第一篇：临床微生物标本检测和细菌耐药监测
红河州第四人民医院
临床微生物标本检测和细菌耐药监测制度
1.根据临床微生物标本检测结果合理选用抗菌药物，接受抗菌药物治疗住院患者微生物检验样本送检率不低于30%(相关指标计算方式见附件5)。
2.感染管理部门应对本院细菌耐药情况进行监测，每三个月定期分析、评估监测数据并发布相关信息，提出干预和改进措施，建立细菌耐药预警机制，配合医务部门监督实施。
3.医疗机构抗菌药物管理工作组针对不同的细菌耐药水平必须采取相应应对措施。
(1)对主要目标细菌耐药率超过30％的抗菌药物，及时将预警信息通报医务人员。
(2)对主要目标细菌耐药率超过40％的抗菌药物，慎重经验用药。(3)对主要目标细菌耐药率超过50％的抗菌药物，参照药敏试验结果选用。
(4)对主要目标细菌耐药率超过75％的抗菌药物，暂停临床应用，根据追踪细菌耐药监测结果，再决定是否恢复临床应用。
4.抗菌药物管理工作组按照要求向全国抗菌药物临床应用监测网报送抗菌药物临床应用相关数据信息，向全国细菌耐药监测网报送耐药菌分布和耐药情况等相关信息。
5.药事管理委员会应根据本院微生物培养、药敏情况，定期进行抗菌药物淘汰或筛选，定期对抗菌药物目录进行调整。
红河州第四人民医院药事管理委员会、药剂科
2011年7月1日
第二篇：细菌耐药监测及预警机制
细菌耐药监测及预警机制
按照《抗菌药物临床应用指导原则》要求，加强临床微生物检测与细菌耐药监测工作，并建立细菌耐药预警机制。
（一）对接受抗菌药物治疗者，微生物检验样本送检率不得低于30%。
（二）微生物室每季度分析我院细菌耐药情况，对耐多药细菌、泛耐药细菌的出现及时向感染管理科报告。
同一科室短时间内多重耐药菌感染有流行或暴发趋势时，原则上要求进行同源性鉴定，一旦同科室部门出现同源性耐药细菌，感染管理科应及时向主管院领导汇报并积极采取隔离消毒措施，严格控制其流行。（三）感染管理科每季度向感染管理委员会公布本院医院感染细菌的构成及耐药情况：
1、对主要目标细菌耐药率超过30%的抗菌药物，应及时将预警信息通报本院医护人员。
2、对主要目标细菌耐药率超过40%的抗菌药物，应慎重经验用药。
3、对主要目标细菌耐药率超过50%的抗菌药物，应参照药敏试验结果选用抗生素。
4、对主要目标细菌耐药率超过75%的抗菌药物，应暂停该类抗菌药物的临床应用，根据耐药监测结果，再决定是否恢复其临床应用。
细菌耐药预警机制流程图
主要目标细菌监测
耐药率≥30%
耐药率≥40%
耐药率≥50%
耐药率≥75%
及时通报本
院医务人员
医务人员慎
重经验用药
按药敏结果用药
医院领导汇报
药事委员会汇报
暂停临床应用
定期监测再决定
是否恢复使用
第三篇：抗菌药物临床应用和细菌耐药预警管理机制
抗菌药物临床应用和细菌耐药预警管理机制
一、将临床抗菌药物应用的管理纳入医院医疗质量管理和综合目标考核中，并与各临床科室绩效考核相结合。
二、抗菌药物管理工作组要定期对抗菌药物应用情况进行检查(每月≥1次)，药剂科每季度对门诊和住院部抗菌药物使用情况进行1次分析，并在《处方及临床用药通报》上向全院进行通报。
三、药剂科每半年要进行一次抗菌药物应用专题分析，形式为会议或者通报。内容包括：抗菌药物使用情况调查分析，医师、药师与护理人员抗菌药物知识调查以及医院细菌耐药趋势分析等；对不合理用药情况提出纠正与改进意见。
四、药剂科应完善各类抗菌药物的出入及消耗登记制度，对某些用量异常、价格昂贵和不良反应较大的抗菌药物实行限制性应用。
五、根据“卫生部全国细菌耐药监测报告”的监测结果，医院感染管理科结合医院实际情况，采取以下干预措施：
1．对细菌耐药率超过30％的抗菌药物，将预警信息及时通报有关科室医务人员。
2．对细菌耐药率超过40％的抗菌药物，慎重经验用药。
3．对细菌耐药率超过50％的抗菌药物，参照药敏试验结果用药。4．对细菌耐药率超过75％的抗菌药物，暂停该类抗菌药物的临床应用，根据细菌耐药监测结果再决定是否恢复临床应用。
六、有下列情况之一者，视为不合理使用抗菌药物： 1．无用药指征；
2．越线用药或药敏试验有低线药物敏感而不及时修改； 3．不按常规疗程、剂量、给药途径、时间间隔给药的；
4．病人转科时频繁换用抗菌药物或者病程记录中对换用抗菌药物的理由不当；
5．不进行药物不良反应观察或发生药物不良反应后不及时处理； 6．不按规定上报药物不良反应；
7．其它不符合“天门市第一人民医院抗菌药物分级管理细则”行为； 8．其它不符合“天门市第一人民医院抗菌药物临床应用原则"行为。
七、抗菌药物使用管理质控重点
下列病例治疗性应用抗菌药物，需行病原菌检测加药敏试验： 1．败血症、菌血症。
2．成人发热3天及以上，儿童发热5天及以上，原因不明，需做血或骨髓培 养。
3．有咳痰(黄绿痰、脓痰)等呼吸系统临床表现需行痰培养；上呼吸道 感染行咽试纸培养。
4．怀疑细菌性心内膜炎需血培养。
5．肝硬化腹水出现腹膜炎体征应行腹水培养。6．泌尿系感染需尿培养。7．生殖系统化脓性感染。
8．气管切开48h后，每周一次培养。9．留置导尿管48h及以上病例。
10．各种引流管留置48h及以上病例(胃管、空肠造瘘管、肛管、气胸闭式引 流管除外)。
11．腹膜炎、胸膜炎、化脓性关节炎、骨髓炎、各部位脓肿等经手术或穿刺可以取。
12．各类非甲级愈合伤口，烧伤(烫伤、电击伤)创面。13．预防性应用抗菌药物超过48小时病例按治疗性应用对待。
八、发现上述第六条、第七条相关违规行为，按以下处理：
1．科室：违规每例次扣l分，累计在科主任绩效考核“基本指标”中“抗生 素规范使用”项扣除，扣完为止。
2．当事人：运行病历每例次扣50分，归档病历按乙级病例计扣21分，取消 病历评奖资格，另扣50分。
第四篇：临床微生物检测行业的现状
临床微生物检测行业的现状、机会与挑战
作为国内比较早进入微生物领域的复星佰珞，我们有幸目睹了国内微生物实验室和微生物检测产品，过去十多年里在技术和规模上的迅猛发展。在此，我们想以从业者的角度，分析和探讨微生物诊断产品的现状、问题和未来可能的行业机会。
一、微生物实验室的地位和作用
国内的临床医院，微生物实验室通常隶属检验科。一部分专业水平比较高的医院，如上海的瑞金医院、北京301医院，微生物科被列为单独的科室，与检验科平级。这种趋势已经和欧美发达国家的情况接近。
微生物实验室最初，也是最基本的工作，是为临床提供及时准确的病原学诊断，包括对病原体的分离、培养、鉴定，以及药敏结果的报告。
随着细菌耐药性的增加，微生物实验室在监管和促进抗菌药物合理使用，以及院内感染的预防和控制中起着越来越重要的作用。
在发达国家，微生物实验室还有一项重要职能，就是参与临床诊断和治疗，为临床提供咨询服务。比如，微生物实验室通常会直接参加对高危和特殊病例的会诊，结合病人的临床指症，提出检测方案，并跟进治疗过程。
二、微生物检测产品的现状和需求
和常规医技项目（如生化、免疫）不同，微生物的检测有一个非常重要也是不可或缺的环节，就是标本处理和培养。只有通过培养得到的各类致病菌，也就是通常所说的阳性标本，才会做进一步的鉴定和药敏检测。
在欧美发达国家，细菌培养的阳性率在35%左右，我们国家阳性率比较低，一般在20-30%。最主要的原因，是标本处理和培养的技术水平比较低，操作不规范。
目前，微生物实验室使用的检测产品，大部分依然以传统方法为基础，首先对标本进行预处理，根据涂片染色的结果，选择合适的培养基进行分离培养；根据菌落特点，选择适当的生化反应或者自动化仪器进行鉴定；药敏则采用纸片法或者直接上自动化仪器进行检测。
无论是国内还是国外，微生物的检测一直是手工、半自动、全自动共存，以基础微生物学方法为主，结合形态学、免疫和分子生物学等辅助手段。这种情况在今后还将长期存在，究其原因，最主要的还是细菌检测，检测的是细菌生长分裂的过程，在技术上无法用自动化仪器取代，尤其是标本处理和培养。
自动化仪器的应用，主要在血培养和鉴定药敏。另外，随着基因技术的发展，不需要培养，能够直接对标本进行检测的快速检测产品逐渐发展起来，这些免疫技术和分子生物学技术的应用，为微生物检测提供了很多辅助手段。
由于方法学的局限，临床对于微生物产品的需求，主要集中在提高速度、减少人工，加强准确性和检测过程的质量控制。另外，对于药敏结果的解释、院感控制和耐药分析也提出了越来越高的要求。
三、制约微生物快速发展的因素
同欧美发达国家相比，国内的微生物实验室无论是技术还是规模，都有着相当大的差距，微生物检测在未来有着非常广阔的发展空间。尤其是最近几年，无论是WHO，还是政府各级卫生主管部门，对于细菌耐药性和抗菌药物合理使用的高度重视，更是为微生物行业的发展创造了有利的大环境。
但是，微生物为什么没有象之前的PCR、化学发光一样，出现一波爆发式的增长呢？ 我们把制约归结为三个问题：人的问题；钱的问题；管理的问题。
所谓人的问题，实际上是临床和实验室沟通的问题。微生物实验室是检验科室中，与临床结合最紧密的检测项目。但是，国内微生物实验室很少具备这种走向临床的能力，大部分医院的情况是，微生物室不懂临床和抗菌药物，而临床医生又不懂微生物。
所谓钱的问题，就是成本核算的压力。微生物室是检验科最不赚钱的部门。成本高、收费低，人力投入大。以最常见的鉴定药敏项目为例，收费不到200元，而一个人份进口试剂的成本就要100元，这还不包括标本处理和辅助试剂的成本，科室的盈利空间非常有限。
管理的问题，虽然，2011年卫生部颁布了史上最严苛的抗菌药物临床管理办法，并启动了为期三年的抗生素专项整治活动，微生物实验室的地位和作用被提到前所未有的高度。但是，在医改的大背景下，医院管理和医药管理的模式尚未解决，政府、医疗保险机构、医院、临床科室和检验科的目标和利益很难达成一致，微生物检测项目依然处在一个两难的境地。
四、如何解决人的问题、钱的问题、管理的问题
微生物检测，最突出的矛盾是缺标本，没标本是因为临床不开单，不开单实验室就没收入，没有收入也就没有投入，实验室配备差，技术水平得不到提高，检测结果对临床没有帮助，医生就更不愿意开单。
所以，在技术上要改变微生物检测的困境、提高标本量，首先要解决人的问题。对微生物室的技术人员、临床医生、采集标本的护士、包括广大患者，都需要进行大量的宣传和教育，提高对微生物检测和抗菌药物合理使用的意识和能力。
人的问题同样体现在院内感染的预防和控制，这其实是微生物室和临床之间的重要媒介。也是提高微生物实验室地位和权威性的重要途径。但是，很多医院的院感依然停留在空气培养等一般性工作上，微生物室的资源和作用并没有很好地得到发挥，也做不到事先预防。
再来看看国外是如何平衡钱的问题。虽然各个国家医疗保障的体系各不相同，但无一例外，都把提高治疗效果、减少住院时间作为降低医疗费用的主要手段。
美国是赢利模式，按病种理赔、按人头收费，病人的治疗时间越短，医疗机构的成本越低，盈利空间越大。微生物检测对合理用药、准确用药致关重要，所以对微生物室的投入很大，尤其是人员。微生物实验室可能赢利不多，甚至不赢利的，却是对医院赢利致关重要的环节。
英国是另外一种公立模式，政府拨款、总量限定，微生物检测能够有效地帮助节约用药费用和住院费用，同样受到重视。
而中国，医院是总量控制下的赢利模式，但是要求各个科室或者小组独立核算，单独赢利。作为需要大量投入的微生物检测，显然达不到这样的赢利要求。
此外，与发达国家相比，在我们的医疗管理和医改过程中，对微生物检测的认识和重视程度远远不够。无论是医保机构，还是政府的政策制定机构，他们的注意力过多地放在医生的处方上，忽视了微生物检测对于合理用药、准确用药的重要作用，甚至一刀切地把本来已经很低的检测收费，进一步地降低，阻碍了微生物实验室的发展。
五、厂家的机遇和挑战
人的问题、钱的问题、管理的问题，制约了微生物检测的快速发展，但是这种局面正在悄悄地发生改变，微生物检测在未来几年实现突破，走向非常广阔的发展空间，已经是不争的事实。
从大环境来看，一个是医疗费用的总量控制，总量控制的关键是药费，而国内药费的主要组成部分是抗菌药物。
其次，抗菌药物的合理使用上升到政策高度，院长成为“第一责任人”。而不是象04年出台抗菌药物指导原则的时候，只有原则没有细则。只有要求，没有落实。
另外，医患矛盾越来越突出，医疗纠纷不短增加，诊断和治疗需要有科学的依据，微生物检测的结果，在处理医疗纠纷、进行理赔时就成为一个重要依据。
当然，这些政策的出台，不可能在短时间内彻底改变所谓人的问题、钱的问题以及管理的问题，广大民众对于抗菌药物合理使用的认识不可能在一夜之间突然提高，我们的医疗制度改革更是一个长期的艰苦的过程。这些都是微生物发展过程中会面临的挑战。
那么，作为厂家，我们应该如何抓住微生物检测未来十年的发展机会呢？
首先，应该致力于开发高品质的、并且适合中国实际情况的产品。
微生物的检测，是个非常严谨的过程，对不同标本、不同细菌都有相应的检测要求，CLSI和UCAST都有非常明确的标准，也是我们微生物检测的根本。
我们国内的一些厂家，出于降低成本的考虑，随意改变药物的浓度梯度和判别标准。有公司在市场上宣传可以按照客户要求，订制药敏试剂，一块板可以同时检测三十多种抗菌药物，可是这些药物当中，很多并没有折点标准，有的甚至根本没有标准品。而他们所谓的订制板条，既没有通过检测，也没有做过临床，当然更不会向SFDA注册申报。
还有一些实验室，过分迷信全自动的进口产品。事实上，不同地区的细菌种类和耐药特性会有很大差异。在本世纪初，我们国内的微生物专家，象陈民均教授、倪语星教授，就注意到了国内外的这种差异，呼吁要建立中国自己的微生物标准和药敏折点。对我们国内企业来讲，这是一个很好的市场机会。
我们复星在开发微生物鉴定药敏系统时，引进的是美国BIOLOG公司的专有技术。作为全球数一数二的微生物专业公司，BIOLOG的鉴定技术在最近10年，一直被逢为表型检测的金标准。
但是，我们在产品开发之初，就考虑到国内和国外，在细菌种类和特性上的差异，并没有照搬美国人的技术，而是花了几年时间，搜集上万株临床细菌，在BIOLOG公司的帮助下，对数据库进行优化和调整。所以，我们的产品虽然比进口产品晚进入市场好几年，还是能够有自己独特的优势，能够直接和进口产品竞争。
除了产品开发，作为厂家，还应该不遗余力地推广规范操作，建立技术壁垒。而不是一味地迎合客户不规范的操作习惯。
我们发现，大部分用户在微生物当中遇到的问题，不是如何操作仪器，而是没有形成好的操作习惯，得不到符合要求的标本。
在教育和培训方面，外资几家大公司做的非常好，值得我们学习和借鉴。但是我们觉得，推广和教育工作还应该更加深入和细致，而不是仅仅停留在微生物室和专家层面。
我们曾经对一家医院呼吸科的护士进行标本采集的培训，这家医院以诊治呼吸道疾病见长。但是，呼吸科标本送检的阳性率不到10%，我们通过对标本采集过程的跟踪，发现问题是出在采样的护士身上，不知道如何采集到符合要求的痰标本。送到微生物室的标本，超过70%都是不合格的，根本无法进行检测。
所以，我们厂家的教育和培训，要跨出检验科和微生物室，充分利用医院层面，对临床医生、护士、实验室操作人员甚至是病人，进行推广和教育。
复星佰珞从2010年开始，对新装机的用户，都会提供免费临床推广的服务。我们发现，医院和临床对这样的培训非常欢迎。很多时候是大院长亲自坐镇，临床科室主任全体参加。当然，这样的医院培训之后的效果通常也最好，临床重视，送检率提高，标本量明显增加，微生物实验室的操作水平得到锻炼，收入也迅速提高。
未来十年，可能是微生物发展的黄金十年。微生物行业的发展，就象细菌的生长一样，需要一个过程，还可能遭遇很多困难，就象细菌，也不是每次都能顺利地培养出来。但是，只要坚持、有耐心，方法得当，最终一定会得到好的结果。
对企业而言，微生物是最有可能站在全球致高点的诊断产品，希望我们的企业，都能够从中找到适合自己的发展机会，专业、专注，实现企业和行业的共同发展！
第五篇：临床微生物检验标本的采集
临床微生物检验标本的采集及微生物检验报告的解读 一 临床微生物检验标本的采集
1.临床微生物检验的思路和原则
确保标本可靠（（分析前质量）保证检验质量
全面了解机体的正常菌群 快速准确提供信息
微生物学的定性、定量和定位分析 结合病情，与临床联系
2.微生物结果的影响因素
2.1针对性的检验申请、病人准备、标本的采集、标本的运输 标本的保存和处理（46~68.2%）； 标本检验（415%）； 结果审核和批准、危急值报告（18.547%）2.2正确采集、转运与保存微生物标本直接关系到致病微生物培养的正确性与阳性率，是从临床微生物检验获得正确结果的最关键一步。
2.3Garbage-In-Garbage-Out 不合格的标本-不正确的检验结果-错误的诊断-错误的治疗-卫生资源的浪费、病人费用增加、耐药菌株增加
2.4成功治疗感染症的重要前提: 正确的微生物学检验始自标本采取。否则工作人员水平再高也不可能得到正确的结果，临床医师、护士及检验人员都必须通晓其要领
3.标本采集前临床医师及护士要考虑的问题
3.1是否感染？细菌感染？真菌感染还是病毒、寄生虫感染？ 3.2何时采集样本？
3.3采集什么样的标本？怎样采集？样本是否足量？ 3.4采用哪种无菌容器或运送培养基采集标本？
3.5如何完善的填写标本申请单？针对某些特殊致病菌的排查要求应怎样写？（申请单信息越详尽，越有助于实验室出具符合临床情况的结果报告，如疑似诊断、准确的取材部位、甚至取样时用抗菌药物。）3.6关键需要特别重视的问题：标本采集是否规范 ；标本保存、运送是否规范 ？；无菌体液培养重视与否？
4.微生物检查的样本收集原则：
4.1收集样本时应使用严格的无菌技术，将污染情形降至最低。
4.2收集真正感染的病灶处之样本，且不受到邻近区域微生物的污染。
4.3采用无菌卫材收集样本，并置于已贴有病患标签之坚固且密和性佳的容器中，将容器置于适当的储存环境待送。
4.4在病患感染的急性期、使用抗生素或伤口局部治疗前收集标本，成人应需氧瓶、厌氧瓶同时培养，以提高阳性检出率和避免漏检。
4.5样本不可添加防腐剂，以免干扰病原菌分离。
4.6于送检申请单上提供足够的有关临床资料(如姓名、性别、年龄、病例号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等)，以便实验室能够合理选择培养环境和培养基。4.7即刻将样本送检，不可拖延，标本采集后在室温下超过2h未送达实验室，可视为不合格标本。不能使用冷藏的样本检验。
4.8实验室只能接受和处理合格标本；对不合格标本退回必须说明原因，并应及时与临床联系。4.9厌氧菌样本采取必须隔绝空气，混入空气的样本影响检验结果，不能使用。
5.血液培养标本采集和处理：
5.１采血指征：
对入院危重感染患者应在未进行抗菌药物治疗之前，及时做血培养。一般患者出现以下一种体征时可作为行血培养的重要指征：
①发热（≥38℃）或低温（≥36℃）；②寒战；③白细胞增多（计数＞10.0×109/L，特别有“核左移”时）；④皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭，血压降低；⑤C反应蛋白升高及呼吸加快；⑥血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。
新生儿可疑菌血症，应同时做尿液和脑脊液培养。5．2皮肤消毒程序：严格执行以下三步法。5.2.1 70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。
5.2.2 1%~2%碘酊作用30s或10%碘伏60s，从穿刺点向外划拳消毒，至消毒区域直径达3cm以上。5.2.3 70%酒精脱碘：对碘过敏的患者，用70%酒精消毒60s，待酒精挥发干燥后采血。5.3培养瓶消毒程序：①70%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s；②用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞子表面残余酒精。5.4静脉穿刺和培养瓶接种程序：
5.4.1在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点； 5.4.2用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头（如果行第二次穿刺，应换针头）直接注入血培养瓶，轻轻颠倒混匀防止血液凝固。立即送检，切勿冷藏。
5.5采血量：
成人采血量是8~10ml，儿童1~5ml。血液和肉汤之比为1:5~1:10。5.6血培养次数和采血时间：
◆根据研究，仅抽血培养1次分离率约占80%，培养2次的分离率约占90%，而培养3次的分离率约占99%。仅抽血培养1次，除了分离率低（其原因是菌血症常会暂时消失）外，且将很难评估病原菌是污染还是与感染有关。如果抽血培养2次或3次，则能够得到肯定。
◆采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行，24h内应采集2~3次做血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养）。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3d，每天采集2份。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h采集血液，或于寒战或发热后1h进行。
5.7特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议：
◆可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎，应在不同部位采集2~3份血标本。
◆不明原因发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热，先采集2~3份标本，24~36h后估计体温升高之前（通常在下午）再采集2份以上。
◆可疑细菌性心内膜炎，在1~2h内采集3份血标本，如果24h后阴性，再采集3份以上的血标本。5.8标本运送：
采血后应该立即送检，如不能立即送检，需室温保存或置35℃~37℃孵箱中，切勿冷藏。
6尿液标本采集和处理：
6．1采样原则：标本需在应用抗菌药物之前或停用抗菌药物5天之后留取尿液标本；尿液在膀胱内应停留6～8 小时以上，使细菌有足够的时间繁殖。一般以清晨第一次的中段尿为宜。6.2采集方法：
6.2.1中段尿采集法：：成年男性和女性分别用肥皂水或1：1000 高锰酸钾水溶液清洗尿道口和外阴部，再用无菌生理盐水冲洗尿道口，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿5～10ml 盛于带盖的无菌容器内送检。
6.2.2导尿法：用导尿管导取10～15ml尿液，置灭菌容器中送检；长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿；留置导尿时，用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口，用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检(不可采集尿液收集袋中的尿液送检)；
6.3送检：尿液收集后，盖上容器盖子立即送检，若无法及时送检，置于4℃冰箱中保存不可超过2小时。6.4注意事项：
◆收集尿液过程中，请勿将手伸入容器内，且尿液勿满出容器外，以免污染。而以无菌导管技术
收集尿液（特别是女性患者）的方法，已被认为不适合，因易引发尿道感染。◆如果同份标本中检出3种以上不同种微生物，可能由于采样本时受到污染所致。
7.痰及下呼吸道标本采集和处理：
7.1采集要点：所采集的痰标本，必须真正能代表肺部之分泌物者，通常清晨时痰液最多，且可能含较多病原菌。7.2采集步骤如下：
7.2.1以清水或牙刷清洁口腔及牙齿，不可用牙膏。
7.2.2指导病患从呼吸道深部咳出痰（不可含有唾液），装于无菌容器内。咳痰较困难者可用雾化蒸气吸入以利痰液咳出。幼儿可用手指轻扣胸骨柄上方以诱发咳痰。7.2.3气管下采集法：通常用于在给患者行纤维支气管镜时顺便抽取。7.2.4气管穿刺法：仅用于昏迷患者，由临床医师进行。
7.2.5痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本，痰量应为3~5ml。7.2.6无法及时送检的痰标本应置于4℃冰箱中保存待送。
7.2.7呼吸道标本采集方法：鼻咽拭子法，先用清水漱口，对光坐，头向上仰，口张大，用压舌板轻压舌根，用棉拭子在病人咽后壁，悬雍垂后侧涂抹数次．立即放入无菌试管中。
7.3痰TB菌涂片采集：痰涂片检查TB菌的初诊病人应送3份痰标本（夜间痰、清晨痰和即时痰）；如无夜间痰在留清晨痰后2~3小时再留一份痰标本，或送两份即时痰；治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰（清晨痰和夜间痰）。
7.4痰标本采集说明：即时痰为病人就诊时咳出的痰液；清晨痰为清晨深咳出的痰液；夜间痰为就诊前一天晚睡前咳出的痰液。痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本，痰量为3~5毫升。
8.泌尿生殖道样本：
8.1阴道、子宫及前列腺等分泌物：由医生采集，收集于无菌试管内送检。淋病奈瑟菌检查时，不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈3cm深取样送检，要避免阴道分泌物污染拭子。
8.2未成年人：若怀疑年幼女童有淋病性阴道炎时，则标本由阴道外围部位取得。
8.3男性：男性怀疑有急性淋病时，则由尿道取分泌物样本作抹片及培养，若怀疑有慢性淋病，样本可由医生采自前列腺或精囊。
8.4注意：从冰箱取出之携送培养基，须先放至室温约半小时，使其恢复室温，因淋病双球菌对温度相当敏感。
9.脑脊液样本：
9.1采集时间：怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液，最好是在应用抗生素之前采集脑脊液。9.2采集方法：腰穿法收取脑脊液3~5ml，盛于无菌试管中，应立即送检，同时注意保温，不可置于冰箱保存。
10.粪便与直肠拭子样本采集和处理：
10．1采集时间：
10.1.1腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便； 10．1.2伤寒患者于发病2w以后采集粪便； 10．1.3怀疑霍乱时立即采集粪便送检。10．2采集方法：
10．2.1自然排便法：取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分，2～3g或1～2 m1，盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检；若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(pH8.6)。10．2.2直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法，将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约4～5cm(幼儿2～3cm)，轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。
11眼、耳、鼻、咽拭子培养标本：
11.1采集眼分泌物：先用无菌生理盐水冲洗眼部,然后用棉拭于拭干，再用无菌棉拭于采集分泌物。
11．2采集咽分泌物：先用清水撤口．用压舌板将舌向下向外压，将咽拭子在咽后壁或悬雍垂后侧涂抹数次，切勿接触口腔和舌粘膜。
11．3采集耳、鼻或鼻咽分泌物：直接用拭子涂抹病灶部位,切勿接触周围粘膜或皮肤。11．4送检：标本采集过程中应注意避免粘膜上的正常菌群污染,标本采集后标明左、右眼（耳）或鼻咽部，连同拭子一起置无菌管内送检。
12.穿刺液样本：
12．1穿刺液培养标本：包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液等。
12．2采集时间：一般在用抗生素等抗菌药物治疗之前，或在停止使用抗菌药物之后2～3d采集标本。
12．3采集方法：
12.3１无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本；
12．3.2标本采集量应>1ml(结核分支杆菌培养时应为l～5m1)； 12.3.3标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中立即送检；
12.3.4可在盛器中先加入灭菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固(0.5ml 肝素可抗凝5ml标本)。穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液。
13.脓汁及创伤感染分泌物标本的采集：
13．1采集要点：对采集标本部位应首先清除污垢，再以碘酒或酒精消毒，防止皮肤表面污染菌混入影响检验结果，盛放标本器皿应无菌。
13．2封闭性脓肿患者病灶局部的皮肤或粘膜表面：先用碘酒消毒，再用75%酒精脱碘，以无菌干燥注射器穿刺抽取，将采集的脓汁注入无菌试管中。
13．3开放性脓肿和脓汁分泌物：在患部附近的皮肤或粘膜用无菌纱布或棉布擦拭，供培养用的标本尽可能从深部流出，如为瘘管可在无菌操作下取组织碎片。
13．4大面积烧伤的创面分泌物：由于创面的部位不同，细菌种类也不同，故应用无菌棉拭子采取多创面的脓汁或分泌物，置于无菌试管送检。注意事项：烧伤12 小时内的创面及分泌物中细菌检出率较低。
14真菌感染培养标本采集：
14．1浅部真菌感染标本采集：
14.1.1皮肤：常规消毒皮肤，从皮肤癣菌皮损边缘刮取鳞屑，置无菌平皿内送检，皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织；
14.1.2指(趾)甲：消毒指(趾)指甲并去掉其表面部分，取可疑病变部分，用刀片修成小薄片5～6 片置无菌容器内送检；
14.1.3毛发：采集根部断折处，至少5～6 根送检。14.2深部真菌感染标本采集：
14.2.1血液：无菌采血8～10 m1，注入未用过抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中，立刻送检，如不能立刻送检时血培养瓶应放室温，但不可超过8~9h；
14.2.2脑脊液：采样量不少于3～5m1,分别注入两支无菌试管中送检(一管做真菌培养和墨汁染色一管测隐球菌抗原和其他培养)；
14．2.4呼吸道及泌尿生殖道：其深部真菌感染标本采集同一般菌培养标本。
15厌氧菌感染培养标本的采集：
15.1标本采集：
15.1.1标本不能被正常菌群污染,采集时尽量避免接触空气,立即送检,严格遵守无菌操作;15.1.2血液及其他体液(胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液等)注入厌氧血培养,立即送检;15.1.3深部脓肿,在病灶部位开放前取材,可用针管抽取,针头用无菌胶塞密封,也可用血气采集针抽取,立即送检;
15.1.4抽出液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。15.2标本运送：
152.1注意事项：标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半小时内)送实验室;15.2.2运送方法:a 注射器运送(标本抽取后尽快排除空气)或接种道专门的运送培养基中直接运送;b 含运送培养基的无氧小瓶运送;c 厌氧罐运送(组织块);d 大量液体标本运送时要装满标本瓶兵立即驱氧,加盖运送;e 一般不采用棉拭子法
二 微生物检验报告的解读
1细菌室药敏试验中常选用的抗生素种类
氨基糖甙类：阿米卡星、庆大霉素 1代头孢：头孢唑啉 2代头孢：头孢呋辛钠
3代头孢：头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟（马斯平）单环 β-内酰胺类：氨曲南
广谱青霉素类：氨苄西林、青霉素G、苯唑西林 抗假单胞菌广谱青霉素：哌拉西林
复方β-内酰胺类：阿莫西林-克拉维酸（奥格门丁）氨苄西林-舒巴坦（优力新）哌拉西林-他唑巴坦（特治星）头孢哌酮-舒巴坦（舒普深）碳青霉烯类：亚胺培南、美罗培南 多肽类：多粘菌素E、替考拉宁 万古霉素 磺胺类：复方新诺明（甲氧苄唑-磺胺甲唑）林可霉素类：克林霉素 大环内脂类：红霉素 氯霉素：氯霉素
三代喹诺酮：环丙沙星、氧氟沙星 左旋氧氟沙星、莫西沙星 四环素类：四环素 利福平
2.耐甲氧西林葡萄球菌（MRS），CLS I规定，葡萄球菌如对苯唑西林（或甲氧西林）耐药：对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类和含酶抑制剂的复方制剂均应报告耐药，而不考虑体外药敏结果。
3.耐高浓度庆大霉素肠球菌
CLS I规定，肠球菌引起的全身性严重感染 常联合应用 β-内酰胺类和氨基糖肽类抗生素，如果肠球菌对高浓度庆大霉素耐药，则联合用药无效
三 与临床沟通中常见的问题
• 为什么微生物的报告时间这么慢？ • 为什么培养回报有细菌而病人情况良 ？ • 为什么送检的是脓痰却没有阳性结果 ？ • 培养阳性的细菌都需要用抗菌药物治疗吗？ • 选择药敏报告敏感的药物，为什么临床治病无效？
1.为什么微生物的报告时间这么慢
微生物的工作流程
细菌培养：接种标本，培养24~48小时
分离标本： 24~48 小时（需要时）
药敏： 18~24 小时 发结果： 阴性48小时
阳性？
真菌培养:因为生长缓慢，时间更长
2.涂片镜检结果与培养结果不吻合？
涂片镜检是报告所有检见的细菌，而培养的目的是检出致病菌。一些苛氧菌需在特殊的环境或培养基上才能生长。
3.尿培养结果报告“三种以上细菌混合生长”代表什么？
泌尿系统感染一般为一种细菌，有时可能有二种，但培养出三种或以上细菌说明标本污染，需要重新留取标本再做培养。
4.为什么培养回报有细菌而病人情况良好？
抗菌药物使用 或定植菌或污染菌
5.为什么送检的是脓痰却没有阳性结果？
5.1 是否送检前使用抗生素
5.2送检是否及时，痰涂片可能帮助判断 5.3 并不是感染性疾病，比如慢怚肺、老慢支 等 5.4实验室操作不规范
6.为什么化脓性感染病灶中取脓汁培养阳性低
脓液是由坏死的组织和吞噬了细菌而死亡的白细胞组成，都是无任何营养的物质，而细菌一般都需要在高营养的环境中才能生长，另白细胞释放的溶菌酶对细菌有杀灭作用，因此，在脓液活细菌较少。将脓液挤干净后在肉芽生长处取标本送检，如果化脓性病灶尚未破溃，要用注射器穿刺到一定深度（肉芽附近处）取标本送检。
7.明显稀便，培养结果为何正常 ？
大便普通培养，通常只能鉴定志贺菌、沙门菌感染，致病性大肠杆菌。怀疑霍乱时，需开霍乱弧菌培养。可能病毒感染(轮状病毒 轮状病毒)8培养阳性的细菌都需要用抗菌药物治疗吗？
8.1.培养阳性感染：可能为污染菌（血培养），可能为定植菌（痰），），任何结果必须结合临床情况进行评价－很重要
8.2.感染部位的清创，引流，换药比使用抗菌药物更重要
8.3.改善患者全身情况，器官功能支持，纠正酸碱电解质紊乱，低蛋白血症，高血糖等
9选择药敏报告敏感的药物为什么治疗无效？
9.1体外药敏试验只能预测体内治疗效果，并不完全等同 9.2.可能不是真正的致病菌（污染或定植）9.3.细菌本身因素（如诱导耐药，生物被膜）
CLSI中提示：部分细菌3天内即可发展为耐药，临床治病34天后，应重新分离细菌做药敏试验
9.5感染部位与药代动力学因素 给药剂量与用药方式 ：时间依赖性、浓度依赖性、抗生素后效应、特殊人群等因素。
9.6.感染原发灶 药敏试验仅报告细菌对药物的敏感性，但不同部位的感染，因根据药物浓度分布选择抗菌药物，药物剂型和生物利用度（纯品，商品）
10.是否能将所有的药都做药敏试验
10.1没有必要：通过耐药机制和标志性药物可以预测其他抗菌药物的敏感性，抗生素的等效性：是指用一种相关抗生素的试验结果预测同类抗生素体内抗菌活性。此特性允许检测少数几种抗生素而不影响临床对其他抗生素的广泛选择，试验的药物代表一类 药，而不是一种药。
如对肠杆菌头孢噻吩与其他一代头孢具有等效性，可用头孢噻吩结果预测其他一代头孢。10.2.没有可能：不是所用药物都可以做药敏试验（需要药物在体外稳定，需要有操作标 准和解释标准）有些细菌对某类抗生素天然耐药，则不需要做药敏试验 比如：嗜麦芽窄食单胞菌对碳青霉烯类天然耐药，治疗首选复方新诺明。
11.鉴定结果明明写着四联球菌、革兰氏阳性杆菌，为何没有药敏结果？
四联球菌为微球菌，一般不引起人体致病，为非致病菌，故考虑污染可能。药敏结果参照CLSI标准，目前革兰氏阳性菌没有参照标准，故暂不能做药敏试验，若需治疗可参照阳性球菌用药。
12.药敏试验报告中MIC越小的抗菌药物效果越好？
感染菌对同一种药物的MIC越小，效果越好，不同种抗菌药物之间 MIC无可比性，目前很多仪器报告的是检测折点，而不是真正的MIC 四 对临床的要求
临床医生应为实验室提供有用的临床信息，以便实验室有针对性地对可能的病原体进行鉴定。临床医生对药敏测定方法和微生物学知识有一定的了解，以更好地理解药敏试验报告中验报告中 S、I、R临床意义，以及体内、体外药敏不一致的现象。增强特殊标本的微生物送检的意识，提高诊断的阳性率。
五 呼 吁
1.请尽量在早上送检标本 2.请正确留取痰标本
3.请正确填写标本部位及名称
4.血培养－感染性疾病的病原学诊断有效手段 5.个别特殊病历多沟通，6.反馈抗生素疗效（药敏结果与临床疗效不符时）7.科研合作
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