细胞培养基种类

第一篇：细胞培养基种类

细胞培养基的选择及常用数据库

日期：2012-04-13 来源：未知 作者：网友 点击：次 细胞实验技术

经典的培养基有很多种，Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。

◆ MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度。

◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的4倍，采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了。

◆ aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞。

◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。

◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。

以前经常听到有人问，这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以好复杂。此话怎讲?如果这种细胞是购自ATCC或其他的细胞库，那很简单，问供应商就行了。或者找到相关的文献，作为参考。Invitrogen网站上有一个Cell Line Database的工具，也很好用。选择你感兴趣的细胞类型，它就会弹出推荐的培养基、血清和转染试剂等，有时还有优化好的转染步骤，很方便。Sigma网站上也有一个Media Expert，包括了培养基所有成分的功能描述、使用推介和参考文献等，它还是一个解决问题能手，对于细胞培养中的常见问题，如细胞贴壁不好、培养基变色等，它都会列出可能的原因，并提供补救办法。这个Expert果然不简单!但如果你是着手建立一种全新细胞的培养体系，根本找不到任何参考，那你就得花点时间自己试验了。万事开头难嘛。因为没有一个标准答案。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做贴壁细胞培养、RPMI 1640做悬浮细胞培养会是一个好的开始。你也可以购买几种培养基来，然后花大约两周的时间做一个简单的细胞生长实验，来选择其中最适合的。有时候你会惊讶地发现你的最佳培养条件与文献报道的不同，就算是同一种培养条件，细胞的生长状态也时好时坏，这是很正常的。因为试剂、水、不同批号的血清之间都存在着差异。要提高培养基的稳定性，可以从培养基和血清两方面入手。

以前大部分实验室都是用干粉培养基，但配制过程就较为繁琐，要溶解、调pH值，过滤，过程中可能会产生一些浓度误差，而且有些实验室的水质并不理想，所以培养的效果会有差异。如果使用液体培养基，这种人为的误差会减少，因为毕竟是大批量工业化生产的，批间差会很小。大家是不是感觉液体培养基会贵很多，以前是这样，但现在非也。HyClone和Invitrogen都在国内建立了液体培养基的生产基地，生产和运输成本大幅降低，所以现在的价格也只是50-60元/500ml，比干粉培养基贵不了多少，而且还帮你省了过滤器和时间。

血清含有生长因子可促进细胞的繁殖，含有附着因子可促进细胞的贴壁，同时还具有抗胰酶活性。血清同时也是矿物质、脂类及激素的来源。最常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和马血清等。牛血清是按照采血时间的早晚来分类的。采血时间越早，营养物质越丰富，所含抗体也越少，因而胎牛血清适合要求高的细胞系和克隆化培养。由于疯牛病的原因，到目前为止，我国政府仍然禁止从北美洲、欧洲和日本等地区进口牛血清，因此市面上的牛血清大多来自澳洲、南美洲，或是国产的。

而血清批次间的差别就是不可避免的，这种差异来源于不同的制备方法和除菌方法、动物的年龄差别及血清的储存条件等，而且与取血动物的来源关系密切。不同的牧场、不同的气候天气及其他环境因素都可能影响血清的质量。因此选好了一种血清就要尽可能长期使用它。在需要更换时，也要尽量保持与原有的一批血清相似。现在很多公司都提供血清预留，你一旦选定了某个批次的血清，最好备足一年的量，这样可以避免很多麻烦。

血清固然是细胞培养中不可或缺的成分，但正如上文所说，血清的批间差异大，更换血清时需要做大量的测试以取保替换的血清与原来的相似。而血清的供应也是必须要考虑的因素。由于气候或疯牛病的影响，说不定哪天血清就突然没得卖了，那对实验的影响可非同小可。另外，血清的价格也很昂贵，虽说现在也有便宜的国产血清，但是高品质的澳洲血清价格仍旧高企。因此，也有一些实验室开始换用无血清培养基。

无血清培养基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顾名思义，就是在细胞培养中不需要添加血清，但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等，能减少上述血清带来的不利因素，使细胞培养的条件更稳定。但它也不是完美的，从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方，对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时，也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用，因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外，它的价格也比普通的培养基贵很多。

现在有很多厂家生产无血清培养基。GIBCO这个细胞培养的金字招牌当然少不了，它也是最早研制无血清培养基的。目前已经开发了ES细胞、杂交瘤、CHO、293、昆虫细胞、神经细胞、淋巴细胞、角质细胞、内皮细胞等多种细胞的无血清培养基。上个月还推出了首个间充质干细胞的无血清培养基，能使MSC维持未分化状态超过9代。HyClone公司也有CHO、293、杂交瘤细胞、昆虫细胞、病毒疫苗细胞的多种无血清培养基。Sigma则刚刚收购了澳大利亚JRH公司，有了JRH的EX-CELL系列，无血清培养基的选择也更多了。

这么多种，要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的，如用于培养内皮细胞的MCDB 131(Sigma)，大部分液体培养基都是专利配方的，也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐，然后用自己的细胞做几次传代培养来选出最合适的培养基。毕竟实践出真知嘛。

P.S.附上一些细胞培养中的小Tip，可能会对您有所启发。(部分摘自Invitrogen的中文Focus)• 切记，细胞培养基的储存条件是2-8摄氏度。如果细胞培养基不小心被冻，您应该融化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生，培养基可以正常使用，如果出现沉淀，只能丢弃这些培养基。

• 贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基，可能在放置几天后颜色变紫。这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时，碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口，在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟，来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。

• 当在无血清培养基中添加抗生素时，降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下，抗生素不被灭活，可能对于细胞达到毒性水平。

• 一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

• 总之，大部分添加物和试剂最多可以冻融3次，如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，将会影响它的性能。

• 血清的热灭活在免疫分析时可以灭活补体系统。在免疫学研究，培养ES细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。热灭活是以往公认的操作步骤，并没有确凿的证据说明这样做是有益的。相反，对大部分细胞而言，GIBCO和HyClone都不推荐热灭活血清。因为加热可能使血清中的沉淀增加，使您误以为污染。

• 如何避免血清中沉淀物的产生? 1.解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。并随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。2.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。

3.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

4.若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

• 在进行传代培养时，我们强烈推荐进行台盼兰活性记数。研究者常常通过一个简单的稀释(1∶4或1∶2)进行传代，不进行活性检测，您可能接种比你认为的低的多的浓度的细胞，这常常可能导致生长缓慢或培养物根本不生长。

• 贮存在4℃冰箱中的液体胰蛋白酶溶液只能使用一周。胰蛋白酶在4℃就可能开始降解，如果在室温下放置超过30分钟，就会变得不稳定。

• 在订购的细胞到达后，应立即复苏，如果培养基还没有准备好，可将其放入液氮中，尽快复苏。千万不能放置在-20或-80℃的冰箱内。

• 细胞复苏往往是比较容易出问题的步骤。请在订购细胞时就向供应商索取详细的复苏步骤，并仔细阅读。有些供应商就不推荐在复苏时离心，对此类细节，应特别留意。

第二篇：培养基汇总

培养基成分汇总

显色培养基

•大肠杆菌显色培养基 •大肠菌群显色培养基 •大肠杆菌／大肠菌群显色培养基

•TBX培养基 •细菌总数显色培养基 •O157显色培养基 •沙门氏菌显色培养基 •李斯特氏菌显色培养基 •金黄色葡萄球菌显色培养基

•弧菌显色培养基 •念珠菌显色培养基 •阪崎肠杆菌显色培养基 •肠球菌显色培养基 •尿道定位显色培养基

菌落总数检测培养基

•平板计数琼脂（PCA）

•TTC营养琼脂 •营养肉汤（NB）•营养琼脂（NA）•2216E琼脂 •标准I号营养琼脂 •标准II号营养琼脂 •胰胨大豆胨固绿琼脂

•m-TGE肉汤 •水平板计数琼脂培养基

•TGE培养基 •CVT琼脂 •肉汤培养基 •酵母粉琼脂 •平板计数琼脂

•平板计数琼脂（含麦芽提取物）

•2216E液体培养基 •嗜冷菌计数琼脂 •NA培养基 •MPC琼脂培养基 •接触皿培养基 •R2A琼脂

大肠杆菌O157检验培养基

•三糖铁（TSI）琼脂

•月桂基硫酸盐胰蛋白胨MUG培养基

•mEC肉汤 •mTSB肉汤 •SD-39琼脂

•改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂

•改良EC肉汤(mEC+n)

•半固体琼脂

•山梨醇麦康凯琼脂基础（SMAC）•改良麦康凯肉汤（CT-MAC）•月桂基硫酸盐蛋白胨肉汤-MUG

•PBS-Tween20洗液 •O157显色培养基

大肠菌群、大肠杆菌检验培养基

•月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）

•EC肉汤 •乳糖胆盐发酵培养基 •乳糖复发酵培养基 •去氧胆酸盐琼脂（DC）

•MR-VP培养基

•结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）

•西蒙氏枸橼酸盐琼脂 •肠道菌计数琼脂（VRBDA）

•品红亚硫酸钠琼脂 •乳糖蛋白胨培养液 •亮绿乳糖培养基 •肠道菌增菌肉汤（EE）

•LB肉汤 •LB营养琼脂 •苯丙氨酸脱氨酶培养基 •伊红美蓝琼脂（EMB）•哥伦比亚MUG培养基

•BDS培养基 •葡萄糖琼脂 •Andrade氏糖类肉汤 •Korser氏枸椽酸盐肉汤

•Endo培养基 •缓冲MUG琼脂 肠球菌、溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基

•葡萄糖肉浸液肉汤 •匹克氏肉汤基础A •肉浸液肉汤培养基 •叠氮钠葡萄糖肉汤 •乙基紫叠氮钠肉汤 •KF链球菌琼脂

•肠球菌琼脂(胆盐－七叶苷－叠氮钠琼脂)•滤膜肠球菌琼脂 •CATC琼脂 •胆盐七叶苷琼脂 •哥伦比亚血琼脂基础

•LIM培养基 •BETA-SSA琼脂 •粪肠球菌琼脂 •缓冲蛋白胨水（BPW）•胆汁液态培养基 •M-肠道菌琼脂 •THB培养基 •PS琼脂 •肠球菌肉汤 •脑心浸液肉汤（BHI）•脑心浸萃液肉汤 •脑心浸液琼脂（BHIA）

•Pfizer肠球菌选择性琼脂（PSE琼脂）

•MEI培养基

沙门氏菌、志贺氏菌检验培养基

•亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）

•胆硫乳琼脂（DHL）

•SS琼脂 •亚硫酸铋琼脂（BS）•亚利桑那菌琼脂（SA）•氯化镁孔雀绿肉汤（MM，RV •HE琼脂（HE）•尿素酶琼脂基础 •V-P半固体琼脂 •硝酸盐氰化钾培养基基础

•丙二酸钠培养基 •卫矛醇半固体琼脂

•GN增菌液 •XLD培养基 •WS琼脂 •葡萄糖铵培养基

•乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂

•Tergitol-7琼脂 •A1培养基 •LES Endo •m-TEC琼脂 •现隐肉汤 •醋酸盐琼脂 •心浸液琼脂 •桔汁琼脂 •EEM培养基 •胰蛋白胨胆盐琼脂 •Elek氏培养基 •Tergitol-7琼脂 •TTC乳糖琼脂 •MFC肉汤 •MFC琼脂

•煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）

•VRB-MUG琼脂 •pH7.3PBS缓冲液

•MEE肉汤 •MI培养基 •结晶紫中性红胆盐肉汤 •艾格LT100肉汤 •SOC培养基

•Aliz-gal肉汤（茜素-β-半乳糖苷琼脂）MR-VP试验用培养基）•去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂

•Honda 氏产毒肉汤 •磷酸盐缓冲液（pH7.2）•大肠杆菌显色培养基 •大肠菌群显色培养基

•营养肉汤（GB/T20944.1-2007标准）

金黄色葡萄球菌检验检验培养基

•脑心浸液肉汤（BHI）•胰蛋白胨大豆肉汤 •Baird-Parker琼脂基础

•DNA酶琼脂 •7.5%氯化钠肉汤 •肠毒素产毒培养基 •亚碲酸钠肉汤培养基基础 •葡萄球菌增菌肉汤 •甲苯胺蓝-DNA酶琼脂 •甘露醇高盐琼脂

•缓冲葡萄糖蛋白胨水（•葡萄糖半固体培养基

•动力－吲哚－尿素培养基基础(MIU)•亚硒酸盐增菌液(SF)•醋酸铅培养基 •SIM培养基 •乳糖肉汤 •煌绿琼脂

•去氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂 •吲哚培养基（蛋白胨水）

•EF-18琼脂 •RVS肉汤 •MKTTn肉汤 •赖氨酸铁琼脂（LIA）•改良MSRV培养基 •SCCRAM肉汤 •BPL琼脂 •BPLS琼脂 •改良BPLS琼脂 •MIO培养基 •XLT4琼脂 •醋酸铅琼脂

•四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)•沙门氏菌显色培养基 •缓冲蛋白胨水（BPW）

•哥伦比亚CNA琼脂基础

•葡萄球菌选择性琼脂110（CHAPMAN琼脂）

•甘露醇卵黄培养基基础

•V-J琼脂

•改良Giolitti-Cantobi肉汤

•TMP琼脂培养基

•(脑)心浸液琼脂

•普通肉汤培养基

•葡萄球菌选择性琼脂

•10％氯化钠胰酪胨大豆肉汤

•营养琼脂斜面

•甘露醇氯化钠琼脂

•北沙参亚碲酸钠胨水培养基基础

•豆粉琼脂（血琼脂基础）

•磷酸盐缓冲液（pH7.2）

沙门氏菌、志贺氏菌检验培养基

•D/E中和肉汤

•D/E中和琼脂

•M-肉汤

•煌绿黄胺嘧啶琼脂

•BGS琼脂

•三糖铁琼脂（TSI）

•沙门氏志贺氏增菌液

•志贺氏菌增菌肉汤

培养基成分汇总2 弧菌检验检验培养基

•碱性蛋白胨水 •TCBS琼脂

•氯化钠多粘菌素B肉汤基础(SCPB)•庆大霉素琼脂 •我妻氏培养基基础 •60g/L氯化钠蛋白胨肉汤

•氯化钠三糖铁 •胰胨大豆琼脂斜面（TSA）

•42℃生长培养基 •O/F培养基(HLGB)•氯化钠结晶紫增菌液 •氯化钠蔗糖琼脂 •嗜盐菌选择性琼脂 •氯化钠血琼脂基础 •霍乱双糖铁琼脂(KIA)•T1N1琼脂 •T1N0肉汤 •T1N3肉汤

•精氨酸葡萄糖斜面琼脂（AGS）

•mCPC培养基 •副溶血性弧菌琼脂 •副溶血性弧菌增菌液 •3.5%Nacl三糖铁 •3%氯化钠碱性蛋白胨水 •3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 •3%氯化钠三糖铁(TSI)琼脂

•BTB培养基 •PAC斜面培养基 •四号琼脂

•纤维二糖-多粘菌素E（CC）琼脂

•副溶血性弧菌显色培养基 •嗜盐性试验用胰胨水

四环素检定、厌氧亚硫酸盐还原杆菌、嗜热菌芽孢检验培养基

•菌种培养基 •四环素检定琼脂 •亚硫酸盐琼脂 •改良亚硫酸盐琼脂 •蛋白胨盐溶液 •亚硫酸铁琼脂 •葡萄糖胰蛋白胨琼脂

酵母菌、霉菌、念珠菌、青霉、曲霉检验培养基

•察氏琼脂 •产毒培养基

•马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）

•高盐察氏琼脂 •沙氏琼脂培养基 •玉米粉琼脂

•孟加拉红培养基（虎红培养基）•酵母粉葡萄糖氯霉素琼脂（YDC）

•Candida Elective琼脂

•DTM培养基 •DRBC琼脂 •WORT琼脂 •WORT肉汤 •YGC琼脂

•改良绿色酵母菌和真菌肉汤

•Littman琼脂 •DG-18琼脂 •YM琼脂 •YM11琼脂 •OGY琼脂 •WL营养琼脂 •改良沙氏琼脂培养基 •沙氏BHI琼脂 •营养盐琼脂

•马铃薯葡萄糖琼脂（含氯霉素）

•高渗真菌学琼脂 •BIGGY琼脂

•1%吐温80-玉米琼脂培养基

•SDAY培养基

•皮肤癣菌鉴别琼脂（DTM）•马铃薯-蔗糖培养基 •无机盐琼脂培养基 •矿物盐琼脂 •酵母蛋白胨培养基

蜡样芽孢杆菌检验培养基

•甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础（MYP）

•胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础

•改良V-P培养基 •胰酪胨大豆羊血琼脂基础

•酪蛋白琼脂 •酚红葡萄糖肉汤 •硝酸盐肉汤 弯曲杆菌检验培养基

•布氏肉汤

•改良Skirrow氏琼脂基础 •改良Camp-BAP氏琼脂基础

•TTC琼脂基础 •甘氨酸培养基 •快速硫化氢试验琼脂 •DNA酶甲基绿琼脂基础 •Campy-Cefex琼脂基础 •改良CCD琼脂基础(mCCD)•Bolton肉汤

•Mueller-Hinton琼脂（MHA）

•哥伦比亚血琼脂基础

•蛋白胨 •布氏琼脂 •马尿酸钠培养基 •波尔顿选择性增菌肉汤

•CCDA基础

乳酸菌、双歧杆菌检验培养基

•改良番茄汁培养基 •改良MC培养基 •BLB培养基 •MRS琼脂 •LBS琼脂 •M17琼脂 •M17肉汤 •乳酸杆菌选择性琼脂

•APT琼脂 •BL琼脂培养基 •BBL琼脂培养基 •TPY琼脂培养基 •PYG液体培养基基础

•MC培养基 •APT肉汤 •乳酸杆菌肉汤培养基

•MRS肉汤 •双歧杆菌BS培养基

李斯特氏菌检验检验培养基

(MMA)•糖发酵基础肉汤

(LB1,LB2)基础

•七叶苷培养基

•动力-硝酸盐培养基（A法）

•木糖-明胶培养基 •腊样芽孢杆菌选择琼脂基础

•葡萄糖酪胨琼脂 •溶菌酶肉汤基础

植物组培

•MS培养基 •B5培养基 •N6培养基 •NLN培养基

阪崎肠杆菌检验培养基

•缓冲蛋白胨水 •胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）•阪崎杆菌显色培养基 •脑心浸液肉汤（BHI）

•改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素

（mLST-Vm）

•阪崎肠杆菌显色培养基（DFI琼脂）•结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBGA）

•TSA琼脂

•肠道菌增菌肉汤（EE）•西蒙氏枸橼酸盐培养基

小肠结肠炎耶尔森氏菌检验培养基

•CIN-1培养基基础 •改良Y培养基 •改良磷酸盐缓冲液 PSB

•ITC肉汤 •半固体琼脂 •SSDC培养基（ISO）•改良克氏双糖铁培养基

李斯特氏菌检验检验培养基 •Half–Fraser培养基 •Fraser培养基 •LPM琼脂

•改良缓冲蛋白胨水（MBP）

•EB增菌液 •UVM培养基 •LM-137琼脂 •MFB培养基

•含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉汤（TSB-YE）•李氏菌选择性培养基基础•李氏菌增菌肉汤 •半固体动力培养基 •牛津琼脂(OXA)基础 •缓冲李氏菌增菌肉汤基础

•PALCAM琼脂 •SIM动力培养基

•含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆琼脂（TSA-YE）

•血液琼脂基础

培养基成分汇总3 阪崎肠杆菌检验培养基

•缓冲蛋白胨水 •胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）•阪崎杆菌显色培养基 •脑心浸液肉汤（BHI）

•改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm）

•阪崎肠杆菌显色培养基（DFI琼脂）•结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBGA）

•TSA琼脂

•肠道菌增菌肉汤（EE）•西蒙氏枸橼酸盐培养基

小肠结肠炎耶尔森氏菌检验培养基

•CIN-1培养基基础 •改良Y培养基 •改良磷酸盐缓冲液 PSB •ITC肉汤 •半固体琼脂 •SSDC培养基（ISO）•改良克氏双糖铁培养基

商业无菌检验培养基

产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、厌氧菌检验培养基

•胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础（TSC）

•产芽孢肉汤

•亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础 •多价蛋白胨-酵母膏（PY）培养基

•疱肉培养基基础 •疱肉牛肉粒 •液体硫乙醇酸盐培养基 •卵黄琼脂培养基基础 •动力-硝酸盐培养基 •含铁牛奶培养基 •梭菌鉴别琼脂（DCA）•强化梭菌鉴别琼脂（DRCA）

•强化梭菌琼脂 •强化梭菌培养基（RCM）

•TSN琼脂 •亚硫酸铁琼脂 •TBB培养基 •CHO培养基基础 •SCHAEDLER琼脂 •厌氧菌琼脂 •CDC厌氧菌琼脂

•亚硫酸盐还原厌氧菌孢子液体培养基 •溴甲酚紫葡萄糖肉汤 •锰盐营养琼脂 •卵黄琼脂基础 •酸性肉汤 •疱肉培养基基础 •疱肉牛肉粒

消毒灭菌效果评价培养基

•溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基

•溴甲酚紫蛋白胨培养液

•营养肉汤(NB)•营养琼脂 •普通肉汤培养基 •0.5%葡萄糖肉汤培养基

化妆品检验检验培养基

•SCDLP液体培养基 •卵磷脂吐温80营养琼脂

•乙酰胺琼脂 •十六烷三甲基溴化铵琼脂 •甘露醇发酵培养基 •明胶培养基基础

PDP琼脂培养基）•TTC卵磷脂-吐温80-营养琼脂

•HC琼脂基础 •改良LETHEEN琼脂基础

•TAT肉汤

•绿脓菌素测定培养基（PDP）

•沙氏葡萄糖琼脂 •沙氏葡萄糖氯霉素琼脂 •孟加拉红培养基 •7.5%氯化钠肉汤 •Baird-Parker琼脂基础

•Letheen肉汤 •Letheen琼脂 •改良HC琼脂

•双料乳糖胆盐（含中和剂）培养基

•乳糖胆盐培养基

2010版中国药典培养基

•抗生素检定培养基1号(高pH)•抗生素检定培养基1号（低pH)•抗生素检定培养基2号（高pH）•抗生素检定培养基2号（低pH）

•WILKINS-CHALGREN琼脂

•MCP琼脂 •SC琼脂基础

一次性卫生用品检验检验培养基

•0.5%葡萄糖肉汤培养基 •溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基

•液体沙氏培养基 •沙氏琼脂培养基 •匹克氏肉汤基础B

饮用天然矿泉水检验培养基

•疱肉培养基基础 •疱肉牛肉粒 •营养琼脂（NA）

•假单菌琼脂基础培养基/CN琼脂

•金氏B培养基 •乙酰胺肉汤 •金氏B培养基（KBA）

•0.1%蛋白胨水 •胰蛋白胨水培养基 •含铁牛奶培养基 •动力-硝酸盐培养基（B法）•缓冲动力-硝酸盐培养基 •动力-硝酸盐培养基（A法）

•卵黄琼脂培养基基础

-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础

•液体硫乙醇酸盐培养基（FT）

•脑-心浸萃琼脂培养基 •脑-心浸萃液态培养基

•KF链球菌琼脂 •大肠菌群显色培养基 •乳糖蛋白胨培养液 •远藤琼脂(品红亚硫酸钠)培养基 •亮绿乳糖胆盐培养液（BGB）

•乳糖胆盐发酵培养基 •KF链球菌肉汤

美国药典培养基（USP标准）

•V-J琼脂培养基（USP）•液体大豆酪蛋白消化物培养基

•甘露醇盐琼脂培养基

•酪蛋白胨大豆卵磷脂吐温20培养基 •大豆-干酪素消化物琼脂培养基 •绿脓菌素测定培养基（•亚硫酸盐•抗生素检定培养基3号 •0.5%葡萄糖肉汤培养基 •抗生素检定培养基4号 •抗生素检定培养基7号 •抗生素检定培养基8号 •卵黄氯化钠琼脂培养基

•抗生素5号

•支原体培养基基础（含精氨酸）

•PPLO肉汤 •硫乙醇酸盐流体培养基 •改良马丁培养基 •改良马丁琼脂培养基 •玫瑰红钠琼脂培养基

•酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基（YPD）

•乳糖发酵培养基 •麦康凯琼脂培养基

•4-甲基伞形酮葡糖苷酸（MUG）培养基 •四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）•沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)•亚碲酸盐肉汤培养基基础

•绿脓菌素测定用培养基（PDP琼脂培养基）

•哥伦比亚琼脂培养基 •抗生素检定培养基6号

•0.1%蛋白胨水 •梭菌增菌培养基 •1%聚山梨醇脂玉米粉琼脂 •支原体琼脂培养基 •支原体肉汤培养基

•支原体肉汤培养基（不含琼脂和酚红）•支原体琼脂培养基（含精氨酸）

•麦迪、麦白霉素检定培养基（普通轻质斜面培养基）•阿奇霉素检定培养基 •制霉素检定培养基 •多粘菌素B用培养基 •抗生素检定培养基9号 •青霉素酶制备培养基 •沙氏葡萄糖琼脂培养基 •沙氏葡萄糖液体培养基 •胰酪胨大豆琼脂培养基 •胰酪胨大豆肉汤培养基 •1%聚山梨醇酯80-玉米粉琼脂培养基

•沙氏葡萄糖琼脂培养基 •沙氏葡萄糖液体培养基 •溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基

•大豆-干酪素消化物培养基 •BairdParker琼脂培养基 •溴化十六烷基三甲胺琼脂培养基

•假单胞菌琼脂培养基F •假单胞菌琼脂培养基P •液体乳糖培养基 •液体亚硒酸盐胱氨酸培养基

•连四硫酸盐培养基 •煌绿琼脂培养基 •XLD琼脂培养基 •亚硫酸铋琼脂培养基 •三糖铁琼脂培养基 •麦康凯琼脂培养基 •伊红美蓝琼脂培养基（Levine）

•沙氏葡萄糖琼脂培养基 •马铃薯葡萄糖琼脂培养基 •缓冲氯化钠蛋白胨培养液PH7.0 •大豆酪蛋白消化物琼脂培养基

欧洲药典培养基（EP标准）

•肉汤培养基A •琼脂培养基B •琼脂培养基C •肉汤培养基D •增菌肉汤培养基E •琼脂培养基F •肉汤培养基G •琼脂培养基H •肉汤培养基I •琼脂培养基J •琼脂培养基K •琼脂培养基L •琼脂培养基M •琼脂培养基N •琼脂培养基O •培养基P •培养基Q •培养基R

•缓冲氯化钠蛋白胨溶液（PH7.0）

•琼脂培养基S •RV肉汤 •甘露醇盐琼脂

•胆盐硫乳琼脂培养基 •三糖铁琼脂培养基 •乳糖胆盐发酵培养基 •PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液

•营养琼脂培养基 •营养肉汤培养基 •甘露醇氯化钠琼脂培养基 •念珠菌显色培养基

第三篇：在细胞苗生产中使用培养基的几点感受

在细胞苗生产中使用培养基的几点感受

山西

宋宝敏

生物制品的生产离不开细胞培养, 细胞培养基是细胞培养的重要因素。目前，国内尚没有关于细胞培养基生产的国家或行业标准，培养基生产企业执行各自的企业标准，细胞培养基生产的质量管理存在较大差别。有一个系统全面的统一标准，可以相对统一培养基质量。

多数细胞的培养采用合成培养基，而且还需要在合成培养基中添加一定量的血清来支持细胞的生长增殖。培养基和血清这两个原辅材料的质量直接关系到产品的质量。

我们企业生产所使用的细胞培养基大多为MEM或DMEM合成培养基，添加一定比例的血清来进行。在生产过程中，毒种和细胞的种类不变，生产的过程是按 GMP的要求进行检查评定的，这两个环节相对于产品的影响相对小，但细胞培养基更换批号或更换厂家，血清批次间的差异经常出现影响细胞生长的情况。这两样原辅料使用将要结束时车间就要求采供部购买同厂家、同批次的培养基及血清（在有效期内），否则必须先提供小样来先试验。这样不仅给采供带来购买难度，而且采购周期会很长，同时一个“换批次会影响质量”的信息潜在操作人员的意识里，即使同厂家的培养基经验证对细胞生长几乎没影响，由于潜意识往往造成细胞培养过程中总感觉不如原来使用的批次，要经过一段时间的使用才能转过来。

在实际生产时，因培养基相对容易购买，所以基本在开产前根据生产计划把一个周期的量基本备足。而血清则不同，每批可能适合某些细胞系，一旦准备更换批号，更不用说更换厂家了，必须做连续三到五批的生长试验，通过细胞的生长情况和细胞数选定血清批次。此处有一更换批号后细胞数对比数据(恕不写明厂家）。两个批号A和B

4三次试验的细胞数，A批号血清对应细胞数为（1）207×10（2)189×104（3）203×104

B批号血清对应细胞数为（1）197×104（2)181×104（3）192×104。

血清因为价格贵等原因总得在一个周期内至少换两个批号。另一个因素是在加血清的培养基采用微孔滤膜过滤除菌时经常出现滤器被杂质堵塞的情况，这时就需要有备用滤器，同时容易污染。不仅如此好多资料表明血清的添加有好多缺点：

1、血清都是批量生产，各批之间差异很大；

2、血清含一些对细胞产生毒性的物质，如多胺氧化酶、补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长，甚至造成细胞死亡；

3、血清的使用使得实验和生产的标准化困难，其中的蛋白质使得某些转基因蛋白生物药品生产中分离纯化工作很难完成；

4、血清质量问题还会对接种病毒以及毒价产生影响，例产毒少，毒价低；

5、血清内含有杂质等等说法不一。

鉴于上述使用情况，看来培养基的生产有必要有一个统一的质量标准和控制方法。尤其是细胞培养基的生产，不仅要有统一的质量标准和控制方法，更要不断有新的培养基产品的推出，好多厂家日益重视对无血清培养基的研发，这是一个有重大意义的工作，在原有培养基的基础上添加成分明确或部分明确的血清替成分。疫苗生产企业期待新型无血清培养基的上市，无血清培养基可以避免血清的批间质量变动对细胞生长的影响，可以降低企业的实验成本、储存成本损耗及采供难度；还可以提高产品的表达水品易于细胞纯化，在操作过程中易于灭菌。但同时企业更关注这种产品的质量，这样就又提到对培养基的生产企业有一国家的统一质量标准和控制方法，并附带培养基使用的统一的SOP。使用这样的原辅料的企业，企业的产品才更容易均

一、稳定、质量可控。

第四篇：Sc-U诱导培养基

Sc－U诱导培养基

SC Minimal Medium and Plates

SC is synthetic minimal defined medium for yeast.0.67% yeast nitrogen base(without amino acids)

2% carbon source(i.e.glucose or raffinose棉子糖)

0.01%(adenine, arginine, cysteine, leuine, lysine, threonine, tryptophan, uracil)

0.005%(aspartic acid, histidine, isoleucine, methionine, phenylalanine, proline, serine, tyrosine, valine)

2% agar(for plates)

1.Dissolve the following reagents in 900 ml deionized water(800 ml if preparing medium containing raffinose).Note: We make medium and plates as we need them and weighout each amino acid.Many researchers prepare 100X solutions of each amino acid that they need.Reminder: Omit uracil to make selective plates for growing pYES2 transformants.6.7 g Yeast Nitrogen Base

0.1 g each 0.05 g each

adenine aspartic acid

arginine histidine

cysteine isoleucine

leucine methionine

lysine phenylalanine

threonine proline

tryptophan serine

uracil(U)tyrosine

valine

2.If you are making plates, add the agar after dissolving the reagents above.3.Autoclave at 15 psi, 121°C for 20 minutes.4.Cool to 50°C and add 100 ml of filter-sterilized 20% glucose or 200 ml of filtersterilized10% raffinose.5.Pour plates and allow to harden.Invert the plates and store at +4°C.Plates are stable for 6 months.Induction Medium

If you are making induction medium, follow Steps 1-3 above except dissolve the reagents in 800 ml of deionized water.Cool the medium to 50°C and add 100 ml of filter-sterilized 20% galactose and 100 ml of filter-sterilized 10% raffinose to the medium.

第五篇：食用菌实验-培养基制作

实验二

母种培养基制作

一、实验目的掌握斜面试管培养基的配制、消毒与灭菌等制作过程，为菌种转管、组织分离制作母种打下基础。

二、常用培养基配方

1．马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)

去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升，pH自然。2.PDA综合培养基

去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克，磷酸二氢钾3.0克，硫酸镁1.5克，维生素B10.05克，水1000毫升，pH自然。

三、实验材料和用具

天平、电炉，18×180毫米试管，止水夹。纱布，棉塞，牛皮纸，皮筋，手套、菜板、刀、恒温箱，三角漏斗、支架（每组一套）。手提式高压灭菌锅。马铃薯、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂等。

四、实验步骤与方法 1．PDA培养基的配制 2．装管、捆把 3．灭菌

锅内加适量水→ 灭菌物品放内锅→

加热 → 压力表0.05Pa 时放气 →压力表1.15Pa(121-126℃)时计时30分钟。

4.摆斜面。灭菌后将试管取出斜放在一根1厘米左右厚的木板条上，使试管内斜面的长度为试管长度的3／5。放置凝固后备用。

五、作业思考题

1．制作PDA培养基过程中，为什么要用牛皮纸将整捆的棉塞部分封盖灭菌? 2．灭菌时，加热水沸后，在锅内压力升至0.5Pa 时，为什么要打开放气阀? 3．写出试管培养基制作的工艺流程。4．消毒与灭菌是同一概念吗?为什么?

实验三

原种培养基制作

原种即二级种，就是将试管中的母种，接入菌种瓶内，等菌丝长满后形成的菌种。

一、实验目的

通过实验初步掌握原种培养基的配料、装瓶(袋)、灭菌、消毒、接种、培养等生产工艺流程。并了解原种培养基的不同配方及不同的制作方法。

二、实验材料和用具 天平，立式或卧式高压灭菌锅，菌种瓶或菌种袋(菌种瓶口径3厘米，容积750毫升)，塑料套环，塑料绳，擦布，锥形捣木。称，大盆

麦粒，麦麸，棉籽壳，不锈钢锅，石膏，碳酸钙，白糖，牛皮纸，皮筋，三、培养基配方

1．木屑米糠培养基(适用于香菇、木耳、猴头菇、杨树菇等木腐生类食用菌)：木屑(锯木屑)78千克，米糠或麦麸20千克，石膏1千克，蔗糖(俗称白糖)1千克。料水比为1：1．4～1．6，使含水量达到60%，即用手握抓材料时指缝现水而不滴水。

2．麦粒培养基(适用于平菇、草菇、猴头、金针菇等)： 麦粒200千克，蔗糖2千克，碳酸钙2千克，水500升。

3．棉籽壳培养基(适于多种食用菌)：

棉籽壳78%，麦麸10%，玉米粉10%，过磷酸钙1%，白糖l%，水料比约1:1.1-1.2。

四、实验步骤与方法 1．培养基的配制

1)木屑米糠培养基的配制：

拌料：根据计划生产原种的数量，计算出各种原料的用量，分别称取后，将不溶性辅料和主料掺拌均匀，将可溶性辅料加入水中溶解，逐渐泼入拌好的主料中，掺拌均匀，继续加水拌料。拌料时，边加水，边测含水量，以便控制水分，不至过多或不足。含水量的测定：拌好料后，用手抓一把培养料在手中紧握，手指缝中有水渗出但不下滴为适宜。料水比约为1:1.2-1.4 装瓶（袋）：将培养料装入750毫升的菌种瓶(或500毫升罐头瓶)中，边装边捣实(但不宜过紧，太紧则透气性差，菌丝生长不良)，以手按结实有弹性为宜，一直装到菌种瓶的瓶肩处。

打孔：培养料装好后，用锥形木棒从瓶中央向下打一个洞，洞深离瓶底部2～3厘米，这样一是可以增加瓶内氧气；二是有助于菌丝沿着洞穴向下蔓延；三是便于固定菌种块，不致游动而影响成活，有利于瓶下部菌丝生长良好。

擦瓶：打洞后，用湿毛巾或湿布多次将瓶口和瓶外粘附的培养料擦净，擦干，以免接种后污染

包扎：塞上棉塞，用牛皮纸将瓶口及棉塞包住，用绳扎紧。也可在瓶口上先放一层牛皮纸，再盖一层聚丙烯塑料薄膜，扎紧瓶口。2)棉籽壳培养基的配制：

棉籽壳原种培养基的配制方法同木屑培养基的相似，只是装瓶时培养料的压实要比木屑的紧，因棉籽壳颗粒较大，且能留有较多的空隙。3)麦粒培养基的配制：

浸料：将小麦粒用水浸4-8小时，煮沸20—30分钟，煮沸的过程中就加入蔗糖。最后使麦粒熟而不开花。滤去水分(滤液可制母种培养基或栽培时拌料用)，摊在通风处晾30—40分钟，使麦粒表皮不湿为宜。

装瓶：加入碳酸钙，拌匀后装瓶。装瓶时要注意边装瓶边将瓶轻轻地扣动，使瓶内培养料松紧度上下一致，装至粒面至瓶肩部。瓶口包扎同前。2．灭菌

包扎好的料瓶（袋）放入高压灭菌锅内进行灭菌。在1．5千克／平方厘米压力下，灭菌2小时即可。如用土蒸锅常压灭菌，须将水烧开后继续蒸10小时，缓慢降温后取出使用。

六、作业思考题

1．原种培养基装满瓶后，为什么要用湿毛巾或湿布多次擦洗瓶外和瓶颈? 2．原种培养基装好后，为什么要在当天及时进行灭菌? 3．原种培养基装瓶后，用锥形捣木在其中内插一个圆洞的目的是什么? 4．原种培养基装满瓶后，其瓶的上部培养料是松一些好，还是紧一些好?为什么? 5．培养料装得过松过紧都将产生什么样的结果?