乙型肝炎血清学检测中不常见模式分析（共5篇）

第一篇：乙型肝炎血清学检测中不常见模式分析

乙型肝炎血清学检测中不常见模式分析

乙型肝炎病毒的血清学检测是临床实验室的常规检测项目，应用最广泛的就是我们俗称的乙肝“二对半”。人体感染乙肝病毒后，血清中抗原、抗体的变化有一定的规律性，有一些模式是我们经常遇到的，例如我们通常所称的“大三阳”、“小三阳”等，而所谓的不常见模式是相对于常见模式而言，这些模式难以用乙型肝炎病毒感染后血清学指标规律性的改变来解释。不常见模式的出现是多种因素造成的。如果排除了试剂、操作及其他干扰因素，根本原因是病毒变异或人体免疫状态改变所引起。乙型肝炎病毒的变异是在慢性感染过程中为适应生存环境而自然发生的，特别是近几年抗乙肝药物以及疫苗的广泛应用，使乙肝病毒的突变发生率明显增加。突变可发生在基因组各个区域：前S/S区、前C/C区、P区以及X区，由于基因的变异造成其合成的蛋白构象发生改变，使临床检测血清学指标的模式有所改变。而人体免疫状态的改变，无论是由于遗传性的还是继发性的原因，都可能在感染乙肝病毒时发生无免疫应答或应答低下，使临床实验室无法检测到某种抗原或抗体，继而使血清学指标的模式发生改变。

本实验室统计了8099例用Abbott Axsym试剂检测乙型肝炎病毒血清学指标的结果，包括乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（HBsAb）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗体（HBeAb）、乙肝核心抗体（HBcAb）以及乙肝核心抗体-IgM（HBcAb-IgM），其中有150例为不常见模式，占1.85%。虽然所占比例较低，但由于我国是乙肝的高发区且人口众多，因此不常见模式的绝对数仍不容忽视。

我们统计了本实验室不常见模式出现的百分比，最多见的依次为以下5种不常见模式：HBeAg与HBeAb同时阳性、HBsAg与HBsAb同时阳性、HBsAg单独阳性、HBsAg阴性而HBcAb-IgM阳性、HBeAg单独阳性。我们将这些模式可能出现的原因进行分析讨论，有以下几种情况：

1、HBeAg与HBeAb同时阳性：HBeAg阳性一般反映HBV复制活跃，传染性较强，抗HBe一般在HBeAg由阳性转为阴性后产生，表明部分病毒被清除，乙肝有所缓解，传染性降低。而我们统计的HBeAg和HBeAb同时阳性占总的不常见模式的百分比高达44%，并且结合肝功能指标发现，慢性指标天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）升高的百分比较高，提示急性HBV感染趋向恢复（感染中期），处于血清转换期，但肝细胞仍有炎症损伤。

但值得注意的是，并非所有HBeAg阳性转为阴性都提示病情有好转的趋势，一些乙肝患者和健康携带者出现-HBeAb的同时可检测到持续高滴度的与前C区/C区突变相关的HBV复制。此时应检测HBV-DNA，以观察患者体内HBV是否有复制。如HBeAg已转阴，而HBV-DNA仍有复制，高度提示HBV已发生变异。前C区1896位（A83）的变异是HBV中最常见，也是目前研

究最多的变异之一，是乙肝病毒为适应生存环境，使前基因组RNA结构更具稳定性，有利于病毒复制而引起的突变（与基因型有关），临床上表现为HBeAg阴性而HBV-DNA阳性，患者处于活动状态的慢性乙型肝炎。

随着以拉米夫定为代表的核苷类抗病毒药物的应用，推动了慢性乙型肝炎治疗的进程，治疗过程中会发生HBeAg向HBeAb的血清转化，出现HBeAg和HBeAb同时阳性。但拉米夫定的临床广泛应用也遇到了与以往治疗类似的问题，如持续应答率不满意、部分患者停药后复发、需长期用药和耐药突变等。其中耐药突变研究最多是YMDD变异，已有研究证实，YMDD变异株复制活力较野生株低，停用拉米夫定后野生株很快恢复为优势株，因此变异出现并不是停止治疗的指标，发生变异不一定耐药，只有当变异株成为优势株时才发生耐药。临床应根据患者不同的临床表现，密切观察用药后HBeAg的血清转换率、治疗前后谷丙转氨酶（ALT）的升降、HBV-DNA的水平高低以及加强对耐药突变的检测，综合评价疗效，制定下一步的治疗方案，并加强随访。

2、HBsAg与HBsAb同时阳性：HBsAg是HBV感染的特异性指标，HBsAb一般于HBsAg消失数周后（也就是急性感染约5个月后）开始在血液中出现，是HBsAg刺激机体产生的特异性保护抗体，是HBV感染终止及有免疫力的标志。一般情况下，血清中HBsAg和HBsAb不可能同时存在。本实验室统计发现HBsAg 与HBsAb同时阳性占总的不常见模式百分比为35.26%，居不常见模式的第2位。随着大量乙肝治疗药物的临床应用以及乙肝疫苗的推广使用，此种模式的患者数量还会明显增加。

分析原因可能有以下几种：①接种乙型肝炎疫苗后，虽有正常的HBsAb应答，但仍能感染α决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而与HBsAb并存。②前后有不同亚型的HBV感染。③乙肝病毒携带者接种疫苗后产生HBsAb，由于S基因的变异，其编码的HBsAg抗原性改变，原型HBsAb不能将HBsAg清除。有研究者统计，随访台湾地区10年来乙肝HBV-DNA阳性儿童由于接种疫苗后发生S基因变异，由1984年（接种前）的6.1%（8/132）上升到了1989年（5年后）的19.6%（10/51）和1994年（10年后）的28.1%（9/32）。而且HBV-DNA阳性儿童接种疫苗后S基因变异率明显高于未接种疫苗者（12/33对15/153）。由此可见HBV基因变异株有可能在免疫后人群中流行而成为新的公共卫生问题。④HBsAb能与HBsAg 构成免疫复合物，所以少数慢性乙肝患者可出现HBsAb和HBsAg 同时阳性。另外，由于干扰素既能抑制病毒复制，又能调节宿主免疫，因此对于干扰素治疗的慢性乙肝患者，在治疗中虽出现HBsAb血清转换，但由于S基因的变异，而不能将HBsAg清除。该模式尽管HBsAb阳性，但由于有免疫逃逸病毒株的存在，因此肝功能的急慢性指标均有不同程度的升高，说明乙肝并未进入恢复期，对于该模式的患者应结合HBV-DNA和前S蛋白等检测，以了解病毒复制情况，进行正确的治疗。

3、HBsAg单独阳性：不常见模式中还有HBsAg单独阳性，无抗体出现的模式，主要见于①急性HBV感染的最早期，一般随之出现HBeAg和HBcAb-IgM，若以后仍为持续性单一的

HBsAg阳性，需用HBsAg确认实验以避免假阳性结果。②HBsAg携带者母亲所生的婴儿。结合临床诊断分析，此种模式主要为慢性乙肝，且肝功能指标仅AST升高，提示可能处于乙肝感染的早期或低水平感染。

4、HBsAg阴性而HBcAb-IgM阳性：HBcAb-IgM是HBV感染后较早出现的抗体，高滴度的HBcAb-IgM被认为是诊断急性乙型肝炎的“金标准”，即使HBsAg(-),也可诊断急性乙型肝炎，高滴度的HBcAb-IgM常表示肝脏损害，有肝功能的异常。HBsAg阴性而HBcAb-IgM阳性的模式，其肝功能急性指标升高的患者较少，而慢性指标升高的患者较多，有报道认为此种模式可能是急性乙肝处于恢复的窗口期。

5、HBeAg单独阳性：HBsAg阴性而HBeAg阳性。有文献报道，HBV-S基因区突变可使患者感染HBV后，产生HBsAg阴性结果，若运用PCR技术在血清或肝组织中能检测出HBV-DNA，此可视为HBsAg阴性的HBV感染，但较为少见。另有报道：HBsAb与HBsAg 可形成免疫复合物，当抗体的数量恰好将抗原决定簇位点全部覆盖时，便造成了血清中既不能检测到HBsAg 又不能检测到HBsAb的现象；类风湿因子与HBeAg有交叉抗原存在，当类风湿因子阳性时，可能造成HBeAg假阳性，此时如遇到HBeAg单独阳性时应做类风湿因子检测，以排除假阳性的可能。少数病例可能与干扰素治疗中C基因区的短暂整合或S基因序列中决定簇前有插入变异有关。

特别需要注意的是有些不常见模式是由于一些外在的因素造成的，如试剂质量、方法学差异、操作误差及样本干扰等，例如HBsAg浓度过高，有些采用“一步法”检测的试剂盒会产生“钩状效应”，出现假阴性的结果，以上提到的不常见模式中4、5两种模式就有可能为“钩状效应”造成，要避免这种情况，可将标本稀释后再测或采用“二步法”的试剂进行检测。因此，对临床实验室检测到的乙肝不常见模式不能轻易发出报告，首先要进行复查，排除试剂及操作过程造成的误差，并且最好采用不同的试剂及方法加以验证；其次应及时与临床沟通并结合HBV-DNA、肝功能等检查以及临床症状进行综合分析；此外，有条件的实验室还可以对这些标本进行基因突变的检测，这样有利于分析这些模式产生的真正原因，也为临床的诊断和治疗提供可靠依据。

第二篇：17102例乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒检测结果分析

【摘要】 目的 回顾性分析传染病乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒4项检测结果，分别探讨其在就诊患者中诊疗的意义。方法 对17102例患者的传染病4项检测结果进行回顾性分析，所有患者均采用时间分辨免疫荧光法检测乙型肝炎表面抗原（hbsag），采用酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体（抗-hcv）、人类获得性免疫缺陷病毒抗体（抗-hiv）和梅毒螺旋体抗体，并分析检查结果。结果 ①4 项

检测结果中hbsag、抗-hcv、梅毒螺旋体抗体、抗-hiv阳性率分别为21.60%、0.71%、0.75%、0.35%。②科室分布：门诊部作为相对独立的大科室，在传染病4项中均占有较高的比例，住院患者中腹部外科的hbsag阳性率较其他科室高，整个外科的阳性比例要比内科高。结论 传染病4项阳性率在门诊及体检患者中较为常见，住院患者以外科阳性率为高，及时检查能降低医源性阳性率，避免发生医疗纠纷，减少医院内感染。

【关键词】 乙型肝炎病毒；丙型肝炎病毒；艾滋病；梅毒

doi：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.004

传染病4项检测在临床上具有相当广泛的实用性和必要性，由于经过血液传播的疾病初期在临床上往往无明显特异性，容易被忽视，并可能对患者及他人造成严重后果，传染病患者在不知晓的情况下进行输血及无偿献血，对血液安全造成严重威胁[1]。本文分析传染病4项检测在临床中的意义，报告如下。

资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年1～12月在本院参与hbsag、抗-hcv、抗-hiv、梅毒螺旋体抗体检测的17102例就诊患者，年龄1～90岁。

1.2 试剂及仪器 hbsag采用上海新波生物有限公司试剂，抗-hcv检测试剂盒购自北京万泰生物药业有限公司，抗-hiv检测试剂盒购自珠海丽珠试剂股份有限公司，梅毒螺旋体抗体试剂盒购自北京贝尔生物工程有限公司，仪器采用hr801全自动酶标仪。

1.3 检测方法 所有患者均清晨空腹采集静脉血3～5 ml并及时送检。hbsag采用时间分辨免疫荧光分析法检测，抗-hcv、抗-hiv、梅毒螺旋体抗体均采用酶联免疫法进行检测。

结果

2.1 检测结果 17102例中hbsag阳性3694例（21.60%），阳性率最高；抗-hcv阳性122例（0.71%）； 梅毒螺旋体抗体阳性129例（0.75%）；抗-hiv阳性60例（0.35%）。

2.2 科室分布情况 门诊部作为相对独立的大科室，在传染病4项中均占有较高的比例，住院患者中腹部外科的hbsag阳性率较其他科室高，整个外科的阳性比例要比内科高，这种情况也反映在抗-hcv、抗-hiv和梅毒螺旋体抗体的阳性情况上。见表1。

讨论

我国肝炎高发，尤其以乙型肝炎、丙型肝炎最多[2]。据报道，hcv的慢性阳性率约为我国总人口的3%，而隐性 hbsag感染者超过8%[3-8]。自 1981 年 6月美国疾病控制中心（cdc）报道首例艾滋病以来，短短 30 年间，艾滋病已在

230 多个国家和地区流行，至少有5000万hiv感染者，中国内地1985年6月发现首例外籍艾滋病患者，截止2007年7月

底，全国已累计艾滋病病毒感染者21.43万例，艾滋病患者达56758 例，死亡18246 例。本组发现抗-hiv呈阳性反应者达60例，以门诊部、感染科和其他内科比例为最高；感染科是集中了全院大部分艾滋病病毒感染病例，或是首诊或是其他住院科室转来或是进入艾滋病发病期的过往患者，因此比例较高，而其他内科由较多科室组成，各内科科室比例不高；门诊部的比例较高，因此必需高度注意门诊首诊患者的艾滋病病毒抗体筛查。梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性全身性疾病，我国近年来开展梅毒临床监测，发现医院皮肤科门诊就诊患者中梅毒约占10%，部分地区的城市人口中5%患有梅毒，农村地区为2%～3%[9，10]。

本组17102例传染病4项检测结果中hbsag阳性率最高；整个外科hbsag、抗-hcv、抗-hiv和梅毒螺旋体抗体阳性比例要比内科高，因此外科术前筛查传染病4项和术中医务人员注意防护十分重要。

综上所述，传染病4项阳性在门诊患者中较为常见，而住院患者又以外科较为多见，及时进行传染病检出，可降低医源性感染发生率，避免医疗纠纷，预防医院内感染，同时可为阻断母婴4项传染病的垂直传播提供重要指引。

第三篇：不定时工作制常见争议问题汇总分析

不定时工作制常见争议问题汇总

不定时工作制，它没有固定工作时间的限制，是针对因生产特点、工作性质特殊需要或职责范围的关系，需要连续上班或难以按时上下班，无法适用标准工作时间或需要机动作业的职工而采用的一种工作时间制度，是中国现行的基本工作时间制度之一。

在各行各业中，并不是每种工作都是朝九晚五这样规定好上下班时间的，有些工作没有固定的工作时间限制，而是等待老板或者客户随叫随到，工作起来不分昼夜。例如企业高管、外勤人员、推销人员、长途运输司机等，这些岗位的工作时间无法按照标准工作时间进行衡量，于是另外一种工作制顺势而生了——不定时工作制。

因为劳动法中缺少细则，不定时工作制在实践当中时常导致一些劳动争议，例如员工绩效难以考核，加班费难以计算，甚至未经批准而实施不定时工作制等。

相关问题：

问题一：不定时工作制没有在劳动合同中约定是否就无效？

笔者认为，根据《劳动合同法》第八条规定，用人单位招用劳动者时，应当如实告知劳动者工作内容、工作条件、工作地点、职业危害、安全生产状况、劳动报酬，以及劳动者要求了解的其他情况；第十七条规定，工作时间和休息休假是劳动合同的必备条款，而且第三十五条规定，用人单位与劳动者协商一致，可以变更劳动合同约定的内容。变更劳动合同，应当采用书面形式。因此，笔者认为，不定时工作制会切实影响劳动者的利益，用人单位实行不定时工作制的，应当主动告知，并且在劳动合同中明确注明，由标准工时制等变更为不定时工时制时，应当采用书面形式与劳动者协商一致。有些地方就是如此规定的，例如江苏省人社厅出台的规范特殊工时制的相关通知，就要求企业今后申请特殊工时制时，不仅要事先征得劳动者的书面同意，还要在相关的劳动合同和劳务派遣合同中予以注明。

问题二：法定节假日上班的，应当为不定时工作制的职工支付加班费吗？ 根据劳动部颁布的《工资支付暂行规定》中第十三条规定，实行不定时工作制的劳动者，不执行普通用人单位加班工资计算的相关规定。而各地区可以辅以出台适合本地情况的地方法规。

有些地方对此作出了明确规定，例如《深圳市员工工资支付条例》第二十条规定：“用人单位安排实行不定时工作制的员工在法定休假节日工作的，按照不低于员工本人正常工作时间工资的百分之三百支付员工加班工资。”

但是在很多地方就没有针对不定时工作制如何支付加班费的具体规定，如果地方政府未出台具体的地方法规，那么应当按照国家规定来执行，而按照《工资支付暂行规定》不定时工作制的，用人单位可以不支付加班工资，即使在法定节假日被安排工作。

问题三：不定时工作制获得许可后能否改变劳动合同的约定？

行政许可是一种授益性行政行为，按照行政法理论，授益性行政行为不具有强制执行力。不定时工作制许可“授益”的范围，只是为用人单位与劳动者对特殊岗位进行“不定时工作制”协商提供了条件，并不能当然地改变合同关于工时制的约定。

而且，根据前述问题一的分析，由其他工时制变更为不定时工时制的，应当与劳动者协商一致并采用书面形式，可见，不定时工时制的许可决定不能改变劳动合同的约定。

问题四：改变标准工时制要与劳动者协商吗？

有些用人单位针对某些工作岗位获得不定时工时制的审批后，没有变更原劳动合同的约定，或者有些用人单位在规章制度中规定了某些工作岗位实行不定时工时制，但是在劳动合同中做相应的变更。这时，对某个具体的员工，他能否以劳动合同没有变更为由主张不定时工时制对自己不适用呢？

笔者认为，根据《劳动合同法》第十七条规定 “工作时间与休息休假” 是劳动合同必备条款，而且按照《劳动合同法》第八条关于用人单位告知义务的规定，用人单位应当就该岗位实行的是不定时工作制的情况对劳动者进行告知，并须与劳动者协商一致，否则，有可能被视为欺诈而导致劳动合同无效。如果劳动关系成立在前，并且已经约定为标准工时制或约定不明确，而后劳动行政部门许可该岗位为不定时工作制，这种情况下，用人单位要改变标准工时制为不定时工作制，属于劳动合同的变更。按照《劳动合同法》第三十五条的规定，用人单位仍然要与劳动者协商，并用书面形式变更劳动合同。如果劳动者不同意变更，只能按照劳动合同约定的条款继续履行劳动合同。

另外，根据《最高人民法院关于审理劳动争议案件适用法律若干问题的解释(二)》第十六条规定，用人单位制定的内部规章制度与集体合同或者劳动合同约定的内容不一致，劳动者请求优先适用合同约定的，人民法院应予支持。因此，即使用人单位的规章制度与集体合同中约定了某工作岗位实行不定时工时制，但是如果劳动合同中约定的时标准工时制或其他工时制的，仍然应当按照原来的约定履行劳动合同。

但是根据目前的司法实践，很多案例中，只要是用人单位取得行政许可的，法院都认定该许可已经变更了劳动合同，按照不定时工作制的规定履行。

问题五：不定时工作制员工是否存在迟到旷工？

案例：

老陈是A科技公司的高级业务经理，在A公司已经10多年，负责业务及客户接待等工作，需要经常外出。早在几年前，A公司为部分岗位包括老陈在内申请了不定时工作制，签订了协议书。2012年1月，集团空降了总经理到A公司，大力整顿A公司，发文要求全体人员（包括不定时的高管人员）从2012年2月起每天按时（9点）上班，而且必须打卡考勤，否则严格按照考勤制度处罚。

老陈并不在意，2012年3月，老陈突然收到公司的处罚通知书，理由是老陈多次迟到、甚至旷工，并明确如再旷工，将立即解除劳动合同。2012年4月，老陈由于无法改变10多年的习惯，多次不打卡，被A公司以“多次迟到，多次旷工”为由解除劳动合同。老陈不服，遂申请劳动仲裁。

问题：A公司解除老陈劳动关系合理吗？你的理由是什么？

评析：

根据劳动部《关于企业实行不定时工作制和综合计算工时工作制的审批办法》第四条规定：“企业对符合下列条件之一的职工，可以实行不定时工作制：

（一）企业中的高级管理人员、外勤人员、推销人员、部分值班人员和其他因工作无法按标准工作时间衡量的职工”

法律法规规定，经批准实行不定时工作制的职工，是不受平时工作日延长工作时间标准和月度延长工作时间标准的限制；即不存在加班加点之说法。

不定时工作制的本质是，员工的累计的工作量大概也是每天8小时左右，只是其工作很难在一段固定的连续的时间内完成，其工作往往是分阶段、分时段完成的；员工很可能在早上、下午、晚上、深夜都需要工作或在此等部分时间段内工作。如果劳动者有充分证据证明其工作时间客观上确实明显超出8小时，且此状态是经常性的，那么用人单位还是存在支付加班费的风险（可能被认定为以合法形式掩盖非法目的）！

实行不定时工作制的单位，往往不要求员工登记考勤。如果一定要求“不定时工作制”的员工进行考勤登记，那么应该在其出勤、工作的时候登记；而不应该要求其跟普通员工一样“朝九晚五”标准式地登记。否则，这些员工白天可能没有工作任务，而晚上去工作的时候他们将可能要求加班费。这样反而对用人单位很不利！

本案中，老陈的岗位实行了不定时工时制，不应参照标准工时进行打卡考勤。用人单位后面发文要求按标准工时去打卡，此做法未必对老陈有效，因为用人单位的单方行为未必能对抗双方的约定《劳动争议司法解释

（二）第十六条》。假设内部发文具有法律效力，且老陈日后执行该做法，那么将来老陈就有机会索赔加班费，因为其工作性质决定了老陈肯定存在加班的状态！用人单位应衡量得失利弊！

问题六：不定时工作制就是可以随意“加班”吗？

【案例】： 今年54岁的老金是某钢板加工公司的专职驾驶员。2007年9月28日，公司向劳保局提出申请，要求对单位的6名驾驶员实行不定时工作制，申请期从同年10月1日至2008年9月30日。第二天，劳保局作出批复，同意公司对老金在内的6名驾驶员实行不定时工作制，有效期为1年，周一到周五7： 00－19： 00，以外算作加班时间。同时要求公司对于实行该制度的员工，应在保障身体健康的基础上，采用适当的工作和休息方式，确保员工休息休假的权利。为此，钢板加工公司要求司机老金等人早上7点上班，晚上7点下班。

对于公司的决定，老金却不认可。他认为，公司采取的每天工作12小时不定时工作制违法。双方就此发生争议，2008年12月16日，老金将同意公司实行不定时工作制的劳保局告上法庭，要求撤销其对第三人某钢板加工公司作出批复的具体行政行为。

在庭审中，被告劳保局表示，自2002年9月起，某钢板加工公司就驾驶员岗位每年向劳保局申请不定时工作制，并经审批同意。原告在2006年时确认公司对其等成功申请了不定时工作制，每位驾驶员须按照这个规章制度工作，周一到周五7： 00－19： 00，以外算作加班时间。所以，劳动部门作出的批复具体行政行为合法，事实清楚，适用法律正确。

第三人某钢板加工公司认为，原告老金起诉超过诉讼时效，他在进入公司时就已知道工作岗位的特殊，是实行不定时工作制的，如有异议，也早应提起诉讼，现原告对已经执行完毕、已失效的具体行政行为起诉，显然不合理。另外，公司对老金从来没有实行考勤制度，原告所称每天工作12小时没有事实根据，公司定7点至19点为上班时间，是为了在此时间段外便于计算加班费。法院审理后认为，根据相关规定，企业实行不定时工作制和综合计算工时工作制的，应向注册地的区县劳动和社会保障局提出申请，因生产特点、工作特殊需要或职责范围的关系，适合实行不定时工作制的职工，企业可以实行不定时工作制。

司机老金等人从事驾驶员岗位，工作性质具有一定的特殊性，公司据此向劳保局申请对驾驶员实行不定时工作制，符合规定。劳保局在2007年9月28日受理原告老金的申请后，进行了审核，并于次日作出批复，同意公司对驾驶员实行不定时工作制，并强调该公司对于实行不定时工作制的员工，在保障其身体健康的基础上，采用适当的工作方式和休息方式，确保员工的休息休假的权利，该具体行政行为并无不当。另外，行政机关作出具体行政行为时，未告知公民、法人或者其他组织诉权或起诉期限，起诉期限从公民、法人或者其他组织知道或者应当知道诉权或者起诉期限之日起计算，但从知道或者应当知道具体行政行为内容之日起最长不得超过2年。故原告老金的起诉未超过法定期限。至于某钢板加工公司对原告等实行不定时工作制的员工是否采用了适当的工作方式和休息方式，是第三人对不定时工作制的执行问题，不属于本案审理范围。据此，鉴于诉争批复目前已自行失效，法院依法作出判决：驳回司机老金的诉讼请求。争议焦点。劳保局的批准行为是否合法，认定事实是否清楚，适用法律是否正确。

【评析】：

1、对司机老金能否实行不定时工时制？

根据原劳动部《关于企业实行不定时工作制和综合计算工时工作制的审批办法》（劳部发[1994]503号）的规定,企业中的下列三类职工经劳动行政部门审批，可以实行不定时工作制：（1）企业中的高级管理人员、外勤人员、推销人员、部分值班人员和其他因工作无法按标准工作时间衡量的职工；（2）企业中的长途运输人员、出租汽车司机和铁路、港口、仓库的部分装卸人员以及因工作性质特殊,需机动作业的职工；（3）其他因生产特点、工作特殊需要或职责范围的关系,适合实行不定时工作制的职工。根据上述分析，是可以对司机老金实行不定时工时制的。

2、不定时工时制可以要求随意“加班”吗？

《宪法》第四十三条规定：“中华人民共和国劳动者有休息的权利。国家发展劳动者休息和休养的设施，规定职工的工作时间和休假制度。”

根据原劳动部《关于企业实行不定时工作制和综合计算工时工作制的审批办法》第六条规定：“对于实行不定时工作制和综合计算工时工作制等其他工作和休息办法的职工，企业应根据《中华人民共和国劳动法》第一章、第四章有关规定，在保障职工身体健康并充分听取职工意见的基础上，采用集中工作、集中休息、轮休调休、弹性工作时间等适当方式，确保职工的休息休假权利和生产、工作任务的完成。”因此，不定时工时制的员工，也有休息休假的权利，只是其休息是集中进行或者轮休调休、弹性工作时间等方式进行的而已，并非可以让他们任意加班。对此，有些地方性规定也有规定，例如《深圳市实行不定时工作制和综合计算工时工作制审批管理工作试行办法》第七条规定：“用人单位应当根据标准工时制度，合理确定实行不定时工作制员工的劳动定额，建立健全考勤制度，规范劳动用工，保障员工休息权。”

可见，休息休假是劳动者的法定权利，对不定时工时制的员工，用人单位也必须采取弹性工作时间等适当的工作和休息方式,确保职工的休息休假权利。

问题七：违法实行不定时工时制需要承担什么法律责任？

对此，《劳动保障监察条例》第25条规定：劳动保障部门可以对违反法律、法规延长工作时间的单位警告、责令限期改正，并可以按照受侵害的劳动者每人100~500元的标准处以罚款。

问题八：不定时工时制的工作岗位是否都必须经过审批？

对此，有些地方有不同的规定，例如《深圳市实行不定时工作制和综合计算工时工作制审批管理工作试行办法》第十五条规定，用人单位中符合《公司法》规定的高级管理人员实行不定时工作制的，不需办理审批手续。因此，在深圳，对总经理、财务负责人、董事会秘书和公司章程规定的其他高级管理人员，可以不办理不定时工时制的审批手续实行不定时工时制。

应对措施：

1.用人单位应担保障劳动者的休息休假权。

在不影响劳动者身心健康的情况下，企业由于生产经营需要而要求职工加班加点是法律允许的，但是必须符合法定的条件。

2.必须经过劳动行政部门的批准。

非因地方规定，实行不定时工作制不能由用人单位单方决定，也不能仅仅由双方在劳动合同约定，只有经过劳动行政部门审批才合法。

3、在劳动合同中注明 为避免争议，如果经过劳动行政部门审批同意的，建议用人单位在劳动合同中明确注明实行不定时工时制。

【作者简介】

段海宇，劳动法专家，毕业于华侨大学。

著有《人力资源全流程法律风险管理手册》、《人力资源法律风险管控操作实务》和《劳资法律风险管理手册》（电子书）等著作，当当网有售。

第四篇：压力容器中图纸常见错误分析

压力容器审图中图纸常见错误分析

（反应釜）

1． 压力容器类别错误，主要未按多腔容器划类原则进行。

例如：有一符合监察条件的反应釜，内筒最高工作压力为0.052MPa(400mmHg),最高工作温度：120℃，介质：易燃、易爆、中度危害。夹套：最高工作压力为0.6MPa(表压)，最高工作温度165℃，介质：饱和水蒸汽。定出容器类别：一类。内筒实际上不成类别，只需按夹套来确定类别。

2． 由于类别的错误，带来一系列的错误，如：无损检测的比例、焊接接头系数等错误。3． 技术特性表中主要受压元件材质缺少或者是少装量系数、操作容积等数据。

4． 内筒与夹套焊接，异种金属（如碳钢与不锈钢焊接）未采用高铬镍焊条，仅采用普通

不锈钢焊条，如：A102。

二、三压力容器不要用酸性焊条和酸性焊剂。5． 技术要求中锻件级别不正确，出现Ⅰ级锻件。6． 立式反应釜水压试验时，注明是卧试，应为立试。

7． 水压试验时，内筒为不锈钢材料未在技术要求中说明控制水中的氯离子含量不超过

25mg/l。

8． 技术要求中关于搅拌试运转未按照HG/T20569-1994执行。9． 水压试验时，轴封处泄漏量的数据不正确。

10．内筒介质为易燃、易爆特性，轴封形式采用填料密封，未采用机械密封。11． 设备法兰的公称压力等级错误，密封面形式错误。12． 设备法兰的紧固件选用错误。（螺栓、螺母、垫片）13． 管法兰的公称压力等级错误，密封面形式错误。14． 管法兰的紧固件选用错误。（螺栓、螺母、垫片）

15． 技术要求中缺少设备法兰与内筒焊接C缝的无损检测要求。

16． 技术要求中设备法兰与内筒焊接C缝的无损检测方法不正确，如奥氏体焊缝采用MT，应该为PT。

17． 介质为易燃、易爆的，未注明防爆电机和设备静电接地的要求。18． 夹套上端缺少直径不小于10mm的排气口。19． 管口方位图上少定位尺寸或定位角度。

20． 夹套与内筒焊接节点图标注不全面，扳边圆弧太小。21． 缺少非径向焊接节点图。

22． 不等厚对接焊接节点图削边长度不够，CS、LAN为1：3；SS为1：4或1：5。23． 温度计接管的长度太短，插不到液面以下。24． 水压试验、气密性试验的试压步骤不正确。25． 悬臂轴应注明轴端到底封头的距离。

26． 带保温层的立式反应釜耳座选了A型，未采用B型。27． 夹套进蒸汽口未设置防冲扳。

28． 导流板设置结构不合理，导致制造困难。29． 底部接管不合理，开挡太小。

30． 技术要求中不锈钢钢板未注明应按压力容器用钢板交货。

31． 视镜在管口方位图上位置有误，应错开一个角度，不能在一直线上。32． 管口在同一圆周上分布得太多了，强度削弱太多 33． 单垮轴的反应釜结构不合理，未设置人孔。

压力容器审图中图纸常见错误

（换热器）

1． 压力容器类别搞错，特别是有一腔的设计压力已是1.6MPa，还是定为一类，应该为二类。2． 管板本身具有凸肩与圆筒（或封头）对接连接时，没有采用锻件，采用了板材。3． 管板采用锻件时，级别不正确。4． 管程、壳程的进出口温度调反。

5． 水压试验的压力不正确，管程与壳程对调了。6． 结构上未设置放气口或排液口。

7． F型、S型位置安放错误，应对调，并注意是热膨胀型还是冷收缩型的长圆形孔的位置。8． 鞍座安放尺寸不正确，未按照GB151-1999P87执行。9． CS、LAN制的焊有分程隔板的管箱未提出热处理要求，并且密封面应在热处理以后进行机加工。10． 设备法兰的公称压力等级不正确，紧固件选用不合理，密封面形式不对。11． 管法兰的公称压力等级不正确，密封面形式不对，紧固件选用不合理。12． 折流板缺口的方向不正确。13． 折流板间距不正确，太大，不符合最大无支撑跨距要求。14． 图纸上有非径向接管，但无非径向焊接节点图。15． 管板固定端未远离圆筒焊有防冲板的接管端，圆筒组装困难。16． 图样上进出口与管口表不一致，介质没有按逆向进出。17． 甲型法兰或乙型法兰与圆筒组焊的C 缝没有提无损检测的要求。18． 采用乙型法兰时，未设置法兰短节。19． 乙型法兰短节与圆筒不等厚焊接未按JB/T4700—2000要求进行削边处理。20． 采用长颈对焊法兰时，法兰与圆筒不等厚焊接未按JB/T4700—2000要求进行处理。21． 对长颈对焊法兰，应注意：当工作压力大于或等于0.8倍标准中规定的最大允许工作压力时，法兰与圆筒的对接焊缝必须进行100％的RT或UT，合格级别为RTⅡ级、UTⅠ级。22． 不锈钢换热器水压试验时，技术要求中没有提水质要求，控制水中的氯离子含量不超过25mg/l。

对带衬环的法兰（不锈钢与碳钢、低合金钢之间的焊接）焊接材料用错，未采用高铬镍焊条。23． 技术数据栏中可能会少一部分数据，如：管束级别等。而且级别可能搞错。24． 技术要求中缺少部分内容，如材料的标准等，特别时是有关换热管的有关内容。25． 当管程试验压力高于壳程试验压力时，接头试压在图样上未作要求。26． 设备法兰应注意螺栓的跨中问题，图样上可能没有跨中。27． 圆筒厚度未满足换热器规定的最小厚度。28． 分程隔板的厚度未满足最小厚度的要求。

U形管换热器应注意U形管的弯曲半径不小于两倍的换热管外径，并注意防短路结构。29． 管束能抽出来的换热器应设置防松支耳。30． 重量超过30Kg的管箱最好设置吊耳。31． 立式换热器如有膨胀节应注意它与耳座的位置。32． 壳程进口处没有按标准设置防冲装置。33． 管板与换热管焊接节点图中，换热管的厚度与标准中的厚度不一致时，未调整焊接坡口深度。34． 在图纸上应注意尺寸标注是否齐全，管口定位尺寸是否齐全。

第五篇：食品中常见毒素的化学性质和检测方法

食品中常见毒素和几种典型毒素的性质和检测方法

07应用化学，2007055079黎健豪

（暨南大学生命科学技术学院，广州 510632）

摘 要 本文综述了食品中常见毒素的化学性质和化学的检测方法，重点讨论了河豚毒素，黄曲霉毒素和肉毒毒素的化学性质和检测方法。

关键词： 食品检测

霉菌毒素 河豚毒素 肉毒毒素 Keyword：food detecting

tetrodotoxin

aflatoxin

botulism neurotoxins

在日常生活中，我们每天都会接触到由不同公司，不同地方生产的食品。但在近几年，国内经常出现食品质量问题。五年前，肯德基的鸡翅被发现加入了工业染料苏丹红。随后，问题咸蛋又发现含有工业染料苏丹红。不法商人用 “瘦肉精”喂养猪只，令食用的猪肉里含有对人体心脏有害的“瘦肉精”。市场用孔雀石绿养鱼，令鱼类中含有有害物质孔雀石绿。去年，又发现三鹿奶粉中非法添加有害物质三聚氰胺。

食品安全不但发生在国内，而且在我们身边也经常发生。2007年暨南大学珠海学院就发生了一起严重的食物中毒事件，不少师生感到身体不适。学生因为进食不干净食物发生肠胃炎的事件时有发生。质量不安全食品也在市场上泛滥。因此，食品质量问题不得不引起人们关注。

本文结合自己专业所学的化学知识和《身边毒物的认识与应对》 《食品分析》《文献检索与利用》的相关信息和技能，介绍了食品中常见毒素同时详细介绍了几种典型毒素的化学性质和检测方法。食品中常见毒素

食品中常见毒素有霉菌毒素，动物性天然毒素和植物性天然毒素。其中 食品中常见的霉菌毒素有黄曲霉毒素，展青霉毒素，单端孢霉烯族化合物，玉米赤霉烯酮，杂色曲霉素，棒曲霉素，岛青霉毒素和其他霉菌毒素。常见的动物性天然毒素有动物肝脏中的毒素，河豚毒素，岩蛤毒素，螺累毒素和组胺。常见的植物性天然毒素有氰苷，红细胞凝集素，皂苷，龙葵碱，秋水仙碱，棉酚和毒蘑菇。

2霉菌毒素——黄曲霉毒素的性质与检测方法

黄曲霉毒素是黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(A.parasiticus)等的代谢产物,主要存在于霉变的花生、谷物、果仁和大米等食物中,食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。它是由黄曲霉和寄生曲霉代谢产生的一组化学结构类似、致毒基团相同的化合物,目前已分离鉴定出18 种,主要是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 以及由B1 和B2 在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1、M2 等,B1 为毒性及致癌性最强的物质。B1 是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物,即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素),前者为基本毒性结构,后者与致癌有关。黄曲霉毒素对人类健康的危害主要是由于人们食用被黄曲霉毒素污染的食物,途径有二,其一是由受黄曲霉毒素(主要为B1)污染的植物性食物摄入,其二是经饲料而进入奶或乳制品(包括乳酪、奶粉等)的黄曲霉毒素(主要为M1)。黄曲霉毒素B1 的半数致死量为0.36 mg/ kg 体重,属特剧毒的毒物范围(动物半数致死量10 mg/ kg ,它的毒性比氰化钾大10 倍,比砒霜大68 倍),它引起人的中毒主要是损害肝脏,发生肝炎、肝硬化、肝坏死等。因此，黄曲霉素的检测方法在食品检测中极为重要。

2.1检测方法

国内外有关黄曲霉素B1 的检测方法主要有:薄层色谱法、酶联免疫测定法、高效液相色谱法和荧光光度法。试验采用了免疫亲和柱对饲料中黄曲霉素B1 进

行净化,对高效液相色谱荧光检测方法进行了研究,为监控饲料中黄曲霉素B1 提供了简便可行的方法。

2.1.1薄层色谱法(TLC)

薄层色谱法(TLC)是传统的检测AFB1 最常用方法,是应用最早、最广的分离、分析技术,曾是我国测定食品及饲料中AFB1 的国家标准方法之一。此法所用的试剂、设备简单,费用低廉,容易掌握,适用大量样品的分离、筛选,一般的实验室均可开展,属于定性和半定量的功能。灵敏度低、重现差、操作烦琐、时间长且安全性差等缺点,已越来越不适用现代分析的要求。

2.1.2高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法(HPLC)具有高效、快速、准确性好、灵敏度高、重现性好、检测限低、定量准确的特点,可同时分离多种黄曲霉毒素,操作简便,适于大批量样品的分析。高效液相色谱法是目前国内测定黄曲霉毒素使用最多、也是比较权威的方法,灵敏度高、精度高、能同时分析多种黄曲霉毒素类型,但该法的样品前处理相对复杂,检测周期长、程序复杂、所需试剂繁多、操作时需要专门的技术人员,难以满足现代检测。其中免疫亲和色谱-高效液相色谱法(HPLC)测定饲料中黄曲霉素B1 ,采用甲醇-水提取饲料中的黄曲霉素B1 ,用免疫亲和色谱柱净化,以甲醇和水为流动相,反相高效液相色谱荧光检测法进行测定,激发波长为365 nm ,发射波长为435 nm。方法的检测限为0.01μg/ kg ,定量限为0.03μg/ kg ,平均回收率为77.5 % ,变异系数为0.03 %。此法适宜用于普通实验室检测食品中的黄曲霉素。物性天然毒素——河豚毒素的性质与检测方法

河豚毒素的化学研究始于1909 年, 1964 年以后由Woodward 测定了TTX 的结构, 1972 年Kishi 等采用化学方法成功合成了河豚毒素。河豚毒素分子式为C11H17N3O8, 分子量为319.27。分子主要由3 个氮原子组成, 它们与氢氧原子形成特殊的结构。其结构特征, 含有1 个碳环, 1 个胍基, 6 个羟基, 在C—5 和C

—10位有一个半醛糖内酯连接着分开的环。有专家将其称为“自然界最奇特的分子之一”, 也是世界上最致命的毒药之一。1 g 河豚毒素的毒性是1 g 氰化物的1 万倍。

TTX 粗制品为棕黄色粉末, 纯品为无色晶体, 呈针状或菱形, 无臭, 无味, 易吸湿潮解, 不溶于无水乙醇、乙醚、苯等有机溶剂, 微溶于水, 极易溶于稀酸水溶液。TTX 在溶液中存在TTX、半缩醛型TTX、内酯型TTX动态平衡的三种结构。TTX 理化性质比较稳定, 在中性和酸性条件下对热稳定, 240℃开始碳化, 但300 ℃以上也不分解。在碱水溶液中易分解, 在5%氢氧化钾溶液中于80 ℃～100 ℃可分解成黄色结晶2-氨基-6-羟甲基-8-羟基-喹唑啉, 这也是TTX 化学检测法的理论。

3.1检测方法

河豚毒素的检测方法主要有生物检测法，仪器检测法和免疫检测法。以下主要介绍仪器检测发。

3.1.1光分析发

仪器检测发有荧光光度法和色谱法荧光检测法[9]是早期的检测方法之一，主要是利用TTX 加碱水解后生成2-氨基-6-羟甲基-8-羟基喹唑啉(简称C9 碱), 该物质在特定波长发荧光, 从而可进行检测。由于河豚毒素在紫外区间吸收很少, 使其紫外检测受到限制, 所以紫外分光光度法采用TTX 在生成C9 碱的同时定量生成草酸钠, 草酸钠在紫外区有明显吸收, 从而间接定量TTX。此法操作简便,但灵敏度低,专一性差。

3.1.2色谱法

另外一种较常用的方法就是色谱法。有关高效液相色谱(HPLC)用于定量检测TTX 的报道很多, 大多采用反相色谱, 用硅胶柱作固定相。张虹等建立了反相离子对-高效液相色谱法测定河豚毒素含量的方法。选用SHIM ADZU ODS 色谱柱(150×6 mm 5 μm), 以0.2 %(v/v)醋酸液为流动相,流速为1.2 mL/min, 检测波长为230 nm。河豚毒素线性范围20 μg/mL~100 μg/mL, r=0.996 0(n=5): 回收率为93.32 %, 最低检测限50 ng。色谱法由于具有简单、快速等特点, 再加上高灵敏度的检测器成为众多检测方法中主要的方法, 但它要求检测样品的纯度比较高。

4细菌毒素———肉毒杆菌毒素和金黄色葡萄球菌肠毒素的性质与检测方法

肉毒毒素(botulism neurotoxins,BoNTs)是肉毒梭菌产生的一种外毒素,属于高分子量蛋白质类神经毒素。根据肉毒毒素抗原不同,将其分为A～G 7个亚型。A型肉毒杆菌由毒性和非毒性蛋白两部分组成,可高度特异地与突触前膜结合,阻滞神经兴奋传递。BoNT/A的LD50为1.2 ng/kg,是迄今为止发现的生物毒素中毒性最强的物质。在弱酸条件下, 150 kDa毒性亚基以非共价键方式与非毒性亚基结合成复合物以保持其生物活性。温度40 ℃以上,尤其在碱性条件下,A型肉毒杆菌毒素迅速变性。黄金色葡萄球菌肠毒素(staphylococcus aureus enterotoxin, SE)是金黄色葡萄球菌产生的数种可引起急性胃肠炎的蛋白质类肠毒素,分子量约为26～30 kDa。根据血清学特征不同分为A～J 10个毒素血清型,其中A型毒力最强。肠毒素通过刺激中枢神经系统引起中毒反应,小鼠LD50为25μg/kg。肠毒素易溶于水和盐溶液,对热稳定, pH耐受范围较宽(pH 4～10),不易被蛋白水解酶和消化酶降解。一株金葡菌产毒株能产生一种或两种以上亚型的肠毒素,故肠毒素的型别不能代表细菌的型别。

4.1检测方法

进来常用的检测方法有: 质谱法,荧光分析法 ,免疫测定法，PCR检测法（基于SYBR Green染料的实时PCR检测技术）。以下介绍质谱法和荧光分析法。

4.1.1质谱法

Endopep2MS是基于肽链内切酶的质谱方法,可分辨肉毒毒素的不同亚型并测定其活性。该方法将抗体亲和反应与生物质谱有机结合起来, 血清样品中的LOD 为: 肉毒毒素A:0.02 mouse LD50 /L,B: 0.001 mouse LD50 /L, E: 2 ×1024 mouse LD50 /L, F: 0.001 mouse LD50 /L。该方法与EL ISA相比灵敏度更高,且不易出现假阳性结果。应用LC2ESI2MS/MS检测SEB不仅可以精确测定分子量,还可对SEB酶切后的肽段进行氨基酸序列分析,近年来开发的micro2ESI2TOF2MS具有更小的柱内径,对SEB的分析时间可显著缩短至30 min,LOD降至约0.8μg/L(水)。

4.1.2荧光分析法

Anne等利用BoNT/B的蛋白水解酶活性实现对BoNT/B的检测,该方法以人突

触囊泡蛋白21的60～94部分的片段作为底物,用L 2芘基丙氨酸和荧光淬灭基团(p2硝基苯丙氨酸)分别修饰74和77位点。肉毒毒素的活性链可选择性地将突触囊泡蛋白在76～77位点间切断,去除77位点上修饰的荧光猝灭基团,再通过检测60～76位点间发出的强荧光进行直接定量检测。该方法可检测3.5 ng/L的肉毒毒素B。

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