LSRFortessa流式细胞仪简明操作规程

LSRFortessa流式细胞仪简明操作规程

一、开机程序

1.打开仪器总电源开关（桌子下方红色空气阀），打开位于仪器右侧的开关（绿色按钮）。

2.启动计算机，登录对话框中无需输入密码，直接点击“OK”。

3.进入预约系统客户端，使用预约账户的用户名和密码登录。

4.运行电脑桌面软件“BD FACSDiva Software”，登录对话框中无需输入用户名和密码，直接点击“OK”。

5.仪器自动联机，在“Cytometer仪器框”中显示“Cytometer Connected”，确认软件已经和仪器相连接。如果有必要，选择工具栏中的“Cytometer”，在下拉菜单中点击“Connect”重新联机。

6.检查鞘液桶，如需要，加满鞘液，液面不要超过桶上部凹环。

7.检查废液桶，如需要，倒空废液桶，并在废液桶中加入20ml新洁尔灭。

8.排除管路中的气泡，取下进样针上的双纯水管，做Prime 3-5次。

9.将双纯水管放至进样针处，将样品支撑臂置于正位，仪器选择STANDBY待机模式。

二、关机程序

1.取干净流式管，加3ml Clean洗液放至进样针处，将样品支撑臂置于旁位，以外管吸入1ml。

2.将样品支撑臂置于正位，以HI流速运行10分钟。

3.换成双纯水管放至进样针处，重复步骤1-2。

4.放置盛有1ml双纯水管于样品支撑架上，仪器选择STANDBY待机模式。

5.关闭仪器右侧开关（绿色按钮）。

6.退出软件，退出预约登录系统，关闭计算机。

7.关闭仪器总电源。

三、操作注意事项

1.开机前务必检查鞘液桶和废液桶。鞘液桶下有电子称，空桶重量为5.5kg，使用过程中注意鞘液桶不能空，防止气体进入液路系统。

（无鞘液运行会严重损坏仪器，一定确保鞘液桶不能空！！）

2.液路中气泡会严重影响实验结果，开机后一定要排除气泡，包括鞘液桶上方管路排除气泡、仪器管路右侧管路排除气泡、进样针Prime 2-3次。加鞘液后要稍等2-3分钟再排气泡。

3.样品上机前一定要过滤（300目细胞筛或35-55um尼龙筛网），以防样品中团块堵塞进样针。

4.数据采集完，及时导出Experiment或FSC文件，并及时从Diva软件中删除原来的数据。

5.试验结束后严格按照关机程序清洗管路。

6.试验数据拷贝：复制所要拷贝的数据，在桌面上双击FTP文件夹，直接将数据粘贴在打开的文件夹中，文件即开始上传。上传结束后，在512厅里面的电脑上用U盘或移动硬盘拷贝数据。

7.严禁使用U盘直接插到与流式仪连接的电脑拷数据，否则承担由此造成的所有后果！！