第一篇：考研生理生化资料总结
词解释；01.根压——植物根系的生理活动使液流从根部上升；04.内聚力学说——以水分具有较大的内聚力保证由；05.矿质营养——植物对矿物质的吸收、转运和同化；06.必需元素——指在植物营养生理上表现为直接的；08.离子对抗——在发生单盐毒害的溶液中，如加入；09.平衡溶液——对植物生长有良好作用而无毒害作；10.还原氨基化——还原氨直接使酮酸氨基化而形成；1 01.根压——植物根系的生理活动使液流从根部上升的压力 02.蒸腾作用——水分通过植物体表面（如叶片等），以气体状态从体内散失到体外的现象 03.水分临界期——指在植物生长发育过程中对缺水最为敏感，最易受害的阶段
04.内聚力学说——以水分具有较大的内聚力保证由叶至根水柱不断来解释水分上升原因的学说
05.矿质营养——植物对矿物质的吸收、转运和同化，通称为矿质营养
06.必需元素——指在植物营养生理上表现为直接的效果、如果缺乏时则植物生育发生障碍，不能完成生活史、以及去除时植物表现出专一的、可以预防和恢复的症状的一类元素 07.单盐毒害——溶液中只有一种金属离子对植物起有害作用的现象
08.离子对抗——在发生单盐毒害的溶液中，如加入少量其他金属离子来减弱或消除单盐毒害的作用叫离子对抗
09.平衡溶液——对植物生长有良好作用而无毒害作用的溶液
10.还原氨基化——还原氨直接使酮酸氨基化而形成相应氨基酸的过程 11.胞饮作用— —物质吸附在质膜上，然后通过膜的内折而转移到细胞内的攫取物质及液体的过程
12.通道蛋白 ——在细胞质膜上构成圆形孔道的内在蛋白 13.植物营养临界期 —— 14.C3途径——以RUBP为CO2受体，CO2固定后的最初产物为PGA的光合途径为C3途径
15.交换吸附——根部细胞在吸收离子的过程中，同时进行着离子的吸附与解吸附的过程，总有一部分离子被其它离子所置换，所以细胞吸附离子具有交换性质
16.C4途径——以PEP为CO2受体，CO2固定后最的初产物是四碳双羧酸的光合途径为C4途径。
17.光系统——由不同的中心色素和一些天线色素、电子供体和电子受体组成的蛋白色素复合体。
18.反应中心——由中心色素、原初电子供体及原初电子受体组成的具有电荷分离功能的色素蛋白复合体结构。
19.荧光现象——叶绿素溶液在透射光下呈绿色，在反射光下呈红色的现象
20.磷光现象——当去掉光源后，叶绿素溶液和能继续辐射出极微弱的红光，它是由三线态回到基态时所产生的光。这种发光现象称为磷光现象。21.爱默生效应——如果在长波红光（大于685nm）照射时，再加上波长较短的红光（650nm），则量子产额大增，比分别单独用两种波长的光照射时的总和还要高。
22.光合作用——绿色植物吸收光能，同化CO2和水，制造有机物质并释放O2并积蓄能量的过程
23.聚光色素——没有光化学活性，只有收集光能的作用，并将之传到反应中心色素的色素 24.光合磷酸化——叶绿体在光下把无机磷和ADP转化为ATP形成高能磷酸键的过程 25.光补偿点——光合过程中吸收的CO2和呼吸过程中放出的CO2等量时的光照强度。26.光饱和点——增加光照强度，光合速率不再增加时的光照强度。
27.呼吸作用——生活细胞内某些有机物在有氧和无氧条件下进行彻底或不彻底的氧化分解，并释放能量过程
28.呼吸链——呼吸代谢中间产物的电子和质子，沿着一系列有顺序的电子传递体组成的电子传递途径，传递到分子氧的总过程
29.三羧酸循环——丙酮酸在有氧的条件下，通过一个包括三羧酸和二羧酸的循环而逐步氧
化分解，直到形成水和CO2为止的过程
30.巴斯德效应——氧可以降低糖类的分解代谢和减少糖酵解产物的积累的现象叫巴斯德效应
31.P/O——一对电子通过电子传递链每消耗1个氧原子与所用去的磷酸的比值 32.氧化磷酸化作用——氧化过程中伴随着ATP的合成，即氧化作与磷酸化作用同时进行的 过程
33.植物生长物质——是指一些调节植物的生长发育的物质，它包括植物激素和植物生长调节剂
34.植物生长调节剂——指具有一些激素活性人工合成的物质 35.植物生长调节物质——指在植物体内合成的、能调节植物生长发育的非激素类的生理活性物质。36.激素受体——能与激素特异地结合，并引起特殊生理效应的蛋白质类物质
37.生长素结合蛋白——机位于质膜上的生长素受体，可使质子泵将膜内质子泵膜外，引起质膜的超级化，胞壁松弛。也有位于胞基质和核质中，促进mRNA的合成。
38.植物激素—— 一些在植物体内合成，并从产生之处运到别处，对生长发育产生显著作用的微量有机物
39.自由生长素——易于从各种溶剂中提取的生长素
40.束缚生长素——指没有活性，需要通过酶解、水解或自溶作用从束缚物质释放出来的生长素
41.乙烯的“三重反应”——指乙烯使黄花豌豆幼苗变矮，变粗和横向生长。42.生长抑制剂——抑制植物顶端分生组织生长、破坏顶端优势的生长调节剂 43.生长延缓剂——抑制植物亚顶端分生组织生长、抑制节间伸长的生长调节剂
44.植物生长——:是指植物体积和重量（干重）上的不可逆增加，是由细胞分裂、细胞伸长以及原生质体、细胞壁的增长而引起。45．再分化——指离体培养中形成的处于脱分化状态的细胞团再度分化形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官、甚至最终再形成完整植株的过程。
46.植物细胞全能性——植物体的每一个细胞携带着一套完整的基因组，并有发育成完整植株的潜在能力
47.植物组织培养——指在无无菌条件下，将外植体接种到人工配制的培养基中培育离体植物组织、器官或细胞，以及培育成植株的技术。48.生长温周期现象——植物对昼夜温度周期性变化的反应
49．生长的相关性——植物各部分间在生长上相互依赖有相互制约的现象 50.顶端优势——植物顶端在生长上占有优势并抑制侧枝或侧根生长的现象 51．光形态建成——光控制植物生长、发育和分化的过程
52．光敏色素——在植物体内存在着一种吸收红光和远红光并且可以互相转化的光受体蛋白，具有红光吸收型（Pr）和远红光吸收型（Pfr）两种形式，其中Pfr型具有生理活性，参与光形态建成、调节植物生长发育
53．光受体——是指植物体中存在的一些微量色素，能够感受到外界的光信号，并把光信号放大使植物做出相应的反应，从而影响植物的光形态建成
54.向性运动——是由光、重力等外界因素刺激而产生决定运动方向的，生长引起的不可逆高等植物运动
55.感性运动——是由外界刺激或内部时间机制而引起的、但不能决定运动方向的高等植物运动
56.生理钟——又称生物钟，指植物内生节奏调节的近似24小时的周期性变化节律。
57.春化作用——用低温促使植物开花的作用叫春化作用 58.光周期现象——植物对白天和黑夜的相对长度的反应
59.双重日长植物——花诱导和花形成两个过程很明显地分开，要求不同日常的植物 60.识别反应——花粉落在雌蕊柱头上能否正常萌发并导致受精，决定于双方的亲和性，即它们之间的“认可”和“拒绝”称为识别反应
61.蒙导花粉——亲和的花粉可使柱头不能识别不亲和的花粉，被称为蒙导花粉
62.单性结实——有些植物的胚珠不经受精，子房仍然能继续发育成为没有种子的果实，称为单性结实
63.休眠——种子在合适的萌发条件下仍不萌发的现象
64.骤跃变型结实——指在成熟期出现呼吸跃变现象的果实。65.非骤变型果实——指在成熟期不出现呼吸跃变现象的果实 66.后熟——种子在休眠期内发生的生理、生化过程 67.层积处理——对一些蔷薇科和松柏科植物的种子，用湿砂将种子分层堆积在低温处1至3个月，经后熟才萌发的催芽技术
68.衰老——衰老是植物生命周期的最后阶段，是成熟的细胞，组织，器官和整个植株自然地终止生命活动的一系列机能衰败过程
69.脱落——脱落是指有机体发育过程中，在结构和生理功能方面出现进行性的衰退变化，其特点是有机体对环境的适应能力逐渐减弱，但不立即死亡
70.逆境——又称胁迫，指对植物生存和生长不利的各种环境因素的总称
71.抗逆性——植物对逆境的抵抗和忍耐能力，简称为抗性。抗性是植物对环境的一种适应性反应，是在长期进化过程中形成的。
72.交叉抗性——植物经历了某种逆境后，能提高对另一些逆境的抵抗能力，这种对不同逆境间相互适应作用，称为交互适应。73．渗透调节——植物细胞通过主动增加溶质降低渗透势，增强吸水和保水能力，以维持正常细胞膨压的作用。
74．冻害——温度下降到零度以下，植物体内发生冰冻，因而受伤甚至死亡的现象
75．冷害——零度以上低温，虽无结冰现象，但能引起喜植物的生理障碍，使植物受伤甚至死亡的现象
76．逆境蛋白——由逆境因素和紫外线等诱导植物体内形成新蛋白质（酶）。
77．大气干旱——空气极度干燥，相对湿度极低，根系吸水赶不上蒸腾失水，因而发生水分亏缺现象。
78.钙调素——一种耐热的球蛋白
79.临界暗期——引起短日照植物或长日照植物成花反应的最低或最高暗期极限称为临界暗期
80.短日植物——每日在短于一定临界日长的日照下才开花的植物
81.衬质势——是细胞胶体物质亲水性和毛细管对自由水束缚而引起水势降低的值（以负值表示）
82.代谢源——指叶子，它制造出光合产物并输送到其他器官
83.生长的相关性——植物在生长过程中各部分间的相互制约与协调现象
简 答 题 01.植物体内水分存在状态与代谢活力有何关系？
答：自由水参与各种代谢作用，它的含量制约着植物的代谢强度，自由水占总含水量的百分比越大，植物代谢越旺盛；束缚水不参与代谢作用，但植物要求低微的代谢强度去度过不良的外界条件，因此，束缚水的含量与植物抗性大小有密切关系。02.简述蒸腾作用的部位及生理意义？
答：蒸腾作用的部位有（1）植物幼小时，暴露在地面上的全部表面都能蒸腾；植物长大后蒸腾作用发生在茎枝上的皮孔和叶片。蒸腾作用的生理意义有（1）它是植物水分吸收和运输的主要动力；（2）它对吸收矿物质和有机物以及它们在植物体内的运输都是有帮助的；（3）它能降低叶片的温度。
03.根系吸水的方式、动力？ 答: 根系吸水的途径有三条：（1）质外体途径；（2）跨膜途径；（3）共质体途径.。根系吸水的动力有根压和蒸腾拉力。04.气孔开关假说有哪些？
答：气孔开关假说有（1）淀粉—糖转化学说；（2）无机离子吸收学说；（3）苹果酸生成学说
05．植物必需的矿质元素应具备哪些条件？ 答：植物必需的矿质元素应具备下列条件：（1）如缺乏该元素，植物生育发生障碍，不能完成生活史（2）除去该元素，则表现出专一的缺乏症，而且这种缺乏症是可以预防和恢复的；（3）该元素在植物营养生理上表现为直接的效果。06．植物吸收矿质元素的方式？ 答：（1）离子通道运输；（2）载体运输；（3）离子泵运输；（4）胞饮作用。06． 植物吸收矿质元素的特点？ 答：植物吸收矿质元素的特点有：（1）一方面与吸水有关系，另一方面又有其独立性；（2）对不同离子的吸收还有选择性；〔3〕会出现单盐毒害和离子对抗现象。07． 试述植物细胞对矿质元素的被动吸收和主动吸收的机理？ 答：植物细胞对矿质元素的被动吸收 08． 02抑制光合作用的原因？ 答：（1）加强氧与CO2对RUBP的结合竞争，提高光呼吸速率。（2）氧能与NADP+竞争接受电子，使NADPH合成量减少，使碳同化需要的还原能力减少。（3）氧接受电子后形成的超氧阴离子会破坏光合膜。（4）在强光下氧参与光合色素的光氧化，破坏光合色素 09． 作物为什么会出现午休现象？
答：植物种类不同，生长条件不同，造成光合午休的原因也不同。有以下几种原因：（1）中午水分供给不足，气孔关闭。（2）CO2供应不足。（3）光合产物淀粉等来不及分解运走，累积在叶肉细胞中，阻碍细胞内CO2的运输。（4）中午时的高温低湿降低了碳同化酶的活性。（5）生理钟调控。
10． C4比C3植物的光呼吸低，简述原因？ 答：光呼吸是由RUBP加氧酶催化RUBP加氧造成的。C4植物在叶肉细胞中只进行由PEP羧化酶催化的羧化活动，且PEP羧化酶对CO2亲和力高，固定CO2的能力强，在叶肉细胞形成C4二羧酸之后，再转运到维管束鞘细胞，脱羧后放出CO2，就起到了“CO2泵”的作用，增加了维管束鞘细胞中的CO2浓度，抑制了鞘细胞中的Rubisco的加氧活性并提高了它的羧化活性，有利于CO2的固定和还原，不利于乙醇酸的形成，不利于光呼吸进行，所以C4植物光呼吸值很低。而C3植物，在叶肉细胞内固定CO2，叶肉细胞的CO2/O2的比值低，此时，RUBP加氧酶活性增强，有利于光呼吸的进行，而且C3植物中RUBPP羧化酶对CO2 亲和力低，此外，光呼吸是释放的CO2不易被重新固定。
11． 把大豆和高粱放在同一密闭照光室内，一段时间后会出现什么现象，为什么？ 答：大豆首先死亡，一段时间后高粱也死亡。因为大豆是C3植物，它的CO2补偿点高于C4植物高粱。随着光合作用的进行，室内的CO2浓度越来越低，当低于大豆的CO2补偿点时，大豆便没有净光合只有消耗，不久便死亡。此时的CO2浓度仍高于高粱的CO2补偿点，所以高粱仍然能够进行光合作用，当密闭室内的CO2浓度低于高粱的CO2补偿点时，高粱便因不能进行光合作用而死亡。
12． 长时间无氧呼吸，植物为什么会死亡？
答：长时间无氧呼吸，植物会死亡的原因有三点：（1）无氧呼吸产生酒精，使细胞只的蛋白质发生变性；（2）无氧呼吸利用葡萄糖产生的能量很少，植物要维持正常生理需要，就要消耗更多的有机物；（3）没有丙酮酸氧化过程，许多由这个过程的中间产物形成的物质就无法继续合成。
13． 氧为何抑制糖酵解和发酵？
答：糖酵解和发酵都是糖类物质在无氧的情况下分解成不彻底的氧化产物，同时释放能量的过程。而氧可以降低糖类的分解代谢和减少糖酵解产物的积累，在氧气充足的情况下，产生较多的ATP和柠檬酸，降低ADP和Pi的水平。ATP和柠檬酸是负效应物，抑制磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的活性，糖分分解就慢，糖酵解和发酵也就受到抑制。
14． 试述收缩蛋白学说与细胞质泵动学说的主要内容？这两个学说主要解决了运输方面的哪些问题？
答：筛分子内腔的细胞质呈几条长丝，形成胞纵连束，纵跨筛分子，在束内呈环状的蛋白质反复地有节奏的收缩和张弛，就产生一种蠕动，把细胞质长距离泵走，糖分就随之流动的学说被称之为细胞质泵动学说。而收缩蛋白学说认为，筛分子的内腔有一种由微纤丝相连的网状结构。微纤丝是由具收缩能力的P蛋白收缩丝所组成。微纤丝一端固定，一端游离于筛管细胞质内，微纤丝似鞭毛一样颤动。收缩蛋白的收缩与伸展可能是同化产物沿筛管运输的动力，它影响原生质的流动。这两个学说主要解决了植物同化产物在筛分子内腔的运输问题。15． 何为压力流动学说？实验依据是什么？有哪些不足之处？
答：德国E.Munch1930年提出的学说，主张筛管液流是靠源端和库端的膨压差建立起来的压力梯度来推动的。实验依据有：利用快速冷冻和固定技术的试验证明P蛋白沿着长轴分布在细胞壁附近，而不会堵塞开放的筛孔；Knoblauch等利用共聚焦激光扫描显微镜，加入与蔗糖结合的绿色荧光染料，观察到蚕豆叶片的韧皮部是活的，有运输蔗糖的功能。该学说的不足之处在于不能解决单一筛管能否同时进行双向运输蔗糖的问题，且对于裸子植物同化产物的长距离运输不适用。16． 为什么“树怕剥皮”？
答：有机物的运输主要是由韧皮部担任的，如被剥皮，则同化产物的运输受阻，而且剥口下端也长不出枝条，时间一长，根系原来贮存的有机物消耗完毕，根部就会饿死，从而导致整个植株的死亡。
17． 束缚态的生长素在植物体内有何作用？
答：束缚态的生长素在植物体内的作用可能有下列几个方面：（1）作为贮藏形式；（2）作为运输形式；（3）解毒作用；（4）调解自由生长素含量。18． 乙烯在生产上有何作用？
答：乙烯在生产上的作用有（1）果实催熟和改善品质；（2）促进次生物质排出；（3）促进开花
19． 乙烯诱导果实成熟原因是什么？ 答： 乙烯与质膜的的受体结合之后，能诱发质膜的透性增加，使氧气容易通过质膜进入细胞质，诱导水解酶的合成，使呼吸作用增强，分解分解有机速度加快，达到促使果实成熟的作用。
21． 种子萌发必需的外界条件有哪些？第一、三阶段靠什么吸水？种子萌发时吸水可分为哪三个阶段？
答：种子萌发必须的外界条件有：（1）足够的水分；（2）充足的氧气；（3）适当的温度；（4）某些植物种子的萌发还受光的影响。种子萌发时吸水可分为三个阶段：（1）急剧的吸水；（2）吸水的停止；（3）胚根长出后的重新迅速吸水。第一阶段细胞主要靠吸胀性吸水；第三阶段是靠渗透性吸水。
24．土壤中缺氮时为什么根冠比会增大？
答：氮素是由根系从土壤中吸收后再供应地上部分的。因此，土壤缺氮是对地上部分生长的影响就比对根的影响大。另外，缺氮时地上部分蛋白质合成减少，积累的糖分多，这样对根系供应的糖分也增多，促进了根系的生长，故使根冠比值增大。25．光敏色素作用的模式主要有哪两类假说？ 答：（1）膜作用假说认为光敏色素能改变细胞中一种或多种膜的特性或功能而参与光形态建成，从而引发一系列的反应。显然光敏色素调控的快速反应都与膜性质的变化有关；（2）基因调节假说认为光敏色素对光形态建成的作用，是通过调节基因表达来实现的。一般认为光敏调空的长期反应与基因表达有关。
26． 高山上的树木为什么比平地长得矮小？ 答：（1）高山上水分较少，土壤也较瘠薄，肥力较低，造成植物因缺少水、肥而生长不良。（2）气温也较低，且昼夜温差大，夜间温度过低，造成植物代谢缓慢，因而表现出植生长缓慢。（3）高山风力较大，使植株受到的机械刺激多，体内激素平衡不利植物生长发育。（4）高山顶上空气中灰尘较少，光照较强，紫外光也较多，由于强光特别是紫外光抑制植物生长，因而高山树木生长缓慢而矮小。
27． 种子萌发时，有机物质发生哪些生理、生化变化？ 答：种子萌发时，有机物质发生的生理、生化变化有：（1）淀粉的转化。淀粉在淀粉酶、麦芽糖酶作用下转变成葡萄糖（或磷酸葡萄糖）。（2）脂肪的转化。脂肪在脂肪酶作用下转变为甘油和脂肪酸，再进一步转化为糖。（3）蛋白质的转化。胚乳或子叶内贮藏的蛋白质在蛋白质酶和肽酶的催化下，分解为氨基酸。（4）植酸的动员。植酸在植酸酶的作用下分解为肌醇和磷酸。
28．生物钟有何特征？ 答：（1）需要光暗交替作为启动信号，一旦节奏启动了，就可以在稳恒条件下持续一段时间。（2）具有内生的近似昼夜节奏，约为22小时至28小时。（3）生物钟有自调重拨功能。若日夜颠倒，则可自行调整，而适应于新的环境节奏。还可重新拨回。（4）生物钟的周期长度对温度钝感。
29．植物产生向光性弯曲的原因是什么？
答：植物的向光弯曲是由于向光面的生长与背光面生长的不均匀所致。究其原因目前主要有两种一种观点认为由于生长素分布不均匀，单方向的光照会引起生长素向背光面移动，以至引起背光面生长素含量增多，而较高浓度的生长素促进茎细胞生长，因而背光面比向光面生长快，而表现向光弯曲。生长素向背光面移动的原因可能与光照引起器官尖端的不同部位产生电势差有关。向光面带负电荷、背光面带正电荷，弱酸性的生长素阴离子被正电荷吸引移向背面。另一种观点认为是由于抑制物质分布不均匀而造成的。30．常言道：“根身叶茂”是何道理？ 答：所谓“根身叶茂”，有以下理由：（1）地上部分生长需要的水分和矿物质主要是由根系供给的。另外根系还能合成多种氨基酸、细胞分裂素等供应地上部分。因此，根发育得好，对
地上部分生长有利。（2）植物地上部分对根的生长也有促进作用，叶片中制造的糖类、生长素、维生素等也可以供应根，以利于根的生长。因此，地上部分长不利，根系也长不好，反之，根系生长不好，地上部分也不可能生长的好，它们是相互依赖相互促进的。31．含羞草受震动后叶子下垂的机理是什么？
答：含羞草受震动后几秒钟内叶子就下垂，机理是，由于复叶叶柄基部的叶枕中细胞紧张度发生变化的结果。在解剖结构上，叶枕的上半部的细胞胞壁较厚，而下半部组织较薄，下半部组织的胞间隙也比上半部的大。在震动刺激下，叶枕下半部细胞的透性增大，水分和溶质由液泡中透出，进入胞间隙，因此下半部组织细胞的紧张度下降，组织疲软，而上半部组织此时仍保持紧张状态，复叶下垂。
32． 植物生长的最适温度和协调温度有何不同？
答：植物生长的最适温度是指植物生长最快的温度，这个温度对于植物健壮生长来说，往往不是最适宜的。因为植物生长最快时，物质较多用于生长，消耗太快，没有在较低温度下生长那么结实。在生产实践上培育健壮的植株，常要求在比生长最适温度略低的温度，即“协调的最适温度”下进行。
33． 什么是春化作用？如何证明植物感受低温的部位是茎间生长点？
答：春化作用就是用低温促使植物开花的作用。将芹菜种植在高温的温室中由于得不到花分化所需要的低温，不能开花结实。但是以橡皮管缠绕芹菜茎的顶端，管内不断通过冰冷的水流，使茎的生长点获得低温，就能通过春化，可以开花结实。反之，将芹菜种植在冰冷的室内，而使茎生长点处于高温下，也不能开花结实。34． 赤霉素与春化作用有何关系？
答：小麦、油菜、燕麦等多种作物经过春化处理后，体内赤霉素含量增多。一些需要春化的植物未经低温处理，如施用赤霉素也能开花。这表明赤霉素可以某种方式代替低温的作用。35． “南麻北种”有何利弊，为什么？
答：麻类是短日植物，南种北引可推迟开花，营养生长期长，使麻杆生长较长，提高纤维产量和质量，但因为北方地区较难满足短日作物麻类成花所需的短日条件，因而南麻北种会延迟开花，种子不能及时成熟。若在留种地采用苗期短日处理方法，可解决留种问题。36．举例说明光周期在农业生产实践中的应用？ 答：（1）光周期的人工控制，可以促进和延迟开花；（2）在温室中延长或缩短日照强度，控制作物花期，可解决花期不遇问题，对杂交育种也将有很大的帮助；（3）引种。37． 种子成熟时主要发生哪些生理、生化变化？ 答：种子成熟时主要发生的生理、生化变化有：（1）从植株营养器官转运过来的可溶性低分子化合态养料被逐渐转化为不溶性高分子化合态物质积累起来；（2）呼吸作用由强到弱，由高到低；（3）种子内的内源激素由少变多，再由多变少；（4）种子的含水量随着种子的成熟而逐渐减少。
38． 在逆境中，植物体内积累脯氨酸有何作用？ 答：在逆境中，植物体内积累脯氨酸的作用有：（1）作为渗透调节物质，用于保持胞质溶胶与环境的渗透平衡，防止水分散失；（2）保持膜结构的完整性。39． 外施ABA提高植物抗逆性的原因？ 答：外施ABA提高植物抗逆性的原因有：（1）减少膜的伤害；（2）减少自由基对膜的破坏；（3）改变体内代谢；（4）减少水分丧失。
40． 零上低温对植物组织的伤害大致可分哪几个步骤？ 答：零上低温对植物组织的伤害大致可分为两个步骤：第一步是膜相的改变，第二步是由于膜损坏而引起代谢紊乱，导致死亡。41． 提高作物抗旱性的途径？
答：（1）播种前对萌动种子进行干旱锻炼；（2）利用根冠比的特征选择出不同抗旱性的作物品种，或作为抗旱育种的亲本，加速抗旱育种的步骤；（3）控制土壤水分；（4）施用植物激素。
论 述 题：
1．病毒对在植物生理生化的影响如下：①水分平衡失调，许多植物感病后发生萎焉或猝倒。②呼吸作用加强。染病组织一般比健康组织的呼吸速率可增加许多倍，且氧化磷酸化截偶联，大部分能量以热能形式释放出去，所以染病组织的温度大大升高。③光合作用下降。染病后，叶绿体破坏，叶绿体含量减少，光合速率显著下降。④生长改变。有些植物染病后由于IAA、GA增加，引起植物徒长，偏上生长，形成肿瘤等。
2．作物抗病的生理基础是：①加强氧化酶（抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶）的活性，可以分解毒素，促进伤口愈合，抑制病菌水解酶活性。②植物染病后产生过敏性组织坏死，使有些只能寄生于活细胞的病原菌死亡。③产生抑制物质。如马铃薯植株产生绿原酸，可以防止黑疤病菌的感染，亚麻的根分泌一种含氰化物的物质，抑制微生物的呼吸。④作物还具有免疫反应。即在病菌侵入时，体内产生某种对病原菌有毒的化合物（多为酚类化合物）防止病菌侵染。此外，作物内还含有一些化学物质，如生物碱、单宁、苦杏仁苷等，对侵入的病菌有毒杀作用或防御反应，能减轻病害。3．植物渗透调节物质可分为两大类：一是由外界引入细胞中的无机离子，包括钾、钠、钙、镁、氯等；二是在细胞内合成的有机溶质，主要是蔗糖、山梨醇、脯氨酸、甜菜碱等。其主要生理功能包括： ⑴维持细胞膨胀压变化不大，利于其他生理生化过程进行；⑵维持气孔开放，以保证光合作用较正常的进行。
4．植物在逆境条件下合成的逆境蛋白有：⑴热激蛋白f，可以和受热激伤害后变性蛋白质结合，维持它们的可溶状态或使其恢复原有的空间构象和生物活性。热激蛋白也可以与一些酶结合成复合体，使这些酶的热失活温度明显提高；⑵低温诱导蛋白，亦称冷击蛋白，它与植物抗寒性的提高有关。由于这些蛋白具有高亲水性，所以具有诚少细胞失水和防止细胞脱水的作用；⑶渗条蛋白，有利于降低细胞的渗透势和防止细胞脱水，提高植物的抗盐性和抗旱性；⑷病程相关蛋白（PRs），与植物局部和系统诱导抗性有关。还能抑制真菌孢子的萌发，抑制菌丝生长，诱导与其他防卫系统有关的酶的合成，提高其抗病能力。5.植物器官脱落与植物激素有何关系？ 答：（1）生长素：实验证明，叶片年龄增长，生长素含量下降，便不能阻止脱落的发生。Addicott等提出脱落的生长素梯度学说，认为不是叶片内生长素的绝对含量，而是横过离层区两边的生长素的浓度梯度影响脱落。梯度大，即远轴端生长素含量高，不易脱落；梯度小时，即近端生长素含量高于或等于远轴端的量，则促进脱落。此外，已证明有些果实的自然脱落与生长素含量的降低也密切相关。在生长素产生少的时期，往往引起大量落果。（2）脱落酸：幼果和幼叶的脱落酸含量低，当接近脱落时，它的含量最高。主要原因是可促进分解细胞壁的酶的活性，抑制叶柄内生长素的传导。（3）乙烯：棉花子叶在脱落前乙烯生成量增加一倍多，感病植株乙烯适放量增多，会促进脱落。（4）赤霉素：促进乙烯生成，也可促进脱落。细胞分裂素延缓衰老，抑制脱落。2.北方小麦与南方小麦相比，哪个蛋白质含量高？为什么？
答：北方小麦蛋白质含量高。因为水分供应不良对淀粉合成的影响比对蛋白质的影响大。在小麦成熟期，北方雨量及土壤水分比南方少，所以北方小麦蛋白质含量高。3.导致脱落的外界因素有哪些？ 答：（1）氧浓度 氧分压过高过低都能导致脱落。高氧促进乙烯的形成，低氧抑制呼吸作用；（2）温度异常温度加速器官脱落。高温促进呼吸消耗。此外，高温还会引起水分亏缺，加速叶片脱落；（3）水分干旱缺水会引起叶、花、果的脱落。这是一种保护性反映，以减少水分散失。干旱会促进乙烯、脱落酸增加，促进离层形成引起脱落；（4）光照 光照弱脱落增加，长日照可以延迟脱落，短日照可以促进脱落；（5）矿质元素缺Zn、N、P、K、Fe等都可能导致脱落。
4．目前有关植物衰老机理的假说有哪些，并叙述自由基伤害假说的基本内容。
答：关于植物衰老机理的假说有三种：一是营养亏缺假说；二是植物激素调空理论；三是自由基伤害假说。自由基伤害假说是人体和动物衰老机理的众多学说之一。该学说认为衰老过程即氧代谢失调、自由基累积的过程。研究表明，植物细胞通过多种途径产生超氧阴离子自由基、羟自由基和过氧化氢、单线态氧等活性氧。同时，植物细胞本身具有清、清除自由基活性氧的酶保护系统和非酶保护系统。在正常情况下，细胞自由基活性氧的产生与清除处于动态平衡状态，自由基活性氧浓度很低，不会引起伤害。但在植物衰老劣变过程中，特别是处于干旱、高盐、SO2等逆境条件下，这种平衡遭到破坏，结果自由基活性氧的浓度超过了伤害”阈值“导致蛋白质、核酸的氧化破坏，特别是膜脂中不饱和双链酸最易受自由基的攻击发生过氧化作用；过氧化过程产生新的自由基，会进一步促进膜脂质过氧化，膜的完整性受到破坏，最后导致植物伤害或死亡。5.花粉管为什么能向着胚囊定向生长？ 答：一般认为这是由于花粉管的向化性运动所引起的。生长的花粉管从顶端到基部存在着由高到低的Ca2+浓度梯度。这种Ca2+梯度的存在有利于控制高尔基体小泡的定向分泌、运转与融合，从而使合成花粉管壁和质膜的物质源源不断地运到花粉管顶端，以保持顶端的极性生长。雌性生殖单位中的助细胞与花粉管的定向生长有关。棉花的花粉管在雌蕊中生长时，花粉管中的信号物质如赤霉素会引起一个助细胞的首先解体，并释放出大量的Ca2+，造成花柱与株孔间的Ca2+梯度，而Ca2+则被认为是一种向化性物质，因此，花粉管会朝Ca2+浓度高的方向生长，最后穿过株孔，进入胚囊。此外，花粉管可能有向电性生长。7.授粉后雌蕊中生长素含量剧增的只要原因是什么？
答：只要不是花粉带进去的，而是因为花粉中含有使色氨酸转变成吲哚乙酸的酶体系，花粉管在伸长过程中，能将这些酶分泌到雌蕊组织中去，因此，会引起花柱和子房形成大量生长素
8.影响植物花器官形成的条件有哪些？
答：1.内因(1)营养状况 营养是花芽分化以及花器官形成与生长的物质基础。其中的碳水化合物对花的形成尤为重要，C/N过小，营养生长过旺，影响花芽分化。(2)内源激素 花芽分化属内源激素的调控。2.外因(1)光照 光照对花器官形成有促进作用。在植物花芽分化期间，若光照充足，有机物合成多，则有利于花芽分化。此外，光周期还影响植物的育性。(2)温度 一般植物在一定的温度范围内，随温度升高而花芽分化加快。温度主要影响光和作用、呼吸作用和物质的转化及运输等过程，从而间接地影响花芽的分化。低温还影响减数分裂期花粉母细胞的发育，使其不能正常分裂。(3)水分 不同植物的花芽分化对水分的需求不同，如对稻麦等作物来说，孕穗期对缺水敏感，此时缺水影响幼穗分化；而对果树而言，夏季的适度干旱可提高果树的C/N比，反而有利于花芽分化。(4)矿质营养 缺氮，花器官分化慢且花的数量减少；氮过多，营养生长过旺，花的分化推迟，发育不良。在适宜的氮肥条件下，如能配合施用磷、钾肥，并注意补充锰、钼、硼等微量元素，则有利于花芽分化。
9.花粉和柱头之间的相互识别的机制是什么？
答：花粉的识别物质是外壁蛋白中的糖蛋白，它在花粉湿润后几秒钟内就迅速释放出来。而雌蕊的识别物质是柱头表面的亲水性蛋白质薄膜，它具有粘性，易于捕捉花粉。当亲和花粉落到柱头上时，花粉就释放出外壁蛋白并扩散入柱头表面，与柱头表面蛋白质膜相互作用，认可后花粉管伸长并穿过柱头，沿花柱引导组织生长并进入胚囊受精。如果是不亲和的花粉则不能萌发，或花粉关生长受阻，或柱头乳突细胞产生胼胝质阻碍花粉管穿过柱头
10.如何用实验证明植物感受光周期的部位，以及光周期刺激可能是以某种化学物质来传递的？ 答：植物在适宜的光周期诱导后，成花部位是茎端的生长点，而感受光周期的部位却是叶片。这一点可以用对植株不同部位进行光周期处理后观察对开花效应的情况来证明：①将植物全株置于不适宜的光周期条件下，植物不开花而保持营养生长；②将植物全株置于适宜的光周期下，植物可以开花；③只将植物叶片置于适宜的光周期条件下，植物正常开花；④只将植物叶片置于不适宜的光周期下，植物不开花。用嫁接实验可证明植物的光周期刺激可能是以某种化学物资来传递的：如将数株短日植物苍耳嫁接串联在一起，只让其中一株的一片叶接受适宜的短日光周期诱导，而其它植株都在长日照条件下，结果数株苍耳全部开花。
第二篇：生化考研重点知识总结
生化考研重点知识总结
第一章 单糖
①多糖与碘显色，至少需要的葡萄糖残基数：6 ②唾液淀粉酶激活剂：Cl
③几个典型非还原糖：蔗糖、糖原、淀粉 ④形成N-糖肽键的单糖或衍生物是：
第二章 油脂
①几个非饱和脂肪酸双键数： ⑪油酸：1 ⑫亚油酸：2 ⑬亚麻酸：3 ②人不能自身合成的必须脂肪酸： 亚油酸、亚麻酸 ③四种脂类转运脂蛋白：
⑪CM：乳糜微粒，转运外源性三酰甘油酯 ⑫VLDL：极低密度脂蛋白，转运内源性三酰甘
油酯
⑬LDL：低密度脂蛋白，转运内源性胆固醇
⑭HDL：高密度脂蛋白，转运外源性胆固醇
第三章 氨基酸与蛋白质 ①几种主要氨基酸及三字母缩写 ⑪两特殊：Pro、Gly ⑫芳香：酪（Tyr）色（Trp/Try，吸光最强）苯（Phe）
⑬八种必需氨基酸：甲携来一本亮色书，Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr ⑭侧链为羟基氨基酸：苏（Thr）丝（Ser）酪（Tyr）⑮酸性氨基酸：天（Asp）谷（Glu）※对应两酰胺：Asn、Gln ⑯碱性氨基酸：赖（Lys）精（Arg）组（His）⑰其它：丙氨酸（Ala）
-②PI ⑪PI的计算：PI=（PK1+PK2）/2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2 ⑫PH的计算：PH=PK1+Lg（R/R）=PK2+Lg（R/R）
⑬PH =7的水中溶蛋白，PH=6，则该蛋白PI<6：蛋白溶后PH下降为6，表明蛋白的COOH
+--电离出H，则产生了R，PH=6>PI 时有R ③蛋白二级结构
⑪α螺旋：Sn=3.613，存在Pro时不形成α螺旋，右手螺旋 ⑫β折叠：同/反向，肽键中H与O成氢键，轴距0.35nm ⑬β转角：转角处为Gly
④超二级结构：无规卷曲、结构域
⑤三级结构：作用力（二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力）⑥蛋白结构分析
⑪N端分析法：FDNB（Sanger）、PITC（Edman）、DNS-Cl（丹磺酰氯）、氨肽酶法 ⑫C端分析法：羧肽酶法、无水肼解法 ※羧肽酶A：不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键；羧肽酶B：能水解C端为Lys、Arg的肽键；C端倒数第二位是Pro时，A、B都不能水解 ⑬打开二硫键：还原法（巯基化合物，碘乙酸保护）、氧化法（过甲酸）
⑭专一切断：胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽键）；CNBr（Met-COOH肽键）；胰凝乳蛋白酶（）； ⑦显色反应
⑪Follin酚：蓝色，酚基（Tyr）、吲哚基（Trp），组分（CuSO4+磷钼酸）⑫Millon：红色，酚基（Tyr），组分（HgNO3+Hg（NO3）2）⑬坂口反应：红色，胍基（Arg），组分（α萘酚，NaClO）⑭黄色反应：黄色，芳香氨基酸，组分（浓HNO3）⑮双缩脲反应：紫红色，肽键，多肽，组分（NaOH+CuSO4）⑯乙醛酸反应：紫色，吲哚基（Trp）⑧几种重要氨基酸
⑪提供活性甲基的：S-腺苷Met ⑫形成N-糖肽键的：Asp ⑬胶原蛋白中含量高的氨基酸：Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys
+
-⑨蛋白分离纯化技术：透析、超滤；密度梯度离心；凝胶过滤；PI法、盐析、有机溶剂法；电泳、离子交换；吸附层析；亲和层析 ※凝胶过滤大分子先出，凝胶电泳相反：机理 △分子运动速度决定因素：大小、电荷量、形状 ※蛋白离子交换层析与洗脱：
※凝胶电泳三效应：电荷、分子筛、浓度效应 ⑩蛋白含量测定
⑪测N：凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光 ⑫测M：沉降离心、凝胶过滤（凝胶排阻层析）、SDS-PAGE ※凯氏定氮：HNO2反应，生成的N2中氨基酸占1/2 ⑾其它
⑪分离二硫基的肽段可用：SDS-PAGE ⑫几个主要氨基酸的PI值： ⑬几种重要蛋白：
⑭镰刀贫血病：Glu→Val，第6位
⑮与烷化剂（碘乙酸）反应的氨基酸：Cys（半胱氨酸）
第四章 酶学
①酶活化中心组成：结合部位、催化部位
②计算：活力单位（IU、Kat）、比活力（IU/mg）、转化数/转化周期、米氏方程 ③各可逆抑制作用的动力学特点：Km、Vmax ※几个抑制作用：竞争抑制（丙二酸对琥珀酸脱氢酶）；有有机磷（与丝氨酸羟基共价不可逆）；CO、CN（作用于Cytaa3）；不可逆抑制（重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO）④酶促反应初速度与[E]、T有关
⑤以“三点结合”模型作用的酶：甘油激酶 ⑥酶的专一性
⑪专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶：
⑫以O2为直接氢受体的氧化酶：VC氧化酶、细胞色素氧化酶 ⑦别构酶
⑪两独立功能部位：活性中心、变构中心 ⑫动力学曲线：S型，其它为双曲线 ⑬具有效应：协同效应、变构效应
※典型代表—血红蛋白：协同效应、波尔效应、变构效应 ⑧酶分离纯化
⑪要求：纯化倍数高、回收率高 ※纯化倍数=比活力/纯化前总比活力
回收率=活力单位数/纯化前活力单位数 ⑫方法：同蛋白质
⑨竞争性抑制剂：增[S]可减弱抑制作用
⑩患尿黑酸症的病人是由于：缺少尿黑酸氧化酶（尿黑酸氧化酶遗传缺陷）
第五章 核酸
①反向互补配对：ACG-CGT（U）
②N-苷键：Ψ（C1‘-C5），嘌呤（N9-C1‘），嘧啶（N1-C1’）③SnRNA：核仁不均一RNA，功能（促进转录、）④核酸分离技术
⑵ 凝胶电泳：三效应、分子运动速度决定因素 见蛋白质 ⑫离子交换层析：阳离子交换层析，核苷酸脱下顺序：U→G→C→A 阴离子交换层析，核苷酸脱下顺序：C→A→U→G ⑶ 亲和层析：可用亲和层析法分离的核酸：mRNA（PolyA尾）
⑤DNA测序三法：加减法（Sanger、1975），化学断裂法，双脱氧终止法（Sanger、1977、原理）⑥不能形成两性离子的核苷酸是UMP：原因 ⑦cNMP ⑪最重要的cNMP：cAMP、cGMP ⑫cAMP：第二信使
⑭cAMP分子内有：环化的磷酸二酯键 cAMP与cGMP：生物作用并不是完全相反
第六章 分子生物学与基因工程 ①基因组学
⑪启动子组成3部分：识别部位（-
35、CG/CAAT），结合部位（-
10、TATA），转录起始点 ⑫高度重复序列：卫星DNA、小卫星DNA、微卫星DNA ⑬原核生物基因重叠类型：
⑭基因家族按特点分三类：简单多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家
族
基因家族按组成分三类： ②DNA复制
⑪DNA复制方式：线性（眼型），环状【θ（大肠杆菌）、滚环（病毒质粒）、D型（线粒
体、叶绿体）】
⑫DNA复制需引物：转录不需引物
※原核DNA聚合酶功能：损伤修复、校正、合成DNA ③基因工程酶
⑪RNase:RNaseA(嘧啶3’→5’)、RNaseT1（G的3’→5’）、RNaseT2（A的3’→5’）⑫DNA连接酶所需能量：原核ATP、真核NAD+ ⑬转移水解DNA-RNA中的RNA的酶：RNaseH、逆转录酶（有RNaseH活性）⑭牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物：5’磷酸切开，产生3’单磷酸核苷 ⑮蛇毒磷酸二酯酶水解RNA所得产物：3’-OH切开，产生5’单磷酸核苷
⑯核酸合成酶：DDDP（依赖DNA的DNA聚合酶）、RDDP（依赖RNA的DNA聚合酶）、DDRP（依赖DNA的RNA聚合酶）⑰RNAPol2：RNAPolB，合成hnRNA，分布在核质中 ⑱RNA用强碱水解产生：2’-核苷酸、3’-核苷酸混合物
⑲限制内切酶切割特点：4-8bp、6bp主要，成黏性、平齐末端，成回文序列，甲基化难切 ④tRNA结构
⑪含稀有碱基最多：D（二氢尿嘧啶）、ψ（假尿嘧啶）、I（次黄嘌呤）⑫四环四臂五区：D臂、TψC臂、氨基酸臂（受体臂）、反密码子臂 ⑬二级：三叶草 ⑭三级：倒L ⑤基因表达
⑪DNA重组过程中DNA连接四方式：粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加
DNA接头连接法
⑫转位：三类转位因子【（插入序列IS）、转座子（Tn）、可转座噬菌体】，转位后遗传
效应（突变、产生新基因、染色体畸变）
⑬转录：转录5’端常见起始核苷酸是G、A，原核终止子在终止位点前有PolyU ⑭翻译：参与肽链延伸的因子（EF-Tu、EF-TS、移位酶/G因子），肽基转移酶催化组分（23SrRNA），蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解 ⑮转录抑制剂：利福平、利迪链霉素、放线素D、α-鹅膏蕈碱
⑯翻译抑制剂：抗生素（氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素）※机理 干扰素（使起始因子eIF2磷酸化失活），毒素（抑制真核肽链延长）⑥基因工程
⑪基因工程载体：必备条件（自主复制、有标志基因便于筛选、易引入受体细胞、酶切位
点少、M大可携带大片基因）
常用载体（质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体改造而来）⑫DNA文库：含某种生物体全部被转录成mRNA的所有基因序列 ⑦密码子
⑪起始密码子：原核（AUG、GUG、UUG，对应fMet）真核（AUG，对应Met）※起始tRNA：tRNAMet、tRNAfMet ⑫终止密码子：UAA、UAG、UGA ⑬无义密码子：UAA、UAG、UGA ⑭线粒体中三种特殊密码子：UGA-色氨酸
⑮原核RF1识别的密码子：UAA、UAX ※RF2识别的密码子：UAA、UGA ⑯密码子性质：不重叠、特殊性、通用性、简并性、连续性、摆动性 ※摆动性：A-U，U-A、G，C-G，G-C、U，I-A、U、C ⑧其它
⑪SnRNA功能：RNA成熟加工、与染色质结合、调节基因活性 ⑫多拷贝基因有：组蛋白基因、⑬3种印迹法对应检测对象：S-DNA、N-RNA、W-Pro ⑮Tm的影响三因素：C三G、盐浓度（Na+）、DNA均一性（均一→窄）Tm=（C+G）%×0.41+69.3 第七章 维生素与激素 ①几种重要酶的辅酶
⑪脱羧酶：α酮酸脱羧酶（TPP/VB1）、氨基酸脱羧酶（磷酸吡哆醛（VB6）※磷酸吡哆醛：氨基酸脱羧酶、转氨酶的辅酶
⑫以FAD为辅酶的酶：二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶A脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体α磷酸甘油脱氢酶 ⑬羧化酶的辅酶：生物素（VB7）⑭VB12：钴胺素（参与甲基转移）⑮氧化还原酶的辅酶：NAD+ ⑯以NADP为辅酶的酶：苹果酸酶、6-p-G脱氢酶 ⑰以FAK为辅酶的酶：脂酰辅酶A脱氢酶 ②几种特定功能的维生素 ⑪凝血维生素：VK，脂溶 ⑫抗血维生素：VC，水溶
⑬含A的维生素：NAD+、NADP、FAD、CoASH ※VD：
体内活性最高的VD是：1,25-二羟基胆钙化醇[1,25-（OH）2D3] 两种VD原：VD3（7-脱氢胆固醇），VD2（麦角固醇）VD3的形成：胆固醇→7-脱氢胆固醇→VD3 ③胰岛素等激素的受体是：
④含N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由G蛋白介导实现的 ⑤蛋白质类激素受体位于：细胞质膜上 ⑥类固醇激素受体位于：细胞内 第八章 生物氧化
①肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是：磷酸肌酸（IP3）
②高能化合物有：磷酸肌酸、1,3-二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）、③生物合成中主要的还原剂；NADPH，来源于HMS（磷酸戊糖途径/磷酸己糖旁路）
④生物氧化过程中，ATP生成方式：底物水平磷酸化、氧化磷酸化 ⑤线粒体的嵴：外表面与基质接触，含有氧化磷酸化组分 ⑥ATP合成酶
⑪F0F1-ATPase是：催化ATP合成的酶形式，一种膜结合复合物，单独存在时没ATP酶活性 ⑫F0：含H+通道 ⑦ATP合成机理
⑧细胞质脱下的一对氢进入线粒体的三方式：异柠檬酸穿梭、苹果酸穿梭、甘油磷酸穿梭 ⑨丙氨酸脱氢酶系的辅因子：TPP（VB1）、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+
丙氨酸脱氢酶系的酶：丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶 ⑩醛缩酶的底物是：F-1,6-2P ⑾在TCA、有氧呼吸链中产生的ATP最多的是：α-酮戊二酸→琥珀酸 第九章 糖代谢 ㈠糖酵解 ①部位：胞液
②过程：葡萄糖、糖元转变为丙酮酸 ③三关键酶：
⑪己糖激酶：包括（葡糖糖激酶、果糖激酶），不受ATP/AMP的调节
⑫磷酸果糖激酶：限速，主要激活剂（2,6-二磷酸果糖），抑制剂（ATP、柠檬酸）⑬丙酮酸激酶：受ATP/AMP的抑制 ④产能：2ATP ⑤醛缩酶的底物：F-1，6-P2（1，6-二磷酸果糖）
※糖代谢中既催化脱氢又催化脱羧的两种酶：异柠檬酸脱氢酶、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 ㈡糖的有氧氧化 ①丙酮酸→乙酰辅酶A： ⑪部位：线粒体内膜
⑫丙酮酸脱氢酶系：3酶（丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶）
5辅（TPP（VB1）、CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、Mg2+）
②TCA循环：柠檬酸循环、Krebs循环
⑪调节TCA循环运转最主要的酶：异柠檬酸脱氢酶（限速）、α-酮戊二酸脱氢酶系 ⑫部位：线粒体基质、内膜
⑬酶：柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶（限速）、α-酮戊二酸脱氢酶系 ③1分子葡萄糖有氧氧化产生ATP数：36（38）=2+6（4）+6+24 ④草酰乙酸来源三途径：苹果酸酶和苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸丙酮酸脱羧酶 ㈢磷酸戊糖途径、磷酸己糖旁路HMS ①核糖的分解途径是：HMS ②生物合成中除ATP供能外 ⑪合成糖还需：UTP ⑫合成脂肪还需：GTP ⑬生物合成的还原力是NADPH，来源是HMS ※反应部位总结 糖酵解（EMP）：胞质 TCA：线粒体基质、内膜 氧化磷酸化：线粒体内膜 ㈣糖元代谢
①合成糖元时，葡萄糖先活化成：UDPG ②植物合成淀粉时需：ADPG ③合成蔗糖需：UDPG、6-P-G ㈤糖异生 第十章 脂代谢 ㈠三酰甘油代谢 ①分解代谢 ⑪β-氧化：
反应部位：线粒体基质
产物：偶数碳（乙酰CoA）、奇数碳（几个乙酰CoA+1个丙酰CoA）反应过程：二步脱氢（生成1FADH2+1NADH）、产ATP（5个）⑫饱和脂肪酸分解 ※酮体
生成部位：肝内
成分：乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮 利用部位：肝外，脑、肌 ⑬不饱和脂肪酸氧化分解：
两特殊酶：顺-反烯酯酰CoA异构酶、顺-反-β羟酯酰CoA异构酶 1分子软脂酸（16C）彻底氧化分解成CO2、H2O生成ATP数： ②脂肪酸合成
⑪脂肪酸合成代谢还原力是NADPH，来源是HMS ⑫催化胞液脂肪酸合成的限速反应由乙酰CoA羧化酶催化 ⑬酰基载体为ACP，β-氧化中酰基载体是乙酰CoA ㈡磷脂代谢
①合成磷脂所需能量来自：CTP ㈢胆固醇代谢
①在体内可直接合成胆固醇的化合物是：脂酰CoA 第十一章 氨基酸与蛋白质代谢 ①几种氨基酸
⑪生酮氨基酸：Leu、Lys ⑫生糖氨基酸：除Leu、Lys外的
⑬生酮兼生糖氨基酸：Phe、Tyr、Trp、Thr、Ile、Lys ⑭可转变为乙酰CoA的氨基酸： ⑮能与糖链发生糖基化的氨基酸： ②脱氨基
⑪氧化脱氨基：L-Glu ⑫联合脱氨基：组织中
⑬嘌呤核苷酸循环：骨骼肌、心肌中
③直接排氨的动物：水生动物（鱼）、原生动物 ④氨的代谢
⑪氨的储存与转运： 储存方式：
转运方式：丙氨酸-葡萄糖循环、谷氨酰胺-谷氨酸循环
※骨骼肌中脱氨基产生的氨通过什么途径转入肝脏：丙氨酸-葡萄糖循环 ⑫氨的去路-鸟氨酸循环（尿素循环）部位：肝（线粒体、胞质）终产物：尿素 关键酶：
※鸟氨酸循环生成尿素的前体是：Arg 产物-尿素中N的来源：N2-Asp
⑤个别氨基酸的代谢 ⑪组胺的形成：His脱羧 第十二章 核苷酸代谢 ㈠核苷酸合成代谢
①嘌呤碱基与嘧啶碱基中各原子来源 ⑪嘌呤碱基 N1-Asp C2、C8-C1（一碳单位）N3、N9-Gln C4、C5、N7-Gly C6-CO2 ⑫嘧啶碱基 C2-CO2 N3-Gln N1、C4、C5、C6-Asp ②脱氧核苷酸的合成
⑪脱氧发生在NDP（核苷二磷酸）水平⑫dTMP生成发生在NMP水平
※合成嘌呤需氨基酸：Asp、Gln、Gly 合成嘧啶需氨基酸：Gln、Asp 嘧啶核苷酸合成的重要中间产物是：OMP ㈡核苷酸分解代谢 ①嘌呤分解代谢 ⑪人体嘌呤分解代谢主要终产物：尿酸
⑫人、猿以外哺乳动物嘌呤代谢终产物：尿囊素 ※代谢综合总结：
联系糖、脂、蛋白三大物质代谢的关键物质是：乙酰CoA、丙酮酸 氨甲蝶呤抑制：嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸的从头合成
第三篇：微生物鉴定的生理生化反应汇总
微生物鉴定的生理生化反应
各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多，主要有以下几类。
一、碳水化合物的代谢试验 1．糖（醇、苷）类发酵试验
（1）原理：不同种类细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，因而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也有所不同，即使能分解某种糖（醇、苷）类，其代谢产物可因菌种而异。检查细菌对培养基中所含糖（醇、苷）降解后产酸或产酸产气的能力，可用以鉴定细菌种类。
(2)方法：在基础培养基中（如酚红肉汤基础培养基pH7.4）加入0.5~1.0％（w/v）的特定糖（醇、苷）类。所使用的糖（醇、苷）类有很多种，根据不同需要可选择单糖、多糖或低聚糖、多元醇和环醇等，见表6-4-1。将待鉴定的纯培养细菌接种入试验培养基中，置35℃孵育箱内孵育数小时到两周（视方法及菌种而定）后，观察结果。若用微量发酵管，或要求培养时间较长时，应注意保持其周围的湿度，以免培养基干燥。
(3)结果：能分解糖（醇、苷）产酸的细菌，培养基中的指示剂呈酸性反应（如酚红变为黄色），产气的细菌可在小倒管（Durham小管）中产生气泡，固体培养基则产生裂隙。不分解糖则无变化。
(4)应用：糖（醇、苷）类发酵试验，是鉴定细菌的生化反应试验中最主要的试验，不同细菌可发酵 不同的糖（醇、苷）类，如沙门菌可发酵葡萄糖，但不能发酵乳糖，大肠埃希菌则可发酵葡萄糖和乳糖。即便是两种细菌均可发酵同一种糖类，其发酵结果也不尽相同，如志贺菌和大肠埃希菌均可发酵葡萄糖，但前者仅产酸，而后者则产酸、产气，故可利用此试验鉴别细菌。
表6-4-1 常用于细菌糖发酵试验的糖、醇类
单糖 四碳糖：赤藓糖 , 五碳糖：核糖 核酮糖 木糖
阿拉伯糖, 六碳糖：葡萄糖 果糖 半乳糖 甘露糖
双糖 蔗糖（葡萄糖＋果糖）乳糖（葡萄糖＋半乳糖）麦芽糖（两分子葡萄糖）三糖 棉子糖（葡萄糖＋果糖＋半乳糖）多糖 菊糖（多分子果糖）淀粉
醇类 侧金盏花醇 卫茅醇 甘露醇 山梨醇 非糖类 肌醇
2．葡萄糖代谢类型鉴别试验
(1)原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖，而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。本试验又称氧化发酵（O/F或Hugh－Leifson，HL）试验，可用于区别细菌的代谢类型。
(2)方法：挑取少许纯培养物（不要从选择性平板中挑取）接种2支HL培养管中，在其中一管加入高度至少为0.5cm的无菌液体石蜡以隔绝空气（作为密封管），另一管不加（作为开放管）。置35℃孵箱孵育48h以上。
(3)结果： 两管培养基均不产酸（颜色不变）为阴性；两管都产酸（变黄）为发酵型；加液体石蜡管不产酸，不加液体石蜡管产酸为氧化型。(4)应用：主要用于肠杆菌科与其它非发酵菌的鉴别。肠杆菌科、弧菌科细菌为发酵型，非发酵菌为氧化型或产碱型。也可用于鉴别葡萄球菌（发酵型）与微球菌（氧化型）。3．甲基红（MR）试验
(1)原理：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解为甲酸、乙酸和琥珀酸等，使培养基pH下降至4.5以下时，加入甲基红指示剂呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其它物质（如醇、醛、酮、气体和水），培养基pH在 5.4以上，加入甲基红指示剂呈桔黄色。
(2)方法：将待试菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中，35℃孵育48h~96h后，于5ml培养基中滴加5~6滴甲基红指示剂，立即观察结果。
(3)结果判定：呈现红色者为阳性，桔黄色为阴性，桔红色为弱阳性。
(4)应用：常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别，如大肠埃希菌和产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。肠杆菌属和哈夫尼亚菌属为阴性，而沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等为阳性。
4．β－半乳糖苷酶试验（ONPG试验）
(1)原理：乳糖发酵过程中需要乳糖通透酶和β－半乳糖苷酶才能快速分解。有些细菌只有半乳糖苷酶，因而只能迟缓发酵乳糖，所有乳糖快速发酵和迟缓发酵的细菌均可快速水解邻硝基酚-β-D-半乳糖苷（O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG）而生成黄色的邻硝基酚。用于枸橼酸菌属、亚利桑那菌属与沙门菌属的鉴别。
(2)方法：将待试菌接种于ONPG肉汤中，35℃水浴或孵箱孵育18~24h，观察结果。(3)结果：呈现亮黄色为阳性，无色为阴性。
(4)应用：可用于迟缓发酵乳糖细菌的快速鉴定，本法对于迅速及迟缓分解乳糖的细菌均可短时间内呈现阳性。埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、哈夫尼亚菌属、沙雷菌属和肠杆菌属等均为试验阳性，而沙门菌属、变形杆菌属和普罗威登斯菌属等为阴性。
5．VP试验
(1)原理：测定细菌产生乙酰甲基甲醇的能力。某些细菌如产气肠杆菌，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步脱羧形成乙酰甲基甲醇。在碱性条件下，乙酰甲基甲醇被氧化成二乙酰，进而与培养基中的精氨酸等含胍基的物质结合形成红色化合物。即V-P试验阳性。(2)方法：将待检菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中，35℃孵育24~48h，加入50g/Lα－萘酚（95％乙醇溶液）0.6ml，轻轻振摇试管，然后加0.2ml 400g/L KOH，轻轻振摇试管30s至1min，然后静置观察结果。
(3)结果：红色者为阳性，黄色或类似铜色为阴性。
(4)应用：主要用于大肠埃希菌和产气肠杆菌的鉴别。本试验常与MR试验一起使用，一般情况下，前者为阳性的细菌，后者常为阴性，反之亦然。但肠杆菌科细菌不一定都这样规律，如蜂房哈夫尼亚菌和奇异变形杆菌的VP试验和MR试验常同为阳性。6．胆汁七叶苷水解试验
（1）原理：在10%~40％胆汁存在下，测定细菌水解七叶苷的能力。七叶苷被细菌分解生成的七叶素，七叶素与培养基中的枸橼酸铁的二价铁离子发生反应形成黑色化合物。
(2)方法：将被检菌接种于胆汁七叶苷培养基中，35℃孵育18~24h后，观察结果。(3)结果：培养基完全变黑为阳性，不变黑为阴性。
(4)应用：主要用于鉴别D群链球菌与其它链球菌的区别，以及肠杆菌科的某些种、某些厌氧菌（如脆弱拟杆菌等）的初步鉴别。D群链球菌本试验为阳性。7．淀粉水解试验
(1)原理：产生淀粉酶的细菌能将淀粉水解为糖类，在培养基上滴加碘液时，可在菌落周围出现透明区。
(2)方法：将被检菌划线接种于淀粉琼脂平板或试管中，35℃孵育18~24h，加入革兰碘液数滴，立即观察结果。
(3)结果：阳性反应，菌落周围有无色透明区，其它地方蓝色；阴性反应，培养基全部为蓝色。
(4)应用：用于白喉棒状杆菌生物型的分型，重型淀粉水解试验阳性，轻、中型阴性；芽胞杆菌属菌种和厌氧菌某些种的鉴定。8．甘油复红试验
(1)原理：甘油可被细菌分解生成丙酮酸，丙酮酸脱去羧基为乙醛，乙醛与无色的复红生成醌式化合物，呈深紫红色。
(2)方法：取被检菌接种于甘油复红肉汤培养基中，于35℃孵育，观察2~8d。应同时做阴性对照。
(3)结果：紫红色为阳性，与对照管颜色相同为阴性。
(4)应用：主要用于沙门菌属内各菌种间的鉴别。伤寒沙门菌、甲（丙）型副伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、孔道夫沙门菌和仙台沙门菌本试验为阴性，乙型副伤寒沙门菌结果不定，其它不常见沙门菌多数为阳性。9．葡萄糖酸氧化试验
(1)原理：某些细菌可氧化葡萄糖酸钾，生成α-酮基葡萄糖酸。α-酮基葡萄糖酸是一种还原性物质，可与班氏试剂起反应，出现棕色或砖红色的氧化亚铜沉淀。
(2)方法：将待检菌接种于葡萄糖酸盐培养基中(1ml)，置35℃孵育48h,加入班氏试剂1ml，于水浴中煮沸10min并迅速冷却，观察结果。
(3)结果：出现黄到砖红色沉淀为阳性。不变或仍为蓝色为阴性。
(4)应用：主要用于假单胞菌的鉴定和肠杆菌科菌分群。
二、氨基酸和蛋白质的代谢试验 1．硫化氢试验
(1)原理：某些细菌能分解含硫氨基酸生成硫化氢，与亚铁离子或铅离子结合形成黑色沉淀物。
(2)方法：将待检菌接种于含硫化物及亚铁离子的培养基或克氏双糖铁琼脂（KIA）中，35℃孵育18~24h，观察有无黑色沉淀出现。或用醋酸铅纸条，悬挂于KIA管中（白色滤纸，根据试管大小裁剪适当，在热的50g/L醋酸铅饱和水溶液中浸泡，然后于50~60℃烘干，121℃15min高压灭菌备用）。醋酸铅是最敏感的方法。(3)结果：有黑色沉淀物为阳性。
(4)应用：主要用于鉴别肠杆菌科细菌，如沙门菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属、爱德华菌属等为阳性，其它菌属大多为阴性。但沙门菌属中亦有部分硫化氢阴性菌株，如甲型副伤寒、仙台、猪霍乱沙门菌等。2．明胶液化试验
(1)原理：细菌分泌的胞外蛋白水解酶（明胶酶）能分解明胶，使明胶失去凝固能力而液化。(2)方法：将待检菌接种于明胶培养基中，35℃孵育24h到7d或更长时间，每24h取出放入4℃冰箱约2h后，观察有无凝固。
(3)结果：如无凝固，则表示明胶已被水解，液化试验阳性。如凝固，则继续培养。
(3)应用：奇异变形杆菌、普通变形杆菌、沙雷菌属和阴沟肠杆菌等到能液化明胶，肠杆菌科中的其它细菌很少液化明胶。有些厌氧菌如产气荚膜梭菌、脆弱类杆菌等也能液化明胶。另外，许多假单胞菌也能产生明胶酶而使明胶液化。3．吲哚试验（靛基质试验）(1)原理：某些细菌有色氨酸酶，能分解色氨酸产生吲哚，吲哚与对二甲氨基苯甲醛形成红色的玫瑰吲哚。
(2)方法：将待检菌接种于富含色氨酸的蛋白胨水培养基中，35℃孵育24~48h，加入靛基质试剂，观察结果。
(3)结果：红色为阳性，无色为阴性。
(4)应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定，如大肠埃希菌与产气肠杆菌，肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌等的鉴别。4．苯丙氨酸脱氨酶试验
(1)原理：测定细菌是否产生苯丙氨酸脱氨酶。细菌产生的苯丙氨酸脱氨酶使苯丙氨酸脱氨后生成苯丙酮酸，加入三氯化铁试剂后产生绿色反应。若延长时间，会引起退色。
(2)方法：将待检菌大量接种入苯丙氨酸培养基中，35℃孵育18~24h，滴加100g/L三氯化铁试剂4~5滴，立即观察菌落生长处有无绿色出现。(3)结果：有绿色出现为阳性。
(4)应用：变形杆菌属、普罗威登菌属、摩根菌属均为阳性，肠杆菌科其它细菌均为阴性。5．氨基酸脱羧酶试验
(1)原理：某些细菌可产生氨基酸脱羧酶使氨基酸脱羧生成胺和二氧化碳。由于胺的生成使培养基变为碱性，可用指示剂指示出来。
(2)方法：将待检菌分别接种于1支氨基酸（赖氨酸，鸟氨酸或精氨酸）脱羧酶试验管和1支氨基酸脱羧酶对照管（无氨基酸），各覆盖至少0.5cm高度的无菌石蜡油，35℃孵育1~4d，观察结果。
(3)结果：若为溴甲酚紫指示剂，则试验管紫色为阳性，黄色为阴性，对照管应为黄色。(4)应用：主要用于某些细菌种间的鉴别，如赖氨酸用于产气肠杆菌（阳性）与阴沟肠杆菌（阴性）；鸟氨酸用于阴沟肠杆菌（阳性）和克雷伯菌（阴性）；精氨酸用于阴沟肠杆菌（阳性）和产气肠杆菌（阴性）等。6．精氨酸双水解酶试验
(1)原理：精氨酸经两次水解后,生成鸟氨酸、氨及二氧化碳。鸟氨酸又在脱羧酶的作用下生成腐胺。氨及腐胺均为碱性物质，故可使培养基变碱，用指示剂指示出来。(1)方法：将待检菌接种于试验培养上，置35℃孵箱孵育1~4d，观察结果。
(2)结果：溴甲酚紫指示剂呈紫色为阳性，酚红指示剂呈红色为阳性。黄色为阴性。(3)应用：主要用于肠杆菌科及假单胞菌属的鉴定。7．尿素酶试验
(1)原理：某些细菌能产生尿素酶，分解尿素产生大量的氨，使培养基变碱。(2)方法：将待检菌接种于含有尿素的培养基中，35℃孵育18~24h，观察结果。(3)结果：红色为阳性，不变为阴性。
(4)应用：主要用于肠杆菌科变形杆菌属、普罗威登菌属、克雷伯菌属及假单胞菌属的鉴定。
8．霍乱红试验
(1)原理：霍乱弧菌分解色氨酸生成吲哚，并能使硝酸盐还原为亚硝酸盐，当加入硫酸后生成亚硝酸吲哚，呈红色反应。
(2)方法：将待检菌接种于蛋白胨水中，置35℃孵育24h，加入浓硫酸数滴，观察结果。(3)结果：呈红色者为阳性。
(4)应用：霍乱弧菌呈阳性反应，但本试验并非霍乱弧菌所特有。凡能产生吲哚并还原硝酸盐为亚硝酸盐的细菌，均可呈现阳性反应。
三、碳源和氮源利用试验 1．枸橼酸盐利用试验
(1)原理：某些细菌能利用枸橼酸盐作为唯一碳源，而在此培养基上生长，并分解枸橼酸盐生成碳酸钠，使培养基变碱性。
(2)方法：将待检菌接种于枸橼酸盐培养基上，置35℃孵育1~4d，逐日观察结果。
(3)结果：若用溴麝香草酚兰指示剂，斜面出现菌落或菌苔，培养基变蓝色为阳性；无菌落生长，培养基绿色为阴性。
(4)应用：可用此试验作细菌种属间鉴定。埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属均为阴性，沙门菌属、克雷伯菌属通常阳性，粘质和液化沙雷菌和某些变形杆菌及枸橼酸杆菌阳性。此外，铜绿假单胞菌、洋葱伯克霍尔德菌和嗜水气单胞菌也能利用枸橼酸盐。
2．丙二酸盐利用试验
(1)原理：某些细菌能利用丙二酸盐作为唯一碳源，丙二酸盐被分解生成碳酸钠，使培养基变碱。
(2)方法：将待检菌接种于丙二酸盐培养基中，置35℃孵育24~48h，观察结果。(3)结果：培养基由绿色变为蓝色为阳性。颜色无变化为阴性。
(4)应用：肠杆菌科中亚利桑那菌和克雷伯菌属为阳性，枸橼酸杆菌属、肠杆菌属和哈夫尼亚菌属有不同生物型反应，其它各菌属均为阴性。
3．醋酸钠利用试验
(1)原理：细菌利用铵盐作为唯一氮源，同时，利用醋酸盐作为唯一碳源时，可在醋酸盐培养上生长，分解醋酸盐生成碳酸钠，使培养基变为碱性。
(2)方法：将被检菌接种于醋酸盐培养基中，置35℃孵育2~7d，逐日观察结果。(3)结果：培养基上有细菌生长，并变为蓝色为阳性。
(4)应用：主要用于大肠埃希菌和志贺菌属的鉴别，前者为阳性，而后者为阴性。4．马尿酸钠水解试验
(1)原理：某些细菌可具有马尿酸水解酶，可使马尿酸水解为苯甲酸和甘氨酸，苯甲酸与三氯化铁试剂结合，形成苯甲酸铁沉淀。
(2)方法：将待检菌接种于马尿酸钠培养基中，置35℃孵育48h，离心沉淀，取上清液0.8ml，加入三氯化铁试剂0.2ml，立即混匀，经10~15min观察结果。(3)结果：出现恒定之沉淀物为阳性。(5)应用：主要用于B群链球菌的鉴定。
5、乙酰胺利用试验
(1)原理：许多非发酵菌产生一种脱酰胺酶，可使乙酰胺经脱酰胺作用释放氨，使培养基变碱。
(2)方法：将被检菌接种于乙酰胺培养基中，置35℃孵育24~48h，观察结果。
(3)结果：培养基由绿色变为蓝色为阳性。如不生长，或稍有生长，但培养基颜色不变为阴性。
(4)应用：主要用于非发酵菌的鉴定。铜绿假单胞菌、去硝化产碱杆菌、食酸假单胞菌为阳性，其它非发酵菌大多数为阴性。
四、酶类试验 1.氧化酶试验
(1)原理：氧化酶又称细胞色素氧化酶，是细胞色素氧化酶系统中的最终呼吸酶。此酶并不直接与氧化酶试剂起反应，而是先使细胞色素C氧化，然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。因此，本试验结果与细胞色素C的存在有关。
(2)方法：取洁净滤纸条，沾取菌落少许，加氧化酶试剂（10g/L盐酸四甲基对苯二胺水溶液或10g/L盐酸二甲基对苯二胺水溶液）1滴，1min内观察结果。也可将试剂滴加到菌落上进行试验。
(3)结果：阳性者立即变粉红色，5~10s内呈深紫色。无色为阴性。
(4)应用：用于奈瑟菌属的菌种鉴定，该属细菌均阳性。此外，也用于假单胞菌属与肠杆菌科细菌的区别，前者阳性，而后者阴性。莫拉菌属、产碱杆菌属等均为阳性。
注意事项： ①试验时应避免接触含铁物质，以免出现假阳性。②10g/L盐酸四甲基对苯二胺或10g/L盐酸四甲基对苯二胺水溶液为无色溶液，在空气中易被氧化而失效，故应经常更换新试剂，并盛于棕色瓶中，若试剂已变成深蓝色，应弃去不用。
2．触酶试验
(1)原理：触酶又称过氧化氢酶，具有过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢成为水和原子态氧，继而形成氧分子，出现气泡。
(2)方法：取洁净玻片1张，用接种环挑取细菌，加3％H2O2 1滴，立即观察结果。(3)结果：若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。
(4)应用：大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶，但链球菌科阴性，故常用此试验来鉴定。此外，金氏杆菌属的细菌也为阴性。分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验，结核分枝杆菌为阴性，戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。
注意事项：①3％H2O2溶液要新鲜配制。②不宜用血琼脂平板上生长的菌落，因红细胞含有触酶，可致假阳性反应，③取对数生长期的细菌。3．凝固酶试验
(1)原理：凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶，一种是与细胞壁结合的凝聚因子，称结合凝固酶，它直接作用于血浆中纤维蛋白原，使发生沉淀，包围于细菌外面而凝聚成块，玻片法阳性结果是由此凝聚因子所致；另一种凝固酶是分泌至菌体外，称为游离凝固酶，它能使凝血酶原变成凝血酶类产物，使纤维蛋白原变为纤维蛋白，从而使血浆凝固。试管法可同时测定结合型和游离型凝固酶。(2)方法: ①玻片法：在一张洁净玻片中央加1滴生理盐水，用接种环取待检培养物与其混合（设阳性和阴性对照）制成菌悬液，若经10~20s内无自凝现象发生，则加入人或兔新鲜血浆1环，与菌悬液混合，观察结果。②试管法：于试管内加1﹕4稀释的兔或人血浆0.5ml，再加1~2个待试菌菌落，置37℃水浴，每30min观察1次结果。
(3)结果：①玻片法：5~10s内出现凝集者为阳性。②试管法：如有凝块或整管凝集出现为阳性。2h后无上述现象出现，则放置过夜后再观察。
(4)应用：本试验仅用于致病性葡萄球的鉴定。
注意事项：①玻片法为筛选试验，阳性、阴性均需进行试管法测定。②血浆必须新鲜。③应使用肝素而非枸橼酸盐作抗凝剂抗凝的血浆。④本试验也可用市购的胶乳凝集试验试剂盒测定。
4．DNA酶试验
(1)原理： 某些细菌能产生DNA酶，水解外源性DNA使之成为寡核苷酸。DNA可被酸沉淀，而寡核苷酸则不会。故在DNA琼脂平板上加盐酸后，可在菌落周围形成透明区。
(2)方法：在DNA琼脂平板上点种待检菌，35℃孵育18~24h，用1 mol/L盐酸倾注平板，观察结果。
(3)结果：如菌落周围有透明区者为阳性，无透明区为阴性。
(4)应用：主要用于肠杆菌科及葡萄球菌属某些菌种的鉴定。沙雷菌、变形杆菌和金黄色葡萄球菌DNA酶均阳性。
5．胆汁溶菌试验
(1)原理：胆汁或去氧胆酸钠能导致某些细菌溶解，一方面是由于胆汁或去氧胆酸钠降低了细菌细胞膜上的表面张力，使细菌的细胞膜破损或使菌体裂解。另一方面可能与激活细菌体内的自溶酶有关。
(2)方法：①试管法：用纯培养物制备1ml生理盐水浓菌悬液，pH调至7.0，分装两支试管，各0.5ml。其中一管加0.5ml 100g/L去氧胆酸钠为试验管，另一管加0.5ml生理盐水作对照。35℃孵育每小时观察1次结果。②平板法：在血平板上选取单个可疑菌落，作好标记，直接在菌落上加1接种环20g/L去氧胆酸钠（pH7.0），置35℃孵育30min（平板不要翻转）观察结果。
(3)结果：①试管法：在3h内液体透明为阳性。②平板法：如菌落消失，仅留下溶血区为阳性，菌落不消失为阴性。
(4)应用：用于肺炎链球菌的鉴定。6．硝酸盐还原试验
(1)原理：硝酸盐还原反应包括两个过程，其一是在合成代谢过程中，硝酸盐还原为亚硝酸盐和氨，再由氨转化为氨基酸和细胞内其它含氮化合物；另一是在分解代谢过程中，硝酸盐或亚硝酸盐代替氧作为呼吸酶系统中的终末受氢体。硝酸盐还原过程可因细菌不同而异。有的细菌仅使硝酸盐还原为亚硝酸盐，如大肠埃希菌等；有的细菌可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵；有的细菌能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮，如沙雷菌属；有的细菌还可以将其还原产物在合成性代谢中完全利用。硝酸盐或亚硝酸盐如果还原生成气体的终末产物如氮或氧化氮，则称为脱硝化或脱氮化作用。某些细菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐，亚硝酸盐与醋酸作用，生成亚硝酸，亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者与α-萘胺结合生成N-α萘胺偶苯磺酸。
(2)方法：将待检菌接种于硝酸盐培养基（内含小倒管）中，35℃孵育1~4d。将甲、乙等量混合液（用时混合）0.1ml加于试管内，立即或10min内观察结果。
(3)结果：出现红色为阳性反应。如欲观察有无氮气产生，可于培养基管内加1只小倒管，有气泡产生，则表示有氮气生成。如欲检查培养基中硝酸盐是否被分解，可取锌粉少许加入培养基内，如出现红色表明硝酸盐仍存在；若不出现红色，表示硝酸盐已被分解。
(4)应用：本试验广泛用于细菌鉴定。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；假单胞菌属中有的细菌能产生氮气，如铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、斯氏假单胞菌，有的则能还原硝酸盐为亚硝酸盐，如鼻疽假单胞菌等；厌氧菌如韦荣菌也能还原硝酸盐为亚硝酸盐。7．卵磷脂酶试验
(1)原理：细菌产生的卵磷脂酶，经钙离子作用，能迅速分解卵黄或血清中的卵磷脂形成混浊沉淀状的甘油酯和水溶性磷酸胆碱。
(2)方法：取待检菌划线接种或点种在卵黄琼脂平板上，置35℃孵育3~6h，观察结果。(3)结果：3h后在菌落周围形成乳白色混浊，即为卵磷脂酶试验阳性，6h后该混浊圈可扩大到直径5~6mm。(4)应用：该试验主要用于厌氧的鉴定。产气荚膜梭菌和诺维梭菌为阳性，其他梭菌为阴性。蜡样芽孢杆菌亦为阳性。8．磷酸酶试验
(1)原理：磷酸酶是磷酸脂的水解酶，可使单磷脂水解，其反应可根据反应基质不同而异，如用磷酸酚酞为基质，经磷酸酶水解后可释放酚酞，在碱性环境中呈红色。
(2)方法：取待检菌接种于磷酸酚酞琼脂平板上，置35℃孵育18~24h，于平皿盖内加1滴浓氨水，熏蒸片刻，观察结果。亦可用液体培养基，经孵育后，向管内加400g/L氢氧化钠溶液1滴，观察结果。
(3)结果：菌落变为红色者为阳性。
(4)应用：主要用于致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌的鉴别，前者为阳性，后者为阴性。
9．脂酶试验
(1)原理：细菌产生的脂酶可分解脂肪为游离脂肪酸。在培养基中加入维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物，如果脂肪被分解，则维多利亚蓝释出，呈蓝色。
(2)方法：将待检菌接种于含维多利亚蓝的脂酶培养基中，置35℃孵育24h，观察结果。(3)结果：培养基变为深蓝色者为阳性，否则可呈无色或粉红色。
(4)应用：主要用于厌氧菌鉴定。在拟杆菌中产黑色素拟杆菌中间亚种产生脂酶，其它拟杆菌阴性；在梭菌属中诺维梭菌和产芽胞梭菌也产生此酶，其它梭菌为阴性。10．CAMP试验
(1)原理：B群链球菌（无乳链球菌）产生一种“CAMP”因子，此种物质能促进葡萄球菌的β-溶血素的活性。因此，可在两种细菌的交界处溶血力增强，出现箭头型透明溶血区。
(2)方法：在羊血或马血琼脂平板上，先以β-溶血的金黄色葡萄球菌划一横线接种。再将待检菌与前一划线作垂直接种，两者应相距1cm，于35℃孵育18~24h，观察结果。每次试验应做阴阳性对照。
(3)结果：两种细菌划线交接处出现箭头型溶血区为阳性。
(4)应用：主要用于B群链球菌（阳性）的鉴定，其他链球菌均为阴性。11．石蕊牛乳试验
(1)原理：由于牛乳内含有丰富的蛋白质和糖类，各种细菌对这些物质的分解能力不同，故可有数种不同反应，用以鉴别细菌。(2)将待检菌接种于石蕊牛乳培养基中，若为芽胞梭菌，要在培养基中加入无菌铁末，置35℃孵育18~24h，必要时可延长至14d。观察结果。
(3)结果：①产酸：发酵乳糖产酸，使指示剂变为粉红色。②产气：发酵乳糖而同时产气，可冲开上面的凡士林。③凝固：因产酸太多而使牛乳中的酪蛋白凝固。④胨化：将凝固的酪蛋白继续水解为胨，培养基上层液体变清，底部可留有未被完全胨化的酪蛋白。⑤产碱：乳糖未发酵，因分解含氮物质，生成胺及氨，培养基变碱，指示剂变为蓝色。(4)应用：主要用于梭菌、链球菌和丙酸杆菌的鉴定。
五、抑菌试验
1．Optochin敏感试验
(1)原理：Optochin(奥普托欣)是盐酸乙基氢化羟基奎宁的商品名。对肺炎链球菌有特异抑制作用，其作用机制可能是干扰叶酸生物合成作用，而对其它链球菌则无此作用。
(2)方法：用棉拭子将待检菌的肉汤培养物均匀涂布于血琼脂平板上，贴上一张含5μg奥普托欣纸片，置烛缸或二氧化碳孵箱，35℃ 孵育18~24h，观察结果。(3)结果：抑菌圈直径大于14mm为敏感，小于或等于 14mm为阴性。(4)应用：主要用于肺炎链球菌（敏感）与其它链球菌（耐药）的鉴别。2．杆菌肽敏感试验
(1)原理：A群链球菌对杆菌肽几乎是100%敏感，而其它群链球菌对杆菌肽通常耐药。故此试验可对链球菌进行鉴别。
(2)方法：用棉拭子将待检菌的肉汤培养物均匀涂布于血琼脂平板上，稍干后贴一张含0.04U的杆菌肽纸片，置35℃ 孵育18~24h，观察结果。
(3)结果：抑菌圈直径大于10mm为敏感，小于10mm为耐药。(4)应用：主要用于A群与非A群链球菌的鉴别。从临床分离的菌株中有5%~15%非 A群链球菌也对杆菌肽敏感，如6%的B群链球菌、7.5%的C群链球菌和G群链球菌等。3．新生霉素敏感试验
(1)原理：金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌可被低浓度新生霉素所抑制，表现为敏感，而腐生葡萄球菌则表现为耐药。
(2)方法：用棉拭子将待检菌菌悬液均匀涂布于M-H琼脂平板或血平板上，在平板中央贴含5μg/片新生霉素诊断纸片一张，置35℃孵育16~18h，观察结果。(3)结果：抑菌圈直径大于16mm为敏感，小于或等于16mm为耐药。(4)应用：主要用于葡萄球菌某些种的鉴定。4．O/129试验
(1)原理：O/129（2，4二氨基-6，7-二异丙基喋啶）能抑制弧菌属、发光杆菌属和邻单胞菌属细菌生长，而气单胞菌属和假单胞菌属细菌则耐药。
(2)方法：用棉拭子将待检菌菌悬液均匀涂布于碱性琼脂平板上，将10μg/片及150μg/片的O/129诊断纸片贴于平板上，置35℃孵育18~24h，观察结果。(3)结果：出现抑菌圈者表示敏感，无抑菌圈者为耐药。
(4)应用：主要用于弧菌属、邻单胞菌属与气单胞菌属的鉴别，弧菌属和邻单胞菌属菌为敏感，气单胞菌属菌为耐药。其它菌属有发光杆菌属为敏感，假单胞菌属为耐药。5．氰化钾试验
(1)原理：氰化钾可抑制某些细菌的呼吸酶系统。细胞色素、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶均以铁卟啉作为辅基，氰化钾与铁卟啉结合，使这些酶失去活性，使细菌生长受到抑制。(2)方法：将待检菌接种于氰化钾培养基中，同时接种一支不含氰化钾的对照培养基，置35℃孵育24~48h，观察结果。
(3)结果：细菌在氰化钾培养基中生长的（不受抑制）为阳性，不生长（抑制）为阴性。(4)应用：肠杆菌科中的沙门菌属、志贺菌属和埃希菌属细菌的生长受到抑制，而其它各菌属的细菌均可生长。
六、其它试验
1．克氏双糖铁或三糖铁琼脂培养基试验
(1)原理：克氏双糖铁(KIA)或三糖铁琼脂(TSI)培养基制成高层和短的斜面，其中葡萄糖含量仅为乳糖或蔗糖的十分之一，若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖和蔗糖，分解葡萄糖产酸使pH降低，因此斜面和底层均先呈黄色，但因葡萄糖量较少，所生成的少量酸可因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，使斜面部分又变成红色；底层由于处于缺氧状态，细菌分解葡萄糖所生成的酸类一时不被氧化而仍保持黄色。细菌分解葡萄糖、乳糖或蔗糖产酸产气，使斜面与底层均呈黄色，且有气泡。细菌产生硫化氢时与培养基中的硫酸亚铁作用，形成黑色的硫化铁。
(2)方法：用接种针挑取待检菌的菌落，先穿刺接种到KIA或TSI深层，距管底3~5mm为止，再从原路退回，在斜面上自下而上划线，置35℃孵 育18~24h，观察结果。(3)结果：常见的KIA反应有如下几种： ①斜面碱性/底层碱性：不发酵碳水化合物，系不发酵菌的特征。如铜绿假单胞菌。②斜面碱性/底层酸性：葡萄糖发酵、乳糖（和TSI中的蔗糖）不发酵，是不发酵乳糖菌的特征，如志贺菌。③斜面碱性/底层酸性（黑色）：葡萄糖发酵、乳糖不发酵并产生硫化氢，是产生硫化氢不发酵乳糖菌的特征。如沙门菌、亚利桑那菌、枸橼酸杆菌和变形杆菌等。④斜面酸性/底层酸性：葡萄糖和乳糖（和TSI中的蔗糖）发酵，是发酵乳糖的大肠菌群的特征，如大肠埃希菌、克雷伯菌属和肠杆菌属。
(4)应用：鉴别肠道杆菌用。KIA或TSI对初分离出的、可疑为革兰阴性杆菌鉴定特别有用。其反应模式是许多杆菌鉴定表的组成部分，也可作为观察其他培养基反应的有价值的质控依据。
2．氢氧化钾拉丝试验
(1)原理：革兰阴性细菌的细胞壁在稀碱溶液中易于破裂，释放出未断裂的DNA螺旋，使氢氧化钾菌悬液呈现粘性，可用接种环搅拌后拉出粘丝来，而革兰阳性细菌在稀碱溶液中没有上述变化。
(2)方法：取1滴40g/L氢氧化钾水溶液（应新鲜配制）于洁净玻片上，取新鲜菌落少许，与氢氧化钾水溶液搅拌混匀，并每隔几秒钟上提接种环，观察能否拉出粘丝。(3)结果：用接种环拉出粘丝者为阳性，仍为混悬液者为阴性。
(4)应用：主要用于革兰阴性菌与易脱色的革兰阳性菌的鉴别。大多数革兰阴性菌于5~10s内出现阳性反应，有的则需30~45s，假单胞菌、无色杆菌、黄杆菌、产碱杆菌、莫拉菌等大多数在10s内呈阳性，不动杆菌、莫拉菌反应较慢，大多数菌株在60s内出现阳性，而革兰阳性菌在60s以后仍为阴性。
第四篇：实验五 细菌的生理生化
实验五 细菌的生理、生化试验
实验目的：
初步学会细菌生理、生化试验的操作、结果分析。
仪器材料：
蛋白胨水培养基、糖发酵培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基、醋酸铅蛋白胨水培养基、柠檬酸盐琼脂斜面培养基等；甲基红（MR）试剂、维-培（V-P）试剂、靛基质试剂等；大肠杆菌、产气杆菌、沙门氏菌的24h纯培养物等。
微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下：
一、糖酵解试验
不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。
试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培养物少许，接种于发酵液体培养基管中，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。接种后，置36±1.0°C培养，每天观察结果，检视培养基颜色有无改变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培养基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力，培养物可呈弥散生长。本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力，从而进行各种细菌的鉴别，因而每次试验，常需同时接种多管。一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫，溴百里蓝和An-drade指示剂。
二、淀粉水解试验
某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。
试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20℃培养5天。然后将碘试剂直接滴浸于培养表面，若为液体培养物，则加数滴碘试剂于试管中。立即检视结果，阳性反应（淀粉被分解）为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。
淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。培养基pH必须为中性或微酸性，以pH7.2最适。淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。
三：V-P试验
某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。
试验方法：
１）O’Meara氏法：将试验菌接种于通用培养基，于36±1°C培养48h，培养液1ml加O’Meara试剂（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氢氧化钠水溶液）1ml，摇动试管1~2min，静置于室温或36±1°C恒温箱，若4h内不呈现伊红，即判定为阴性。亦有主张在48~50°C水浴放置2h后判定结果者。
２）Barritt氏法：将试验菌接种于通用培养基，于36±1°C培养4天、培养液2.5ml先加入a萘酚（2-na-phthol）纯酒精溶液0.6ml,再加40%氢氧化钾水溶液0.2ml，摇动2~5min，阳性菌常立即呈现红色，若无红色出现，静置于室温或36±1°C恒温箱，如2h内仍不显现红色、可判定为阴性。
３）快速法：将0.5%肌酸溶液2滴放于小试管中、挑取产酸反应的三糖铁琼脂斜面培养物一接种环，乳化接种于其中，加入5%α-萘酚3滴，40%氢氧化钠水溶液2滴，振动后放置5min，判定结果。不产酸的培养物不能使用。
本试验一般用于肠杆菌科各菌属的鉴别。在用于芽胞杆菌和葡萄球菌等其它细菌时，通用培养基中的磷酸盐可阻碍乙酰甲基醇的产生，故应省去或以氯化钠代替。
四：甲基红（Methyl Red）试验
肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红。
试验方法：挑取新的待试纯培养物少许，接种于通用培养基，培养于36±1°C或30°C（以30°C较好）3~5天，从第二天起，每日取培养液1ml，加甲基红指示剂1~2滴，阳性呈鲜红色，弱阳性呈淡红色，阴性为黄色。迄至发现阳性或至第5天仍为阴性、即可判定结果。
甲基红为酸性指示剂，pH范围为4.4~6.0，其pK值为5.0。故在pH5.0以下，随酸度而增强黄色，在pH5.0以上，则随碱度而增强黄色，在pH5.0或上下接近时，可能变色不够明显，此时应延长培养时间，重复试验。
五：靛基质（Imdole）试验
某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表
现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。
试验方法：将待试纯培养物小量接种于试验培养基管，于36±1°C培养24h时后，取约2ml培养液，加入Kovacs氏试剂2~3滴，轻摇试管，呈红色为阳性，或先加少量乙醚或二甲苯，摇动试管以提取和浓缩靛基质，待其浮于培养液表面后，再沿试管壁徐缓加入Kovacs氏试剂数滴，在接触面呈红色，即为阳性。
实验证明靛基质试剂可与17种不的靛基质化合物作用而产生阳性反应，若先用二甲苯或乙醚等进行提取，再加试剂，则只有靛基质或5-甲基靛基质在溶剂中呈现红色，因而结果更为可靠。
六、硝酸盐（Nitrate）还原试验
有些细菌具有还原硝酸盐的能力，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨或氮气等。亚硝酸盐的存在可用硝酸试剂检验。
试验方法：临试前将试剂的A（磺胺酸冰醋酸溶液）和B（α－萘胺乙醇溶液）试液各0.2ml等量混合、取混合试剂约0.1ml、加于液体培养物或琼脂斜面培养物表面，立即或于10min内呈现红色即为试验阳性，若无红色出现则为阴性。
用α-萘胺进行试验时，阳性红色消退很快、故加入后应立即判定结果。进行试验时必须有未接种的培养基管作为阴性对照。α-萘胺具有致癌性、故使用时应加注意。
七、明胶（Gelatin）液化试验
有些细菌具有明胶酶（亦称类蛋白水解酶），能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，失去凝胶性质而液化。
试验方法：挑取18~24h待试菌培养物，以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。于20~22℃培养7~14天。明胶高层亦可培养于36±1℃。每天观察结果，若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化，如确被液化，即为试验阳性。平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂，若为阳性，10~20min后，菌落周围应出现清晰带环。否则为阴性。
八、尿素酶（Urease）试验
有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。尿素酶不是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶。其活性最适pH为7.0。
试验方法：挑取18~24h待试菌培养物大量接种于液体培养基管中，摇均，于36±1℃培养10，60和120min，分别观察结果。或涂布并穿刺接种于琼脂斜面，不要到达底部，留底部作变色对照。培养2，4和24h分别观察结果，如阴性应继续培养至4天，作最终判定，变为粉红色为阳性。
九、氧化酶（Oxidase）试验
氧化酶亦即细胞色素氧化酶，为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶，氧化酶先使细胞色素C氧化，然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。
试验方法：在琼脂斜面培养物上或血琼脂平板菌落上滴加试剂1~2滴，阳性者Kovacs氏试剂呈粉红色~深紫色，Ewing氏改进试剂呈蓝色。阴性者无颜色改变。应在数分钟内判定试验结果。
十、硫化氢（H2S）试验
有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，而产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。
试验方法：在含有硫代硫酸钠等指示剂的培养基中，沿管壁穿刺接种，于36±1℃培养24~28h，培养基呈黑色为阳性。阴性应继续培养至6天。也可用醋酸铅纸条法：将待试菌接种于一般营养肉汤，再将醋酸铅纸条悬挂于培养基上空，以不会被溅湿为适度；用管塞压住置36±1℃培养1~6天。纸条变黑为阳性。
十一、三糖铁（TSI）琼脂试验
试验方法：以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物，穿刺接种并涂布于斜面，置36±1℃培养18~24h，观察结果。
本试验可同时观察乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气（变黄）；产生硫化氢（变黑）。葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。
十二、硫化氢-靛基质-动力（SIM）琼脂试验
试验方法：以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度，置36±1℃培养18~24h，观察结果。培养物呈现黑色为硫化氢阳性，混浊或沿穿刺线向外生长为有动力，然后加Kovacs氏试剂数滴于培养表面，静置10min，若试剂呈红色为靛基质阳性。培养基未接种的下部，可作为对照。
本试验用于肠杆菌科细菌初步生化筛选，与三糖铁琼脂等联合使用可显著提高筛选功效。
第五篇：考研资料重要会议总结
.党的一大：
1921年，中国共产党在上海召开，党的纲领是以无产阶级革命军队推翻资产阶级，联合共产国际。
规定党员条件和党的纪律。
党的中心任务是开产工人运动。宣告了中国共产党的成立。
2.党的二大：提出反帝反封建的民主革命纲领
1922年，上海召开，正确分析了中国的社会性质，中国革命的性质是民主主义革命、对象是帝国主义和封建军阀、动力和前途，指出了中国革命要分两步走，在中国近代史上第一次提出了彻底的反帝反封建的
党的最高纲领是实现社会主义、共产主义；现阶段的革命纲领即最低纲领是消除内乱，打倒军阀，建设国内和平，推翻国际帝国主义压迫，达到中华民族的完全独立，统一中国为真正的民主共和国。提出了群众路线。
3.党的三大：大革命洪流中召开的党的代表大会
1923年，党的三大召开，决定共产党员以个人身份加入国民党，实现国共合作，建立革命统一战线，同时保持共产党在政治、思想、组织上的独立性。
4.国民党一大 1924年召开，确立联俄、联共、扶助农工的三大政策，形成了新三民主义，标志着第一次国共合作正式形成。改组后的国民党变成工人阶级，农民阶级，小资产阶级，民族资产阶级的革命联盟。
5.党的四大：大革命洪流中召开的党的代表大会（课本未提及）
1925年四大召开，提出了无产阶级在民主革命中的领导权问题和工农联盟问题。四大的缺点和不足是：虽然提出了领导权的问题，但对于如何争取领导权，缺乏具体明确的方针，只讲对群众运动的领导权，而完全忽视了对政权和武装力量的领导权。
提出了农民是革命同盟军的问题，但没有提出土地革命这一解决农民问题的根本思想。
6.党的五大
1927年五大召开，大大虽然批判了陈独秀的右倾错误，强调了通资产阶级争夺领导权的重要性，均未做出切合实际的回答，反而对武汉公民政府抱有幻想。五大实际上并未解决挽救时局的问题。
7.八七会议：政权是由枪杆子中取得的
1927年8月7日，汉口召开。选出中央临时政治局，瞿秋白，李维汉，苏兆征为政治局常委。
会议坚决纠正了以陈独秀为代表的右倾投降主义。
确定实行土地革命和武装反抗国民党反动派的总方针，并把发动农民举行秋收起义作为当前党的主要任务，解决了要不要继续革命和革谁的命的问题。中国革命从此开始由国民革命失败到土地革命战争星期的历史转折。
8.党的六大：唯一一次在国外召开的党的代表大会
1928年六大在莫斯科召开，仍旧把城市工作放在全党工作的中心，这对中国革命的发展起了消极的影响。
9.三湾改编
1927年9月29日，这是中国工农红军政治工作的开端，确立了党对军队的绝对领导，为从组织上，政治上和思想上建设一支全新型的人民军队奠定了牢固的基础。
10.古田会议：用无产阶级思想进行军队和和党的建设。
11.遵义会议：第一次将马克思列宁主义原理与中国实践结合（探索中国社会主义建设道路是第二次将马克思列宁主义原理与中国实践结合P119）
1935年1月，会议集中全力解决当时最紧迫的军事问题和组织问题。
结束了王明“左”倾教条主义在党中央的统治，事实上确立了以毛泽东为核心的新的中央的正确领导。
挽救了红军，挽救了党，挽救了中国革命，是中国共产党历史上一个生死攸关的转折点。
12.瓦窑堡会议：中国共产党是无产阶级的先锋队，又是全民族的先锋队。
1935年12月，确定了抗日民族统一战线的策略方针，同时坚持无产阶级在统一战线中的领导权。
批评党内存在的左倾冒险主义和关门主义倾向。圆满解决了遵义会议没有解决的党的政治路线问题。
13.洛川会议：为争取抗日战争的胜利奠定了政治思想基础
1937年8月，中共中央政治局在陕北洛川县召开扩大会议。会议通过了《关于目前形势与党的任务的决定》确定全面抗战路线。
会议通过《抗日救国十大纲领》是全面抗战路线的具体体现。会议认为必须坚持无产阶级在抗战中的领导权，在敌人后方放手发动独立自主的游击战，在国民党统治区放手发动抗日的群众运动。
14.中共六届六中全会：我们的原则是党指挥枪，而决不允许枪指挥党
1938年9月至11月，毛泽东提出“马克思主义中国化”。会议基本纠正王明右倾错误。
15.国民参政会
1944年9月15日，林伯渠根据中共中央的指示正式提出建立民主联合政府的主张
16.党的六届七中全会
1945年4月，通过《关于若干历史问题的研究》是整风运动的重要成果，也是正逢运动结束的标志。
17.党的七大：确立毛泽东思想在全党的指导地位
1945年七大在延安召开，大会确立毛泽东思想为全党的指导思想。
大会把党在长期奋斗中形成的优良传统和作风概括为三大作风：即理论联系实际，密切联系群众，批评与自我批评。
18.党的七届二中全会
1949年3月，确立迅速夺取民主革命胜利的方针。
规定了全国胜利后在政治、经济（新民主主义的五种经济成分）、外交的基本政策。党的工作重心由农村转向城市。毛泽东第一次提出了执政党的建设问题：“两个务必”的思想——要求全党在革命胜利后务必要保持谦虚、谨慎、不骄、不躁的作风，务必要保持艰苦奋斗的作风，警惕资产阶级“糖衣炮弹”的侵蚀和攻击。
19.中国人民政治协商会议一届会议
1949年9月21日至30日，会议通过《中国人民政治协商会议共同纲领》，规定了国体和政体、经济建设、民族政策、外交方面的问题。
《共同纲领》起着临时宪法的作用。政协一届全会的召开标志着中共领导的多党合作制度的形成，宣告中华人民共和国的成立。
20.全国人大一届一次会议
1954年，通过了《中华人民共和国宪法》，是第一部社会主义性质的宪法。
21.党的八大：探索建设社会主义道路的良好开端
1956年，我国无产阶级同资产阶级之间的矛盾已经基本解决，国内的主要矛盾，已经是人民对于建立先进的工业国的要求同落后的农业国的现实之间的矛盾，已经是人民对于经济文化迅速发展的需要同当前经济文化不能满足人民需要的状况之间的矛盾（1957年中共八届三中全会改变八大关于社会主要矛盾的正确判断，认为主要矛盾是无产阶级和资产阶级，社会主义和资本主义的矛盾）。
党和人民当前的主要任务，就是要集中力量解决这个矛盾，把我国尽快地从落后的农业国变成先进的工业国（另一种说法：社会主义的根本任务是发展生产力，实现工业化，逐步满足人民日益增长的需要）。
经济建设的指导方针：既反保守，又反冒进，坚持在综合平衡中稳步前进（陈云在八大的发言中提出了我国社会主义经济“三个主体，三个补充”的思想）政治建设上：有法可依，有法必依。
党的建设：坚持理论联系实际，实事求是，坚持民主集中制和集体领导制；加强监督，扩大民主。
22.党的十一届三中全会：马克思同中国实际相结合第二次飞跃的起点
1978年12月，重新确立马克思主义的思想路线，政治路线和组织路线，改革开放的序幕由此拉开。
科学评价了毛泽东和毛泽东思想，彻底否定了“以阶级斗争为纲”的理论。重新确认实事求是的思想路线。
把工作重心转向经济建设，确立社会主义初级阶段基本路线。形成党的二代领导集体，创立邓小平理论。
23.党的十一届四中全会
《关于加快农业发展若干问题的决定》确认“统分结合”的家庭联产承包责任制。“政社合一"的人民公社制度解体，成立乡镇基层政权，将村民委员会作为村民自治组织。
24.党的十一届六中全会：党和国家在指导思想上拨乱反正的完成 通过《关于建国以来党的若干问题的决议》，正确评价文革，分析原因。实事求是评价毛泽东的历史地位。
正确评价毛泽东思想（活的灵魂：实事求是，群众路线，独立自主）。
25.党的十二大
1982年十二大召开，邓小平在这次大会上第一次提出了“建设有中国特色的社会主义”的崭新命题。
到20 世纪末，GDP翻两番，人民物质文化生活达到小康水平。
26.党的十二届三中全会
1984年10月在北京召开，通过了《关于经济体制改革的决定》，确认我国社会主义经济是公有制基础上的有计划的商品经济。
在《决定》精神的指导下，以城市为重点的整个经济体制改革从1985年起全面展开。形成以公有制为主体，多种经济成分并存的局面。
27.中国共产党十二届六中全会
1986年9月28日在北京举行。会议通过了《中共中央关于社会主义精神文明建设指导方针的决议》，阐明了精神文明建设的任务，培养有理想，有道德，有文化，有纪律的公民。
28.1987年十三大召开，十三大第一次系统地阐明了关于社会主义初级阶段的理论，明确概括了党在社会主义初级阶段“一个中心，两个基本点”的基本路线。
提出经济体制改革和政治体制改革的任务（建立有计划的商品经济和高度民主、法制完备、富有效率的政治体制）。
大会还制定了社会主义现代化建设“三步走” 的战略部署。
29.党的十四大：邓小平南方谈话，为十四大召开作了理论准备 确立邓小平建设有中国特色社会主义理论在全党的指导地位。明确经济体制改革的目标是建立社会主义市场经济体制。
30.党的十五大：高举邓小平理论伟大旗帜
1997年党的十五大召开，在大会通过的党章中，把邓小平理论作为党的指导思想，并写入修改后的党章。
提出党在社会主义初级阶段的基本纲领。大会指出：公有制为主体，多种所有制经济共同发展，是社会主义初级阶段的基本经济制度。依法治国是当领导人民治理国家的基本方略。选举了以江泽民为首的领导机构。
31.党的十六大：与时俱进的大会
2002年党的十六大召开，把“三个代表”确立为全党的指导思想。并实现了我们党承前启后，完成整体性新老交替的任务。
明确提出“全面建设小康社会”，加快推进社会主义现代化，为开创中国特色社会主义事业新局面而奋斗。
32.中国共产党十六届三中全会
以人为本，全面协调可持续的科学发展观。
提出按照统筹城乡发展、统筹区域发展、统筹经济社会发展、统筹人与自然和谐发展、统筹国内发展和对外开放的要求。
33.中国共产党十六届五中全会：科学发展观是推动社会发展，加快现代化建设必须坚持的指导思想
34.中国共产党十六届六中全会
《中共中央关于和谐社会若干问题的决定》指出：社会和谐是中国特色社会主义的本质属性（特征是民主法治，公平正义，诚信友爱，充满活力，安东有序，人与自然和谐相处）。马克思主义指导思想，中国特色社会主义共同理想，以爱国主义为核心的民族精神和以改革创新为核心的时代精神，社会主义荣辱观，构成社会主义核心价值体系的基本内容。将“和谐”列入现代化建设的奋斗目标。和谐社会的提出使中国特色社会主义事业发展为经济建设，政治建设，文化建设社会建设四位一体。
35.中共十七大
大会主题是：高举中国特色社会主义伟大旗帜，以邓小平理论和“三个代表”重要思想为指导，深入贯彻落实科学发展观，继续解放思想，坚持改革开放，推动科学发展，促进社会和谐，为夺取全面建设小康社会新胜利而奋斗。
大会对我国社会主义经济建设，政治建设，文化建设，社会建设作了全面部署。将科学发展观写入党章。
点击咨询 