孕产妇孕期HIV初筛检测的意义

第一篇：孕产妇孕期HIV初筛检测的意义

孕产妇孕期HIV初筛检测的意义

安亚丽

澄江县妇幼保健院

云南澄江652500 摘要：目的 为降低艾滋病母婴传播，提高儿童健康水平。方法：对459例孕产妇进行HIV抗体初筛检测。结果： 检出抗HIV待复查者5例。DIC确认1例。结论：孕产妇孕期HIV抗体初筛检测可为其早预防、早治疗提供依据，改善孕产妇孕期生活质量，提高儿童健康水平。

关键词：孕产妇；艾滋病；母婴传播；HIV抗体初筛

艾滋病全称获得性免疫缺陷综合征（AIDS），是一种由逆转录病毒引起的人类免疫防御系统方面的疫病。婴儿和儿童感染艾滋病约有90%是通过母婴传播而获得的。艾滋病母婴传播是指感染了艾滋病病毒的孕妇把艾滋病病毒传给自己的婴儿，是艾滋病病毒传播的三种途径之一。它可以发生在妊娠（主要是孕晚期）、分娩或哺乳过程中、胎儿或婴儿可通过胎盘、母产道、母乳喂养途径感染艾滋病病毒。在没有预防措施的情况下，婴儿从感染的母亲那儿获得这种病毒的风险，在发达国家为15%到25%，发展中国家则为25%至35%，这种差别主要是因为喂养习惯；与工业化国家相比，发展中国家母孕乳喂养更为普遍，时间通常更大，传播的风险也更大。艾滋病的流行对儿童的健康影响很严重，艾滋病的流行已经吞噬了将近300万儿童的生命，现今还有100万儿童携带艾滋病病毒，世界范围内，1998年新感染艾滋病病毒的人中1/10是儿童，艾滋病可能使儿童生存方面取得的进步出现逆转，艾滋病已使流行最严重国家的婴儿死亡率成倍增加，中国累计已有9000例艾滋病母婴传播发生。据世界卫生组织估计，世界上每天大约有80万儿童受到母婴传播的威胁，至今已有50万儿童因艾滋病死亡，艾滋病病毒感染使全球新生儿死亡率增加了75%。目前，我国已全面启动预防HIV母婴传播工作，通过广泛开展预防HIV母婴传播的健康教育，提高人群预防艾滋病母婴传播意识，为孕产妇提供预防艾滋病母婴传播服务，支持感染艾滋病病毒的妇女对自己的生殖健康做出知情选择，减少母婴传播，最大限度地防止所生婴儿感染HIV，提高儿童生存率，所以，预防艾滋病母婴传播刻不容缓。

材料和方法

一、受检者

我院（澄江县妇幼保健院）2007年1月——2007年3月孕产妇共459例，取静脉血，室温下自然放置1—2h，待血液凝固和血块收缩，后再用3000rpm离心15分钟，吸出血清备用，置2—8℃冰箱保存1—7天内进行检测。

二、检验试剂

1、上海科华生物工程股份有限公司提供以人类免疫缺陷病毒HIV（1/2）抗体诊试剂盒（胶体金法）

2、美国雅培有限公司提供的人类免疫缺陷病毒HIV1+2型抗体诊断试剂（胶体硒法）

3、检测

三、检验方法

首先用ELISA双抗原夹心法进行HIV抗体筛查实验，若出现阳性结果，则再用HIV1+2型抗体诊断试剂盒（胶体硒法）和HIV（1/2）抗体诊断试剂（胶体金法）两种试剂同时进行抗体筛查实验，若出现一阴一阳或两阳送CDC进行确认。

结

果 珠海丽珠试剂有限公司提供酸免疫试剂（ELISA、双抗体原夹心法）本实验测定459例孕期孕产妇HIV抗体待复查数（待复查率）为5（1.15%）送CDC确认的阳性数（阳性率）为1（0.12%）。

讨

论

在459例孕产妇中检出5例初筛阳性，血样送省疾控中心HIV确认实验室确认为1例，阳性率为0.21%，这例HIV感染者为孕39周孕妇，无艾滋病症状或体征，否认有输血史、手术史、吸毒史和卖淫史，但自认卫生意识差和防范意识差，曾被野外带血注射器划破手指。像这类患者容易被忽略不做抗HIV抗体检测，潜在的传播气焰很大，应该引起所有医务人员的高度重视，同时也提醒广大患者加强自身保护。HIV筛查结果是阴性的，要反复解释“窗口期”的意义，若在“窗口期”的建议三个月后再做检测。

此初筛实验其检出HIV待复查5例，确认1例，确认占待复查的20%，提示此初筛实验为避免漏检HIV抗体阳性提供了重要的依据，有利于预防孕产期艾滋病母婴传播。

此初筛试验共检出HIV待复查5例，确认1例，确认占待复查的20%。提示此初筛试验为避免漏检HIV抗体真阳性提供了重要的依据。初筛试验的开展也为HIV确认试验（免疫蛋白印迹法）省去了许多不必要的麻烦。确认试验一个是成本高，方法复杂，在HIV确认实验室才能开展，不能普及。而初筛试验因方法简便，具有快速，敏感性高等优点，适合于取得HIV抗体初筛实验室资格的基层医院，县级医院开展。HIV抗体初筛试验的开展在母婴儿阻断工作方面起了很大作用，它为医生对孕妇孕期指导提供了重要的依据，提高了母婴医疗保健水平，为孕产妇提供预防艾滋病母婴传播服务，支持艾滋病病毒阳性妇女对自己的生殖健康做出知情选择，为儿童及其父母提供关怀，支持和治疗，预防育龄妇女感染艾滋病，注意孕期保健，规范HIV感染孕产妇产前、产时、产后处理 方法和新生儿喂养和随防措施，孕期、产时和新生儿产后分别应用抗艾滋病病毒药物阻断，采用有效抗逆转录病毒治疗，可明显降低艾滋病病毒传播率，从而预防控制，最大程度地减少艾滋病病毒母婴垂直传播，降低艾滋病对妇女儿童的影响，提高妇女儿童生活质量及生存率。

初筛检测的目的是检出所有的阳性者，因此对筛查试剂的质量要求

敏感 性必须好，特异性可能相对降低，在得到一个筛查试验阳性的结果时，要想到它极为可能是真正的阳性，但也有假阳性的可能，同时还要检查实验过程中有无技术性错误和误差。但假阳性反应的原因可能很多，如一些会有针对HLA抗原的抗体和患者自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮、风湿病）、寄生虫病（如症疾等）、其它病毒感染（如病毒性肝炎等），患者的血清标本常容易出现假阳性，越是在传染病流行率高，病种复杂的地区，发生假阳性反应的越多，这可能是由于一些传染病病原体与HIV某些抗原体决定簇有交叉反应，因此对筛查阳性结果的解释必须慎重，但初筛试剂敏感性高，可避免漏掉真正的弱阳性。

所以，初筛试验的检测因特异性、敏感性高、方法相对简便，成熟，HIV抗体除感染早期短暂的窗口期外，整个生命期间长期稳定地存在并可被检测到。国内外的经验和研究证明，实施孕期自愿咨询与HIV抗体初筛检测，可有效地预防艾滋病母婴传播，可效地降低艾滋病母婴传播的发生率，提高儿童的生存质量。

参考文献

[1]丁国芳，方利文，王克让等《预防艾滋病母婴传播培训教程》2005，3 [2] 王临虹《预防艾滋病母婴传播》

[3] 颜淑妩、董文波、周永辉、魏婷《艾滋病病毒（HIV）抗体初筛实验结果分析与评价》[中国卫生检验杂去chinese Journd of Neath Laboratory Techology]

第二篇：HIV抗体初筛检测程序

梅县区慢性病防治院作业指导书

文件编号：MXMBY/W66－001 标题：HIV实验室各项规章制度及标准操作规程

版号：第 1 版

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HIV抗体初筛检测程序

1.实验准备：试验开始前将试剂和样品放置在室温，按实验室SOP或者试剂说明书做好试剂准备。

2.实验操作（以华大吉比爱生物技术公司的Anti-HIV 1+2 Antibody ELISA Kit 为例）：

a 取出HIV抗原包被板。每次试验设空白对照1孔，阴、阳性对照2孔。除空白对照外，分别加入HIV阴、阳性对照各50微升，其余孔加入待检血清各50微升。贴上封口胶，置37℃温育30分钟

b 将50倍浓缩液用纯化水50倍稀释后备用

c 弃去各孔中样品、拍干。每孔加满洗液，静置数秒后弃去，如此重复洗5次，拍干。

D 除空白孔外，每孔加入酶标抗原工作液50微升，贴上封口胶。37℃温育20分钟。

e 弃去各孔中酶液，用洗液反复洗涤5次（操作同步骤3）f 每孔加入底物液A 50微升，再加入底物液B 50微升，轻拍混匀，置37℃避光显色10分钟

g 显色完毕后，每孔加入终止液50微升，轻拍混匀，立即以空白孔调零，置酶标仪450nm波长处测定OD值（参考波长为630nm）3.结果报告：对呈阴性反应的样品，可由初筛实验室出具HIV抗体阴性报告；对呈阳性反应的样品，须进行复查，不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告。梅县区慢性病防治院作业指导书

文件编号：MXMBY/W66－001 标题：HIV实验室各项规章制度及标准操作规程

版号：第 1 版

1/2 4.复检试验：对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。

5.复检报告：两种试剂复测均呈阴性反应的，则出具HIV抗体阴性；均呈阳性反应或者一阴一阳的，需送艾滋病确认实验室进行确认。

第三篇：HIV初筛实验室工作制度

HIV初筛实验室工作制度

一、人员准入制度

1、艾滋病筛查实验室技术人员必须经过相关的业务培

训，并取得培训合格证书才能从事相关工作。

2、禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经主管领导及实验室负责人批准后方可进入。

3、进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室内工作。

二、日常工作制度

1、严格遵守作息时间，按时上、下班。

2、坚守工作岗位，集中精力做好本职工作，工作

时间不得处理个人私事，不串岗及擅自离岗，不准带小孩，不准高声喧哗。

3、上班时着装整齐，要讲文明，有礼貌。

4、因公外出及时报告，因事请假，必须履行请假手续。

5、认真填写工作日志，记载处理的各项事宜。

6、收标本时严格查对制度，对不符合要求的标本应重新采集。不能立即检验的标本，要按照相关的保存要求妥善保管。

7、发出检验报告前，要认真核对检验结果，填写报告单，做好登记。

8、开展室内质控，保证检验质量，定期检查试剂和校对仪器，定期抽查检验质量。

9、发出报告后标本保留7天，一般标本和用具应立即消毒，对被污染的器皿高压灭菌后方可洗涤，防止交叉感染。

10、严格按照《全国艾滋病检测技术规范》，做好本筛查实验室的医疗废物的处理，加强生物安全管理。

11、艾滋病病毒抗体确证试验结果应当告知本人；本人为无行为能力或者限制行为能力人的，应当告知其监护人。

12、艾滋病筛查实验室的各种检测记录和各种档案暂由科室负责人负责保存，不得擅自修改和销毁。记录保存不少于十年，国家法律、法规另有规定的，仿照有关规定执行。

第四篇：HIV初筛实验室相关工作制度

HIV初筛实验室工作制度

1、本实验操作人员必须经省艾滋病初检技术培训学习合格后方可持证上岗。

2、严格遵守样本的采集、保存制度；样品的运送处理制度；遵守实验室操作、检

验结果的报告处理和保密、实验室污染物废弃物以及工作人员防护消毒隔离制度。

3、积极参加上级实验室的业务培训和技术考核。

4、必须参加省临检中心的室间质量评价工作。

5、未尽事宜按科室实验室按科室工作制度和相关管理条例执行。

HIV抗体检测程序及其流程

1、血液标本验收合格后，用初筛试剂进行检测，如呈阴性反应，则作HIV抗体阴性报告；

2、初筛检测结果呈阳性反应的标本，须进行重复检测。复检时用两种不同的初筛检测试剂复测；

3、如两种试剂复检结果均呈阴性反应，则作HIV抗体阴性报告；如均呈阳性反应，或有一份阳性，该标本需送上级实验室加以进一步证实。送检时应将重新采集的该受检者血液标本和原有血液标本一并送检。

4、检测结果的判定和处理

对HIV抗体阳性者应做好咨询、保密和报告工作。对HIV抗体阴性者，如近期有高危行为如性乱史、吸毒史、受血史，或有急性流感样症状等情况，为排除窗口期的可能，建议每3个月复查一次，连续2次。对HIV抗体可疑的对象要做好咨询和随访工作。

5、、反馈与报告程序

（一）初筛检测中发现HIV抗体阳性反应的标本，应尽快(城区一般要求在48小时内，农村要求在96小时内)将血样连同原始实验资料（包括厂家批号、试剂种类、有效期，如ELISA实验应附上阴性、阳性对照值，Cut off值及样品OD值）和送检化验单送卫生行政部门指定的初筛中心实验室，再转送确认实验室，或直接送至HIV抗体确认实验室。送检化验单必须由初筛实验室一名直接实验操作人员和一名中级技术职称以上的负责人员签名。初筛实验室不得向受检者宣布初检阳性反应结果；

（二）做好标本收集与检测登记工作，每月5日按统一表格向卫生行政部门指定的HIV抗体初筛中心实验室报告检测情况，如无HIV抗体中心实验室，则直接向省级HIV抗体确认中心报告。

HIV检测安全制度

（一）实验室工作人员要熟悉生物安全操作知识和消毒技术；

（二）不得在实验室内喝饮料、吸烟、吃食物和化妆打扮等；不得在实验室内会客；

（三）实验室用品（包括工作服）不得用于其他用途；不可将私人和无关的物品带入实验室；

（四）工作时，要戴手套、穿工作衣和隔离衣，操作时手套破损应立即丢弃、洗手并戴上新手套；

（五）不要用戴着手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等；

（六）尽量避免使用尖锐物品和器具；宜用不易破碎材料制品；禁止用口吸任何物质；

（七）工作结束后，要对工作台面消毒，如用消毒液清洗后要干燥20分钟以上；操作时有标本、检测试剂外溅时应及时消毒；平时要保持环境整洁；

（八）工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手；

（九）遇有意外事故，应立即处理并分别以口头和书面报告上级部门。如工作人员皮肤被刺伤，可以用流动水局部清洗或用刺激性较轻的含氯消毒剂浸泡皮肤创口；样品或检测试剂溅入眼内立即用生理盐水冲洗，溅入嘴内，先吐出残留的液体后，用水反复漱口；

（十）遇有高危的意外事故发生，除进行局部处理外，同时应立即采取预防措施，包括对其随访、HIV检测、休息并暂时离开原岗位3个月，按医嘱服用抗HIV药物进行预防。

HIV实验室 物品消毒处理制度

（一）血液标本置于合适容器内，加盖盖紧后运送，切勿污染盛器外部。如果盛器被污染，要用消毒液消毒。也可将血样置于有盖的塑料管内，外面套上塑料袋，封口，连同送检单一并运送，有血液外溢时，立即用消毒液消毒；

（二）各种试剂和化学品均应贴有标签，放置于合适的位置，实验台上不放置不必要的物品。任何测试用的样品和试剂不宜置于桌面或架子的边沿，以防滑落打破，污染环境。一旦污染，先在污染区外周围倒入消毒液，逐渐向中心消毒处理。

（三）实验室所有垃圾，包括用过的一次性手套和工作衣，置于专门污物袋内，经焚烧或有效消毒剂处理后丢弃，污染的非一次性工作衣应先消毒后再洗涤；

（四）所有用过的实验用品，尤其是血样管和血液标本先在实验室内消毒，再移出清洗，待消毒后再用；

（五）所有尖锐物品应置于不宜刺破的容器内，消毒后用合适的方法处理；

（六）常用的消毒剂和消毒方法与病毒性肝炎消毒方法相同。

HIV实验室工作人员 健康监护制度

（一）实验室工作人员从事工作前必须进行HIV抗体和乙肝、丙肝等肝炎病毒标记物的检测；

（二）每半年进行一次HIV抗体的复检，并保留血样一年以上；

（三）遇有意外事故，接触者应在接触当时、接触后6周、3个月、6个月及12个月各采血检查一次；

（四）患有皮肤疾患，尤其有皮肤溃烂、破损情况要及时诊治。

HIV实验室操作技术要求

一、样本的采集

（一）血液是最常见的样品，包括血清、血浆和全血，有时用唾液或尿液作测试样本。样品采集应按试剂盒说明书要求采集。

（二）采血时一定要注意安全，采血用一次性注射器，谨慎操作，防止发生刺伤皮肤和造成外界污染。血样如即时用，可存于普通冰箱，如要长期保存，则置于一200C及以下。如用滤纸采样，则手指或耳垂局部消毒严格按常规进行，在刺破皮肤后，迅速把滤纸沾上，切勿让血液滴落在其他物体表面造成污染。采血后要待血样干燥后再包装送检。如要置于低温，将滤纸放进塑料袋，可以长时间保存。滤纸上的血量，一般直径为6．3毫米的圆点滤纸血样相当于10微升全血或5微升的血清。

二、样本的运送

样品从一个实验室转送到另外一个实验室，必须是血清或血浆，除特殊需要外，一般不能用全血，且须置于带有盖帽的试管内，防止样品流出，试管上应有明显的标记，标明种类、姓名、地区、时间或原有的编号。将试管放入专门带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理，在所放试管周围上下均垫有软性物质，以免碰碎，容器外标有HIV检测专用字样。如果路程较远或者气候炎热时，盛有样本的容器应置于40C以下运送。送样同时需附送验单。如有特殊情况，对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但盛样品的试管，必须包扎好，保证不会破碎、溢漏。如果为滤纸标本，置于塑料袋后再放入特快专递投寄。

三、样本的处理

（一）对从其他实验室送来的样品，注意检查并注明其送检单与标本记录的符合、样品管破损、溢漏情况。如有溢漏应立即将尚留存的血样移出，并对管壁和盛器消毒。要检查并记录样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸等情况。如经过某些临床治疗可导致样品自发荧光的，不能供荧光方法测试用。

（二）对实验室自己采集的样品，最好将血液先自然存放1-2时后，再用3000rpm离心15分钟，吸出上清液备用，如在几天内检测可放在2－8℃冰箱中，如要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。

四、样本的加量和稀释

严格按照每种试剂说明书规定加样量和稀释度操作，不能擅自更改，要做到准确地取样、加样和稀释。加样器刻度必须标化，包括移液器、刻度吸管和机械吸液管，尤其移液器一定要高质量的，要随时测定其容量精确度。加样要小心，不要使吸头碰着了酶标板（或细胞板）孔上的包被抗原或抗体层。一般均应先加入样品稀释液后再加入样品。为保证加样的准确，加入稀释液、酶抗体、底物等均应以多孔道加样器为主，使用时要注意防止吸头间的交叉污染。

五、血清制品的检验

目前市售的各类诊断试剂主要适合于人血清或血浆样品，而血制品如免疫球蛋白、凝血因子VIII和IX等均为浓缩制品，检测方法与直接采集人血测定有别，要按照国家有关要求进行检验。

六、样本测试时的其他条件

要严格按照各厂家试剂盒说明书操作，包括试剂加量、洗涤次数、保温（温育）反应时间、显色时间、读数时间、阴、阳性对照状态、仪器设备稳定性等。如ELISA法（俗称酶标法），必须用仪器测定，不能目测。测试时，必须按规定波长测试。要随时掌握仪器的正确性。

医务人员职业暴露处理流程

1、血液、体液等溅洒于皮肤、黏膜表面应立即先用肥皂，再用清水、自来水或生理盐水冲洗。

2、溅入口腔、眼睛等部位，用清水、自来水或生理盐水长时间彻底冲洗。

3、皮肤针刺伤、切割伤、咬伤等出血性损伤，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤部位的血液，禁止进行伤口的局部挤职业暴露处理流程图 压，然后用清水、自来水或生理盐水彻底冲洗，再用0.5%碘伏、70%酒精、0.2%-0.5%过氧乙酸、3%双氧水等消毒创面。

第五篇：HIV初筛实验室规章制度

HIV初筛实验室规章制度

一、人员准入制度

1、艾滋病筛查实验室技术人员必须经过相关的业务培培训，并取得培训合格证书才能从事相关工作。

2、禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经主管领导及实验室负责人批准后方可进入。

3、进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人批准，穿戴好个人防护用品后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室内工作。

二、岗位设置及职责

1、工作范围：HIV抗体初筛检测。

2、工作岗位及负责人：检测岗 许光山 审核岗 张珍全

3、岗位职责：

3.1检测岗主要负责标本的接收、核对、离心；检测前试剂的准备；日常标本的检测及室内质控；仪器保养维护及记录；医疗废弃物的处理；可疑结果的报告。3.2审核岗主要负责报告结果及室内质控的审核；可疑结果的复检工作；临床联系及咨询服务；外检标本的收集及复检单的填写；室间质评及盲样考核的检测、数据上报等工作。

三、原始结果保存

艾滋病筛查实验室的各种检测记录和各种档案均由科室指定专人保存，不得擅自修改和销毁。记录保存不少于十年。