各种皮试液配制的方法(范文)

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第一篇:各种皮试液配制的方法(范文)

药物是否须要皮试及所用皮试液的配制方法请按说明书为准则,原则上原药皮试。

一、1、青霉素80万U/瓶:50u 80万青霉素加生理盐水溶解至4ml;(20万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2千U/ml)取上液0.25ml+生理盐水至1ml;(500U/ml)取上液0.1ml作皮试(即50U)

2、头孢他啶1g/瓶、氯唑西林1g/瓶、氨苄西林钠氯唑西林钠1g/瓶、阿洛西林舒巴坦钠1g/瓶:

以上所需药物加生理盐水溶解至4ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.05mg)皮试结果判断同青霉素。

3、派拉西林舒巴坦钠1.5g/瓶

以上所需药物加生理盐水溶解至6ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.05mg)皮试结果判断同青霉素。

5、普鲁卡因:

普鲁卡因40mg/支,浓度为0.25%; 取0.125ml+生理盐水至1ml;

取上液0.1ml作皮试(即0.25mg)皮试结果判断同青霉素。

6、先锋铋1g/瓶、头孢替唑1g/瓶: 以上所需药物加生理盐水溶解至4ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25 mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮试时取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮试结果判断同青霉素。

7、头孢曲松1.5g/瓶、头孢曲松舒巴坦钠1.5g/瓶 以上所需药物加生理盐水溶解至6ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25 mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮试时取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮试结果判断同青霉素。

8、破伤风抗毒素(TAT)1500 U/支:(教科书)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(150U/ml)取上液0.1ml作皮试;(即15U)20分钟观察结果,如为阴性可一次性注射,如为阳性者,则行脱敏疗法。阴性:局部无红肿、无异常反应。

阳性:皮丘红肿,硬结直径大于1.5cm,红晕范围直径超过4cm,有时出现伪足或有痒感,全身过敏性反应同青霉素过敏反应大致相同。脱敏疗法方法: 第一次:取TAT0.1ml+生理盐水至1ml肌肉注射; 第二次:取TAT0.2ml+生理盐水至1ml肌肉注射; 第三次:取TAT0.3ml+生理盐水至1ml肌肉注射; 第四次:取余液+生理盐水至1ml肌肉注射。

每隔20分钟注射一次,在脱敏过程中密切观察病人的反应。如病人有气促、面色苍白、紫绀、荨麻疹及头晕、心跳等不适时,应即停止注射并从速处理并报告医生。

9、细胞色素C15mg/支/2ml:

取细胞色素C 0.1ml+生理盐水至1ml;(0.75mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.07mg)

局部红肿,直径大于1cm,有丘疹者为阳性

10、链霉素1g(100万U/瓶):

链霉素100万U+生理盐水至3.5ml(共4ml)(25万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2500万U/ml)取上液0.1ml作皮试(即2500U)(皮试结果判断同青霉素。链霉素过敏性休克抢救措施同青霉素过敏性休克抢救措施,因链霉素可与钙离子铬合,从而使链霉素的毒性症状减轻或消失。故需备10%葡萄糖酸钙注射液静脉注射)

11、糜蛋白酶4000U/瓶

糜蛋白酶4000U/瓶+生理盐水5ml溶解;(800U/ml)取上液0.5ml+生理盐水至1ml;(40U/ml)取上液0.1ml作皮试(即4U)

(肌注者需皮试;皮试结果判断同青霉素。)

13、结核菌素 50U/支/ml 取上液0.1ml作皮试(5U/ ml)皮试时于左手注入试敏液,右手注入生理盐水作对照。48-72小时观察结果 阴性:皮肤硬结小于5mm 阳性:皮肤硬结5-10mm(+)皮肤硬结10-15mm(++)皮肤硬结15-20mm(+++)皮肤硬结大于20mm或局部出现水疱或坏死者为(++++)应向病人解释结素试验阳性仅表明曾有结核

14、碘过敏试验:(30%泛影葡胺)(凡是造影者须做该试验)

A、取60%泛影葡胺(欧乃派克)0.5ml加生理盐水至1ml缓慢静脉注射。B、专用30%泛影葡胺试敏剂(1ml)缓慢静脉注射。

密切观察15分钟。如病人有恶心、呕吐、手足麻木感和(或)出现荨麻疹者即为阳性反应。

15、鲑鱼降钙素注射液 50单位(10μg/支)1、1ml注射器取0.2ml原液用生理盐水稀释至1ml;

2、取上液0.1ml(即1单位)皮下注射。观察15分钟看结果。结果判断同青霉素。

过敏急救

破伤风抗毒素(TAT)1500单位/支(现说明书要求)1、0.1ml抗毒素加0.9ml氯化钠注射液,2、取上液0.05ml在前掌侧皮内注射。

观察30分钟看结果。结果判断:阴性:注射部位无明显反应者,可在严密观察下直接注射抗毒素。阳性:注射部位出现皮丘增大、红肿、浸润,特别是形似伪足或有痒感者。破伤风抗毒素脱敏疗法方法:

取TAT原液0.2ml稀释至2ml,分小量数次作皮下注射,每次注射后观察30分钟;

第一次:取上液0.2ml皮下注射,观察无紫绀、气喘或显著呼吸短促、脉搏加速即可注射第二次;

第二次:取上液0.4ml皮下注射,如无反应则可注射第三次; 第三次:取上液0.8ml皮下注射,如无反应则可注射第四次

第四次:取所有余液(含安瓿中未稀释的抗毒素全量)作皮下或肌肉注射。

有过敏史或过敏试验强阳性者,应将第一次注射量和以后的递增量适当减少,分次注射,以免发生剧烈反应。门诊病人注射后须观察30分钟始可离开。青霉素过敏试验法:

1、评估:

1)仔细询问过敏史,如有青霉素过敏史则停止该项试验。有其他药物过敏史或变态反应疾病史应慎用。2)曾使用青霉素,停药3天(TAT7天)后再次使用,或在使用过程中改不同批号的制剂时,需要重做皮试,确定结果为阴性才能继续用药。

2、计划:

1)用物准备:必需备0.1%盐酸肾上腺素,(其他略)

2)病人准备:A、病人不宜空腹进行皮试,因个别人于空腹时注射用药会发生眩晕、恶心等反应,宜与过敏反应相混淆。B、让病人了解注射目的,懂得观察期间不可随意离开;不可搔抓或揉按皮试局部;如有异常随时告知医护人员。

3、实施:

1)配制方法(略)

2)皮内试验:于前臂内侧皮内注射皮试液0.1ml,20分钟后观察皮试结果。皮试结果标准: 阴性:皮丘无改变,周围不红肿,无红晕、无自觉症状。

阳性:皮丘隆起增大,出现红晕,直径大于1cm,周围有伪足伴局部痒感;严重时可有头晕、心慌、恶心,甚至发生过敏性休克。

3)皮试结果阳性者不可使用青霉素,并要在病历、医嘱单、床头卡和注射单上加以注明,以及将结果告知病人及其家属。如对皮试结果有怀疑的,应在对侧前臂内注射生理盐水0.1ml,以作对照,确认青霉素皮试结果为阴性方可用药。过敏性休克的急救措施:

1、立即停药,使病人平卧。

2、立即皮下注射0.1%肾上腺素1ml,小儿酌减。症状如不缓解,可每隔半小时皮下或静脉注射该药0.5ml。直至脱离危险期。

3、给予氧气吸入,改善缺氧症状。呼吸受抑制时,应立即进行人工呼吸,并使用呼吸兴奋剂。喉头水肿引致窒息时,应尽快实行气管切开。

4、根据医嘱静脉注射地塞米松5-10mg,应用抗组胺类药,如盐酸异丙嗪等。

5、静脉滴注10%葡萄糖溶液或平衡液扩充血容量。血压仍不回升,可按医嘱加入多巴胺等。

6、若心跳骤停,则立即进行复苏抢救。

7、密切观察病情,记录病人呼吸、脉搏、血压、神志和尿量等变化

第二篇:常见《皮试液配制方法》

常见《皮试液配制方法》

青霉素过敏试验法:

1、评估:

1)仔细询问过敏史,如有青霉素过敏史则停止该项试验。有其他药物过敏史或**反应疾病史应慎用。

2)曾使用青霉素,停药3天(TAT7天)后再次使用,或在使用过程中改不同批号的制剂时,需要重做皮试,确定结果为阴性才能继续用药。

2、计划:

1)用物准备:必需备0.1%盐酸肾上腺素,(其他略)

2)病人准备:A.病人不宜空腹进行皮试,因个别人于空腹时注射用药会发生眩晕、恶心等反应,宜与过敏反应相混淆。B.让病人了解注射目的,懂得观察期间不可随意离开;不可搔抓或揉按皮试局部;如有异常随时告知医护人员。

3、实施: 1)配制方法(略)

2)皮内试验:于前臂内侧皮内注射皮试液0.1ml,20分钟后观察皮试结果。皮试结果判断标准:

阴性:皮丘无改变,周围不红肿,无红晕、无自觉症状。

阳性:皮丘隆起增大,出现红晕,直径大于1cm,周围有伪足伴局部痒感;严重时可有头晕、心慌、恶心,甚至发生过敏性休克。

3)皮试结果阳性者不可使用青霉素,并要在病历、医嘱单、床头卡和注射单上加以注明,以及将结果告知病人及其家属。如对皮试结果有怀疑的,应在对侧前臂内注射生理盐水0.1ml,以作对照,确认青霉素皮试结果为阴性方可用药。

1、青霉素80万U/瓶:50u80万青霉素加生理盐水溶解至4ml;(20万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2千U/ml)取上液0.25ml+生理盐水至1ml;(500U/ml)取上液0.1ml作皮试(即50U)

2、氨苄西林1g/瓶、氯唑西林1g/瓶、氨苄西林钠氯唑西林钠1g/瓶、阿洛西林舒巴坦钠1g/瓶:

以上所需药物加生理盐水溶解至4ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.05mg)皮试结果判断同青霉素。

3、氨苄西林钠氯唑西林钠2g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至8ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.05mg)皮试结果判断同青霉素。

4、美洛西林舒巴坦钠1.25g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至5ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.05mg)皮试结果判断同青霉素。

5、阿莫西林舒巴坦钠1.5g/瓶、派拉西林舒巴坦钠1.5g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至6ml;(250mg/ml)

取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.05mg)皮试结果判断同青霉素。

6、美洛西林0.5g/瓶、派拉西林0.5g/瓶、氨苄西林0.5g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至2ml;(250mg/ml)

取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.05mg)皮试结果判断同青霉素。

7、长效西林(苄星青霉素)120万U/瓶: 长效西林+生理盐水5.8ml溶解;(20万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2千U/ml)取上液0.25ml+生理盐水至1ml;(500U/ml)取上液0.1ml作皮试(即50U/0.1ml)皮试结果判断同青霉素。

8、普鲁卡因:

普鲁卡因40mg/支,浓度为0.25%; 取0.125ml+生理盐水至1ml; 取上液0.1ml作皮试(即0.25mg)皮试结果判断同青霉素。

9、先锋铋1g/瓶、头孢替唑1g/瓶:

以上所需药物加生理盐水溶解至4ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)

取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮试时取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮试结果判断同青霉素。

10、头孢拉定0.5g/瓶、头孢呋辛钠0.5g/瓶、头孢地嗪钠0.5g/瓶、头孢派酮钠舒巴坦钠0.5g/瓶、头孢唑林钠0.5g/瓶:

以上所需药物加生理盐水溶解至2ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮试时取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮试结果判断同青霉素。

11、头孢曲松1.5g/瓶、头孢曲松舒巴坦钠1.5g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至6ml;(250mg/ml)

取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)

取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮试时取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮试结果判断同青霉素。

12、头孢他定舒巴坦钠0.75g/瓶以上所需药物加生理盐水溶解至3ml;(250mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(25mg/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5mg/ml)

取上液0.2ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)(500ug/ml)皮试时取0.1ml(即50ug/0.1ml)皮试结果判断同青霉素。

13、破伤风抗毒素(TAT)1500U/支: 取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(150U/ml)取上液0.1ml作皮试;(即15U)

20分钟观察结果,如为阴性可一次性注射,如为阳性者,则行脱敏疗法。阴性:局部无红肿、无异常反应。

阳性:皮丘红肿,硬结直径大于1.5cm,红晕范围直径超过4cm,有时出现伪足或有痒感,全身过敏性反应同青霉素过敏反应大致相同。脱敏疗法方法:

第一次:取TAT0.1ml+生理盐水至1ml肌肉注射; 第二次:取TAT0.2ml+生理盐水至1ml肌肉注射; 第三次:取TAT0.3ml+生理盐水至1ml肌肉注射; 第四次:取余液+生理盐水至1ml肌肉注射。

每隔20分钟注射一次,在脱敏过程中密切观察病人的反应。如病人有气促、面色苍白、紫绀、荨麻疹及头晕、心跳等不适时,应即停止注射并从速处理并报告医生。

14、细胞色素C15mg/支/2ml:

取细胞色素C0.1ml+生理盐水至1ml;(0.75mg/ml)取上液0.1ml作皮试(即0.07mg)局部红肿,直径大于1cm,有丘疹者为阳性

15、链霉素1g(100万U/瓶):

链霉素100万U+生理盐水至3.5ml(共4ml)(25万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2.5万U/ml)取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(2500万U/ml)取上液0.1ml作皮试(即2500U)

(皮试结果判断同青霉素。链霉素过敏性休克抢救措施同青霉素过敏性休克抢救措施,因链霉素可与钙离子铬合,从而使链霉素的毒性症状减轻或消失。故需备10%葡萄糖酸钙注射液静脉注射)

16、糜蛋白酶4000U/瓶糜蛋白酶4000U/瓶+生理盐水5ml溶解;(800U/ml)取上液0.5ml+生理盐水至1ml;(40U/ml)取上液0.1ml作皮试(即4U)

(肌注者需皮试;皮试结果判断同青霉素。)

17、B1注射液10mg/瓶/2ml取上液0.1ml+生理盐水至1ml;(0.5mg/ml)取上液0.1ml作皮试(0.05mg/ml)(皮试结果判断同青霉素)

18、结核菌素50U/支/ml取上液0.1ml作皮试(5U/ml)

皮试时于左手注入试敏液,右手注入生理盐水作对照。48-72小时观察结果阴性: 皮肤硬结小于5mm阳性 皮肤硬结5-10mm(+)皮肤硬结10-15mm(++)皮肤硬结15-20mm(+++)

皮肤硬结大于20mm或局部出现水疱或坏死者为(++++)应向病人解释结素试验阳性仅表明曾有结核

19、碘过敏试验:(30%泛影葡胺)(凡是造影者须做该试验)

A.取60%泛影葡胺(欧乃派克)0.5ml加生理盐水至1ml缓慢静脉注射。B.专用30%泛影葡胺试敏剂(1ml)缓慢静脉注射。

密切观察15分钟。如病人有恶心、呕吐、手足麻木感和(或)出现荨麻疹者即为阳性反应。

20、鲑鱼降钙素注射液50单位(10μg/支)1、1ml注射器取0.2ml原液用生理盐水稀释至1ml;

2、取上液0.1ml(即1单位)皮下注射。观察15分钟看结果。结果判断同青霉素。

21、破伤风抗毒素(TAT)1500单位/支 1、0.1ml抗毒素加0.9ml氯化钠注射液;

2、取上液0.05ml在前掌侧皮内注射。

观察30分钟看结果。结果判断:阴性:注射部位无明显反应者,可在严密观察下直接注射抗毒素。阳性:注射部位出现皮丘增大、红肿、浸润,特别是形似伪足或有痒感者。

破伤风抗毒素脱敏疗法方法:

取TAT原液0.2ml稀释至2ml,分小量数次作皮下注射,每次注射后观察30分钟; 第一次:取上液0.2ml皮下注射,观察无紫绀、气喘或显著呼吸短促、脉搏加速即可注射第二次;

第二次:取上液0.4ml皮下注射,如无反应则可注射第三次;

第三次:取上液0.8ml皮下注射,如无反应则可注射第四次第四次:取所有余液(含安瓿中未稀释的抗毒素全量)作皮下或肌肉注射。

有过敏史或过敏试验强阳性者,应将第一次注射量和以后的递增量适当减少,分次注射,以免发生剧烈反应。门诊病人注射后须观察30分钟始可离开。

过敏性休克的急救措施:

1、立即停药,使病人平卧。

2、立即皮下注射0.1%肾上腺素1ml,小儿酌减。症状如不缓解,可每隔半小时皮下或静脉注射该药0.5ml.直至脱离危险期。

3、给予氧气吸入,改善缺氧症状。呼吸受抑制时,应立即进行人工呼吸,并使用呼吸兴奋剂。喉头水肿引致窒息时,应尽快实行气管切开。

4、根据医嘱静脉注射地塞米松5-10mg,应用抗组胺类药,如盐酸异丙嗪等。

5、静脉滴注10%葡萄糖溶液或平衡液扩充血容量。血压仍不回升,可按医嘱加入多巴胺等。

6、若心跳骤停,则立即进行复苏抢救。

7、密切观察病情,记录病人呼吸、脉搏、血压、神志和尿量等变化。

第三篇:青霉素皮试药液配制方法解读

青霉素皮试药液配制方法:

青霉素1瓶80万u,注入4ml生理盐水,则1ml含20万u 取0.1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2万u 取0.1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2000u 取0.25ml,加生理盐水至1ml,则1ml含500u,即成青霉素皮试液。皮内注射0.1ml含50 u 破伤风抗毒素(TAT)皮试液的配制方法:

TAT 每支1500IU约0.7 ml,加水至1ml,抽取0.1ml,加生理盐水稀释至1ml(含150IU),皮内注射0.1ml含15IU。细胞色素C皮试液的配制方法:

细胞色素C 每支2 ml含15mg,取0.1ml,加生理盐水至1ml(1ml含0.75 mg),皮内注射0.1ml含0.075 mg。先锋酶素皮试液的配制方法:

先锋酶素0.5 g加生理盐水2 ml,则1ml含250mg 取0.2ml,加生理盐水至1ml,则1ml含30mg 取0.1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含3mg(3000 ug)取0.1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含300 ug 皮内注射0.1ml含30ug 长效青霉素皮试液的配制方法;

长效青霉素1瓶120万u,注入4ml生理盐水,则1ml含30万u 8 [<1?[b 取0.1ml l含3万u,作画痕试验。

碘过敏试验:

30%泛影葡胺1ml缓慢静脉注射 链霉素皮试液的配制方法:

链霉素1瓶1g(100万u),加生理盐水至3.5ml溶解后为4ml,则1ml含0.25 g(25万u)

取0.1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2.5万u 取0.1ml,加生理盐水至1ml,则1ml含2500u 皮内注射0.1ml含250万 精制抗狂犬病血清皮试液的配制方法: 抗血清每支400IU,取0.1ml,加生理盐水0·9ml,皮内注射0.05ml,观察30分钟。

头孢唑啉钠皮试液的配制

0.5g/瓶头孢唑啉钠加等渗盐水至5ml -→0.1g/ml

取0.1ml瓶加4.9ml等渗盐水至5ml -→2mg/ml

取0.15g/瓶加4.85ml等渗盐水至5ml -→60μg/ml

取头孢唑啉钠皮试液0.1ml(含6μg)作皮内注射,观察20分钟后,判断试验结果。头孢曲松皮试液的配置

在1 g的头孢曲松钠中加入生理盐水4 ml,充分溶化,使每毫升浓度为250 mg/ml。用1 ml注射器从上液中抽取0.2 ml,加生理盐水至1 ml,使其浓度为50 mg/ml。取0.1 ml,加生理盐水至1 ml,使其浓度为5 mg/ml。取0.1 ml,加生理盐水至1 ml,即成浓度为500 μg/ml的皮试液。

取头孢曲松皮试液0.1ml(含50 μg/ml)作皮内注射,观察20分钟后,判断试验结果。氨苄青霉素皮试液的配制

0.5g/瓶加等渗盐水至2ml -→250mg/ml

取0.1ml加0.9ml等渗盐水至1ml -→25mg/ml

取0.1ml加0.9m等渗盐水至1ml -→2.5mg/ml

取0.1ml加0.9m等渗盐水至1ml -→0.25mg/ml

取氨苄青霉素皮试液0.1ml(含25μg)作皮内注射,观察20分钟后,判断试验结果。

(1)青霉素G钠(钾)①皮试溶液的配制

a.用4ml 生理盐水将80万单位的青霉素稀释成为20万单位!b. 用lml注射器取每毫升含20万u的青霉素溶液0.lml,加注射用水或生理盐水至lml,摇匀即成(含青霉素2万U)。c. 取上液0.lml&上法稀释至lml(含青霉素2000u)。

d. 取每毫升含青霉素2000u的溶液0.sml按上法稀释至2ml,摇匀即成(含青霉素500u)。

其实在b 的基础上取0.25&上法稀释至1ml,摇匀每0.1ml即含50U!这样每次只取0.1ml做皮试.用一毫升针管配可简记为:4-------0.1~1-------0.1~1------0.25~1;

用五毫升针管配,则为4-----0.4~4-----0.4~4-----1~4!!

注意事项

a.极少数患者可在皮肤试验时发生过敏性休克,常于注射后数秒至5min内开始。先是皮肤蜃痒、四肢麻木,gy则气急、胸闷、发绀、心跳加快、脉细、血压下降、大量出汗等。如不及时抢救,可导致病人死亡。应做好抢救准备,如盐酸肾上腺素肌注;氢化可的松静滴;及10%葡萄糖酸钙液与高渗葡萄糖液20ml缓慢静注;以及使用中枢兴奋药和抗过敏药。b.试验用药含量要准,配制后在冰箱中保存不应超过24h,注射器应用lml刻度者。C.更换同类药物或不同批号或停药3天以上,最好重新作皮内试验。(2)头胞菌素(先锋霉素)①皮试溶液的配制

取头抱菌素0.5g加生理盐水5ml溶解,然后抽取0.lml稀释至5ml后,再抽取0.15ml稀释至5ml即成(每毫升含头抱菌素60ug)。②应试方法及结果观察

每次取应试液0.lml做皮内试验,具体操作及结果观察均同青霉素试验。注:也有的医疗单位采用每毫升含0.25、0.3、0.5mg浓度的头泡菌素为皮试液。每次抽取0.05—0.lml作皮试。下面介绍以剂量为50ug为例.配制方法:以一瓶含0.5g为例头孢唑林钠即先锋V为例)a.取头----钠0.5g加生理盐水2ml溶解,则每ml 含0.25g ,即250mg.b,取0.2ml上液加生理盐水至1ml,则每ml含50mg.c.取0.1ml上液加生理盐水至1ml ,则每ml 含5mg.d-------------,---0.5mg.即500ug.即每0.1ml含50ug,故每次取0.1ml做皮试!头孢他啶(舒秦)规格为1.5g一瓶,则在a的步骤上加6ml生理盐水,其他同理!

小结:用一毫升针管配,以唑林类或西林类药为例,如先锋V(0.5g)为例,则为2----0.2~1------0.1~1-----0.1~1.用五毫升针管配,则为2------0.4~2-----0.4~4-----0.4~4!!!头孢哌酮舒巴坦钠(懊必健0.75g)皮试配制方法: 1)1毫升:3------0.2~1-----0.1~1-----0.1~1!!2)5毫升:3------0.4~2-----0.4-~4----0.4~4!!头孢曲松钠:(1.0g为单位)

1)1毫升:4---0.2~1----0.1~1---0.1~1

2)5毫升:4---0.4~2-----0.4-~4----0.4~4!!小节:头孢类药皮试均以0.5g为标准,0.5克加2毫升0.9%NS或灭菌注射用水!然后依次为0.2~1----0.1~1---0.1~1!!1克加4毫升以此类推!

(3)链霉素 ①皮试溶液的配制

a.取链霉素1g(100万u)加生理盐水3.sml溶液后即成4ml(每毫升含25万u)。b.取a液0.lml加生理盐水稀释至lml(每毫升含2.5万U)。c.取b液0.lml加生理盐水稀释至lml(每毫升含2500U)。d.取c液0.Zml加生理盐水稀释至lml(每毫升含500u)即得。②皮试方法及结果观察

取度试液0.lml做皮内试验,观察15—20min.具体皮试方法及结果观察均同青霉素试验。③注意事项

a.皮试阴性的病人,注射时也可发生过敏反应,故应做好抢救准备。b.皮试方法目前全国尚不统一,已规定要做皮试的地区,应按规定进行。(4)结核苗素 ①皮试溶液的配制

取纯结核菌素0.5ml加生理盐水4.5ml为第一号溶液,其稀释度为1:10。依上法配制第2、3、4号溶液,其稀释度分别为1:1加91:10o山1:10000O’ ②皮试方法及结果观察。

选择前臂屈侧关节上6.6cm处,消毒后皮内注射0.1ml结核菌素液,使之成一皮丘。通常从1:1000开始,如无反应可用较大浓度。最后判断小儿有无结核菌感染,需做1:100浓度的试验。如患儿有疱性结膜炎、皮肤结节性红斑或胸腔积液,应从1:10000开始。注射后48一72h观察反应强度,并以(+)号表示之。阴性:不发红和硬结直径不超过0.5cm或仅发红而无硬结。可疑:(t)发红和硬结直径为0.scm以下。阳性:(+)发红和硬结直径为0.5—0.gcm。(++)发红和便结直径为1—1.gcm。(+++)发红和硬结直径为ZCin以上。(++++)除发红和硬结外有水泡或坏死。③注意事项

巳稀释后的结核菌素液,在冰箱内可保存6周。如发生沉淀或变黄色则不能用。

(5)破伤风抗毒素

1、皮试液的配制

取破伤风抗毒素1500u,抽取0.1ml加生理盐水稀释至1ml既成。

2、皮试方法及结果观察

取皮试液0.1ml在前臂作皮内试验,15min后观察,局部红肿在1cm以上为阳性。必要时应以生理盐水在另一前臂做对照试验.

3、注意事项

若皮试为阳性,也可用脱敏法进行注射。第1针用1:20稀释血清0.05ml;第2针用1:10稀释血清0.05ml;第3针用未稀释血清0.lml,第4针用未稀释血清0.smll第5针将余量一次肌内注射。每针间隔20min,无反应可注射。但在注射前要做好过敏性休克的抢救准备。

次数 抗毒血清 等渗盐水 注射法 1 0.1 0.9 肌肉注射 0.2 0.8--0.3 0.7---余量 稀释至1ml---

注:白喉抗毒素、多价精制气性坏疽抗毒素、精制肉毒抗毒素,其过敏试验均同破伤风抗毒素。

(6)盐酸普鲁卡因 ①应试溶液的配制

将盐酸普鲁卡因配制0.25%溶液即成。②皮试方法及结果观察

取皮试液0.lml在前臂作皮内试验,15—20min后观察结果。其判断标准同青霉素皮肤试验。

(7)细胞色素C ①皮试溶液的配制 用原药液。

②皮试方法及结果观察

a.划痕法:用本品1滴于前臂内侧皮肤上划痕,使之少量出血,20min后观察,如发红在10mm以上或肿胀在7mm以上为阳性。b.皮内法。将本品稀释为0.03mg/ml,在前臂皮内注射0.03—0.05ml,20min后,发红直径在15mm以上或肿胀在10cm以上为阳性。c.点眼法:将浓度为5mg/ml本品1滴,滴于眼结膜 上,20min后,结膜充血、水肿、痒者为阳性. ③注意事项

据报道偶可引起过敏反应,尤其是停药后再用该药时澳警队_。

(8)有机碘造影剂(碘吡啦啥,醋碘苯酸钠,泛影钠,泛影葡胺,胆影钠,碘化油等)①度试溶液的配制 用30%有机碘溶液。②皮试方法及结果观察:

a.静注法:用30%有机碘溶液lml静注,密切观察20min,注意有无心脏、颊膜水肿、恶心、呕吐、尊麻疹、血压下降及其它不适等反应。如有上述现象不可注射。b.日含试验法:用1—5ml造影剂含于口中,5min后观察有无上述反应。

c.皮内试验法:用0.05一0.lml造影剂在前臂作皮内试验,10一15min后观察,有1cm大小的红斑反成即为强阳性。,d.结膜试验法。用1—2滴造影剂滴入一侧眼结膜囊内,lmin后观察结膜与巩膜充血情况,如有显著充血(与对侧对比)、血管扩张、曲张,即为强阳性。③注意事项

过敏试验阴性者,在碘造影过程中仍可出现过敏反应,必需注意。(9)门冬酰胺酶 ①皮试液的配制

a.取门冬酸胺酶1000u加生理盐水lml溶解后即成1000u/ml.b.取上液0.lml加生理盐水稀释至lml即成。②皮试方法及结果观察

取皮试液0.lml在前臂作皮内试验,结果判断同青霉素皮试。阳性者不可田。③注意事项

a.不同药厂、不同批号产品的纯度和过敏反应均有一差异,使用时必须慎重。b.有过敏史的病人应十分小心或不用。(10)精制抗蝮蛇毒血清 ①皮试溶液的配制

取本品0.lml加生理盐水稀释至2ml即成。②皮试方法及结果观察

取皮试液0.05ml作皮内试验,20—30min后观察,在正在1cm以内,周围无红晕及伪足状者为阴性。若疑为阳性者可先注射扑尔敏10mg,15min后再用脱敏法给药。脱敏注射法:本品用生理盐水稀释20倍,第一次注射0.4ml,每次观察10—20m1n,如无反应可酌情增量,注射3次以上无反应时可注射。如有异常反应,立即停止注射,可用地塞米松或氢化可的松流用酸钠注射液静注抗过敏。

注:精制抗五步蛇毒血清和精制抗银环蛇毒血清过敏试验同抗蝮蛇毒血清。(11)精制抗炭疽血清 ①皮试溶液的配制

取本品0.lml加生理盐水稀释至lml即成。②皮试方法及结果观察

取应试液0.05ml在前臂作皮内试验,30min后观察,无明显反应者为阴性。如出现皮丘增大、红肿、浸润、形似伪足或有库感为阳性反应,须脱敏注射。脱敏注射法;用生理盐水10倍稀释血清,第一次注射稀释血清0.2ml、第二次注射0.4ml、第三次注射0.8ml。每次注射后30min观察,如无反应,可将安缅中未稀释的全部血清肌注。有过敏史或过敏试验强阳性者。应将第一次注射量及以后的递增量减少。

注:精制抗狂犬病血清过敏试验同精制抗炭疽血简。溢一敏注射法亦同,仅用量第一次为lml,每次增加lml至4ml止。

读书的好处

1、行万里路,读万卷书。

2、书山有路勤为径,学海无涯苦作舟。

3、读书破万卷,下笔如有神。

4、我所学到的任何有价值的知识都是由自学中得来的。——达尔文

5、少壮不努力,老大徒悲伤。

6、黑发不知勤学早,白首方悔读书迟。——颜真卿

7、宝剑锋从磨砺出,梅花香自苦寒来。

8、读书要三到:心到、眼到、口到

9、玉不琢、不成器,人不学、不知义。

10、一日无书,百事荒废。——陈寿

11、书是人类进步的阶梯。

12、一日不读口生,一日不写手生。

13、我扑在书上,就像饥饿的人扑在面包上。——高尔基

14、书到用时方恨少、事非经过不知难。——陆游

15、读一本好书,就如同和一个高尚的人在交谈——歌德

16、读一切好书,就是和许多高尚的人谈话。——笛卡儿

17、学习永远不晚。——高尔基

18、少而好学,如日出之阳;壮而好学,如日中之光;志而好学,如炳烛之光。——刘向

19、学而不思则惘,思而不学则殆。——孔子

20、读书给人以快乐、给人以光彩、给人以才干。——培根

第四篇:化验室试剂试液管理制度

化验室试剂试液管理制度

1目的:规范化验室试剂试液的管理,保证配制、储存合理,为质量检验提供有利支持。

2范围:适用于化验室试剂、试液的管理。

3责任:化验员对实施本程序负责。质量技术部监督执行。4程序

4.1化验室试剂试液的配制管理

4.1.1所有试剂、试液应有专人保管,均应贴有明显的标签,内容包括:品名、配置浓度等。

4.1.2标准液由专人负责称配,有专人核对并在《化学试剂配制记录》上做好登记。标准液瓶签要写明品名、浓度、日期、室温等。

4.1.3使用试剂、试液,要遵守使用规程,使用前要观察性状有无变化(色泽、澄明、臭味)瓶签是否完整,浓度是否书写清楚。

4.1.4使用剩余试液及标液不能倾回瓶中,如有不慎弄污瓶签在复核下进行更换。4.1.5药品、试液应由专柜、专人保管好。

4.1.6试剂、试液要避免阳光直晒,需要避光的试剂、试液要用黑色纸包装或棕色瓶盛装。

4.1.7试液的配置所用试剂无特殊要求,一般用分析纯,溶剂一般用蒸馏水。4.1.8基准试剂在标定前应干燥至恒重。

4.1.9标准液、滴定液的配制按规定的操作标准执行。4.2化验室试剂试液的储存管理

4.2.1所有的化学试剂要分类单独存放在专用橱内,存放区要防热、防潮,要通风干燥,避免阳光,室温一般在5—25℃。

4.2.2试剂储存在安全位置,严禁明火、消防设施器材完备。

4.2.3化学试剂应指定专人负责管理,对有毒的药品应严格按照有毒药品规定执行。4.2.4易燃烧、挥发的物品要放在空气流通的地方。

4.2.5易被阳光分解的物质如硝酸银、高锰酸钾放在暗色瓶内。4.2.6相互抵触化学品不得在同一橱、同一室内存放。4.2.7危险品存储于专室、专柜内。4.3化验室试剂试液的安全管理

4.3.1未经质量技术部部长允许,非化验室人员不准进行任何分析和化验。

4.3.2室内一切设备仪器及药品,非直接有关人员不得动用。4.3.3不了解其性能及用途的药品仪器,须弄懂后方可使用.4.3.4水或蒸馏水用后应立即关闭阀门。4.3.5禁止使用有裂纹的玻璃器皿。4.3.6加热溶液时出气口不得面对工作人员。4.3.7禁止用口尝试药品,须用吸液管吸取毒性溶液。

4.3.8稀释硫酸时必须把硫酸以细流状缓缓倾入水中,而且要不断搅拌,中和浓酸时应先稀释。4.3.9使用易燃品要远离明火。

4.3.10易燃易爆品及毒品应放在指定的地点。

第五篇:分子生物学实验室常用试剂的配制方法

一.常用贮液与溶液

1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇

至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份贮存于-20℃。

1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。

100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹

或贮存于-20℃。

20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)

5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。

10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。

10%SDS(十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。

2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。

100%三氯乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制)

2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃。

100×Denhardt试剂(Denhardt's regent)

成分及终浓度

配制100ml溶液各成分的用量

2%聚蔗糖(Ficoll,400型)

2%聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40)

2%BSA(组分V)

2g 2g 2g

加水至总体积为100ml

依照上表称取各组分,溶于水中定容。过滤除菌及杂质,分装成小份于-20℃贮存。

10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接)

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分的用量

0.5mol/L Tris-HCl 100mmol/L MgCl2 100mmol/L DTT 2mmol/L ATP

5mmol/L 盐酸亚精胺(可选)

0.5mg/ml BSA(组分V)(可选)

5ml 1mol/L 贮液

1ml 1mol/L 贮液

1ml 1mol/L 贮液

200ul 100 mmol/L 贮液

50ul 1 mmol/L 贮液

0.5ml 10 mg/mL 贮液

2.25ml

将配制好的缓冲液分装成小份,贮存于-20℃。

mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions)

可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液,-80℃可贮存至少6个月。

10mmol/L dNTP混合液

成分及终浓度

配制20ul溶液各成分的用量

10mmol/L dATP 10mmol/L dCTP 10mmol/L dGTP 10mmol/L dTTP 水

2ul 100 mmol/L dATP 贮液

2ul 100 mmol/L dCTP 贮液

2ul 100 mmol/L dGTP 贮液

2ul 100 mmol/L dTTP 贮液

12ul

20%PEG 8000/2.5M NaCl

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分的用量

质量浓度为20%聚乙二醇

2.5mol/L 氯化钠

水 20g

50ml 5 mol/L 氯化钠 或 14.6g 固体氯化钠

补足100ml

加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中,加水至终体积100ml,用磁力搅拌器搅拌溶解。

20×SSC

成分及终浓度

配制1L溶液各成分的用量

300mmol/L 柠檬酸三钠(二水)

3mol/L 氯化钠

88.2g 175.3g 补足1L

溶解柠檬酸三钠(二水)和氯化钠于约0.9L水中,加几滴10N NaOH溶液调pH为7.0,用水补足体积至1L。

DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水

加100ul DEPC 于 100ml 水中,使DEPC的体积分数为0.1%。在37℃温浴至少12h,然后在15 psi 条件下高压灭菌20min,以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应,不可用DEPC处理Tris缓冲液。

甲酰胺(deionized formamide)

直接购买或加Dowex XG8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中,用磁力搅拌器轻轻搅拌1h,可去除甲酰胺中的离子。经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份,充氮气于-80℃贮存(防止氧化)。

磷酸缓冲液(phosphate buffer)

按照下表所给定的体积,混合1 mol/L 的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L 磷酸氢二钠(双碱)贮液,获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)贮液:溶解138g于足量水中,使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。

1mol/L 磷酸二氢钠(ml)

1mol/L 磷酸氢二钠(ml)

最终pH值

877 850 815 775 735 685 625 565 510 450 390 330 280 123 150 185 225 265 315 375 435 490 550 610 670 720 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 7.0 7.1 7.2

TE(用于悬浮和贮存DNA)

成分及终浓度

配制100ml溶液各成分的用量

10mmol/L Tris-HCl 1mmol/L EDTA 水

1ml 1mol/L Tris-HCl(pH7.4-8.0,25℃)

200ul 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)

98.8ml

Tris缓冲液(Tris-HCl buffer)

将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。

浓盐酸的体积(ml)

pH

8.6 14 21 28.5 38 46 56 66 71.3 76 9.0 8.8 8.6 8.4 8.2 8.0 7.8 7.6 7.4 7.2

二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液

电泳缓冲液

50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液

成分及终浓度

配制1L溶液各成分的用量

2mol/L Tris碱

1mol/L 乙酸

mmol/L EDTA 水

242g

57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)

200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)

补足1L

5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液

成分及终浓度

配制1L溶液各成分的用量

445 mmol/L Tris碱

445 mmol/L 硼酸盐mmol/L EDTA 水

54g 27.5g 硼酸 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)

补足1L

染料

1%溴酚蓝(bromophenol blue)

加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。

1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)

溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。

10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)

小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。

凝胶上样液(gel loading solutions)

6×碱性凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分用量

0.3 N 氢氧化钠mmol/L EDTA 18%聚蔗糖(400型)

0.15%溴甲酚绿

0.25%二甲苯青FF 水

300ul 10N 氢氧化钠

120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

1.8g 15mg 25mg 补足到10ml

6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分用量

0.15%溴酚蓝

0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 15%聚蔗糖(400型)

1.5ml 1%溴酚蓝

1.5ml 1%二甲苯青FF

100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

1.5g 补足到10ml

6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分用量

0.25%溴酚蓝

0.25%二甲苯青FF 15%聚蔗糖(400型)

2.5ml 1%溴酚蓝 2.5ml 1%二甲苯青FF 1.5g 补足到10ml

6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分用量

0.15%溴酚蓝

0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 50%甘油

1.5ml 1%溴酚蓝

1.5ml 1%二甲苯青FF

100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

3ml 3.9ml

6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分用量

0.15%溴酚蓝

0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 40%聚蔗糖

1.5ml 1%溴酚蓝

1.5ml 1%二甲苯青FF

100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

4g

补足到10ml

10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)

成分及终浓度

配制10ml溶液各成分用量

0.2%溴酚蓝

0.2%二甲苯青FF 200 mmol/L EDTA 0.1%SDS 50%甘油

20mg 20mg

4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)100ul 10% SDS 5ml 补足到10ml

三.常用培养基

LB培养基

将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

10g

酵母提取物

5g

氯化钠

10g

如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

SOB培养基

将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

20g

酵母提取物

5g

氯化钠 0.5g mol/L 氯化钾

2.5ml

用水补足体积到1L。分成100ml的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。

SOC培养基

成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。

TB培养基

将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

12g

酵母提取物

24g

甘油

4ml

各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。

2×YT培养基

将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

16g

酵母提取物

10g

氯化钠

4ml

如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

YPD培养基

将下列组分溶解在0.9L水中:

蛋白胨

20g

酵母提取物

10g

葡萄糖

20g

用水补足体积为1L后,高压灭菌。建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸,因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板,需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。

四.常用抗生素

氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)

溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)

溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)

溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)

溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)

溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

链霉素(streptomycin)(50mg/ml)

溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)

溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

四环素(tetracyyline)(10mg/ml)

溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

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