第五章 微生物的营养和培养基习题整理（最终版）

第一篇：第五章 微生物的营养和培养基习题整理（最终版）

第五章 微生物的营养和培养基

一、选择题

1.大多数微生物的营养类型属于：（）

A.光能自养

B.光能异养

C.化能自养

D.化能异养 2.蓝细菌的营养类型属于：（）

A．光能自养

B.光能异养

C．化能自养

D.化能异养 3.碳素营养物质的主要功能是：（）

A.构成细胞物质

B.提供能量

C.A，B 两者 4.占微生物细胞总重量70%-90% 以上的细胞组分是：（）

A.碳素物质

B.氮素物质

C.水 5.能用分子氮作氮源的微生物有：（）

A.酵母菌

B.蓝细菌

C.苏云金杆菌 6.大肠杆菌属于（）型的微生物。

A.光能无机自养

B.光能有机异养

C.化能无机自养

D.化能有机异养 7.自养型微生物和异养型微生物的主要差别是：（）

A.所需能源物质不同

B.所需碳源不同

C.所需氮源不同 8.基团转位和主动运输的主要差别是：（）

A.运输中需要各种载体参与

B.需要消耗能量

C.改变了被运输物质的化学结构 9.单纯扩散和促进扩散的主要区别是：（）

A.物质运输的浓度梯度不同

B.前者不需能量，后者需要能量

C.前者不需要载体，后者需要载体

10.微生物生长所需要的生长因子（生长因素）是：（）

A.微量元素

B.氨基酸和碱基

C.维生素

D.B，C二者 11.培养基中使用酵母膏主要为微生物提供：（）

A.生长因素

B.C 源

C.N 源 12.细菌中存在的一种主要运输方式为：（）

A.单纯扩散

B.促进扩散

C.主动运输

D.基团转位 13.微生物细胞中的C素含量大约占细胞干重的：（）

A.10%

B.30%

C.50%

D.70% 14.用牛肉膏作培养基能为微生物提供：（）

A.C 源

B.N 源

C.生长因素

D.A，B，C 都提供 15.下列物质可用作生长因子的是（）。A.葡萄糖

B.纤维素

C.NaCl

D.叶酸 16.蓝细菌和藻类属于（）型的微生物。

A.光能无机自养

B.光能有机异养

C.化能无机自养

D.化能有机异养 17.某种细菌可利用无机物为电子供体而以有机物为碳源属于（）型的微生物。A.兼养型

B.异养型

C.自养型

D.原养型

18.实验室培养细菌常用的培养基是（），培养放线菌的是（），培养真菌的是（A.牛肉膏蛋白胨培养基

B.马铃薯培养基

C.高氏一号培养基

D.查氏培养基

19.培养百日咳德氏菌的培养基中含有血液，这种培养基是（）。A.基础培养基

B.加富培养基

C.选择培养基

D.鉴别培养基 20.下列培养基（）是合成培养基

A.LB培养基

B.牛肉膏蛋白胨培养基

C.麦芽汁培养基 D.查氏培养基 21.用来分离固氮菌的培养基中缺乏氮源，这种培养基是一种（）。A.基础培养基

B.加富培养基

C.选择培养基

D.鉴别培养基 22.水分子可以通过（）进入细胞。

A.主动运输

B.扩散

C.促进扩散

D.基团转位 23.需要载体但不能逆浓度运输的是（）。

A.主动运输

B.扩散

C.促进扩散

D.基团转位 24．实验室常用的培养细菌的培养基是（）

A牛肉膏蛋白胨培养基 B.马铃薯培养基

C.高氏一号培养基

D.麦芽汁培养基 25．下列物质属于生长因子的是（）

A．葡萄糖

B．蛋白胨

C．NaCl

D．维生素

26．培养料进入细胞的方式中运送前后物质结构发生变化的是（）A.主动运输

B.被动运输

C.促进扩散

D.基团移位 27．E．coli属于（）型的微生物。

A.光能自养.B.光能异养

C.化能自养

D.化能异养 28．实验室常用的培养放线菌的培养基是（））。A 牛肉膏蛋白胨培养基 B.马铃薯培养基

C.高氏一号培养基

D.麦芽汁培养基 29．酵母菌适宜的生长PH值为（）A.5.0-6.0 B.3.0-4.0 C.8.0-9.0 D.7.0-7.5 30．细菌适宜的生长PH值为（）A 5.0-6.0 B.3.0-4.0 C.8.0-9.0 D.7.0-7.5 31．蓝细菌属于（）型的微生物。

A.光能自养

B.光能异养

C.化能自养

D.化能异养 32．硝化细菌属于（）型的微生物。

A.光能自养

B.光能异养

C.化能自养

D.化能异养 33．培养硝化细菌的碳源、氮源、能源依次是（）A．葡萄糖、氨、葡萄糖

B．葡萄糖、铵盐、太阳能 C．二氧化碳、硝酸盐、氨

D．二氧化碳、氨、太阳能 34．蓝藻常利用的碳源、氮源依次为（）A．CO2、氨基酸

B．氨基酸、葡萄糖 C．CO2、硝酸盐

D．葡萄糖、蛋白胨

35．微生物需要的营养物质中需要量最大的是（）A．碳源

B．氮源

C．生长因子

D．无机盐 36．下列有关碳源的叙述，不正确的是（）

A．碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物 B．某些碳源可以作为微生物的主要能源物质

C．蛋白质一定不能作碳源

D．不同种类的微生物的碳源可能不同 37．下列关于生长因子的叙述不正确的是（）

A．生长因子是指微生物生长不可缺少的微量有机物

B．一般是酶、核酸的组成部分 C．自身不能合成，必须由外界补充

D．主要包括维生素、氨基酸和碱基等 38．大肠杆菌属于（）型的微生物。

A.光能无机自养

B.光能有机异养

C.化能无机自养 D.化能有机异养 39．硝化细菌属于（）型的微生物。

A.光能无机自养

B.光能有机异养

C.化能无机自养 D.化能有机异养 40．某种细菌可利用无机物为电子供体而有贾稀为碳源，属于（）型的微生物。A.兼养型

B.异养型

C.自养型

D.原养型

41、化能无机自养微生物可利用（）为电子供体。A.CO2

B.H2

C.O2

D.H2O 42．用来分离产胞外蛋白酶菌株的酪素培养基是一种（）。A.基础培养基

B.加富培养基

C.选择培养基

D.鉴别培养基 43.固体培养基中琼脂含量一般为（）。A.0.5%

B.1.5%

C.2.5%

D.5% 44．用来分离固氮菌的培养基中缺乏氮源，这种培养基是一种（）。A.基础培养基

B.加富培养基

C.选择培养基

D.鉴别培养基 45．水分子可通过（）进入细胞。

A.主动运输

B.扩散

C.促进扩散

D.基团转位 46．被运输物质进入细胞前后物质结构发生变化的是（）。A．主动运输

B.扩散

C.促进扩散

D.基团转位 47.以下碳源中，微生物优先利用的是（）

A.葡萄糖

B.蔗糖

C.淀粉

D.纤维素

二、是非题

1.最常用的固体培养基的凝固剂是琼脂。（）

2.大多数微生物可以合成自身所需的生长因子，不必从外界摄取。（）3.培养基按其制成后的物理状态可分固体.液体和半固体培养基。（）4.碳源对微生物的主要作用是构成细胞骨架和提供能源。（）

5.实验室做固体培养基时；常加1-2%的琼脂作凝固剂；做半固体培养基时，琼脂加入量通常是0.5%。（）

6.促进扩散必须借助于特异载体蛋白和能量。（）

7.营养物跨膜的主动运输必需依靠载体和能量，而被动扩散不需要载体和能量。（）8.微生物的碳源物质既提供碳素营养，又提供微生物代谢能量。（）9.微生物可以合成自身所需的生长因子，不必从外界摄取。（）

10.对含葡萄糖的培养基进行高压蒸汽灭菌时可在121.3℃加热20min即可。（）11.半固体培养基常用来观察微生物的运动特征。（）

12.在用于分离G+细菌的选择培养基中可加入结晶紫抑制G-细菌的生长。（）13．培养营养缺陷型微生物的培养基必须同时加入维生素、氨基酸、嘌呤及嘧啶。（）14．为使微生物生长旺盛，培养基中营养物质的浓度越高越好。（）15．伊红美蓝（EMB）培养基中，伊红美蓝的作用是促进大肠杆菌的生长。（）１6．在固体培养基中，琼脂的浓度一般为0.5—1.0%．（）

17．主动运输是广泛存在于微生物中的一种主要的物质运输方式。（）18.光能自养菌和化能自养菌都利用二氧化碳作碳源合成细胞有机物。（）

19.基团转位运输方式中, 除了在运输过程中物质发生化学变化这一特点外, 其它特征均与主动运输方式相同。（）

20.单纯扩散不能进行逆浓度运输, 而促进扩散则能进行逆浓度运输。（）

三、填空题

1.实验室常用的有机氮源有____________和____________等, 培养基按其制成后的物理状态可分为____________、____________和____________。

2.在营养物质运输中需要载体参加的运输方式是__________、__________和__________，其中乳糖通过__________ 方式运输，3.光能异养菌以__________作能源，以__________为碳源，以__________作供H体将__________合成细胞有机物。

4.化能自养菌以__________取得能量，以__________作碳源合成细胞有机物。

5.根据微生物生长所需要的碳源和能源的不同，可把微生物分为________、______、______、_______ 四种营养类型。

6.在营养物质的四种运输方式中，只有__________运输方式改变了被运输物质的化学组成。7.微生物所需要的营养物质包括__________、__________、_________、__________和另一种不可缺少的物质__________。

8.化能自养型和化能异养型微生物，生长所需的能量前者来自于__________的氧化放能、而后者则来自于__________的氧化放能，生长所需的碳源前者以__________为主,后者则以__________为主要来源。

9.主动运输运送营养物质的方式主要存在于好氧细菌中，它能将________、_________、___________运进微生物细胞。

10.在营养物质运输中，能逆浓度梯度方向进行营养物运输的运输方式是__________、__________。

11.在营养物质运输中既消耗能量又需要载体的运输方式是____________________。12.光能自养型和光能异养型微生物的共同点是都能利用__________；不同点在于前者能以__________作唯一碳源或主要碳源，而后者则以__________作主要碳源，前者以__________作供氢体而后者则以__________作供氢体。

13.生长因子主要包括__________、__________和__________，其主要作用是____________________、____________________。

14．根据__________，微生物可分为自养型和异养型；根据__________，微生物可分为光能营养型和化能营养型；根据__________，微生物可分为无机营养型和有机营养型。15.在营养物质运输中, 能逆浓度梯度方向进行营养物运输的运输方式是 __________, __________。

16.在营养物质运输中顺浓度梯度方向运输营养物质进入微生物细胞的运输方式是 __________ 和 __________。

17．根据碳源、能源和电子供体性质的不同，微生物的营养类型可分为__________、__________、__________ 和__________。

18．按用途划分，培养基可分为__________、___

_______、__________和____ ______等4种类型。

19．常用的培养基凝固剂有__________、__________和__________。

20.11．实验室常用的有机氮源有__________ 和__ __等，无机氮源有__ __和__________ 等；为节约成本，工厂中常用___ __等作为有机氮源。21.在营养物质运输中既消耗能量又需要载体的运输方式是__________, __________。22.微生物的营养类型, 根据其所需C素营养物质的不同, 分为 __________ 和 _________； 根据其生长所需的能量来源不同分为 __________ 和 __________。23.化能自养型和化能异养型微生物, 生长所需的能量前者来自于 __________ 的氧化放能, 而后者则来自于 __________ 的氧化放能； 生长所需的碳源前者以 __________ 为主, 后者则以 __________ 为主要来源。

四、解释题

1.碳氮比； 2.光能自养型； 3.化能自养型； 4.化能异养型； 5.水活度； 6.培养基； 7.生长因子； 8.单纯扩散； 9.主动运输； 10.天然培养基 11.基团移位； 12．选择培养基； 13．基础培养基； 14．合成培养基；

五、简答题

1.微生物需要哪些营养物质，它们各有什么主要生理功能？ 2.试述划分微生物营养类型的依据，并各举一例微生物说明之。3.试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的基本特点。

4.举例说明微生物在生长过程中培养基pH值可能发生的变化，并提出解决方法。5.简述固体培养基的配制和灭菌方法。

6.以EMB（伊红美蓝乳糖琼脂培养基）为例，分析鉴别培养基的作用原理。

7．列表比较微生物的四大营养类型。8．配制培养基的原则和方法是什么？ 9．四种物质运输方式的比较

10．何谓培养基？培养基有哪些类型？

第二篇：微生物实验室培养基制作个人总结

一．培养基的制备

仪器材料 微波炉、高压灭菌器、玻璃器皿、三角瓶，PH试纸、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠、氢氧化钠。操作方法

１． 肉汤培养基制作 ⑴成分

肉浸膏（0.3%牛肉膏）500ml 蛋白胨 5g 氯化钠 2.5g 磷酸氢二钾 0.5g ⑵准备工作 配制调节PH用的0.1M氢氧化钠和1M氢氧化钠溶液。⑶操作

①称取牛肉膏，放入玻璃皿中，另入适量蒸馏水配成0.3%。②按比例加入适量蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾搅拌。③搅拌加热至完全溶解。

④PH值调至7.8，煮沸10min，站足水分。

⑤待冷至40～50℃时，过滤。滤液分装于无菌试管内（达试管的1/3）或每管加4-5ml。塞好棉塞。

⑥置高压灭菌器内高压灭菌（121.3℃，20分钟即可）2．普通琼脂培养基制作

⑴成分 肉汤培养基 500ml 琼脂 8-15g ⑵制法

①先矫正肉汤培养基PH值。

②加入适量琼脂煮沸溶解，矫正PH值至7.4～7.6。③灭菌后使杂质沉淀。

④取其上清液灭菌后分装。倒入无菌平皿内凝固即成普通琼脂平板。

二、平板划线接种法 【方法】

1． 在平板底面上用记号笔作好标记，如菌种、班级，姓名、接种日期等，并在平板底面边缘作一原划线标记。

2．右手拿接种环，烧灼灭菌并冷却后，取混合菌液少许。3．左手斜持（45°角）琼脂平板，略开盖，平板在乙醇灯火焰左前上方约5～6cm距离。右手持已取标本的接种环在琼脂平板表面之一侧边缘，作原划线，见图5-2A。

4．接种环烧灼灭菌，冷却后自原划线末端沾取少许标本，使接种环与平板表面成30～40°角，运用腕力将接种环在平板上来回划线，见图5-2B。划线要密但不能重叠，充分利用平板的表面积，不要划破琼脂表面，并注意无菌技术，避免空气中细菌的污染。也可用分区划线法，即从原划线末端沾取标本后只划平板的1/5～1/4，划毕烧灼灭菌接种环，冷后同样划线，共计4～5次。接种环烧灼灭菌后方可放下（图5-2C、D、E）。

三.细菌在培养基中生长特性的观察 1.琼脂培养基 ⑴大小

⑵形状：圆形、不整形、针尖状、露滴状、同心圆状、颗粒状。⑶边缘：整齐、波浪状、锯齿状、卷发状。

⑷表面性状：光滑、粗糙、同心圆状、放射状、皱状、颗粒状。⑸湿润度：湿润、干燥。

⑹隆起度：表面隆起、轻度隆起、中央隆起、扣状扁平。

⑺色泽及透明度：无色、白色、黄色、橙色、红色；透明、半透明、不透明。⑻质地：坚硬、柔软、粘稠。

⑼溶血性：α型溶血 菌落周围有透明溶血环。

β型溶血 半透明带绿色溶血环。

γ型溶血 不溶血。

药物敏感试验

基本原理

细菌对抗菌药物的敏感试验，通常简称为细菌的药敏试验。在给患传染病动物进行治疗时，测定细菌对药物的敏感性，不仅有助于选择合适的药物，而且可为药物的用量提供依据。某种细菌对药物的敏感度，是指抑制该细菌生长所需的最低药物浓度。细菌在体外的敏感度和临床的疗效大体是符合的，但也有不一致者。目前供药敏试验的方法很多，可归纳为两大类，即稀释法和扩散法。有的以抑制细菌生长为评定结果的标准，有的则以杀灭细菌为标准。一般可报告为某菌对某抗菌药物敏感、轻度敏感或耐药。

稀释法是将抗菌药物稀释为不同的浓度，作用于被检菌株，定量测定药物对细菌的最低抑菌浓度(minimal inhibition concentration, MIC)或最低杀菌浓度(minimal bacteriocidal concentration, MBC)，可在液体培养基或固体培养基中进行。

扩散法（diffusion method）是将抗菌药物置于已接种待测细菌的固体培养基上（或内），抗菌药物通过向培养基内的扩散，抑制敏感菌的生长，从而出现抑菌环（带）。药物扩散的距离越远，达到该距离的药物浓度就越低，故可根据抑菌环的大小，判断细菌对药物的敏感度。抑菌环（带）边缘的药物含量即该药物的敏感度。此法操作简便，容易掌握，但只用于定性。因受纸片含药量不均及接种量等多种因素影响，结果不够准确，因此试验时应同时设立已知敏感度的标准菌株作为对照。

器材准备

1．菌种 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、炭疽杆菌。

2．药敏试纸 含青霉素、链霉素、庆大霉素、氯霉素、磺胺嘧啶等药敏试纸，分装于灭菌平皿中。

3．培养基 普通肉汤、普通琼脂平板培养基。

4．其他 95％酒精、小镊子、麦氏比浊管、1mL刻度吸管、橡皮胶头等。

实验步骤

1．试管双倍稀释法

（1）抗生素原液的配制及保存：将抗生素制剂无菌操作溶于适宜的溶剂如蒸馏水、磷酸盐缓冲液中，稀释至所需浓度。抗生素的最初稀释剂通常用蒸馏水，但是有些抗生素必须用其它溶剂作初步溶解。常用抗生素原液的溶剂和最初稀释剂见表6-1。若制剂中可能含有杂菌，配制后宜用细菌滤器过滤除菌（可用玻璃滤器或微孔滤膜，孔径0.22m，但不可用纤维垫滤器）。分装小瓶，在－20℃冷冻状态下保存，可保存3个月或更久，每次取出一瓶保存于4℃冰箱，可用1周左右。

（2）培养基：一般采用普通肉汤培养基。如细菌生长缓慢，可加入0.25％～1％葡萄糖或5％～10％血清。

（3）方法：被测菌种悬液的制备：将较多量的菌种移种于肉汤培养管中，置37℃温箱中培养6h（生长缓慢者可培养过夜），使生长浊度达9×108个/mL（相当于麦氏比浊管第3管）。

抗生素溶液的双倍连续稀释：取13×100mm灭菌带棉塞试管13支（管数多少可依具体需要而定）。另将上述菌液作1︰10 000倍稀释（生长缓慢的细菌可稀释1︰1 000或更少），除第1管加入稀释菌液1.8mL外，其余各管均各加1.0mL。继于第1管加入抗生素原液0.2mL，混合后吸出1.0mL加入第2管中，用同法依次稀释至第12管，弃去1.0mL。第13管为生长对照。

表6-1 抗生素原液的溶剂和稀释剂

抗生素

丁胺卡那霉素 氯苄青霉素 杆菌肽 羧苄青霉素 头孢羟唑 头孢唑林 头孢甲氧霉素 头孢菌素I 氯霉素 氯洁霉素 多粘菌素B或E 红霉素

溶剂 蒸馏水

0.1mol/L PBS（pH值8.0）

蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水

0.1mol/L PBS（pH值8.0）

甲醇 蒸馏水 蒸馏水 甲醇

稀释剂 蒸馏水

0.1mol/L PBS（pH值8.0）

蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水

0.1mol/L PBS（pH值8.0）庆大霉素 卡那霉素

新青霉素I、II、III 青霉素G 萘啶酸 链霉素 四环素 妥布霉素 万古霉素

蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 0.1mol/L NaOH

蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水

蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水 蒸馏水

培养及结果观察：置37℃培养16～24h，观察结果。凡药物最高稀释管中无细菌生长者，该管的浓度即为MIC。

MBC的测定：从无细菌生长的各管取材，分别划线接种于琼脂平板培养基，于37℃培养过夜（或48h），观察结果。琼脂平板上无细菌生长而含抗生素最少的一管，即为MBC。也可将上述各管在37℃继续培养48h，无细菌生长的最低浓度即相当于该抗生素的MBC。

结果报告：一般以MIC作为细菌对药物的敏感度，如第1～8管无细菌生长，第9管开始有细菌生长，则把第8管抗生素的浓度报告为该菌对这种抗生素的敏感度；如全部试管均有细菌生长，则报告该菌对这种抗生素的敏感度大小为第1管中的浓度或对该药耐药；如除对照管外，全部都不生长时，则报告为细菌对该抗生素的敏感度等于或小于第12管的浓度，或高度敏感。

2．扩散法（K-B法）

（1）含药滤纸片的制备：含有各种抗菌药物的滤纸片是扩散法中应用最多的。目前，我国生产含药滤纸片的单位不多，购买较为困难，即使购买也易过期失效，所以一般可应用自制的药敏滤纸片。其方法如下：

滤纸片：选用新华1号定性滤纸，用打孔机打成直径为6mm的小圆片，根据需要将数片包成一纸包或放入带棉塞的小瓶或小平皿内，121℃灭菌15min，置100℃干燥箱内烘干备用。

药液的配制：常用药物的配制方法及所用浓度见表6-2。

表6-2 药敏纸片的制备及含药浓度

药 物 青霉素 剂 量 注射用粉剂

制备方法

20mg加pH值6.0 PB缓冲液15.5mL，取1mL加PB缓冲液9mL

20mg加pH值6.0 PB缓冲液20mL 20mg加pH值7.8 PB缓冲液 8mL 以pH值7.8 PB缓冲液作100倍稀释 以pH值6.0 PB缓冲液稀释 20mg加水20mL溶解

药液浓度（g/mL）

200 1 000 2 500 2 500 1 000 1 000

纸片含量（g）10 25 25 10 10 新青霉素 注射用粉剂

注射用粉剂

链霉素

注射用针剂 注射用针剂

氯霉素

口服粉剂 土霉素 口服粉剂或片剂

25mg粉末，加2.5mol/L HCl 15mL 溶解后，以pH值6.0 PB缓冲液或水稀释 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 500 3 000 3 000 1 000 3 000 1 000 1 000 1 000 1 000 10 000 10 000 1 000 10 000 10 000 10 000 125 10 10 10 10 10 10 30 30 10 300 10 10 10 10 100 100 100 100 100 100 1.25 四环素 口服粉(片)

同土霉素

剂

注射用粉剂 口服片剂

以生理盐水稀释 同土霉素

以pH值3.0 PB缓冲液溶解后以pH值6.0 PB缓冲液稀释

以pH值8.2 PB缓冲液溶解后稀释 以水溶解，以pH值7.8 PB缓冲液稀释 同红霉素

以pH值7.8 PB缓冲液稀释 以pH值7.8 PB缓冲液稀释 以pH值7.2 PB缓冲液稀释 以pH值7.8 PB缓冲液稀释

以1mol/L NaOH 1mL溶解1片，用pH6.0 PB缓冲液稀释 以1mol/L NaOH 1mL溶解1片，用pH6.0 PB缓冲液稀释

以二甲基酰胺或丙酮溶解 以水稀释

以水或pH值8.2 PB缓冲液稀释 100mg加2.5mol/L HCl 1.25mL，加水至5mL，以pH值6.0 PB缓冲液稀释 100mg加水1mL，浓HCl 0.7mL溶解，以pH8.2 PB缓冲液稀释

100mg加水2mL，浓HCl 0.5mL溶解，以pH8.2 PB缓冲液稀释

100mg加浓HCl 1mL，溶解后以pH6.0 PB缓冲液稀释

1片研碎后加水2mL，浓HCl 0.25mL，以pH值6.0及7.8 PB缓冲液稀释 金霉素

口服粉剂

新霉素 红霉素 口服片剂 注射用粉剂 注射用粉剂

卡那霉素

注射用针剂

庆大霉素 注射用针剂 多粘菌素 注射用粉剂 万古霉素 注射用粉剂 呋喃妥因 粉剂或片剂 呋喃西林 粉剂或片剂 痢特灵 磺胺嘧啶片剂

粉剂或针剂

钠

磺胺二甲基针剂

嘧啶

长效磺胺 片剂 周效磺胺 片剂 磺胺甲基异恶唑

磺胺5-甲氧嘧啶

磺胺增效剂

片剂 片剂 片剂

含药纸片的制备：将灭菌滤纸片用无菌镊子摊布于灭菌平皿中，以每张滤纸片饱和吸水量为0.01mL计，每50张滤纸片加入药液0.5mL，不时翻动滤纸片，使滤纸片将药液均匀吸净，一般浸泡30min即可。然后取出含药纸片置于一纱布袋中，以真空抽气使之干燥。或直接将滤纸片摊于37℃温箱中烘干，烘烤的时间不宜过长，以免某些抗生素失效。对青霉素、金霉素等纸片的干燥宜用低温真空干燥法。干燥后，立即装入无菌的小瓶中加塞，置于干燥器内保存，也可将纸片贮藏于－20℃或家用冰箱冰冻。少量供工作用的纸片从冰箱中取出后应在室温中放置1h，使纸片温度和室温平行，防止冷的纸片遇热产生凝结水。

药敏纸片的鉴定：取制好的纸片3张，以标准敏感菌株测其抑菌环，大小符合标准者则为合格。纸片的有效期一般为4～6个月。

（2）操作方法：K-B法是用含有一定量抗生素的药敏纸片，贴在已接种试验细菌的琼脂平板上，经37℃培养后，抗生素浓度梯度通过纸片上弥散作用而形成，在敏感抗生素的有效范围内，细菌的生长受到抑制，在有效范围外，细菌能够生长，故能形成一个明显的抑菌环。以抑菌环的大小来判定试验菌对某一抗生素是否敏感及敏感程度。

用接种环挑取菌落4～5个，接种于肉汤培养基中，置37℃培养4～6h。

菌液稀释：用灭菌生理盐水稀释培养液使浊度相当于硫酸钡标准管（配制方法：1.175％氯化钡0.5mL、1％硫酸溶液99.5mL，充分混匀，将此溶液置于与肉汤培养基相同的试管中，用前充分振摇）。

用无菌棉拭子蘸取上述肉汤培养液，在管壁上挤压，除去多余的液体，用棉拭子涂满琼脂表面，盖好平皿，在室温下干燥5min，待平板表面稍干即可放置含药纸片。

用灭菌镊子以无菌操作取出含药纸片贴在涂有细菌的平板培养基表面。一个直径9cm的平皿最多只能贴7张纸片，6张纸片均匀地贴在离平皿边缘15mm处，一张位于中心。贴纸片时要轻轻按压，以保证与培养基密切接触。将平皿放37℃恒温箱，培养16～18h，观察结果（如图6-1）。结果判定：观察含药纸片周围有无抑菌环，量取其直径（包括纸片直径）大小，用毫米数记录，按抑菌环直径的大小报告敏感、中度敏感和耐药，具体标准见表6-3。

表6-3 抗菌药物的抑菌环与敏感标准

抗菌药物 丁胺卡那霉素 肠杆菌、肠球菌 葡萄球菌和青霉素敏感细菌 嗜血杆菌 杆菌肽 肠杆菌科 绿脓杆菌 先锋霉素I 氯霉素 氯林可霉素 粘菌素

复方甲氧异恶唑 红霉素 每片含药量(g)

耐药 10 10 10 10 100 100 30 30 2 10 25 15

≤11 ≤11 ≤10 ≤19 ≤8 ≤17 ≤13 ≤14 ≤12 ≤14 ≤8 ≤10 ≤13

抑菌环的直径（mm）

中等敏感 12～13 12～13 12～23

9～12 18～22 14～16 15～17 13～17 15～16 9～10 11～15 14～17

敏感 ≥14 ≥14 ≥24 ≥20 ≥13 ≥23 ≥17 ≥18 ≥18 ≥17 ≥11 ≥16 ≥18 庆大霉素 卡那霉素 甲氧苯青霉素 萘啶酸 新霉素 呋喃妥因 苯唑青霉素 青霉素G 葡萄球菌 其他细菌 30 5 30 30 300 1 10 10 300 10 300 300 10 30 2

≤12 ≤13 ≤9 ≤13 ≤12 ≤14 ≤10 ≤20 ≤11 ≤8 ≤11 ≤12 ≤12 ≤11 ≤9 ≤14

13～14 14～17 10～13 14～18 13～16 15～16 11～12 21～28 12～21 9～11 12～14 13～16 13～18 12～13 10～11 15～16

≥15 ≥18 ≥14 ≥19 ≥17 ≥17 ≥13 ≥29 ≥22 ≥12 ≥15 ≥17 ≥19 ≥14 ≥12 ≥17 多粘菌素B 链霉素 磺胺 四环素 妥布霉素 万古霉素 氯洁霉素

注意事项

1．稀释法

（1）接种量：接种细菌量的多少与MIC有一定关系。如用敏感的葡萄球菌对氯苄青霉素进行检测时，接种量增加1 000倍，MIC只略有增加，但对甲氧苯青霉素的敏感度则因接种量的不同而有较大变化，即使同一菌株，接种量小时为敏感，接种量增大时，其MIC则增加许多倍。

（2）培养基成分及培养条件：培养基的组成成分应保持恒定，外观清晰透明，pH值适宜。为了观察方便，还可向各管中加入葡萄糖及指示剂，以指示剂颜色的改变判定其是否生长。同时要注意选择适宜的培养温度，一般在12～18h观察药敏试验结果。如时间过长，细菌将会在高浓度的药物中生长。其原因，一是由于被轻度抑制的细菌开始繁殖，另一方面则是因为有些抗生素在37℃情况下不稳定，在其被破坏之后，受抑制的细菌也会再次生长繁殖。

（3）对于一些色泽深或本身呈混浊的中草药，其试管培养后不易观察细菌的生长情况。可从培养管移至平板培养基上，观察各管中的细菌是否被杀死。这种方法只能测定药物的最低杀菌浓度。

抑菌圈图示

含药纸片

抑菌圈

细菌菌苔（4）稀释时，每一个稀释度均应更换吸管。菌液及抗生素的加量要准确。

2．扩散法

（1）K-B纸片扩散法必须使用Mueller-Hintion（MHA）培养基，因其解释度的数据是用此培养基积累的，MHA培养基普通冰箱可保存2～3周，用前须放37℃10min，以使形成的水雾干燥。此培养基适合于快速生长的细菌，生长缓慢的细菌或厌氧菌，不宜采用K-B技术及其解释标准。

（2）接种用的菌液浓度必须标准化，以细菌在平板上的生长恰呈融合状态为标准，接种后应及时贴含药纸片和放入35℃（或37℃）培养。

（3）培养的温度要恒定，时间为16～18h，结果不宜判读过早。因培养过久，细菌能恢复生长，使抑菌环变小。培养时不应增加CO2，以防某些抗菌药物形成的抑菌圈大小发生改变及影响培养基的pH值。

第三篇：微生物历年习题

2006——2010年微生物试题整理（微生物实验切片，图文皆有，大家写实验报告可以参照）

【试题】2010-6-20/山东大学/口腔医学院{五年制）、公卫、临五/2008级/微生物

名词解释：3分×10个

1，非细胞型微生物

2，溶原性转换

3，败血症

4，BCG

5，衣原体

6，刺突

7，IFN

8，潜伏感染

9，HBeAg

10，HIVgp120

简答题：共50分

1，比较革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的不同

2，简述外毒素的特征

3，简述霍乱肠毒素的致病机制

4，简述病毒感染的致病机制

5，简述流感病毒分型依据及抗原变异的形成6，简述HIV的复制过程

【试题】2009-12-26/山东大学/药学院/2007级/微生物

一、名词解释九个每个三分

细菌L型、热原质、消毒、SPA、Cholera Toxin、感染性核酸、IFN、gp120、prion

三、简答

1.外毒素与内毒素区别

2.病毒对宿主细胞致病作用

3.乙肝传染源、传染途径、致病机制

4.结核菌素试验原理 结果判断 意义

【试题】2009-12-26/山东大学/医学院/临床七年制/07级/医学微生物学/A卷

名解

adsorption

antigenic drift

BCG

Mycoplasma

bacteria L form

normal flora

slow virus infection

HBeAg

大题（36分）

1.virulence factors of G+bacteria(10)

2.What is IFN refer to ? mechanism? properties of anti-virus effect?(8)

3.pathogenicity of Staphylococci aureus?（8）

4.what is gp120?co-receptor of HIV?HIV infective sources and transmission route?(10)

【试题】2009-01-04 /山东大学/药学院/2006级/ 药学/微生物试题

名解9个

LPS肥达实验 病毒体 垂直传播 转化潜伏感染 BCG消毒 HBsAg

问答4个

细菌的致病机制

葡萄球菌的致病物质和所致疾病

IFN是什么？其抗病毒的特点？

肠道病毒的共同特征

【试题】2009-01-04/山东大学/医学院/2006级/临床口腔药学七年制/医学微生物学/微生物 名解8*3‘

pyrogen

transformation

defective virus

CPE

SPA

chlamydia

prion

HBsAg

简答

1，细菌特殊结构的作用

2，什么是重配，以流感为例说明其可能出现的结果及临床价值

3，描述A群链球菌的致病因素及可导致的疾病

4，HIV的致病机制

对这次考试的总结：细菌对氧的情况一道没考很诡异啊

总论细菌病毒真菌的选择题比例是10：13：16：1

细菌病毒部分致病考的比较多

选择题都是那本书上的没讲的菌或毒基本不考，貌似有一两个选择吧

病毒注意大重点还是肝炎和HIV，小重点容易忽略的是虫媒和肠道的共

同特点，注意先天和性传播

【试题】2008—01—07/山东大学/医学院/05级/七年制/医学微生物（英文原版）

名词解释

1．bacterial L form

2．Sterilization

3．slow virus infection

4．virion

5．Mycoplasm

6．SPA

7．antigenic shift

8．HIV gp120

简答题：

1.Please compare the characteristic of bacterial exotoxins with endotoxins.9/

2.What kind of viral vaccine are in common used at present ? Please try to give an example for each kind and explain their characteristics.9/

3.How dose IFN exert its antivirus function? What characteristics dose this function have ? 8/

【试题】2008-01-07/山东大学/药学院/05级/药学/微生物

一、名词解释 细菌L型 CPE抗原性转变 支原体 朊粒 毒性噬菌体 BCG顿挫感染

二、简答

1、细菌的致病机制

2、细菌耐药性的遗传机制

3、IFN的定义？生物学活性。

4、血清中能检出与HBV相关成分有哪些？其意义何在？

5、霍乱弧菌的致病机制。

【试题】2007-01/山东大学/药学专业/微生物试题

名解：

菌群失调症

类毒素

AVP

SPA

外斐反应

抗原性转变

Dane颗粒

简答：

什么是正常菌群？简述正常菌群对机体的生理作用

简述病毒感染的致病机制（包括细胞水平的感染、机体水平的感染）

简述A群链球菌的致病物质和所致疾病

试述结核菌素试验原理、结果判断及意义

何谓人畜共患病？哪些原核细胞型微生物可引起人畜共患病？

试述乙肝病毒的抗原组成及意义

试述HIV的传播途径及致病机制

何谓Prion？可导致人和动物哪些疾病？

何谓质粒？简述其特征

【试题】2007-01-16/山东大学/医学院/2004级/七年制/微生物

一.名解：1.pyrogen;2.defective virus:3.prion:4.lysogenic phage:5.transformation:

6.DPT:7.HBsAg:8.chlamydia:9.opportunistic pathogen:

二，大题：

1。链球菌的致病物质和疾病。

2。BCG的定义、应用、检测。

3。IFN的定义、特点。

4。重配定义，以流感病毒说明。

5。HBcAg,gp120,HA的功能或临床意义。

【试题】2006-06-21/山东大学/医学院/2003级/六年制/微生物

名词3*10：LPS，SPA，灭菌，基因工程疫苗，朊粒，AVP，前噬菌体，基因重配，选择都是白皮书上的，比较简单，问答7*5：

1.质粒是什么，有何特点

2.潜伏感染，并以HSV-1为例，描述其特点

3.正常菌落的作用和解剖位置

4.结核分枝杆菌的传播途径和致病因子

5.HBV基因组及其编码的蛋白

第四篇：微生物检测课后习题

绪论：

1.食品的卫生标准内容包括那些？感官指标、理化指标、微生物指标

2.对食品进行微生物检验具有何意义？是衡量食品卫生质量的终于指标，也是判断被检食品是否能食用的科学依据；可以判断食品加工环境及食品卫生的情况，为卫生管理工作提供科学依据；可以有效地防止人畜共患病的发生；保证产品质量，避免不必要的损失

3.食品微生物检验的范围包括那些？生产环境的检验；原辅料的检验；食品加工、储藏、销售等环节的检验；食品的检验

4.食品卫生标准中的微生物指标有那些？菌落总数；大肠菌群；致病菌；霉菌及其毒素；其他指标 菌落总数概念和测定意义

1.什么是菌落总数？是指食品检验经过处理，在一定条件下培养后，所得1mL（g）或1cm2面积检样中所含菌落的总数

2.测定食品、饮料等产品的菌落总数有什么意义？（1）判定食品被细菌污染的程度及卫生质量（2）预测食品存用的期限长短（3）了解细菌在食品中的繁殖动态

3.画出平板倾注法测定菌落总数的示意图：步骤:检样—稀释处理—选择3个适宜稀释度—倒平板—培养—菌落计数—报告结果

4.在测定菌落总数时，如何选择菌落进行计数？(1)选取菌落数在30-300之间的平板,若有两个稀释度均在30-300之间时,比值小于或等于2取平均数,比值大于2则取稀释度较低平板菌落数(2)如均大于300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告(3)如均小于30,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告(4)如菌落数有的大于300,有的又小于30,不再30-300之间,以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告(5)如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1乘以最低稀释倍数报告

5.在菌落总数的检验中，要注意哪些事项？(1)对照平板出现几个菌落时,要追加对照平板(2)吸管进出瓶子或试管时,吸管口不得触及瓶口、管口的外围部分（3）吸管插入试样液内的深度不得小于2.5cm，调整时要使管尖与容器内壁紧贴（4）进行稀释时，吸管口不得与稀释液接触（5）检验从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min（6）稀释倍数越高菌落数越少，如出现逆反现象，不可作为检样计数报告的依据。

6.在菌落总数的检验中，如何根据样品的特性选择培养温度和时间？普通食品37℃48h倒放平板；清凉饮料、调味品、糕点、酒类：37℃24h；水产品：30℃48h 大肠菌群测定

1.什么是大肠菌群？大肠菌群由那些微生物组成？指一群需氧及兼性厌氧，在37℃能分解乳糖，产酸产气的革兰氏染色阴性无芽孢杆菌；组成：大肠埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、产气克雷伯氏菌属、阴沟肠杆菌

2.测定食品、饮料等产品的大肠菌群数有什么意义？（1）判断食品是否受到粪便的污染（2）有利于控制肠道传染病的发生和流行（3）有利于控制食品在生产加工、运输、保存等过程中的卫生状况

3.大肠菌群具有那些生物学特性？形态与染色：革兰氏阴性，无芽孢杆菌，发酵乳糖产酸产气；培养特性：在EMB琼脂平板上的典型菌落：呈深紫黑色或中心深紫黑色，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，常有金属光泽

4.在大肠菌群数的检验中，要注意哪些事项？（1）抑菌剂（2）菌落特征（3）产气量（4）MPN检索表

5.在水的大肠菌群数检验中，如何进行水样的采集？自来水（未含氟）：龙头火烧灭菌，畅流5-10秒后取样；地面水源水，江湖河，水库，水池等浸入水下20cm下取样，水井50cm下取样；漂白粉处理的水样：自来水，游泳池水，应在瓶内加入0.03g硫代硫酸钠/500,或2ml1.5%硫代硫酸钠液/500ml,除氯;运送:2小时内送检.6-10℃<6h立即检验;检验前将水样震荡5-10min 病原性球菌检测

1.金黄色葡萄球菌可产生哪些毒素和酶?溶血毒素；杀白细胞素；血浆凝固酶；脱氧核糖核酸酶；肠毒素；溶纤维蛋白酶；透明质酸酶

2.金黄色葡萄球菌在B-P平板上的菌落特征如何?说明其原理？特征：圆形，光滑凸起，湿润，成灰色至黑色，边缘色淡周围为浑浊带，在其外层有一透明带；原理：氯化锂、甘氨酸：抑制非致病性葡萄球菌的生长；丙酮酸钠：促进葡萄球菌生长；亚碲酸钾：抑制G-杆菌生长，可被金黄色葡萄球菌还原为碲盐呈黑色。

3.金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特征如何?菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有透明溶血圈（β型）

4.确认葡萄球菌为金黄色葡萄球菌的依据至少应该包括那几个试验? 5.金黄色葡萄球菌的形态与染色、培养特征如何？形态与染色：革兰氏阳性球形菌，排列呈葡萄状。无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜，可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气；培养特征：需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃、PH7.4；对营养要求不高，在普通培养基中生长良好，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛；耐盐性强，在含NaCL7.5-15%培养基中能生长；在肉汤中是浑浊生长，时间过长，有少量沉淀；在普通培养基上生长，可形成圆形凸起，表面光滑，边缘整齐，不透明，直径1—2mm的菌落能产生黄色色素；血琼脂平板：菌落大、产生完全溶血圈；BP平板：灰色到黑色边缘淡，菌落周围有一浑浊带，在其外有一透明带

食品中溶血性链球菌的检验

1.链球菌的溶血现象有那几个类型，各类型的溶血特征如何？甲型α-溶血性链球菌（菌落周围有1-2mm宽的草绿色溶血环，也称甲型溶血，这类链球菌多为条件致病菌。）、乙型β-溶血性链球菌（菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色溶血环，也称乙型溶血，该菌的致病力强，常引起人类和动物的多种疾病，与人类疾病有关的血清型90%属于A族链球菌）、丙型γ-链球菌（不产生溶血素，菌落周围无溶血环，也称为丙型或不溶血性链球菌，该菌无致病性，常存在于乳类和粪便中，偶尔也引起感染。）

2.溶血性链球菌在血平板和葡萄糖肉汤中生长有何特征？在血平板上形成灰白色，半透明、表面光滑、有乳光圆形突起的细小菌落，直径0.5-0.75mm，针尖大小，菌落周围出现溶血环；在葡萄糖肉汤中：

3.溶血性链球菌能产生什么毒素和酶？溶血毒素、致热外毒素、透明质酸酶、链激酶、链道酶、杀白细胞素

4.写出链球菌的检验程序，并说明链激酶的反应原理。检验程序：固体检验—样品处理—增菌培养—分离培养—纯化培养—生化鉴定—报告；原理： 肠道致病菌

1.肠道致病菌具有那些生物性特性？均为革兰氏阴性杆菌，中等大小，无芽孢，多数具有周鞭毛能运动；需氧或兼性厌氧，菌落中等大小，表面光滑，液体培养基浑浊生长；肠道致病菌一般不分解乳糖，而非致病菌多能分解乳糖、葡萄糖产酸或产酸产气；可还原硝酸盐为亚硝酸盐

2.肠道致病菌具有那些抗原？又称为什么？有什么特点？O抗原：也称菌体抗原，细胞壁脂多糖，耐热100℃不被破坏

H抗原：也称鞭毛抗原，鞭毛蛋白，不耐热，60℃30’可破坏

K抗原:也称表面抗原(荚膜抗原),多糖,具有阻抑O抗原发生凝集的现象,加热60℃30’可消除抑阻作用 菌毛抗原: 3.写出肠道致病菌检验的基本程序？检样—处理—增菌培养—分离培养—生化实验—血清学鉴定—报告 沙门氏菌

1．典型沙门氏菌的五项生化试验结果如何？

2.沙门氏菌的形态特征，培养特性是什么？形态特征：革兰氏染色阴性，无荚膜，无芽孢，多数有鞭毛，有动力，短小杆菌；培养特性：需氧或兼性厌氧，最适温37，PH7.2-7.4；对营养要求不高，在普通培养基上生长良好，37，24h能形成菌落中等大小，直径2-3mm，圆形或卵圆形，表面光滑湿润，无色半透明，边缘整齐的菌落；在液体培养基中，呈均匀浑浊性生长，无菌膜。3.沙门氏菌检验时为什么要进行前增菌和增菌？

4.沙门氏菌有哪些抗原？各有何特点？O、H抗原如何表示，A-F群沙门氏菌中，代表每群O特异性抗原的独特因子是什么？O抗原（主要抗原OA~OZ，O51~63，O65~67）、H抗原、表面抗原（K抗原）、菌毛抗原。

5.沙门氏菌哪几个菌型具有Vi抗原，Vi抗原对O抗原血清连实验有何影响，对含Vi抗原菌，如何做O抗原血清学实验？含有Vi 抗原的沙门氏菌：伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌。Vi抗原位于菌体的最表层，包围了O抗原，可阻碍O抗原的血清学凝集试验。破坏Vi抗原：60℃30秒，100℃5秒，石炭酸处理或人工培养后消失。

6.沙门氏菌在SS平板，TSI培养基上生长的现象如何，说明其原理

7.分离纯化后怎样选用最少的生化试验方法初步鉴定检验菌是否是沙门氏菌属的细菌

8.如何进行沙门氏菌的血清学试验 志贺氏菌 1.志贺氏菌分几个群各称为什么？抗原结构如何？K抗原对O抗原试验有何影响？A群痢疾志贺氏菌、B群福氏志贺氏菌、C群鲍氏志贺氏菌、D群宋内氏志贺氏菌；抗原结构：ABCD均是O抗原；A群、C群具有K抗原；影响：K抗原可阻碍O抗原的血清学凝集实验，煮沸处理即可。

2.写出志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌在SS、EMB平板上生长的菌落特征？志贺氏菌：无色透明，不发酵乳糖，中等大小，光滑圆形菌落；沙门氏菌：SS圆形或卵圆形，表面光滑湿润，无色半透明，边缘整齐的菌落；大肠杆菌：EMB呈深紫黑色或中心深紫色，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，常有金属光泽

3.志贺氏菌在三糖铁培养基上生长结果如何？斜面产碱仍为红色或粉红色；底层产酸不产气，变黄色；不产硫化氢，不出现黑色。

4.在志贺氏菌中，接种三糖尿病铁培养基和葡萄糖半固体培养基后，那些培养物可认为不属于本菌生长现象的范围而可弃去？在TSI表面上呈现蔓延生长的培养物；在18h-24h发酵乳糖、蔗糖的培养物；不分解葡萄糖，只在半固体培养基表面生长的培养物；产气的培养物；有动力的培养物；产硫化氢的培养物。5.如何用生化反应来区分志贺氏菌各群？用4中志贺氏菌多价血清检查，如果呈现凝集，则用A1，A2、B群多价和D群血清分别试验；如是B群，则哟个群和型因子血清分别检查；4中志贺氏菌多价血清不凝集的菌株用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1-15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3-12型多价血清及各型因子血清检查。

6.写出沙门氏菌、志贺氏菌的检验程序及其所用培养基。沙门氏菌：检验—增菌（前增菌）--分离培养—生化实验初步鉴定—血清学反映最后鉴定—报告；培养基：BS琼脂平板和XLD琼脂平板；志贺氏菌：检验—样品处理—增菌培养—SS、EMB平板分离培养—初步生化鉴定—最后血清学鉴定—报告。培养基：强选择性（SS或HE）、弱选择性（EMB或麦康凯）副溶血性弧菌

1.副溶血性弧菌的形态与染色有和特点？革兰氏阴性无芽孢多形态杆菌，单端鞭毛、两端浓染。杆状、棒状、甚至球状、丝状等；需氧或兼性厌氧，生长最好；在2~3%NaCL培养基中生长最好,无盐或食盐>10%不能生长;最适温度36℃,PH7.5-7.8;在专用选择性平板上,菌落呈圆形凸起,浑浊不透明,表面光滑,较湿润,边缘不整齐;血平板:可见溶血环

2.副溶血性弧菌的生化特性中最有特点的是那个项目，如何利用这个项目，诊断某细菌是否是副溶血性弧菌？

3.副溶血性弧菌在TSI，Nacl蔗糖，嗜盐选择性平板上培养特征如何？Nacl蔗糖平板：圆形，半透明或不透明，无粘性，绿蓝色；嗜盐性平板：圆整或不齐，隆起混浊，无粘性，无色，湿润。镜检：两端浓染 蜡样芽孢杆菌

1.引起蜡样芽孢杆菌事物中毒的常见食物有那些？什么条件下可引起蜡样芽孢杆菌食中毒？乳类、肉类、米饭、淀粉类、甜点心、凉拌蔬菜，水果，色拉 2.蜡样芽孢杆菌的形态与染色特性如何？革兰氏阳性大杆菌，芽孢不突出菌体，菌体两端较平整，多数呈链状排列，周身鞭毛，有动力

3.蜡样芽孢杆菌在普通营养琼脂和甘露醇卵黄多粘菌琼脂平板上生长的菌落特征如何？普通：菌落灰白色，不透明，边缘不整齐，表面粗糙，呈毛玻璃状或白蜡状；甘露醇卵黄多粘菌素平板：菌落呈粉红色，具有白色浑浊环。血平板：菌落呈浅灰色，不透明，似白色毛玻璃状，有溶血环。4.写出蜡样芽孢杆菌检验的基本程序？检验—稀释处理—平板分离—证实实验—培养特性观察—生化实验—报告结果 霉菌、酵母菌数测定

列表说明霉菌、酵母菌数的测定与菌落总数的测定有什么不同的地方和相同的地方？

检验程序：检验—处理—稀释—平板分离培养—菌落计数—报告 罐头类

1.罐头食品的商业无菌检验中，保温的目的是什么？目的：观察是否胖听或泄漏 2.在罐头食品的商业无菌检验中，开罐前要做好那些准备工作？用75%酒精稀球擦试无代号端，并点燃灭菌（胖听不能烧），然后开罐，但不能伤及卷边结构。3.如何判断罐头为商业无菌？该批罐头食品经审查生产记录，属于正常，抽取样品经保温试验未见胖听或泄漏，保温后开罐，经感官检查PH测定，涂片镜检，或接种培养，确证无M增殖现象。

第五篇：微生物的营养 讲课稿

第四章

微生物的营养

前几节课，我们把微生物它的形态、结构还有功能作为一个很大的部分已经讲完了。那从这节课开始，我们会讲到微生物的一些生理过程，包括微生物的营养，微生物的代谢以及微生物的生长这几大生理过程。那我们今天主要讲第四章微生物的营养。在这一章里面，我们将会讲到微生物对营养的需求，也就是说微生物要吃什么物质才能进行它的生长、繁殖、代谢等等这些活动。这些营养给它准备了，它怎样去做获得这些营养。形象地说就是我们如何给它做饭来让它吸收这些营养，也就是我们第二节要讲到的培养微生物所需要的培养基。第三节呢，你有了这些营养物质，也给它做好了，它怎么去吃这些营养，怎样去转化到它自身的细胞内，去吸收这些营养，在生长过程中还会产生一些代谢产物，它如何排出体外，这就是我们第三节要讲的营养物质是如何进入细胞的。这一章，我们主要是讲第三部分。

首先，我们来看两个概念，什么是营养物质呢？ 营养物质（nutrient）：那些能够满足微生物机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需的物质。什么是营养呢？

虽然只差两个字，但它们是截然不同的两个概念。营养（nutrition）：微生物获得、吸收和利用营养物质的过程。

所以，可以说营养物质是微生物生存的物质基础，没有这些营养物质，微生物无法生存，就更谈不上它的一些生理活动了；而营养是生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。这两个，一个是基础，一个是生理过程。

接下来，我们看一下第一节，微生物的营养要求。我们先看一下微生物的化学组成，为什么要先看一下微生物的化学组成呢，因为它能反应出微生物对一些营养物质的需求。那我们来看，对于微生物细胞来说，水是占比重最大的，占了70%-90%这个比例。另外一部分，就是它的干物质，干物质里面又包括有机物和无机物（盐）。有机物里面又包括像是蛋白质、糖、脂、核酸、维生素等及其降解产物。那无机盐主要是由这些化学元素所组成，这里面有大量的元素，还有微量元素。大量的主要元素是碳氢氧氮等，微量元素是锌锰钠氯等。所以，我们从微生物的这些化学组成就能看出微生物所需要的这些营养物质。现在，我们分别讲一下微生物所需要的营养物质及其在体内的一些生理功能。我们可以根据这些营养物质它们在机体中的生理作用不同进行划分。一般来说，微生物所需要的营养物质包括六大元素。第一大元素，就是碳源。第二大元素，就是氮源。第三是能源，另外一种是生长因子，第五种是无机盐，我们把水作为第六大元素。所以，微生物所需要的营养物质包括这六大元素，我们分别来看一下。

1、碳源（carbon source）

定义：凡能提供微生物营养所需碳元素的营养源。也就是说这种物质能够满足微生物对碳源的这种需要。不同种类的微生物对碳源的需要是不一样的，微生物所需要的碳源范围是非常广的。对于自养微生物，它需要的碳源是二氧化碳，作为它唯一或最主要碳源。另外，像碳酸氢钠也可以作为自养微生物的碳源，绝大多数自养微生物都是把二氧化碳作为唯一碳源。对于异样微生物来讲，它所需要的碳源范围就更多。自然界所有有机物如：糖类、蛋白质、脂类、烃类、天然或人工合成有毒的有机物等皆可作相应微生物的碳源。所以它包含范围是非常广的。所以我们可以用异样微生物来对一些有毒物质进行处理，在实际的生存生活中是非常有用的。不同的微生物对碳源的喜好是不一样的。Glc是一般异养微生物最喜爱利用的碳源。像葡萄糖对微生物来说，是最为喜爱的。若给微生物加入葡萄糖，它是最容易吸收的。对单糖的吸收要好于多糖，对多糖的吸收，要先分解然后才能吸收。微生物利用的碳源的范围，我们称作碳源谱。像微生物如果碳源谱非常广，则说明这种微生物利用的碳源种类非常多。举个例子，像Pseudomonas spp 可利用90种以上碳源，所以它的碳源就非常广。还有一种叫甲烷氧化菌，它利用的碳源就比较窄，它就只能利用甲烷或者甲醇这一类作为它的碳源，所以说不同的微生物它所利用的碳源的种类是不一样的。微生物碳源谱的宽或窄主要取决于其体内酶体系的差异。

2、氮源（nitrogcn sourcc）

定义：凡能提供微生物营养所需氮元素的营养源。

氮源又包括无机氮源和有机氮源。无机氮又包括气态氮、铵盐、硝酸盐、碳化物等。有机氮包括种类比较多，包括蛋白胨、牛肉浸膏、酵母粉、豆粉饼、鱼粉、玉米浆等。有机氮源这一部分我们在后面的培养基那一部分还会重点讲到。微生物对氮源的利用都是偏向于有机氮源，一般优先利用有机氮源。对氮源利用有选择性，优先利用有机氮，有机氮源物质同时也可提供碳源。

3、能源（energy source）

定义：能为微生物生命活动提供最初能量来源的物质。这些物质可以是化学物质，还有一种可以是光能。对于化能异养微生物来说能量来源是有机物（同碳源），对于化能自养微生物来说能量来源是无机物（不同于碳源），主要是还原态的无机物，这里面包括硫化氢、氢、二价铁等。对于光能自养和光能异养微生物来说，它们的能量来源是光能。有的营养物质既可以作为碳源，又可以作为氮源或者能源，这不是截然不同的，有的物质是可以作为多种营养物质的。

4、无机盐（inorganic salt）

定义：以盐的形式提供主要元素与微量元素。

无机盐是微生物在成长过程里所需要的元素与微量元素的盐的形式，它是必不可少的，这些无机盐它的功能主要是维持细胞渗透压、调节ph、作酶的辅基、激活剂。我们根据微生物对这些无机盐需要量的大小做一个划分，分为大量元素和微量元素。钠镁钙这一类在10的-3次到10的-4次 mol/L，称大量元素；铜锌锰这一类在10的-6次到10的-8次

mol/L，称微量元素。

5、生长因子（growth factor）

定义：微生物生长所必需，其需要量很少，微生物自身不能合成或合成量不足，难以满足微生物生长需要，只有在培养基加入才能使其生长的有机化合物。狭义生长因子：维生素

广义生长因子：还有氨基酸、嘌呤、嘧啶、脂肪酸等

肠膜状明串珠菌需要17种氨基酸作生长因子，所以它的培养需要给它加足了生长因子才能生长。某些人体寄生菌以血清作生长因子。生长因子的来源一般是酵母膏、玉米浆、麦芽汁等，还有复合维生素。所以在培养微生物时，我们加入酵母膏，不仅加入了氮源，也加入了生长因子。

6、水

再一类是水，可以说是非常重要的，万物离不开水，它不仅提供了微生物生长所需要的胶态的这样一个环境，而且是物质代谢的一个原料。