1091例手术中冰冻切片病理诊断准确性分析

第一篇：1091例手术中冰冻切片病理诊断准确性分析

内容摘要： 作者：张剑虹 成日青 林媛媛 赵秀芳 张凡 刘军超 张九鸿

作者：张剑虹 成日青 林媛媛 赵秀芳 张凡 刘军超 张九鸿

【关键词】 冰冻切片;病理诊断;准确性

随着临床医学手术水平的不断提高，手术中要求送检冰冻病理切片快速诊断的病例日益增多，临床手术医师对病理报告的依赖性也逐渐增加，快速病理冰冻诊断已成为指导临床手术医师确诊和制订合理手术方案的必需手段之一。然而手术中冰冻切片病理诊断受到很多因素的制约，准确性很难达到与常规石蜡切片相一致的效果。为此我们收集我院病理科近两年的冰冻切片资料1091例，分析探讨冰冻切片诊断价值和准确性及其影响因素，旨在不断提高手术中病理诊断质量，从而降低医疗事故隐患。1 材料与方法

选取我院2003.1～2005.12月的冰冻切片资料1091例，为防止制成的冰冻切片镜下组织形态发生改变，送检标本要求用干纱布包裹或置于不加任何液体的洁净容器内及时送达病理科，病理医师详细检查大体标本后取肉眼确认病变最明显区域1～2块组织，迅速置全自动恒冷切片机（英国产shandn as 620e型）上制作切片。每个组织块切取两张切片，厚4μm，经酒精固定，he染色，普通光镜（olympus bx51）下观察，并经2～3名医师阅片后集体讨论确诊；如送检组织不合格（凝血块、坏死渗出物等），立即请手术医师第二次取材送检，冰冻残余组织做常规石蜡切片，并与另外多处取材石蜡切片对照分析。2 结果

1091例冰冻组织分布在12个系统及组织，如女性生殖系统485例，占总例数44.4%，乳腺病变364例，占33.3%，甲状腺58例，占5.3%，消化系统52例，占4.7%等。送检最活跃的科室为妇科、产科，其次为普外科等，见表1。表1 1091例冰冻标本在各系统分布情况石蜡证实良性病变775例，其中771例冰冻符合，冰冻准确率96.9%；石蜡证实恶性病变286例，冰冻报告恶性281例，冰冻准确率97.6%；石蜡证实交界性病变29例，冰冻报告交界性24例，冰冻准确率82.8%。1091例冰冻标本中，与石蜡切片报告相符的为1056例，冰冻切片总的诊断准确率为96.8%，误诊14例，误诊率为0.13%，见表2。表2 1091例冰冻与石蜡切片诊断结果比较

讨论

3.1 冰冻切片病理诊断病变的价值 冰冻在外科手术中应用广泛，术中冰冻可使外科医生在手术中知晓病变性质（良性、交界性、恶性），从而决定适当的手术方案。自1960年cryostat冷冻切片机在临床病理应用以来，随着病理技术人员素质的提高和切片设备的更新换代，冷冻切片质量与石蜡切片已相差无几，使病理医师对手术中冰冻切片诊断准确率不断提高。我院近年内投资进口大型衡冷柜式切片机，为冰冻切片的准确性提供了必要的保障。所以目前冰冻切片为临床快速确定诊断和决定手术范围的一个重要依据，主要应用价值体现在：1.决定病变的性质，要求病理医师在最短的时间内确定送检组织是肿瘤或是非肿瘤性病变，如为肿瘤则需再确定良性或恶性，因病变不典型而不能确定良性、恶性病变时，则提一个考虑性或倾向性意见供临床考虑，或待石蜡切片再定。2.确定切除肿瘤的边缘是否残留肿瘤组织。我们遇到最多的是乳腺癌手术实施保乳治疗时的上、下、左、右及基底五个切缘，如切缘发现癌组织，则需扩大切除范围，此时冰冻切片结果对临床手术范围起到了决定性作用。3.辨认组织，如先天性巨结肠须证实手术切缘的肠壁内是否有肌间神经节细胞存在，如未见神经节细胞则须再切肠管,直至查见肌间神经节细胞为止。4.确定淋巴结有无癌转移，手术医师取局部淋巴结确定有无癌转移以决定手术方案，对于存在淋巴结隐性癌转移的病理尤其必要。5.头面部恶性肿瘤手术确定切缘有无肿瘤组织残留对于清扫范围和扩大切除的方向关系重大，因为头面部血管、神经丰富，微小的损伤都会使面容受到影响，因此手术中需要多个方向取组织，确定有无肿瘤残留。冰冻切片诊断可预防手术切除过度或不足，有的也可避免不必要的二次手术。有报道冰冻切片准确率为94%～97%[1,2]，本组资料为96.8%，与 文献 报道基本相符合。

第二篇：手术中冰冻切片病理检查志愿书

接受手术中冰冻切片病理检查志愿书

门诊、住院科 室ID号住院号

姓名年龄性别职别单位

手术中冰冻切片病理检查是将切下的病变组织在冰冻切片机中迅速冷冻后制成病理切片，由病理医师即刻在显微镜下检查，做出病现诊断，主要目的是：（1）帮助判断病变的性质。如：炎症、肿瘤或其它性质的病变；如果是肿瘤，则需进一步判断是良性还是恶性肿瘤。（2）帮助判断切除肿瘤组织的边缘是否有残留的癌组织。（3）帮助辨认手术切除组织。

（4）判断手术切除的淋巴结中有无转移的癌细胞。冰冻切片病理诊断结果作为术中会诊意见提供给临床医生，临床医生将其作为重要的参考依据决定进一步手术的方式和范围。与常规石蜡包埋切片相比，冰冻切片诊断的局限性是：（1）冰冻切片质量较差，诊断准确率低于常规石蜡切片。（2）在做冰冻切片采取活检组织时，有造成肿瘤种植的可能，特别是在甲状腺和肺等实质器官。（3）术中冰冻切片技术不适用于脂肪组织和骨组织。（4）某些疑难病例和交界性病例有时在石蜡切片诊断都很困难，需要做免疫组化和电镜观察，仅凭冰冻切片难以确定诊断，因而要延缓病理诊断。（5）冰冻切片取材局限，有时局部的组织不能代表整个标本。因此，有的病例冰冻切片组织象和手术切除大标本的石蜡切片组织象相差很远，甚至造成假阴性诊断。（6）病变组织在冷冻过程中不可避免地形成冰晶，以及组织处理和诊断时间紧迫等技术因素所限，“冰冻”诊断的准确率有一定的局限性，有可能与最终的“常规”病理切片诊断不相符合，最后病理诊断应以“常规病理诊断为准”。

医师签名：年月日

我已仔细阅读并了解上述关于“冰冻”切片病理诊断的作用及其局限性，同意对实施手术中切除的病变组织进行冰冻切片快速病理检查。

患者本人签字：

代表签字：（与患者关系：）

年月日

注：本志愿书除不能明辨是非、不能正确表达的伤病员可由法定代理人签字外，均由伤病员本人签字

第三篇：卵巢肿瘤术中快速冰冻切片病理诊断分析

卵巢肿瘤术中快速冰冻切片病理诊断分析

【摘要】 目的 探讨卵巢肿瘤术中快速冰冻切片的诊断价值，总结经验。方法 本次收集85例卵巢肿瘤患者作为研究对象，均为本院2009年3月～2013年9月收治，术中进行快速冰冻切片病理诊断，并与术后常规石蜡切片进行对照。结果 本组85例患者快速冰冻切片与术后石蜡切片对照，总确诊率为95.3%（81/85）。其中良性肿瘤确诊率为100%（58/58），交界性肿瘤确诊率为80%（8/10），恶性肿瘤确诊率为88%（15/17）。误诊4例，误诊率为4.7%。结论 病理医生与临床医生在术前及术中密切沟通，从实验室检查结果、病史、手术观察等多方面分析，最终做出诊断，为临床医师提供卵巢肿瘤性质，有助于临床医师选择适宜的手术方式，应用快速冰冻切片病理诊断的方法是确定手术方式和切除范围的最佳手段。

【关键词】 卵巢肿瘤；快速冰冻切片；病理诊断；准确性

卵巢肿瘤种类繁多，可分为良性、恶性、交界性肿瘤，在妇科常见疾病类型占较高病发率，术前不易确诊，妇产科医生在手术中如仅凭肉眼观察，难以确定肿瘤性质。因肿瘤性质不同，在治疗方案的选择上也存在较大差异。所以手术过程中确定肿瘤性质及制定合理的手术治疗方案所进行的行快速冰冻切片病理诊断是完全必要的，更是对生育机能是否保留对侧卵巢及手术范围的选择具有决定性作用[1]。作者就本院病理科2009年3月～2013年9月卵巢病变术中快速冰冻切片病理诊断进行回顾性分析，旨在提高卵巢肿瘤冰冻切片病理诊断的准确性。资料与方法

1.1 一般资料 本次共选择研究对象85例，年龄16～77岁，平均年龄（38.4±3.1）岁。均与WHO卵巢肿瘤组织学制定的相关分类标准符合，其中良性58例，交界性10例，恶性17例。术后均行常规石蜡切片病理诊断，与术中快速冰冻切片病理诊断对照。

1.2 方法 标本均为术中送检新鲜组织，由经验丰富的病理医师取材，术中仔细观察肿物表面并逐层切开肿物，选代表性的部位取材，肿块病变直径2.5 cm的肿块根据肿瘤情况酌取2～3块，置标本于涂有OCT包埋剂的冻头上，恒温冷冻切片机内冰冻切片，HE染色、光镜诊断。20 min发出冰冻报告，报告分为恶性肿瘤、良性肿瘤、交界性肿瘤及延迟诊断。冰冻报告发出后，将原冰冻剩余组织做石蜡切片，复习原冰冻切片及石蜡切片，将诊断分为三类：①确诊：指冰冻切片诊断与石蜡切片诊断完全相同或良恶性原则一致。②描述性诊断（延迟诊断）：指冰冻切片不能明确诊断，需待石蜡切片最后诊断。③误诊：肿瘤良恶性诊断错误。分假阳性和假阴性（假阳性指良性误诊为恶性，假阴性指恶性误诊为良性）。结果

本组85例患者快速冰冻切片与术后石蜡切片诊断结果对照，总确诊率为95.3%（81/85）。其中良性肿瘤确诊率为100%（58/58）；交界性肿瘤确诊率为80%（8/10），恶性肿瘤确诊率为88%（15/17）。误诊4例，误诊率4.7%，85例冰冻切片确诊81例，诊断符合率95.3%，见表1。2例交界性肿瘤的误诊原因，1例由于为取材不当，另1例由于制片不良，加上读片经验不足，未考虑由于制片不良导致的假象及干扰因素；而2例恶性肿瘤的误诊原因，1例由于取材的局限性，送检标本的体积大，取材不够准确及不够全面，局部癌变的区域未被发现；另1例为送检组织过少，加上患者年龄年轻，诊断时过于保守。讨论

从临床治疗的角度，术中冰冻切片病理诊断解决了手术过程中难以诊断其疾病良、恶性的问题。近年来，经济体制改革的迅猛发展显著带动了医疗科技水平，公众对诊疗服务要求不断提高，妇科卵巢肿瘤患者在临床具有一定特殊性，及时明确诊断，并制定有效治疗方案是保障预后，提高患者生存质量，维护家庭和谐和社会安宁的关键。卵巢肿瘤种类繁多，临床无法确诊。卵巢肿瘤患者的治疗中，手术治疗是最常用的也是最重要的治疗方法。而即使辅以B超，CT等检查，卵巢肿瘤在术前不易确诊，手术医生凭其肉眼也无法判定肿瘤性质。而术中快速冰冻切片作为一项快速组织学诊断手段，在临床已普遍应用。术中冰冻可以为妇科医生在手术中提供病变性质（良性、交界性、恶性），从而决定适当的手术方案。冰冻切片诊断可预防手术切除过度或不足，有的也可避免不必要的二次手术。

本次研究以快速冰冻切片在卵巢肿瘤临床诊断中的应用价值为重点，选取相关病例展开探讨，结合本次选取患者年龄结构示，平均年龄（38.4±3.1）岁，提示处于生育期、有活跃且旺盛生育功能的女性为卵巢肿瘤高发人群，与相关研究[3，4]结论一致。分析实验结果，得出卵巢肿瘤采用快速冰冻切片诊断准确性居较高水平，确诊率为95.3%，与文献报道冰冻切片诊断肿瘤的准确率为94%～97%[2]接近。熟练掌握WHO卵巢肿瘤分类是具备开展快速冰冻切片诊断的病理医生的基本要求。较高的确诊率是临床制定恰当的治疗方案的可靠保证。

提高快速冰冻切片诊断卵巢肿瘤的准确率在于以下几个方面：①在手术前对卵巢肿瘤患者的CT、B超等常规检查结果和各种临床表现等方面病史及肿瘤分布情况进行详细掌握，并且在手术过程中及时和临床医师进行沟通；②对送检的冰冻标本要认真仔细的检查确定病变部位和器官，要查看标本的完整性，有无包膜，包膜破损否，与周围组织有无粘连，切面为囊性、实性，还是囊实性，囊性区囊壁局部是否有乳头，都要仔细查看，卵巢肿瘤往往体积大，较大的浆液性和粘液性肿瘤大体标本特征常有明显局部差异，尽可能知道最可能存在何种肿瘤或病变，做到心中有数；③冰冻切片的取材是非常重要的环节，取材局限是造成延迟诊断的主要原因，取材时应仔细观察标本的切面，选取肿块的实性区、囊壁增厚处及衬有丰富的乳头状突起的囊壁等处。实性区应取灰白色鱼肉区域及不同质地和不同颜色区域，易发现上皮增生改变和癌变的区域；④优良的冰冻切片是保证冰冻切片诊断正确的关键，必须要制作优质的冰冻切片，要防止冰晶的发生，把握最佳切片温度，在冰冻组织的在速冻板上出现冰冻包埋剂周边开始变白，最后中央透明消失，这时就得及时从速冻板上取下冷冻头，固定切片机夹头上并开始修组织块，为最佳的切片温度（-25～-23℃）和切片时间。冰冻切片中出现的空泡，大都是取材时标本接触到水的原因，应尽量避免，若不小心接触到水后，制片过程中要多用无水酒精冲洗即可。切片要做到组织平整、厚薄均匀一致，细胞染色清晰，对比染色好。⑤病理医师要客观、冷静，充分了解患者病史、体征及各项术前检查，诊断时要严格把握恶性肿瘤的诊断标准，严防假阳性诊断，以免造成过度手术，引起医疗纠纷或致残等严重后果。但对部分特殊病例，特别是交界性肿瘤，并且年龄年轻的，有生育要求的患者，又确实难以明确诊断的，应及时与临床医师沟通并讲明情况，临床医师根据患者的具体情况决定手术方式。

总之，快速冰冻切片作为手术中病理诊断，在明确肿瘤的良、恶性、明确边缘组织有无肿瘤组织、淋巴结是否有转移，具有重大帮助和指导意义。病理科医师只有紧密与临床联系，不断更新专业知识，认真总结经验，才能提高冰冻切片诊断的准确性，减少误诊，为临床提供快速准确的诊断，满足广大患者的需要。

参考文献

[1] 苑晓军.肿瘤术中冰冻切片的病理诊断分析及临床价值.中国社区医师，2011，32（1）：213-214.[2] Sawady J，Bemer JJ.Accuracy of and resons for frozen section：a correlative rerrospeetive study.Hum Pathol，1998（19）：1019.[3] Chambers JT，Merino MJ，Kohorn EL，et al.Borderline ovarian tumors.Am J Obstet Gynecol，1988（159）：1088-1094

[4] 齐曼丽，陈寿松，任勇.卵巢肿块术中冰冻切片诊断的临床与病理分析.肿瘤防治研究，2007，34（5）：382-383.

第四篇：冰冻切片快速病理诊断30年总结

冰冻切片快速病理诊断30年总结

秦皇岛市肿瘤医院病理科

康文喜 谢芳芳 王小聪 李英 邮编：066001

术中冰冻切片快速病理诊断是1818年由Pieter de Riemer首先创造发明的，1891年Halsted和Accarty将冰冻切片技术列为正式诊断方法。目前国内外已将此项技术普遍应用于临床，解决手术中的病理诊断问题。并日益受到外科医生和患者的欢迎和肯定。随着冰冻切片技术和临床外科手术的发展，要求做冰冻的病例逐年增多，截止到2012年10月份，本院病理科开展快速冰冻病理诊断30余年，共完成冰冻快速病理诊断1476例，积累了一定的经验和教训，为了更进一步提高冰冻快速病理诊断水平，提高冰冻诊断准确率，降低误诊率，作者将30年来所有冰冻切片快速病理诊断病例进行总结分析如下。1 材料和方法

1.1 一般资料

本组1476例大部分来自本院住院病人，小部分来自其他医院。其中男897例，女579例，年龄最大81岁，最小5个月。1.2 病变部位

乳腺1052例，软组织42例，胃33例，淋巴结33例，骨12例，腹膜9例，睾丸及附睾8例，甲状腺47例，小肠15例，大肠25例，膀胱5例，脊椎5例，阑尾10例，胆道14例，阴茎19例，卵巢53例，脑及脑膜3例，前列腺3例，肝12例，肾26例，脊髓2例，喉2例，子宫42例，精索1例，纵隔1例，腹膜后1例，眼1例。

1.3 方法

本组1476例均采用德国进口莱卡冰冻切片机切片，HE染色，普通光学显微镜观察。

1.4 结果

1476例中，恶性肿瘤687例，良性肿瘤388例，瘤样病变170例，炎症202例，结核29例，确诊1457例，未能确诊15例，误诊4例。2.讨

论

冰冻切片质量差，最初很多著名的病理学家如Ewing、Brewer、Simpson等曾经怀疑冰冻切片的准确性，1960年Cryostat冰冻切片机正式应用于临床后，冰冻切片质量有了很大提高，但和石蜡切片相比仍很逊色，对准确的冰冻病理诊断带来一定困难，尤其对年轻的病理科医生来说难度较大，缺乏经验的病理科医生难以胜任此项工作，下面根据自己个人的经验发表一点看法。

2.1 冰冻切片快速病理诊断的优缺点：冰冻切片快速病理诊断的优点是在手术过程中随时取材，迅速做出准确可靠的病理诊断，同时也减少了病人二次手术的痛苦。缺点是切片厚，细胞大，层次多，易造成错觉。另外冰冻切片诊断要求报告快，没有更多思考讨论余地，一旦报错，将造成严重的无法弥补的后果。

2.2 准确率：本文对1476例冰冻切片进行了统计分析，结果准确率为98.7%，未能确诊率为1.02%，误诊率为0.3%，与国内报道相比准确率相仿，而误诊率低于各家报道。

2.3 未能确诊和误诊的原因：⑴

取材不当：恰当准确的取材是正确诊断的必备条件，取材不当就不可能得出正确的病理诊断。当临床切取肿物困难时，所送检的肿物标本不一定是肿物中心组织，很可能是肿物边缘组织，这种组织大部分是肿物周围的正常成分，或仅带有少量肿物，此时应多切几个切面进行观察，在把握不足的情况下可多取几块组织做切片，以防漏诊。⑵

切片质量不佳：切片过厚，组织未能展平出现折叠，组织缺损，染色深浅不均等都直接影响诊断结果。因此，一张高质量的冰冻切片要求厚度不得超过10微米，而且要平整，无折叠无破损，染色深浅适中。

图1：乳腺冰冻切片

图2：同一病例常规石蜡切片

⑶

病理医师经验不足：医生经验不足是误诊的重要原因，从事冰冻快速病理诊断的医生，必须要经过相当长的时间训练和有足够的石蜡切片诊断经验方能胜任此项工作。2.4 冰冻切片快速病理诊断应注意的几个问题：⑴

甲状腺肿物冰冻切片

滤泡性甲状腺癌、胚胎型甲状腺瘤和 Hurhle 氏细胞腺瘤的良恶性鉴别诊断在常规石蜡切片上均有一定难度，在冰冻切片上若想准确的进行鉴别则更加困难，为了防止误诊，有些知名的老专家主张在基层单位的病理科不宜开展甲状腺肿物的冰冻切片快速病理诊断。我们认为，当冰冻切片较难做出良恶性判断时应等石蜡切片确诊，不要冒然发出良性或恶性的报告。另外在许多甲状腺疾病中常常出现一种多形性大细胞，易与恶性肿瘤细胞相混淆，在冰冻切片诊断时应特别注意。这种细胞与恶性肿瘤细胞不同之处是染色质分布均匀，胞浆丰富，不见核分裂像。⑵

淋巴结

术中送淋巴结做冰冻快速病理检查多用于确定有无癌转移，以便手术医生选择手术方式和手术范围。原发于淋巴结的恶性淋巴瘤一般不用冰冻切片方法进行诊断，因为正常未脱水的淋巴细胞膨胀，体积大，加之切片厚，很难与恶性淋巴瘤瘤细胞进行区别，在冰冻切片诊断淋巴结原发性恶性淋巴瘤时要格外慎重。⑶

骨：骨肿瘤冰冻切片快速病理诊断因涉及到截肢，病理科医生的责任十分重大，应慎之又慎。在诊断中一定要密切结合临床及X线，特别是镜下观察，必须结合大体标本的形态特点、取材部位认真分析作出判断。因骨肿瘤病理形态变化多端，送检组织块小常不能代表肿瘤病变全貌，给良恶性判断带来非常大的困难，在确实无法肯定良恶性时，应缝合切口，待石蜡切片确诊后再做处理。

第五篇：冰冻切片中常见问题分析

冰冻切片中常见问题分析

郑则钦

庞瑾昱

陈斌

【摘要】 目的 探讨冰冻切片技术在临床病理诊断中的应用。方法 收集外科手术中冰冻诊断病例，应用快速冰冻切片法、快速冰冻染色法等对冰冻诊断病例进行分析。结论 冰冻切片技术中常见的问题及改进；影响冰冻切片质量的因素；冰冻切片在病理诊断中的作用。

【关键词】 冰冻切片； 病理诊断

冰冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度进行切片的一种方法，是手术过程中采取活体标本，进行快速的组织学诊断的方法，其便捷的优点，利于术中确诊病变性质，决定手术范围，但由于各种原因，影响冰冻切片的质量，拖延病理报告发出的时间，直接影响着病理诊断的及时性、准确性，间接影响病人的预后。

材料与方法

1.材料：收集外科手术中冰冻诊断病例

2.方法：应用快速冰冻切片法、快速冰冻染色法等

结

果 组织取材大小要适宜，约为1.5×1.5㎝,厚2㎜。2 坏死组织影响冰冻切片的完整性。3 冰冻时间根据组织的大小及性质所决定。4 冰冻温度一般设置在－18～－20℃。5 染液的酸碱度要适宜。1 组织取材对制片的影响 组织取材大小：组织块大小要适宜，冷冻切片机内切片刀移动的范围有一定的限制，超出其范围时，易致切片不全。一般情况下，冰冻切片的组织大小为1.5×1.5㎝,厚2㎜。但卵巢肿瘤及脂肪组织可稍微大些。组织块过大，切片时阻力过大，易产生皱折，刀痕，组织易崩碎，增加制片难度，影响诊断。如需在同一标本托上放大于两块组织时，应尽量冻成一个平面，与刀锋平齐，以防切片不完整，发生漏诊。若送检组织过小，请预先速冻一冷台面，再行包埋，利于制片。另外，包埋时，应将组织平放在冻头的中央。组织内含过多的脂肪或坏死组织：脂肪或坏死组织较一般的组织冷冻的温度要低些，当活组织达到所需的温度时，其还比较软，从而影响切片的完整性和拖延冷冻报告发出的时间。组织块过冷：组织冷冻过度易致切片破碎或呈粉沫状，不能制作一张完整的切片。组织块冷冻不均匀：在配合使用液氮时，组织块放入液氮时不能保持水平状态且液氮量不足的情况下，可产生此现象。冻头的温度不足：冷冻切片时要求冻头的温度保持在－25℃～－30℃左右，冻头的温度达不到要求时，组织很快回软，也不能保证切片的完整。冷冻时间对制片的影响：根据组织块的大小、性质，确定冷冻时间，一般13～17s（使用液氮者），若组织较大或脂肪组织时间可适当长些，而甲状腺、脑组织和淋巴组织等冷冻的时间相对要短些。冷冻时间要严格掌握，时间过长，切片易脆碎，其处理方法是：切出完整平面后用戴乳胶手套的拇指按压回温，直到切片完整为止，反之，时间过短，则需继续冷冻，直到组织不粘刀片出现完整切片为基准。冷冻箱体工作温度对制片的影响：一般组织设定为－18～－20℃。但对一些较特殊的组织标本，温度应适当调整，如脂肪成分较多的组织以－30～－35℃为宜，纤维腺瘤，子宫等为－20℃，淋巴结，甲状腺为－18℃，切片时，表面玻璃机器盖子不要打开过大，以免箱体回温过快，影响制片。保持冻箱的温度，做到每次做完冷冻切片应关好冷冻箱的盖子。染色对制片的影响：尤以细胞核的染色最为关键，在寒冷的冬季，室温过低时，影响核的着色，可适当加温，用以增色，苏木素的酸碱度应适宜，经常观察其染液的ph值，过碱时应及时更换，盐酸酒精分化适度，时间控制到位，否则易造成核着色不佳，染色质不清晰，影响诊断的准确性。冰晶的形成对制片的影响：此原因主要取决于组织含水量的大小，尤以组织细胞水肿，淋巴结，纵隔肿瘤，卵巢肿瘤为甚，送检取材过程中接触水源，速冻过程中使用的液氮时间尚未控制好，同是造成冰晶形成的原因，其解决方法为，使用液氮时间上控制到位，保证一次冻透标本，组织送检取材时，尽量避开水源，如遇含水量高的标本时，应尽量用干纱布吸干水分后再行冷冻，避免由于冰晶形成出现诊断上的失误。操作者的动作应迅速。6 切片皱缩或卷缩：这也是影响切片质量的重要因素之一。常见的原因有：①刀锋变钝。② 防卷板粘有异物，防卷板的作用是防止切片卷缩，但若粘有异物，切片时组织会被挤压而缩在一起。③ 防卷板与刀锋的位置不平行、不协调。④ 组织块包埋不完全，缺乏支撑作用。

预防与处理的方法：① 注意检查刀具，及时更换刀口，定期磨刀。② 保持防卷板的清洁，每做一例冷冻切片，均应将刀口及防卷板拭擦干净，防止切片的污染和切片皱缩。③ 调整刀、防卷板的位置，保证两者平行，且防卷板比刀锋前0.2㎜左右。④ 包埋组织应完全，没法切片者再滴加包埋胶。7 切片脱落：冷冻切片是利用温度差（即玻片与组织切片的温度差）将切片粘贴在玻片上，然后进行固定、染色。下面几种情况下可影响切片粘贴的牢固程度，而导致切片脱落：① 组织内含过多的坏死组织。组织细胞坏死崩解后，局部的渗透压升高，吸收水分，切片一经固定，水分逸出，坏死组织失去支撑作用，染色时组织容易脱落。② 固定液浓度过低，这是最常见的原因。③ 载玻片不干净。④ 切片太厚。

预防及处理方法：避免组织内带有坏死组织，条件允许者重新取材；若没有组织可代替，切片固定时间长些，经95％乙醇双重固定后，用电吹风将切片吹干（温度不能过高，以防破坏组织结构）然后再进行染色且动作应轻柔。② 定期更换固定液。一般每周更换一次，例数较多者，适当增加次数；另外，每次做完冷冻，应及时将盛固定液的瓶盖盖好，以防固定液挥发而降低其浓度。③ 保持载玻片干净，平时应将玻片盖好，防止灰尘或其它异物的污染。若新购买的玻片较脏，洗涤过后才使用。④ 调好切片的厚度，切片厚度以5～7um较为合适（脂肪组织可稍为厚些）。组织块脱落：冷冻切片一般要求在30min内发出病理报告，以便手术医生能尽快选择手术方式。但若组织块脱落，会拖延病理报告发出的时间，而耽误病人的手术时间。常见原因有：① 冻头在冷冻机内放置时间过长，致使包埋胶还来不及渗到冻头的底部便凝固了，导致包埋胶与冻头粘连不紧，稍受外力的作用便脱落；② 冻头上的包埋胶冲洗不干净。

总之，对于冰冻切片的质量因素主要有以上几点。如果能正确对待以上几方面的问题，冰冻切片的质量方可得到保证，且能制备出一张质量优秀的切片，为明确病理诊断提供较为便利的客观条件。