预习

师：凛冽

褪尽

脂粉奁

磬口

陈淏子

朔方 指一名同学到黑板上写出答案，集体订正并提出表扬

二整体感知

1学习一篇课文，首先必须对文章有一个大体了解 出示：

1、快速浏览课文，感知美文： 文章的题目是《雪》，在文中作者写到了哪些地方的雪？分别体现在文中的哪些段落？ 学生读2到3分钟，看看谁找得又对又快 提问回答并板书 南方的雪（1-3）北方的雪（4-6）

2现在让我们和录音一起朗读，完成这样几个问题 齐诵课文，根据句式回答下列问题：

我读出了江南的雪具有—————————特点，表现在：————————————。我读出了朔方的雪具有—————————特点，表现在：———————————— 出示录音学生跟随录音诵读 听录音（大约4分钟）

问现在然我们来根据这样的提示一起来看一下

出示：1.江南的雪哪些特点？从哪些地方可以看出来？ 学生说：滋润美艳（板书）

在这份滋润美艳中让我们看到了一个“孕育生命”“富于生机”但又“易于消失”的雪的世界，请大家找一找哪些语句体现出这些特点： 孕育生命

血红的宝珠山茶，白中隐青的单瓣梅花，深黄的磬口的蜡梅花；雪下面还有冷绿的杂草

然而很洁白，很明艳，以自身的滋润相粘结，整个地闪闪地生光。孩子们用龙眼核给他做眼珠，又从谁的母亲的脂粉奁中偷得胭脂来涂在嘴唇上。

富于生机

还在隐约着的青春的消息，极壮健的处子的皮肤

我的眼前仿佛看见冬花开在雪野中，有许多蜜蜂们忙碌地飞着，也听得他们嗡嗡地闹着。

易于消失。

晴天又来消释他的皮肤，寒夜又使他结一层冰，化作不透明的水晶模样；连续的晴天又使他成为不知道算什么样，而嘴上的胭脂也褪尽了。（也许这份美好的回忆中带着一点点遗憾）

2那么朔方的雪有哪些特点？从哪些地方可以看出来？ 学生：如粉如沙（板书）

这仅仅是表现在行的方面，那么从雪的神上去考虑，那它又是怎样的形象呢？（可以用哪些词语来形容？）

冰冷的、坚硬的、孤独的、灿烂的 那么何以见得呢？

永远如粉，如沙，他们决不粘连……便蓬勃地奋飞，在日光中灿灿地生光，如包藏火焰的大雾，旋转而且升腾，弥漫太空，使太空旋转而且升腾地闪烁。在无边的旷野上，在凛冽的天宇下，闪闪地旋转升腾着的是雨的精魂……（指一名男生朗读）

就让我们到实地走一走，看一看 如粉，如沙，绝不粘连 蓬勃，奋飞,灿灿生光 蓬勃，奋飞,灿灿生光 无边的旷野 凛冽的天宇

从这雪中我们可以体会到北方雪 怎样的个性？（可以适当的联系前面的写作背景和课文后的附录文章，看哪位同学在读书的时候最认真，最仔细）独立张扬的个性和斗争的激情以及献身的精神

三研读探究

㈠

1、男女学生分组美读课文：

领略了大江南北的雪景，就让我们用我们的声音一起走进这个雪的世界

前三段请女生朗读，要求读出_优美_________，后三段请男生朗读，要求读出_壮美 2想一想

在作者的笔下，这两幅雪景图都很美，你觉得作者更喜欢哪一幅雪景图？你从文中哪些文字中可以看出来？作者为什么会喜欢这一幅图

总结：大家肯定会说：作者喜欢的是朔方的雪，那么从哪些地方可以看出来呢？ ①暖国的雨，向来没有变过冰冷的坚硬的灿烂的雪花。提问：这三个形容词实际是指什么？这句话有什么含义

“灿烂”是指“北方的雪”，暖国的雪缺乏“冰冷和坚硬”，是一种 单调，是一种不幸。强调的是一种不屈的精神，这种精神是“ 灿烂的”，是最值得先赞赏的。

②(还有一个词)承接前后三段的“但是”，更加表明了作者的感情倾向 为什么喜欢？

北方的雪具有一种不甘沉沦，昂扬向上，执著抗争精神。体现了一种直面惨淡人生的不屈不挠的精神

㈡大家想一想，你自己会更喜欢哪幅图？作者仅仅是在写雪景吗？其中有没有更深层的意义？ 考虑一下

作者采用了什么样的表现手法？

借雪景在表现什么？（象征意义：身处污浊环境却不同流合污；庄重质朴，不哗众取宠；不炫耀自己；特立独行，正直不苟，豁达大度；有美好的资质。是利用了“托物言志”的手法：通过赞扬莲的美好资质，来表达自己的志向）。作者运用的是托物言志，象征手法 简单了解一下：

用具体的事物表现某种特殊的意义。用来象征某种特殊意义的具体事物。

比如火炬可以象征比如：火炬象征光明，春蚕蜡烛等可以象征无私奉献的人

那江南的雪和北方的雪又象征什么呢？（我们在写作背景中可以看到江南是作者一种美好的回忆，而北方则是鲁迅现在生活的地方，他又对这两场雪赋予了什么样的意义呢？）江南的雪象征：对美好事物的向往和追求

北方的雪象征：一种不甘沉沦，昂扬向上，执

著抗争精神（不屈不挠的精神）江南的雪是一种温润、宁静的美，但还需要北方的雪在孤独的境遇下独自抗争的精神。因此，两幅图景贯穿着作者一个共同的哲理：要用战斗来创造一个春天般的美好世界 ㈢文章在江南与北方雪景的对比中，表达了作者怎样的思想感情？

表达了作者对朔方的雪的独立张扬的个性和斗争献身精神的赞颂之情，同时也暗含了作者敢于直面惨淡的人生，进行不屈不挠的斗争，在悲壮的战斗中得到升华的战斗精神。这种精神体现在文章的哪个地方？

是的，那是孤独的雪，是死掉的雨，是雪的惊魂 小结

阅读鲁迅先生的《雪》，我们既欣赏到优美的江南雪景和壮美的朔方飞雪，更能体察到他那博大的胸襟和坚强的斗志。所以说，《雪》不仅是一支不同凡响的雪之绝唱，更是一曲响彻云霄的精神的赞歌。美情、美景相得益彰。

四延伸训练

你所知道的文学作品中有哪些是借描写雪来抒发情感的？ 《沁园春.雪〉 《济南的冬天》 《江

雪》

沁园春.雪

北国风光，千里冰封，万里雪飘。望长城内外，惟余莽莽；大河上下，顿失滔滔。山舞银蛇，原驰蜡象，欲与天公试比高。须晴日，看红装素裹，分外妖娆。

江山如此多娇，引无数英雄竞折腰。惜秦皇汉武，略输文采；唐宗宋祖，稍逊风骚。一代天骄，成吉思汗，只识弯弓射大雕。俱往矣，数风流人物，还看今朝。

最妙的是下点小雪呀。看吧，山上的矮松越发的青黑，树尖上顶着一髻儿白花，好像日本看护妇。山尖全白了，给蓝天镶上一道银边。山坡上，有的地方雪厚点，有的地方草色还露着；这样，一道儿白，一道儿暗黄，给山们穿上一件带水纹的花衣；看着看着，这件花衣好像被风儿吹动，叫你希望看见一点更美的山的肌肤。等到快回落的时候，微黄的阳光斜射在山腰上，那点薄雪好像忽然害了羞，微微露出点粉色。就是下小雪吧，济南是受不住大雪的，那些小山太秀气！

——老舍：《济南的冬天》 孤舟蓑笠翁，独钓寒江雪 “撒盐空中差可拟” “未若柳絮因风起”

“忽如一夜春风来，千树万树梨花开” “白雪却嫌春色晚，故穿庭树作飞花”

五能力迁移

在鲁迅先生的笔下，雪象征着不屈的斗士。在你的想象中，雪还可以象征着什么？ 请认真思考后

简单写一写

六 作

业

继续搜集有关“雪”的诗句

另外课文中写了塑雪罗汉，《从百草园到三味书屋》中写了雪地捕鸟，描写都非常生动传神。你在雪地里做过什么游戏？试写一段文字描述出来。