具有抑菌功能的表面活性剂的调研报告

第一篇：具有抑菌功能的表面活性剂的调研报告

关于具有杀菌功能的阴离子表面活性剂的合成及

应用研究的调研报告

1.摘要

本文以三聚氯氰、脂肪胺、氨基乙磺酸、2-氨基苯并咪唑为原料，合成了三种具备抑菌性的含三嗪环阴离子型表面活性剂：2-正己氨基-4-（2-磺基乙基）-氨基-6-（苯并咪唑基）-氨基-1,3,5均三嗪（BSC6T），2-正辛氨基-4-（2-磺基乙基）-氨基-6-（苯并咪唑基）-氨基-1,3,5均三嗪（BSC8T）和2-正十二氨基-4-（2-磺基乙基）-氨基-6-（苯并咪唑基）-氨基-1,3,5均三嗪（BSC12T）。

采用表面张力法研究了三种化合物水溶液的表面活性。BSC6T、BSC8T、BSC12T在25℃的水溶液中均具备良好的表面活性，最低表面张力（γcmc）分别为33.1mN/m、29.7mN/m和35.2mN/m，临界胶束浓度（cmc）分别为8.5×10-3mol/L、8.9×10-4mol/L和5.3×10-5mol/L；采用量筒法研究了其乳化性能。BSC6T、BSC8T、BSC12T的乳化稳定时间分别为237s、364s和471s。

2.关键词：抑菌性，阴离子表面活性剂 3.前言

从广义上来讲，杀菌剂（Fungicide）包括杀真菌剂、杀细菌剂、杀病毒剂以及杀线虫剂，通常所说的杀菌剂，往往以杀真菌剂为主。杀菌剂广泛应用于农业、工业、医疗卫生、日常生活等诸多领域，需求量巨大。

我国是一个农业大国，农药作为一种极为普遍使用但是不可或缺的农业生产资料，在防治有害生物，保障农业生产安全等方面发挥着极为重要的作用。植物的病害由于不能轻易察觉，因此会造成巨大的危害，而植物病害的主要病因是致病菌，多数由真菌引起。全世界单是由病原真菌引起的植物病害就达上万种，造成的损失占年度总损失的10%-30%。如果将病毒、线虫引起的植物病害也算在内，损失就更加巨大。我国幅员辽阔，农业发达，作物病害种类也是多种多样，造成粮食严重损失的例子更是不胜枚举，防治植物病害是农作物增产的重大措施之一。近年杀菌剂用量呈逐年递增趋势，在农药中的比重也逐渐加大。随着我国农业种植结构调整，水果、蔬菜种植面积逐年增加，病害的发生更加普遍，国内杀菌剂市场对杀菌剂的需求仍在扩大，其销售额也会继续增加。我国杀菌剂近年发展迅速，在申报登记的产品总数逐年上升：截止2012年8月，杀菌剂共登记344个有效成分，6137个产品，其中原药582个，制剂5555个。登记的使用范围涉及85种作物，302种防治对象。

工业中，杀菌剂是用以杀灭和（或）抑制微生物生长的制剂。许多工业原料和产品，尤其是那些有机物质或含有有机成分的原材料或成品，本身就是微生物很容易利用的营养源（如食品、化妆品、纸张、皮革、纺织品、饲料、涂料以及某些塑料等），一旦环境条件适宜，微生物就会迅速生长和繁殖，破坏材料的物质结构使其劣化变质，造成巨大的经济损失。一些昂贵产品如电子设备、高端仪器等，虽不能直接被微生物利用，但是某些微生物如霉腐微生物，在养分极为匮乏的条件下仍可以繁殖生长，其分泌物或代谢产物对产品造成的腐蚀和破坏，即使是局部范围，也会对高端设备造成严重影响。

对于某一种杀菌剂来说，其归属并不是唯一的，有些杀菌剂既可以用在农业中，又可以用在工业、医疗卫生中，反之亦然；有些杀菌剂开始应用于一个领域，随后也可能拓展到其它领域。

(1)杀菌剂的研究现状

杀菌剂的发展迄今为止已有200多年的历史，它是由无机物向有机化合物发展的历史。最早使用的杀菌剂是一些无机化合物，如石灰、硫磺及其混合物，这类杀菌剂以天然矿物为原料加工而成，用于防治果树的白粉病；后来，无机汞及无机铜也开始作为杀菌剂使用，最为人们所熟知的就是波尔多液，是由硫酸铜和石灰混合制成，甚至至今仍在使用。但是因其不便运输，又不能贮藏，往往现配现用，难以保证获得组成相同的产品，造成防效上的差异。

1931-1966年是保护性有机杀菌剂大量使用的时期。其中，1931年发现的福美类（二硫代氨基甲酸衍生物）开辟了有机杀菌剂的新纪元。

福美双

1942年出现了四氯苯醌，1943年出现代森类（乙撑二硫代氯基甲酸类衍生物），都是广谱、稳定、价格低廉的保护性有机杀菌剂，在相当长的时间内位于杀菌剂领域的主导地位，至今仍是需求量最大的有机杀菌剂之一。

代森铵（代森类）

四氯苯醌

1952年后，酰酞亚胺类（克菌丹、敌菌丹）、8-羟基喹啉铜以及某些抗生素，如链霉素，放线菌酮等相继问世。

克菌丹

这些保护性杀菌剂的最大缺点：没有内吸性（即不能被植物吸收至体内，只是在植物表面进行保护作用），因此会出现保护不彻底、不全面的情况，因为天气等自然环境的影响，投施频率较大，导致需要量巨大。保护式杀菌剂，相对内吸式也称作非内吸式杀菌剂。1966年，人们发现萎锈灵的内吸杀菌活性后，有机内吸式杀菌剂以其用量少、毒性低、抗菌谱大、结构多样性等优点得到了迅速的发展，其中品种最多的是三唑类杀菌剂。至1990年，内吸式杀菌剂已经占据很大的市场份额，约占整个杀菌剂市场的60%以上。

萎锈灵

再后来，杀菌剂的发展迅速，种类增多，结构也越来越复杂。从酚类、取代苯衍生物、嘧啶类、有机磷杀菌剂，到酰胺类，Strobilurin类，新三唑类等等。如今，杀菌剂的使用仍以内吸式为主。

嘧啶类杀菌剂通式

肟醚菌胺（Strobilurin类）

在内吸式杀菌剂中，有一类杀菌剂-苯并咪唑类杀菌剂近年来发展迅速，应用领域广，受到人们的广泛关注。

多菌灵

苯菌灵

(2)苯并咪唑杀菌剂

苯并咪唑类杂环化合物及其衍生物具有杀菌、消炎、抗氧化、抗癌、抗寄生虫等活性，广泛应用于食品的防腐和防虫、动植物病毒的防治、人体疾病如肿瘤的防治等，因此苯并咪唑类化合物的合成具有极大的应用价值。在农业方面，对真菌、细菌、病毒、螨类等具有强的杀菌、抑菌作用，对无性植物有促进子叶和根代谢的作用，此外，也可以作为种子消毒剂；在工业方面，可以作为贵金属缓蚀剂、工业杀菌剂等；在医药方面，由于苯并咪唑所含的咪唑环具有抗菌、抗炎、抗寄生、抗癌、镇静、利尿等药物活性，对协调生理平衡具有重要意义，此外，还具有改善心血管活性、降血压的功效，也可作为动物中毒的解毒剂。由于多菌灵的应用较早，所以，通常也会习惯将苯并咪唑类杀菌剂称为多菌灵类杀菌剂。

在杀菌、抑菌方面，苯并咪唑类杀菌剂越来越为人们所青睐。由于菌体细胞要维持其正常的生命代谢，所以必须进行多种生理作用，总体上可分为能量代谢与物质代谢作用。因此，杀菌剂也可大体分为能量合成抑制剂和生物合成抑制剂。能量合成抑制剂的原理是通过抑制细胞的生物呼吸过程中的某一任意环节，表现出的杀菌效果。生物合成抑制剂是干预菌体维持生命和繁殖所需要的新细胞物质产生的过程。生物合成抑制剂分多种，分别可通过抑制细胞壁（若存在）、细胞膜的合成，也可能是核酸、蛋白质等合成的抑制剂。苯并咪唑类杀菌剂的作用机制就是通过抑制核酸的合成来抑制细胞分裂。苯并咪唑类杀菌剂一般是碱基类似物，作用时，它们或者作为代谢拮抗物质直接抑制核苷酸生物合成有关的酶，或者通过直接掺入合成核酸分子的原料中，使得细胞合成“掺假的核酸”，进而形成异常的DNA或RNA分子，导致合成核酸功能的破坏。如噻菌灵，会抑制真菌线粒体的呼吸作用和细胞增殖，干扰DNA合成；苯菌灵会干扰真菌菌丝的有丝分裂；多菌灵会干扰菌丝体有丝分裂中纺锤体的形成，从而影响细胞分裂。

苯并咪唑由于其含氮杂环具有活性高、选择性好、毒性低等特点，近十年作为杀菌剂的研究、开发、应用非常活跃，近期更是通过化学结构的变化衍生出种类繁杂的新颖物质，具备功能性良好、高效、用量少、应用范围广、环境友好等优点。此外，它能和几乎所有杀菌剂复配使用，不仅自身成本较低，而且通过复配达到更好的药效，更加降低了使用成本。2008年我国多菌灵年产量已达3万吨以上，还经常出口一些国家如巴西、阿根廷、俄罗斯、韩国等。2009年数据显示，中国的出口量是1.44万吨，2010年后还在逐年增加。这些足可以说明苯并咪唑成熟的产品品质。它也可以用在如造纸、皮革、涂料等工业领域，还常被用作设计工业杀菌剂的母核。此外，有研究表明在苯并咪唑2位取代时．可提高其生理活性，这又为苯并咪唑提供了更加广泛的开发前景。(3)表面活性剂及其杀菌、抑菌性

表面活性剂（surface active agent；surfactant）是一类重要的精细化学品，如今，其应用范围几乎覆盖了精细化工的所有范畴，具有在添加量很小的情况下能够显著降低溶液（通常为水）的表面张力或两相间的界面张力的特性，具备良好的增溶、乳化、润湿、起泡和洗涤等作用，在工业领域中也有着“工业味精”的美誉。表面活性剂通常按照离子类型，可分为离子型表面活性剂和非离子型表面活性剂两类，而离子型表面活性剂又可分为阳离子、阴离子、两性离子型表面活性剂。

表面活性剂为人们发现有杀菌性早在1935年。Domagk研究了季铵盐杀菌作用与其化学结构的关系，后来Wetzel进行了临床消毒试验后逐步引起了人们的重视。随着表面活性剂领域的不断发展，其杀菌性也在不断的为人们所利用。我国在1964年研究了一种季铵盐类化合物-苯扎溴铵（新洁尔灭）的杀菌作用，1971年总后药检所进行了进一步研究，并推荐作为消毒剂使用。

苯扎溴铵（新洁尔灭）

目前已知的表面活性剂中，阳离子型表面活性剂的杀菌性应用得最为广泛，特别是分子中带有苄基的季铵盐类阳离子表面活性剂表现出很强的杀菌作用。其他类表面活性剂，如两性离子型表面活性剂，也表现出一定的杀菌性，但是目前应用有限，通常在其他方面如金属缓蚀、个人洗护、食品、制药工业等领域发挥重要作用。而阴离子型及非离子型表面活性剂几乎没有表现出任何的杀菌、抑菌作用。

阳离子型，尤其是季铵盐类表面活性剂是目前应用广泛的一类具备杀菌活性的表面活性剂，通常有单链季铵盐和双链季铵盐两类，它的杀菌机理为：季铵盐离子在水中带正电荷，可以吸附于带负电荷的细菌表面，形成微团，由于菌体细胞的细胞膜为磷脂双分子结构，因此其在生物代谢的过程中，会把表面活性剂的疏水链段“认为”是合成细胞膜结构的原料，因此在疏水链段逐步渗入细胞类脂层的过程中，胞膜通透性随之改变，细胞内容物外渗，导致微生物发生接触死亡。细胞表面的吸附作用同时能使蛋白聚凝，酶和结构蛋白发生变性，抑制微生物的新陈代谢，从而将微生物杀死。可见，季铵盐型表面活性剂的杀菌机理是针对细菌进行吸附，进行接触式杀菌的。

季铵盐类表面活性剂的这种性质，在很多领域如石油开采、循环冷却用水的杀菌处理、钻井液用杀菌剂等领域发挥着举足轻重的作用，甚至在光电磁学、催化以及纳米科学等方面有很多潜在的应用。

但是，对于某些特殊体系，特别是胶体体系，基于其杀菌机理，想要达到对微生物的杀灭作用，此类表面活性剂必须达到一定的添加剂量，使得被保护体系的每个角落都有表面活性剂的存在。这使得表面活性剂对目标物的保护部位缺乏针对性，对其集中发挥杀菌作用的位点缺乏定位，从而导致需要投加较大的剂量。不仅造成没有必要的浪费，长时间使用还会造成抗药性。此外，由于电荷的原因，其应用领域也必将受到一定的限制。(4)本项目的立题依据及意义

基于上述问题，利用苯并咪唑基团，拟合成一种具备抑菌性的阴离子型表面活性剂，并将其利用于天然橡胶胶乳的短期保存中，使得其在胶体中发挥表面活性剂在相界面间的定向吸附作用，针对易发生变质的橡胶粒子进行集中保护，针对性强，达到降低杀菌剂用量的目的。这从根本上区别于阳离子季铵盐型表面活性剂的杀菌机理。阴离子型表面活性剂乳化效果较好，同时使表面活性杀菌剂不仅仅局限于阳离子季铵盐型。

因此，本课题以三聚氯氰、脂肪胺、氨基乙磺酸、2-氨基苯并咪唑为原料，利用三聚氯氰的特殊结构作为骨架，采取三步亲和取代的方式，拟合成三种具备抑菌性的含嗪环阴离子型表面活性剂。三聚氯氰的三嗪环具有较高的稳定性，三个氯原子因受到C=N影响具有较高的反应活性，反应条件易于控制；选取的原料易得，合成路线设计合理；产品状态良好，后处理方法简单。

总之，本项目具有重要的理论及现实意义。

4.具备抑菌性阴离子表面活性剂的合成 在三聚氯氰的结构中，均三嗪环具有很高的稳定性，由于环中氮原子带有一对未成键的孤对电子，碳原子电子云密度较低，极易被供电基团诸如-NH2、-OH、-SH等官能团进攻而发生亲核取代反应，因此可以制备出多种均三嗪环衍生物。本论文利用三聚氯氰的这种特性，利用不同链段长度的脂肪胺，氨基乙磺酸以及2-氨基苯并咪唑，合成了三种具备抑菌性含三嗪环阴离子型表面活性剂。

表1 实验原料与主要试剂

序号 名称 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

表2 实验主要设备与仪器

序号 名称 1 2 3 4 5 6 7 8 9

（1）实验部分 三用紫外分析仪 低温冷却液循环泵 精密定时电动搅拌器 电热恒温油浴锅 微波催化合成/萃取仪

型号 ZF-7型

生产厂家

太原市顶杰科教仪器 三聚氯氰 正己胺 正辛胺 正十二胺 无水碳酸钠 氨基乙磺酸 2-氨基苯并咪唑 甲苯 无水甲醇

规格

生产厂家

工业品 河北诚信有限责任公司 分析纯 阿拉丁试剂（上海）有限公司 分析纯 阿拉丁试剂（上海）有限公司 分析纯 阿拉丁试剂（上海）有限公司 分析纯 天津市申泰化学试剂有限公司 分析纯 阿拉丁试剂（上海）有限公司 分析纯 阿拉丁试剂（上海）有限公司 分析纯 天津市申泰化学试剂有限公司 分析纯 天津市恒兴化学试剂制造有限公司

氢氧化钠（粒状）分析纯 天津市恒兴化学试剂制造有限公司 丙酮 茚三酮 浓盐酸 薄层色谱硅胶板

工业

中国石油化工有限公司

分析纯 天津市化学试剂三厂 分析纯 天津市申泰化学试剂有限公司 HF254

于成化工（上海）有限公司

DLSB-10L/10 巩义市予华仪器有限公司 JJ-1型 W-O型 XH-100A

江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司 巩义市予华仪器有限公司 北京祥鹄科技发展有限公司 东莞市科桥超声波设备有限公司 河南巩义市英峪予华仪器厂 巩义市予华仪器有限公司 上海博迅实业有限公司医疗设备厂 中国超声波专业清洗仪器 KQ-200DE 循环水式多用真空泵 旋转蒸发仪 真空干燥箱

SHZ-CD型 RE-201D型 DZF-6050型 以2-正己氨基-4-（2-磺基乙基）-氨基-6-（苯并咪唑基）-氨基-1,3,5均三嗪（BSC6T）为例： BSC6T的合成可通过三步亲核取代完成。合成路线如图所示。

图1 BSC6T合成路线

（2）实验步骤 1、4,6-二氯-2-正己氨基-1,3,5-均三嗪（C6T）的合成

将18.45g（0.1mol）三聚氯氰溶于150mL甲苯中，移入1000mL四口烧瓶，在不断搅拌条件下维持冰水浴环境20分钟。准确称取12.14g（0.12mol）正己胺溶于250mL甲苯，在恒压状态下缓慢滴入反应体系中，保持平均2~3秒1滴。滴加完毕后，将10.6g（0.1mol）无水碳酸钠固体溶于300mL去离子水中配成溶液，在恒压状态下缓慢滴入反应体系中，平均3~4秒1滴。利用TLC跟踪反应监测终点，展开体系为甲苯：丙酮=1:1（V/V）。反应完毕，滤去体系不溶物，将滤液移入分液漏斗中，静置分层，弃去水层后将甲苯溶液用稀盐酸充分洗涤除去过量的胺，饱和碳酸氢钠溶液充分洗涤至水层pH=7~8，最后用去离子水洗涤至中性。将甲苯溶液用无水硫酸钠干燥静置6~8h后，减压浓缩，结晶得到第一步中间体C6T。

2、2-正己氨基-4-（2-磺基乙基）-氨基-6-氯-1,3,5均三嗪（SC6T）的合成

将29.88g（0.12mol）C6T溶于150mL干燥的丙酮中，移入1000mL四口烧瓶，在40~45℃恒温水浴加热并不断搅拌的条件下，恒压滴入12.52g（0.1mol）氨基乙磺酸的水溶液（加入少许碳酸钠助溶，溶液pH=7~8），平均2秒1滴。滴加完毕后，将无水碳酸钠10.6g（0.1mol）溶于300mL去离子水中配成溶液，在恒压状态下缓慢滴入反应体系中，平均3~4秒1滴。利用TLC跟踪反应监测终点，展开体系为丙酮：甲苯：水=6:1.5:0.5（V/V/V）。反应完毕，将反应液冷却后，在不断搅拌下缓慢加入稀盐酸至上清液pH=2-3，不断搅拌20分钟，减压抽滤后弃去滤液，将滤饼在温度45℃情况下反复用去离子水洗涤，再用丙酮充分洗涤，干燥后得第二步中间体SC6T。

3.、2-正己氨基-4-（2-磺基乙基）-氨基-6-（苯并咪唑基）-氨基-1,3,5均三嗪（BSC6T）的合成

将SC6T33.75g（0.1mol）与8g（0.2mol）氢氧化钠混合溶于250mL水，移入微波反应器中，不断向反应器中通入氩气并升温至90℃保持20分钟。将11.22g（0.1mol）三乙烯二胺溶于150mL去离子水恒压状态滴入微波反应器中。20min后将15.98g（0.12mol）2-氨基苯并咪唑溶于水，恒压状态滴入微波反应器中，平均1秒1滴。利用TLC跟踪反应监测终点，展开体系为甲醇：甲苯=3:2（V/V）。反应完毕，向反应体系中滴加稀盐酸至pH=7-8，随后减压浓缩，再将混合物静置冷藏，随后趁冷在不断搅拌下用稀盐酸将pH调至2-3，减压抽滤，将滤饼烘干，用丙酮在45℃情况下充分洗涤得终产物BSC6T。在使用时，应用摩尔比1:1的氢氧化钠将产品中和成钠盐形式方可使用。

利用同样的方法，以正辛胺，正十二胺为原料合成不同疏水链段长度的产品，分别标记为BSC8T、BSC12T，对应第一、第二中间体分别标记为C8T、SC8T和C12T、SC12T。（3）产品的表面活性

BSC6T、BSC8T、BSC12T的γ-lgc曲线如图2所示：

cmc为表面活性剂在溶液中形成胶束时所需的最低浓度。如图显示，随着溶液浓度不断减小，表面张力在开始时维持一定值，当稀释至某一浓度时，溶液的表面张力突然增大，曲线出现转折点，而后随着稀释的不断进行，表面张力不断增大，直至没有显著变化为止。曲线转折点前后两直线交叉点对应浓度为产品在25℃下的cmc值，此处对应的表面张力为最低表面张力γcmc。结果如表3所示：

表3 产品的cmc与γcmc数据

cmc（mol/L）

8.5×10-3 8.9×10-4 5.3×10-5

γcmc(mN/m)

33.1 29.7 35.2

BSC6T

BSC8T

BSC12T 结果表明，产品在25℃的水溶液中均具备良好的表面活性，cmc较低。不同产品比较，cmc随着疏水链段的增长表现出减小的趋势，这是因为，疏水链段是驱使离子型表面活性剂在水中形成胶束的因素，随着疏水链段中碳原子数增加，憎水效应增加，因此在水溶液中更容易发生聚集，因此易于形成胶束，cmc下降。γcmc从理论上没有明显的趋势。（4）产品的乳化性能

从广义上讲，在两种不互溶的液体中，一种液体以微滴形式分散于另一种液体中所形成的多相分散体系，称为乳状液。这种形成乳状液的作用称为乳化作用。

实验得出，BSC6T、BSC8T、BSC12T的乳化稳定时间分别为237s、364s和471s，三种产品中BSC12T的乳化效果最佳，BSC8T次之，BSC6T最差。这是因为，水与液体石蜡充分混合形成的乳状液为“O/W”的分散体系，表面活性剂在其中会发挥在界面间的定向吸附作用，疏水链段吸附于石蜡一相，将两相界面转化为致密的分子态的界面膜，降低界面能，阻止了液滴间的聚集。因此，疏水链段越长，在相界面间的定向吸附能力越强，越容易形成稳定的界面膜，破乳时间越长。因此，随着疏水链段的增长，乳化稳定时间越长。

5.结论

本文以三聚氯氰、脂肪胺（包括正己胺、正辛胺和正十二胺）、氨基乙磺酸、2-氨基苯并咪唑为原料，合成了三种具备抑菌性的含三嗪环阴离子型表面活性剂（分别标记为BSC6T、BSC8T、BSC12T）。对三种产品的表面活性、乳化性能进行了研究。实验得到以下结论：

（1）反应原料易得，条件温和，后处理工艺简单。产率比较理想，合成第一步中间体CT的产率为85%以上，第二步中间体SCT可达90%以上，虽然第三步反应全程使用氩气保护，但是由于在强碱性、高温条件下原料2-氨基苯并咪唑易氧化变质，导致终产品的产率较低，（2）采用吊片法测量了三种产品水溶液在25℃下的表面张力，并计算出cmc。结果表明，BSC6T、BSC8T、BSC12T均具备良好的表面活性，临界胶束浓度（cmc）分别为8.5×10-3mol/L、8.9×10-4mol/L和5.3×10-5mol/L，最低表面张力(γcmc)分别为33.1mN/m、29.7mN/m和35.2mN/m。说明随着疏水链段的增长，产品的cmc减小，而最低表面张力没有表现出明显的规律。

（3）采用量筒法研究了三种产品的乳化性能。BSC6T、BSC8T、BSC12T的乳化稳定时间分别为237s、364s和471s，说明乳化效果顺序为BSC12T＞BSC8T＞BSC6T。

（4）基于本产品的抑菌机理，在表面活性剂的选择上，可尝试一些改进，比如适当增长疏水链段长度或选择非离子型表面活性剂，如聚氧乙烯醚型表面活性剂作为抑菌基团的载体等。但是，在胶乳后续的凝固过程中，要保证所选择的表面活性剂破乳性能良好，还要从凝固用酸量、凝固时间等因素综合考虑其可行性。

第二篇：抗生素抑菌实验实验报告

抗生素抑菌实验实验报告

探 究 抗 生 素 抑 菌 效 果 试 验 报 告

实 验 报 告

实验目的:探究丌同种类抗生素的灭菌效果

实验器材:培养皿，量筒，滴管，锥形瓶，显微镜等

实验药品:琼脂，牛肉膏，蛋白胨，????、????溶液，菌落培养液，氯霉素，青霉素，硫酸庆大霉素等

实验基本原理:

一、常用的抗生素的分类:

1.倍他-内酰胺类:(1).V、阿莫西林、哌拉西林针;(2).头孢类:如头孢氨苄、头孢拉定;2.大环内酯类(红霉素类):、罗红霉素、阿奇霉素、克拉霉素等;3.喹诺酮类:诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星等;4.氨基糖苷类:

5.四环素类:土霉素、四环素、米诺环素，美满环素等; 6.氯霉素类抗生素:、甲砜霉素、无味氯霉素等 7.其他类:甲氧苄啶、磺胺嘧啶、克林霉素、呋喃唑酮等。

(本实验中选择生活中最常见的青霉素、氯霉素和硫酸庆大霉素)

二、抗生素抗菌的机理分类:

1.阻碍细菌细胞壁的合成。以这种方式作用的抗生素主要是 β-内酰胺类抗生素(头孢菌素类)。

2.不细菌核糖体或其反应底物相互所用，抑制蛋白质的合成。以这种方式作用的抗生素包括四环素类抗生素、大环内酯类抗生素、氨基糖苷类抗生素(庆大霉素)、氯霉素等。

3.不细菌细胞膜相互作用，增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道，让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。

4.阻碍细菌 DNA 的复制和转录 5.影响叶酸代谢

实验步骤:

?用蒸馏水清洗用具并制作九只培养基。

?适当稀释菌落培养基后，各取 0.1ml 菌液，使用涂布平板法分别接种到九只培养基上。

?将九只培养基编号，并均分为 A、B、C 三组。

?用滤纸剪出 18 个直径 2cm 的圆片，6 个浸泡青霉素，6 个浸泡氯霉素，6 个浸泡硫酸庆大素。完成后贴在培养基上，每只培养基贴 2 片。

?将做好标记的培养

基培养一段时间，观察细菌生长情况。

?取出平板，测量出抑菌圈的直径大小，并做好记录。

?整理数据，得出结论。

结 果 统 计 表

(注:抑菌圈半径记为 R1;圆片半径 1cm 记为 R2)

实验结论: 硫酸庆大霉素抑菌效果最好，青霉素抑菌效果最差。

篇二:实验 11-抗生素的抑菌试验

实验十一抗生素的抑菌试验

一 目的要求

1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法 2、了解抗生素的抗菌谱

二 实验原理

抗生素是某些植物不微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。

由亍丌同微生物对丌同抗生素的敏感性丌一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。而且当某种抗生素长时间用亍敏感微生物生长后，即使同一种菌的丌同菌株对丌同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长不繁殖，因而丌断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物迚行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法不纸法迚行检测，根据透明抑菌圈的有无不大小作为依据。

三 实验器材

1、菌种 枯草杆菌、大肠杆菌。

2、培养基 MH(Mueller-Hintion)琼脂。

3、试剂 青霉素、链霉素。

四 方法步骤

1、无菌滤纸片 以孔径 6mm 打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121?蒸汽湿热灭菌，100?烘干2h。

2、抗生素溶液制备 将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。

3、指示菌悬浮液的制备 枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。

4、混菌平板制备 取批示菌细胞悬浮液 1mL 加入无菌培养皿内，再加入温度为 43~45?的 PDA 培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 20mL，立即振荡使细胞不培养基混合均匀，静置冷凝。

5、平板加抗生素溶液 将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡 2min 以上，然后将纸片放亍混菌平板上，每皿呈三角形放 3 点，每点贴放纸片 2 张。

6、培养不观察 将平板放亍每 24h 测量一次透明抑菌圈直径，共测量 3 次。

五 结果

1、实验结果

测量每个平板 3 个抑菌圈直径，计算每次测量各平板 3个抑菌圈直径的平均值，结果填亍表内。

表 1 青霉素对供试菌的抑菌效果(抑菌圈直径:mm)

培养时间

菌种名

表 2 链霉素对供试菌的抑菌效果(抑菌圈直径:mm)

培养时间

菌种名

2、结果分析

120

144

168

120

144

168菌液制备

1)对数生长法:从琼脂平板上选取至少 3~5 个形态特征一致的菌落，用接种环转移至含 4~5ml 的肉汤培养管(如胰酶消化大豆肉汤)中，35?培养 2~6h。用无菌盐水或肉汤调整菌液浊度相当

亍 0.5 麦氏标准。

2)直接菌落法:从培养 18-24h 的非选择性培养基(如血琼脂)平板上，挑取单个菌落，直接用肉汤或无菌盐水制成 0.5 麦氏标准浊度的悬液。接种

细菌悬液制备后 15min 内接种至 MH 琼脂平板。用无菌棉拭醮取菌悬液，在管内壁液面上方旋转紧压，将多余菌液挤去，最后沿平板内缘涂抹一周。贴药敏纸片

涂布后的平板在室温下干燥 3~5min，用纸片分配器或无菌镊子将纸片贴亍琼脂表面并轻压，使纸片不琼脂表面完成接触。各纸片中心相距应大亍 24mm，纸片贴上后就丌能再移动位置。培养

将平板倒置放入 35?孵箱(厌氧菌敏平板应放置亍5%~10%CO2 环境中)，16~18h 读取结果，葡萄球菌和肠球菌必须培养 24h 以检测对苯唑西林和万古霉素的耐药性。结果判断

抑菌圈的直径(包含纸片的直径)，以毫米数报告(取整数)。根据 CLSI 判定标准测量抑菌圈直径大小可以判断细菌对该抗生素是敏感、中介还是耐药，如下图。

敏感(S):表示常觃剂量的测定药物在体内所达到的浓度能抑制或杀灭待测菌。

中介(I):丌是敏感性的度量，而是一个“缓冲区”，用以防止因微小的技术因素失控导致的结果偏差，因而其临床意义是丌确定的，故丌应作临床报告。

耐药(R):表示常觃剂量的测定药物在体内达到有效浓度时丌

能抑制待测菌生长。

五、结果不思考题

1、记录各菌对丌同药物的敏感程度 2、思考题

(1)圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项,(2)试述药敏试验的意义

实验十二细菌对抗生素的药物敏感试验

各种微生物对化学药物、抗生素等敏感性各异，即使同一种菌的丌同菌株对丌同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生耐药性变异。因此，测定细菌对药物的敏感程度，对亍临床治疗中选择用药，及

时控制感染具有重要意义。

常用方法有纸片弥散法和试管稀释法。

实验目的 一、纸片法 材料

1(菌种:枯草杆菌、大肠杆菌。

2(培养基:普通琼脂平皿培养基。

3(抗菌药物:青霉素、链霉素、氯霉素、庆大霉素纸片。

4(其他:无菌棉棒、镊子、酒精缸等。

方法

1(用灭菌棉棒分别沾取金黄色葡萄球菌 1 号和 2 号及痢疾杆菌肉汤培养物，分别涂布在琼脂表面，每种菌涂一个平皿(沾菌棉棒用后，放入消毒缸中，勿乱丢)。

2(用小镊子沾酒精烧灼消毒，待冷后镊取一种药物纸片，贴在涂有细菌的平皿上，然后将镊子再沾酒精烧灼后，镊取另一种药物纸片，贴布亍琼脂平皿另一处，如此将几种药物纸片贴完，各纸片距离要大致相等。

3(将已做好的药敏琼脂平皿，置 37?培养 18,24 小时，观察

各药物纸片的抑菌效果。即观察药物纸片周围有无抑菌圈，如有，在平皿底面用尺量其直径大小，测定药物敏感程度。各种抗生素抑菌圈直径不敏感标准见表 12-1。

篇三:抗生素抑菌试验报告

实验报告:抗生素灭菌效果探究

高二(6)班 王一峰 实验器材:培养皿，恒温箱，锥形瓶，滴管，显微镜等 实验药品:琼脂，菌落培养液，多种抗生素。

实验基本原理:抗菌素抗菌的机理大致有如下几种:

1.阻碍细菌细胞壁的合成。以这种方式作用的抗生素主要是 β-内酰胺类抗生素(青霉素，头孢菌素类)。哺乳动物的细胞没有细胞壁，丌受这类药物的影响。

2.不细菌细胞膜相互作用，增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道，让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。以这种方式作用的抗生素有多粘菌素和短杆菌肽等。

3.不细菌核糖体或其反应底物(如 tRNA、mRNA)相互所用，抑制蛋白质的合成——这意味着细胞存活所必需的结构蛋白和酶丌能被合成。以这种方式作用的抗生素包括四环素(四环素，金霉素，土霉素)类抗生素、大环内酯类抗生素(红霉素，乙酰螺旋霉素)、氨基糖苷类抗生素(链霉素，庆大霉素，卡那霉素)、氯霉素等。

4.阻碍细菌 DNA 的复制和转录。阻碍 DNA 复制将导致细菌细胞分裂繁殖受阻，阻碍 DNA 转录成 mRNA则导致后续的 mRNA 翻译

合成蛋白的过程受阻。以这种方式作用的主要是人工(来自:www.xiexiebang.com 写 论 文 网:抗生素抑菌实验实

验报告)合成的抗菌剂喹诺酮类(如氧氟沙星，诺氟沙星)。

5.影响叶酸代谢。抑制细菌叶酸代谢过程中的二氢叶酸合成酶和二氢叶酸还原酶，妨碍叶酸代谢。因为叶酸是合成核酸的前体物质，叶酸缺乏导致核酸合成受阻，从而抑制细菌生长繁殖，主要是磺胺类和甲氧苄啶。

通过观察培养皿上涂抹抗生素后产生的抑菌圈大小，同时结合显微镜的观察，比较丌同抗菌机理的抗生素的抑菌效果。

实验步骤:

1.用蒸馏水洗净培养皿。在培养皿底部的纱布上放一块薄琼脂片。用滴管均匀低价菌落培养液(内含大肠杆菌，化脓链球菌，金黄色葡萄球菌，霉菌等等)。菌落大致形成直径为 20mm 的圆。

2.制做多个基本相当的培养皿。分别滴加 2~3 滴抗生素:

(1)阿莫西林(或盘尼西林)溶液

(2)诺氟沙星溶液

(3)红霉素软膏浸液

(4)盐酸林可霉素注射液

抗生素覆盖区均为直径为 5mm 的圆。

3.其中，第一种方案作用机理是阻碍细菌细胞壁合成，第二种方案是阻碍 DNA 转录和复制，第三和第四种方案都是通过不细菌核糖体或反应底物结合抑制蛋白质合成。

4.将四个培养皿放在恒温箱中，等待结果。

实验现象:四个培养皿均出现大小丌一的抑菌圈，光学显微镜成像显示，抑菌圈是以抗生素为圆心的同心圆，抑菌圈范围内细菌生长明显受到抑制或消失。抑菌圈外的菌落存在细菌生长。

通过尺可以量得，阿莫西林的抑菌效果最佳，抑菌圈直径约为 8mm。而诺氟沙星抑菌圈直径约为 6mm，红霉素和林可霉素抑菌圈直径和诺氟沙星为代表的喹诺酮类抗生素大小基本相同。但是显微镜成像显示抑菌范围内的细菌数目减少量丌如阿莫西林多，也未发现胞体破裂，抗生素大量分布的现象。

实验结论:

结合抗生素的抑菌机理可知，β-内酰胺类和头孢菌素类抗生素抑菌效果最直接最显著，但是敏感测试显示作用菌落范围徆小。而实验中的其他几种抗生素由亍需要迚入到细胞内部通过抑制细胞的分裂不蛋白质的合成，并丌是直接杀死细菌母体，而是控制其分裂繁殖。因此抑菌效果丌显著。但是这类的抗生素作用范围广，特别是配合人体自身免疫系统，能够产生良好的抑菌效果。

第三篇：商务礼仪具有什么功能？

随着市场经济的深入发展，各种商务活动日趋繁多，礼仪也在其中发挥着越来越大的作用。

1．规范行为。礼仪最基本的功能就是规范各种行为。在商务交往中，人们相互影响、相互作用、相互合作，如果不遵循一定的规范，双方就缺乏协作的基础。在众多的商务规范中，礼仪规范可以使人明白应该怎样做，不应该怎样做，哪些可以做，哪些不可以做，有利于确定自我形象，尊重他人，赢得友谊。

2．传递信息。礼仪是一种信息，通过这种信息可以表达出尊敬、友善、真诚等感情，使别人感到温暖。在商务活动中，恰当的礼仪可以获得对方的好感、信任，进而有助于事业的发展。

3．增进感情。在商务活动中，随着交往的深入，双方可能都会产生一定的情绪体验。它表现为两种情感状态：一是感情共鸣，另一种是情感排斥。礼仪容易使双方互相吸引，增进感情，导致良好的人际关系的建立和发展。反之．如果不讲礼仪，粗俗不堪，那么就容易产生感情排斥，造成人际关系紧张，给对方造成不好的印象。

4．树立形象。一个人讲究礼仪，就会在众人面前树立良好的个人形象；一个组织的成员讲究礼仪，就会为自己的组织树立良好的形象，赢得公众的赞省。现代市场竞争除了产品竞争外，更体现在形象竞争。一个具有良好信誉和形象的公司或企业，就容易获得社会各方的信任和支持，就可在激烈的竞争中处于不败之地。所以，商务人员时刻注重礼仪，既是个人和组织良好素质的体现，也是树立和巩固良好形象的需要

商务礼仪是在商务活动中体现相互尊重的行为准则。商务礼仪的核心是一种行为的准则，用来约束我们日常商务活动的方方面面。商务礼仪的核心作用是为了体现人与人之间的相互尊重。这样我们学习商务礼仪就显得更为重要。我们可以用一种简单的方式来概括商务礼仪，它是商务活动中对人的仪容仪表和言谈举止的普遍要求。

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商务礼仪的作用主要在于内强素质，外强形象的表现，具体表述为几个方面：提高个人素质是商务人员的个人素质是一种个人修养及其表现，有助于建立良好的人际沟通，维护个人和企业形象。商务礼仪最基本作用是“减灾效应”：少出洋相、少丢人、少破坏人际关系遇到不知事情，最稳妥方式是紧跟或模仿，以静制动。

在企业层面，良性客户关系的基本组成部分，企业形象的重要构成，提高服务质量，增加效益的必要手段。

商务礼仪具有很强的凝聚情感的作用。商务礼仪的重要功能是对人际关系的调解。如果商务人员都能够自觉主动地遵守商务礼仪规范，按照商务礼仪规范约束自己，就容易使人际间感情得以沟通，建立起相互尊重、彼此信任、友好合作的关系，进而有利于各种事业的发展。

所以商务礼仪是企业形象、文化、员工修养素质的综合体现，我们只有做好应有的商务礼仪才能为企业在形象塑造、文化表达上提升到一个满意的地位。

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第四篇：语文课程具有多重功能

语文课程具有多重功能，涉及丰富的内容和多方面的目标，而在实际教学中往往有可能只抓住一部分，疏忽了其他方面，脱离了核心的目标。例如，有些教师在阅读教学中，往往会脱离课文中相关的语言文字运用情况，讨论、评析作品和作者的思想感情问题；有的教师上课注重对文本意蕴的讲“深”、讲“透”，力图通过“讲”把学生的语言文字运用能力给提高了，重视学生对文本内容的“知道”和“懂得”，忽视了驾驭语言文字能力的培养；有的教师虽然也比较重视语言文字因素，但是他们偏重于语言、文字等学科知识点的落实，对语言文字材料的积累感悟用力不够。正新修订的2011年版《义务 教育语文课程标准》明确指出“语文课程是一门学习语言文字运用的综合性、实践性课程”,在教学建议中又再次强调“注重听说读写之间的有机联系,加强教学内 容的整合,统筹安排教学活动”的意见,而且还增加了“沟通听说读写”的具体要求。作为语文教学基本任务的识字与写字教学应该而且必须落实好读与写、说与写 之间的语言实践与综合运用。下面以人教版一年级语文下册第关键词

识字教学;写字教学;语言文字;教学效果;语言实践;写话;分角色朗...我认为凡是技能的获得，能力的形成离不开“实践”，要“致力于培养学生的语言文字运用能力，提升学生的综合素养”，同样离不开“语文实践”。那么在阅读教学中，要实践什么，怎样实践，是至关重要的两个问题

第五篇：抗抑菌制剂卫生安全评价报告备案操作规范doc

抗抑菌制剂卫生安全评价报告备案操作规

范

一、行政审批项目名称、性质

1、名称：抗抑菌制剂卫生安全评价报告备案

2、性质：非行政许可

二、设定依据

1、《消毒管理办法》（卫生部令第27号）第二十六条：卫生用品和一次性使用医疗用品在投放市场前应当向省级卫生行政部门备案。备案时按照卫生部制定的卫生用品和一次性使用医疗用品备案管理规定的要求提交资料。

2、《消毒产品卫生安全评价规定》第十四条第二款：第一类、第二类消毒产品首次上市时，产品责任单位应当将卫生安全评价报告向所在地省级卫生计生行政部门备案（备案登记表见附件 4）。在国内从事消毒产品生产、分装的单位和个人，必须按照本规定要求申领《消毒产品生产企业卫生许可证》。

三、实施权限和实施主体

玉林市内生产、经营的不需要行政审批的第二类消毒产品中的抗（抑）菌制剂。

（一）第一类消毒产品：具有较高风险，需要严格管理以保证安全、有效的消毒产品，包括用于医疗器械的高水平消毒剂和消毒器械、灭菌剂和灭菌器械，皮肤黏膜消毒剂，生物指示物、灭菌效果化学指示物；

（二）第二类消毒产品：具有中度风险，需要加强管理以保证安全、有效的消毒产品，包括除第一类产品外的消毒剂、消毒器械、化学指示物，以及带有灭菌标识的灭菌物品包装物、抗（抑）菌制剂。

四、备案条件

（一）生产企业取得消毒产品生产企业卫生许可证；

（二）消毒产品经具备相应条件的消毒产品检验机构检验合格；

（三）消毒产品的标签（铭牌）、说明书应符合《消毒产品标签说明书管理规范》和相关卫生标准的要求；

（四）企业标准应依法备案，并在有效期内。

五、需提交的申报材料

申请消毒产品卫生安全评价报告备案的单位和个人应向卫生行政部门提出申请，提交以下材料（一式三份）并对其真实性负责，承担相应的法律责任：

（一）消毒产品卫生安全评价报告备案登记表（见附件1）。

（二）消毒产品卫生安全评价报告（见附件2）。

（三）产品标签、说明书样稿。

（四）产品配方

1.产品的配方应当与实际生产的一致，配方的书写格式和要求见（附件3）；

2.产品原材料的级别、纯度等原材料要求应当符合相应消毒产品卫生标准、技术规范和企业标准的要求。

（五）产品检验报告（含结论）

产品进行检验，并对样品的真实性负责；所有检验项目应当使用同一个批次产品完成（检验项目及要求见附件4）。

（六）经备案的产品企业标准或质量标准 1.应当包括原材料卫生质量要求（包括级别、纯度）、技术要求（包括感官指标、理化指标、微生物学指标、杀灭微生物指标）及其检验方法、型式检验项目、出厂检验项目等；

2.产品技术要求应当符合国家卫生法律法规、规范和规定要求，并不低于相应产品卫生标准；

3.检验方法应当符合国家卫生法律法规、标准、规范和规定要求；

4.国产产品的企业标准应当依法备案，并在有效期内。

（七）产品生产企业卫生许可证（进口产品生产国（地区）允许生产销售的批文）。

六、已完成卫生安全评价的产品上市后，产品如有改变（配方或结构、生产工艺）或有《消毒产品卫生安全评价规定》第十二条规定情形的，应当及时更新《消毒产品卫生安全评价报告》相关内容，保证所评价产品与所生产销售产品相符，同时到原备案机关备案。有下列情形之一的，应当对产品重新进行检验：

（一）实际生产地址迁移、另设分厂或车间、转委托生产加工的。应当进行有效成分含量测定、原液稳定性试验、pH值测定；

（二）延长产品有效期的，应当进行有效成分含量、pH值、一项抗力最强的微生物杀灭（或抑制）试验和稳定性试验；使用原送检样品的只需做稳定性试验；

（三）增加使用范围或改变使用方法的，应当进行相应的理化、微生物杀灭（或抑制）和毒理试验。

七、卫生安全评价报告有效范围 卫生安全评价报告在全国范围内有效。

八、卫生安全评价和备案有效期

第二类消毒产品卫生安全评价报告长期有效。

九、办结时限

资料齐全的在5个工作日内出具备案凭证（见附件5）。

十、负责备案部门

抗（抑）菌制剂产品备案工作由玉林市卫生监督所负责。（备案地点:玉林市教育中路493号玉林市卫生监督所传染病监督科）。

十一、咨询与投诉

1.咨询电话：0775-2839012、0775-2801231 2.投诉电话：0775-2818952

附件：1.消毒产品卫生安全评价报告备案登记表 2.消毒产品卫生安全评价报告 3.配方的书写格式和要求 4.检验项目及要求

5.消毒产品卫生安全评价报告备案凭证 6.消毒产品生产分类目录