浅谈对实验动物学地位和作用的认识

第一篇：浅谈对实验动物学地位和作用的认识

浅谈对实验动物学地位和作用的认识

【摘要】实验动物学是一门专门研究实验动物和动物实验的新兴边缘学科，其具有较强的综合性和应用性。实验动物学是生命科学研究的基础和重要支撑条件。为提高对实验动物学的认识，在结合教学经验的基础上对实验动物学的地位和作用进行了简要的探讨，并对其发展趋势进行展望。

【关键词】实验动物学地位作用发展趋势

实验动物学虽然是一门于2 0世纪 5 O年代新崛起的独立的综合性边缘学科，但 由于对科学研究 的特殊作用，受到 了国家科技部 门及相关管 理部 门的高度重视，因此其发展非常迅速。在经过几十年的整合与飞速发展，现 已形成了自己独特的科学体系，且在全国各大高校的相关专业针对不同层次的学生均 已开设实验动物学课程。由于实验动物学是一门新兴的学科，故对其地位和作用的认识 尚不透彻、完整。在现代科学的带动下，实验动物学已发展成为一门综合性的新兴学科，其发展和应用程度被作为衡量一个国家、一个地区、一个部门或行业。

1、实验动物学的地位

实验动物学是一门独立的综合性边缘学科。实验动物学衍生 自畜牧兽 医科学，随着医学、生物学 的发展而兴起 的一门融合生物学、动物学、遗传学、微生物学、寄生虫学、医学、畜牧兽医学等学科知识为一体，具有 自身 的基本概念基本 内容及 自身 的理论体系的边缘基础学科。实验动物学主要研究实验动物的标准化和动物实验的规范化两大方面的内容。实验动物标准化包括实验动物生物学、实验动物生态学、实验动物遗传学、实验动物营养学、实验动物繁殖学、实验动物微生物和寄生虫学、实验动物医学等。而动物实验 的标准化包括动物实验技术、动物实验伦理学、动物实验替代方法学等。实验动物学在社会生产和科学实验的许多领域 中具有广泛的应用价值，其发展和研究成果对于相关学科 的发展、研究 和应用具有十分重要 的意义，故实验动物学也是一门应用性的学科。

2、实验动物学的作用

人类社会 已进入以生命科学为主宰的 2 1 世纪，作为生 命科学研究的基础和支撑条件 的实验动物学是现代生命科 学前沿领域研究 中最为活跃的学科 门类之一 ：同时由于其研究成果应用较广，如生命科学领域、制药工业和化学工业 领域、畜牧兽医科 学方面、国防和军事科学方面等等，故实验动物学已作为上至衡量一个 国家下至衡量一个科学研究。所和高等院校科研发展水平的主要标志之一l 6。由于实验动物学是一门应用性学科，故其作用主要体现在实验动物和动物实验方法所起到的作用方面。

2.1实验动物是生命科学研究的重要基础

在生命科学研究领域 ． 目前公认 “ A E I R” 是生命科学研究的四大基本条件，“ A” 即 A n i ma l(实验动物)，“ E ” 即 E q u i p me n t(设备)，“ I ”即 I n f o r m a t i o n(信息)，“ R ” 即 R e a g e n t(化学试剂)。其中实验动物是最主要的． 居于首位。由于科学技术的发展，要获得高、精、尖的仪器设备和高

纯度 的试剂、必要的情报信息，已是非常容易办到的事。而培育并应用标准化的实验动物却不易。由于动物质量不标准，会造成动物实验的敏感性、准确性、重复性差，致使实验动物严重浪费，导致科研的科学性及可信度降低，在国际学术界得不到公认 ； 还会造成生物制剂和药品的安全性、有效性评价试验得不到国际承认，影响 出 口。

2.2实验动物是生命科学的支撑条件

在 生命科学领域内． 由于道德观念、道德规范、道德评价和伦理学的限制，我们不能用人去做实验，必须借助实验动物去探索生命的起源，揭开遗传的奥秘，攻克癌症的堡垒，研究各种疾病与衰老的机理，监测公害、污染，保护人类生存的环境，生产更多更好的农畜产品，为人类生活造福。因此实验动物在生命科学中被誉为“ 活的试剂”、“ 最精密的仪器”。从一定意义上来说，实验动物科学的发展水平，代表着一个国家或地区生命科学的发展水平。实验动物作为生命科学的支撑条件主要体现在 ： 为生物医学基础研究提供标准的实验材料 ； 作为人类疾病研究中人的替身或模型 ； 作为药品、食品等安全性评价和效果试验的活试剂 ；作为生物制剂及制品研制的原材料： 为生物学、医学、畜牧兽医学等提供教学材料等。

2.3动 物 实验 是 生 命 科 学研 究 及 其 他 一些 自然 科 学 研 究的重要手段。动物实验是实验动物学两大研究内容之一。其主要研究以各学科的研究 目的为 目标，研究实验动物的选择、试验手段、试验方法、动物模型，以及在试验中采用各种手段和方法在实验动物身上进行实验，研究实验过程中实验动物的反应、表现及其发生机制、发展规律，以探讨生命科学 的疑难问题。实验结果的好坏不仅与实验动物有关，也 L J j 动物实验方法有关，如实验动物的选择、实验季节、温度、湿度、麻醉深度、实验药物、手术技巧等技术环节处理不当，将直接影响动物实验结果。实验动物学研究动物实验基本方法与技术，建立 了科学 的、标 准化的动物实验方法，将避免或减少动物实验过程 中由于某些技术环节给实验结果带 来的不 良影 响。

3、实验 动物 学和 其他学 科的 关 系

实验动物学衍生 自畜牧兽 医科学，随着医学、生物学的发展而兴起的一门融合生物学、动物学、遗传学、微生物学、寄生虫学、医学、畜牧兽医学等学科知识为一体，具有 自身的基本概念、基本内容及 自身的理论体系的边缘基础学科由于实验动物学引入或借鉴了这些学科 的研究成果和研究 方法，冈此这些学科 的迅猛发展，不断丰富和更新实验动物学 的内容。同时实 验 动物 学 的发展 和提 高 又把 这些 学科 的研究引入新的境界，提高到一个更高的水平，从而促进这些学科的发展。如有些实验动物是来自家禽家畜经过人工培育而成 ．同时这些培育而成的实验动物为家禽家畜业的发展提供 了新的品种或品系，因此促进 了家禽家畜业的发展。虽然实验动物学和这些学科相互有关联，但各 A研究 的对象与 目的不同，研究方法也不尽相同，如实验动物学研究实验动物的 目的是服务于动物实验 ：研究动物实验的目的是服从于实验动物。由此可见，实验动物学和其他学科是相互促进，共同发展的相辅相成的关系。世纪将是高科技激烈竞争的年代，现代生物高科技已成为时代竞争的热点和制高点，因此，实验动物科学倍受重视。发达国家每年都投入大量资金，以促进实验动物学的发展。实验动物在科学研究中占有重要地位，如美国生物科学课题投资的 40% 涉及实验动物，60% 的生物学课题需要实验动物。美国肿瘤研究中心，每年的研究经费为 2.2 亿美元，而需要利用实验动物进行研究的课题占 1.4 亿美元。有人统计，我国生物医学科研课题的 60% 以上需要实验动物。由此可见实验动物在科学研究中所占的重要位置。

参考文献 ：

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[ 2 ] 王生存，邵义祥． 实验动物学课 程实验课 教学方法初探 『 J ] 实验动物与比较 医学，[ 3 ] 李凤奎，王纯耀 ．实验动物学

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[ 6 ] 李厚 达． 实验动物学

[ 7 ] 李萍，柳建发．实验动物学在21世纪生物医学的发展综述[

第二篇：对职业教育的地位与作用再认识

对职业教育的地位与作用再认识

我国经过近10 年职业教育的快速发展, 已经从规模发展向内涵发展、文化发展前进。理论的充实, 观念的共识, 比任何时候都要更感迫切。不仅教育界要对职业教育的地位与作用形成共识, 而且全社会都要对职业教育的地位与作用形成共识。一些重大的理论问题, 比如党的教育方针内涵的再思考, 职业教育与其他教育的关系问题, 职业教育自身的改革与发展问题, 都需要从理论的高度加以阐释。职业教育具有全局性的战略地位的共识, 将影响我国未来十几年经济与社会的发展。教育作为国家发展的基石, 关乎民族的兴旺, 人民的福祉和国家的前途命运, 而职业教育的摆位对不对, 将影响中华民族振兴的步伐。

一、经济的发展要以教育为基础, 大力发展职业教育是综合国力彰显的必然选择温家宝总理2009 年1 月4 日在国家科教领导小组会议上的讲话中指出:..教育是国家发展的基石。当今世界, 知识成为提高综合国力和国际竞争力的决定性因素, 人力资源成为推动经济社会发展的战略性资源, 人才培养与储备成为各国在竞争与合作中占据制高点的重要手段。我国是人口大国,教育振兴直接关系国民素质的提高和国家振兴。只有一流的教育才有一流的国家实力, 才能建设一流的国家。!职业教育作为直接培养一线的实用人才, 直接为社会创造财富的群体的教育, 在国民经济发展中具有重要的地位。解决国民经济发展面临的困难, 应对国际金融危机蔓延与加剧的局面, 缓解人口、资源、环境压力越来越大的矛盾,..保持经济平稳较快发展, 推动产业结构升级, 转变经济发展方式, 建设资源节约型和环境友好型社会, 必须紧紧依靠科技进步和提高劳动者素质 , 大力发展职业教育是国家发展战略的重要组成部分。

这是因为, 我们的基本国情是东强西弱, 贫富差距大, 城乡、地区发展不平衡, 解决这些现状实现均衡发展最有效的手段之一就是发展职业教育。..职业教育的根本目的是让人学会技能和本领, 从而能够就业, 能够生存, 能够为社会服务,.就这个优势来讲, 其他教育还无法与之争锋。

此外, 经济全球化、信息化和知识经济的迅速发展, 使科学技术产品的质量和服务水平的竞争越来越激烈, 这个竞争的实质是人才与教育的竞争, 特别是技能型人才和职业教育与培训的竞争。培养数以亿计的热爱劳动的技艺技能型人才, 职业教育是承担此重任的主力军。看一个国家的综合实力,固然要看国民生产总值, 但最主要的还是要看教育的质量, 人才的质量, 特别是劳动者# # # 直接为社会创造财富的人群的质量, 这是最具决定性作用的东西。同样是瑞士手表的零件, 我们工人装配出来的产品价格比瑞士工人装配出来的产品价格低好几倍。原因就是我们的装配技能比不上人家。就全球范围看来, 凡是职业教育搞得好的国家和地区, 他的产品质量就有竞争力, 同样, 全球500 强的企业, 他的职业教育与培训也是好的、有特色的。因此, 哪个国家, 哪个地区, 哪个企业把职业教育与培训放在了全局战略地位, 必然在竞争中处于高点优势。

二、城乡二元化结构的转换要以职业教育为载体, 农村劳动力转移需要职业教育承载历史的重任我国13 亿人口9 亿在农村, 农耕经济不适应工业化发展的需求, 调整农村经济结构, 需要农民的职业分化, 至少有2 亿人口要成为..农民工 , 从事工业服务业等劳动。农村的智力劳动者、个体工商户、乡镇企业管理者、私营企业主, 在农村农业结构战略性调整中, 将影响未来发展的格局, 如何兼顾他们的利益是社会主义新农村建设不可忽视的一个课题。而广大农业劳动者又是弱势群体, 他们的个人纯收入最低, 如何使他们..富 起来, 也是社会主义新农村建设不可忽视的又一个课题。社会主义新农村建设至少包括20 多个评价指标, 如二、三产业产值占GDP 的比重;农民产均集体固定资产价值增长率, 科技投入占GDP 的百分比;科技进步对经济增长贡献率;每千人拥有科技人员数;农民人均纯收入;农民人均生活消费支出;农民生活消费恩格尔系数;农村社会养老覆盖率;农村合作医疗覆盖率;道路硬化率;林地覆盖率;三废污染面积比重;小城镇人口居住比例;统一规划和功能分区等, 其中适龄儿童入学率;农民人均受教育年限;成人积学率;农村文化生活(平均每村固定的文化活动场地数、固定文化娱乐活动经费、公共文化娱乐设施配备情况), 则是最体现农村从..经济为中心 转向..以人为本 的指标性数据。而要尽快实现新农村建设的指标, 只有大力发挥职业教育的主力军作用, 才能缩短新农村建设的进程, 加快实现农村现代化。因为职业教育与培训能提供新农村建设的实用型人才, 提供新农村建设的知识与技术, 提供文化与智力支持。

此外, 农村劳动力有序转移是我国工业化进程的必然趋势。其动因一是经济因素, 二是资源因素,三是农村经济发展方向, 资源组合、生产条件综合因素的影响。资料表明1978~ 2007 年, 我国劳动就业量增长91.7% , 其中城镇增加了1.9836 亿人。但是在我国, 由于历史形成的原因, 有的地区有资源无劳动力, 有的地区有剩余劳动力, 无用工的去向, 因此, 使农村劳动力有序转移是我国人力资源管理的一项大政策。而要解决农村劳动力的有序转移, 必须使这些被转移的劳动力有技能, 有异地生存的条件, 所以必须通过职业教育与培训才能保证他们转移得出去, 留得住, 并能得到较好的生存与发展。

还有一个重要的问题在于: 实现农业现代化需要解决四个关键性问题, 一是要素投入集约化问题;二是资源配置市场化问题;三是生产手段科技化问题;四是产业经营一体化问题, 归根到底是农村的可持续发展问题, 这些问题的解决, 同样需要大力发展职业教育。因为科技化, 集约化, 市场化, 社会化, 最终需要人才有职业素质, 需要农村有一大批懂得现代化农业的人, 这些人才靠引进是不行的,只能是..土里生, 土里长 , 靠农村有志青年成为现代化农业的主力军。职业教育的责任就是为农村培养数以亿计的..观念正确, 有文化、讲文明、懂技术、会经营 的农村智力劳动者和专业人才, 所以, 承载社会主义新农村建设的历史重任, 职业教育应该..一马当先。

三、教育结构的变化突显了职业教育的地位, 职业技术是构成生产力发展的主要因素科学技术是第一生产力。特别是实用技术对推动社会的进程与发展, 起着至关重要的作用。而职业技术教育是以培养人才获得实用技术为特征的, 因此, 大力发展职业教育的目的, 就是要推动生产力又好又快地发展。我国的教育要跟上时代的发展, 第一要坚持面向未来、面向世界、面向现代化,办出具有中国特色、中国风格、中国气派的现代化;第二要服务于经济建设, 服务于实现工业化和城镇化;第三要把教育放在优先发展的地位, 坚持教育兴国、教育立国、教育强国;第四要办人民满意的教育, 实现教育公平;第五要立足于国情, 要充分考虑我国人口众多, 现阶段农村人口大规模迁徙和流动的特征。为此我国的教育结构布局必须处理好义务教育、农村教育、职业教育与高等教育的关系。让每个受教育的人都能在相应的教育形态下找到自己受教育的位置。而..职业教育是面向人人的教育,是面向整个社会的教育 %, 所以..大力发展职业教育, 既是经济发展的需要, 也是促进社会进步的需要 &, 这也是为什么要突显职业教育地位的原因。

1.大力发展职业教育, 首先是大力发展技术工人教育。因为实现工业化首要的是提升装备制造业劳动者的素质, 提高他们的劳动生产率, 原因在于他们对生产力的提高是基础性的, 是直接的。而我国产业工人大军整体素质不高是不可否认的事实, 原因在于经济发展, 产业结构调整, 产品结构变化, 新技术和新工艺的应用向大潮一样涌来以后, 我们的职业技术教育与培训跟不上, 所以很多地区、很多企业都出现了..技工荒。这就要求我们的国家必须大力发展职业技术教育, 否则它将成为经济发展的..瓶颈 , 制约我国生产力的进一步提高。

2.大力发展职业教育, 最关键的是解决专业技术人员结构不合理的状况。我国的高级技术工人严重缺乏, 大力发展高职教育和技术本科教育, 仍是未来10~ 20 年的主要方向。科学技术越发展, 越需要智能型的产业大军, 也越来越需要一大批适应经济快速发展的高级操作工人和高级技术人员。

为此, 如何实现中职、高职与技术本科的衔接是教育改革不可回避的问题, 不从教育体制上理顺关系,将影响经济的可持续发展。

3.大力发展职业教育要符合科学发展观。一要解决好职业技术教育结构与人才结构相适应的矛盾;二要解决好职业技术教育与普通教育、培训沟通与协调的矛盾;三要解决好人文素质教育与专业技术、技能相结合,..做人与做事 ,..学做统一 的矛盾;四要解决统筹规划与教育资源合理利用的矛盾。国家这个层面的教育还是要按胡锦涛总书记所要求的办:..大力发展职业教育, 提高高等教育质量, 普及九年义务教育 , 发展、提高与普及, 各有各的重点。当然优先的的位置仍是大力发展职业教育, 这个摆位不能互换。

4.大力发展职业教育要吸纳、弘扬先进的教育思想。什么是先进的教育思想? 就是符合中国特色社会主义理论和党的教育方针的思想, 就是符合世界先进教育理念和教育经验的思想, 就是符合时代发展的思想, 就是符合职业教育发展规律的思想。由于我国传统教育的影响很深,..学而优则仕 ,鄙视劳动的思想在社会上还有广泛的影响。..读书做官 ,..读书当白领 , 仍是相当多学生与家长的..欲望 , 职业教育的地位在社会认同度上并不高。这一方面要从教育理论上要让职业教育有权威性,有学术性, 确立职业教育理论的学术地位;另一方面要大力宣传职业教育的思想与理论基础, 强化它的社会性地位, 为大众化,平民化教育提供理论支撑。同时要让社会认同职业教育的成果及它对国家发展的贡献, 要让全社会尊重..工人阶级。为此, 专家学者应当站出来, 呼吁社会尊重职业教育, 因为职业教育正如著名教育先驱黄炎培先生所说: 是..用教育的方法, 使人人一方获得生活之供给与乐趣,一方尽其对群之义务 , 它是生活不可或缺的内容。

四、巩固党的执政地位, 需要职业教育提供基础保证.中国共产党章程(明确提出:..中国共产党是工人阶级的先锋队。中国的产业大军及其知识分子是党的阶级基础和执政基础, 是党的先进性的阶级来源。中国工人阶级认同不认同党的领导, 认同不认同社会主义制度, 认同不认同走中国特色社会主义道路, 认同不认同邓小平理论、..三个代表 重要思想与科学发展观作为指导思想与行动指南, 关乎着中国共产党的执政地位是否牢固, 忽视对工人阶级队伍的建设, 是一件很危险的事情。

中国的工人阶级必须认同社会主义核心价值体系, 认同马克思主义指导思想是社会主义核心价值体系的灵魂;认同中国特色社会主义共同理想是社会主义核心价值体系的主题;认同民族精神和时代精神是社会主义核心价值体系的精髓;认同社会主义荣辱观是社会主义核心价值体系的基础, 也就是说, 思想信仰、理想信念、精神支柱和道德基础, 是工人阶级必须具备的思想素质。由于中国的产业工人大军主要是由职业教育培养的, 所以职业教育培育有道德、有文化、有纪律, 德智体美全面发展的中国特色社会主义事业合格建设者和劳动者, 是时代赋予职业教育的历史责任。

要使中国工人阶级队伍壮大起来, 职业教育必须做好四项基础工作。

一是给工人阶级队伍职业技能和社会化技能, 这是提升他们自身发展能力的基础, 也是..安身立命 的本钱。工人阶级有技能才有生产能力、服务能力和创造能力, 才能发挥..科学技术是第一生产力 的作用, 这是最重要的基础工程。

二是给工人阶级队伍良好的职业道德和职业精神, 这是提升他们自身品味的基础, 也是..立志高远 的本钱。工人阶级有精神追求和奉献精神才能乐业爱业, 才能在直接为社会创造财富中体现自身的价值。

三是给工人阶级队伍可持续发展的机会, 让他们在学习、培训的过程中获得提升..基本素质+ 职业素质 的发展成果。他们的..智慧结构+ 技能结构 适应时代的要求, 他们的无限创造力才能迸发出来, 促进工业化的发展进程。职业教育应当是工人阶级的成才教育, 这才是职业教育的本质所在。

四是给工人阶级队伍实现中华民族伟大复兴的历史机遇, 使他们在人才强国中发挥自己的巨大作用。职业教育能使数以亿计的高素质劳动者和数以千万计的专业人才脱颖而出, 成为建设中国特色社会主义的栋梁, 他们用..双手 实现了中国经济实力的大幅度提升, 他们用..双手 创造着中华民族的灿烂文化, 他们以自己的历史责任巩固着我国人民民主专政国家的政权基础, 所以职业教育已经为巩固党的执政地位提供了基础保证。

综上所述, 职业教育在经济又好又快发展, 农村劳动力转移, 教育结构变化和巩固党的执政地位中发挥着重要作用, 其历史地位应当得到全社会的认同。大力发展职业教育不仅是推进社会和谐与促进教育公平的战略举措, 更是巩固党的执政地位的最重要的保障。职业教育应当在..服务社会, 造福人群 中发挥成为让..人民满意的教育 的优势。关键是职业教育工作者要有崇高精神境界和社会责任感, 踏踏实实地做好自己的工作。

该信息出自“中国职业教育与成人教育网” http://www.xiexiebang.com

第三篇：实验动物学重点汇总

一、实验动物、近交系动物、转基因动物、屏障环境

实验动物(Laboratory Animal): 是指经人工饲养、繁育，对其携带的微生物及寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚的，应用于科学研究、教学、生产和检定以及其他科学实验的动物。包括四个基本内涵：

1.遗传背景明确（近交系、封闭群、杂交群）

2.对携带微生物和寄生虫实施控制（普通动物、清洁动物、无特定病原体动物、无菌动物）3.在特定的环境条件下，人工培育而成的动物 4.应用范围明确

近交系(Inbred Strain)是指至少连续经过20代以上全同胞兄妹或亲子交配，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。近交系动物的近交系数（Inbreeding Coefficient）应大于99%。近交系动物的特点：

1．基因纯合性和同基因性 2．各品系均具有独特的特性

3．研究结果的一致性

4．可作为有价值的动物模型

5．具有标准实验材料特性

6.遗传背景清楚

通过实验手段将新的遗传物质(外源性的基因片段)导入到动物的胚细胞中，并能稳定的遗传，由此获得的动物称为转基因动物。常用的方法有显微注射法、逆转录病毒载体法、胚胎干细胞介导法、精子载体法、电转移法、基因直接导入法等。

屏障环境：与外界隔离，是饲养清洁级动物和SPF级动物的设施。进入实验动物生存环境的空气须经过滤净化处理，其洁净度相对于10000级，进入屏障内的人、动物和物品如饲料、水、垫料及实验用品等均需有严格的微生物控制。

二、实验动物环境设施分类

实验动物设施是指实验动物和动物实验设施的总和。一个设施可以大到动物中心或生产繁殖机构，小至某一实验动物室。总体的原则是提供实验动物最适宜的环境，保障实验动物的质量和为动物实验的准确性提供可靠保障。

（一）、按其功能分类

1．动物生产设施（Animal Production Facility）指用于实验动物的饲育繁殖、生产的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。

2．动物实验设施（Animal Experimental Facility）指用于研究、试验、教学、生物制品、药品生产、检定等为目的进行实验动物饲育、试验的建筑物、设备以及运营管理在内的总和。

3．特殊动物实验设施（Special Animal Experimental Facility）指用于感染、毒理动物实验、病原微生物和细胞培养、重组DNA、转基因动物实验、克隆和胚胎干细胞、细胞实验和应用特殊化学物质等进行实验的建筑物、设备以及包括运营管理在内的总和。

（二）按微生物控制程度分类

1．普通环境（Open System）

直接与外界大气相通，是饲养普通级实验动物的场所。饲料、饮水要符合卫生要求，垫料要消毒，饲养室内要有防鼠、防昆虫等措施。

2．屏障环境（Barrier System）

与外界隔离，是饲养清洁级动物和SPF级动物的设施。进入实验动物生存环境的空气须经过滤净化处理，其洁净度相对于10000级，进入屏障内的人、动物和物品如饲料、水、垫料及实验用品等均需有严格的微生物控制。3．隔离环境(Isolation System)

与外界环境完全隔离的环境内。工作人员通过隔离器上组装的无菌手套进行操作，不直接接触动物。饲料、饮水，垫料，笼具等都应高压、高温灭菌。进入隔离器内的一切物品均需通过传递舱灭菌。适合饲养SPF、无菌动物、动物的保种育种或同等级的动物实验。

（三）按设施的平面布局分类

1．无走廊式(No Corridors)

用于饲养品种单一或以实验为主的设施。一般饲养普通级动物

2．单走廊式（Single Corridors）

一般的研究机构在进行中、短期动物实验。相对于双走廊其优点是占用空间小，设施利用率较高，维护费用低。缺点为清洁笼具和污染材料之间常常存在污染的危险，走廊相对拥挤。

3．双走廊式（Double Corridors）

常用的一种实验动物屏障设施类型。可以有效分割为清洁区和污染区。作为屏障设施使用，比较容易控制微生物污染。缺点是有效利用面积减少。

4．三走廊式（Three Corridors）

三走廊式压力梯度从中间的洁净走廊、前室、动物饲养室、污物走廊逐渐降低，是目前常用的动物实验设施。

三、地鼠的习性、特点（颊囊、冬眠）地鼠的习性： 1．生活习性

中国地鼠，灰色，个体小，体长约10cm，背部中心有黑色条纹。白天基本上睡眠，行动笨拙。昼伏夜行动物，一般在夜晚8～11点最为活跃，运动时腹部着地，行动不敏捷，巧手营巢，牙齿十分坚硬，可咬断细铁丝，兴奋时发出强烈的金属性音响。地鼠好斗，雌性比雄性大而且凶猛，受惊时会咬人。除发情期外，雌鼠不易与雄鼠同居，且雄鼠易被雌鼠咬伤。

2．采食性

有很强的贮食习性，可将食物存贮于颊囊内。其颊囊可充分扩张，贮藏能力极大，便于冬眠时食用。地鼠口腔内两侧各有一个很深的颊囊，一般深度为3.5～4.5厘米，直径为2～3厘米，一直延续到耳后颈部。通过颊囊将大量食物搬于巢中。

3．嗜睡性

睡眠很深时，全身肌肉松弛，且不易弄醒，有时误认为死亡。室温低时出现冬眠，一般于8～9℃时可出现冬眠，此时体温、心跳、呼吸频率、基础代谢率均降低。室温低于13℃则幼仔易于冻死，室温最好保持20～25℃，相对湿度40～70%。

地鼠的特点：

（一）解剖学特点：

1．头骨较长，门齿孔小，臼齿呈三棱形，齿式为2（门1/1，犬0/0，前臼0/0，臼齿3/3）=16，门齿能终生生长。

2．口腔内两侧各有一个颊囊。颊囊缺少腺体和完整的淋巴通路，因此对外来组织不产生免疫排斥反应，可用于异体移植。中国地鼠颊囊容易翻脱。

3．在臀髋部有一种腺体，当地鼠处于性兴奋状态时，分泌物会使局部皮肤湿润。雌性地鼠不如雄性发育完全，腺体外露也不明显。

（二）生理学特点：（略看）1．地鼠生殖周期短。

金黄地鼠性周期开始出现年龄为30～32日龄，妊娠为16（14～17）d，为啮齿类动物中妊娠期最短者。哺乳期20～25d，离乳后雄鼠2月龄，雌鼠 1.5月龄可配种。成熟期时除发情期以外雌鼠不许雄鼠靠近。年产5～7胎，每胎产仔约7只。平均寿命2～3年。

2．出生仔鼠体重2～3.3g，离乳时体重可达25～28g，成年体重约为150g，雌鼠体重比雄鼠稍大。成年中国地鼠体重约为35g，雄鼠则比雌鼠大。

3．地鼠对皮肤移植的反应特别，封闭群内个体间皮肤移植常可存活，并能长期生存下来，但不同群体间移植则100%被排斥。这一现象正吸引着许多免疫工作者进行深入的研究。4．中国地鼠（黑线仓鼠）与金黄地鼠解剖生理特点基本相似，但也存在一些差异，如中国地鼠的染色体少而大，二倍体细胞 2n=22，大多数能相互签别，定位明确，尤其Y染色体在形态上是独特的，极易识别。无胆囊，大肠长度比金地鼠短1倍，但脑重、睾丸大均比金地鼠重近1倍。

三、实验动物人性化及3R 至少要满足动物五种基础需要:1.足够饮水和营养良好的食物；2.任何时间不受饮水的限制3.免受痛苦和疾病的折磨；4.免受焦虑和害怕的折磨；5.能够表达正常生理学行为，如躲藏、犊和互相关照等。3R的基本内涵：

减少 Reduction）是指在科学研究中，使用较少量的动物获取同样多的实验数据或使用一定数量的动物能获得更多实验数据的科学方法。

替代(Replacement)是指使用其它方法而不用动物所进行的试验，或者说是使用没有知觉的试验材料代替以往使用神志清醒的活的脊椎动物进行试验的一种科学方法。

优化（Refinement）是指在符合科学原则的基础上，通过改进条件，善待动物，提高动物福利或完善实验程序和改进实验技术，避免或减轻给动物造成的与实验目的无关的疼痛和紧张不安的科学方法。

3R研究的意义：

（一）3R作为提升突破技术壁垒能力的载体和具体体现“标尺”，在经济发展和国际贸易中发挥不可替代的重要作用

（二）为科学发展提供了新思路和新方法

（三）开展“3R”研究，从保护动物，或是关注动物福利的角度出发，这也是时代发展、社会进步在科技上的一种体现。

五、小鼠的行为和生理学特点

（一）行为学特点

1.性情温顺，胆小怕惊，对环境反应敏感。

2.喜居于光线暗的安静环境，昼伏夜动，喜欢啃咬。3.社会群居性。

（二）生理学特点

1．小鼠体型小

2．体温与能量代谢。对小鼠需要供给充足的饮水。小鼠饮水量为4～7ml/d。

3．泌尿 小鼠尿量较小，一次排尿仅1～2滴。与其他哺乳动物不同的是，小鼠尿液中含有蛋白质和肌酸酐。

4．生殖 生长期短、成熟早、繁殖力强。小鼠6～7周龄时性成熟，性周期为4～5d，妊娠期为19～21d；哺乳期为20～22d；有产后发情特点，每胎产仔数为8～15头，一年产仔胎数6～10胎，繁殖率很高，生育期为1年。小鼠为全年多发情动物，发情周期可分为前期、发情期、后期和间情期四个阶段，每个阶段阴道粘膜均发生典型变化，通过阴道涂片可判断处于哪个阶段。交配后10～12h，雌鼠在阴道口形成一个白色的阴道栓，这是受孕的标志。

六、近交系繁殖生产

近交系动物繁殖方法的选择原则：保持近交系动物的同基因性及其基因的纯合性。

（一）引种：繁殖用原种的近交系动物必须遗传背景明确、来源清楚、有较完整的资料（包括品系名称、近交代数、遗传基因特点及主要生物学特征等）。引种动物必须来自近交系的基础群。

（二）繁殖：近交系动物的繁殖可分为：基础群（Foundation Stock）血缘扩大群（Pedigree Expansion Stock）生产群(Production Stock),当近交系动物生产供应数量不是很大时，一般不设血缘扩大群，仅设基础群和生产群。

1.基础群：严格以全同胞兄妹交配方式进行繁殖；对动物个体记录要详细，包括品系名称、近交代数、动物编号、出生日期、双亲编号、离乳日期、交配日期、生育记录和繁殖系谱等。基础群（包括血缘扩大群）的动物不超过5～7代都应能追溯到一对共同祖先。基础群应定期对遗传特性和均一性、病原微生物和寄生虫、环境等检查和监测。基础群动物保种方式：1.平行线式2.单线式3.综合式。也可用于近交系动物的培育（1）平行线式：基础群中的每对全同胞作为一个家系，每个家系繁殖一代后选留一对动物进行全同胞交配，以此类推，以保持基础群。（2）单线式：基础群每对同胞交配繁殖一代后，选留其中一个家系，淘汰其他家系，选中的家系再留数对进行同胞交配繁殖，下一世代仍保留其中一对的后代，淘汰其他后代，如此一代一代繁殖保种。（3）综合式：基础群中每个家系作全同胞交配，每个世代每个家系留一对继续繁殖，若其中某一家系不能继续繁殖下去，则由繁殖力高的一个家系补足，以维持数个家系同步延续，以保证种群和延续。

2.血缘扩大群：种用动物应该来自基础群,，以全同胞兄妹交配方式进行繁殖，设个体繁殖记录卡，血缘扩大群动物不超过5～7代都应能追溯到其在基础群的一对共同祖先。

3.生产群：种动物来自基础群或血缘扩大群。生产群动物一般以随机交配方式进行繁殖。应设繁殖记录卡，生产群动物随机交配繁殖代数一般不应超过4代。

七、封闭群引种

以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖 4 代以上，称为封闭群，亦称远交群（Outbred Stock）。

引种：繁殖用原种的封闭群动物必须遗传背景明确，来源清楚，有较完整的资料（包括种群名称、来源、遗传基因特点及主要生物学特性等）。一般小型啮齿类封闭群动物引种数目不能少于25对。

哈迪-温伯格Hardy-Weinberg定律，也称基因平衡定律。等位基因频率:群体中，一条染色体上某种等位基因数与该染色体上全部等位基因数之比。基因型频率:群体中，某基因型个体数与该群体全部个体数之比。

八、大鼠解剖学特点、肝脏再生、无胆囊、环尾病、裸大鼠的免疫学特点

解剖学特点：

1.门齿终生不断生长，需磨损维持其定。

2.食道与十二指肠相距很近，胃中有一条皱折，收缩时会堵住喷门口，这是大鼠不会呕吐的原因。3.肝脏再生能力强，无胆囊，来自各叶的胆管形成总胆管，开口于十二指肠的乳突上。4.肺结构特别，左肺为1个大叶，右肺分成4叶。5.心脏和外周循环与其他哺乳动物不同。心脏的血液供给既来自冠状动脉，也来自冠状外动脉。6.右肾比左肾靠近头侧，肾为蚕豆形，右侧比左侧稍高。单乳头肾，肾脏前端有一米粒大的肾上腺。7.雌性生殖器呈圆形，有凹沟，子宫为丫型双角子宫，左右子宫角的腔是完全分开的。两个子宫颈独立地开口于阴道。胸部和腹部各有3对乳头。

大鼠无胆囊，肝脏再生能力强，不能呕吐，因此不能用于做催吐实验。

当环境湿度低于40％时，大鼠易患环尾病（环状坏死症）。

裸大鼠的免疫缺陷特征：①免疫器官的组织学与裸小鼠相似，幼龄裸大鼠的解剖发现，有胸腺残迹，内有未分化的上皮细胞，但未见淋巴细胞；②先天性无胸腺，无T细胞，T细胞功能缺失，但B细胞功能正常，NK细胞的活力较正常鼠高。

附：裸大鼠的一般特征：

①体毛稀少，裸大鼠并不像裸小鼠一样完全无毛，而是体毛稀少，尾根往往多毛； ②发育迟缓与裸小鼠一样发育相对较缓慢，体重为正常大鼠的70％左右；

③繁育能力差，由于裸大鼠与裸小鼠一样在妊娠期间乳腺发育缺损，故其繁殖方式同裸小鼠相同，即用纯合子的雄鼠与杂合子的雌鼠交配方式进行繁育；

④易患呼吸道疾病，由于其无胸腺，免疫力低下，因此易感各种疾病，特别是在环境较差时，易感溃疡性气管炎和化脓性支气管炎等，生存时间约6～7个月。

九、豚鼠的补体、常用犬品种

豚鼠特别是老龄雌鼠的血清中含有丰富的补体，是所有实验动物中补体含量最多的一种动物，易引起变态反应。其补体非常稳定，免疫学实验中所用的补体多来源于豚鼠血清。豚鼠是速发型过敏性呼吸道疾病的动物模型，是过敏性休克和变态反应的首选实验动物。常用实验动物接受致敏物质的反应程度不同，其顺序为：豚鼠＞家兔＞犬＞小鼠＞猫＞蛙。（注：变态反应也叫超敏反应，指机体对某些抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。）

国际上用于医学科学研究的常用犬主要有小猎兔犬、墨西哥无毛犬、四系杂交犬、Boxer黑白斑点短毛犬等。

十、兔解剖特点

1．口腔小，上唇分开 齿式为2（门2/1，犬0/0，前臼3/2，臼齿3/3）=28。唾液腺有4对，即腮腺、颌下腺、舌下腺和眶下腺。

2．家兔为单胃。盲肠非常大，占腹腔的1/3。在回盲处有特有的圆小囊。

3．雄兔睾丸可以自由地下降到阴囊或缩回腹腔。雌兔为双子宫，有乳头3～6对。兔为单乳头肾。

4．兔的胸腔构造:纵隔将胸腔分左右两室，互不相通。颈神经血管束中减压神经易于分离。

5．幼兔的消化道发生炎症时，消化道壁即成为可渗透的，这样消化道中的有害物质易被吸收，这就是幼兔腹泻时容易自身中毒而死亡的原因。

十一、动物饲养室有害气体

主要有害气体：氨、甲基硫醇、硫化氢、硫化甲基、甲基丁烷、三甲胺、苯乙烯、乙醛和硫化二甲基。

附：信息素（pheromone）或叫引物信息素（primer pheromone）

①Lee-Boot效应，是指小鼠群养时常常发生假性妊娠和发情周期混乱的现象。

②Whitten效应，是指由于雄性动物分泌的信息素促使雌性动物的发情周期出现有规律的现象。③Bruce效应，是指怀孕初期的雌性小鼠与交配对象以外的雄性接近或同居时产生的中止妊娠反应。

十二、动物实验前准备：

准备工作的内容有： 1.饲养室和饲养器具的准备 2.动物数目的确定 3.动物的购入 4.动物的称重

5.动物的分组标记及动物的管理等。

动物的购入时注意事项 ：

1．各项实验前的准备工作是否已落实，如动物笼具数量、清洁卫生情况、动物观察室内是否已消毒。

2．购入动物时应向供应部门索取动物的遗传背景资料、实验动物有效的质量合格证、实验动物微生物控制的检查资料以及动物的年龄和健康等方面的资料。

3．如若是清洁级以上级别的动物，其运输工具应严格检查密封状况。购入动物回到实验室的时间不宜太长。如若是长途运输，还应考虑到途中各种因素对动物的影响，如运输环境的温度、湿度、饮食等等。尤其要注意动物在途中不能被污染和引起窒息死亡。

4．动物健康检查：应对购入动物的健康情况进行详细检查，检查包括：（1）外观。一般常发生异常的部位及其外观检查内容有：

皮毛：有无光泽和脱毛变化。

口腔：流涎、出血、粘膜汤疡、口臭等。

鼻腔：鼻汁、出血、干燥（有些动物鼻镜干燥）。

眼：眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等。

耳：外伤、耳壳曲折、贫血、中耳炎等。

尾：弯曲、断折等。

四肢：弯曲、脱臼、外伤、关节炎等。

肛门：下痢、血便、脱肛等。

（2）营养状况。被毛逆立、精神倦怠、瘦弱或过肥等属于营养不良。（3）饲料、水摄入量。有无采食减少、食欲低下、过食等。

（4）动物状态。不活动、转圈运动、卧地不起、跛行、痉挛等属不正常。

十三、动物分组标记

1．染色法

染色法是用化学试剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染，或用不同颜色等来区别各组动物，是实验室最常用、最容易掌握的方法。常用的标记液有：①3％～5％苦味酸溶液（黄色）。②0.5％中性红或品红浴液（红色）。③2％硝酸银溶液（咖啡色，涂后需光照10分钟）。④煤焦油酒精溶液（黑色）。

标记时用标记笔蘸取上述溶液，在动物体表不同部位涂上斑点，以示不同号码。编号的原则是：先左后右，从前到后。2．烙印法 3．挂牌法

4．耳孔法

一般来说，小型动物适宜用耳孔法和染色法，中型动物适用挂牌法和烙印法。

十四、影响动物和实验的因素

• 气候因素（温度、湿度、气流速度等）• 理化因素（照明、声音、气味等）• 居住因素（房屋、笼具、垫料等）

• 同种动物间因素（饲养密度、社会地位、势力范围等）

附：

1、实验动物科学的定义：是研究实验动物和动物实验的一门新兴学科。

2、实验动物:略。动物实验:以实验动物为材料，采用各种手段和方法在实验动物身上进行实验，研究实验过程中实验动物的反应、表现及其发生机制、发展规律，以探讨生命科学的疑难问题。

3、种（Species）：是生物学分类系统中最基本单位。同种间可相互交配且后代有繁殖能力的同一类的动物。

品种（Stock，Breed）：是研究者根据不同需要而对同一“种”的动物进行改良和选择（即定向培育），并具有某种特定外形和生物学特征，并能较稳定地遗传的动物群体。

品系（Strain）：指动物群体来源明确，在其内部采用某种交配方法繁殖，个体间具有相似的外貌、群体内都有独特的生物学特征和基本稳定的遗传特性，可用于不同实验目的的动物群体。

亚系（Substrain）：是由同一个近交系分离出来的具有各不相同特性的品系。残余杂合性和突变而导致部分遗传组成的改变。

支系(Subline)：是指品系或亚系经过人工技术处理后称为支系。

4、普通动物（conventional animal，CV；一级动物）：指不携带主要人兽共患病病原和动物烈性传染病病原的动物。仅可用于示教、科研的探索方法、预试之用。清洁动物（clean animal，CL；二级动物）：指除普通级动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原的动物。

无特定病原体动物（specific pathogen free animal，SPF；三级动物）：指除普通、清洁级动物应排除的病原外，还不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的动物。

无菌动物（germ free animal，GF；四级动物）：指无可检出一切生命体的动物。

悉生动物（gnotobiotic animal，GN；四级动物）：又称已知菌（丛）动物，饲养于隔离系统。具有更强的生活力和抵抗力，更易于饲养管理。

第四篇：实验动物学实验报告

实验动物学实验报告

一、实验动物：小鼠

二、操作流程：抓取，固定，编号，给药，取血，麻醉，绝育，解剖。

三、具体操作

1、抓取：抓取小鼠时，右手抓住小鼠尾巴，不要过于用力，以免惊吓小鼠。左手从小鼠身体后部向前抓（以免小鼠向后缩咬伤自己），抓住小鼠颈部。固定住小鼠后，将小鼠皮肤往上抓，尽量将小鼠背部皮肤抓住。左手将小鼠腹部朝向自己，把小鼠尾巴用左手无名指和小指夹住，这时小鼠腹部皮肤紧绷，不能动弹。

2、固定： 通常使用固定器进行固定。将固定器拧开后，抓住小鼠尾巴，使其钻入固定器中，再将拧下的固定器部分装好，使小鼠尾部露出，再将可旋转的铁片固定住即可进行后续实验。

3、编号：编号方式有两种：①剪脚趾编号：把小鼠腹面朝上，在下的脚趾从左至右依次编为1~10号，剪10号脚趾加1~9号脚趾依次编为11~19号，在上的脚趾依次编为20,30,40,50,60,70,80,90号，其余编号与11~19号类似。②打耳钉编号：耳钉上均有唯一编号，通过使用耳钉钳将耳钉打在小鼠耳朵上即可。实验时通常使用的是第一种方式进行编号，第二种编号通常用于需要长距离运输的动物。

4、给药：常用的给药方式有：

①口服给药：即灌胃。将注射器装入药物溶液，装上灌胃针（灌胃针有直头和弯头两种，区别不大）。如上所述，抓取小鼠后，使其头部朝上，尽量呈一直线，取灌胃针，从小鼠嘴角一侧缓缓插入（保持刻度在自己能看到的位置），顺着小鼠口腔食道的弧度让小鼠将针咽入，灌胃过程中如果遇到阻碍一定要及时拔出灌胃针，不可强行灌胃以免伤及小鼠食道以及肺部。灌胃针顺利进入后基本与小鼠身体呈一条直线，注入适量体积后再顺着食道缓缓取出灌胃针。

②静脉注射：小鼠尾部有3条静脉和1条动脉，3条静脉非别位于背部，及两侧。静脉注射时一般选取两侧静脉，因为其相对于背部静脉更为清晰饱满。将小鼠固定后，用酒精擦拭其尾部静脉，使其充血，以便注射。之后使注射器针孔处朝上，针与尾部呈约30°扎入尾部后向上轻挑，再向内扎入部分，此过程应该比较顺畅，没有阻碍，若阻碍较大则有可能扎入到了皮肤中。扎入后将活塞向后回抽一点可见到有血回流，则说明成功扎入静脉当中，注射适当体积后迅速拔针，用酒精进行消毒。

5、取血：有断尾取血法和眼眶取血法两种。本次实验使用的是眼眶取血法。抓取小鼠，固定其头部用手指将其上下眼睑分开，露出其眼球并且不能闭上。用玻璃毛细管从其上眼角处扎入眼球后方毛细血管从，使血液顺着毛细管留下，取血完成后快速将毛细管取下。

6、麻醉：抓取老鼠，使其头部朝下，使其腹部脏器向胸腔靠拢，露出腹部空腔，以免刺伤脏器。将注射器竖直扎入靠近后腿部腹腔，刺入之后稍微向前倾斜但不要向前刺入，一般注入0.5mL麻醉剂即可。随后拔出针，方向小鼠，等待几分钟后即可麻醉。

7、绝育：绝育手术是通过剪除雌鼠卵巢或雄鼠输精管来实现的。将麻醉的雌鼠背面朝上，从其胸腔和尾部之间向下三分之一处剪开一个小口，用镊子将其卵巢取出，上面呈现红色斑点的部分即为卵巢，用剪刀将这一部分剪除，然后用缝合针线将其缝合，缝合方法为将针穿过后，将线缠绕镊子两圈再逆时针缠绕两圈，再重复缠绕一遍，将镊子夹住线头把缠绕的线移至线头系紧即可（缝合过程全程用镊子和剪刀操作），里面肌肉层以及外面皮层均需缝合。雄鼠则从外生殖器向上1-2cm处剪开小口，用镊子在其中找出输精管（较细长的乳白色小管），尽量多减掉一些，以免其长长愈合，以上述方法缝合伤口即可。

9、解剖：以颈椎脱臼法处死小鼠，使其腹面朝上。用镊子将其腹部皮肤夹起，然后用剪刀剪开，观察各个器官所在位置和形态，解剖完的小鼠放入尸体袋中。

第五篇：实验动物学实验

实验一 常用实验动物技术介绍

目的

了解并熟悉实验动物实验操作的基本方法和技术。内容

注射方法；麻醉方法；动物编号的方法；采血；动物性别鉴定；动物的致死。学习打结、缝合、固定动物等。播放录像《太行山猕猴》、《动物的捉拿和给药途径》。用品

大白鼠、小白鼠、蟾蜍、家兔，常用手术器械、注射器、小木锤、大小鼠固定器，戊巴比妥钠，乙醚、士的宁、乙醚、氯仿、氯化钾、一氧化碳、二氧化碳

常用实验动物性别鉴定

1、大、小鼠的性别鉴定

离乳仔鼠性别鉴定主要以生殖器与肛门之间的距离长短及肛门与生殖器有无被毛为标志。识别要点是：① 雄性的生殖器与肛门之间的距离较远，雌鼠较近；② 雄性的生殖器与肛门之间有毛；③ 雄性的生殖器突起较雌鼠大；④ 雌鼠乳头较雄鼠明显。成熟后，雄性可见阴囊,雌性乳头明显而易于区分。

2、豚鼠的性别鉴定

豚鼠的性别鉴定主要是通过生殖器形态来判断。雌性外生殖器阴蒂突起比较小，用拇指按住阴蒂突起，余指拨开大阴唇的皱褶，可见阴道口呈”V”形（注意发情间期的闭锁现象，即一种除了发情和分娩时外，关闭阴道口的细胞结构）；雄性外生殖器有包皮覆盖的阴茎小隆起，用拇指按住其基部包皮，可见龟头向外突出。

3、兔子的性别鉴定

幼兔的性别鉴定主要以尿道开口部与肛门之间的距离及尿道开口部的形状来判别。哺乳期仔兔，雄性尿道开口部与肛门之间的距离较远，为雌性的1.5－2倍，雌性较近。雌性尿道开口扁形，大小与肛门同；雄性圆形，略小于肛门。1月龄仔兔，雄性生殖孔呈圆形，翻出可见呈圆柱体的突起；雌性生殖孔呈Y形，翻出仅见有裂缝，裂缝及于肛门。3月龄以上成年兔，雄性阴囊明显而雌性无阴囊；雄性头大短而圆而雌性头小略呈长形。

4、猫的性别鉴定

幼猫的性别是根据生殖器与肛门的距离来判断。距离远者为雄性，距离近者为雌性。

5、猴类的性别鉴定

猴类性别的区分较为困难。首先检查尿道开口，许多雌性动物有较大的阴蒂，其腹侧形成沟状通向尿道口，而雄性动物的尿道开口在阴茎头上。触摸阴囊内是否有睾丸是确定其雌雄的最可靠办法。

常用实验动物处死

大鼠和小鼠的处死方法

1、脊椎脱臼法

右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头，将脊髓 与脑髓拉断，鼠便立即死亡。

2、断头法

实验者戴上棉纱手套，用右手握住大鼠头部，左手握住背部，露出颈部，助手用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉。小鼠处死法相同。

3、击打法

右手抓住鼠尾，提起，用力摔击其头部，鼠痉挛后立即死亡。用小木锤用力击打鼠头部也可致死。

4、急性大失血法

可采用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使大小鼠立即死亡。

5、化学致死法

吸入一氧化碳，大、小鼠在一氧化碳浓度为0.2-0.5%环境中即可致死。皮下注射士的宁，吸入乙醚、氯仿，均可致死。士的宁注射量，小鼠为0.76～2.0mg/kg体重，大鼠3.0-3.5ml/kg体重。氯化钾处死大鼠剂量：25%溶液0.6ml/只静脉注入。

实验动物的处死方法很多，应根据动物实验目的、实验动物品种（品系）、以及需要采集标本的部位等因素，选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法，都应遵循安乐死的原则。安乐死是指在不影响动物实验结果的前提下，使实验动物短时间无痛苦地死亡。处死实验动物时应注意，首先要保证实验人员的安全；其次要确认实验动物已经死亡，通过对呼吸、心跳、瞳孔、神经反射等指征的观察，对死亡作出综合判断；再者要注意环保，避免污染环境，还要妥善处理好尸体。

一、颈椎脱臼处死法

此法是将实验动物的颈椎脱臼，断离脊髓致死，为大、小鼠最常用的处死方法。操作时实验人员用右手抓住鼠尾根部并将其提起，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，用左手拇指、食指用力向下按压鼠头及颈部，右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方，造成颈椎脱臼，脊髓与脑干断离，实验动物立即死亡。

二、断头处死法

此法适用于鼠类等较小的实验动物。操作时，实验人员用左手按住实验动物的背部，拇指夹住实验动物右腋窝，食指和中指夹住左前肢，右手用剪刀在鼠颈部垂直将鼠头剪断，使实验动物因脑脊髓断离且大量出血死亡。

三、击打头盖骨处死法

主要用于豚鼠和兔的处死。操作时抓住实验动物尾部并提起，用木锤等硬物猛烈打击实验动物头部，使大脑中枢遭到破坏，实验动物痉挛并死亡。

四、放血处死法

此法适用于各种实验动物。具体做法是将实验动物的股动脉、颈动脉、腹主动脉剪断或剪破、刺穿实验动物的心脏放血，导致急性大出血、休克、死亡。

犬、猴等大动物应在轻度麻醉状态下，在股三角做横切口，将股动脉、股静脉全部暴露并切断，让血液流出。操作时用自来水不断冲洗切口及血液，既可保持血液畅流无阻，又可保持操作台清洁，使实验动物急性大出血死亡。

五、空气栓塞处死法

处死兔、猫、犬常用此法。向实验动物静脉内注入一定量的空气，形成肺动脉或冠状动脉空气栓塞，或导致心腔内充满气泡，心脏收缩时气泡变小，心脏舒张时气泡变大，从而影响回心血液量和心输出量，引起循环障碍、休克、死亡。空气栓塞处死法注入的空气量，猫和兔为20~50ml，犬为90~160ml。

六、过量麻醉处死法

此法多用于处死豚鼠和家兔。快速过量注射非挥发性麻醉药（投药量为深麻醉时的30倍），或让动物吸入过量的乙醚，使实验动物中枢神经经过过度抑制，导致死亡。应用戊巴比妥钠注射麻醉致死。豚鼠可用其麻醉剂量3倍以上剂量腹腔注射。猫可采用本药麻醉量的2～3倍药量静脉注射或腹腔内注射。兔可用本药80～100ml／kg的剂量急速注入耳缘静脉内。狗可用本药100mg／kg静脉注射。

七、毒气处死法

让实验动物吸入大量CO2等气体而中毒死亡。吸入二氧化碳，此法安全、人道、迅速，被认为是处理啮齿类的理想方法，国外现多采用此法。可将多只动物同时置入一个大箱或塑料袋内，然后充入CO2，动物在充满CO2的容器内l～3min内死去。

人类为什么总拿小白鼠做实验？

原因一：

老鼠中的小白鼠的基因序列和人类的差不多，一些医学的科研和临床实验都是有小白鼠来完成的。当中以小白鼠做遗传学实验很好，因为它的全基因组和人类的相似度极高，很多人类难以治愈的疾病可以在小白鼠身上找到相似性状，从而加以实验发现治病基因。

原因二：

实验专用白鼠的生物学意义较大，纯系小鼠的培育方法经过百年探索已经形成固定流程，培育出的小鼠几乎完全没有个体差异(生理上)，而在一般的自然种群中,同种动物间的个体差异是很大的(尽管外表相同)，主要表现在先天的身体素质上。生理上没有个体差异是否意味着气质上没有差异尚不明了，不过选择纯系实验白鼠主要还是为了尽可能的减少先天的个体差异。

原因三：

数量充足，许多实验需要统计学分析，这就要求一定的数量，大白鼠和小白鼠，特别是小白鼠，在人工繁殖条件下，能满足这一要求。种系纯，好的实验要对实验动物的品种严格控制，这用小白鼠就容易解决。

还有动物等级，小白鼠好歹也是哺乳动物，除了体形小，与其它哺乳动物的进化水平相比并不差。体形小反而成为人工繁殖喂养的有利条件。

原因四：

其实很多实验用猩猩等与人更近似的动物做最好，但使用猩猩太昂贵了。许多实验，比如认知类的，实验结束后时需要将动物杀死，来检查其内部变化的。这样，大量的实验肯定就不能用比较“贵重”的猩猩了。

实验

二、常用实验动物采血、血细胞计数

1、小白鼠的采血 目的：

了解并熟悉小白鼠的采血方法； 掌握小白鼠眼眶后静脉丛采血。

用品: 二甲苯棉球、1%肝素溶液、1%可卡因、乙醚、刀片、无钩弯镊子、弯止血钳、微量采血针、剪刀、剪毛剪、锋利刀片、注射器。内容：

1、剪尾采血：需血量少时可用此方法。将动物固定，显露尾部，将尾尖剪去约5mm，从尾根部向尾端部按摩，血即从断端流出。若用二甲苯棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟，使尾部血管充盈，可采到较多的血，但注意二甲苯可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出，采血后，消毒，止血。如将动物麻醉取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml，大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。

2、摘眼球采血：此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物，压迫眼球，尽量使眼球突出，右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球，立即将鼠倒置，头朝下，眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活，可采另一侧眼球取血。

3、眼眶后静脉丛采血：用7—10cm长的微量采血针。将取血管浸入1%肝素溶液，干燥后使用。采血时，左手拇指和食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定，并用中指配合，轻轻压迫颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静脉丛充血。可用少量1%可卡因滴入动物眼内，使眼部局部麻醉。右手持取血管，将其尖端插入内眼角与眼球之间，轻轻向眼底方向刺入，小鼠刺入约2—3mm，大鼠刺入约4—5 mm，当感到有阻力时即停止刺入，旋转取血管以切开静脉丛，血液即流入取血管中，采血结束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。用本法短期内可重复采血。小鼠一次可采血0.2—0.3 ml，大鼠一次可采0.5—0.1ml。

4、颈静脉或颈动脉采血：将鼠麻醉，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。

5、断头采血：操作者左手拇指和食指握住鼠颈部，头朝下，用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部，提起动物，血液即可流入准备好的容器中。

6、心脏采血：将动物麻醉，使其仰位固定，剪去胸前区毛，消毒皮肤，在左侧第3—4肋间选择心博最强处穿刺，血液借心脏跳动的力量进入注射器。亦可在动物麻醉后，切开动物胸腔，直视心脏内抽血或剪破心脏，直接用注射器、吸管等吸血。

2、豚鼠的采血 目的

了解并熟悉豚鼠的采血方法； 用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、20%的柠檬酸钠溶液、纱布、脱脂棉。

方法与步骤：

1、耳缘切口采血：先将豚鼠耳消毒，用刀片割破耳缘，在切口边缘涂上20%的柠檬酸钠溶液，防止血凝，则血可自切口处流出。此法采血每次可采0.5ml左右。

2、背中足静脉采血：固定豚鼠，将其右或左后肢膝关节伸直，脚背消毒，找出背中足静脉，左手拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手将注射针刺入静脉，拔针后立即出血。采血后用纱布或脱脂棉压迫止血。

3、心脏采血：选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏，血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些，以免发生采血后穿刺孔出血。

3、家兔的采血 目的 了解并熟悉家兔的采血方法； 掌握家兔的耳缘静脉采血方法。用品

常用手术器械、玻璃取血管、计数板、注射器、显微镜。内容

1、耳缘静脉采血：将兔固定，拔去耳缘静脉局部的被毛，消毒，用手指轻弹兔耳，使静脉扩张，用针头刺耳缘静脉末端，血液即流出。本法为兔最常用的采血方法，可多次重复使用。

2、耳中央动脉采血：在兔耳中央有一条较粗的、颜色较鲜红的中央动脉。用左手固定兔耳，右手持注射器，在中央动脉的末端，沿着与动脉平行的向心方向刺入动脉，即可见血液进入针管。由于兔耳中央动脉容易痉挛，故抽血前必须让兔耳充分充血，采血时动作要迅速。采血所用针头不要太细，一般用6号针头，针刺部位从中央动脉末端开始，不要在近耳根部采血。

3、颈静脉采血：将家兔麻醉，剪去一侧颈部外侧被毛，作颈静脉或颈动脉分离手术，用注射器即可抽出所需血量。也可插入导管，反复采血。

4、心脏采血：穿刺部位在第三肋间胸骨左缘1mm处，选心跳最明显的部位把注射针刺入心脏，血液即流入针管。心脏采血时所用的针头应细长些，以免发生采血后穿刺孔出血。

4、小白鼠RBC、WBC计数 目的

1、复习小白鼠眼眶后静脉丛采血；

2、学习微量采血法和红、白细胞计数法。原理

用加有抗凝剂的溶液将定量的血液稀释，滴入血细胞计数室内，于显微镜下计数，求出一定容积的稀释血液中的RBC、WBC数，再将其换算成1L血液中的RBC、WBC个数。用品

血细胞计数板、计数器、显微镜、微量吸血管、酒精棉球、消毒脱脂棉球、RBC稀释液（0.9%NaCl溶液）或RBC稀释液：NaCl（维持渗透压）0.5g，Na2SO4（使溶液比重增加，红细胞均匀分布不易下沉）2.5g，HgCl2（固定红细胞并防腐）0.25g，蒸馏水加至100ml。

WBC稀释液，其成分为：冰醋酸1ml（破坏红细胞），1%龙胆紫1ml（染白细胞核，便于计数），加蒸馏水至100ml。方法与步骤

1、熟悉血细胞计数板和微量吸血管的构造

（1）计数板是一块厚厚的长方形玻璃板，板的中部有四条直槽，内侧两槽中间有一条横槽，把中部隔成两个长方型的平台。此平台比整个玻璃板的平台低0.1mm，当放上盖玻片后，平台与盖玻片之间的高度为0.1mm,平台中部有3mm×3mm精确划分的9个大方格，称为计数室,每个大方格的面积为1mm×1mm=1mm2, 体积为0.1mm3。中央的大方格则由双线精确划分为25个中方格，每个中方格的面积为0.2mm×0.2mm=0.04mm2,体积为0.004mm3,每个中方格又用单线精确划分成16个小方格。适用于RBC计数。

（2）微量吸血管 一次性玻璃细管，以防交叉感染。该管长12cm，在4.5cm处和9cm处各有一定量标记，分别10μl和20μl。在11cm处有一色标，为连 结橡胶吸头的标记。

2、微量采血和稀释

（1）先准确吸取3.98mlRBC稀释液于一洁净的试管内。

（2）手持微量吸血管，将其管口浸入血滴，缓缓吸入血液至20μl处，如吸入血液稍过量，可用手指或干棉球轻触管口，缓缓转动，可使血液吸出，至恰好与刻度相符。用干棉球将管口外面的血液擦拭干净。将血液加入到准备好的RBC稀释液中。注意，应将采血管垂直插入稀释液底部，缓缓挤出血液使之不扩散，轻吸上清液再挤出，使血液完全转入到试管中。

（3）将血液和稀释液混匀。

3、充液

取洁净计数板及盖玻片，将盖玻片平放在计数板的计数室上。用干净吸血管或小吸管吸少量混匀的RBC稀释液，然后将管口斜置于盖玻片边缘的计数板毛玻璃斜面上，挤出少量稀释液，此时液体即由于毛细管作用而进入计数室内。但须注意，如果计数室内留有气泡或稀释液过多以致溢出室外的凹沟中，都应该洗去，再重新充液。

4、计数

充液后应让计数板静置8min，待RBC充分下沉后方可进行计数。先在低倍显微镜下观察RBC分布是否均匀，如果分布很不均匀，应洗去重做。在低倍镜下找到中央大方格，看清其横、竖线后即可用高倍镜来计数。显微镜的光圈应缩小并降低聚光器使得视野较暗，这样RBC的轮廓可更清楚些。通常选择中央大方格四角的4个中格和中央的1个中格来计数。计数为了防止遗漏，应按一定的顺序：即第一行先从左向右数到最后一格，下一行则从右向左数，以此类推。对于分布在双线上的RBC，则可计数左侧和上方线上的RBC，即按照“数上不数下，数左不数右”的原则。计数时应将每个中格的RBC数记录下来，若发现各中格之间的RBC数相差超过15个时，表示其分布不均匀，应将计数室洗净，重新摇匀吸管中的稀释血液，再充液进行计数。

5、计算

RBC的稀释倍数为200倍：（0.02ml+3.98ml）/0.02ml=200 计数室5个中格的总容积为0.02mm3，设5个中格RBC总数为X，则1mm3稀释液RBC总数为X×50个。由此可知，每毫升血液中实际RBC数目：X×50×200个，即10000X，再乘以106得出每升血液中的RBC数。WBC基本与RBC相同，不同之处：

1、WBC稀释液，其成分为：冰醋酸1ml（破坏红细胞），1%龙胆紫1ml（染白细胞核，便于计数），加蒸馏水至100ml。

2、计数板四角的四个大方格又各分为16个中方格，适用于WBC计数。

3、吸取WBC稀释液为0.38ml，血液稀释了20倍。

4、在计数WBC时，计数四角的4个大方格中的WBC总数。其总容积为0.4mm3,换算成每升血液中的WBC数时，4个大方格内WBC数×2.5×20×106=WBC数/L。

5、计数时，如发现大方格之间的WBC数相差超过10个时，表示WBC分布不均匀，应重新充液计数。思考题：

1、在实际操作中，你认为哪种采血方法效果好？为什么？

2、小结在操作过程中，哪些因素可能影响计数的准确性？ 实验

三、常用实验动物的给药、胰岛素惊厥

1、小白鼠的给药 目的：

1、了解并熟悉小白鼠、豚鼠、家兔的给药方法；

2、掌握小白鼠的皮下注射、腹腔注射。

3、了解胰岛素调节血糖水平的机能。

用品：小鼠专用灌胃针、注射器、75%酒精棉球。

内容：

1．灌胃给药

小鼠专用灌胃针由注射器和喂管组成，喂管长约1nm，喂管尖端焊有一金属小圆球，金属球中空，用途是防止喂管插入时造成损伤。金属球弯成20度角，以适应口腔与食道之间弯曲。将喂管插头紧紧连接在注射器的接口上，吸入定量的药液；左手捉住小鼠，右手拿起准备好的注射器。将喂管针头尖端防放进小鼠口咽部，顺咽后壁轻轻往下推，喂管会顺着食管滑入小鼠的胃，插入深度约3cm。用中指与拇指捏住针筒，食指按着针竿的头慢慢往下压，即可将注射器忠的药液灌入小鼠的胃中。在插入过程中如遇到阻力或可看见1/3的针管，则江喂管取出重新插入，因为这时灌胃并没有插入胃中。

2．注射给药

（1）皮下注射给药

皮下注射给药是将药液推入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环的过程。作皮下注射常选项背或大腿内侧的皮肤。操作时，常规消毒注射部位皮肤，然后将皮肤提起，注射针头取一钝角角度刺入皮下，把针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻，以防止药物外漏。注射量约为0.1-0.3ml/10g体重。

（2）皮内注射给药

是将药液注入皮肤的表皮和真皮之间，观察皮肤血管的通透性变化或皮内反应，接种、过敏实验等一般作皮内注射。先将注射部位的被毛剪掉，局部常规消毒，左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连接4.5针头穿刺，针头进入皮肤浅层，再向上挑起并梢刺入，将药液注入皮内。注射后皮肤出现一白色小皮丘，而皮肤上的毛孔极为明显。注射量为0.1ml/次。

（3）肌肉注射给药

小鼠体积小，肌肉少，很少采用肌肉注射。当给小鼠注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时，采用肌肉注射。操作时1人保定小鼠，另一人用左手抓住小鼠的1条后肢，右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈60°角迅速插入1/4，注入药液。用药量：不超过0.1ml/10g体重。

(4)静脉注射给药

将小鼠放在金属笼或鼠夹中，通过金属笼或鼠夹的孔拉出尾巴，用左手抓住小鼠尾巴中部，小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉，2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面，3条静脉呈品字型分布，一般采用左右两侧的静脉。拔去沿尾部静脉走向的毛，置尾巴于45-50℃温水中浸泡几分钟或用75%酒精棉球反复擦拭尾部，以达到消毒和使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的。当尾部静脉注射时,以左手拇指和食指捏住鼠尾两恻，使静脉更为充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指夹住尾巴的末梢，右手持4号针头注射器，使针头与静脉平行(小于30° 角)，从尾巴的下1/4处进针，开始注入药物时应缓慢，仔细观察，如果无阻力，无白色皮丘出现，说明已刺入血管，可正式注入药物。有的实验需连日反复尾静脉注射给药，注射部位应尽可能从尾端开始，按次序向尾根部移动，更换血管位置注射给药。注射量为0.05-0.1ml/10g体重。拔出针头后，用拇指按住注射部位轻压1-2min，防止出血。

（5）腹腔注射

左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，鼠头略低于尾部，右手持注射器将针头在下腹部近腹白线的两侧进行穿刺，针头刺入皮肤后进针3nm左右，接着使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。注射量为0.1-0.2ml/10g体重。

2、豚鼠的给药

1）皮下注射给药

皮下注射部位取颈背、腋下、侧腹或豚鼠后大腿的内侧，注射时以左手拇指和食指提起豚鼠皮肤，将连有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。

2）肌肉注射给药

选用大腿外侧肌肉进行注射。操作时1人保定豚鼠，另一人用左手抓住豚鼠的1条后肢，右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈60°角迅速插入1/4，注入药液。用药量：不超过0.1ml/10g体重。

3、家兔的给药

1）静脉注射 兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定，故不用。外缘静脉表浅易固定，常用。先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺入，移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。

2）皮下注射 注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。

3）肌肉注射

肌肉注射应选肌肉发达，无大血管通过的部位，一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉，回抽针栓如无回血，即可进行注射。

4）腹腔注射

用家兔做实验时，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。

小白鼠胰岛素惊厥

基本原理

胰岛素是调节机体血糖的激素之一，当体内胰岛素含量增高时，便引起血糖下降，动物出现惊厥现象。动物与器材

小白鼠数只、1ml注射器、鼠笼、胰岛素溶液（2μ/ml）、50%葡萄糖溶液、酸性生理盐水。方法与步骤

1．取4只小白鼠称重后，分实验组和对照组，每组2只。2．给实验组动物腹腔注射胰岛素溶液（0.1ml/10g体重）。3．给对照组动物腹腔注射等量的酸性生理盐水。4．将两组动物都放在30—37℃的环境中，并记下时间，注意观察并比较两组动物的神态、姿势及活动情况。

5．当动物出现角弓反张、乱滚等惊厥反应时，记下时间，并立即皮下注射葡萄糖溶液（0.1ml/10g体重）。

6．比较对照组动物、注射葡萄糖的动物、以及出现惊厥而未经抢救的动物的活动情况，并分析所得的结果。注意事项

1．动物在实验前必须饥饿18—24h。2．一定要用pH2.5—3.5的酸性生理盐水配制胰岛素溶液。因为胰岛素在酸性环境中才有效应。

3．酸性生理盐水的配制将10ml0.1mol/LHCl加入300ml生理盐水中，调整其pH值在2.5—3.5，如果偏碱，可加入同样浓度的盐酸调整。

4．注射了胰岛素的动物最好放在30—37℃环境中保温，夏天可为室温，冬天则应高些，可到36—37℃。因温度过低，反应出现较慢。思考题

试分析糖尿病产生的原因及治疗方法。

实验

四、实验动物的全身麻醉、损毁小白鼠小脑的效应

1、实验动物的全身麻醉 目的：

了解影响实验动物麻醉的因素； 了解并熟悉实验动物的麻醉方法； 掌握大、小白鼠的吸入麻醉法。原理：

麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。

全身麻醉方法：麻醉药经呼吸道吸入或静脉、肌肉注射，产生中枢神经系统抑制，呈现神志消失，全身不感疼痛，肌肉松弛和反射抑制等现象，这种方法称全身麻醉。其特点为抑制深浅与药物在血液内的浓度有关，当麻醉药从体内排出或在体内代谢破坏后，动物逐渐清醒，不留后遗症。

用品：注射器、乙醚、戊巴比妥钠、硫喷妥钠、氨基甲酸乙酯、内容：实验动物的麻醉是一项复杂系统的工作。正确的麻醉处理，是动物实验成功的有力保障。而麻醉处理不当，会给实验结果带来难以分析的误差。要想获得良好的麻醉效果，除掌握实验动物麻醉的基本知识和技术、遵循科学的麻醉程序外，还应了解影响实验动物麻醉的各种因素，如动物因素、环境因素等。

1、动物因素

1、年龄和体重

动物对药物的反应随年龄的不同而有差异。有人将大鼠、小鼠按年龄分成幼年、成年和老年3组，观察年龄对乙醇、戊烷和二氯乙烷等急性毒性的影响。按LD50及麻醉浓度观察，敏感性显示为幼年>成年>老年。

体重小的动物每单位体重的基础代谢率较大动物高，因此，动物越小，每单位体重所需的麻醉药剂量越大。一些慢性实验，观察时间较长，可选择年幼、体重较小的动物做实验。

2、性别 实验证明，不同性别的动物对同一药物的敏感性不同，对各种刺激的反应也不尽一致，雌性动物性周期不同阶段和怀孕、授乳时的机体反应性有较大的改变，因此，一般情况优先选雄性动物或雌雄各半做实验。

3、生理和健康状况 体瘦、肌肉发达的动物较脂肪多的动物所需麻醉药量大，这是因为相对非代谢组织，其基础代谢率较低。活动可增加代谢率，因此，好动的动物所需的麻醉量大。身体状况差的动物，所需麻醉药量小耐受性降低。易发生中毒现象。

4、动物饲养

保证足够的营养供应是维持动物健康的重要因素，其中饲料对动物的关系更为密切。动物的生长、发育、繁殖、抵御疾病的能力及一切生命活动都依赖于营养丰富的饲料。动物在麻醉之前一周应提前到位，给于精心的饲养管理，使其处于良好的健康状态。

2、环境因素

1、温度

在一定范围内，温度缓慢的变化，机体可以进行自动调节与之相适应。但变化莫测过大或过急，对机体将产生行为和生理等不良影响。因此，实验环境温度过高或过低都能导致机体抵抗力下降，对麻醉药物的敏感性升高，易发生中毒现象。因此影响麻醉效果。

2、湿度；

3、空气的流速和清洁度 方法：

1.吸入麻醉法 麻醉药以蒸气或气体状态经呼吸道吸入而产生麻醉者，称吸入麻醉，常用乙醚作麻醉药。吸入法对多数动物有良好的麻醉效果，其优点是易于调节麻醉的深度和较快的终止麻醉，缺点是中、小型动物较适用，对大型动物如狗的吸入麻醉操作复杂，通常不用。

具体方法是：使用乙醚麻醉兔及大小鼠时，可将动物放入玻璃麻醉箱内，把装有浸润乙醚棉球的小烧杯放入麻醉箱，然后观察动物。开始动物自主活动，不久动物出现异常兴奋，不停地挣扎，随后排出大小便。渐渐地动物由兴奋转为抑制，倒下不动，呼吸变慢。如动物四肢紧张度明显减低，角膜反射迟钝，皮肤痛觉消失，则表示动物已进入麻醉，可行手术和操作。在实验过程中应随时观察动物的变化，必要时把乙醚烧杯放在动物鼻部，以维持麻醉的时间与深度。2.注射麻醉法 常用的麻醉药有戊巴比妥钠、硫喷妥钠、氨基甲酸乙酯等。大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法进行全身麻醉。狗、兔等动物既可腹腔注射给药，也可静脉注射给药。在麻醉兴奋期出现时，动物挣扎不安，为防止注射针滑脱，常用吸入麻醉法进行诱导，待动物安静后再行腹腔或静脉穿刺给药麻醉。在注射麻醉药物时，先用麻醉药总量的三分之二，密切观察动物生命体征的变化，如已达到所需麻醉的程度，余下的麻醉药则不用，避免麻醉过深抑制延脑呼吸中枢导致动物死亡。注意事项

1、麻醉剂的用量，除参照一般标准外，还应考虑个体对药物的耐受性不同，而且体重与所需剂量的关系也并不是绝对成正比的。一般说，衰弱和过胖的动物，其单位体重所需剂量较小，在使用麻醉剂过程中，随时检查动物的反应情况，尤其是采用静脉注射，绝不可将按体重计算出的用量匆忙进行注射。

2、动物在麻醉期体温容易下降，要采取保温措施。

3、静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，应立即停止注射。配制的药液浓度要适中不可过高，以免麻醉过急；但也不能过低，以减少注入溶液的体积。

4、作慢性实验时，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。思考题

小结在操作过程中，哪些因素可能影响实验动物麻醉效果？

常用的麻醉剂

动物实验中常用的麻醉剂分为三类，即挥发性麻醉剂、非挥发性麻醉剂和中药麻醉剂。1.挥发性麻醉剂 这类麻药包括乙醚、氯仿等。乙醚是常用的吸入麻醉剂，乙醚挥发性很强，有特殊的气味，为易燃品，适用于各种动物（鸡除外），乙醚的作用是抑制中枢神经系统。其特点是安全范围大，肌肉能完全松弛，对肝和肾的毒性较小，麻醉的诱导期和苏醒较短，动物麻醉深度容易掌握，而且麻醉后苏醒较快。其副作用是对呼吸道和结膜刺激性强，胃肠道反应增高，局部刺激作用大，可引起上呼吸道黏膜液体分泌增多，易发生呼吸道阻塞，使用时应小心。2.非挥发性麻醉剂 这类麻醉剂种类较多，包括苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物，氨基酸乙脂和水合氯醛。这些麻醉剂使用方便，一次给药可维持较长的麻醉时间，麻醉过程较平稳，动物无明显挣扎现象。但缺点是苏醒较慢。（1）戊巴比妥钠：为中效巴比妥类药物。戊巴比妥钠，是常用的麻醉剂，有兽用、人兽共用的产品，使用时应注意药品质量。（2）硫喷妥钠：硫喷妥钠为超速效巴比妥类药物，为淡黄色粉末，有硫臭，易吸水，装在安瓶中保存。其水溶液不稳定，故必须临时配制，常配浓度为1%~5%，在0～4℃冰箱中保存，置7天之内，其分解甚微；在室温中则只能保存24h。如见溶液色呈深黄、混浊，即表示已分解，不能使用。该药麻醉诱导和苏醒时间短，一次用药仅可维持数分钟。因此，一般用作为诱导麻醉或基础麻醉。其副作用：对呼吸系统有明显的抑制作用，不宜与吗啡合用。（3）氯胺酮：为中效巴比妥药物，常用其盐酸盐。静脉或肌肉给药后，很快起到麻醉作用，但维持时间较短，一般仅10～20min。为了延长时间，可重复给药。其副作用是心率加快，血压升高，有时还可引起动物呕吐等。（4）水合氯 11 醛：此药为无色透明棱状结晶，有穿透性的臭气及腐蚀性苦味。其溶解度较小，常配浓度为5％～10％。配制后的溶液易沉淀，用时先在水浴锅中适量加热，促其融解。作用特点与巴比妥类药物相似，似一种安全有效的镇静催眠药，能起到全身麻醉作用，其麻醉量与中毒量很接近，故安全范围小，使用时应注意。其副作用为对皮肤和粘膜有较强的刺激作用。（5）氨基甲酸乙酯（乌拉坦）：此药是比较温和的麻醉药，安全度大。多数实验动物都可使用，更使用于小动物。一般用作基础麻醉，如实验全部过程都用此药麻醉时，动物保温尤为重要。使用时常配成20%～25%水溶液，犬、猫、兔直肠灌注1.5g/kg体重；皮下、静脉、腹腔注射0.75～1g/kg体重。当与水合氯醛按1：1比例合并麻醉时，效果更好。但在作静脉注射时必须溶在生理盐水中，配成5%或10%的溶液，即每千克体重注射10～20ml。蛙类：2g/kg体重，由背部淋巴囊注射。鸟类：1.25g/kg体重，由肌肉注入。鼠：1.5～2g/kg体重，由腹腔注射。（6）异戊巴比妥钠：常配成5％～10％的水溶液，作用和戊巴比妥钠相似。使用剂量和方法：犬、猫、兔腹腔和肌肉注射80～100mg/kg体重；静脉注射40～50mg/kg体重；直肠灌注100mg/kg体重。鼠：腹腔注射100mg/kg体重。3.中药麻醉剂 动物实验时有时也用到象洋金花和氢溴酸东莨菪菅碱等中药麻醉剂，但由于其作用不够稳定，而且常需加佐剂麻醉效果才能理想，故在使用过程中不能得及普及，因而，多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。

2、豚鼠的局部麻醉 目的

1、了解并熟悉豚鼠的局部麻醉方法

2、掌握局部浸润麻醉方法。用品

刀片、注射器、消毒干棉球、75%酒精棉球、普鲁卡因、利多卡因。原理

用局部麻醉药阻滞周围神经末梢或神经干、神经节、神经丛的冲动传导，产生局部性的麻醉区，称为局部麻醉。其特点是动物保持清醒，对重要器官功能干扰轻微，麻醉并发症少，是一种比较安全的麻醉方法。适用于大中型动物各种短时间内的实验。豚鼠对麻醉药物很敏感。内容

1.表面麻醉 利用局部麻醉药的组织穿透作用，透过粘膜，阻滞表面的神经末梢，称表面麻醉。在口腔及鼻腔粘膜、眼结膜、尿道等部位手术时，常把麻醉药涂敷、滴入、喷于表面上，或尿道灌注给药，使之麻醉。

2.局部浸润麻醉：沿手术切口逐层注射麻醉药，靠药液的张力弥散，浸入组织,麻醉感觉神经末梢，称局部浸润麻醉。常用药为普鲁卡因。在施行局部浸 润麻醉时，先固定好动物，用0.5～1％盐酸普鲁卡因皮内注射，使局部皮肤表面呈现一桔皮样隆起，称皮丘，然后从皮丘进针，向皮下分层注射，在扩大浸润范围时，针尖应从已浸润过的部位刺入，直至要求麻醉区域的皮肤都浸润为止。每次注射时，必须先抽注射器，以免将麻醉药注入血管内引起中毒反应。3.区域阻滞麻醉：在手术区四周和底部注射麻醉药阻断疼痛的向心传导,称区域阻断麻醉。常用药为普鲁卡因。

4.神经干(丛)阻滞麻醉：在神经干(丛)的周围注射麻醉药，阻滞其传导,使其所支配的区域无疼痛，称神经干(丛)阻滞麻醉。常用药为利多卡因。

3、损毁小白鼠小脑的效应 目的：

1、掌握小白鼠的麻醉方法；

2、了解小脑的机能。基本原理

小脑具有维持身体平衡，调节肌紧张和协调肌肉运动等机能。当小脑损伤后，随着破坏程度的不同，可表现出不同程度的肌紧张失调及平衡失调。动物与器材

小白鼠、常用手术器械、大头针、麻醉口罩、乙醚、棉花。方法与步骤

1．用乙醚麻醉小鼠（注意仔细观察呼吸，若呼吸变慢时则表示动物已麻醉）。2．自头顶部至耳后沿正中线剪开皮肤，将颈肌向下剥离。透过透明的颅骨即可看清小脑的位置（图9-6）用大头针刺穿颅骨，直达小脑（2—3mm），搅毁该侧小脑（注意不可深刺，以免损伤脑干）。

3．待小鼠清醒后，可见其向一侧旋转或翻滚。如损伤较轻，小鼠向健侧旋转；当损伤重时，则向损伤侧翻滚。

4．将实验用完的小鼠拉断颈椎处死后弃之。思考题

根据实验结果说明小脑的生理机能。

实验

五、家兔的热原实验

目的

1、练习家兔的各种注射方法；

2、了解家兔热源反应的基本原理。原理

家兔体温变化十分灵敏，最易产生发热反应，发热反应典型、恒定，因此常选用家兔进行这方面的研究。方法与步骤

1、用体温计测量实验前家兔的正常体温。

2、采用以下方法进行热源实验：给家兔静脉注射伤寒一副伤寒四联菌苗0.5～2.0ml/kg，菌苗含量应不低于100亿/ml；皮下注射2%二硝基酚溶液（30毫克）15～20分钟后开始发热；肌注10%蛋白胨1.0g/Kg；皮下注射消毒脱脂牛奶3～5ml。

3、一至两小时后，用体温计再次测量家兔的体温，看其有何变化。思考题

在热源实验操作过程中，你认为应注意哪些方面？

实验

六、动物体内常见寄生虫卵检查

目的

1、学习常见实验动物虫卵标本的采集和检查方法。

2、学会对不同虫卵进行鉴定。用品

大鼠、小鼠、猕猴的粪便、示范片、盖玻片、载玻片、目镜测微尺、物镜测微尺 方法

1、直接涂片法

包括粪便、血液、肠内容物等直接涂片检查。取一载玻片,在其上加一滴生理盐水,取少许粪便或肠内容物与生理盐水混匀后于显微镜下观察。血液可直接滴于载玻片上，制成涂片，加盖玻片观察。

2、虫卵收集法

a.沉淀集卵法:取粪便加适量清水,混匀后过滤,重复数次至液体清亮为止,静止沉淀十分钟后,取底部沉淀物作镜检。此法适于检查血吸虫卵。

b.饱和盐水漂浮法:利用虫卵的比重小于饱和盐水的原理,使线虫卵和几种绦虫卵或包囊漂浮于液面上,提高检查效果。实验步骤和内容：

1、自然感染蠕虫的调查

取猕猴粪便在盛有生理盐水的培养皿中漂洗,直接查找寄生虫虫体和虫卵,根据虫体和虫卵的形态,签别虫种。

2、直接涂片法或沉淀集卵法检查寄生虫卵。

3、观察蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵标本装片。

注意:观察各种虫卵的大小、形状、颜色、卵膜结构等以及各种虫卵的特征

A、蛔虫卵(线虫纲一虫体线形或长圆柱形,雌雄异体)受精卵为椭圆形,大小约40-60微米(35-50×45-76),卵壳的表面有一层凸凹不平的蛋白质膜,被胆汁染成棕黄色,整个虫卵呈棕黄色。卵壳厚而透明。卵内有一近圆形的卵细胞。

未受精卵多为长椭圆形,大小约40一60微米(39-40×88-94),卵壳与蛋白质膜较薄,卵内充满大小不等的屈光颗粒。

无论受精卵和未受精卵其蛋白质膜有时缺失,无蛋白质膜的受精卵是无色透明,请注意与其它虫卵的区别。

B、蛲虫(线虫纲：虫体细小,乳白色,似一白色线头。)虫卵为椭圆形,两侧不对称,一侧扁平,一侧稍凸。大小约25-55微米(20-30×50-60),卵壳较厚,无色透明,内含幼虫。

C、绦虫(绦虫纲：腹背扁平、带状、分节,雌雄同体,常见的有链状带绦虫。)虫卵近球形,较小,大小约45-70微米,虫卵自孕节排出时卵壳己脱落,镜下所见是具胚膜的六钩蚴,胚膜较厚,棕黄色有放射状的条纹。

D、血吸虫(吸虫纲一多有腹背扁平,舌状或叶状,有吸盘,雌雄异体,常见的有日本血吸虫等。)虫卵为椭圆形,淡黄色。大小约74-106×55-80微米,卵壳较薄无盖,壳 的一侧有小棘,一般在镜下不易见到。成熟的卵内含有一个毛蚴。注意事项

1.高倍镜下观察必须加盖玻片；

2.采用直接涂片法时，不要涂得太多，必须分散开，均匀； 3.观察寄生虫卵前，需在高倍镜下校对目镜每格的长度，才能算出虫卵大小； 4.先在低倍镜下观察，发现后换为高倍镜。实验报告内容

1、绘出镜下观察到的蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵。

2、概括总结蛔虫、蛲虫、绦虫和血吸虫卵的形态区别要点。

3、在整过操作过程中的注意事项。

实验

七、雌性小鼠动情周期的检查

目的

1、学习小鼠阴道内液体的采集方法；

2、了解在动情周期的不同阶段，小鼠阴道涂片的组织学变化。原理

哺乳类的雌性动物在性成熟后，出现动情周期变化，其中啮齿类动物在动情周期不同阶段，阴道粘膜发生比较典型的变化。因此，根椐阴道涂片的细胞学改变，可以推断卵巢功能的周期性变化。

未成熟的大、小白鼠尚无自然的动情周期，但当注射绒毛膜促性腺激素后，则可使其提前出现。用品

显微镜、棉签、载玻片、生理盐水、碱性美蓝溶液（配制：美蓝0.3g，溶于95%的乙醇30ml中，再加蒸馏水至100ml及10%NaOH溶液0.1ml）等。动物

性成熟的雌性小白鼠。方法与步骤

1、小鼠阴道内液体取法

取阴道内液体有下列三种方法：

（1）冲洗法 将装有消毒生理盐水的滴管轻轻插入动物阴道内，按压滴管橡皮头，将生理盐水打入阴道，然后吸出，如此2-3次。最后将滴管中的阴道冲洗液滴在载玻片上。

（2）沾取法 将消毒的细棉签用生理盐水润湿，轻轻插入动物阴道内0.5cm，慢慢转动一下取出。

（3）刮取法 用光滑的玻璃小勺或牛角制 小刮片慢慢插入阴道内，在阴道壁轻轻刮取一点阴道内含物。

2、涂片

将带有阴道内含物的细棉签等在载玻片上均匀的转动做成涂片，然后将涂片在空气中自然干燥。

3、染色

用碱性美蓝溶液染色5min左右，用蒸馏水冲洗剩余的美蓝溶液（注意：应从涂片边缘慢慢冲洗，切不要把细胞冲洗掉），并使之干燥。

4、观察结果

在显微镜下观察阴道分泌物涂片的组织学变化，确定动情周期变化的不同阶 段。

阶段

表 小白鼠性周期阴道分泌物涂片变化 持续时卵巢变化 涂片可见 间/h 卵泡加速大量有核上皮细胞，少量角化

生长 细胞

卵泡成熟、满视野角化上皮细胞，少量有

排卵 核上皮细胞

黄体生成 角化上皮细胞及白细胞 动情前期

动情期

动情后期

动情 黄体退化 大量白细胞及少量黏液 间期

注意事项：

1.采取阴道（下口）内分泌物，不是肠道内容物（上口）； 2.制作涂片要均匀；

3.自然干燥后，再染色8-10min；

4.用蒸馏水冲洗剩余的美蓝溶液时，应从涂片边缘慢慢冲洗； 5.在镜下镜检（如用高倍镜，必须加盖玻片）。

实验

八、小鼠下颌骨形态分析

目的与原理

小鼠的下颌骨形态有高度的遗传稳定性，不同品种或品系小鼠下颌骨的形态、大小不同，因此该项技术可以作为纯系小鼠、纯系大鼠遗传质量的检测方法之一。下颌骨形态分析是一种定量技术。可阐明许多遗传学差异。主要是对小鼠或大鼠右侧下颌骨形态做对比分析，通过多变量分析，建立判别函数进行性别判别。

常规标本制备方法

1.随机抽取小鼠数只（60日龄，体重相当）处死，取下头颅。

2.投入沸水中煮约10分钟，冷却后把头颅上的组织仔细剔除，放在含有木瓜蛋白酶的自来水中（下颌骨带的残肉与酶的比例为1:25)，水的PH为4.5，消化温度为40—60℃，最适温度为52 ℃，保温过夜，取出下颌骨，用小镊子去掉残肉和门齿，再用水洗净。

3.自然干燥，存放于塑料袋中。

4.制作坐标底片，用于测量下颌骨有关变量。

5.在坐标底片上用两个平直的玻璃细条粘成直角，成L型，与坐标的纵轴和横轴相吻合，压平待用。动物

小白鼠 方法与步骤

1.下颌骨的11个测量点参见下图。

2.将待测标本平放在解剖镜载物台的标尺上，下颌骨前端和下部边缘与标尺上的L型玻璃条的X及Y轴分别贴紧放平，将每个标本11个变量的结果记录下来，交给老师，统一处理。

3、打开SPSS，输入数据；定义变量；

4、操作步骤：Analyze→Classify →Discriminant →open discriminant analyze;Gender →grouping variables(define range);all variables →independent;Method →enter independent together;open statistics →function coefficients →Fisher’s,unstandardized →continue;open classify →display→summary table,casewise results;prior probabilities →All groups equal → continue →OK。结果分析：求出判别系数和判别函数；

2、得到判别代结果和判别率；

3、验证回代和新标本判别。注意事项

1、标本要保证完整性；

2、小白鼠雌雄的体重要分别相近；

3、突变性的标本要舍去；

4、测量要注意准确；

5、每组标本的性别，不要混淆。

实验

九、家兔的神经分离、气管插管

目的

1、学习气管插管术；

2、学习分离及识别有关的血管和神经；

3、学习测定家兔呼吸运动的方法。用品

常用手术器械、气体插管、玻璃分针、刺激器、张力换能器、铁夹台、25%氨基甲酸乙酯、3%乳酸。动物

家兔 方法与步骤

1、麻醉并固定动物

每组取家兔一只,称重,按40mg/kg体重的剂量由耳缘静脉缓慢注射戊巴比妥钠溶液，将动物麻醉。当动物四肢松软,呼吸变深变慢,角膜反射迟钝时,表明动物己被麻醉，即可停止注射。将麻醉动物仰卧于兔体手术台上,固定好头部和四肢，将兔舌拉出以免阻塞呼吸道。注意：缓慢注射；兔舌拉出；颈部必须放正拉直。

2、颈部手术

用剪毛剪剪去颈部被毛,用手术刀切开颈部皮肤(5-7cm)长,分离皮下结缔组织和肌肉,暴露气管,分离气管和食管,在气管下穿一棉线备用。

3、颈部神经及血管分离术

3.1 颈总动脉的分离 在颈部,神经与颈总动脉被结缔组织膜束在一起,形成血管神经束,位于气管的外侧,其腹面被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。用玻璃分针将气管两侧上述肌肉分离后,用左手拇指和食指轻轻捏住分离的左侧肌肉和皮肤,稍向外翻,即可将血管神经束翻于食指之上。然后用玻璃分针分离颈总动脉外的结缔组织膜,将动脉分离约4cm长,并向头端追索到甲状软骨上缘,暴露颈动脉窦,在颈动脉下穿一棉线。用同样的方法可分离右侧颈总动脉。3.2 颈部神 经的分离 轻轻提起左侧颈总动脉下的线,即可清楚看到三条粗细不同的神经。其中迷走神经最粗,呈白色，一般位于外侧,易于识别；交感神经较细,略呈灰色，一般位于内侧；减压神经最细，呈白色,一般位于迷走神经和交感神经之间。

由于家兔品种不同及个体间的差异,三条神经的位置有较大的变异,应注意识别。识别准确后,用玻璃分针顺着神经的方向,小心分离其外的结缔组织膜,-般先分离减压神经,然后再分离交感神经和迷走神经,并分别在各神经下穿不同颜色的线（双线）备用。

4、气管切开术

在喉头下2-3cm处的气管上作一“T”型切口,将与气管口径相近的气管插管向心方向插入气管中，用线结扎,并将余线固定于气管插管的分叉处,以防气管插管脱落。

5、腹部手术

剪去剑突部位腹部被毛,切开胸骨下端剑突部位的皮肤,并沿腹白线再切开长约2cm的切口。细心分离剑突软骨并结扎,线的另一端连于张力换能器上,张力换能器连接于计算机BL-410的 1 通道上。

6、开机→BL-410生物机能实验系统→实验项目→呼吸实验→呼吸运动调节 这时可看到在屏幕上显示4个波形窗口,鼠标左双击1通道窗口,即只显示出1通道波形窗口,在屏幕右下角选实验标记。鼠标点开始即可描记呼吸运动曲线。

7、观察项目

7.1 慢速记录正常的呼吸运动曲线,注意分清吸气与呼气时的曲线方向； 7.2 增加无效腔对呼吸运动的影响 将橡皮管(长约lm,内径0.7cm)连于气管插管的一个侧管上,用止血钳夹闭另一侧管,使无效腔增加,观察并记录呼吸运动的变化。当呼吸运动出现明显改变后立即去掉橡皮管使呼吸运动恢复正常；

7.3 窒息对呼吸运动的影响 将气管插管的两个侧管同时夹闭,观察并记录呼吸运动的变化；

7.4 血中酸性物质增多的效应 取5ml注射器,由耳缘静脉较快地注入3%乳酸溶液2m1,观察呼吸运动的变化；

7.5 分别刺激迷走神经中枢端和外周端,观察并记录呼吸运动。注意事项

1、实验过程中，要防止动脉套管刺破颈总动脉和发生凝血现象；

2、剪去一段剑突软骨时，不能剪得过深，以免伤及其下附着的膈肌，并要保证剑突软骨与胸骨完全分离；

3、在分离神经及穿线时,切勿损伤与其伴行的神经；

4、在颈总动脉近甲状腺处有甲状腺前动脉,分离时应稍靠下方,以免损伤；

5、注射要缓慢，兔舌要拉出，颈部必须放正拉直。

实验

十、实验动物环境因子检测

目的

1、正确使用环境因子检测仪器；

2、了解噪音计、光度计、温度计、湿度计的测定原理；

3、学习测定方法。内容

测定各种实验动物环境的照度、噪音、温度和湿度。

实验

十一、小白鼠走迷宫

目的

1.通过观察、分析小白鼠学习和记忆过程，理解大脑在动物行为机制建立中的作用。

2.通过实验，了解影响动物学习和记忆能力的因素。

3.通过实验，了解数据统计分析在科学研究中的重要作用。实验原理

老鼠接近人类，通过老鼠的实验可以间接地了解人脑的功能。学习和记忆是神经系统高级中枢的重要机能之一。学习是神经系统不断接受环境刺激而获得的行为习惯或经验；获得的行为习惯或经验维持一定时间的能力就是记忆。动物的学习和记忆能力对其生存具有重要意义。

在人为设置的迷宫里，动物通过不断感受复杂通道的结构，调整和改进自己的行为。随着训练次数的增加，条件反射逐渐建立，以至在大脑皮层形成记忆。通过记录动物搜寻食物的时间长短可以对此加以评价。同时也可以考察一些刺激（如饥饿和化学药剂）对记忆力的影响。

实验材料

小白鼠。用品

由学生根据实验需要自行准备。实验步骤

（一）实验准备

1.用硬纸板或木板构建迷宫。高度以小白鼠不能爬上为宜，上面也可以盖上一玻璃板。

1、选择健康活泼的小白鼠5只，要求年龄和体重一致，实验前饥饿一天，但提供水。另选择一只未经饥饿处理的小白鼠备用。在迷宫内特定位置放置一块面包。

（二）实验项目

1.饥饿处理的小白鼠1只，放置在迷宫入口，记录其找到食物所需时间。5分钟后，重复上述步骤，同样的间隔时间对其进行四次实验，每只小白鼠共计进 行5次实验。

2.对其余四只饥饿处理的小白鼠进行5次实验，记录每只小白鼠找到食物所需时间。

3.数据处理 根据实验数据，求出5只小白鼠每次实验找到食物所需时间的平均值。以实验次数为横坐标，找到食物的时间为纵坐标，建立直角坐标系，制作标准曲线。把上述平均值标在坐标纸上并连接各点，从而得到实验数据与寻找时间的关系曲线。观察图形的变化趋势。

4.取未经饥饿处理的小白鼠进行步骤1，把记录的时间与标准曲线进行对比，分析小白鼠记忆力的变化。

5.取1只饥饿处理的小白鼠称重，皮下注射120mg/kgNaNO2，然后让其走迷宫，重复步骤1，将所记录的时间与标准曲线对比，分析小白鼠记忆力的变化。

6.另取1只饥饿处理的小白鼠称重，测试前半小时将小白鼠灌服20%-40%酒精100ml/kg。将所记录的时间与标准曲线进行对比，分析小白鼠记忆力的变化。

7.再取1只饥饿处理的小白鼠静脉注射乙酰胆碱，重复步骤1，将所记录的时间与标准曲线对比，分析小白鼠记忆力的变化

实验改进点

1、实验用年老的小鼠与小白鼠进行对比考察年龄对学习和记忆力的影响。

2、实验考察乙酰胆碱和NaNO2对小白鼠学习和记忆力的影响。

3、实验注意事项

1、选材为活泼健康的小白鼠，不能选运动机能和记忆力差的小白鼠。

2、为了避免嗅觉对测试的影响，做每一个实验项目前都应对迷宫进行清洁。实验分工

和 负责找资料，负责整理和制作，实验改进点由这几人讨论。

实验预期结果

1、随着小白鼠学习和记忆过程的进行，小白鼠找到食物的时间会越来越短。

2、未经饥饿处理的小白鼠由于没有饥饿的刺激，找到食物的时间会更长。

3、由于NaNO2是缺氧剂，会造成脑部缺氧，从而破坏记忆的保持，因此小白鼠找到食物的时间会变长。

4、测试前半小时将小白鼠灌服20%-40%酒精可以明显干扰记忆的再现，因此小白鼠找到食物的时间会变长。

5、小白鼠脑部乙酰胆碱的增加会增强记忆力，因此小白鼠找到食物的时间会变短。思考

1.小白鼠的年龄对学习和记忆有没有影响？ 2.人的大脑也和小白鼠有类似的结果吗？ 3.乙酰胆碱在该实验中的作用机理是什么？

实验参考资料

《实验动物和动物实验技术》苗明三主编中国医药出版社.北京.1997.6 《动物生物学实验技术》黄诗笺主编高等教育出版社 施普林出版社2001.8：109，131，132 《实验动物学》罗满林、顾为望主编中国农业出版社 2002.8P127-143.实验十二 消化系统疾病动物模型建立及验证（设计）

（一）病毒性肝炎模型

常用方法是注射乙型肝炎病人血清复制乙型肝炎模型。但大部分实验动物对甲型肝炎病毒不易感。我国已有报导红面猕猴、恒河猴、人及野生树鼩种毒后出现人甲型肝炎现象。近年来发现某些鸭肝炎病毒的特征与人肝炎病毒十分相似，故用鸭作为人肝炎模型也开始增多。

（二）免疫性肝炎模型

慢性或迁延性肝炎患者体内存在着抗肝细胞成分抗体。1959年国外有人用肝组织悬液加弗氏佐剂免疫豚鼠，成功地诱发了肝细胞变性及坏死病变。也有人报导肝膜蛋白（LSP）加佐剂分次注射产生动物免疫性肝炎模型。

（三）胃、肠道溃疡模型

在动物身上复制胃、肠道溃疡的方法较多，但所用的方法不同，引起的溃疡病变也各有特点。常用的方法有：

1．应激法 以各种强烈的伤害性刺激（如强迫制动、饥饿、寒冷等），引起动物发生应激性溃疡。如把动物浸入冷水中或放在应激箱中不断地遭受电刺激，使之剧烈不安，一昼夜即能引起胃粘膜出血及溃疡。这种方法简单，成功率达99%以上。

2．药物法 给动物投服或注射一定量的组织胺、胃泌素、肾上腺类固醇、水杨酸盐、血清素、利血平、保泰松等可造成动物胃肠溃疡。如给豚鼠小剂量的组织胺，连续数天，可引起胃、十二指肠、食道等发生溃疡。又如可用利血平、血清紧张素、阿斯匹林等诱发大白鼠或小白鼠的胃溃疡。

3．烧灼法 用电极烧灼胃底部的胃壁，可造成象人的胃溃疡病变；用浓醋酸给大鼠胃壁内注射或涂抹于胃壁浆膜面上可造成慢性溃疡。烧灼法复制胃、肠道溃疡模型的优点是方法简便，溃疡部位可由作者自己选择。

4．结扎幽门法 选用大鼠、小鼠或豚鼠，麻醉后，无菌技术下在剑突下由腹正中切开腹壁皮肤及肌层，切口长约3cm，暴露胃，沿胃向右，辩清幽门和十二指肠的联结处，避开血管，于其下穿线，将幽门完全结扎。术后绝对禁食禁水。幽门结扎后，可刺激胃液分泌并使高酸度胃液在胃中潴留，造成胃溃疡。这类溃疡复制方法简单，发生快，成功率高，但病变较表浅，严格地说仍然属于胃粘膜急性出血性糜烂，与人类胃溃疡的典型病变差距较大，适于作探索抗溃疡病药物研究和胃溃疡发病学方面的研究。

其他还可用外科手术方法从肠道上部排除可中和胃酸的碱性胆汁、胰 液或十二指肠液造成溃疡。还可用刺激、损伤或毁损脑组织等方法造成溃疡。

（四）胰腺炎模型

复制胰腺炎模型可采用使胰液外分泌发生潴留；使各种胰酶在胰管系统内活化；感染或某些微生物毒素的作用，影响胰腺的营养、代谢等。实验动物选用狗、兔和大鼠。将狗自身胆注按0.5ml/kg体重缓慢注入狗胰腺体尾交界处的胰腺实质内，则可引起胰腺局部组织坏死及炎性浸润，与人类急性胰腺炎和病变相似。用大肠杆菌悬液9亿/ml，按1ml/kg体重，向兔胰管内逆进注射可诱发急性胰腺炎。另外也可采用大鼠腹腔内连续注射乙硫胺酸诱发成功胰腺炎模型。随着乙硫胺酸注射时间的延长，胰腺组织可以出现广泛进行性破坏和退化及胰酶水平的持续下降。

（五）糖尿病模型

糖尿病模型的复制方法采用注射致高血糖因子；手术切除胰腺的全部或大部；用四氧嘧啶（Alloxan）破坏胰岛β细胞，造成胰性糖尿病；注射根皮苷使肾小管对糖的再吸收发生障碍并破坏酯酶致使葡萄糖磷酸化过程和脱磷酸过程障碍，引起根皮苷糖皮。

四氧嘧啶复制的糖尿病动物模型是目前研究人类糖尿病较好的方法，其实验性糖尿病近似人类糖尿病，体内代谢障碍时有可能产生此种衍生物，胰岛外分泌部不受损伤，几乎所有常用实验动物都可用来进行实验研究。模型胰岛的β细胞不是功能消失，而是功能不同程度的降低，有利于研究胰岛组织再生和功能恢复，动物不必注射胰岛素即可存活很久。大鼠造型剂量为12mg/100g体重，家兔为150～200mg/kg体重，狗约为50～60mg/kg体重。家兔根皮苷皮糖尿病造型剂量为0.5%根皮苷按15m/kg体重，皮下注射。注意所用四氧嘧啶和根皮苷溶液必须现配现用。

实验

十三、骨质疏松动物模型建立和验证（设计）