脑脊液标本的细菌学检验操作规程

第一篇：脑脊液标本的细菌学检验操作规程

单位及实验室名称 项 目

汉源县人民医院检验科 脑脊液标本的细菌学检验操作 编号：LAB/SOP/HY/微-007 日期：2010年5月3日

版本：第一版，第0次修订

第1页，共3页

一、【标本采集】

脑脊液的采集由临床医师以无菌操作腰穿采取脑脊液3-5ml，置于无菌试管内立即送检。如做厌氧菌培养，则需将注射器针头封口，立即送检。

二、【检验方法】

1、一般细菌的培养

（1）一般细菌培养主要适用于脑脊液内的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和大肠杆菌等的分离培养。

（2）用无菌接种环挑取混浊脑脊液或经离心的沉渣，非别接种于血平板和普通肉汤培养基。经35℃培养，观察有无细菌生长。若有细菌生长，挑取可疑菌落，并涂片染色镜检。根据菌落特征、细菌形态、染色特点得出初步印象，再进一步鉴定，然后做出报告。若血平板无细菌生长，肉汤有细菌生长，则移种于血平板分离培养，按上述方法鉴定。如血平板、肉汤均无细菌生长，再延长培养数天，仍无细菌生长时，即可报告：“经培养×天无细菌生长。” 2.脑膜炎奈瑟菌的培养

以无菌方法取脑脊液，经3000r/min，离心30min，取沉淀物立即接种于事先预温的巧克力或血平板上，置于5%-10%CO2环境中，经35℃ 培养18-24小时后，观察结果。若发现平板上有光滑、湿润、透明、边缘整齐、粘性的中等大小的菌落，经革兰染色为阴性双球菌者，可做出初步报告：“有脑膜炎奈瑟菌生长”。经纯培养后做糖发酵、氧化酶试验、自凝试验、血清玻片凝集试验、乳胶凝集以做出最后的鉴定。3.新型隐球菌的培养

以无菌方法采取脑脊液标本，经离心沉淀后，取其沉淀物接种于沙保弱氏斜面或血平板培养基上，分别置于37℃及25℃培养。数日后可见有白色或淡褐色酵母样的菌落（如培养较久、菌落则变为湿润、粘液状），如果此时菌落用墨汁染色法染色镜检，可见有出牙的细胞及短芽管（培养时间过长则芽管可消失，荚膜形成）。杆菌菌落及染色镜检特征，可做出初步报告：“真菌培养有新型隐球菌生长。”必要时再做生化反应及动物试验等进一步鉴定。

三、【检验程序】 脑脊液

↓ ↓ ↓ 离心涂片染色 分离培养 结核杆菌检查 镜检 ———————— ——————

↓ ↓ ↓ ↓

厌氧环境培养 普通及

5%-10%CO2培养

罗氏培养基培养 取沉淀物

涂片抗酸染色

↓ ↓35℃18-24h ↓35℃3-4W

————————————————

↓

菌落观察

↓ ↓ ↓ 生化反应 → 血清学检查 ← 自动化鉴定

↓

药敏试验

↓

报告结果

作者：肖德慧

时间：2010-5-3 3

第二篇：实验一 粪便标本的细菌学检验

课程名称：微生物学检验技术 授课专业：医学检验 学时：4学时

实验一

粪便标本的细菌学检验

一、实验目的

⒈熟悉粪便标本的采集方法与注意事项。⒉掌握粪便标本的细菌学鉴定方法。

二、试验器材

粪便

培养基

接种环

酒精灯 显微镜

抗血清等

三、实验内容

㈠标本的采集：

多见于急性腹泻及用药前采用自然排便法采集，也可用直肠拭子法采集。⒈自然排便法：取新鲜的粪便2-3克放无菌容器内立即送检，挑取脓血粘液便，液体粪便取絮状物。

⒉直肠拭子法：排便困难患者或幼儿，将拭子前端用无菌生理盐水或甘油湿润，然后插入肛门约4-5厘米（幼儿2-3厘米），轻轻在直肠内旋转，取其粘液放于无菌试管中送检。

⒊注意事项： ⑴在用药前采集

⑵注意无菌操作，防止杂菌污染，用无菌的广口瓶或洁净的容器装 ⑶及时送检和接种

⑷标本用完后及时进行消毒处理，防止实验室污染。㈡检验程序

粪便或肛拭子

↓

分离培养

SS MAC

↓35℃

24小时

观察细菌生长情况

Gs染色镜检

纯培养（KIA）药敏试验

↓35℃24小时

需氧培养

厌氧培养

KIA.MIU 初步生化反应查编码

氧化酶

↓

四、实验安排

制作培养基

第一台SS平板16个，第二台MAC

16个，第三台双糖铁16支，五、实验准备

无菌中号试管 32无菌小号试管 16无菌中号平板 32SS 32*20MAC

KIA

枸橼酸盐

蛋白胨水 16葡胨水

尿素培养基 16半固体 1620%葡萄糖

0.4%酚红 150%尿素 1血清学鉴定

↓ 报告结果

葡萄糖蛋白胨水 32支

尿素16支

蛋白胨水16支

支／班 支*5／班 ／班 毫升／班 32*20毫升／班 16支*3毫升／班 16支*3毫升／班 支*2毫升／班 16支*2*2毫升／班 支*2毫升／班 支*2毫升／班 1瓶/教室 瓶/教室 瓶/教室

枸橼酸盐16支半固体16支

无菌5ml吸管 2筒 无菌1ml吸管 2筒

第三篇：血液及骨髓标本的细菌学检验操作规程SOP微-001

单位及实验室名称 项 目

汉源县人民医院检验科 血液及骨髓标本的细菌学检验操作 编号：LAB/SOP/HY/微-001 日期：2010年5月3日

版本：第一版，第0次修订

第1页，共3页

一、【标本采集】

1.血液采集：（1）以无菌方法采血，采出的血液标本立即注入适当的液体增菌培养基内，迅速轻摇，使之充分混匀，以防止凝固。（2）采血量：增菌液与血液标本比例为5-10：1，成人一次采血8-10ml，婴幼儿1-5ml。

2.骨髓标本：（1）采集部位及时间：一般用骨髓穿刺针从髂骨采集骨髓标本，最好在用药前，发热患者要在发热初期或高热期采集标本。（2）标本采集要严格无菌操作，增菌与运送同血液标本。

二、【检验方法】

1.培养：标本接种于肉汤增菌液后，立即置35℃孵箱内孵育，每天观察培养液内有无混浊、沉淀菌膜、色素颜色变化等。肉汤出现变化 怀疑菌种 混浊 革兰氏阴性杆菌 均匀混浊，有绿色荧光 绿脓杆菌 上面澄清，下面沉淀 链球菌 自下而上溶血现象 溶血性链球菌 肉栋样凝固 葡萄球菌

表面有灰白菌膜 枯草杆菌或类白喉杆菌 2.检验：对有细菌生长迹象的血培养瓶应及时做如下检验

（1）以无菌操作挑取培养物涂片进行革兰氏染色镜检，一旦有细菌生长可向临床作初步报告。

（2）同时转种于血平板或其它培养基进行分离培养。

（3）根据菌落特征及菌体染色镜检形态，进行常规生化反应，同时做药敏试验。

三、【检验程序】

血液、骨髓

↓

增菌培养（需氧及厌氧）

↓

———————————————————————————— ↓ ↓ ↓ 涂片染色镜检 分离培养 直接药敏试验 ∣ ↓

（35℃ 4-6小时）初步报告

↓

↓ ↓ 需氧培养及CO2环境培养 厌氧培养（血平板

等分离培养基）

（血琼脂平板和巧克力平板）∣——————————菌落观察—————————∣

↓

↓ ↓ 涂片、革兰氏染色镜检

纯培养

↓

———————————————————

↓ ↓

血清学检查→确定报告←生化反应试验、药敏试验

四、【结果报告】

1.根据增菌液培养结果直接直接涂片、染色、镜检确属致病菌时可向临床做初步报告，最后根据细菌鉴定结果及药敏试验及时向临床报告。

2.培养7天无菌生长时，可报告为“经7天培养无细菌生长”。对于亚急性心内膜炎患者标本应培养1个月，才能做出报告。

3.菌血症、败血症的诊断标准：（1）两次培养均出现同一细菌（可排除污染）；（2）发病2周后血中抗体滴度增高。

作者：肖德慧

时间：2010-5-3 3

第四篇：临床检验标本采集、运输、保存操作规程

临床检验标本采集、运输、保存操作规程

目录

第一章 体液标本的采集、运输、保存操作规程

一、尿液标本采集、运输、保存

二、脑脊液标本采集、运输、保存

三、浆膜腔积液标本采集、运输、保存

四、阴道分泌物标本采集、运输

五、分泌物革兰阴性双球菌检测标本采集、运输

六、精液标本采集、运输、保存

七、前列腺液标本采集、运输、保存

八、粪便采集、运输、保存

第二章

血液一般检验的标本采集、运输、保存操作规程

一、未梢血标本采集

二、静脉血采集、运输、保存

第三章

生化检验标本采集、运输、保存操作规程 第四章

免疫学检验标本采集、运输、保存操作规程

第五章

化学发光免疫分析项目标本采集、运输、保存操作规程 第六章

血气分析标本采集、运输、保存操作规程

第七章

凝血功能四项检测标本采集、运输、保存操作规程 第八章

微量元素检测标本采集、运输、保存操作规程 第九章

临床微生物学检验标本采集、运输、保存操作规程

第一节 尿液标本的采集、运输和保存

第二节 粪便标本的采集、运输和保存

第三节 上呼吸道标本的采集、运输和保存

第四节 痰标本的采集、运输和保存

第五节 化脓和创伤标本的采集、运输和保存

第六节 脑脊液标本的采集、运输和保存

第七节 胆汁标本的采集、运输和保存

第八节 胸水标本的采集、运输和保存

第九节 腹水标本的采集、运输和保存

第十节 生殖道标本的采集、运输和保存

第十一节 血液及骨髓标本的采集、运输和保存 第十章

液基薄层细胞学检查标本采集、运输、保存操作规程

前

言

在临床工作中，检验标本的分析结果是临床医生诊断疾病、制订治疗方案的重要依据，而标本采集及送检工作的合格与否直接影响检验结果的真实性，进而影响疾病的诊治工作。为了进一步提高检验结果的准确性和可靠性，除了要求检验科提高检验质量水平外，还要求临床医护人员正确采集标本。为确保标本的正确采集、运输和保存，检验科特编写了临床检验标本采集、运输、保存操作规程，要求医护人员严格按操作规程采集、运输和保存标本。

第一章 体液标本的采集、运输、保存操作规程

一、尿液标本采集、运输、保存

（一）检查项目

1．尿液干化学测定：尿液比重、pH 值、尿胆原、胆红素、潜血、酮体、蛋白质、白细胞、亚硝酸盐、葡萄糖、抗坏血酸。

2．尿液有形成份检测：包括红细胞及白细胞形态等。3．24小时尿总蛋白、尿肌酐、尿尿酸等。

4．其它：尿HCG、微量白蛋白、转铁蛋白、免疫球蛋白IgG、α1-微球蛋白、尿淀粉酶、尿蛋白酶原-

2、尿液红细胞显微镜形态分析。

（二）标本采集 【容器及采样量】

门诊病人由检验科提供专用塑料尿杯，采样量20-30ml。

住院病人使用清洁容器取尿，再将尿液倒入专用的试管内，量约5-10ml。

24小时尿液收集于清洁容器中，如小的带盖的塑料桶。【标本种类及适用人群或项目】（1）晨尿

即清晨起床后的第一次尿标本，为较浓缩和酸化的标本，血细胞、上皮细胞及管型等有形成分相对集中且保存得较好。

门诊患者可采集清晨第二次尿标本。

适用：住院病人、可疑或已知泌尿系统疾病的动态观察及早期妊娠试验等。（2）随机尿（随意一次尿）

即留取任何时间的尿液。本法留取方便，但易受饮食、运动、用药等影响，可使低浓度或病理临界浓度的物质和有形成分漏检，也可能出现饮食性糖尿或药物如维生素C等的干扰。

适用：门诊和急诊病人。（3）24h尿

于第当天8∶00 排空膀胱弃去此次尿液，然后收集至次日8∶00 全部尿液。在第一次尿液排到收集容器后，将10ml二甲苯防腐剂倒入容器中并摇匀。每升尿中加入10ml二甲苯。以后每次排尿到收集容器后均要摇匀尿液，并盖好盖，以防尿液蒸发。

尿液收集完毕，混匀，用量筒准确测量尿液毫升数，并记录在检验申请单上。用注射器针穿过防腐剂层抽取尿液10毫升，注入干净试管送检。

适用：24小时尿总蛋白、尿肌酐、尿尿酸及其它尿液化学成份定量检测。（4）其他

包括留取中段尿（女病人易受阴道分泌物污染，应采集中段尿）、导尿、耻骨上膀胱穿刺尿等。【注意事项】

（1）避免阴道分泌物、月经血、粪便等污染，女性病人应采集中段尿，尽量避免经期做尿常规检查；

（2）避免干扰化学物质（如表面活性剂、消毒剂）混入；

（3）住院病人送检的标本要标上病人姓名，门诊病人的标本和检验申请单放在指定的标本收集盘上。

（4）尿标本采集后应避免强光照射，以免尿胆原等物质因光照分解或氧化而减少。

（三）标本运输及保存

标本采集后应尽快送检，1时内须送达检验科，2小时内完成检测。采集24小时尿液可不用防腐剂防腐，放4℃冰箱保存即可。

（四）拒收标准

细菌污染、样本量不足的标本拒收。

二、脑脊液标本采集、运输、保存

（一）检查项目

脑脊液常规、细菌培养、生化检查等。

（二）标本采集

脑脊液标本由医生采集。脑脊液采集一般用腰椎穿刺术（腰穿）获得，必要时用小脑延髓池穿刺术（池穿）或侧脑室穿刺术。

脑脊液应采集三管。第一管用于细菌培养（无菌操作），第二管用于常规检查，第三管用于生化检查。每管1-2毫升。蛋白浓度高时可用EDTA盐抗凝。样品管上应标明病人姓名，在检验申请单上注明采样时间。

（三）标本的运输及保存

脑脊液标本采集后应立即送检。用于微生物检验的标本应室温保存，不可置冰箱保存。

三、浆膜腔积液标本采集、运输、保存

（一）检查项目

浆膜腔积液常规、细胞学、细菌培养等检查。

（二）标本采集

由医生采集。经行胸腔穿刺术、腹腔穿刺术，心包腔及关节穿刺术采集标本。应采集三管，第一管用于细菌培养（无菌操作），第二管用于常规检查，第三管用于生化检查。每管2-20毫升。样品管上应标明病人姓名，在检验申请单上注明采样时间。

（三）标本的运送及保存

标本采集后立即送检。不能及时检测的标本放置4℃冰箱保存。用于微生物检验的标本应室温保存，不可置冰箱保存。

四、阴道分泌物标本采集、运输

（一）检查项目

阴道分泌物清洁度、真菌、滴虫、细菌性阴道炎检查等。

（二）标本采集

由临床医生采样。用无菌拭子从阴道后穹隆处取分泌物。所用窥阴器不可用润滑剂，只能用少量无菌等渗盐水润湿。采样后马上将样本放入洁净试管送检。

（三）标本的运输及保存

取样后应立刻送检。避免因放置时间太久影响滴虫活动力或虫体破坏，使检查结果受到影响。

五、分泌物革兰阴性双球菌检测标本采集、运输

（一）检查项目

分泌物找革兰阴性双球菌

（二）标本采集

1、尿道分泌物

①男性：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，采取从尿道口溢出的脓性分泌物，如无脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按摩，促使分泌物溢出，或用无菌男性拭子插入尿道内2～4厘米旋转取出分泌物。拭子置于干净试管内送检。

②女性：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，然后从阴道内诊压迫尿道，或从尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出，用无菌女性拭子采集分泌物。无肉眼

可见脓液时，可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内，旋转拭子采集标本。拭子置于干净试管内送检。

2、阴道分泌物：用窥器扩张阴道，用无菌女性拭子采取阴道口内4厘米内侧壁或后穹隆处分泌物送检。拭子置于干净试管内送检。

3、宫颈分泌物：用窥器扩张阴道，先用无菌棉球擦去宫颈口分泌物，再用女性拭子插入宫颈管2厘米采取分泌物，转动并停留10～20秒钟，让拭子充分吸附分泌物，拭子置于干净试管内送检。

4、前列腺按摩液：用前列腺按摩法采集前列腺液。前列腺液滴于玻片上或试管内，立即送检。

5、精液：受检者应5天以上未排精。清洗尿道口，采用手淫法体外排精，射精于干净容器内送检。

6、溃疡分泌物：先用生理盐水清洗患处，用无菌棉拭子取其边缘或其基底部的分泌物，置干净试管内送检。

（三）标本的运输

采样后应及时送检，避免标本干结。

六、精液标本采集、运输、保存

（一）检查项目

精液常规检查，包括精液量、液化时间、酸碱度、精子总数、精子活动力、精子存活率、精子畸形率。

（二）标本采集 【采集前注意事项】

采集精液标本前必须禁欲。一般情况下，25 岁以下禁欲 3 天，25～35 岁禁欲 5 天，35～45 岁禁欲 7 天（禁欲亦包括无遗精手淫）。【容器及采样量】

收集精液标本的容器要求是清洁、干燥。可用一次性带盖塑料杯留取精液。收集排出的全部精液。【标本采集及注意事项】

精液标本一般由患者通过手淫法留取。将一次射出的全部精液直接排入清洁塑料杯内。不能用乳胶避孕套采集，因避孕套内含有的滑石粉会影响精子活力。

准确记录采集时间，并写在申请单的空白处。

（三）标本的运输及保存

精液标本留取后应立即送检。在运送过程中，标本温度应保持在 25～35℃。冬天运送标本时，最好将标本放在内衣口袋内保温，注意防止瓶子倒置。

（四）拒收标准

精液收集不全、被尿液污染、有溢漏、超过 2 小时送达的标本。

七、前列腺液标本采集、运输、保存

（一）检查项目

前列腺液常规检查。

（二）标本采集

由临床医生采用前列腺按摩术采集前列腺液于清洁玻片上或容器内。

（三）标本的运输及保存

要求立即送检，室温运输，不宜久置。

（四）拒收标准

久置干结的标本。

八、粪便采集、运输、保存

（一）检查项目

大便常规、大便潜血试验、大便找寄生虫、人类轮状病毒抗原检查。

（二）标本采集 【采集前注意事项】

医生应向患者讲清楚收集粪便标本前应禁止服用的食物和药物，化学法检测潜血禁止服铁剂，素食三天后留取标本。【标本容器及取样量】

容器：一次性带盖塑料便盒，标明患者姓名。采样量：取少量标本（指头大小）。【采集方法】

自然排便。选取有粘液、脓血等病变成分的粪便；外观无异常及粪便潜血检测标本须从表面、深处、粪端多处取材。

检查阿米巴滋养体时，应于排便后立即从脓血性或稀软部分取样，立即送检。检查蛲虫卵需用拭子于晚上12时或清晨排便前自肛门周围皱裂处取样，并立即送检。

注意避免尿液污染。住院病人标本盒上标明患者姓名，门诊病人标本与申请单一起放于标本收集盘内。

（三）标本的运输及保存

标本采集后要盖紧，室温下及时送检，1小时内完成检测。

（四）拒收标准

标本量不足、含有尿液的或送检时间超过1小时的标本拒收。

第二章

血液一般检验的标本采集、运输、保存操作规程

一、未梢血标本采集

（一）检查项目及适用人群：适用于门诊病人做血常规、C-反应蛋白、ABO和Rh血型、疟原虫检测等项目。

（二）操作步骤：

1.血常规：一般选择无名指，先用酒精棉球消毒，然后用一次性采血针穿刺，让血液自然流出，用消毒棉球轻拭去第一滴血后，将血液收集在0.5毫升离心管(EDTA-K2抗凝管)内，约0.2-0.4毫升，混匀，马上上机检测。

婴幼儿可自拇指或足跟两侧采血。烧伤患者可根据情况选用皮肤完整的肢体末端。采血部位应无炎症或水肿。末梢采血不可用力挤压。

2.C-反应蛋白：采集20微升指血放入专用的含定量稀释液的反应杯中。

3.ABO或Rh血型：采用玻片法检测。用未梢血涂片做血型鉴定。4.疟原虫检查：最好在寒战初期采血。用未梢血制成厚、薄涂片。

二、静脉血采集、运输、保存

（一）检验项目

血常规：标本用于上血细胞分析仪检测，项目包括白细胞计数及五分类、红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积、红细胞体积分布宽度、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、平均红细胞体积、血小板计数、血小板体积分布宽度、血小板压积、网织红细胞计数与分类等。

交叉配血试验；ABO或Rh血型；红细胞沉降率（ESR）；血液粘度检查；NT-proBNP。

（二）标本采集

1．血常规、ABO或Rh血型、交叉配血试验、NT-proBNP：用含 EDTA-K2 抗凝剂的真空采血管采集2毫升静脉血，颠倒5-6次混匀；

2．红细胞沉降率（ESR）：用含枸橼酸盐抗凝剂的专用ESR真空采血管采集静脉血至两条采血量标识线之间，颠倒5-6次混匀.3.血液粘度检查: 一般宜清晨空腹安静状态下采血。血液粘度测定需同时抽取静脉血常规管、血沉管和肝素抗凝血（5ml）三份样本，颠倒5-6次混匀.4.静脉血标本唯一标识：住院病人为“采血管上标明病人姓名+检验申请单右上方贴上采血管条码” ；门诊病人为“采血管上标明序号+在检验申请单右上方写上相同序号和贴上采血管条码”。

5.在检验申请单上写上采血时间.(三)标本运输及保存

静脉血液标本采集后应在2小时内送达检验科，4h内完成检测。室温下保存，不能及时检测的标本置4℃冰箱保存.(四)标本拒收标准

凡不按血量：抗凝剂比例抽血、从输液管抽血、明显脂血标本、明显溶血标本、有凝块、标识不清、抗凝剂不对及血量不足的标本一律拒收。

第三章

生化检验标本采集、运输、保存操作规程

一、检查项目

肝功能检查：总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、丙氨酸氨基转氨酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、总胆汁酸(TBA)；

肾功能检查：尿素(UREA)、肌酐(CREA)、尿酸（UA）、β2-微球蛋白（β2-MG）、胱抑素C（Cys-C）；

心肌酶谱：乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、a-羟丁酸脱氢酶(HBDH)；

血脂检查：总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白A1（APO-A1）、载脂蛋白B（APO-B）

糖尿病相关检测项目：葡萄糖（GLU）、糖化血红蛋白（HbA1c）、糖耐量试验；

电解质检测：钾（K）、钠（Na）、氯（Cl）、钙（Ca）、无机磷（Pi）、铁（Fe）；

心肌早期损伤三项：cTnI/Myo/CK-MB定性或定量（化学发光法）检测； 其它：淀粉酶、总铁结合力。

二、标本采集及注意事项

1．要求空腹 8-12小时后采静脉血，以早晨空腹为佳。应避免跑步、骑自行车、爬楼等剧烈运动。过度精神刺激和剧烈运动可使肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等不同程度升高。2．急诊病人查急诊项目可随机采血。

3．血脂检查要求抽血前3天保持正常饮食。采血前一天的晚餐应避免饮酒、高脂肪和高蛋白饮食。餐后采血容易出现“ 饮食性脂血”。饮酒可使TG、TC和HDL-C增高。

4．患者应取坐位或卧位静脉采血，止血带结扎时间应少于 1 分钟。禁止在输液管处或输液肢体同侧采血。

5．采血前应核对好姓名和检验项目，明确标本要求。

6．用含促凝剂的干燥管（生化管）或分离胶-促凝剂采血管采集静脉血标本（血糖和糖化血红蛋白标本除外），采血量4-5ml。

7.糖化血红蛋白（HbA1c）测定：不要求空腹，随机采血。用EDTA-K2抗凝管采集静脉血标本，采血量2毫升。采血后立即轻轻颠倒5-6次，使血液与抗凝剂充分混匀。

8．血糖测定：用含氟化物抗凝剂真空采血管采血2ml，颠倒5-6次混匀。9.糖耐量试验（OGTT）

（1）试验前每天碳水化合物摄入量不少于150g，有正常的体力活动至少3天。

（2）过夜空腹10－14小时。

（3）试验前禁用酒、咖啡、茶，保持情绪稳定。

（4）用含氟化物抗凝剂真空采血管采血2ml，颠倒5-6次混匀。

（5）上午8：30以前抽空腹血，然后饮用含75克葡萄糖的水250-300毫升,5分钟内饮完.（若空腹血糖＞15.0mmol/L或1型糖尿病，有酮症倾向者以100克面粉馒头替代，10-15分钟内吃完）。

（6）分别于饮糖水或吃完馒头后0.5小时、1小时、2小时、3小时各抽血一次，测定血糖值。

10．静脉血标本唯一标识：住院病人为“采血管上标明病人姓名+检验申请单右上方贴上采血管条码”，门诊病人为“采血管上标明阿拉伯数字序号+在检验申请单右上方写上相同序号和贴上采血管条码”。

11．在检验申请单上写上采血时间。

三、标本的运输及保存

要求标本采集后及时送检。如标本不能及时检测，应放置 4℃冰箱保存。血糖管2-8℃冰箱保存可稳定48小时，其余项目可稳定3-7天。检测胆红素的标本应避光保存。

血清钾（K）/钠（Na）/氯（Cl）检测应在标本采集后1小时内送达检验科，2小时内完成检测。如不能及时检测，应离心分离血清后放置 4℃冰箱保存，可稳定24小时。

四、标本拒收

拒收明显溶血、乳糜血、血量不足、标识不清的标本。溶血标本不能用于检测钾、钠、氯。

第四章

免疫学检验标本采集、运输、保存操作规程

一、检查项目

免疫蛋白检查：补体（C3）、补体（C4）、免疫球蛋白 A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）。

风湿三项：抗“0”溶血素（ASO）、类风湿因子（RF）、C-反应蛋白（CRP）；

肝炎系列：甲型肝炎病毒IgM（HAV-IgM）、乙肝5项（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb），丙型肝炎抗体（Anti-HCV），戊型肝炎抗体（Anti-HEV）；

优生优育五项（ToRCH）：弓形虫IgM、疯疹病毒IgM、巨细胞病毒IgM、单纯疱疹病毒1型IgM、单纯疱疹病毒2型IgM。

其它：梅毒螺旋体抗体检查（TRUST、TRUST滴度、TPPA）；人类免疫缺陷病毒抗体（Anti-HIV）；肺炎支原体抗体IgM；肥达氏试验和外斐氏试验。

二、标本采集及注意事项

1.患者不需特殊准备。用含促凝剂的干燥真空采血管采集静脉血，采血量 4-5ml。

2.静脉血标本唯一标识：住院病人为“采血管上标明病人姓名+检验申请单右上方贴上采血管条码”，门诊病人为“采血管上标明阿拉伯数字序号+在检验申请单右上方写上相同序号和贴上采血管条码”。

3.在检验申请单上写上采血时间

三、标本的运输及保存

要求标本采集后及时送检，如标本不能及时检测，可放置 4℃冰箱保存，稳定 7天。

四、标本拒收

明显溶血、标本量不足、标识不清的标本。

第五章 化学发光免疫分析项目标本采集、运输、保存操作规程

一、检查项目

肿瘤筛查项目：甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、糖类蛋白抗原125（CA125）、人绒毛膜促性腺激素β亚单位（β-HCG）；

性激素六项：雌二醇（E2）、促黄体生成激素（LH）、促卵泡生成激素（FSH）、孕酮（P）、泌乳素（PRL）、睾酮（Testo）；

甲功五项：T3、T4、TSH、FT3、FT4；

贫血三项检验：维生素B12（VitB12）、铁蛋白（sFe）、叶酸（FA）； 糖尿病相关项目检验：胰岛素、C-肽； 骨疾病相关项目检验：甲状旁腺素（PTH）； 心梗三项：cTnI、Myo、CK-MB。

二、标本采集

1.静脉血标本采集前应避免运动。要求患者静坐休息15min 后再采血。用含促凝剂的干燥真空采血管采血，采血量4-5ml。

2.激素标本采集时机由开单医生根据临床需要决定，并由开单医生告知患者。

3．静脉血标本唯一标识：住院病人为“采血管上标明病人姓名+检验申请单右上方贴上采血管条码”，门诊病人为“采血管上标明阿拉伯数字序号+在检验申请单右上方写上相同序号和贴上采血管条码”。4．在检验申请单上写上采血时间

三、标本的运输及保存

要求标本采集后及时送检，如标本当天不能检测，可放置 4℃冰箱保存，留待第二天检测。如果24小时内无法进行检测，可离心后分离血清置－20℃冰箱保存，可稳定7天。

四、标本拒收

明显溶血、标识不清、标本量不足的标本。

第六章

血气分析标本采集、运输、保存操作规程

一、检查项目

血气分析。

二、标本采集

【采集前注意事项】

1.受试者应保持情绪稳定。

2.如正在输氧，应在检验申请单上记录当时的氧流量。3.在检验申请单上记录病人当时的体温。【标本采集器材】

使用专用的干式肝素化血气分析采样器。【采集方法】

1．采集动脉血，量约1.0毫升。桡动脉最理想，其次为股动脉。采集时动脉血应随着动脉搏动顺利地流入针筒，否则可能将气泡带入采样器中，导致结果不准。

2．注意隔绝空气。采血后应即封闭针头。如针筒内有气泡，应将气泡排出后再封闭针头。

3．采样后应水平和垂直旋转混匀约1分钟，以免血液凝固。

三、标本的运输及保存

1、血气标本采集后必须密封隔离空气，10分钟内送达检验科。

2、如出现仪器故障等情况，导致标本不能在15min 内完成检测时，必须将标本置于0～4℃冰箱中保存，但保存时间不得超过60 分钟，因为标本放置30 分钟后PO2下降2%，60 分钟后约下降8%，pH 值也同时下降，PCO2 上升，白细胞高的标本（白血病）改变更明显。

四、标本拒收

标本没有隔离空气、有凝块、溶血、有气泡、标本量不足等拒收。

第七章 凝血功能四项检测标本采集、运输、保存操作规程

一、检查项目

凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量（FIB）、凝血酶时间（TT）。

二、标本采集及注意事项

1.用专用的含枸橼酸钠的真空采血管（内含0.2 ml抗凝剂）采集静脉血，枸橼酸钠是通过与血中钙离子螯合而起抗凝作用。

2.标本量=1.8ml静脉血+0.2 ml抗凝剂，要求标本量尽量控制在1.8－2.2 ml范围内。

3.采血后立即颠倒混匀5－6 次，避免用力振摇.4.止血带的压力要小；结扎时间要<1分钟；采血要尽量一针见血；不能在淤血部位采血；不要从输液管处采血；不要拍打采血部位；避免产生凝血、溶血、气泡和组织液污染；不要让患者反复做握拳动作。

5.在检验申请单上记录采样时间。

三、标本运送及保存

标本采集后应尽快送检验科。要求1小时内送达检验科，2小时内完成检测。如不能及时送检，标本存贮的条件和稳定时间为 ：2－8℃，＜4小时。标本放置时间过长，检测结果会受影响。

四、标本拒收标准

凡不按血量与抗凝剂比例采血、从输液管抽血、脂血标本、溶血标本、有凝块、抗凝剂不对、血量不足、标识不清、采样后至标本送达检验科时间超过2小时的一律拒收。

第八章

微量元素检测标本采集、运输、保存操作规程

一、检查项目

血铅、镉、铜、锌、镁、钙、铁、钠、钾。

二、标本采集前注意事项

1.病人准备：原则上要求早上空腹采血。

2.采血人员应经专门培训，知晓微量元素标本极易受到污染及技术操作要求。为保证检测结果准确，采血人员在采血过程中应按以下要求操作。

2.1采血时不要戴乳胶手套(对锌有污染)，可使用塑料手套，或不戴手套把手清洗干净。

2.2采血时彻底清洁穿刺部位的皮肤，用酒精清洁取血区皮肤。

2.3 保证采血场所的清洁，不要在采血室使用风扇降温。

2.4 用肝素抗凝管采集2－3ml静脉血，轻轻颠倒5-6次混匀，采血后不要开盖。

2.5 送检时将采血管口封严，以防渗漏。如不能及时送检，置于2-8℃冰箱保存。

三、标本采集

1．严格按照操作规程要求用碘酒、酒精清洁取血部位后采集静脉血，或用酒精清洁手指取血部位后采集未梢血；

2．成人用含肝素抗凝剂的采血管采集静脉血2-3毫升，立即颠倒5-6次混匀；婴幼儿采集未梢血40微升，立即加入到专用的标本稀释液，混匀。

3．标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上贴上采血管条码，注明标本采集时间等。

四、标本运输及保存

采集标本后应及时送达检验科。不能及时送检的标本应置4℃冰箱保存，可保存7天。

第九章

临床微生物学检验标本采集、运输和保存操作规程

第一节 尿液标本的采集、运输和保存

一、检查项目

尿液细菌培养、真菌培养、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。

二、标本采集

【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集标本。【采集容器】

无菌试管或无菌尿液标本留取容器。【标本采集】

1、一般采集晨起第一次尿液送检。

2、留取清洁中段尿标本：嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，开始排尿，将前段尿排去，接取中段尿约 10-20ml 于无菌容器中，立即送检.收到标本后1小时内接种。该方法简单、易行，是最常用的尿培养标

本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。

3、耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦，病人难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。

4、直接导尿：按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。可减少尿液标本的污染，准确地反映膀胱感染情况。但有可能将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。

5、留置导尿管收集尿液：利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液，操作时应防止混入消毒剂，不能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿管患者，应在更换新尿管时留取尿标本。6．标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本的运输及保存

标本采集后应立即送检。标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。

四、拒收标准

1没有用指定容器保存的标本。标本量不够或者违反标本采集、运输及保存注意事项的标本。

第二节 粪便标本的采集、运输和保存

一、检验项目

霍乱弧菌培养、沙门氏菌和志贺氏菌培养和鉴定、真菌培养及鉴定。

二、标本采集 【采集前注意事项】

应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。做好并保持肛门部位清洁。【采集容器】

一次性无菌便盒，或无菌试管。【标本采集】 采集时间：应在急性期采样，以提高检出率。自然排便采集法：自然排便后，挑取有粘液脓血部位的粪便，标本量约花生米粒大小，液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内（约1-2ml）,或置于保存液或增菌液中送检。直肠拭子法：如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿，可采用直肠拭子方法采集，取出后置于灭菌容器内送检。

4．标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本的运输及保存

应立即送检。标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。

四、拒收标准 没有用指定容器保存的标本。违反标本采集、运输及保存注意事项的标本。

第三节 上呼吸道标本的采集、运输和保存

一、检验项目

上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。

二、标本采集 【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【采样材料】

咽拭子或鼻咽拭子。【标本采集及注意事项】

1.采集时间：时间上无严格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，晨起后采集为佳。.标本采集：嘱患者用清水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，拭子要避免接触口腔和舌粘膜。.标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本的运输及保存

应立即送检。标本运送过程中必须保证其安全，避免细菌污染。

四、拒收标准 没有用指定容器保存的标本。违反标本采集、运输及保存注意事项的标本。

第四节 痰标本的采集、运输和保存

一、检查项目

痰液的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。

二、标本采集 【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【采集容器】

一次性无菌留痰盒。【采集方法及注意事项】

1、以晨痰为好。多数病人清晨痰较多，易于采集。且清晨痰含有的病理成分较多，可增加培养的阳性率。

2、采集方法：

(1)自然咳痰法：咳痰前，先用清水或漱口液反复漱口（为减少口腔正常菌群污染标本），然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器内（来自于下呼吸道分泌物）。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃ 10％NaCL水溶液，使

痰液易于排出。对咳痰少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽。合格的痰标本要求是镜下WBC>10个/LP，上皮细胞<25个/LP。

(2)气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。

(3)小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。

3、标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本运输及保存

采集后应立即送检。真菌培养的标本如不能及时送检，可放 4℃保存，以免杂菌生长。

标本运送过程中必须保证其安全，避免细菌污染。

四、拒收标准

1没有用指定容器保存的标本。违反标本采集、运输及保存注意事项的标本。

第五节 化脓和创伤标本的采集、运输和保存

一、检验项目

脓汁和创伤部位分泌物的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。

二、标本采集 【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【采集容器材】

无菌拭子和无菌试管。【采集方法及注意事项】 开放性感染和已溃破的化脓灶：先用灭菌生理盐水冲洗表面的污染菌，用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。注意尽量取化脓组织与正常组织交界处 的脓汁，因为脓汁中心的细菌大部分已死亡，交接处的活菌较多，会提高阳性率。对于慢性感染，因污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下的组织，研磨成组织匀浆接种于培养基。闭合性脓肿：一般采用穿刺或手术引流的方法采取.采集前先用2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周围皮肤。标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本运输及保存

应立即送检，如不能送检，应放 4℃保存，淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌培养的标本除外，后者应室温保存。

标本运送过程中必须保证其安全，避免细菌污染。

四、拒收标准

1没有用指定容器保存的标本。违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。

第六节 脑脊液标本的采集、运输和保存

一、检验项目

脑脊液的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、墨汁染色查新型隐球菌、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。

二、标本采集 【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【收集样本容器及采样量】

无菌试管或小瓶。如果用于检测细菌或病毒，脑脊液量应大于或等于1ml，如果用于检测真菌或抗酸杆菌，脑脊液量应大于或等于2ml。【采集方法】

用腰穿的方法采集脑脊液。

标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本运输及保存

收集标本后，室温下15分钟内送到检验科。脑脊液标本不可放冰箱保存，这样做会导致某些细菌死亡（如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和嗜血杆菌）。常温下可存放24小时。

标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。

四、拒收标准 没有用指定容器保存的标本。标本量不足或者违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。

第七节 胆汁标本的采集、运输和保存

一、检验项目

胆汁标本的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。

二、标本采集 【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药1－2天后采集标本。如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【标本收集容器及采样量】

无菌试管或无菌容器。尽可能多采集标本，且不少于1ml。【采集方法】

1、采集时间：怀疑感染存在时,尽早采集。

2、用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，标本放入无菌试管或无菌容器内。

3、标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本运输及保存

应在室温下15分钟内送到检验科。在常温下标本可保存24小时。做真菌培养的标本如不能及时检验，应放4℃保存。

标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。

四、拒收标准 没有用指定容器保存的标本。标本量不足或者违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。

第八节 胸水标本的采集、运输和保存

一、检验项目

胸水的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。

二、标本采集 【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药后1-2日采集。如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【标本收集容器及采样量】

无菌试管或无菌容器。尽可能多采集标本，且不少于1ml。【采集方法】

1、采集时间：怀疑感染存在时,尽早采集。

2、用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，并放入无菌试管或小瓶内。为防止凝固，可在试管中先加入灭菌肝素。

3、标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本运输及保存

应在室温下15分钟内送到检验科。标本在常温下可保存24小时。如果做真菌培养，只能放4℃保存。

标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。

四、标本拒收标准 没有用指定容器保存的标本。标本量不够或者违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。

第九节 腹水标本的采集、运输和保存

一、检验项目

腹水的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、抗酸杆菌涂片、革兰染色菌涂片检查。

二、标本采集 【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药1－2天后采集标本。如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【收集容器及采样量】

无菌试管或无菌容器。尽可能收集多的标本，且不能少于1ml。【采集方法】

1、采集时间：怀疑感染存在时，尽早采集。

2、用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，放入无菌试管或无菌容器内。为防止凝固，可在试管中先加入灭菌肝素。

3、标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等情况。

三、标本运输及保存

应在室温下15分钟内送到实验室。在室温下可保存24小时。如做真菌培养的标本不能及时检查，应放4℃保存。

标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。

四、拒收标准

1没有用指定容器保存的标本。

2标本量不够或者违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。

第十节 生殖道标本的采集、运输和保存

一、检验项目

生殖道标本的细菌、真菌、淋球菌，解脲脲原体和人型支原体培养；沙眼衣原体抗原检查；淋球菌涂片；细菌性阴道病相关检测、真菌涂片。

二、标本采集 【采集前注意事项】

病原体培养应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。【标本采集器材】

无菌试管、无菌男性拭子、无菌女性拭子。【采集方法】

1.尿道分泌物

(1)男性：取样前至少1小时内不要小便。清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，用男性拭子采取从尿道口溢出的脓性分泌物或将男性拭子插入尿道内 2～4 厘米取出分泌物。如无脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按摩，促使分泌物溢出。当无肉眼可见的分泌物时，可将灭菌男性拭子轻轻深入尿道内2～4 厘米，转动并停留 10～20 秒钟采集标本。采样拭子置入灭菌试管内送检。

(2)女性：取样前至少1小时内不要小便。清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，然后经阴道内诊压迫尿道，或从尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出，用无菌女性拭子采样。无肉眼可见的分泌物时，可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内，转动并停留 10～20 秒钟采集标本.采样拭子置入灭菌试管内送检。

2.巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后压迫腺体，使分泌物溢出，用无菌拭子采样。

3.阴道分泌物：用窥器扩张阴道，用灭菌女性拭子采取阴道口内 4 厘米内侧壁或后穹隆处分泌物。

4.宫颈分泌物：用窥器扩张阴道，先用无菌棉球擦除宫颈口分泌物，再用女性拭子插入宫颈管 2 厘米，转动并停留 10～20 秒钟，让拭子充分吸附分泌物，采样拭子置入灭菌试管内送检。

5.前列腺液：用前列腺按摩法采集前列腺液，标本置于灭菌容器内送检。6.精液：受检者应在 5 天内未排精。清洗尿道口，采用手淫法体外排精，精液置于灭菌容器内送检。

7.溃疡分泌物：先用生理盐水清洗患处，再用灭菌棉拭子取其边缘或其基底部的分泌物，标本置于灭菌试管内送检。.标本采集完成后应在标本容器上注明患者姓名，在申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等信息。

三、标本运输及保存

标本应在室温下 15 分钟内送到检验科。

标本运送过程中必须保证其安全，避免细菌污染。

四、拒收标准

1.没有用指定容器保存的标本。.违反标本采集、运输及保存操作要求的标本。

第十一节 血液及骨髓标本的采集、运输和保存

一、检查项目

血液、骨髓液的细菌培养。

二、标本采集

（一）血液标本采集

【采集前注意事项】

应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。抽血过程中应严格遵循无菌操作规程。

【采集方法及注意事项】

1、采用BACT/ALERT 3D血培养仪配套血培养瓶收集标本。

2、防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。

2.1 培养瓶消毒程序

2.1.1 用 70％酒精消毒培养瓶橡皮塞子。2.1.2 酒精作用 60s,待干燥后使用。

2.1.3 在血液注入血培养瓶之前，先确认培养瓶盖酒精已经风干，否则应用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，再将血液注入培养瓶中。

在采血前，先消毒培养瓶盖，紧接着进行皮肤消毒。2.2 皮肤消毒程序： 严格按以下三步法进行

2.2.1 用70%酒精擦拭静脉穿刺部位,作用时间30s。

2.2.2 用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤，从穿刺点向外画圈消毒,消毒区域直径应达3cm 以上，碘酊作用 30s，碘伏作用 90s。

2.2.3 用70％酒精脱碘。对碘过敏的病人只能用 70%酒精消毒，作用60s。穿刺部位酒精挥发干燥后再行穿刺采血。

3、培养瓶接种程序

用无菌注射器抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，防止血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严防将空气注入厌氧瓶中。如采血量少于推荐血量时，应首先接种需氧瓶，剩余血量再接种厌氧瓶。

4、采血量及采血部位： 4.1 成人

4.1.1 现我院做法---“单臂1套”：单臂(单一静脉穿刺点)采集1份血样，分注到两个血培养瓶(需氧+厌氧，即1套)中，每个血培养瓶的血量为5～10ml（在此范围内，随着血量增加检出率相应提高）,总量为10～20ml。4.1.2 推荐做法-----“双臂2套”: 同时或短时间间隔（10分钟内）从双臂（两个不同穿刺点）采集2份血样，注入两套血培养瓶中，即从一个部位采集1份血样接种到1套培养瓶中，再从另一部位采血接种到另1套培养瓶中.4.2 儿童---“双臂2瓶”：一般只做需氧培养,特殊患者才考虑厌氧培养.同时采集2次(不同部位，如双上肢)血样，注入需氧瓶中（2个需氧瓶），每个培养瓶的血量为 2～5ml。

4.3 婴幼儿：一般只需做一瓶需氧瓶培养。

5、将血培养瓶上的条码撕下，粘贴在检验申请单上，将患者姓名写在血培养瓶标签的空白处。在申请单上注明采集时间和部位、每瓶注入血量、病人用药等信息。

【标本采集的时机】

1、采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，如已经使用抗菌药物者，应在下次用药之前采血培养,并选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。

2、对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前 0.5～1h 采集血液，或于寒战或发热后 1h 采集。因为发热时血液中可能没有细菌。

3、特殊情况的血培养，如导管相关性血流感染、感染性心内膜炎（间隔30分钟，连续采3套血培养）等可咨询微生物室工作人员。

（二）骨髓液标本采集

1、严格按照无菌操作规程进行；

2、采集部位：（1）髂后上棘最常用；（2）髂前上棘较安全。

3、采集量：以注射器抽吸骨髓液1.0ml送微生物培养。骨髓液抽取后应立即涂片，否则会很快凝固，使涂片失败。标本量不宜过多,以免被外周血稀释而影响结果.4、标本采集完成后应即密封。在标本容器上注明患者姓名，在检验申请单上注明标本来源、采集时间、病人用药等信息。

三、标本的运输及保存

血培养标本应尽快送往检验科。从标本采集到送达检验科不得超过2小时。如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放,因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，从而使培养阳性率下降。

骨髓标本采集后应尽快送至检验科。

四、拒收标准

血培养瓶标识与检验申请单不符、血培养瓶渗漏、破裂或明显污染、血液凝固。

第十章

液基薄层细胞学检查标本采集、运输和保存操作规程

一、检查项目

宫颈液基细胞学（TCT）检查。

二、标本采集 【采集前注意事项】

1、检查的最佳时间：绝经前的妇女，月经中后期是最理想，应避开经期。

2、检查前24小时勿用阴道药膏和冲洗阴道。

3、检查前48小时内禁止性交、盆浴和阴道检查。【采集方法】 步骤一：采样

取样应在直接观察下进行，先用阴道窥器保证宫颈完全暴露，擦净白带，使视野清晰。再将扫帚状取样器的中央刷毛伸入宫颈管内，周边刷毛到达子宫颈，同向旋转5-10圈。注意：手法宜轻柔，避免来回旋转，采样过程中，宫颈出血明显时，应立即停止采样。步骤二：漂洗

在装有TCT保存液的小瓶内漂洗扫帚状取样器。上下反复地将扫帚状取样器推入瓶底，迫使刷毛全部分散开来，共10次；最后，在溶液中快速地转动扫帚状取样器以进一步的将细胞标本保存下来，然后将取样器的宫颈刷头留在保存液中，将取样器柄扔掉。步骤三：保存

紧瓶盖，直到瓶盖与瓶体突出圆环密合。记录：将标识患者样本的条码以垂直于瓶口方向贴在瓶体上（方便扫描），并把患者姓名写在瓶子标签上；将患者的个人资料和病程简历填写在液基薄层细胞学检验申请单上，字迹工整，尽可能提供相关临床信息，后将另一张相同条码贴在申请单上。将标本保存瓶和申请单统一管理，以便送往实验室。

三、标本的运输及保存

采样后应即置细胞保存液中保存，放置室温，及时送检。

四、拒收标准

涂片收集到的细胞过少者拒收。

第五篇：细菌学检验试题

细菌学检验

一、名词解释 Imvic实验 Sop 基因突变 Sos显色实验 探针 芽孢

二、选择题 【A型题】

1．证明细菌具有鞭毛结构的常用方法是：E A．革兰染色法 B．抗酸染色法 C．普通琼脂培养法 D．液体培养法 E．半固体培养法

2．革兰染色法在临床上常用于： B A．鉴别细菌的血清型别 B．协助临床选择用药 C．诊断疾病 D．解释发病机制 E．判定细菌的免疫性 3．测量细菌的常用单位是：B A．mm B．μm C．nm D．pm E．

4．不属于细菌的基本结构的是：D A．细胞壁 B．细胞膜 C．细胞浆 D．细胞器 E．核质

5．细菌细胞壁的最主要成分是： B A．脂类 B．蛋白质 C．糖类 D．脂蛋白 E．***聚糖

6．不属于细胞基本结构的是： A A．鞭毛 B．中介体 C．细胞膜 D．核糖体 E．核质 7．青霉素抗菌作用的机理是： A A．干扰菌细胞壁的合成 B．破坏菌细胞壁上的磷壁酸 C．干扰菌细胞蛋白质的合成 D．破坏菌细胞膜的通透性 E．破坏菌细胞壁的多糖骨架 8．溶菌酶的杀菌机理是：E A．干扰菌细胞壁交联桥的合成 B．干扰二氨基庚二酸的活性 C．破坏聚糖骨架上四***侧链的连接 D．干扰菌细胞核质的活性

E．破坏菌壁多糖骨架β-

1、4键的连接 9．关于L型细菌叙述错误的是：C A．由于细胞壁缺陷常呈多形态 B．染色体不易着色 C．无致病力

D．常规细菌学检查多呈阴性

E．除去诱导因素可回复成原来的细菌 10．质粒是细胞的：A A．染色体以外DNA B．核质RNA C．储存高能的胞浆颗粒 D．胞浆中rRNA E．中介体 11．关于菌毛叙述错误的是：A A．是细菌的运动器官 B．分为普通菌毛和性菌毛 C．成分是蛋白质

D．普通菌毛与细菌的致病性有关 E．普通光学显微镜下不能看见

12．细菌的革兰染色性不同主要是因为：D A．形态不同 B．营养需要不同 C．生理功能不同 D．细菌细胞壁结构不同 E．致病性不同

13．细菌学形态学检查中最常用染色方法是：A．抗酸性染色法 B．特殊染色法 C．暗视野墨汁染色法 D．美兰单染色法 E．革兰染色法

14．细菌的繁殖形式是：D A．接合 B．裂殖 C．胞子 D．二分裂 E．复制

E 15．在细菌生长曲线中菌数增加最快的是：B A．迟缓期 B．对数期 C．稳定期 D．衰亡期 E．全部生长过程

16．有关热原质叙述错误的是：D A．是多数G-菌少数G+菌合成代谢产物 B．是G-菌细胞壁中脂多糖 C．注入人、动物体可引起发热 D．可被121℃20分钟处理破坏 E．可经吸负剂、石棉滤板除掉

17．下列那种不是细菌的合成代谢产物：E A．色素 B．细菌素 C．抗生素 D．维生素 E．抗毒素

18．关于噬菌体生物学特性叙述错误的是：B A．是细菌的病毒 B．不具有抗原性

C．主要成分是核酸和蛋白质 D．形态多呈蝌蚪状 E．较细菌的抵抗力强 19．不产毒的白喉棒状杆菌，携带了β—棒状杆菌噬菌体后便可产生这种现象称为：D A．转导 B．转化 C．接合 D．溶原性转换 E．原生质体融合

20．病原菌引起疾病的最佳组合是： A A．毒力+侵入门户+细菌数量 B．毒素+侵袭力+侵入门户 C．侵袭力+细菌数量 D．细菌数量+侵袭酶类

E．侵入门户+毒素+细菌表面结构

21．细菌内毒素的特点下列哪项是错误的： C A．主要由G—菌产生 B．化学成分主要是脂多糖 C．对人体组织有选择性毒性作用 D．可单独激活补体旁路途径 E．可使鲎血液变形细胞溶解物凝固

三、问答题

1、中和剂对消毒剂的消毒效果起着至关重要的作用，试简述具体实验分组。

2、简述细菌分子检测的技术，至少说出三种，并解释其原理与步骤。

3、生物安全实验室的具体分类与分别检测的微生物类型。4.简述菌种保藏方法及原则。