Weak Form英语弱读重要总结资料 超重点!!

第一篇：Weak Form英语弱读重要总结资料 超重点!!

Weak Forms 弱读

在英语中，与句重音相对应的出现的是非重读音节，它们一起构成了句子的高低起伏，强弱交替的节奏模式，形成具有表意功能的连贯句子。这些非重读音节体现在单个单词中就是常说的某些单音节的弱读或非重读（unstressed syllable）。英语是节奏感很强的语言，要掌握好英语节奏，首先要熟悉强读式(strong forms)和弱读式(weak forms)，它对语言连贯、流畅性起着重要的作用。

一、强读和弱读

强读和弱读实际就是重读和弱读，一句话中至少有一个重要的音节要重读，其他音节相应弱读。重读音节从音高和音强上应该big, strong, important loudly,非重读音节（弱读）就应该是weak or small or quiet。

强读和弱读通过一定形式在句子中体现，英语中有接近五十多个单音节词有两种读音形式：弱读形式和强读形式。在连贯的语言中弱读形式的使用比强读形式更多，更重要。重读或强读形式其实是单个单词发音的基本形式，即音标中的读音形式，而弱读形式从音质上和强读形式比较起来短而轻；在前面学习中，我们知道短元音/ə/和/i/常出现在非重读音节中，因此多数弱读形式体现也以/ə/或/i/体现。

二、弱读形式

从上一单元可以知道，在英语句子中，实词一般要重读虚词弱读，其中有弱读形式的单音节词根据不同类别可以分为以下几种：

冠词、人称代词、be动词、助动词、情态动词、单音节介词、单音节、连词以及其他特殊词。其弱读形式见表

从表8-1中，我们对五十多个单音节词的弱读形式进行归纳，得出三个规律：

1)弱读形式以/ə/为主,大部分的弱读形式都和/ə/有关，极少部分与/i/和/u/有关,如 a /ə/, some /səm/;who /hu,u/ my /mi/。

2）如果单词是发长音，其弱读形式一般变成相应短音，如： be /bi/been /bin/her /hə/等。3）在语流很快时或者可以缩略的单词中，常常只出现辅音，如 will/l/is /z,s/am /m/等。

弱读形式 单词 Weak forms and Example Article冠词 a /ə/ a book, in a minute, an /ən,n/ an hour, in an hour, the /ðə/辅音前,/ði/元音前 the book, the apple Be动词

am /əm//m/ What am I to do? is /z,s/ He’s at home.are /ə/,/ər/元音前 What are you doing?

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be /bi/ Don’t be late.been /bin/ You’ve been a long time.was /wəz/ He was a rich man.were /wə/ What were you doing? 助动词

have /həv,əv,v/ Have you been to Shanghai? has /həz,əz,z,s/ The bus has gone.had /həd,əd,d/ The room had been reserved.do /du,də,d/ What do you want? does /dəz,z,s/ How does it work? 情态动词

will /l/ I’ll do it.would /wəd,əd,d / What would you like? should /ʃəd,ʃd / What should I say? could /kəd,kd / I wish I could do something for you.must /məst/ He must go now.can /kən,kn/ What can I do to make up you? shall /ʃəl,ʃl/ I shall wait for you.短小连词

that /ðət,ðt/ This is the best that I can do.as /əz/ as long as, do as I do but /bət/ It’s old but useful.and /ənd,nd,ən,n / you and me, a cat and a dog than /ðən,ðn/ It’s more than I want.such /sətʃ/ I never heard of such thing.短小介词 at /ət/ at six, at school of /əv,v,ə/ a lot of money, one of the book off /əf/ take off to /tə,u/ Do you want to go? I’d love to.for /fə/ Is this for you? for a long time from /frəm/ She just come back from Italy.人称代词

he /hi,i/ What did he say? He told me a story.him /im/ I write him a letter.his /iz/ she /ʃi/ What did she say? She’s fine her /hə,ə,/ I gave her the book.me /mi/ You make me happy.us /əs/ They told us to go.you /ju/ What’re you doing? How do you do? your /jə/,/jər/(元音前)them /ðəm/,/ðm/,/m/ If I saw them,I’ll tell them that.we /wi/ We’d like a drink.who /hu/, /u/ Who are you? my /mi/ Do you know my brother? 其他词 some /səm/ Would like some drink? not /nt,n/ I haven’t finish it.there /ðə/,/ðər/(元音前)There is a book.or /ə/ two or three so /sə/ Thank you so much.many /mni/ How many?

有了这三个规律,对这些单音节词的弱读形式可以运用正确读音,连贯句子;但同时还需注 意几个问题: 1）he, her,his, have,has, had不带/h/的弱读形式不用在句首；

2）has,does,is 弱读形式/s/用在清辅音的后面,/z/放在浊辅音或元音的后面,如: it’s: /its/;3）the 在元音前和在辅音前的读音不一样；

4）there are your,只有在后面有元音时才有/r/,在下一单元连读要涉及； 5）有些弱读形式较常用,有些不常用,只有在较快的口语中使用,如: my /mi/ or /ə/ so /sə/ such /sətʃ/。

6）尽管以上助动词、情态动词、介词有弱读形式，但当他们位于句末时不用弱读形式，例如：

---Are you a student？---Yes I am What are you working for？ What are you fighting for？ Where are you from？ 7）对于中元音/ə/发音特点要牢固掌握，即轻而弱，自然而放松。

第二篇：电子政务总结重点资料.doc

3.电子政务框架体系：电子政务的网络体系，电子政务

资源体系，电子政务支撑平台，电子政务应用体系，政府门户网站，系统维护管理体系，电子政务安全体系，国家电子政务标准体系。

4.我国电子政务“三网一库”的基本框架：三网为政府机关内部的办公业务网（政府内网）；与政府内网有条件关联，实现地区级政府涉密信息共享的办公业务资源网（政务专网）；以因特网为依托的政府公众信息网（政务外网）；一库即政府系统共建共享的政务资源数据库。

5.中国电子政务标准体系：总体标准，应用标准，应用支撑标准，网络基础设施标准，信息安全标准，管理标准

6.中间件及其类型：中间件是一种独立的系统软件或

服务程序，分布式应用软件借助这种软件在不同的技术之间共享资源。

类型：事务式中间件，过程式中间件，面向消息的中间件，面向对象的中间件，web应用服务器，web services中间件

7.云计算及其特点：狭义的云计算是指IT基础设施的交付和使用模式，指通过网络以按需，易扩展的方式获得所需的资源；广义的云计算是指服务的交付和使用模式，指通过网络以按需，易扩展的方式获得所需的服务。

特点：超大规模，虚拟化，高可靠性，高可扩展性，按需服务，及其廉价，潜在的危险性

应用形式：SaaS(软件即服务)，实用计算，网络服务，平台即服务，MSP（管理服务提供商），商业服务平台，互联网整合8.工作流：就是工作流程的计算模型，即将工作流程中的工作如何前后组织在一起的逻辑和规则在计算机中以恰当的模型进行表示并对其实施计算。简单的说，工作流就是一系列相互衔接，自动进行的业务活动或任务。

主要功能：工作流引擎，工作流过程建模工具，流程操作，工作流客户端程序，流程监控，表单设计器，与表单的集成，与应用程序的集成。

9.密码技术分为：对称密码技术和非对称密码技术

实施密码技术的目的：防止信息被剽窃，防止计算机病毒的侵入。

10.计算机病毒的概念及特征：计算机病毒就是能够通

过某种途径潜伏在计算机存储介质（或程序）中，当达到某种条件时即被激活的具有对计算机资源进行破坏作用的一组程序或指令集合。

特征：隐蔽性，传染性，潜伏性，表现性

11.一站式服务：利用计算机对传统政务进行业务流程重

组和再造，以便将其职能通过网络来实现

12.办公自动化：以计算机为中心，采用一系列现代化的办公设备和先进的通信技术，广泛、全面、迅速地收集、整理、加工、存储和使用信息，使企业内部人员方便快捷地共享信息，高效地协同工作；改变过去复杂、低效的手工办公方式，为科学管理和决策服务，从而达到提高行政效率的目的。

13.公文流转模式：直流 分流 合流 回流

14.电子政务与电子商务之间的关系：（P11）

相同点：支撑体系是同一个结构，开展电子政务是为了实现政府的办公网络化和信息资源的高度共享，从另一个方面也促进经济的快速发展。

业务流程上：电子政务是政务流程再造，电子商务是商务流程再造；

客户关系管理上：电子政务是政务关系管理电子商务是商务关系管理；

信息门户网站上：电子政务是政府的信息门户，电子商务是企业的信息门户；

跨部门合作 上： 电子政务协调政务，电子商务协同商务；不同点：

（1）主体不同：电子政务的主体是政府电子商务的主体是企业；

（2）目的不同：电子政务是为了让政府更好实现自己的职能，让政府更好为大众服务 ；企业的最终目的是为了盈利。联系：都是必须依靠信息技术实现，都是为了推动社会和经济的快速发展；在政府和企业之间具有业务往来的。

17.我国政务信息资源的开发现状：

缺乏全国性的管理协调机构；政府部门对信息资源的共享很差，独占很强；重硬件，轻软件

措施：充分发挥政府的作用，统筹规划政府协调机制，加强信息资源的共享，建立开放的运行机构，探索符合我国的信息资源的开发模式。

15.电子政务基本模式和功能：

基本模式：政府对政府的电子政务（例如：电子公文，电子办公，业绩评价），政府对企业的电子政务（电子采购与

招标，电子税务，电子证照办理），政府对公众的电子政务（教育与培训服务，就业服务，电子医疗服务，社会保险网络服务，公民电子税务）。功能：

1.降低工作成本，可以提高政府的办事效率； 2.加快部门整合，有利于政府部门优化； 3.提高工作水平，便于公众监督；

4.增加政府工作的透明度，提高公众对政府的信任； 5.提高了行政监管的有效性，加强了政府部门对经济监管的力度；

6.提高政府的服务质量，从另一个方面，降低企业的运营成本，加快了企业的决策速度，促进的经济的快速发展。

1.政府改革运动是电子政务的政府发展背景。

（1）

自20世纪70年代末开始，西方发达国家面对经济危机和社会发展停滞的社会局面，开始了一场影响比较广泛的政府改革运动。

（2）

进入20世纪90年代，信息技术开始迅猛发展，为政府改革运动提供了强有力的技术支持，信息技术革命与政府改革运动开始结合，进一步推动了全球性的政府改革运动的发展。

（3）

以最早提出电子政务概念的美国为例，其电子政务的发展过程就是政府改进、完善其行政方式的过程。

（4）

我国的电子政务发展最早可追溯到20世纪70年代计算机在政府计划经济计划和统计汇总等方面的应用，进入20世纪90年代，建设重点放在了“金卡”、“金卡”和“金税”等“三金”工程的建设上。同时，党的十七大报告中提出要“推行电子政务，强化社会管理和公共服务”，特别强调了电子政务在政府改革进程中的重要作用。

（5）

可以说，政府改革不仅是电子政务发展的重要环境背景，还是电子政务发展的 内在动因之一。

2.金卡、金关、金税是“三金”工程，是电子政

务与社会信息化融合的产物。

3.变革传统政务关系中业已存在的G to G（governmenttogovernment）、G to B(governmenttobusiness)、G to C(governmenttocustomer)等联系方式和运行结构，以支持高效率的政府运行。

4.政府的四大职能：宏观经济调控、市场监管、社会管理、公共服务。

5.从外国的电子政务的发展中，我们可以

得到哪些经验？

我们可以借鉴的经验：从电子政务在国外的发展来看，由于国情和发展重点不同，各国在电

子政务的具体建构方面有许多差异。但一些共同特征还是值得我们注意和借鉴的，如：都有一个统一的规划和技术标准，相应地制定了电子政务由易到难、分段实施的发展原则；多管齐下，努力缩小数字鸿沟；重点政府门户网站建设，充分利用互联网实现资源共享和服务整合；把电子政务建设与政府改革紧密结合起来，最终实现从根本上改善政府的公共服务的目的。

 电子政务对政府管理模式的影响：

（1）.电子政务对政府部门工作人员的影响：a,电子政务给政府部门工作人员行为方式带来变化;b,电子政务对政府部门工作人员素质能力的新要求；

（2）.电子政务对政府决策的影响：a，电子政务对政府决策目标的影响；b，电子政务削弱以致取消了决策者与执行者之间的严格分界；c，电子政务有助于改善政府决策者的“有限理性”

（3）.电子政务对行政方法的影响;改善现有行政方法信息基础和信息通信手段：创立全新的行政方法和行政行政措施

（4）.电子政务对行政组织的影响：a，中间管理层的缩减；b，管理幅度的增宽；c，行政组织绩效的进一步改进和提高

 当前 阶段，我国电子政务的功能具体表

现在以下几个方面：

（1）

推动政府职能转变。它可以减缓甚至是杜绝传统组织形态下经常出现的官僚主义现象，消除信息传递的障碍；

（2）提高政府工作的效率。政府管理的电子化和网络化改变了传统政务高成本、低效率的粗放管理方式，可以通过先进生产力来解放管理能力，在降低管理成本的同时，提高工作效率;(3)使公众充分享受政府提供的公共服务；电子政务通过政府公务活动的电子化，将政府处理公共事务的流程向社会公开，公众可以通过互联网快捷方便、及时准确了解到政府机构的组成、职能和办事规程，并获取相关信息。

(4)促进政务公开和廉政建设，使社会公众更好地参政议政。它可以通过灵敏有效的网络渠道及时了解社情民意，改进工作作风，密切与群众的联系；

（5）增强政府经济调节、市场监管、社会管理的能力。比较充分的电子化、网络化，使政府可以有切实的手段和措施为社会有关方面建立或者促进建立相应的专业交易市场，以推动经济的发展，三金工程的实施，在客观上极大地加强了政府部门对经济活动的监管力度。；

（6）促进社会信息化发展。由于政府是信息资源的最大拥有者和应用者，因此，电子政务也就成为社会信息化的中心环节，发展电子政务不仅可以极大地丰富网上信息资源，而且成为社会信息化建设水平的重要标志。

17.电子政务运营理念的基本内容：民主理念、法

治理念、公平理念、科学理念、责任理念、服务理念、效能理念、系统理念、创新理念、安全理念。

 20.电子政务运营理念对传统政府管理的挑战：

（1），电子政务运营理念对传统行政环境的挑战；（2），电子政务运营理念对传统行政职能的挑战；（3），电子政务运营理念对传统行政组织的挑战；（4），电子政务运营理念对传统行政人员的挑战。

 中国电子政务的效益，主要体现在以下几

个方面：

（1）.通过加强经济调节和市场监管，促进了经济发展

我国电子政务若干“金”字等工程项目的建设实施，都证明了我国电子政务的建设和发展，加强了政府的经济调节和市场监管职能，促进了经济增长，增加了就业，稳定了物价，保持了国际收支平衡，增加了财政收入，促进了俄和保障了统一、开放、竞争、有序的良好市场秩序的建立。（2）.节省人力、物力、财力，降低了行政成本 网上建立的虚拟机关、虚拟办公室、规范的工作流程和简化的管理程序等，减去了多余、重叠的机构和不必要的中间环节，使得人们可以从多种渠道方便地获取政府的信息及服务，节省了人们的精力和时间，降低了行政费用支出，提高了办事效率。（3）.政府的服务效率和质量明显提高

电子政务在政府与公民之间、政府与企业之间、政府部门与部门之间实现了更多高效便捷的沟通联系，推动政府理顺整体的工作流程，为政府机构处理事务提供了优化方案，从而显著提高政府部门为社会服务的效率和质量。

（4）.推进了社会主义民主化进程

我国电子政务的建设与发展已经成为推进社会主义民主进程的重要力量。

（5）.带动信息基础设施建设以及信息技术产业和信息资源产业的发展

信息基础设施的建设通常是电子政务发展关键性的第一步和启动器。最大限度地利用信息资源是电子政务效益更直接的体现 31..政府信息资源建设的原则：一是统一规划，共建共享；二是分阶段，分层建设；三是统一规范、统一标准；四是科学性与实效性相结合；五是充分发挥多种机制作用。

32.政府信息资源建设的主要内容：一是政府信

息资源的规划；二是政府信息资源元数据的管理；三是政府信息资源的分类；四是建立信息资源目录体系；五是建设信息资源库。

29.材料，能源和信息，是现代社会发展的三

大资源。

 21..办公自动化系统的特点与功能

特点是：（1）在使用对象上，办公自动化系统的定位比较广泛；（2），在功能范围上，较为完整的办公自动化系统不仅包括传统的公文处理，还会包括文档资料管理，各种行政事务处理功能，日常办公管理功能，以及辅助领导决策的功能。（3），在信息内容上，办公自动化系统不仅可以管理事务管理信息，而且可以和具体的业务系统相结合，直接对业务信息进行管理，同时兼顾了决策信息的管理。（4），在表现形式上，办公自动化系统建立在Internet基础上，以web端作为普通客户端，通过web端让普通用户直接接触各种各样的信息，同时这种开发模型也具备了相当的灵活性、安全性。

功能是：.提供电子邮件服务，（2）.具有强大的数据信息处理能力，（3）.具备多种共享方式和强大共享能力，（4）优化政府工作流程，（5）具有完备的安全特性 23..政府知识管理系统的基本管理职能：

外化知识、内化知识、中介知识、认知过程

根据公务处理系统覆盖范围不同，专用电子化公务处理系统可以分为专门机关系统、专门部门系统、专项业务系统、专项功能系统四类。24.电子化公共服务与电子政务的关系

（1）.电子政务的基本目标----改革公共服务。一个政府提供的电子化公共服务的好坏直接影响着电子政务的进展，它是电子政务建设的衡量器。

（2）.电子政务的核心理念----全心全“E”为公众服务 由此，我们可以看出，电子化公共服务是电子政务的核心内容，它的水平与效果，就是电子政务的水平与效果。在电子政务的建设中，必须重视且花大气力发展电子化公共服务。

25.按服务对象的不同进行分类，电子化公共服

务可以被划分为：对公众提供的电子化公共服务，对企业提供的电子化公共服务，对其它政府部门提供的电子化公共服务。

26.就目前世界范围内的政府网站而言，其所提

供的公共服务主要有三部分：一是政府公开信息的提供；二是在线办理相关事务；三是为社会公众参与政务特别是公共事务的管理提供条件。

27.政府门户网站的作用：

（1）.政府门户网站是电子化公共服务的基础设施，是提高政府公共服务水平的基本条件

（2）.政府门户网站可以成为全社会理解、支持政府工作的窗口，进一步密切政府与社会公众的联系（3）.政府门户网站是电子政务的基础设施，对整个电子政务建设与运作水平的提升具有促进和拉动的作用

28..三网一库是指：(1)机关内部办公网，机关内部

办公网（简称“内网”）；（2）办公业务资源网络，办公业务资源网（简称“专网”）；（3）公共管理与服务网络，公共管理与服务网（简称“外网”）。

34.当今社会，政府信息公开具有非常重要的意义，这主要表现在：一，保障人民群众的知情权，维护社会公众的合法权益；二，全面提高政府工作的透明度，有效预防和治理腐败现象；三，有力地促进政府部门依法行政；四，充分实现政府的服务职能。

36．制约政府信息资源共享的因素分析：

（1），相应政策法规供给不足；（2），现行体制下部门利益泛化；（3），信息资源获取的不对称性；（4），政府数据管理混乱问题严重。

37.电子政务的安全需求：

电子政务的安全需求，是指在信息化环境下，政务活动对信息安全的基本需求和要求。电子政务的安全需求来自于电子政务的外部环境，也取决于信息化背景下政务活动的特点和方式。

一，电子政务的安全环境和安全威胁。电子政务环境

中的安全威胁包括以下几个方面：（1），人为因素，（2），技术系统因素，（3），安全管理因素，（4），自然因素。

二，电子政务安全方面的需要和要求。它主要体现在以下几个方面：

（1），保障电子政务整体有效运行和行政秩序的需求，（2）保障基础设施安全的需求，（3），保障电子政务系统运行安全的需求，（4），保障政务信息资源安全的需求。

38.电子政务安全目标：

（1），通过技术自主化保障安全；（2）.保护信息资源；（3）.持续安全保障；（4），电子政务功能指标。（保密性指标，完整性指标，真实性指标，可用性指标，可塑性指标）

39.电子政务安全的总体策略是：国家主导、社会

参与、全局治理、积极防御，等级保护、保障发展。电子政务安全防范技术：

1、反病毒系统

2、防火墙系统

3、虚拟专用网络（VPN）

4、入侵检测系统（IDS）

5、物理隔离系统

40.目前世界各主要国家和地区有关电子政务发展所需要的外部法制环境建设，主要是制定以下几个方面的法律法规：

一，关于信息资源管理与信息系统的规划建设；二，关于惩治信息犯罪与信息安全的维护；三，关于政务信息公开；四，关于电子商务；五，关于知识产权和个人隐私权的保护。

 41.我国电子政务法制建设发展的基本原

则：

（1），突出重点，层层推进；（2），在立足现实需要的同时，充分考虑到未来发展需要；（3），保持必要的动态适应性；（4），中央立法与地方立法相结合。（228）广州市于2003年1月1日起施行《广州市政府信息公开规定》

43..政府流程最为重要的属性是：约束性，确定

性，稳定性，可操作性。

44.政法流程的种类：

（1），依照其法定的效用，可分为强制性与选择性两种

（2），依照其效力范围，可分为内部流程与外部流程两种

（3），依照工作行为的性质，可分为立法性、执法性、司法性流程三种

（4），依照其精细的程度，可分为一般流程、作业流程、动作流程三种。

 45.政府流程设计的程序：

一，明确目的、任务，制定计划 二，认真调查研究 三，分析评价既有流程 四，规划新流程

五，实验平价审批新流程方案 六，正式确定新流程

46.政府流程优化的方法技巧：

一，政府流程优化前的准备工作

二，政府流程优化中认识改进必要性的方法技巧 三，政府流程优化中观察分析问题的方法技巧 四，政府流程优化中解决问题的基本方法

48..与此相适应，所制定的电子政务发展战略也主要有三种模式：

一，以电子行政为核心的战略模式； 二，以电子服务为核心的战略模式； 三，以电子社会为核心的战略模式。

49..同时，这份重要的中国信息化纲领性文件

《2006—2020年国家信息化发展战略》还对实现这一战略目标规定了具体的指标性要求：

一，促进经济增长方式的根本转变；

二，实现信息技术自主创新、信息产业发展的跨越； 三，提升网络普及水平、信息资源开发利用水平和信息安全保障水平；

四，增强政府公共服务能力、社会主义先进文化传播能力、中国特色的军事变革能力和国民信息技术应用能力。

50.中国电子政务的发展基础：

法律政策基础、管理基础、信息资源基础、信息基础设施、以电子信息技术为核心的技术基础。

51.与电子政务发展需要相适应的管理基础应当具有如下特征：

一，树立反映时代发展要求的全新管理理念 二，熟悉并正确运用新的管理方式 三，全面实施管理的规范化。

名字解析：

1.办公自动化： 办公自动化（OA）或者是办公信

息系统可以看作是政府信息化或者电子政务的一个有机组成部分。它主要是解决政务过程与流程问题的信息化方式，可以提供自动化处理政务信息的技术功能，可以认为是政务活动的技术应用方式和技术组织方式。

2.电子政务： 电子政务是指各种公务机构通过广泛

应用现代信息技术，推动政务活动方式的变革，提高行政效率，发展民主决策进程，向社会提供优质、规范、透明的管理与服务的过程和结果。

3.电子政务的实质是： 电子政务既是社会信息化

进程的有机组成部分，又是通过广泛应用信息技术、转变职能、改革政府体制机制形成的一种新的政府管理形态，这就是电子政务的实质。其中，电子政务覆盖政务活动的全过程，二是电子政务是政务活动全面信息化的过程和结果，三是电子政务是推动政务方式变革的信息化过程。

4.政府信息公开： 政府信息公开是指为了提高政府

工作透明度，保障公民、法人和其他社会组织的合法权益，监督政府机关依法履行职责，根据有关法律、法规规定，政府机关向社会公开有关政府信息的过程或行为。

5.政法流程：是指政法在实施管理时，为达成特定目

标所经历的，体现工作规律的稳定的活动步骤的集合。

第三篇：八年级下英语作文重要资料（精选）

Writing

1.Unit one of composition:

Demand：请以What will my life be like in five?为题写一

篇60词左右的短文。

What will my life be like in five?

In five years, I think I’ll be a college student.I’ll study

in Zhejiang University, because I heard of this university and

fell in love with it.I think it’s really a good university.As a

student, I think I will study hard and take part in many interesting activities;I’ll meet lots of interesting people.And I’ll live with my friends.I’ll probably go swimming and skating every day.I’ll look smart.I think I’ll go to visit Hong Kong on vacation, and one day I might even go to Paris.2.Unit two of composition: Demand：阅读原信，根据其内容给Eric 写一封回信，要求60词左右。

Dear Eric,There are a lot of things you should do.You could ask

your friend what you did wrong.If you did something wrong, you should say “Sorry ”to your friend.Or maybe you should more friendly to your friend and help him as much as possible.You also should talk with him as much as you can.These things can make him think you are a friend of him.Good luck!Yours,Mary 3.Unit three of composition:Demand：假设你在过去的一天亲眼见到了外星人，你和你周围的人在干什么？

What were you doing when the UFO arrived?

Last Sunday, I had a very unusual experience.At about 10

o 'clock in the morning.I was walking home when a UFO

landed right in fround of me.An alien walked out, and walked along the central street.While it was in a souvenir shop,the shop assistant called the poilce.Then the alien went to a museum.And I called my mom.I told her “I meet an alien.”, while she was watered the garden.What an amazing day!4.Unit four of composition:

Demand：给你的好朋友写一封信，告诉他你期中考试的成绩，及各科老师对你的评价。

Dear XXX,How's it going? Things are fine here.I finished my

end-of-year exams last week and got my report card today.I had a really hard time with math this semester, my math teacher said I was lazy.But I think math was really difficult.Another disappointing result was in history.My history teacher said I could do better.The good news is that my English teacher said I was hard-working.And my Chinese teacher said my reading was good.Well, that's about all the news I have for now.Yours,Lived 5.Unit five of composition:

Demand： About 70 words.My dream job

In the future, I will be a teacher like Yu Dan.She is my

favorite writer.If I am a teacher I will work hard.I will at

least write a book if I have enough time.And I will try my best to help people, because I am sure that people in the future will be friendlier.If I am a teacher, I will have the long vacations twice a year.And the life in the future will be better;I also can do something I want to do.6.Unit six of composition: Demand: 请以My Hobby 为题写一篇短文，说说你的爱好是什么？你为什么喜欢它？以及它对你的生活和学习产生了什么样的影响？ My Hobby I like collecting stamps.I have been collecting them for ten years, and now I have eleven stamp albums.My mom says I must stop, because we’ve run out of room to store them.But I really think they are interesting.I will be collecting them, because it makes me learn a lot of things

about the world.It open up my eyes, I love really them.7.Unit seven of composition: Demand:假如你是Mike，请给你的朋友Jackson写一封信，对他的生活习惯提出建议和要求。Dear Jackson,I am sorry to hear that you feel ill now, but don’t you think your living habit is not good enough? So would you mind not getting up too late? And playing too much computer games is

also bad for you health.How about doing more exercise? Itcan make you more health and strong.You shouldn’t eat too

much junk food.And if you want to get good grades, youwill have to do your homework.I think you will get over it.Sincerely

Mike 8.Unit eight of composition:Demand:假设你有一条宠物狗，讲讲关于他的故事。My Dog I have a little dog named Coffee.I love him.I always spend time with him.Sometimes we watch TV together.Sometimes we take a walk after dinner.I often go hiking with him.We can understand each other.He always knows what I want him to do.I think the life with a little dog is

perfect.But because the school works, I am afraid I won’t have enough time to spend with him.9.Unit nine of composition: Demand:介绍你曾经去过的并且留下深刻的印象的地方，70字左右。Have you ever been to Harbin?Last winter holiday, I went to Harbin with my parents.We have been in there for five days.The weather there was very cold last winter, we even could not say a few words outside city center in the morning.There were many funny people.But the food there was bad.We came here because there were several snow trade shows.These shows were really wonderful.So we were tired but happy.How a beautiful city the Harbin was!10.你的爷爷下星期过生日，你决定买一只宠物作为生日礼物送给他。从下面三种动物中选择一种，并说明你为什么选择它。

1、rabbit

2、goldfish

3、dogMy grandpa’s birthday is in the next week.I

decided to buy a pet as a birthday gift to him.Which

pet should I get for my grandpa ? I think the dog is the best.First,it is cute and interesting.Second, it is useful.It can stand in front of the gate to protect the

house.Third, it is easy to take care of.Fourth ,It will become a company of my grandpa.My grandpa could talk with him everyday.My grandpa is not lonely any more.ours , iao Hua

11.上周末去了市游乐园，觉得非常有趣，她想把自己的经历告诉笔友Robert,并想知道Robert,并想知道Robert有没有去过游乐园，请你以Joyce的身份给Rober t写一封信。

Dear Robert,I was happy to receive your letter.How are you？ I went to the city’s amusement park last weekend.There were many attractions there ,such as the roller coaster and other sites().The roller coaster was really exciting.I enjoyed taking it.I also went for a boat ride for half an hour.It was a lot of fun.Have you ever been to an amusement park ? Would you like to tell me your experience?

Yours ,Joyce

12.假设你是李明，请给你的朋友尼克写一封感谢信，感谢他邀请你和他一起过暑假。

Dear Nick,Thank you for your invitation to spend the summer holidays with you.It was very good of you to invite me ,and I really had a good time.I enjoyed the food very much ,and I liked my new friends , too.I should be very pleased if you could come to my home and stay with us for a few days.I do hope you will come/

Thank you again.ours,i Ming

13.我可爱的家乡My lovely hometown

My hometown is beautiful.White clouds can be seen in the blue sky.Each season is like a beautiful picture.When spring comes, the whole world turns green.Birds are singing and the rivers run happily ahead.Everything grows fast in summer.When autumn arrives, my hometown is colored golden.In winter, sometimes snow covers the top of the mountains.My hometown is colorful all the year around.I really love my hometown.14.我的英语学习My English learning

Some students study English by reading English

magazines or newspapers, and some of them are interested in watching English programs on TV.In my opinion, every day, we should insist on reading the textbooks and learning words by heart.Listening to English tapes and keeping diaries are very useful, too.Singing English songs is also a good way for us to improve our oral English.What’s more we should often speak English.No pains, no gains.I’m sure we’ll make great progress if we keep on working hard at it.15.一件开心的事A Happy Thing

Last Saturday my classmates and I went to the old

people’s home to help the old people.After we got there , we began to clean the rooms and wash clothes for the old people.We also talk to them.After that we played games

with them.The old people were very happy.They laughed

Yand laughed.And they said “Thank you” again and again.Though we were tired , we were also glad.Because we

Xhelped other people.I will not forget the happy thing.16.爱在我身边Love around me

I think love is always around me.When I am in trouble at school, my classmates and teachers often help me.When I am upset, my parents often encourage me.I feel very thankful when they give me their loves.I should show my love to them.When I am happy, I should share my happiness with them.When someone is in trouble, I should try my best to help him.Let's show our love to the people who love us.Y

L

第四篇：超全干细胞重点知识总结

第九章干细胞 第一节干细胞概述

一、干细胞(stem cells)与个体发育

正常生物个体发育的过程是按严格的时空程序进行的一系列细胞分裂、分化和细胞凋亡相互协调作用的结果。从一个受精卵、全能胚胎干细胞或组织谱系干细胞最终分化为具有独特功能体细胞所组成的组织器官,这是一个彼此协调而又制约的复杂过程,这一过程通常被称为发育的遗传程序(genetic program),被记录在细胞基因组的结构中。不同物种有不同的遗传程序,这可能是物种在长期进化过程中逐渐形成的。

在哺乳动物个体发育的不同阶段,包括胚胎、幼年和成年个体的各个发育时期,都存在着发育潜能参差不同的干细胞。干细胞最终演变为独特结构和功能的体细胞或成熟生殖细胞,这过程即是所谓细胞分化。从分子水平而言,可以认为细胞分化是部分基因选择性地被激活或差异性表达,从而控制专一性蛋白质的合成和排布的结果。对正常细胞分化来说,最重要的是多个基因表达过程在数量和时空上的精确联系和密切配合,并受不同层次的基因调控网络系统精确无误地调节和控制。干细胞在胚胎和成体组织内部的活动,包括干细胞基本特性的分子机制和调节控制、胚胎细胞的迁移活动、时空程序与相邻胚胎细胞的相互作用,对细胞增殖和分化的关系等,虽已有所了解,但由于技术上的原因,直接证据还很少,因此,干细胞增殖和分化问题仍是今天发育生物学研究的主题内容之一.二、干细胞的定义和分类

因干细胞是指一类具有自我更新和产生分化后代这两种基本特性的细胞。一个充满生命力的雌雄两性机体都是由两类不同的组织和器官构成的。一类是全部由体细胞组成的,另一类是以生殖细胞为主的,也包括一些由体细胞组成的组织和器官构成的。前者是执行机体生命活动各种生理功能的;后者一切都为了保证生殖系统的卵巢和辜丸中的卵子和精子的发育和成熟并延续生命的。对人类来讲,从一个受精卵的单细胞要产生200多种不同类别的细胞来构成各种组织和器官,必然要靠全能性的早期胚胎干细胞通过自我更新和产生分化后代来实现的。

自我更新是指干细胞可进行均等分裂,产生两个遗传特性上完全一样的干细胞,均等分裂是大多数细胞的特性,而产生分化后代指的是干细胞还可进行不均等分裂,产生的两个子代细胞中一个仍是干细胞,而另一个是遗传特性有所不同的,要开始走上分化道路的定向祖细胞。早期胚胎细胞是全能的,它既可产生体细胞,又能产生生殖细胞,这包括从早期的卵裂球和囊胚期的ICM细胞以及后来胚胎的3个胚层已分化后的生殖嵴区的原始生殖细胞;而分化的后代细胞可从包括全能细胞向多能细胞和细胞谱系的各级祖细胞发展,这些细胞仍旧可通过均等和不均等两种分裂方式进行繁殖,一直到最后的终未分化体细胞。

干细胞可分为两类:一类干细胞包括从早期囊胚ICM(inner cell mass)细胞分离并在体外培养和建系的胚胎干细胞(embryonic stem cells,简称ES细胞)和从胚胎生殖嵴原始生殖细胞(primordial germ cells, PGC)分离建系的胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,简称EG细胞);另一类是先在成年组织和器官,以后在胎儿组织被证明其存在,随后个别也在体外培养和建系成功的干细胞, 称为组织干细胞(tissue stem cells),又称成体干细胞(adult stem cells)。

三、胚胎干细胞研究简史

哺乳动物早期胚胎体积小,又在母体子宫内发育,因此,要在体内对各类干细胞的分化及其机制进行实验研究几乎不可能。从20世纪50年代开始,人们一直在致力于寻找一个既能在体外增殖,又具有胚胎细胞全能性(totipotency)或多能性的(pluripotency)并通过适当条件能被诱导分化为各种类型分化细胞的实验模型。20世纪50年代末美国发育生物学家Stevens(1967)将着床前发育阶段的小鼠胚胎(包括受精卵)或12天胚龄的胚胎生殖嵴异位移植到同系成年小鼠辜丸或肾脏被膜下,移植后7天,发现有80%接种灶出现并发展为畸胎瘤。从中分离、培养和建立了胚胎性癌细胞(embryonal carcinoma cell, EC)系,揭开了胚胎性干细胞早期研究的序幕。EC细胞既具有恶性生长又具有早期胚胎细胞发育多潜能性的双重性质。在20 世纪70年代, EC细胞常用作研究哺乳动物发育遗传以及细胞分化的实验模型,并取得了一些重要结果。后因EC细胞核型异常,分化细胞类型有限等缺点而不再被使用。

20世纪80年代初,英国Evans和Kaufman以及美国Martin 2家实验室独立地从小鼠囊胚成功地建立了能在体外不断增殖,并维持不分化状态的多潜能胚胎干(ES)细胞系,开创了ES细胞生物学研究的新时代。但此后ES细胞在其他动物上的分离和建系却颇受挫折,直到20世纪80年代后期才有所突破,见表 19.1。20世纪90年代初,美国Matsui等从小鼠9天胚胎生殖嵴建立了多潜能的胚胎生殖细胞系,同一时期,少数其他动物也相继建立了ES或EG细胞系。1998年美国威斯康星大学Thomson等人利用36枚新鲜或冻存的人工体外受精胚胎,获得人ICM细胞,经体外培养后,首次成功地建立了5株人类ES细胞系,同年, John Hopkins医学院Shamblott等人从5-9周人流胚胎的生殖嵴和肠系膜首次培养出人EG细胞系。第二节胚胎干细胞

胚胎干细胞又称ES细胞主要是指从早期胚胎的卵裂球、囊胚ICM细胞分离培养和建系的细胞。而从胚胎生殖嵴中PGC分离培养建成的称胚胎生殖细胞简称EG细胞。这2类干细胞统称为胚胎性干细胞,其最基本的重要特性是具有稳定地在体外自我更新并保持不分化和发育的多能性,即可以在体外分化为属于3个胚层的各种细胞。

一、ES和EG细胞培养、建系技术

体外培养建系ES和EG细胞的技术以小鼠的最为成熟,成功率最高,其基本原则是有赖于获得全能性胚胎细胞或细胞团并建立体外适合其增殖和抑制分化的培养系统。由于早期胚胎细胞离体后极易发生分化,首先要解决阻止其分化、确保维持其全能性或多能性这一关键问题。目前常用的细胞分化抑制物主要有3种:饲养层细胞(feeder layer cells)、特殊细胞的条件培液(conditioned medium),如BRL(Buffalo rat liver)细胞条件培液,分化抑制因子(differentiation inhibitory factor, DIF),如白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor, LIF)。此外,也有添加通过gp130信号转导途径的细胞因子,例如,白介素6(lL一6)、Oncostatin M和睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor, CNTF)等同样可达到维持小鼠ES细胞的不分化状态。因此,体外培养ES和EG细胞可划分为两大类:饲养层培养法和无饲养层培养法。(一)饲养层细胞培养法

不论ES细胞或EG细胞,原代或初期培养阶段一般都需依赖于能分泌使它们在体外存活和增殖所必需生长因子的饲养层细胞。

不同类型的饲养层细胞分泌的生长因子略有不同。但都要求在ES或EG细胞培养过程中的饲养层细胞保持不分裂增殖,而仍然保持细胞的代谢活性。常用的饲养层细胞有下列两种:一种是取自各种品系小鼠交配后12 dpc(days post coitum)的胚胎成纤维细胞(embryonic fibroblast, MEF)。经丝裂霉素C(mitomycin C)处理以终止细胞分裂后,用作ES细胞培养的饲养层。另一种是来自SIM小鼠(S)胚胎的对硫代鸟嘌岭(thioguanine, T)和乌本苷(ouabain, O)有抗性的成纤维STO细胞系,主要分泌干细胞生长因子(stem cell factor, SCF)和白血病抑制因子(LIF)。此外,SLCM)。一般以2-3份上述细胞条件培养液加120%胎牛血清,共同组合成无饲养层的ES 细胞培养系统。但往往在胚胎干细胞原代和建系初期缺乏饲养层时,用这种条件培养液培养ES和EG细胞成功率不高,因此,正确使用饲养层细胞和条件培养液在ES/EG细胞建系初期仍是成功的一个关键因素。(三)ES和EC细胞的体外培养 1.ES细胞

不同动物,甚至同种不同品系动物的胚胎发育速度和方式存在着较大差异,例如,猪ICM细胞生长与小鼠的不一样,其生长速率很慢,且有一个休眠(quiescent)时期。因此,ES细胞培养建系需根据各个物种而选择不同发育阶段的早期胚胎。例如,一般小鼠多选用3-4 d的囊胚或210 d 的囊胚,绵羊取8-9 d的囊胚,人和牛取7-8 d的囊胚。同时,经体外受精的胚胎或由核移植获得的重构胚胎在体外培养至所需适当的发育阶段也是选取ES细胞培养的有效材料来源。

基本培养液为含15%4.5 dpc的小鼠囊胚主要由己分化的滋养外胚层(trophectoderm)和未分化的ICM细胞组成,前者细胞表面一般已表达主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC),能识别其相应抗体和形成免疫复合物,在补体存在时可导致细胞发生免疫溶解。囊胚去除透明带,直接暴露于稀释的兔抗JCR小鼠脾细胞抗血清(抗H10.5 dpc小鼠胚胎,在解剖镜下用镊子剖取包含原始生殖细胞(PGC)的生殖嵴组织，以0.02% EDTA液孵育含PGC细胞的生殖嵴组织, 37 0C , 15 min。吸管轻吹打散,接种于铺有MEF或STO饲养层细胞的4孔培养板内。接种细胞首先出现贴壁生长,每天或隔天更换培养液。生殖嵴组织培养物在饲养层细胞上分裂增殖,480和GCTM-2抗体均可起反应。人与猴是近亲,因此,人与猴的ES细胞都表达 TRA分子,而啮齿动物小鼠却缺(见表19.2),推测TRA可能是灵长类多能胚胎干细胞特异性的分子标记。

Oct-4是生殖系专一性转录因子,在小鼠胚胎发育早期、生殖细胞谱系以及体外培养的多能胚胎干细胞中特异地表达,被认为是全能和多能性的一种标志基因。小鼠、猪和包括人类在内的灵长类动物的ES和 EG细胞都表达Oct3 d更换培养液,50 d后,这种拟胚体发育成软骨细胞,经Alcian blue液染色,显示出明确的软骨细胞特征,细胞间存在着11型胶原。小鼠ES细胞经过拟胚体阶段,结合无血清和多种生长因子、有丝分裂原处理,可被诱导分化为分泌胰岛素的、类似胰岛的结构。近来利用人ES细胞经过悬浮培养获得胚体,再经如bFGF等生长因子诱导可分化为以产生胰岛素为特征的胰岛β样细胞,为临床糖尿病的细胞治疗提供了β细胞来源打下基础。

ES细胞定向诱导分化为肝细胞已有少数几篇报道。国内蒯小玲等成功地用RA、肝细胞生长因子(HGF)、β-神经生长因子(β-NGF)共同添加至细胞培养液,被诱导分化细胞从形态学、生化和肝细胞功能性标记等指标都证明是具有功能性的肝细胞。但仅使用RA,虽能分化为上皮样细胞,可是并不表达各种肝功能的生化指标,例如,白蛋白、AFP、G-6-P、α1-AT、肝核因子-4和SAPK/ERK激酶-1(SEK1)等,表明 HGF和β-NGF是诱导小鼠ES细胞分化为功能性肝细胞的重要因子。在现阶段,通过不同的诱导途径可将ES细胞诱导成肝细胞。但体外诱导,体内诱导以及体内外相结合的诱导分化,总的来看, ES细胞定向分化为肝细胞的分化率和在体内与正常肝的嵌合率都还不高,这是一个急需解决的问题。

由于ES细胞易进行遗传操作,近年日本科学家Toyooka将标记基因GFP或lacZ定点敲人(knock in)ES细胞Mvh基因(在生殖细胞分化中特异表达的基因)位点,用以ES细胞体外分化期间追踪生殖细胞的产生。体外ES细胞形成拟胚体时,出现Mvh阳性的生殖细胞,与分泌骨形态发生蛋白(BMP4)的细胞共培养下,可促进这种Mvh阳性生殖细胞分化。将这种Mvh阳性生殖细胞接种人CD-1(ICR)裸鼠辜丸被膜下,可进一步分化成熟为精子。同年早些时候,美国Hubner等人也报道了小鼠ES细胞在体外可发育为进入减数分裂期的卵原细胞(oogonia),在体外观察了卵子发生(oogenesis)过程。第三节成体干细胞

20世纪初, Pappenheim根据对骨髓中的造血细胞发生过程的形态学观察,提出了骨髓中存在着未分化干细胞的设想,认为未分化的干细胞通过各个中间阶段的前体细胞最终生成成熟的多种类型血细胞。第一次提出了成体干细胞(adult stem cell)的概念。成体干细胞是指一群分布在成体组织中尚未分化的、具有自我更新潜能并负有构建和补充某种组织的各种类型细胞的干细胞,故又名组织干细胞。实际上,成体组织中存在干细胞是个体发育进化史的产物, 涉及组织器官的再生能力和创伤修复等基本特性。例如,骨髓组织的造血干细胞可分裂、分化为血液系统的各种细胞,定期补充细胞成分或失血。小肠和皮肤中的干细胞也分别能分化、补充和更新小肠和皮肤组织的一些细胞。传统的观点曾认为,干细胞一旦分化成熟,就不再分裂增殖了;人体除了血液、皮肤、消化管上皮和肝脏的组织干细胞有一定的再生能力外,其他组织器官例如神经组织基本上不再具有再生能力。同时也认为在成体中存在的、属于某组织器官的成体干细胞是专能或限能的,例如造血干细胞只能分化为血液系统的各种细胞等。但是,新近的研究表明,这些成体干细胞的发育潜能可跨越组织或胚层的界限。例如,从成年小鼠脑组织分离的神经干细胞移植入经X射线照射过的小鼠骨髓部位,则分化出血液细胞。此后,发现人和小鼠的神经干细胞具有分化为肌细胞和胚胎多种组织细胞的潜能。看来,神经干细胞随着微环境条件的改变,其分化潜能会有所变化。因此,神经干细胞同样具有可塑性,能分化为非神经类型的细胞。人们把成体干细胞具有跨越组织或胚层分化的这一特性称为干细胞的可塑性(plasticity)或跨越分化(transdifferentiation).这些新概念从根本上动摇了早先经典的关于组织干细胞分化的胚层限制理论。成体干细胞分化的多能性表明：当机体需要的时候,细胞的命运不是一成不变的。成体干细胞可以“多向分化”的多潜能性的发现,不仅从理论上改写了“组织特异性干细胞只能向特定方向分化”的传统概念,而且还为许多疾病的细胞治疗提供了新的思路和有希望的前景。

目前,比较一致的看法是：成体干细胞是一种处于尚未终末分化的、处于干/祖或前体细胞状态的成体细胞,它来源于成年和未成年个体的组织干细胞。在正常生理条件下,倾向于分化成并更新所在组织的各种细胞。但在特定的外界条件诱导下,一种组织的成体干细胞能超越该特定组织、胚层分化成其他组织的功能性细胞,补充参与其他组织损伤的修复等。

一、成体干细胞具分化可塑性

在成体干细胞的研究中,近年来最重要的发现是干细胞具有可塑性(plasticity)。证据大多数来自小鼠的实验,人们确信机体中成体干细胞的可塑性现象具有普遍性。(一)骨髓干细胞

骨髓是由不同类型多种细胞成分组成的组织,除了分化的血细胞和间质细胞外,其中主要有二类成体干细胞：一类是造血干细胞(hematopoietic stem cell, HSC),能生成各种血细胞;另一类是间质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC),能生成内皮细胞、脂肪细胞和成纤维细胞等。一些实验室通过全骨髓移植实验证明,骨髓中的细胞在不同微环境的位点,除了形成各种血细胞和衍生于间质干细胞的各类细胞外,还可以被诱导分化为神经细胞、肌细胞、骨和肝细胞等外、中、内3个胚层的不同类型的分化细胞(表19.4)。证明骨髓组织中含有的干细胞具有多潜能性,在特定的条件下可跨越组织或胚层分化的能力,能够分化为内皮、神经元、胶质细胞和肝细胞等。

目前已知道骨髓中存在着造血干细胞(HSC)和间质干细胞(MSC)两类干细胞,为区别这两类干细胞在分化潜能上的不同,便把骨髓干细胞分离和纯化。体外培养的骨髓细胞,HSC细胞呈悬浮集落生长;而MSC细胞则贴壁生长,通过换液很容易把两者分开。发现两者也都具有多潜能性。

1.间质干细胞

从骨髓组织分离的MSC细胞在体外单独培养时,经证明具有分化为包括骨细胞、软骨细胞、腱、脂肪细胞和肌细胞等潜能,也能分化成内皮细胞和内胚层的肝细胞。MSC细胞移植至脑中,可分化为非间质细胞性质的神经细胞,特别是神经元、神经胶质细胞。当MSC细胞注射入早期囊胚,然后移植入假孕母鼠,分析嵌合体动物,发现MSC细胞可参与大多数(但不是所有)体细胞类型的分化;当MSC细胞移植入正常宿主时,则除了肝、肺和肠的上皮外,主要分化为造血细胞的谱系世代。当MSC细胞移植入小量射线照射的宿主,则造血系统和胃肠道组织有所增加。

2.造血干细胞

在成体干细胞中,HSC细胞是研究得最早和最多的一种异质性很强的干细胞。由于已知HSC细胞表面存在着一些标志,可用流式细胞仪或免疫磁性分选技术从骨髓细胞中分离和纯化出HSC细胞。经移植至不同的体内微环境,可分化为三胚层的各种类型细胞,包括心肌、骨骼肌、血管内皮系统,肝细胞、肺泡、食管、肠道、胃、胆管以及皮肤和神经细胞等。因此,骨髓中的HSC与MSC一样,分化潜能具有很大的可塑性,可分化为跨越胚层的各种类型细胞。HSC细胞在体外培养时,发现血细胞系之间,即淋巴细胞系与髓性细胞系之间和系内也存在分化方向的转变。

(二)神经干细胞

受经典的造血发生和无脊椎动物神经发育研究的启示,发现了神经干细胞。起初,把神经发育过程中未成熟的、增殖中的各类细胞称为神经前体细胞(progenitor cell)。因此,神经干细胞是神经系统中一类能自我更新并产生神经元和神经胶质细胞的前体细胞。早期研究是从哺乳动物胚胎的中枢神经系统和周围神经系统开始的,确证了胚胎的神经系统中普遍存在着这类神经干细胞。其后,进行成体神经干细胞分离,发现成体神经干细胞主要存在中枢神经系统的2个神经发生区域：即脑的海马区(hippocampus)和次脑窒区(subventricular zone, SVZ)以及包括脊髓等其他一些非神经性的区域。

总而言之,神经干细胞或神经前体细胞在个体发育过程中,经受发育上的时空变化,成体神经干细胞的可塑性受到限制。通过个体不同发育阶段的神经干细胞移植至宿主不同部位,可以发现,神经干细胞移植物分化为神经细胞的潜能具有发育阶段的依赖性,成体中的神经干细胞分化潜能随发育遂受到限制。用成体中枢神经系统的干细胞经体外培养扩增的移植实验表明,其在成体微环境中尚有一定的可塑性。例如,成体脊髓衍生的干细胞通常不产生神经元,若注人成体脑的海马区,则能产生神经元;成年海马衍生的干细胞移植入SVZ,则能产生嗅球神经元。然而,至今却没有直接证据表明成体神经干细胞分化为如在胚胎中正常产生的有突触的神经元。当然,移植的神经干细胞或神经前体细胞在宿主不同部位也会受到所在微环境各种因素的相互影响;神经干细胞经体外不同方式处理后移植至宿主体内,也可能会改变其分化行为和表型。

倘若神经干细胞分化潜能被限制,这些限制能否撤消?即成体干细胞能否重新获得如在胚胎正常所产生各类细胞的能力?现有的研究资料表明,把体外培养的SVZ干细胞生长成神经球通过注射入鸡胚神经嵴(neural crest)途径,其分化潜能有所扩大,可产生周围神经系统。另外,神经干细胞的子代也有可能恢复发育多潜能性。例如,通常唯一产生神经胶质细胞的视神经O2A中枢前体细胞在体外可恢复其多能的、产生中枢神经系统的干细胞。表明环境因子能改变神经干细胞的命运或增加其可塑性。(三)肝干细胞

由于肝干细胞本身缺乏特异性标志,给肝干细胞分离和鉴定带来了困难。人们对肝干细胞存在与否一直有争论,直到最近才得以确认。早在1958年, Wilson JW等人认为“肝组织中存在着干细胞”,其依据是肝组织因营养损伤或部分切除时仍能再生,但已存在的肝细胞不能分裂和再生,因而,新生的肝细胞只能来源于肝干细胞。肝癌发生的研究也支持了肝干细胞存在的假设。化学致癌实验时,位于门管周围的小细胞发生增殖,这种具有卵圆形细胞核、少细胞质的细胞称为卵圆形细胞(oval cell)。在人的肝组织中,同样发现这种卵圆形细胞。对发育中的肝具有自我更新能力的细胞进行单克隆培养和分析,证明这种卵圆形细胞在体外能大量增殖,细胞移植后在形态和功能上可分别分化为肝细胞和胆管上皮细胞,表明肝卵圆形细胞是肝干细胞,具有分化为肝细胞和胆管上皮细胞的双潜能性。近来发现,骨髓和血液中的细胞能分化为肝细胞,因此,肝干细胞来源可能有两条途径：一是肝组织外的来源,近年越来越多的资料证明,骨髓和血液是卵圆形细胞的来源,人的骨髓细胞也能分化为肝细胞和胆管上皮细胞;二是肝组织内处于休眠期的肝干细胞。双潜能的肝干细胞同时表达肝细胞和胆上皮细胞的标志物,细胞角蛋白CK7 和CK19为胆上皮细胞的特异性标志;白蛋白和肝代谢酶细胞色素P450可作为肝细胞的特异性标志物;而细胞角蛋白CK8和CK18在肝实质细胞和胆上皮细胞都有表达。角蛋白CK14可区分单层和复层上皮细胞。OV-6抗体是啮齿类卵圆形细胞的特异性标志物,但不是人肝干细胞的标志,原因不清楚。肝干细胞一般除了其特有的形态学外,常结合上述特有标志通过免疫组织化学、流式细胞检测和原位杂交等方法予以鉴定。

双潜能卵圆形细胞不仅能分化为肝细胞和胆管上皮细胞,当分别移植到胰腺和十二指肠时,还能跨越组织各自分化为胰腺细胞和肠上皮细胞。表明肝干细胞在适当的微环境能被诱导分化为仍是内胚层其他组织的细胞。但还未见有跨胚层分化的直接例证。但是,利用胚胎的肝组织在体外培养则大量生成血细胞,但很难说明这些血细胞就是来自肝干细胞,很可能这些血细胞是来自胚胎肝组织中混杂的造血干细胞。卵圆形细胞异常分化或分化突然停止有可能发生肝细胞癌。国内外曾有报道,在培养液添加适当的分化诱导剂,如丁酸钠或二甲基亚砜,可诱导和促进肝干细胞分化为肝细胞。在培养液中添加转化生长因子β(TGFβ)或肝细胞生长因子(HGF),可诱导肝干细胞分化为胆管上皮细胞。因此,结合细胞分化诱导物等培养条件,有可能使肝干细胞定向分化为肝细胞或胆管上皮细胞。(四)骨骼肌干细胞 肌肉的生长、更新和修复是与肌纤维周围的卫星细胞(satellite cells)有关,故一般认为这就是骨骼肌干细胞。近年证明,从肌肉分离的干细胞不仅能分化出肌肉,还能产生血液细胞成分。Jiang等人从3天龄的新生小鼠前后肢近端分离和体外培养骨骼肌细胞,得到一类被称为多能成年前体细胞(multipotent adult progenitor cells, MAPC)的细胞。这种细胞具有类似于小鼠骨髓MAPC的表型和特征,能在体外增殖。肌肉来源的MAPC在体外特定的细胞因子条件下可被诱导分化成内皮、肝细胞样细胞和包括进一步分化为神经元及神经胶质样细胞的神经外胚层细胞。表明骨骼肌组织中确实存在着干细胞,并具有分化的可塑性。

二、成体干细胞研究中的问题(一)异质性

实际上,成体干细胞在组织中的所含数量极少,又缺乏特异性检测标志,很难从组织中将其分离纯化出来。因此,在一些成体干细胞“可塑性”的实验中,人们质疑所谓“可塑性”可能是组织中混杂着几种或一群不同类型的干细胞而分化的结果,这在骨髓组织的干细胞实验中更为明显。在肝细胞谱系分化的各类祖细胞中,就发现存在着异质性(heterogeneity)和可塑性。干细胞的异质性在遗传学中是指由于不同遗传机制而产生相同或类似的表型。异质性在某种程度上是干细胞固有的特性。造血干细胞异质性早已被证明。从骨髓肌干细胞的研究中发现,这类所谓的肌干细胞在特定环境下分别分化出肌肉和血细胞,其实这是由含有两类分化方向完全不同的干细胞所致。这一实验结果使得成体干细胞“可塑性”理论受到质疑和动摇。

人们也曾设想成体组织中存在着类似胚胎干细胞那样的多能性干细胞。Zuk等人(2001)发现,从人体脂肪组织来源的干细胞可分化为肌肉、骨和软骨。但该作者指出不排除该组织中混入了诸如随血流循环进人脂肪组织的造血干细胞(HSC)或其他类型干细胞的可能性。因此,无法确证这类分化为肌肉、骨和软骨的就是“脂肪干细胞”。也有人相信“来源于肌肉组织的多能干细胞”其实就是随血液循环迁移或过客(itinerate)而停留在肌肉的造血干细胞。因为当这些细胞被移植入动物体内,在内皮细胞生长因子等细胞因子的剌激下,会被重新激活而分化为血细胞。甚至估计小鼠体内有100-400个HSC细胞处于这种状态。目前还不能确定成体干细胞的可塑性是否因干细胞异质性直接所致,因此,要明确一种干细胞与其组织来源及归宿之间的确切关系,还得进行大量的研究。(二)干细胞所处的环境

小鼠造血干细胞和胰腺干细胞都能分化出肝细胞并能修复小鼠受损的肝组织。但是,移植造血干细胞和胰腺干细胞对修复小鼠受损肝组织的效果远远不如移植成熟肝细胞本身。看来干细胞所处环境的信号对于细胞分化有重要影响。特殊稳定的微环境可以控制造血干细胞生长和分化,这种微环境在早期被称为壁鑫(niche)。现在微环境定义为能容纳一个或多个干细胞并能控制其自我更新和分化的组织细胞和胞外基质的组合。它是由各种调控活性成分组成的空间,细胞间保持的距离以及局部的近距离调控正适合于细胞间相互作用。从视网膜再生研究中发现一个很有趣的现象。将视网膜祖细胞分离出来在体外培养一些时间后,分化为视网膜感受器细胞。如果从小鼠眼中分离的干细胞移植入正常小鼠视网膜,它们将不能分化和被整合入正常视网膜;而当移植入损伤的视网膜中,则分化为感受器细胞,并整合入该受损组织,尽管尚未确证这类整合入的细胞是否具有正常细胞的功能,但组织环境确实对干/祖细胞的命运有决定性的作用;同时,也不可忽视干/祖细胞本身对所处环境信号的反应能力。众所周知,脊髓产生的运动神经元具有对来自各组织的信号具有反应的能力;从鼠脑中获取的神经干细胞在体外因中断了来自大脑的信号刺激,故在体外培养条件下,只能一过性地分化为多巴胶能神经元,不能维持长久的多巴胶能神经元的功能。因此,干细胞与所处的细胞环境之间精巧而默契的协调作用可能是干细胞“可塑性”的重要原因之一。(三)成体干细胞可塑性的调控

目前认为,人们对成体干细胞“可塑性”现象的解说有4种：①机体中存在着多种来源和不同分化方向的成体干细胞群体,分别能定向地向各自的组织来源的细胞分化。②机体中存在着一种多潜能的成体干细胞,在不同的微环境信号的刺激下,可向不同组织的细胞方向分化。③某特定组织来源的成体干细胞,除了向该组织的细胞成分分化外,在特殊信号的剌激下,可重新编程(reprogramming),继续分化为其他类型的细胞。④某种成体干细胞与特定组织来源的干细胞发生融合,成为具有来自2种细胞的遗传物质,染色体数量也是正常2倍的“杂交细胞”。但使前者具有了后者的分化潜能,因此,成熟的干细胞也许无法变成不同类型的细胞,但它们可自动与现有的干细胞融合,形成其他组织类型的细胞。例如神经干细胞与造血干细胞融合,从而“变性”为血液干细胞,分化为各类血细胞。

正如上所述,干细胞的“可塑性”一方面与其所处微环境密切相关,即受到外源性因素调控;另一方面也受到成体干细胞本身对这类外来信号做出反应的固有特性即内源性因子调控。外源性因素通常指各种体液因子、邻近同种或异种细胞的直接接触、细胞外基质等的作用。至今大多数干细胞的可塑性研究是基于组织损伤而造成的微环境,因而人们正把注意力集中在组织损伤后的微环境对干细胞的调控作用。

在内源性调控机制中,一般认为转录因子在其中起着重要的作用。细胞分化中,一个已明确定向分化程序的谱系特异性转录因子过表达会致使该谱系特异性转录因子功能发生颉顽作用,并使原有的基因程序活性保持沉默。这样,这类细胞对微环境中特定细胞因子的反应是分化成另一类新细胞。例如,在成肌细胞分化中,转录因子MyoD和Myf5起着调控成肌细胞调控因子(myogenic regulatory factor, MRF)网络中的颉顽作用。在成纤维细胞中, MyoD的过表达可致使这类细胞转变为成肌细胞,同时, Myf 5又抑制成肌细胞的分化活性。然而,在某些情况下,这一过程却是可逆的。在转基因C2C12细胞的肌管形成中,同源异形框基因的异位表达降低了成肌细胞调控因子MRF和MyoD表达水平,致使多核的肌管去分化而转变成单核的细胞, 进一步再分化为软骨细胞、脂肪细胞等中胚层类型的细胞。(四)分化细胞的功能

目前成体干细胞包括“可塑性”的研究的结果大多数是基于检测新生组织中终末分化细胞的特定蛋白或标记的表达,很少直接论及到终未分化细胞的生理功能。然而,有的不同类型的细胞却具有相同的标记, 例如,内皮细胞与成熟血细胞亚群表面标志都有CD31,甚至HSC表面也有CD31,因此,选用CD31作为进行分析HSC能否分化为内皮细胞时,显然是不合适的。不少人对仅仅检测到某种标志就证明该细胞或组织具有正常细胞功能的做法常持有质疑;特别是干细胞的异质性和类型以及环境的复杂性使得人们对体外培养的干细胞移植入体内能否发挥预期功能表示怀疑。确实,目前在技术学上还无法适当地证明成体干细胞在所移植的组织或器官中产生出来的细胞具有功能性,例如,在研究帕金森氏病的动物实验中,体外培养的多巴胶能神经元移植入脑内,可观察到被整合入动物脑组织,但不能证明这些新的神经元是否具有完整的功能。因此,欲要确定供体干细胞的终末分化状态应该包括细胞表面标志鉴别和细胞功能确定这2方面因素。例如,神经干细胞移植后，“可塑”为血细胞,既要鉴定出分化细胞具有血细胞的表面标志,又要肯定使已接受致死辐射剂量照射过的受体小鼠存活并使造血功能恢复。只有这样,才能完整地确定干细胞的分化细胞特性和功能。(五)体外增殖

成体干细胞从某一组织分离、纯化后,目前,尚未有现成的能较长期在体外维持其未分化状态并大量增殖的方法。因大多数成体干细胞研究是用于再生医学作细胞治疗的目的,常设计使用两种手段:其一是将分离的成体干细胞直接移植入动物或患者的损害组织器官,以期在受损组织原位分化出该组织中成熟的功能性的细胞;其二是在体外将干细胞诱导分化为所需要的成熟细胞,而后将细胞移植入损害组织或器官。鉴于成体干细胞很难分离、纯化和体外培养,因而,目前这两种手段都不能奏效。一个典型的例子是将烫伤患者的、含有皮肤干细胞的健康皮肤切取下来,进行短暂体外培养,再重新植回患者的皮肤损害部位,发现尽管皮肤可愈合,但不能产生汗腺和毛孔,无法行使正常功能。由于在体内观察组织行为极为困难,而且得到的结果不确定因素较多,因而,继续探索成体干细胞体外培养和增殖的条件和方法,将是一项极为重要的课题。

第四节干细胞在再生医学中的应用

干细胞(包括胚胎干细胞)生物学研究的最新进展,使人们对干细胞独特的生物学特性有新的了解。成体干细胞的“可塑性”或“跨越分化”潜能的发现具有重要的理论意义和应用价值。不仅向传统的细胞分化和细胞周期理论提出了挑战,而且成体干细胞在细胞生物学行为上与癌细胞很相似,成了研究癌症发生机制新的生长点。在再生医学中可望利用成体干细胞修复创伤、疾病的细胞治疗并介入整形外科学和组织工程学等方面,其中除了神经干细胞作为脑损害的细胞治疗研究有较多的报道外,大部分工作集中在组织工程学领域,干细胞在生物和再生医学中的应用主要有下列4方面。

一、哺乳类发育的体外模型

如前所述,体内研究哺乳动物胚胎发育和各类细胞分化极为困难。干细胞,特别是ES细胞因其富具独特的发育全能或多能性质,在嵌合体动物中,ES细胞又能参与个体发育,并产生包括生殖系在内的各种类型细胞,表明ES细胞类似胚胎的ICM细胞,不仅具有完整的发育潜能性,而且也持有对调节正常发育所有信号的应答能力。在特定的体外培养条件和诱导剂共同作用下,ES细胞在体外可被诱导分化属于3个胚层谱系的各种高度分化的体细胞,例如神经细胞、肌肉、血细胞、上皮细胞和成纤维细胞等。同时,在这些细胞分化过程中,必然先经过一定的前体细胞阶段。因此,ES细胞不仅是研究特定类型细胞分化的模型,而且也是研究某些前体细胞起源和细胞谱系演变较理想的实验体系。可能ES细胞体外分化途径和机制与在体胚胎的不完全相同,但在分子水平包括发育的遗传程序仍有共同或相似之处。小鼠的卵受精后的卵裂期较长,约 3天才到达16细胞期,进一步分裂,约在4.5 dpc时形成囊胚。这时胚胎出现第一次分化,产生以后参与胚外结构的滋养外胚层和原始内胚层。胚泡内约由20个左右细胞组成内细胞团(ICM)。胚胎进一步增殖和空腔化(cavitation),约在5.0 dpc时逐形成原始外胚层或上胚层(epiblast),后者在原肠期除了主要发育成胎儿本体的3个胚层组织外,还有部分细胞将来参与胚外中胚层的发育。悬浮生长的体外细胞拟胚体在结构排列上与在体胚体的有些不同,但一些类型的细胞分化秩序和方式却非常类似于在体的胚体。因此小鼠ES 细胞已被公认为是研究哺乳类发育较理想的模型。人ES细胞建系后,一些国家的法律和道德伦理禁止用于人体胚胎研究。但近来认识到,ES细胞本身缺乏胚外组织,不可能产生完整的胚胎。因此,许多国家在法律上禁止以克隆或复制人为目的的前提下,已允许将人ES细胞类似于小鼠ES细胞的体外实验那样,用于研究人类胚胎在体内所不能分析的发育、分化和调节信号等事件。这无疑将丰富、充实和完善人们对人类早期发育或畸胎发生等认识。

二、介导改造动物的基因

ES细胞介导的转基因优点明显超过常规如逆转录病毒载体整合至早期胚胎或显微注射DNA至受精卵原核等一般转基因方法,主要是因为在后一途径中,导人的多拷贝DNA存在着随意整合的问题,产生的转基因动物效果一般不太理想。利用ES细胞技术学的优点是在于产生一种新的经生殖系传递的转基因动物以前,可以通过在体外ES细胞系统中,研究和筛选外源DNA表达质粒的构建、整合和表达。从而可提高产生转基因动物的效率;同时,ES细胞在体外增殖迅速,可作为重组ES细胞取之不尽的来源;ES细胞的基因改造技术,如剔除(knock out)、敲入(knock in)能够精确地改造细胞内存在的基因,克服位置效应、插入失活和特殊内源性基因失活等弊病。重组ES细胞的基因组经生殖系传递途径,可不断地提供和产生同样基因型的、丰富的转基因动物的种子细胞来源。近年来,在制备转基因动物出现了一个新的策略利用体外培养的体细胞经外源基因转染后,取其细胞核显微注射至去核卵细胞,从而获得转基因动物,这一技术路线显然比直接显微注射DNA至去核卵细胞效果更好,特别是对那些至今还未建立ES细胞系但核移植已获成功的那些动物。

三、人体的基因和细胞治疗

干细胞生物学技术和理论的发展,促使医学产生了一门新的学科分支,即再生医学(regenerative medicine)。它是一门探索人体组织和器官自身所具有的构建、更新和修复的能力,并使用多种修复术手段使人体的组织器官功能得以改善或恢复新兴学科。干细胞的基因和细胞治疗则是再生医学的重要组成部分之一。这里基因治疗是指用遗传改造过的人体细胞直接移植或输入患者体内,达到控制和治愈疾病为目的的治疗手段,又称细胞治疗。人ES细胞经遗传操作后一般能稳定地在体外增殖传代,克服了目前基因治疗中需大量靶细胞来源的主要问题。

四、组织工程的种子细胞来源

第五篇：英语四级重点学习资料

英语四级重点学习资料

现如今，只要学习，大家就离不开学习资料，学习资料能够帮助大家根据自身的需要针对性的.进行练习和突破。相信很多人都在为没有好的学习资料而发愁，下面是小编收集整理的英语四级重点学习资料，仅供参考，希望能够帮助到大家。

英语四级重点学习资料汇总1：作文开头句式

①My own experience tells me that …

②In my opinion , we should attack more importance to …

③As for my own idea about … I believe …

④As far as I am concerned , I plan to …

⑤Personally , I prefer …

⑥In my view , both sides are partly right in that …

⑦But for me , I would rather …

⑧My own point of view is that …

⑨In conclusion , I support the statement that …

⑩As regards me , I tend to choose …

英语四级重点学习资料汇总2：作文开头句式

①Some people like / prefer …, while others are / feel inclined to …

②There are different opinions among people as to … Some believe … whole hold …

③Some people claim that … is superior to … Others , however , disagree with it.④Some people believe … Others maintain … Still others claim …

⑤Some people suggest … Others , however , hold the opposite opinion.⑥On the one hand , people tend to … On the other hand , they feel …

⑦Some people argue that … Others , in contrast , believe that …

⑧Although more and more people come to believe … there are still others who insist that …

⑨On the contrary , there are people in favor of …

⑩There are some people who hold different opinions about …

英语四级重点学习资料汇总3：四级语法动词知识

系动词

系动词亦称联系动词(Link Verb)，作为系动词，它本身有词义，但不能单独用作谓语，后边必须跟表语(亦称补语)，构成系表结构说明主语的状况、性质、特征等情况。

说明：

有些系动词又是实义动词，该动词表达实义时，有词义，可单独作谓语，例如：

He fell ill yesterday.他昨天病了。(fell是系动词，后跟补足语，说明主语情况。)

He fell off the ladder.他从梯子上摔下来。fell是实义动词，单独作谓语。

1)状态系动词

用来表示主语状态，只有be一词，例如：

He is a teacher.他是一名教师。(is与补足语一起说明主语的身份。)

2)持续系动词

用来表示主语继续或保持一种状况或态度，主要有keep, rest, remain, stay, lie, stand,例如：

He always kept silent at meeting.他开会时总保持沉默。

This matter rests a mystery.此事仍是一个谜。

3)表像系动词

用来表示“看起来像”这一概念，主要有seem, appear, look,例如：

He looks tired.他看起来很累。

He seems(to be)very sad.他看起来很伤心。

4)感官系动词

感官系动词主要有feel, smell, sound, taste,例如：

This kind of cloth feels very soft.这种布手感很软。

This flower smells very sweet.这朵花闻起来很香。

5)变化系动词

这些系动词表示主语变成什么样，变化系动词主要有become, grow, turn, fall, get, go, come, run.例如：

He became mad after that.自那之后，他疯了。

She grew rich within a short time.她没多长时间就富了。

6)终止系动词

表示主语已终止动作，主要有prove, trun out,表达“证实”，“变成”之意，例如：

The rumor proved false.这谣言证实有假。

The search proved difficult.搜查证实很难。

His plan turned out a success.他的计划终于成功了。(turn out表终止性结果)

英语四级重点学习资料汇总4：四级语法动词知识

什么是助动词

1)协助主要动词构成谓语动词词组的词叫助动词(Auxiliary Verb)。被协助的动词称作主要动词(Main Verb)。

助动词自身没有词义，不可单独使用，例如：

He doesn't like English.他不喜欢英语。

(doesn't是助动词，无词义;like是主要动词，有词义)

2)助动词协助主要动词完成以下功用，可以用来：

a.表示时态，例如：

He is singing.他在唱歌。

He has got married.他已结婚。

b.表示语态，例如：

He was sent to England.他被派往英国。

c.构成疑问句，例如：

Do you like college life?你喜欢大学生活吗?

Did you study English before you came here?你来这儿之前学过英语吗?

d.与否定副词not合用，构成否定句，例如：

I don't like him.我不喜欢他。

e.加强语气，例如：

Do come to the party tomorrow evening.明天晚上一定来参加晚会。

He did know that.他的确知道那件事。

3)最常用的助动词有：be, have, do, shall, will, should, would