转基因大豆制品半定量检测方法研究

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第一篇:转基因大豆制品半定量检测方法研究

转基因大豆制品半定量检测方法研究

转基因作物发展迅速,2004年总种植面积8100万公顷,增长率为20%。估计2010年将达到1.5亿公顷,并将有多达30个国家的1500万农民种植生物技术作物。

转基因作物在带来巨大经济效益、社会效益与环境效益的同时,也产生了许多认识和观念问题。各国政府纷纷制定相应的法律和法规,转基因的定性检测国内外已有很多报道。瑞典转基因检测方法即是检测35S启动子,欧盟则要求检测35S启动子和NOS终止子。随着各国转基因法律和法规越来越严格,定量检测显得日趋重要。Marc Vaïtilingom等用Real-Time PCR定量检测抗草甘膦大豆,能定量分析含转基因成分仅为0.01%的样品。实时PCR技术自动化程度高、快速、灵敏度极高,但所需仪器十分昂贵,检测费用也高,方法的标准化程度不高。本研究旨在利用普通PCR扩增,结合国内的实际,建立一套经济、简便的半定量检测方法。

定性检测了转基因大豆制品中插入的具有抗除草剂特性的CP4-EPSPS目的基因。用普通PCR扩增,以大豆凝集素(lectin)基因为内置标准,利用已知转基因成分标准含量样品与未知含量样品进行扩增对比。经聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染、成像,用凝胶分析软件(Quantity One 4.5)进行数据处理,从而确定未知样品转基因含量。

随着各国有关转基因成分(GMO)标签法的建立和不断完善,建立适合我国的转基因食品国家标准检测方法是刻不容缓的课题。本研究通过普通PCR与凝胶分析软件的结合,利用分辨率较高的聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术,建立了一套经济、简单可行的转基因成分半定量检测方法。

实践证明,该方法经济且具有较高的准确性。

关键词:转基因大豆 PCR检测 半定量检测

第二篇:工业废水中可生物降解COD定量检测方法

工业废水中可生物降解COD定量检测方法

废水的可生化性是指废水中所含污染物可被微生物降解的性质,即废水中有机污染物被生物降解的难以程度。它是废水的重要特性之一。废水中所含有机物除一部分容易被微生物分解、利用外,还含有一部分不易被微生物降解甚至对微生物的成长产生抑制作用的有机物。确定污水处理工艺时这些有机物的相对含量十分重要,决定了废水采用生物处理的可行性及难易程度。因此,确定污水的可生物降解性COD的含量,对选择污水处理工艺、判断出水能否达标及制定污水治理规划具有重大意义。COD(Chemical Oxygen Demand)(化学需氧量)是水中有机物消耗氧的含量,是反应废水污染程度的重要指标之一,是水质监测的重中之重,与我们的生活息息相关。化学需氧量COD是在一定的条件下,采用一定的强氧化剂处理水样时,所消耗的氧化剂量。它是表示水中还原性物质多少的一个指标。水中的还原性物质有各种有机物、亚硝酸盐、硫化物、亚铁盐等。但主要的是有机物。因此,化学需氧量(COD)又往往作为衡量水中有机物质含量多少的指标。

常规可生物降解性判断,对于可生化性的判定方法,在实验室条件下主要有BOD5/CODCr(B/C)比值法、耗氧速率法、瓦勃呼吸仪法、生化模型试验法、脱氧酶活性法和三磷酸腺苷(ATP)含量测定法、微生物反应动力学等。实际运用中可操作性较强的只有B/C比值法和好氧呼吸法。其中以B/C比值法最常见。传统观点认为B/C体现了废水中可生物降解的有机污染物占有机污染物总量的比例,可用该值评价废水在好氧条件下的微生物可降解性。

废水的可生物降解性判断方法很多,但都是定性判断,无法对生化出水的COD进行准确预估,尤其是成分复杂的工业废水误差更大。针对工业废水提出了可生物降解性COD的定量检测分析方法,将其细分为易降解、可降解、难降解和不可降解4类,同时给出了具体的分类方法及分类标准。经具体实验验证,该方法可以弥补B/C判定废水可生化性时工业废水误差较大的缺陷。

第三篇:【新闻】150706转基因检测

由扬州市人民政府、中国检验检疫学会、江苏省食品药品监督管理局、南京工业大学、太平洋国际展览有限公司主办的“第八届中国国际食品安全技术论坛(CBIFS 2015)”(以下简称:CBIFS 2015)4月9日在扬州会议中心正式开幕。这个中国食品安全技术领域规模最大、学术水平最高、科研成果最新和专业性最强的行业盛会,吸引了来自政府单位、科研机构、大专院校、仪器厂商等单位的官员、学者、专家、厂商、学生等800余人参加。

会上,扬州市市长朱民阳说,“民以食为天,食以安为先”。食品安全是基本民生问题,关系着亿万人的生命健康。加强食品监管,强化食品安全技术研发,提高食品安全保障能力,一直是各级政府紧抓在手的重要职责。中国检验检疫学会会长魏传忠也致辞表示,食品安全是一个世界各国共同面临的严峻问题,保障食品安全,中国政府高度重视,需要构建共治格局,需要夯实国家质量基础,需要提升技术支撑能力。

会议期间,与会有关领导、嘉宾、专家围绕生命健康产业发展、食品安全检验检测举行专题研讨会。在4月9日下午开展的食品快速检测专题技术交流会上,国家“千人计划”特聘专家、华南理工大学教授应大会组委会的邀请,为大家带来了《新型快速转基因检测方法在食品中的应用》的专题报告。

转基因技术关系到国家未来粮食生产技术的自主性和创新性,大力推进转基因技术的自主研发,占领转基因技术的制高点对于国家安全具有重大意义。但由于转基因食品的安全性仍存在争议,国家对于转基因食品安全性有一套严格的安全评价体系,对市面上非法转基因食品的监管也在日益加强,如何充分合理的评估转基因粮食可能带来的风险,并未雨绸缪提前做好防范和规避风险的准备,已成为生产者和决策者面临的头等大事。石磊教授表示,国外许多政府检测机构都在大量使用快速检测方法,尤其是ATP法、免疫法、阻抗法和显色培养基法在国外应用相当成功,国内的许多政府检测机构也都已经在使用或正在考虑使用国外先进的快速检测技术,而从长远发展趋势来说,快速方法是检测的大方向。目前常用的转基因检测方法有胶体金免疫层析检测条、PCR—聚合酶链式反应技术、荧光PCR技术等。他说,荧光定量PCR(qPCR)技术是目前主流的分子检测技术,相关产品占据全球分子诊断市场的一半。然而这种技术由于核酸检测过程复杂、实现核酸扩增信号检测设备价格高、对实验室硬件条件要求高等问题,只局限于高端市场,普及推广困难,基层医疗和检测机构需求得不到满足。

基于此种现状,石磊教授带领其团队开发了新型恒温荧光核酸扩增分子检测平台,其设备简便、快速准确,将反应全过程恒定63℃,操作简单易于推广,是分子检测技术的又一次革命,突破了现有的技术瓶颈,真正为分子检测方法在基层的应用打开了市场。

最后教授介绍了目前已经成功产业化的“分子检测技术平台”。一台恒温荧光检测仪、搭配一台金属浴、一台混匀器、一台小型离心机及移液器和检测试剂盒即可成为一套可移动的转基因检测实验室,不仅可以用于转基因快速检测,还可用于致病微生物检测、动物源性食品检测、畜禽水产病害检测等。

第四篇:LECD半定量评价法

危险源辨识、评价半定量分析

LEC评价法

(Likelihood Exposure Consequenc

e)

这是一种评价具有潜在危险性环境中作业的危险性半定量评价方法。它是用与系统风险率有关的3种因素指标值之积来评价系统人员伤亡风险大小,这3种因素是:

L(Likelihood)为发生事故的可能性大小; E(Exposure)为人体暴露在这种危险环境中的频繁程度;

C(Consequence)为一旦发生事故会造成的损失后果。

取得这3种因素的科学准确的数据是相当繁琐的过程,为了简化评价过程,采取半定量计值法,给3种因素的不同等级分别确定不同的分值,再以3个分值的乘积D来评价危险性的大小;即D=LEC。D值越大,说明该系统危险性大,需要增加安全措施,或改变发生事故的可能性,或减少人体暴露于危险环境中的频繁程度,或减轻事故损 失,直至调整到允许范围内。表1 L为发生事故的可能性大小 分数值 完全可以预料 10 相当可能 6 可能,但不经常 3 可能性小,完全意外 1 很不可能,可以设想 0.5 极不可能 0.2 实际不可能 0.1

表2

E暴露于危险环境的频繁程度连续暴露 10 每天工作时间内暴露 6 每周一次或偶然暴露 3 每月一次暴露 2 每年几次暴露 1 非常罕见暴露 0.5

分数值

表3

C为发生事故产生的后果 分数值

大灾难,10人以上死亡 100 或造成重大财产损失

灾难,3~9人死亡或 40 造成很大财产损失

严重,1~2人死亡或多人重伤 15 或造成一定财产损失 较重,一人重伤致残或 7 造成较小财产损失

几人轻伤或造成较小财产损失 3

轻伤,需要治疗救护,1 不造成财产损失。

D(Danger)——危险性分值。根据公式就可以计算作业的危险程度,但关键是如何确定各个分值和总分的评价。根据经验,总分在20以下是被认为低危险的,这样的危险比日常生活中骑自行车去上班还要安全些;如果危险分值到达70~160之间,那就有显著的危险性,需要及时整改;如果危险分值在160~320之间,那么这是一种必须立即采取措施进行整改的高度危险环境;分值在320以上的高分值表示环境非常危险,应立即停止生产直到环境得到改善为止。危险等级的划分是凭经验判断,难免带有局限性,不能认为是普遍适用的,应用时需要根据实际情况予以修正。危险等级划分如表4所示。表4 危险源危险程度(D)采用公式D=L×E×C分数值确定,其危险程度和等级划分如下: 分数值 危险程度 危险等级 >320 极其危险 5 160~320 高度危险 4 70~160 显著危险 3 20~70 一般危险 2 <20 稍有危险 1

第五篇:转基因食品安全研究感想

关于转基因食品安全研究的感想

前一段时间,崔永元和方舟子关于转基因食品在网上抄得火热,很多人通过这个事件了解了“转基因食品”。当看到这个课题时,我就很快做了决定。

我通过前期的论文资料搜索与整理环节,在网上看到了不同的观点,和很多独特的见解。有人说:“转基因技术不是圣杯,但它们是重要的工具。如果使用恰当,可以为种植者带来全新的产品,使消费者长期受益。”,当然也有人举出了转基因食品危害的事例,给我印象最深的是:在18世纪60年代左右,美国一些农民第一次使用转基因种子,然而种出来的食物并不尽如人意,当他们把转基因玉米当做猪饲料为给猪吃的时候,那些猪却都死了。这在当时引起了不小的轰动。

但是,我认为:科学是把双刃剑,转基因也一样,虽说它有缺陷,但同样它也有着自己的优势。我们正处在面对人类最大挑战的边缘上。全球人口在持续增长,2050年之前人口将突破95亿。将会有20到30亿人步入中产阶级。对食物的需求将会在2050年翻倍。我们在未来的36年需要生产的粮食要比全世界历史上生产的粮食加起来更多。这是个艰巨的挑战,并且我们还面临着气候变化和水资源短缺等问题。但转基因技术 却可以有效地避免这个问题,大幅度提高粮食产量。

最后,我想说,转基因技术是完美的吗?当然不是。它们需要规范,它们需要完善,它们需要被合理地应用,这点同任何其他技术都一样。害虫对转基因作物的抗性会增强,这点对任何杀虫剂都一样。我们知道杂草会演化出对除草剂的抗性,无论是转基因作物系统还是其他作物系统的除草剂都没有区别。我承认这些是合理的顾虑,但是我相信科学可以对利用这些技术起到巨大的作用。

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