NY_T 528-2002_食用菌菌种生产技术规程

第一篇：NY_T 528-2002_食用菌菌种生产技术规程

NY/T 528-2002 食用菌菌种生产技术规程

基本信息

【英文名称】Technical inspection of pure culture making of edible fungi 【标准状态】被代替 【全文语种】中文简体 【发布日期】2002/8/27 【实施日期】2002/12/1 【修订日期】2002/8/27 【中国标准分类号】暂无 【国际标准分类号】暂无

关联标准

【代替标准】暂无 【被代替标准】暂无

【引用标准】GB 4789.28-1994,GB 9687-1988,GB 9688-1988

适用范围&文摘

暂无

第二篇：食用菌菌种买卖合同[最终版]

出卖人： 签订时间：

买受人： 签订地点：

起始日期: 截止日期: 计划金额(元):

第一条 标的、数量、价款及交(提)货时间

产品名称

交货时间

单位

（kg）

数 量

单 价

保护价

（元/kg）

总金额

（元）

第二条 质量标准：按《食用菌菌种管理条例》和《无公害江山白菇省级地方质量标准》标准执行。检验标准、方法、地点及期限；买方于菌种接种之日起10日内提出验收要求的，按前款规定的质量标准到买方种菇地验收。卖方自接到买方在上述期限内提出的验收要求之日起3日内未办理验收的，视为质量不合格。买方在上述期限内未提出要求的，视为质量合格。

第三条 白菇菌种的交货地点、时间及提供方式：和方式为：_____________。

第四条 定金:买方在 年 月 日前向卖方支付收购定金______元。交货时定金(抵作货款)。定金支付后，因买方违约解除合同的，定金不予退还；因卖方违约解除合同的，应双倍返还定金。

第五条 标的物的所有权自_______时起转移，但买受人未履行支付款价义务的，标的物属于_________所有。

第六条 运输方式及运输费用负担；由卖方送到买方指定的——投售点。运输费用由_______方负担。

第七条 结算方式、时间及地点：_______________________________________。

第八条 担保方式(也可另立担保合同)__________________________________。

第九条 菌种瓶的供应及回收和费用负担：菌种瓶由卖方提供，每个菌种瓶收取押金______元，由买方于菌种出售后_____日内返还菌种瓶时按实际返还的个数退回。

第十条 本合同解除的条件____________________________________________。

第十一条 违约责任：违约方按合同总金额的______％向守约方支付违约金。

第十二条 合同争议的解决方式：本合同在履行过程中发生的争议，由双方当事人协商解决；也可由当地工商行政管理部门调解；协商或调解不成的，按下列第__种方式解决：

(一)提交______仲裁委员会仲裁；(二)依法向_______人民法院起诉。

第十三条 本合同自_______________起生效。

第十四条 其他约定事项；卖方必须做好对买方的售后技术指导服务。买方未按卖方的技术指导操作而引起的损害，由买方自负。菌种在有效期内出现质量问题的，由卖方负责调换。

出 卖 人 买 受 人

出卖人(章)： 买受人(章)：

住所： 住所：

法定代表人： 法定代表人：

居民身份证号码； 居民身份证号码；

委托代理人： 委托代理人：

电话： 电话：

开户银行： 开户银行：

帐号： 帐号：

第三篇：微生物菌种纯度检测技术规程

微生物菌种纯度检测技术规程范围

本规程规定了古菌、细菌、真菌、病毒（种）纯度检测的程序和方法。

本规程适用于从事微生物菌种资源保藏及研究的机构、大学、企业、个人等。术语、定义

下列术语和定义适用于本规程

2.1

纯度检测 purity check

指通过适当的方法检测菌种是否为纯培养物。

2.2

纯培养pure culture

由单个细胞的后代组成的培养物，即单细胞培养物或无性繁殖系。通常是由挑取单个菌落或利用单胞分离技术，移种繁殖获得。菌种的纯度检测

3.1 古菌和细菌的纯度检测

3.1.1 菌落形态

在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线，适宜培养后，同一平板上的单菌落的大小、形状、颜色、质地、光泽等是否相似；对于两种或以上形态的出发菌株，应再分别挑取单菌落划线或稀释涂布培养，检测是否重复出现相同特征。

3.1.2 细胞形态

对数生长期的培养物革兰氏染色反应应呈现一致性；细胞形状、大小、荚膜等特征应相似

3.1.3 芽孢大小、位置、形状

宜检测样品是否形成芽孢，对形成芽孢的菌种，其芽孢大小、位置、形状应相似。

3.2 放线菌菌种纯度检测

3.2.1 菌落形态

在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线,挑取单菌落，适宜培养后，在同一平板上单菌落形状、大小、表面状况、质地、光泽、颜色等应相似。如怀疑为细菌污染，则30℃液体培养24小时，培养液不应浑浊，如浑浊则视为细菌污染。

3.2.2 培养特征

分别接种三种以上培养基，在三种以上培养基上的培养特征应想同，包括气生菌丝、基内菌丝、可溶性色素的颜色等。

3.2.3 孢子丝及孢囊

在特定的培养基、培养温度及培养时间等条件下，孢子着生方式、孢子丝形态及其颜色或孢囊着生位置（气丝或基丝）、孢囊的形状，大小应呈现出一致性。

3.3 酵母菌种纯度检测

3.3.1 菌落形态

应对菌落形态相似性进行检测。在特定的培养基上，通过对待检测菌株进行稀释或划线涂布平板获取单菌落，一定的培养条件下，比较同一平板内，菌落的大小、形状、颜色、隆起、表面状况、质地、光泽等应一致。

3.3.2 个体形态

应对检测样品的个体形态进行检测。在指定的培养基及培养条件下，细胞形状、大小及细胞的增殖方式应一致。

3.3.3 繁殖方式

酵母繁殖的方式应一致，如是芽殖，出芽的方位、数量应一致。

3.4 丝状真菌菌种纯度检测

3.4.1 菌落特征

菌落的形态等表观特征应一致。

3.4.2 菌丝特征

在特定的培养基和培养条件下，菌丝分隔、菌丝形态等应一致。

3.4.3 其他主要显微特征应一致

3.4.4 检测是否有细菌污染

3.4.5 对于外观上不能确定菌种纯度的，利用单胞分离技术获得纯培养物进行对比，其菌丝、孢子等特征应与原始菌株的描述一致。

3.5 病毒的纯度检测

3.5.1 纯粹检查

应将待检病毒液直接接种含硫乙醇酸盐培养基（T.G）、酪蛋白胨琼脂培养基（G.A）、葡萄糖蛋白胨汤。通过一定温度时间培养后，检查结果应无细菌生长为纯粹。

3.5.2 支原体检查

检测由禽胚组织或其细胞所培养的病毒应用改良Frey氏培养基。检测其它培养方法所得病毒应用支原体培养基。任何一次琼脂平板上出现支原体菌落，判为阳性。阳性对照中至少有一个平板长菌落，而阴性对照中无菌落生长，则检验有效。

3.5.3 外源病毒检查

病毒类制品在毒种选育和生产过程中，经常使用动物或细胞基质培养，因此，有可能造成外源因子（特别是外源病毒因子）的污染。为了保证制品质量，需要对毒种和细胞进行外源因子检测。

3.5.3.1 病毒种子批外源因子检查

对病毒主种子批或工作种子批，应抽取足够检测试验需要量的供试品进行病毒外源因子检测。在试验前应用特异性抗体（血清）中和本病毒（或单克隆抗体），所用的抗体免疫源应采用与生产疫苗（或制品）不同种而且无外源因子污染的细胞（或动物）制品。如果病毒曾在禽类组织或细胞中繁殖过，则抗体不能用禽类来制备。若用鸡胚，应来自SPF鸡群。以下方法可以选择一种或多种进行。

3.5.3.1.1 动物试验法

3.5.3.1.1.1 小鼠试验法

取15－20g小鼠至少10只，用经抗血清中和后的病毒悬液，每只脑内接种0.03ml，同时腹腔接种0.5ml。至少观察21天。在观察期内至少有80％最初接种的小鼠存活，试验才有效。如果没有小鼠出现病毒感染，为符合要求。解剖所用在试验24小时后死亡或有患病体征的小鼠，直接观察期病理改变，并将有病变的相应的组织悬液通过脑内和颅腔接种另外至少5只15－20g小鼠，并观察21天，如果没有小鼠出现病毒感染，则符合要求。

3.5.3.1.1.2 乳鼠试验法

取出生后24小时内的乳鼠至少10只，用经抗血清中和后的病毒悬液，脑内接种0.01ml，同时腹腔接种至少0.1ml。每天观察，至少14天。在观察内至少有80％最初接种的乳鼠存活，试验才有效。如果没有小鼠出现病毒感染，为符合要求。解剖所有在试验24小时后死亡或有患病体征的乳鼠，直接肉眼观察其病理改变，并取有病变的相应的组织和脑、脾制备成悬液通过脑内和腹腔接种另外至少5只出生后24小时内乳鼠，并每天观察至接种第14天，如果没有小鼠出现病毒感染，则符合要求。

3.5.3.1.2 细胞培养法

3.5.3.1.2.1 非血吸附检查

用经抗血清中和后的病毒悬液，接种于生产用的同种的细胞。细胞至少接种6瓶，每瓶病毒悬液接种量不少于培养液总量的25％。于36±1℃培养，观察14天，必要时可更换细胞培养液，未见细胞病变（CPE）为阴性，符合要求。

3.5.3.1.2.2 血吸附病毒检查

上述接种病毒的各个细胞于第6－8天后和第14天，取出2瓶进行血吸附病毒检查。用0.2％－0.5%鸡和豚鼠红细胞混合菌悬液覆盖于细胞表面，分别置于2－8℃，20－25℃，30分钟后显微镜下观察，未见血球吸附现象为阴性，符合要求。

3.5.3.1.3 鸡胚检查法

在禽类组织或细胞中繁殖过的病毒种子需用鸡胚检查禽类病毒的污染。选用9－11日和5－7日龄两组SPF鸡胚，每组至少5只，分别于尿囊腔和卵黄囊接种经抗体血清中和后的病毒悬液，每胚0.5ml。孵育7日后，取尿囊液用豚鼠和鸡血细胞混合悬液做血球凝集试验应为阴性。被接种的鸡胚至少80％存活7天，试验有效。

3.5.3.2 生产用细胞外源因子检查

3.5.3.2.1 细胞直接观察

每批生产用细胞应留取5％（或不少于500ml）,细胞悬液不接种病毒，作为对照细胞加入与疫苗生产相同的细胞维持液，置于与疫苗生产相同的条件下培养，观察14天，在显微镜下观察是否有细胞病变（CPE）出现，无细胞病变（CPE）出现者为阴性，符合要求。在观察期末至少有80％的对照细胞培养物存活，试验有效。

3.5.3.2.2 血清吸附病毒检查

对生产用细胞外源因子检查的（1）项细胞培养物在观察期末取至少25％的细胞培养瓶进行血吸附病毒检查。（方法同病毒种子批外源因子检查的血吸附病毒检查）

参考文献

[1] 刘志恒，姜成林主编.放线菌现代生物学与生物技术.北京：科学出版社,Pp1-353.2004

[2] 杨苏声主编.细菌分类学.北京：中国农业大学出版社,Pp1-145.1997

[3] 沈萍，彭珍荣主译.《微生物学》，第五版，中文版,高等教育出版社，2004

[4] 中国科学院微生物研究所《常见与常用真菌》编写组.常见与常用真菌.北京：科学出版社,P1-317，1978

[5] 中国科学院微生物研究所《菌种保藏手册》编著组.菌种保藏手册.北京：科学出版社,P1-839，1980

[6] David R.Boone et al.Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology.Second Edition.Volume One.Springer.2001

[7] Kirk P.M., P.F.Cannon, J.C.David and J.A.Stalpers(ed).Dictionary of the Fungi.9th edition.CABI Publishing.2001

第四篇：引进食用菌菌种及高产原材料

引进食用菌菌种及高产原材料

项目单位工作总结

一、项目背景及原因

食用菌产业作为一项变废为宝，延伸农业产业链条，提升农业产业附加值的新兴产业，具有无污染、无公害、投入低、产出高、营养丰富、并可保健药用等优点，是特色农业的重要组成部分、21世纪的朝阳产业。自2002年以来，省委、省政府将食用菌产业做为一项新兴产业，不断加大引导、扶持力度，使食用菌产业取得了长足发展。按照发展节水高效特色农业，走专业化布局、产业化经营、标准化生产、技能化培训路子的“一特四化”战略部署，把食用菌产业作为一项拓宽农业增收渠道，促进农业增效、农民增收的新兴产业大力培育，进一步延伸了农业产业链条，为当地的农民增收找到了一条增收致富的路子。至目前，种植季节由冬季生产发展到全年生产，年种植规模由2010年的20多棚发展到现在的400多棚，实现经济效益2400多万元，初步形成了以平菇、香菇等为主的食用菌生产格局，社会效益、经济效益和生态效益极其显著。但是，随着食用菌产业发展步伐的加快，菌种质量不高、技术水平落后、生物学效率低、病虫害发生频繁等问题日益凸显，已成为食用菌产业发展的障碍和瓶颈。为确保全市食用菌产业健康、快速发展，吕梁市把食用菌产业列入全市“8+2”农业产业发展项目作为重点引智项目，政府聘请多位食用菌专家进行了多次的技术指导和培训。现将执行本项目总结如下：

二、项目实施过程中的主要做法

(一)精心组织安排，做好准备工作。为进一步做好工作，农委在专家到来之前，做了充分的准备工作，对活动日程进行了精心安排，搜集整理了专家需要解决的技术难题，并安排人员深入市农技推广中心和乡村食用菌种植基地尽快熟悉、掌握食用菌及相关基础知识，了解我市食用菌种植规模、现状、分布等情况。专家到达后，农委热情接待安排食宿和工作人员、分管领导全程陪伴专家的工作生活，安排做到科学合理，丰富多彩。同时，农委还积极与各乡镇协调，确定专家指导的重点和时间，保证了工作的顺利开展。

（二）实地查看指导，找出存在的问题。学者专家具有丰富的工作经验与广博的专业知识。为了做好指导工作，工作之初，他没有急于切入主题，直接讲解技术，而是详细询问了我市食用菌的种植情况，并深入各乡镇的食用菌示范园区或基地，实地查看了生产环境和配方、发料、覆土、病虫害防治等关键技术环节的操作过程，与技术人员、农户交流经验和做法，并做了详细的记录，针对配方、水分管理、覆土质量、产品质量、常见病害的识别及发生原因等问题因地制宜地进行了技术指导，向农户实地讲解了食用菌种植过程中常见问题的处理方法。

（三）理论与实际相结合，全方位开展技术培训。通过几天的细致观察，专家在汾阳宾馆的会议厅，把食用菌产业发展中存在的问题、国外等食用菌产业发达国家的具体做法，对全市农技人员及部分种植大户120多人进行了2天的食用菌技术培训班，做了详细的讲解。一是分析了我市平菇、重菇、金针菇等食用菌产业存在的问题。我市食用菌产业整体上仍然存在生产设施简陋、环境可控性差、操作粗放、技术水平参差不齐、专业化生产程度低等问题，这是造成病虫害发生频繁、生物学效率不高的主要原因。部分存在配方中粪草比例不合适，发酵过程中水分过多、翻堆不均匀，覆土过厚、僵化，通风不良，乱用农药的问题，并针对这些问题专家都分析了原因，讲述了改进的具体办法和措施。二是系统介绍了国外食用菌产业发展的情况。目前，国外食用菌产业已经实现了培训推广、菌种、培养料、覆土、出菇、销售、加工的专业化生产链条，各部门之间各负其责，紧密协作。所生产的培养料、覆土、菌种已经出口到周边国家，全部实现了机械化生产。而我国虽然是食用菌生产大国，但是集约化、机械化程度不高，尤其在我省各技术环节仍以农户分散经营为主，技术水平与国外食用菌产业发达的国家仍有六十年的差距。

三、取得的成效

（一）对菌种生产做了技术指导，推动我区菌种建设。在项目实施过程中，专家先后到市食用菌生产基地参观指导，对菌种的生产环境、设备、过程进行了技术指导。对种植户的消毒、接种及环境卫生方面，提出了加强和改进的意见和建议及今后努力的方向，尤其对废弃菌种的处理及优化菌种站的环境卫生进行了重点强调。指出新品种引进要考虑的技术培训、培养料的来源、品种特性等问题，必须在试验成功的基础上再逐步扩大种植规模。

（二）进行了技术培训，提高技术人员的素质。一是通过专家的讲解，进一步开阔了技术人员的视野，对食用菌产业有了更深的认识，对怎样做好技术推广工作有了更清晰地思路。二是通过学习指导，我们对食用菌生产的过程有了一个全新的认识，对如何改进配方、加强环境控制、提高关键技术措施集成、提高产量和品质有了具体的方法。三是我们了解到国外的发展现状发展前景，也看到了我市在食用菌种植方面存在的差距，对今后吕梁市在食用菌产业的品种确定、本地化栽培技术的研究明确了方向和目标。通过培训，提高了广大食用菌人员的整体素质，在指导食用菌种植中更有针对性和实用性，使部分种植户的种植水平也得到了提高，在效益和产量上也将得到逐步提高。

（三）专家的工作作风和态度也影响了我区技术人员。专家深入基层农村踏实的工作作风，认真的工作态度，不怕吃苦，不怕脏不怕累的精神，对我市的技术人员起到了很好的教育作用。使他们进一步认识到，工作必须认真钻研，多下功夫，多动脑筋，干一行爱一行，干一项务一项，只有这样，才能做好工作，才能推动所从事的事业不断发展和进步。

四、存在的问题和不足

虽然我们对本次引智工作高度重视，做了大量的准备工作，但是仍存在许多不足之处：一是本次引进的专家工作时间只有短短的2天，加之工作任务繁重，他没有经历过这种种植方式，直接接触的是现代化的种植方式，对于我市的食用菌了解还是不够全面，广大技术人员听完讲座后仍有意犹未尽的感觉。二是虽然我们尽最大的努力做好引导工作，但是在实际工作中，涉及的专业知识较多，交流有一定偏差，影响了工作效率。三是项目执行结束后，一些后续衔接工作有待进一步加强和沟通。

总之，通过专家指导对我们的工作既有收获，又有不足，我们将在认真总结的基础上，改进工作中的不足，为下次引智提供借鉴。并将积极消化引智成果，争取尽快地把先进的生产理念在生产领域进行推广应用。

第五篇：生产技术规程

广西凌云县绿色食品茶叶专业合作社

有机茶生产、加工操作规程

适用单位：广西凌云县绿色食品茶叶专业合作社

主要内容：

一、防虫：及时采摘和修剪茶树并将病虫枝叶带出茶园，利用天敌和生物农药防治病虫害，严禁使用化学农药。及时观察病虫发生情况，并采取人工方法摘除病枝、病叶或灯光诱捕。

二、除草：及时耕作除草，茶树周围的杂草可以采用机械或人工方法清除。

三、施肥：有机茶园应施基肥和追肥。基肥采用经1至6个月堆制，充分腐熟的有机肥料，包括无污染的各类饼肥、绿肥、作物残体、泥炭、有机茶专用肥等肥料。追肥采用经高温堆制及无害化处理的人粪、禽兽粪、有机茶专用肥及生物有机液肥等。

实施日期：2013年1月1日起

广西凌云县绿色食品茶叶专业合作社

2013年1月1日