第一篇：实验方案-样本
第三节 汽车拖拉机试验计划与组织
试验过程分试验准备、试验实施和试验总结三个阶段
一，试验准备阶段
1.制定试验大纲
试验大纲包括下列内容：
(1)试验目的和任务》试验的目的决定了试验的类型、试验的规模与内容
(2)试验内容与条件》为完成试验任务所需的试验内容、试验程序及试验工作量
(3)试验项目和测量参数》应根据试验内容，列出必须进行的试验项目和每项目中必须测量的参数，并说明由测量参数求得最后性能指标的方法，附必要的计算公式。
(4)试验仪器》根据试验项目和测量参数，选择试验仪器设备，提出精度要求
(5)试验技术和方法》对试验人员的正确操作、检测数据及确保试验成功是十分重要的，尤其要遵守标准的或法规规定的实验程序和方法。
(6)人员组织和分工》明确参加试验人员的职责，组成试验组织系统。
(7)试验进度计划》以便使试验工作协调和有计划进行
2.仪器设备准备
根据试验大纲要求，准备好所需仪器。所有测试仪器与设备都应满足试验的测量范围、容量和精度的要求。试验前应对各种传感器进行定度，定度的数据应记录并填入试验报告中。
3.人员配备和记录表格准备
二，试验实施阶段
一般经历以下几个过程：起动预热、工况监测、采样读数和校核数据
三，试验总结阶段
试验报告内容一般包括：
○1问题的提出和简要测试方案。○2试验条件描述，如地面状况、测试工况、气温、风向和风速等。以便于试验结果比较和应用结果时参考。○3试验方案设计与试验方法。○4测试系统仪器选配。○5传感器定度。○6数据处理方法、处理结果与误差范围。○7试验结果分析。○8结论。○9存在问题和进一步的改进意见。○10附录，如典型试验记录曲线、数据处理结果表、试验规律曲线及工况照片等。
第二篇：课题实验方案
《如何培养中学生创造性思维》
课题实验方案
一、课题研究的目的和意义
1、课题提出的背景：培养中学生创造性思维是国内外教育教学工作者共同面临的一个焦点和难点问题。目前针对这一课题国内外都在开展研究探索，并取得了大量成果。如美国在中小学各学科教学目标中都增加了创新目标，很大程度上推动了创新教育的发展。我国近几年结合中学课程改革的实践很多学者都进行了有益地探索，在此课题研究上取得了相当大的进展，丰富了相关的教育教学理论，并用于指导各学科教学实践，提高了课堂教学的实效性和针对性。对于实施素质教育起到了很大的推动作用。
2、课题研究的意义：随着经济社会的发展，人类进入知识经济的时代，创新意识对于21世纪的发展至关重要。“创新是一个民族进步的灵魂，是一个国家兴旺发达的不竭动力”。创造性思维能力是一种具有高度机动性、灵活性、新颖性的思维活动，它既是发散思维和聚合思维的统一，又是直觉思维与分析思维的综合。课堂教学是知识传播、掌握的主要基地，是培养创新才能和创新人才的摇篮。创造性思维能力是一个人综合素质的重要组成部分。中学生正处于人生成长的关键时期，因此，培养中学生的创造性思维能力，既是推进新课程改革进行素质教育的重要任务，又关系到中学生能否全面提高自身素质，为一生发展打下良好基础。
二、课题研究的理论依据 课题实施的理论依据是科学发展观及素质教育理论、创新学习理论。围绕中学生各学科教学改革实践和学生的实际情况开展研究。坚持一切从中学生实际出发，针对其生理特点、心理特征、学习基础等现状，以课堂教学为主阵地，以活动为载体。充分发挥学生的主体作用和教师的主导作用，着力在课堂教学中引导学生善于发现问题，敢于质疑和超越，勇于打破常规，进行逆向思维，使学生在不断积累知识，把握已知规律的基础上，创新意识不断得到激发，创造潜能不断得到挖掘，创新能力不断得到提高。
三、课题研究方法及过程
1、研究方法：立足于目前中学生实际，提出相关研究问题、研究目标、形式和具体的切实可行的实施方案，按研究计划有步骤、有秩序地开展研究实验活动。在不断发现问题，不断解决问题的过程中，将理论与实践有机结合起来，逐步获得有价值的研究成果，最终结题。
2、研究的步骤：本课题研究周期为2年，自2008年7月至2010年6月，按计划分为准备与培训、实验与研究、总结成果三个阶段。第一阶段：准备与培训（自2008年7月至2008年10月）（1）组成课题小组，确定研究方向，明确分工。（2）制定详细具体一的课题研究方案。（3）收集整理国内外相关理论研究资料。
（4）制定学习计划，确定学习内容，开展与本课题研究相关理论知识的学习与培训工作。
第二阶段：实验与研究（自2008年10月至2010年1月）（1）进行教育教学实验研究。在中学各学科课堂教学实践中探索，培养学生创新思维的教学模式。
（2）课题组成员每月举行一次小型座谈会，做项目阶段性的研究分析，不断调整方案，完善过程，不断取得阶段性的成果。
第三阶段：总结实验成果，指导教学实践（自2010年1月至2010年6月）
（1）整理加工全部教学实践材料和阶段性的成果。（2）尝试将研究理论成果推广指导教学，达到研究的目标。（3）课题组撰写经验论文。
四、课题研究的组织管理
1、课题组成员及其它分工为：
吴宝明
男
38岁
中学高级
课题总负责人 陈
超
女
30岁
中学一级
负责资料收集、打印 武
平
女
34岁
中学一级
负责教学实验
仇丽鹏
女
40岁
中学一级
负责组织协调、会议召集、记录
姚智鑫
女
34岁
中学一级
负责教学实验
2、研究经费及保障
本研究课题受到了学校的高度重视和大力支持，所需人力、物力和经费确保及其足额到位。
第三篇：基因工程实验方案
实验
一、大肠杆菌质粒的提取与电泳检测
一、实验目的
学习质粒DNA提取的基本原理，理解各种试剂的作用，掌握质粒最常用的提取方法，为基因工程提供载体原料。
二、实验原理
将一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖或表达的工具较载体。细菌质粒是重组DNA技术中最常用的载体。质粒是一种独立于染色体外的稳定的遗传因子，为双链、闭环的DNA分子，并以超螺旋状态存在于宿主细胞总，大小从1—200kb不等。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中，它具有自主复制和转录能力，能在子代细胞中保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息。质粒的复制和转录依赖于宿主细胞编码的某些酶和蛋白质，如离开宿主细胞则不能复制，而宿主即使没有质粒也可以正常存活。但质粒的存在使得宿主细胞具有一些额外的特性，如对抗生素的抗性等。常用的质粒载体大小在2.7—10kb之间。如pBR32、pUC系列、pGEM系列和pBluescript(简称pBS)等。
细菌质粒的提取是根据环状质粒DNA分子具有相对分子质量小，易于复性的特点进行的。在热或碱性条件下DNA分子双链解开，若此时将溶液置于复性条件，由于变性的质粒分子能在较短时间内复性而染色体DNA不能复性。用碱变性方法提取质粒就是利用离子型表明活性剂SDS溶解细胞膜上的脂肪及蛋白，在pH高达12.6的碱性条件下染色体DNA氢键断裂，双螺旋结构解开而变性，成了杂乱无章的片段。而相对分子质量较小的质粒 DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状结构的两条互补链不完全分离，当pH4.8的NaAc或KAc高盐缓冲液调节pH至中性时，变性的质粒DNA可以完全形成互补链，又恢复到原来的构型。而染色体DNA不能恢复而形成缠连的网状结构，变性DNA与菌体的蛋白质凝聚成块。经过离心，出去的沉淀是变性的染色体DNA和蛋白质杂质，而上清液中的质粒DNA分子，则利用无水乙醇与盐凝聚形成沉淀。由于乙醇沉淀的时候，不光DNA还有性质相似的RNA也一起被沉淀下来。为了除去RNA，可以利用RNA酶进行处理，其后采用苯酚使RNA酶失活。出去RNA酶活性往往会采用一些复合物如苯酚、氯仿等，并且苯酚不仅使RNA酶失活，还能有效去除菌体的蛋白质等物质。因为只用无水乙醇沉淀，样品中还是混有蛋白质。所以为了获得高纯度质粒，应在无水乙醇沉淀前，先用苯酚进行处理，以便除去其中的蛋白质。
三、实验试剂
1.含质粒的大肠杆菌菌株
LB培养基：1%蛋白胨、0.5%酵母粉、1%Nacl、调pH7.2 抗生素：氨苄青霉素：母液100mg/mL，工作浓度100ug/mL 溶液I：50 mmol.L-1Tris-HCl，pH7.5，10 mmol.L-1 EDTA，pH8.0，高压灭菌后室温保存。
溶液II：0.2 M/LNaOH，1% SDS（以2M NaOH和10% SDS母液现用现配）溶液III：1.32 M KAc（pH4.8），(3mol/L NaAc)高压灭菌后室温保存。TE缓冲液（pH=8.0）：10mmol/LTris-Hcl/1mmol/LEDTA 2mg/mLRNase A溶解于10mmol/LTris-Hcl(pH7.5)、15mmol/LNacl 3mol/LNaAc(pH5.2 苯酚/氯仿/异戊醇（PCI）、冰冷无水乙醇、冰冷70%乙醇 碱裂解法小量提取质粒DNA步骤如下：
（a）挑单菌落接种于含相应抗生素的LB培养基中，37℃摇菌过夜。（b）每管取1ml菌液然后12,000 g离心30 秒，集菌。（c）加200 l溶液I，用振荡器剧烈振荡悬浮菌体。（d）加300 l新配制的溶液II，温和颠倒混匀5次以上。
（e）溶液澄清后立即加入300 l预冷的溶液III，混匀后冰上放置5分钟。（f）4℃、12000 g离心10（或5）分钟。
（g）取上清，加入等体积的氯仿，颠倒混匀后，4℃、12000 g离心10 分钟沉淀蛋白。
（h）吸取上清，加等体积异丙醇，混匀。室温放置10分钟。
（i）12000 g离心10 分钟，弃上清，再用75%(v/v)乙醇洗涤沉淀，12000 g离心5分钟。
(k)沉淀在37 ℃干燥后后溶于适量水或TE（50ul），（-20°C）保存备用。质粒DNA的检测:取5ul的质粒与2ul的6×上样缓冲液混合后，在0.7%凝胶上电泳检测。
溶液I：50 mmol.L-1Tris-HCl，pH7.5，10 mmol.L-1 EDTA，pH8.0，高压灭菌后室温保存。溶液I的作用：
１、任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此可用适当浓度和适当pH值的Tris-HCl溶液。
２、大家知道EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂，配在分子生物学试剂中的主要作用是：抑制DNase的活性，和抑制微生物生长。在溶液I中加入高达10 mM的EDTA，无非就是要把大肠杆菌细胞中的所有二价金属离子都螯合掉。
溶液II：0.2 M/LNaOH，1% SDS（以2M NaOH和10% SDS母液现用现配）用新鲜的0.4 N的NaOH和2％的SDS等体积混合后使用的。要新从浓NaOH稀释制备0.4N的NaOH，无非是为了保证NaOH没有吸收空气中的CO2而减弱了碱性。其实破细胞的主要是碱，而不是SDS，所以才叫碱法抽提。事实上NaOH是最佳的溶解细胞的试剂，不管是大肠杆菌还是哺乳动物细胞，碰到了碱都会几乎在瞬间就溶解，这是由于细胞膜发生了从bilayer（双层膜）结构向micelle（微囊）结构的相变化所导致。
既然是NaOH溶解的细胞，那为什么要加SDS呢？那是为下一步操作做的铺垫。这一步要记住两点：第一，时间不能过长，千万不要这时候去接电话，因为在这样的碱性条件下基因组DNA片断会慢慢断裂；第二，必须温柔混合不然基因组DNA也会断裂。基因组DNA的断裂会带来麻烦，溶液III：1.32 M KAc（pH4.8），(3mol/L NaAc)高压灭菌后室温保存。加入溶液III后出现大量沉淀，这与SDS的加入有关系。这其实是十二烷基硫酸钠遇到钾离子后变成了十二烷基硫酸钾（potassium dodecylsulfate, PDS），而PDS是水不溶的，因此发生了沉淀。如此看来，溶液III加入后的沉淀实际上是钾离子置换了SDS中的钠离子形成了不溶性的PDS，而高浓度的盐，使得沉淀更完全。大家知道SDS专门喜欢和蛋白质结合，平均两个氨基酸上结合一个SDS分子，钾钠离子置换所产生的大量沉淀自然就将绝大部分蛋白质沉淀了，让人高兴的是大肠杆菌的基因组DNA也一起被共沉淀了。这个过程不难想象，因为基因组DNA太长了，长长的DNA自然容易被PDS给共沉淀了，尽管SDS并不与DNA分子结合。
琼脂糖电泳进行鉴定质粒DNA时，多数情况下你能看到三条带。其实这三条带以电泳速度的快慢排序，分别是超螺旋、开环和复制中间体（即没有复制完全的两个质粒连在了一起）。如果你不小心在溶液II加入后过度振荡，会有第四条带，这条带泳动得较慢，远离这三条带，是20-100kb的大肠杆菌基因组DNA的片断。
实验
二、DNA片段（PCR或者酶切）的体外连接感受态细胞的制备重组质粒的转化阳性克隆的筛选（抗性筛选、蓝白斑筛选）
大肠杆菌质粒DNA的提取（碱裂解法）
此方法适用于小量质粒DNA的提取提取的质粒DNA可直接用于酶切PCR扩增。1.取1.5ml细菌培养物于EP管中，4000rpm离心1分钟，弃上清液，使细菌沉 淀尽量干燥；
2.将细菌沉淀重悬于用冰预冷的100µl 溶液I(50mmol/L葡萄糖，10mmol/L EDTApH8.0，25mmol/LTris-HClpH8.0)中，剧烈振荡；
3.加入200µl 新配制的溶液II(0.2mol/LNaOH，1％SDS（m/v）)，盖紧EP管 口，快速颠倒离心管5次，以混合混合物，确保离心管的整个内表面与溶液 II接触，不要涡旋，置于冰浴中；
4.加入150µl预冷溶液III(每100ml的溶液III中含60ml5mol/L乙酸钾，11.5 ml冰乙酸，28.5mlH2O)，盖紧EP管口，反复颠倒数次，使溶液III在粘稠 的细菌裂解物中分散均匀，之后将管置于冰上3~5分钟； 5.在最大转速下离心5min，取上清液于另一新EP管；
6.用两倍体积的乙醇室温沉淀双链DNA，振荡混合于室温放置2分钟，最大转 速离心5分钟；
7.小心吸去上清液，将离心管倒置于滤纸上，以使所有液体都流出，在将附于管壁的液滴除尽；
8.加1ml70％乙醇洗涤沉淀，振荡混合，用12,000g离心2分钟，弃上清，将 开口的EP管置于室温使乙醇挥发，直至EP管中内没有可见的液体存在（5～ 10分钟），用适量的ddH2O溶解；
9.用0.5µl的RNase37℃温育5~10分钟； 10.电泳鉴定。
乙醇沉淀DNA 1.加入1/10体积的乙酸钠（3mol⁄L，PH=5.2）于DNA溶液中充分混匀，使其 最终浓度为0.3mol⁄L；
2.加入2倍体积用冰预冷的乙醇混合后再次充分混匀置于-20℃中15~30分钟； 3.12,000g离心10分钟，小心移出上清液，吸去管壁上所有的液滴；
4.加入1/2离心管容量的70％乙醇，12000g离心2分钟，小心移出上清液，吸 去管壁上所有的液滴；
5.于室温下将开盖的EP管的置于实验桌上以使残留的液体挥发至干； 6.加适量的ddH2O溶解DNA沉淀。
酶切
1.酶切前确定待切样品的浓度, 并选择合适的限制性内切酶和配套Buffer。2.在离心管中加入如下成分： 10×Buffer 1μl 待切样品xμl 酶 0.5-1μl 加水补足10μl 3.混匀样品并短暂离心使样品沉于管底。
4.将离心管置于37℃中温育1-3hr，若待切样品为PCR产物，则可将反应时间 适当延长。
5.用未酶切的质粒作为对照，琼脂糖电泳鉴定酶切结果。注：当酶切样品用于回收而不是鉴定时，可按比例适当加大反应体积。双酶 切可选用二者活性都较高的Buffer或者通用Buffer，但要注意不能有星反应。）
连接
1.连接前先电泳确定待连接载体与片段的浓度。2.在离心管中加入如下成分： 10×连接Buffer1μl 待连接的样品（胶回收产物或PCR产物，载体与片段的mol比为1∶3-5）连接酶0.5-1μl 加水补足10μl 3.混匀样品并短暂离心使样品全部沉于管底。
4.将离心管置于连接酶要求的温度孵育适当的时间（根据不同公司的酶的要求 而定，一般为22℃1-3hr或16℃连接过夜）。
连接完的样品可直接用于转化，也可放4℃冰箱短期保存。
感受态细胞的制备
1.挑取适当菌株的E.coli单菌落接种于2mlSOB培养液中，37℃摇床过夜。2.取0.5-1ml过夜培养的菌液转种到50mlSOB中，18℃剧烈震荡，直到A600 达到0.6。
3.将培养物转移到50ml离心管中，4℃4,000rpm/min 离心10min。同时在冰浴 上配置TB溶液。
4.弃上清，将离心管倒置于滤纸上，使培养液被吸干。
5.取1ml刚配的TB溶液打散菌体沉淀，再加入15mlTB（1/3体积的起始培养 液），冰浴10-15min，4℃4,000rpm/min 离心10min。
6.弃上清，沉淀重悬于4mlTB（1/12.5体积的起始培养液），冰浴10min。
7.加入280μl DMSO，缓缓滴入并轻轻摇晃，使其充分混合均匀，冰浴10min。8.将菌液分装于EP管中，-80℃或液氮冻存。
9.取两管感受态细胞分别加入1μl无菌ddH2O（阴性对照）和1μl纯质粒（阳性对照）进行转化（见后），以检测感受态的质量。阴性对照平板上应该无菌落 生长，阳性对照平板上菌落数目的多少显示感受态效率的高低。
注：上述溶液均需高压蒸汽灭菌处理 0.1MK-Pipes(pH=6.7)的配制：
称取3.02gPipes粉末溶于80mlddH2O中，此时粉末不能完全溶解，用10N KOH或KOH固体调节PH值，只有当PH接近6.7时粉末才能完全溶解，此时 当小心少量地加入KOH直至达到所需PH值。
转化
1.取100μl感受态细胞于冰浴上融化。
2.加入1μl纯质粒或连接产物，轻轻吹打混匀，冰浴30min。3.将菌液放入42℃水浴中热激90秒，立即放入冰浴中2min。4.加入0.9mlSOC，于37℃恒温摇床上200rpm×1hr温育。
5.将菌液4000rpm/min离心3min，留200μl上清将菌体打散，均匀涂布于含适当
抗生素的琼脂平板表面，平板于37℃倒置培养过夜。
i.注：新倒的平板可于37℃培养箱中预先放置数小时至过夜干燥。ii.当转化的是TA克隆连接产物时可在菌液中加入8μl 1MIPTG 和40μl 20mg/mlX-gal以进行蓝白斑筛选。
重组子的筛选和鉴定
重组子可通过酶切进行鉴定，也可以利用扩增引物通过PCR进行鉴定，阳 性重组子能切出所需要的片段或得到相应片段的PCR产物。
1.用牙签挑取平板上的菌落接种于2ml含适当抗生素的LB培养基中，37℃摇 床培养过夜。
2.次日取菌液0.2-0.5ml，13,000rpm×3min离心，弃上清，加入20μl ddH2O和 20μl 酚/氯仿，震荡混匀，13,000rpm×5min离心。
3.取上清进行琼脂糖电泳，加入载体质粒DNA作为阴性对照，根据质粒大小 初步筛选重组子，重组子的泳动速度应该慢于载体质粒。4.用碱法小量制备可能是重组子的质粒DNA。
5.选取适当的酶，对重组子进行酶切分析，酶切体积均为10μl体系。酶切样品 进行琼脂糖电泳鉴定是否有所需片段。
6.酶切分析正确的重组子分成两份，一份进行测序反应，另外一份保种。7.若用PCR法鉴定，则在第2步时每个样本取0.5-1.0μl 菌液为模板进行PCR 反应，每管反应体系最低可少至10μl，PCR产物电泳，能得到所需条带的样 本进一步提取质粒酶切鉴定或送样品测序。
第四篇：课题实验方案
《提高小学生计算能力实验与研究》
实
验
方
案
海丰县陶河镇中心小学课题组
一、课题的提出
《数学课程标准》明确指出：人人都能获得良好的数学教育，不同的人在数学上获得不同的发展。这已是当今数学课堂教学中应有的理念。计算是数学知识中的重要内容之一，数学计算能力既是一项基本的数学能力，也是学习数学和其他学科的重要基础。在小学数学教材中计算所处的位置非常重要，学生计算能力的高低直接影响着数学其他知识的学习：数学中有些概念的引入需要通过计算来进行；数学应用题的解题思路、步骤、结果也要通过计算来落实；几何知识的教学要涉及周长、面积、体积的求法，这些公式的推导与运用同样离不开计算；至于简易方程、比例和统计图表等知识也无不与计算密切相关。可见学生的计算能力是至关重要的。
综上所述，提高学生的计算能力，有助于培养学生的数学素养，有助于培养学生解决问题的能力，有助于树立学生认真、细致、耐心、不畏困难的品质。因此，如何提高学生的计算能力就成了小学数学教学重要研究的重要问题。
但是，在实际学习中学生在计算方面所反映出来的情况令人担忧，学生的计算能力不高，由于计算错误，直接导致部分学生的数学成绩较差。特别是近几年来，我镇六年级数学毕业检测的成绩逐年下降，纵观一份毕业检测的数学试卷，单纯计算一大题就安排30分以上，第1页（共7页）
相当部分的学生得分都在15分以下。学生计算能力下降的原因是多方面的：这里面有主观的因素（学生自身生理、心理方面的因素）；也有客观的因素（包括家庭因素以及社会影响的因素等），我所在的陶河镇的各小学都属农村小学，近几年在我国加大城市化进程中农村人进城成风，陶河镇也在所难免，造成学校规模越来越小，学生的整体素质也大不如前，农村的留守儿童也对学生的学习情绪造成一定的影响；还有教师平时教学的因素。
基于以上几种原因，我们提出了“提高小学生计算能力实验与研究”这个课题。希望以此课题为突破口，跟随新课标的深化实施，我们面对21世纪的小学生，教学也要与时俱进需要，寻求更好的教学方法，特别是在计算教学方面应寻求创新，力求有新的突破。
二、课题研究的目的
1、通过本课题的研究，寻找学生学习非智力因素的影响，然后对症下药，排除学生学习的不利因素。使智力活动与非智力活动相互统一，协调一致，相互促进，充分地调动学生的主观能动性，让学生养成良好的学习习惯，增强学习毅力和意志。
2.通过本课题的研究，找出造成学生计算失误的原因及存在的心理障碍，采取积极的预防措施，培养学生在计算上的兴趣，提高学生的计算能力
3．通过本课题的研究，提高学生计算的正确率、准确率以及计算的灵活性，发展学生的数学思维。
4.通过本课题的研究，促使教师转变教学观念，努力营造学生喜欢的数学计算课堂。在创造性的开发学习资源、设计情景及教研的过程中实现教师专业的自我成长。在教师中形成敢于实践，勇于创新的教研精神。
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三、课题研究的原则
1、导向性原则。小学数学计算教学应体现数学课程标准的要求：体会四则运算的意义，掌握必要的运算技能，能准确进行计算。根据学生已有经验、心理发展规律以及所学内容的特点，采用逐步渗透、深化、螺旋上升的方式编排，以便逐步实现每一阶段的学习目标。
2、主体性原则。学生是学习的主体，所有的新知识只有通过学生自身的“再创造”活动，才能纳入其认知结构中，才可能成为有效的知识。因此，在评价时要尊重学生，以学生的基础和年龄特征出发，投其所好，使他们主动地得到发展。
3、差异性原则。学习心理学的研究表明，学生在发展上是存在差异的，要求没有差异就意味着不要求发展。我们要尊重这个差异，为学生自由发展创造足够的空间，实现不同的人在数学上获得不同的发展。
4、激励性原则。在教学中,应激发学生的学习兴趣,使其形成强大的、持久的学习动力,从而以极高的热情进行学习,并积极引导他们向某一方面发展。这是挖掘学生潜能,提高教学质量,加速人才培养的关键。
5、趣味性原则。有效的数学学习来自于学生对数学活动的参与，而参与的程度却与学生学习时产生的情感因素密切相关。学生对该知识感兴趣，他就学得认真，做得用心，因此，在设计教学时，要符合学生特点，要有趣、要贴近学生的生活实际。
四、课题研究的内容 我们要研究的内容如下：
1、非智力因素对学生学习习惯影响的分析研究。
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有的学生计算能力低，固然有概念不清、没有真正理解算理、没有熟练掌握算法等原因，但非智力因素的影响也是不可忽视的。非智力因素包括学生自身生理、家庭和社会等因素。
2、利用课堂教学提高学生计算能力的研究。
有关计算方面的基础知识广泛分布于小学数学的各册教材中，要求每位数学教师必须熟悉各册教材的教学要求，根据小学生的认知规律、年龄特征以及知识基础精心设计教案，灵活调控教学过程。在强化基础知识的同时，还要注意培养能力，发展智力，寻找能够提高学生计算速度和计算正确率的教学突破口和教学训练方法等策略。
3.教师教学方法的研究。
探索在新课程标准下以提高学生计算正确率和速度的指导为特点的课堂教学模式，要求教师在计算教学中与时俱进更新教学理念。采取灵活多样教学方法和教学技巧
五、课题研究的方法和措施
（一）课题研究的方法：
1、调查法：深入课堂教学实践进行实地调查，寻找错误的原因。
2、文献研究法：学习与本课题相关的基础理论，并在科学理论的指导下来研究分析。
3、个案研究法：通过对典型错例和课例的分析，找到问题的实质，研究解决问题的有效策略。同时找出具有普遍意义的、有借鉴价值的先进经验，宣传推广，为提高计算教学的针对性、有效性提供帮助。
4、行动研究法：深入课堂，深入教研组，在调研中发现问题，针对问题研究对策；开展教学研究课比赛，给教师提供展示交流的平台。
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5、经验总结法。搜集整理课题研究材料，总结、分析课题研究的经验，形成课题研究论文（报告）。
（二）课题研究的措施：
1、加强计算教学，上好新授课，引导学生主动探索，透彻理解算理掌握法则。实录计算教学实验课堂教学案例，依照新课程理论对案例进行剖析。
2、培养学生认真、细致、书写工整、格式规范，认真审题、分析、自觉检查验算和独立纠正错误的良好习惯。
3、开展教学研究反思和以提高学生计算能力为主题的课堂教学研讨活动，在教师日常教学中不断研究，不断反思，积累教学成功的案例。
4、收集错题类型，做到对症下药。每堂新授课可以加入前一天作业中的易错处，让学生改错。几节新授课后，在练习课中安排一节专门以改错类型的课，以巩固、运用新知识为主要任务，目的是及时针对学生作业中输出的错误信息，集中分析订正，使学生准确掌握新知识，并在改错中化知识为能力。
六、课题研究的步骤
本实验周期为一年，分为三个阶段进行。
第一阶段：2012年10月至2012年11月。主要组织理论学习，确立研究对象，研究目的，制订实验方案。
第二阶段：2012年11月至2013年5月。课题研究和实验过程。
1、深入了解学生计算能力的现状及其计算能力差的根源。
2、召开研讨会，对学生存在的计算问题进行分析、比较和研究。
3、开展实验课，邀请名师工作室主持人吕崇平老师等专家指导。
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4、组织学生参与各种形式的课题实践活动，实验现状分析调查，进行实验操作，反复进行探究活动操作，积累资料。
5、召开经验交流会，进行阶段性的成果总结，将优秀课例、教案、论文。
第三阶段：2013年5月至2013年7月。收集、整理实验资料，总结及撰写实验报告、心得体会、论文。课题组写出全程报告和收集有关数据、教案、课例、体会、论文向上汇报，注重“理论——实践——理论”的升华过程。
七、课题研究达到的预期成果
1、教师探索“如何提高小学生计算能力研究”教学模式的论文2-4篇，分段总结并努力将成果发表于各级报刊上。
2、开展现场教学活动，请专家、同仁指导，写出优秀课例及教案。
3、分阶段形成阶段实验报告和终期实验报告，写出阶段性实验报告和实验总结。
4、请有关科研单位对课题进行结题评估，并把教学经验推广。
八、课题组织机构及其分工
1、课题实验领导小组
组长：林少粒 副组长：陈鸿标 陈可亲 成员：黄伟庆 刘克引 邓怀强
2、课题实验工作指导
吕崇平（名师工作室主持人）陈源德（海丰县教育局教研室主任）
3、课题研究负责人：陈鸿标（组织课题组实验教师开展理论学习；组织开展课题实验研究；组织课题组做好阶段小结及各阶段性评价；组织实验教师撰写论文、案例，总结经验，撰写实验报告）。
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4、课题研究成员：陈鸿标、邓怀强、黄杰锦、刘克东、刘克专、刘惠雪、吕伟成、李赛贤（认真学习课题相关的理论；做好学情调查、分析；开展实验研究；做好各阶段的实验小结，撰写案例、论文）。
九、课题研究实验经费
本课题估计需要的经费不多，由主持人所在的学校自筹。
海丰县陶河镇中心小学课题组
2012年10月30日
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第五篇：分子生物学实验方案
实验一 分子生物学实验安全注意事项及分子生物学实验室所需要的仪器设备的使用（2学时）实验二 分子材料的采集、保存和植物/动物基因组DNA 的分离（8学时）实验三 DNA/RNA 的琼脂糖凝胶检测（4学时）实验三 聚合酶链式反应（PCR）（3学时）
实验四 PCR产物的琼脂糖凝胶检测与聚丙烯酰胺凝胶电泳检测（6学时）实验五 分子生物学软件的使用（4学时）
实验六 生物信息学（3学时）生物信息获取与利用 实验考试
实验三：琼脂糖凝胶电泳检测DNA
【目的要求】
学习并掌握DNA琼脂糖凝胶电泳基本原理和操作，了解如何通过电泳判断DNA纯度、含量和分子量。
【实验原理】
凝胶电泳是分离、纯化和鉴定DNA的常用方法。因为DNA分子是两性解离分子，在pH高于其等电点（约3.5）的中性或碱性溶液中带负电荷，在电场中向正极方向泳动。DNA凝胶电泳的介质主要有两种：琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。聚丙烯凝胶的孔径较小，适合于分离5-500bp的小片段DNA；而琼脂糖凝胶的孔径较大，可以分离100bp-60kb的较大片段DNA。不同浓度的琼脂糖凝胶适合于分离不同大小的DNA片段（表7-1）。
琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物，当熔化后再凝固时就会形成固体基质，具有多孔的网状结构，孔径大小取决于琼脂糖浓度。DNA在琼脂糖凝胶中泳动时，受到电荷效应和分子筛效应的双重影响。电荷效应由分子所带的电荷量多少来决定，而分子筛效应则与分子大小和构象有关。在一定的电场强度下，DNA分子的泳动速度主要取决于分子量大小和构象。线状双链DNA分子在琼脂糖凝胶介质中的迁移率与其分子量的对数值成反比。分子越大，迁移速度越慢，从而可以将不同大小的DNA分子分开。因此，通过与DNA标准分子量参照物（MW marker）的迁移率对照，可以鉴定DNA分子的大小。DNA分子的构象也可以明显影响其迁移率。在细胞内质粒DNA有3种构象：超螺旋的共价闭环DNA（covalently closed circular DNA，cccDNA），松弛型的开环DNA（open circular DNA，ocDNA）和线性DNA，在琼脂糖凝胶电泳中，其泳动速度依次为：cccDNA >线性DNA >ocDNA，因而未酶切的质粒DNA在电泳中多显示为3条带，泳动速度最快的超螺旋带越亮，说明质粒DNA提取质量越好。
表7-1：不同浓度琼脂糖凝胶对DNA的有效分离范围
琼脂糖浓度（%）线性DNA有效分离范围(kb)0.3 5-60 0.6 1-20 0.7 0.8-10 0.9 0.5-7 1.2 0.4-6 1.5 0.2-4 2.0 0.1-3 DNA的迁移率还与电场强度（即单位长度的电压降）有关，电场强度越大，泳动速度越快。当需要快速观察电泳结果时，可以适当加大电场强度。但是电泳分辨率会随着电场强度的增大而缩小，因为高分子高速流动时摩擦力增加，相对分子质量与移动速度就不一定成正比，因此一般电场强度应不超过5V/cm。特别是当需要较精确测定DNA片段大小、获得理想的分辨率和漂亮的带型时，应该适当降低电场强度，相应的适当延长电泳时间，并选用相对较低的凝胶浓度。
为了显示凝胶中DNA的泳动位置，需要加入染色剂染色。最常用的染色剂是溴化乙锭（ethidium bromide EB）。溴化乙锭可以嵌入核酸双链的配对碱基之间，在紫外线的激发下发出橘红色荧光。一般是在凝胶中直接加入终浓度为0.5μg/ml的溴化乙锭，这样可以在电泳过程中随时利用紫外灯观察核酸的迁移情况。但是EB与DNA的结合会影响DNA的迁移率，因此对于需要较精确测定DNA片段大小、或需根据荧光强度测定DNA含量时，EB染色应在电泳结束后再进行（将凝胶浸入0.5μg/ml的溴乙锭水溶液中10min即可）。注意：EB是强诱变剂，使用EB必须戴一次性手套，不要洒在桌面地面上，被污染的物品必须专门处理后（加少量漂白粉可使EB分解），再彻底清洗或丢弃。
指示剂溴酚蓝和二甲苯青的作用是指示样品在凝胶中的迁移过程，以确定终止电泳时间。在0.6 %、1%、2%琼脂糖凝胶电泳中，溴酚蓝分别约与1kb、600bp、150bp双链线状DNA片段的迁移率大致相同。在1%琼脂糖凝胶中，二甲苯青大致相当于2kb双链线状DNA的位置。【试剂器材】
1．5×TAE：
2．10mg/ml溴化乙锭（EB），避光4℃保存。/ GoldView 常温保存。3．6×上样缓冲液（配方见附录）4．（电泳）琼脂糖
5． DNA、PCR扩增产物
6．DNA标准分子量marker（λDNA/HindIII）7．水平式电泳槽、电泳仪 8．透射式紫外灯 9．胶带
10．微波炉或恒温水浴 11．微量移液器 【操作步骤】
1．称取琼脂糖1g，置三角烧瓶中，加入1×TAE 100 ml，置沸水浴或微波炉中加热，使充分溶解。注意：微波炉煮沸1次可能不能充分溶解，需取出混合后反复加热1-2次，注意此时可能出现爆沸现象，避免蒸汽烫伤。
2．待琼脂糖溶液冷却至60-65℃左右时加入溴化乙锭/5ulGold View，使终浓度为0.5μg/ml，混匀。
3．用胶带把制胶模具的两端边缘封好，置水平位置，选择孔径适宜的加样孔模板（梳子），并垂直安插好。注意梳齿必须与模具底面保持一定距离（约0.5-1mm），防止样品槽破裂，导致样品泄漏。
图3-1：凝胶灌胶过程示意图
4．将冷却至50-60℃左右的琼脂糖溶液缓慢倒入制胶模具中，使凝胶液缓慢展开，直至形成厚度适当（一般为0.3-0.5cm）的胶层。小心去除加样孔周围的气泡。室温静置30-60分钟。（如图3-1）
5．琼脂糖完全凝固后，小心取出梳子，去掉模具两端的胶带，将凝胶放入电泳槽中。6．电泳槽中注入适量0.5×TBE缓冲液，使液面高于凝胶约1mm左右。7．分别取5μl DNA或者2μl PCR产物和约0.5μg DNA分子量marker，加入1/5体积（2ul）的上样缓冲液，混匀。
8．小心缓慢将样品上样于凝胶加样孔中。记录样品加样孔顺序。
9．上样完成后，尽快开始电泳，以防止样品漂流。接通电源，注意正负极是否正确。调节电压在1-5V/cm左右，样品进胶前电压不要太高。电泳开始后不久就可以观察到溴酚蓝从加样孔迁移到凝胶中。
10．根据指示剂迁移的位置，或根据反射紫外灯显示的DNA迁移位置，判断是否需要终止电泳。切断电源后，取出凝胶。
11．将凝胶置于透射紫外灯上，打开紫外灯（注意尽量避免使用254nm短波紫外灯，并戴好防护眼镜或防护罩），观察染色后发出橘红色荧光的DNA条带，拍照记录。
注意观察样品DNA条带是否清晰，有无拖尾现象，条带数量、大小是否正确，判断样品DNA分子大小，与预期大小是否相符，并目测粗略估算样品DNA含量。【注意事项】
（1）凝胶不能有气泡。（2）电泳是从负极到正极。
（3）EB是致癌剂，操作要带手套。【实验安排】
本实验一天内可做完。【作业】
写出实验步骤及注意事项。
相关溶液配制
1,50倍TAE缓冲液的配制(pH8.5)配方：2MTris-HAc、100mM EDTA 配制量：1L 配制方法：
1）称取Tris碱242.3g，置于烧杯中
2）称取EDTA固体29.3g或Na2EDTA-2H2O固体37.2g 3）加入700mLddH2O，溶解完全 4）加入57mLHAc，充分搅拌 5）用HAc调pH至8.5 6）定容至1L，室温保存
2，溴化乙锭(EB)【强致癌物】 配制量：100mL 配制方法：
1）1gEB于专用容器中
2）加入100mLddH2O,搅拌数小时至溶解完全 3）转移至棕色瓶中，避光保存 3，6×上样缓冲液Loading Buffer 配方：30mMEDTA；36%（V/V）丙三醇；0.05%溴酚蓝；pH7.0 配制量：100mL 配置方法：
1）6mL EDTA（500mM，pH8.0）加入50ml ddH2O中 2）5mL 1%溴酚蓝 3）取36mL丙三醇
4)用2N的NaOH调pH=7.0 5）定容至100mL 4，6×甘油上样缓冲液Loading Buffer 配方、配制量：
成分及终浓度 0.15%溴酚蓝
0.15%二甲苯靑EF 5mmol/L EDTA 50%甘油 水
配制10ml溶液各成分用量 1.5ml 1%溴酚蓝
1.5ml 1%二甲苯靑EF
100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)3ml 3.9ml
5.GoldView(GV)GoldView(GV)是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同，在100ml琼脂糖胶溶液中加入5µl GoldView™即可。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，也可用于染RNA。
由于未发现GoldView™有致癌作用，且灵敏度与EB相当，将有可能逐渐取代EB而得以广泛应用。
概 述
GoldView™是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA时，GoldView™与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，而且也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验，致突变性结果均为阴性；而溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂。因此用Goldview™代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法
1.将100ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%~2%）在微波炉中融化。
2.加入5ul GoldView，轻轻摇匀，避免产生气泡。
3.冷却至不烫手时倒胶，待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4.电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照相记录，则关闭相机的闪光灯，放在自动档即可；若使用凝胶成像系统照相，通过调节光圈、曝光时间，选择合适的滤光片，可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1.胶厚度不宜超过0.5cm，胶太厚会影响检测的灵敏度。
2.加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响，但不明显。
3.通过凝胶电泳回收DNA片段时，建议使用GoldView染色，在自然光下切割DNA条带，避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤，可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4.虽然未发现GoldView有致癌作用，但对皮肤、眼睛会有一定的刺激，操作时应戴上手套。
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