植物病害标本的采集制作与保存-系统发生错误[推荐阅读]

第一篇：植物病害标本的采集制作与保存-系统发生错误

植物病害标本的采集制作与保存

植物病害标本是高等农业院校植物病理学科本科教学不可缺少的实物，它在教学中具有直观、不受季节和区域限制的特点。因此，植物病害标本的采集、制作和保存是植物病理学科实验教学中必不可少的基础知识和技能。1 植物病害标本的采集

在北方由于季节分明，作物品种丰富，植物病害发生频繁，大部分的植物病害标本都能从田间采集到。但是，病害的发生有一定的规律，要充分掌握病害发生的季节规律及寄主的生长规律才能收获症状特征比较典型的标本。1.1 病害标本采集的工具

植物病害大多发生在根、茎、叶和果实上，因此所用工具要针对不同的部位，常用的工具有刀、剪、锄、锯等，还有标本夹、标本箱、标本纸、小玻瓶、纸袋、标签和记录本等。1.2 标本的采集

大田采集主要分为按季节采集和按寄主采集。按季节采集主要是针对每年只在特定时期发生的病害。如白粉病具有性阶段，小麦白粉病多在每年5—6 月能够采集到；植物的灰霉病则在低温阴雨的条件下容易发病，每年3—5 月最容易采到。按寄主采集主要针对寄主范围广泛的病害，如霜霉病，可以在很多植物病害的叶片上发现，常见的有莴苣、葡萄、白菜等；疫病如番茄、马铃薯、辣椒疫病等。1.3 采集标本的记录

为了区分采集的不同的标本，采集时要进行记载。主要包括寄主名称、时间和地点、采集人姓名、主要发生情况和必要的生态环境因子。2 植物病害标本的制作

采集的标本通过鉴定以后，除去作为分离用的标本外，一般都用干燥法或浸渍法进行保存，要求能够尽量保存标本的本来性状。一些微小的可以做成玻片标本，比较难以保存的和特殊的标本可通过多媒体扫描系统或显微系统存入计算机中，制成相应的文体图形、动画、视频图像等。

2.1 标本干燥制作法

2.1.1 压制法。采到的植物病害标本，若干燥后容易卷缩的（如稻叶），最好随采随压。其他的可以放到采集箱内带回去后压在吸水纸中，用标本夹夹紧，日晒任其干燥。在此期间，要经常更换标本纸。夏季温度和湿度较高，容易使标本发霉变色，标本纸要勤更换。通常前3~4 d 换1~2 次/d，以后2~3d 换1 次，至标本完全干燥。2.1.2 烫干法或硅胶烘干法。不准备作为分离用的标本可以采用此2 种方法。为了加快标本的干燥速度，更好地保持标本原有的色泽，可以将刚采集的标本放在吸水纸或布中用电熨斗来回迅速烫干或将其加载草纸和干燥过的硅胶粉的标本夹中捆紧，放入50 ℃烘箱中2~3 d，使其很快干燥。

2.1.3 微波炉干燥保色法。为了弥补烫干法的不足之处，刘春元等（2003）报道了根据植物病害标本的质地，摸索了一套微波干燥保色法。此法干燥迅速，保色效果较佳，可长期保存而不褪色。如豆科植物病叶处理1 min，效果最佳，症状保存完好。2.1.4 冷冻干燥法。是目前比较好的方法。标本在冷冻的情况下干燥，几乎能完全保持原有的色泽和形状。

2.1.5 自然干燥法。水分很少的标本如枝干病害的枝条等，不需要采取任何干燥的手段，在空气中自然干燥即可。2.2 浸渍标本制作法

对于果实病害和汁液较多的病害以及肉质的子囊菌和担子菌的子实体，均可以采用浸渍法保存。但此方法占的面积大，保存时间有限，只能用于保存少量的标本，这些标本大多用于教学和示范。浸渍标本的制作，需要配备各种类型的浸渍液，主要包括各种保持原本颜色的保存液和防腐的保存液。

2.2.1 保色浸渍液的配制。根据植物果实病害的寄主植物的颜色，可将保色的浸渍液分为保存绿色浸渍液、保存黄色和桔色的浸渍液、保存红色的浸渍液等。①保存绿色的浸渍液。保存绿色的浸渍液很多，要根据不同的植物病害标本选择适当的方法，才能达到好的效果。如醋酸铜浸渍液：将醋酸铜结晶逐渐加在50％的醋酸溶液中，到不再溶解为止，原液要根据标本颜色的不同将其用水稀释3~4 倍，然后使用。将标本加入到煮沸的稀释液中，继续加热，标本的绿色开始褪去，经3~4 min，使绿色恢复后，将其取出，用清水冲净，保存于5%的福尔马林溶液中，或压制成干燥的标

本。这种方法保色效果良好，但与原色稍有出入。不能煮的如淡绿色苹果、梨、绿色葡萄等的病害标本可直接浸泡在1%亚硫酸100 ml、95%酒精100 ml、水800 ml 配成的溶液中浸泡10~20d，然后取出，冲洗干净，再保存在5%的福尔马林溶液中。另外，还有硫酸铜亚硫酸浸渍液、瓦查（Vacha）浸渍液等，也是保存绿色标本常用的方法。②保存红色的浸渍液。对于红色的果实病害标本如草莓、辣椒、马铃薯以及其他的植物红色组织，选择病害症状典型的标本，可以将标本浸入瓦查的红色浸渍液（硝酸亚钴15 g，福尔马林25 ml，氯化锡10 g，水1 000 ml）内，2 周后取出冲洗干净，浸泡在亚硫酸30~50ml，福尔马林10 ml，酒精（95%）10 ml，水1 000 ml 配成的溶液中加以保存。③保存黄色和桔红色标本的浸渍液。含叶黄素和胡萝卜素的果实如杏、梨、柿子、柑橘等，用亚硫酸溶液保存比较适宜。方法是将亚硫酸（含SO2 5%~6%）配成4%~10%的水溶液（含SO2 0.2%~0.5%）中[1]。总之，各种保色的浸渍液，除有些保存绿色的浸渍液外，保存其他颜色的浸渍液，效果都不理想。为了更好的显示植物病害的危害状，最好采用多媒体系统将其扫描或摄影，制作成相应的图片和视频进行保存。

2.2.2 防腐浸渍液。对于浸渍标本的保存来说，防腐是最重要的一个环节。因此，需要防腐浸渍液对其进行保存。主要成分如下： 福尔马林50 ml，酒精（95%）300 ml，水2 000ml，也可单用福尔马林和酒精。3 植物病害标本的保存 3.1 蜡叶标本的保存

3.1.1 散装标本。将干燥好的蜡叶标本放进消毒室或消毒箱内，传统的方法是用酒精、升汞液消毒，或将敌敌畏或四氯化碳与二硫化碳混合液置于玻皿内，利用毒气熏杀标本上的虫或虫卵，约3 d 后即可取出。有条件也在-40 ℃低温处理消毒。将消毒好的蜡叶标本鉴定、整理，然后装进标本袋中，贴好标签，以备实验课用作实物标本，供学生上课使用。

3.1.2 制作盒装标本。将植物病害症状典型的蜡叶标本和干燥的果实标本，可利用玻面纸盒的方法进行保藏。按照标本的大小，选择合适的纸盒（一般为长28 cm、宽20 cm、高1.5~3.0 cm），在纸盒中铺1 层棉花，棉花上放标本和标签，注明寄主植物、寄生菌的名称、采集时间等，然后加上玻盖。棉花中可加入少量的樟脑粉或驱

虫的药剂。这种方法制作的标本可长期保存，循环使用。

3.1.3 塑封标本。适合保存叶片标本和较小的茎秆（如小麦、水稻）标本。做法是：根据植物病害标本的大小选择适当的护卡膜，将1 张比护卡膜稍小的白纸放入护卡膜中，在白纸右下角写上该标本的标签，然后把标本放在白纸上摆好，再把膜放平，放入预热到160 ℃的过塑机封塑即可。如果标本较小、较窄，1 张纸上可放几个标本，可根据需要分类装订成册。这种方法做出的标本弥补了以上盒装方法存在许多缺点，如标本盒体积大，携带不便，造价较高，只能用肉眼和手持放大镜观察标本的局部，对细小组织和结构观察困难，标本易变色、发霉、受虫蛀、不耐贮存等。3.2 浸渍标本的保存

将已鉴别的标本适当处理后放在盛有保存液的标本瓶中，用蜡或火棉胶封口后，将标签贴在标本瓶上进行保存。由于浸渍液所使用的药品大都为挥发性的，或容易氧化，因此浸渍标本最好放在暗处，以减少药液的氧化，或瓶口因温度变化而造成破裂。4 注意事项

植物病害标本的采集受植物生长季节、气候条件、采集地点、采集时间及作物品种布局等多种因素的影响，要把握时机才能采到需要的症状典型的标本。另外，对于病害标本的制作，不同部位制作和保存的方法不同。蜡叶标本在保存过程中，要保持标本室的干燥才能防止发霉，但干燥标本易遭虫蛀，因此最好每年用甲基溴等药剂熏蒸，以保证标本的完好。浸渍标本保存液也要经常更换，以保证标本不腐烂。这样，逐渐积累和补充各种病害标本，才能使实验课程顺利进行，达到预期的良好效果。

昆虫标本制作方法

一、昆虫标本的干制法

1.用针刺晒干。用昆虫针由昆虫的胸部刺过, 插在软木板上。插人的针应当垂直, 插人的高度当用刺虫台校整, 自然干固。

2.粘虫纸粘固。较小的昆虫，如蚤、蚊等, 将其粘在粘虫纸上后,剪下纸块, 用

昆虫针刺在纸上固定晒干。

3.展翅晒干。翅较大的昆虫,针刺后常常两翅下落, 这时应使用展翅板, 将其两翅伸平并用纸条固定晒干。

4.去除内脏。对较大的昆虫,内脏极易腐败生霉, 应去除内脏。在腹或背侧开口取出内脏, 再用脱脂棉花加以充填, 并放人少量的苯酚，再用昆虫针从胸中刺人晒干。

5.填蜡法。对较大的蛾类幼虫, 在去内脏之后（去内脏时用注射器从肛门刺人把内脏全部吸除）, 把化溶的石蜡用注射器从肛门注入其体腔内, 呈现原来的饱满状态。放人冷水中加以固化。

6.去脏烤干法。把昆虫的内脏抽出之后, 用二联球慢慢打人空气使之体腔充起, 外加红外线灯烘烤至干。

7.埋藏法。把昆虫经固定脱水之后, 用熔化的酒精松香稠液慢慢浇灌, 使昆虫被包埋藏在松香之中；另法是把昆虫脱水后, 用白明胶液包藏之。明胶液配法明胶加水和石碳酸, 用水浴法溶化后浇埋之。此外还可以用万能胶包藏, 效果较好。把脱水的材料放在白纸上用万能胶滴埋, 使其全部躯体都粘上胶, 待后再滴一次, 滴后应加罩防尘。这种作法效果较好,包埋极薄的一层胶, 不影响观察, 增加材料的坚固性能, 能防潮防霉。

二、昆虫标本浸渍法

1.福尔马林浸存法。用5%福尔马林浸泡。经3-5d后换液一次再移入5%福尔马林中保存。

2.酒精浸存法。用50%酒精固定12-24h后移入70%酒精中保存。

3.酒精甘油、甲醛甘油浸存法。将上二配方分别加20%-40%甘油效果更好。能增加昆虫肢足关节的柔软性，防治了单用酒精脱水变硬的缺点。

鼠类的标本采制和保藏

山西省农科院济经作物研究所

柳

枢

在进行鼠类区系、生态调查，灭鼠防治工作中，必须要做好一件事情，就

是收集标本材料，保存和制作好各种鼠类的标本，作为研究生物科学的证据，标本的形迹是最重要的记录材料，采集标本，鼠夹是最常用的捕鼠工具，种类型号很多，可根据鼠的活动特点

栖息环境以及鼠类的体型大小分别选用。为了不损伤被捕获的动物，也可选用各种捕鼠笼捕抓活体。此外，亦也有猎枪、小口径步枪猎取动物。在药物灭鼠现场则能收集妥善处理。尤其是动物疫病流行地区或不疑地区，在无十分安全可靠的消毒措施及手段时，不要随便进行采集。必须指出，在进行该项工作时，应穿戴防疫服装、鞋、袜等，以避被跳蚤等叮咬感染动物流行病。

(1)制作标本所需要的物品

1、消毒用品：氯仿、来苏儿、酒精、肥皂、洗涤剂等。

2、防腐剂：砒矾粉(配方：亚砒酸、明矾各半研制成细粉)或砒皂膏(配方亚砒酸五分之

一、樟脑五分之二，切碎的肥皂五分之二混合后加水煮成膏)樟脑或卫生球等。

3、工具和物品：熏桶、解剖刀、小剪刀、钳子、镊子、天平或小称、钢卷尺、铅丝(粗细根据标本而定)、木板、毛巾、棉花、针、线、标签、钢笔、铅笔、墨水、登记本、大头针等等。制作生态标本时，还要准备假眼等。

(二)剥制前的处理

对于获得的标本，务必置于鼠袋内并扎紧袋口，谨防鼠类体外寄生虫逸出。同时，使用标签注明采集地点、时间、原则上应以一鼠一袋为准。将带回的鼠体，首先放在熏桶内、倒入一定量的乙醚、氯仿或氰化钙，把体外寄生虫、蚤、螨等熏死和暂时麻醉，然后，用昆虫镊或密梳子清拣昆虫。捕获的活鼠可就地破坏延髓、压挤内藏、窒息等法处死。或置于密闭的容器内充以CO2窒息处死。对于获得的罕见鼠种，即使是幼鼠和有血迹污染，或稍有腐烂尸体，也要用布或滑石粉等擦洗干净，设法制成标本。经过上述处理的死动物，即可进行标本的测量，鉴定。

(三)外部测量与鉴别

已杀灭体外寄生虫的死亡动物，挑选毛皮、头骨、四肢及尾部完整的个体做标本。虽有损伤，但可能是稀有、珍贵或可疑的种类也应选取。选取的标本应先记录体重，以克为单位，然后进行外部测量。

外部测量以毫米为单位，取其整数即可。测量器械可用两脚规、钢卷尺、卡尺等。测量前，将鼠体仰放桌上或搪瓷盘内，取其自然姿态，若是僵死蜷缩的标本，应轻轻揉按直，其使恢复自然姿势。测定及记载项目包括：标本编号、采集地、日期、性别、体长、后足长、尾长、耳等(见图1)动物的雌雄鉴别，主要决定于动物的外生殖器结构，雌雄有发达的乳腺位于胸腹部和鼠鼷部两侧；雄性的睾丸自腹腔降落至鼠鼷部的阴囊里。

对于幼体发育不完全，上述特征不易看清，因此不易鉴别。一般说来，可根据位于腹部正中线后端的泌尿生殖乳头与肛门的距离长短而定，雄性比雌性距离为长。在上述方法皆无法鉴别性别或对于不熟悉的种类，可剖开腹部，通过内生殖器观察来判断。雄性可看到阴茎及睾丸，雌性可看到输卵管及子宫带。

(四)剥制方法

将鼠体仰放于平板上，用小剪刀或解剖刀轻轻沿腹部正中线，至生殖器前端切开表皮。

(不可用力过大，否则会切开腹肌露出内脏)，在刀口处小心把两侧表皮与肌肉分开，直到膝关节，并推出后腿的膝关节用剪刀将膝关节处剪断。(如图2)为了使这项工作作得方便，把后腿足略微向里推一点，此时关膝弯曲，而关节上去了。清除大腿的肌肉，把皮翻过来使恢复原态。另一侧用同样的方法处理。

把生殖器及直肠与皮肤连接处切断，便可剥离尾部。以后修剪一下尾周围的结缔组织纤维，在此后用一只手的食指与拇指摄紧尾基部皮缘，缓缓紧拉，尾椎即可抽出(见图3)。切记不可用力过猛、否则尾椎会断。

尾部剥完后，继续脱袜子式的向前推脱，一直脱到前肢，从肩胛处切断。

头部剥皮比较复杂，应特别小心谨慎，以免碰伤皮肤或头骨。当翻至颈部上端时会遇到一层半透明的软骨膜，这是耳壳。将周围的结缔组织轻轻剥离，细剪着耳部的皮肤，再向前剥至眼部，要特别小心，切匆剥破。轻拉皮与头骨，可见到皮肤与眼球之间有一白色的园环，这就是眼脸。从脂白环与眼球之间小心剪开，继剥至吻部。先剥下唇，后剥上唇，至鼻端从鼻骨处切断。到此为止，鼠的尸体与鼠皮完全分开了。头胄由颈部剪下，系上与鼠皮和采集薄上的一致编号，另行处理。如果要剥制生态标本，头骨要保留在皮上。在上颔的鼻尖和下颔嘴唇的皮不要完全切开，适当的保留一点，由头骨后部剪下，把舌头、眼睛、脑浆挖出来，把头骨上的肌肉去干净。

(五)标本的填装与制作

1、固态标本制作法：首先把皮上残留肉和脂肪刮去，把破裂的地方要缝合好。将剥皮时留在皮上的四肢骨插上细铁丝，涂以防腐剂，用棉花缠在四肢骨骼上，使其如生活有肌肉那样丰满，取长等于尾尖到胸部的鸟羽轴或竹·签、铁丝等卷以适当的棉花插入尾鞘。然后把鼠皮翻过来，开始填装，填入的棉花应均匀不管装在什么部位，都要平而松软，与原来肌肉相似。填充完毕后，将上下唇缝合，再缝合腹皮。缝合时应注意要从里往外穿针，穿针时以免把毛带进皮的内面。由上而下先拉一针，然后再左右拉线。最后调整姿态，先用小镊子张鼓眼脸，两耳竖直，胡须摆正，将皮毛梳理好。标签一般系在右后腿上。四肢用大头针固定在硬纸板或木板上，固定时前肢并拢，脚掌向下，两后肢靠紧尾巴，足掌向下，尾平放于两后腿之间。而后分别在前飞后肢的掌部用大头针加以固定(图4)。在阴干过程中还要不断加以整形，直到干为止。

2、生态标本制作法：生态标本的制作法与固态标本相同，但是还需要用铁

丝支持其肢体，并按其生活时的姿态进行制作。铁丝的粗细应依动物个体的大小而不同。头部、前后左右附肢及尾部各用一根铁丝支撑。头部的铁丝先用棉花卷成与颈部原有肌肉粗细长短相同，其一端固定于头骨上。眼窝、吻部等除去肌肉的部分，用棉花填充塑成而与原形相似，将它放在头皮之内，按其原头部之形状矫正眼、耳、脸飞唇的位置。取两根细铁丝，一端由足底沿肢骨后侧插入肢内，外留一段为固定之用。穿人的铁丝沿肢骨弯曲，用线缚于骨骼上，外卷棉花以代替除去的肌肉。四肢皮肤翻回原状，但应注意不可扭转。尾巴的制法与固态标本同。先将头和前肢的铁丝在相当于肩胛骨外扭合，再将后肢和尾巴的铁丝扭合成适当的躯干支柱，腹内填充棉花，缝合切口。

将制成的生态标本，按所需求的姿态固定于板上或生境架上，整理眼睛耳朵、嘴唇位置，唇间填入适当的棉花或粘土，使它与原肌肉一样，胡须摆正，两耳竖直，眼窝内嵌入大小适宜的假眼睛。至此生态标本制作完毕。

假眼的制作有许多方法。小型鼠类的眼睛因其虹彩不大明显，可采用黑疙瘩钉。对于较大的鼠类，可采用彩色假眼，即用大小适当的半球形黑色飞玻璃体，或黑豆粒等。制作生态标本时，必须熟悉鼠类的生活习性和形态特征，这样才能制成如生的标本o

3、浸制标本制作：暂时性的保存野外捕获的鼠类或幼小的哺乳鼠，胎仔、生殖系统等资料，均可用浸制液保存。一般采得上述标本可直接浸于7 5％酒精，或5-10％甲醛(福尔马林)溶液，或两者各半的混合液中。对幼小鼠或胎盘内脏等，宜用较稀药液浸泡，否则，容易硬化。

体型较大的鼠体处死后，应将腹部剖开，使保存溶液易于渗透到内部，以免腐烂。

活的鼠类标本可不经杀死直接投入浸泡液中，待它死后固定变硬之前，将附肢及其它部分调整适当姿态，以便日后观察研究。

各浸制标本都应拴以标签，用铅笔写上采集时间飞地点、种类等。为防止保存液蒸发，装有浸制标本的标本瓶除加盖外，还需将盖缝四周以石腊密封。药液如变浑浊，要随时更换。

4、头骨的标本制作法：头骨是标本的一个组成部分，在分类签定中是不可缺少的。鼠类鉴别，主要是根据外部形态与头骨结构特征进行的。因此，制成剥制的标本，其头骨均应制成相应的头骨标本。

剥皮后的动物从颈部将头切下，用水蒸法将附在头骨下的肌肉煮熟后剥制干净，用小勺子或小镊子掏净脑髓，用刷子刷净后即成。较大的头骨附着的筋健不易熟烂，可少加些碱面。较小的头骨，用水煮时，时间不要过长，以免由于过于熟烂至头骨破碎。此外，小型头骨的制作也可采用生刮法或发酵法，即将头骨连同附带的肌肉浸泡于装清水的玻璃瓶中或埋在土中，数日后肌肉自行腐烂，然后用清水洗净制成完整的头骨标本，制成的头骨标本，如需漂白，可放于烈日下暴晒或在百分之二的漂白粉溶液中浸泡后清洗，即可达到标本漂白的目的。

(六)标本的保藏

标本是科学研究的资料和依据，也是生物教学的实物，需要长期保存，除应妥善管理不使损坏外，对原来头骨、皮毛及其它认为有研究、保存价值的标本亦

应成套保管，不能随便堆放。为了避免混乱，可在头骨标本的颅骨与下颌骨上分别标以同样的标号，在相配合的头骨、假剥制标本或毛皮上也应系上相同的标签。

标本应放置在通风良好，空气干燥的室内保存。为使毛皮标本不致蜕色，宜放于柜厨内避免阳光照射。存放标本的柜厨内应经常撒放樟脑以防虫蛀。标本室要定期用熏蒸毒剂处理，以防蛀虫。

浸制标本的保藏除以上所述外，亦应注意避光保存。

第二篇：实验四 植物病害标本采集及制作

实验四 植物病害标本采集及制作

一、目的要求：

通过采集和制作标本，了解植物病害标本采集要求，学会标本的采集与记录，掌握植物病害标本的制作方法。没人鉴定10份病害标本，做3-4病原图，标注病原名称、拉丁学名。植物病害标本要能表现出植物病害特征，须注意采集病害症状的各种表现。对不认识的寄主植物，一定要采集花、果实以备鉴定，对常见的局部性病害寄主，就不一定采植物整株。但若植物各个器官都发病，则应分别采集各个发病器官。病征是鉴定植物病害的主要依据，凡有病征的植物病害，一定要注意采集带有典型病征或病原物不同发育阶段繁殖体的标本。

二、标本采集

1、观察

采集时，应县应对一种植物的反常表现进行观察，主要观察他是不是病害（是虫害、或是机械伤害？是侵染性病害还是非侵染性病害？）这种病害特点是什么？哪些病株可以代表这种病害特点？

2、采集

典型的病害植株选定后，就可以采集所需要的部分，每种标本应采三份。

3、编号登记

采集数种病害标本以后，即可进行编号和登记。按照采集顺序给所采集的标本编“采集号”。采集标签、采集记录本是记载标本症状特点的重要备查依据，应及时、详细地填写记载。

三、标本压制

采集的标本要及时经过压制，使其迅速干燥和平展，尽可能地保持其自然色泽和状态，干燥后的标本才能成为有价值的材料永久保存。为此务必做到：

1、在压制前须进行标本的修剪和整形，勿使过大、过密，然后放在标本纸中加压吸水干燥。

2、勤换纸、翻压标本。新采的标本，每日至少换干标本纸一次，遇秋季高湿及多汁标本，每日应换两次。初次换纸翻压时应对标本进行整形。三五日后，标本已大部干燥，可以隔日换纸、翻压直至干燥。

四、采集工具

标本夹、标本纸、采集标签、记录本（采集号码、采集日期、采集地点海拔、寄主名称、危害部位、症状特点、病害名称、病原菌学名、受害程度、产地环境、产地环境、采集人、标本号数、备注等）、手持放大镜、修枝剪、手锯等

第三篇：标本采集、运送、保存程序

标本采集、运送、保存成序

1.目的

规范标本采集程序，保证实验室检测前标本质量。2.范围 微生物标本。3.职责

3.1 医护人员和检验人员负责指导病人如何正确留取标本。3.2 标本运输人员负责收取标本和运输标本至微生物室。4.程序

4.1 采集标本前，采样人员根据检验申请单检验项目的要求，确认采样计划并进行适当的准备工作，包括核对遗嘱、打印条形码、选择合适的标本容器、粘贴条形码及指导病人做好采样前的准备工作等。4.2 认真核对病人、标本容器和检验申请单是否一致，严防差错。4.3 标本送到微生物室，标本运输人员必须与微生物室标本接收人员对标本进行核收登记并签名

4.4 所有标本必须记录采样时间并立即送检，一般不得超过2h.5 采集方法 5.1 血液及骨髓 5.1.1 血液

5.1.1.1采血时间：①在抗菌药物治疗前；②尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前30-60分钟内采血；③如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养；④同时或短时间内完成几套血

培养采集，除非怀疑存在持续性菌血症时（如亚急性感染性心内膜炎1-2小时从不同部位采集3套标本）

5.1.1.2采血量：成人一次采血5～10ml,儿童2～5 ml婴幼儿为1～2ml。（附注：儿童的采血量不能超过其总血容量的1%）。

5.1.1.3采血方法：①成年病人，推荐同时在不同部位采集2～3套（每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厌氧瓶）；对于感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集；对于婴幼儿病人，推荐同时在不同部位采集2～3瓶。因为儿童患者很少见厌氧菌感染，因此推荐仅使用需氧瓶而不常规推荐同时做厌氧培养。②采血量充足时，应先注入厌氧瓶，后注入需氧瓶；采血量不足时，应先注入需氧瓶，后注入厌氧瓶。5.1.2 骨髓标本用骨髓穿刺针从髂骨采集。

5.1.3 标本保存：采集标本后立即送到实验室，不能及时送检可置于室温，切勿放入冰箱。冬季血培养瓶在送检过程中应采取一定的保暖措施。

5.2 脑脊液标本：由临床医师以无菌要求做腰椎穿刺，抽取脑脊液2～3ml,盛于无菌容器中送检。脑膜炎奈瑟菌离体后能产生自酶，会迅速自溶，肺炎链球菌及流感嗜血杆菌离体后也易死亡，因此，脑脊液无论图片或培养，必须于采集后立即送检。5.3 上呼吸道标本

5.3.1 鼻咽标本：将鼻咽拭子缓缓地伸进鼻孔直至鼻咽喉部（注意：不可用力），轻轻转动，并于该深度停留20～30s,然后迅速地抽出（注意：避免受口或咽部中细菌的污染）。

5.3.2 喉标本：用压舌板压舌，用无菌拭子从咽后、扁桃体和发炎区采样。喉拭子培养不能用于会厌发炎的病人。将转运管安全封口，注明标识和日期，将标本尽快送到实验室。5.4 下呼吸道标本 5.4.1 痰

5.4.1.1 采集标本以晨痰为好。支气管扩张症病人清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰标本。

5.4.1.2 自然咳痰法：在留取痰之前，用清水反复漱口，从气管深部咳出痰，吐入无菌容器内。

5.4.1.3 支气管镜下采集法：在病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。

5.4.1.4 气管穿刺法：在环甲膜下穿刺抽取痰液，收集标本，适用于厌氧菌培养。

5.4.1.5 棉拭采集法：用无菌棉拭子轻轻擦拭病人鼻咽部黏膜，留取标本，置无菌试管内送检，放置时间不应超过2h.5.4.2 支气管灌洗液：用不少于140ml无菌生理盐水灌洗小支气管和肺泡，40～80ml回收的灌洗液中包含约1ml支气管末梢和肺泡中的分泌物；弃去前段可能污染的部分，收集其余部分后立即送检。5.4.3 保护毛刷(PSB):保护毛刷因有双层套管保护，不易污染上呼吸道和口腔定植菌。用无菌剪刀剪断毛刷，置于1ml生理盐水的无菌容器中（仅供需氧培养），快速送检。5.5 穿刺液标本

5.5.1 采用无菌方法采集体内可疑感染部位的液体约2ml，注入无菌试管，或抽取穿刺液1～2ml注入多功能体液培养瓶，或抽取穿刺液2～5ml注入血培养瓶，混匀，立即送检。

5.5.2 标本保存：采集标本后立即送到实验室，若不能及时送检可置于室温，放置时间不应超过2h.5.6 生殖器来源

5.6.1 阴道：经过阴道口（introitus），将拭子插入约5ml,轻轻转动10～30s。确保拭子触及阴道壁，小心退出，不要触及皮肤，将拭子转移到Aptima采集管，与第二线折断。拭子必须必须置于运输管中，尽快送抵实验室。梅毒螺旋体标本从外生殖器的硬下疳处蘸取渗出液，置于载玻片上，加盖玻片后立即送检。

5.6.2 前庭大腺：不要在黏膜部位使用乙醇。皮肤准备参见一般部位，吸取前庭大腺脓肿，使用厌氧转运培养基送至实验室。5.6.3 用于培养基的子宫颈（宫颈管）标本

5.6.3.1 准备阴道窥器，除温水外，避免使用润滑剂，插入阴道窥器，见到子宫颈，用棉拭子拭去多余的黏液，将涤纶拭子插入子宫颈，轻轻转动，并停留10～30s,取出拭子，置于细菌转运培养基。5.6.3.2 一般情况下，阴道标本培养不会产生有意义的结果，所以除B群链球菌筛检外，不推荐阴道标本培养。阴道标本不用于厌氧培养。5.6.4 羊膜腔穿刺术：通常由医生经超声定位留取样本，置于封口的注射器或厌氧转运培养基送抵实验室。

5.7 前列腺：用肥皂水清洗阴茎头，经直肠前列腺按摩获取前列腺液，用无菌拭子采集前列腺液，在室温下运送标本，选择前列腺按摩前和最近时刻的尿液同时送去培养。5.8 尿

5.8.1 女性：先以肥皂水清洗外阴部，再以无菌水冲洗，用无菌纱布擦拭，以手指将阴唇分开排尿，弃去前段尿，留取中段尿5～7ml于无菌试管内。

5.8.2 男性：翻转包皮，用肥皂水清洗尿道口，用清水冲洗，留取中段尿。

5.8.3 儿童、婴儿：先以无菌生理盐水棉球清洗其外阴或外生殖器，将无菌拭管或瓶口对准尿道口，以胶布固定于皮肤上，待尿排出后送检。

5.8.4 两侧肾盂尿：由专科医生采集，左右侧标本必须标明，避免混淆而误诊。

5.8.5 膀胱穿刺：此法用于厌氧菌培养。耻骨上皮肤经碘酊消毒后，再以75%乙醇擦拭，用无菌注射器行膀胱穿刺，吸取尿液后排去注射器内的空气，针头插于无菌橡皮塞上及时送检，2h内进行接种。5.9 粪便标本

5.9.1 自然排便采集：自然排便后，挑取其脓血、黏液部分2～3g,黏液粪便取絮状物2～3ml，盛于灭菌容器内，或置于保存液（运送培养基）、增菌培养基中送检。

5.9.2 直肠拭子：如不易获得粪便时，或排便困难病人及婴儿，可用直肠拭子采取，即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后，插入肛门

内4～5cm（幼儿2～3ml）轻轻转动取出，插入卡布（Cary-Blair）运送培养基内或无菌培容器内送检。

5.9.3 粪便标本应该立即送检，室温保存下不能超过2h，如不能及时送检可以发放入磷酸盐甘油（ph7.0）或转运培养基，但不能超过24h.培养艰难梭菌的标本保存于20℃以下。培养沙门菌和致贺菌的标本应放置磷酸盐甘油溶液中保存。保存弯曲杆菌和弧菌的标本，需加Cacl2(100mg/L)试剂。5.10 脓及创伤标本

5.10.1 封闭性脓肿消毒局部皮肤或黏膜表面后，用无菌注射器抽取，用无菌手术刀切开栗粒状脓肿（miliary abscess），使用无菌注射器和针头采集露出的标本。

5.10.2 将脓液注入多功能培养瓶或无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时，应做床边接种或厌氧运送培养基内送检。

5.10.3 开放性脓肿和脓性分泌物用无菌盐水或75﹪乙醇擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡深处采集2支拭子，1支为图片检查用，1支为培养用。

5.10.4 大面积烧伤的创面分泌物用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置灭菌试管内（注明采集部位）送检。

5.10.5 对未引流脓肿：使用无菌注射器和针头，按无菌操作技术，从中采集脓性物。用无菌手术刀切开栗粒状脓肿，使用无菌注射器和针头采集露出的标本。

5.10.6 疑为放线菌属、奴卡菌属感染时，在检查单上注明需要排除

放线菌属、奴卡菌属。

5.11 褥疮溃疡：用无菌盐水清洗表面后如得不到活检标本或抽吸物，则用拭子用力采集损伤底部。由于褥疮溃疡拭子临床价值不大，一般选择组织活检或针头抽吸样本。

5.12 大疱、蜂窝组织炎、小疱：皮肤消毒同血液培养，用无菌针头和注射器抽吸液体或化脓性物质，如果获得了抽吸物，将之置于合适细菌转运培养基。如果没有得到抽吸物，将小疱或大疱性病变打开，使用棉拭子采集病变部位，置于转运培养基中。

5.13 中心静脉导管标本：用无菌镊子将5cm导管尖端或近心端送至实验室。5.14 耳部标本

514.1 内耳：穿刺前用肥皂水清洗外耳道再进行消毒程序，最后用注射器穿刺鼓室抽吸脓液。对鼓室破裂者，用专用采样管中配备的细头软杆拭子采集脓液，脓液量大也可采用注射器抽吸。

5.14.2 外耳：先用润湿的棉签清洁外耳道，再用专用采样管中配备的毛刷状采样拭子在外耳道内用力旋转摩擦取样。5.15 眼部标本

5.15.1 结膜：采样前先用无菌盐水润湿拭子，再绕结膜取样，最好两眼各采集2支拭子：其中1支用于涂片。建议在床边接种。采集时，须小心地避免感染延至眼部临近区域。注意，须标明左眼、右眼的标本。

5.15.2 角膜：由眼科医生采用刮取法采集标本：采集前先滴2滴局

部麻醉液，再用角膜上皮刮铲刮取病变角膜组织，将刮擦物用少许生理盐水洗下，置无菌杯中送检。

5.16组织标本采集：表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术切除，对窦道和瘘管应深部刮取，获得部分管壁组织。深部组织标本可在手术过程中或采取穿刺活检或抽取分泌物送检，也可使用相应的内镜采集活检标本。标本置无菌容器中并加入少量生理盐水以保持湿度，或置肉汤增菌液中送检。如怀疑为军团菌感染，肺组织切片不要滴加生理盐水（能抑制军团菌生长）。如果怀疑为厌氧菌感染，应把组织放入厌氧的传输系统内立即送检。5.17引流液：用70%乙醇消毒导管采集部位，用注射器从引流管无菌采集2～3ml。标本不能直接从引流袋放出，因引流液在袋中潴留时间太长容易滋生细菌。

第四篇：标本采集常见错误分析

标本采集常见错误分析

送检标本的质量控制包括分析前、分析中、分析后三个主要过程的质量管理。大多数不满意的检验报告单可溯源到标本质量不符合要求，而分析前标本的质量控制对检验结果的可靠性有至关重要的影响，标本采集是影响标本质量最重要的因素之一。我们在加强与临床、护理沟通的同时，坚持标本的核实验收和不合格标本退回制度，目的就是为了把好标本质量关。以下是近年来血液及其他标本采集中最常见的错误，希望能引起重视。

1．凝血不充分：此类错误排在第一位，主要是抗凝血中存在小凝块，多发生在血常规检测中，为采血后标本没有充分颠倒混匀所致；另外，标本量过多，由于抗凝剂的相对不足，血浆中出现微血凝块的可能性增加。微血凝块除易阻塞检测仪器外，由于血液内部分成分的消耗而影响检测结果。一份只有仔细检查才能发现小凝块的标本，可以使血小板降低30%甚至更多，红细胞、白细胞计数也可以降低10%左右。我们规定，对用于血常规的标本均轻轻颠倒并仔细观察，绝大部分可以检查出。2．抗凝剂与血液比例不正确：在凝血功能测定中，常有一些标本量明显不足，特别是儿童和入院检查病人标本，由于小孩采血难，入院时需检查项目多，最易发生抽血量不足，使PT、KPTT和TT假性延长，将误导临床诊治。因此，血液未到刻度的标本一律退回重抽。

3．标本溶血：许多指标在红细胞内和血清（血浆）明显不同，溶血可使LDH、HBDH、血K+、AST、ALT或等值异常升高。此类错误是采血时的一些不良习惯造成，如：压脉时间过长，采血不顺利、抽血速度太快、血液注入容器时未取下针头或用力过猛、等均可造成溶血。我们作过实验，选择20位体格检查者，用两种方法进行比较：⑴用注射器抽血后不去除针头直接将针头插入真空采血管，这时在真空管负压作用下针管内的血液被吸入；⑵用注射器抽血后先除去针头，然后打开真空采血管盖子缓缓注入标本，两种采血方法的标本同时作部分生化项目检测，结果是：前者比后者LDH上升23.4%－58.2%，平均33.7%；HBDH上升22.5%－61.4%，平均35.4%；AST上升6.7%－31.6%，平均13.7%；ALT上升4.7%－18.2%，平均11.4%；血K+上升23.7%－71.2%，平均36.1%，其它如TP、GGT和UREA等也有或多或少的变化。因此，我们主张用真空采血系统自然流出的标本为宜，如果必须用注射器抽血，抽血后要取下针头，再缓缓将血液注入标本采集管。对于未用真空采血系统的单位，若注射器和针头连接不紧，采血时有空气进入或产生泡沫，使用劣质采血器，标本收集管没有干燥均易造成溶血。

4．采血部位不当：有些病人需多次检查，或输液时间较长，有的护士会在病人输液更换瓶子时放出一些血液送检，即使先去除前面的10ml血液，结果也有明显变化。如一例输脂肪乳后直接从输液的静脉中采血，导致了许多结果错误，影响前三位的是：TG为12.4mmol/L(平时为1.0 mmol/L左右)，血小板达560×109/L（上升了4倍多），总蛋白浓度从60左右上升到91.6(g/L)。其它常有明显影响的有血糖、血电解质等项目。虽临床也知道正确的采血方法，但由于护理人员流动性大，工作量超负荷，不时有此类标本送检，只有反复与临床沟通、宣传，加上对标本审核，对于血细胞比例明显不对，结果不合理或有异常变化，及时与临床联系，减少不合格报告发出。

5．采血量不足：对于血培养而言,采血过少可降低培养的阳性率。有文献报告,当培养的血量从2ml增加至20ml时,血培养的阳性率增加30%—50%,培养血量每增加1ml,阳性率增加3%—5%。由于标本已经注入培养瓶，不能检查是否符合要求，只有加强沟通交流，共同努力提高检验质量。

6．标本采集时间不当：对细菌培养、激素检查、找疟原虫或丝虫病原体，需在特定的时间，以提高阳性率。

7．标本运送和处理不及时：标本的运送虽不属采集范畴，但标本采集再规范，若不能及时送检，将严重影响检验质量。尿常规标本需在二小时内检测完成，否则细胞等有形成分开始破坏；离体过长的标本作血细胞分析时会影响分类结果；生化检测的标本也因为细胞内外物质交换而变化。我们要求标本及时送检，到检验中心的标本尽快测定，不能及时测定的生化、免疫等标本及时分离血清，加盖并置4℃冷藏。

以上是标本采集过程常见的错误，属于分析前质量控制的重要部分，做好分析前质量控制是保证检验结果正确是前题和关键。有人对一份临床标本的整个测试时间分布进行统计，结果显示报告申请、抽血和运输占整个测试时间的55%，标本编号、分离和编程占14%，上机检测占4%，分析前的工作超过70%；用于仪器检测的工作量为25%；核对和报告的时间不足3%。除标本采集外，病人的准备工作，所用药物等对结果也有影响。如检查2小时血糖时没有按规定进餐（1个鸡蛋，2根油条，1个包子加1杯牛奶），结果为7.4 mmol/L，重新检查按规定饮食（75克糖溶于250 ml水中，5分钟内喝完），结果为5.4 mmol/L。

质量是检验科的生命，质量的提高要全部医务人员的共同努力，我们应主动和临床乃至患者的沟通，加深了解。通过沟通，让双方都能够从思想上认识到分析前质量控制的重要性，并能真正重视标本的采集工作，从而保证送检标本的质量。另外，检验科工作人员也要提高质量意识，认真负责地做好标本的保存、处理等工作，并严格执行《不合格标本拒收制度》，做好解释工作。

第五篇：血标本采集错误演练

标本采集错误的应急演练

时间：2015-2-14 地点：外科大楼8楼产科病房

参加人员：主班（）责护（）护士（）护士（）病人（）病人（）家属（）

主班接到医嘱，3床（）查凝血功能，和责护核对无误后粘贴采血管，并登记在标本采血登记本。责护（），拿着采血单到病房：3床（），你今天在门诊抽血，查了血常规和肝肾功，没有查凝血功能。办了住院，我们就不允许外出外宿，请你明天早上七点务必要在病房，我们护士会到床边给你采血的。

护士（）：三床（）是吧，现在我给你抽血了？ 病人处于半睡半醒状态：是的。责护进行采血，采血毕.三床按呼叫器，护士赶到床边询问：您好，请问你有什么事吗？ 病人回答：昨天我的责任护士告诉我今天早上，我要抽血化验，昨天晚上家里有事就回去了，刚来，麻烦你现在给我抽血吧。

护士（）和护士（）核对后发现3床的凝血功已抽，并已经送检了，去病房询问，原来早上抽血时加3床病人睡在三床了。护士（）电话联系检验科：你好，检验科吗？我们是产科，刚送去的3床（）的凝血功你们化验了吗？

检验科：正在准备化验呢，有什么事吗？ 护士（）：发生采血错误，麻烦你们暂停化验，并将此标本丢弃，我们马上再抽血送检，谢谢！

护士（）重新打印了3床的凝血功能的条码，粘贴试管，和护士（）核对无误后去病人床边，核对无误后给3床（）抽血，并及时送检。

护士（）来到加3床床边：不好意思，早上抽血的时候，您躺在3床的床上，我没有仔细核对你的身份信息，就抽成你的了，我们已经给检验科打电话暂停化验了。你不要太紧张。

加3床：没事，晚上家属没地方睡，3床回去了，所以我就睡在她的床上了。护士（）：钟护士长，刚才发生一起标本采集错误，现在向您汇报。

钟护士长：通知全科护士，今天下午5：30学习，共同讨论分析标本采集错误的原因并提出整改措施，现在先进行网报。演练结束！