2011微生物与寄生虫检验知识辅导：变异在诊断中的应用

第一篇：2011微生物与寄生虫检验知识辅导：变异在诊断中的应用

在实验诊断工作中，常遇到一些变异菌株、其形态、毒力、生化反应或抗原性都不典型，给细菌鉴定带来困难。如在有些使用抗生素的患者体内可分离到L型细菌。从而必须了解L型细菌培养的特点以及如何使其返祖而恢复其典型形态与菌落，作出正确的诊断。

第二篇：分子生物学在微生物检验中的应用(精)

分子生物学在微生物检验中的应用

南京军区福州总医院全军临床检验研究所

兰小鹏 世纪是以分子生物学为代表的生命科学的时代，近年来,随着现代生物技术的快速发展,人类基因组计划的完成,尤其是生物化学、免疫学、生物仪器及计算机理论与技术的进步，分子生物学技术在医学、遗传学、法医学、生物学等各个领域广泛应用, 新的诊断技术和方法不断涌现并被广泛应用于微生物检测，为传染病的流行病学调查、基因的多样性、微生物的生物学特性、微生物的致病性和药物的耐受性、微生物的生物降解能力等各个方面提供了重要的信息。一．核酸杂交法

最初应用于微生物检测的分子生物学技术是基因探针方法,它是用带有同位素标记或非同位素标记的DNA 或RNA 片段来检测样本中某一特定微生物核苷酸的方法。核酸杂交有原位杂交、打点杂交、斑点杂交、Sorthern杂交、Northern杂交等,核酸分子探针又可根据它们的来源和性质分为DNA探针、cDNA探针、RNA探针及人工合成的寡聚核苷酸探针等。其原理是通过标记根据病原体核酸片段制备的探针与病原体核酸片段杂交,观察是否产生特异的杂交信号。核酸探针技术具有特异性好、敏感性高、诊断速度快、操作较为简便等特点。目前,已建立了多种病原体的核酸杂交检测方法,尤其是近年来发展起来的荧光原位杂交技术(FISH)更为常用。二．质粒DNA图谱分型技术

细菌质粒分析是较早被使用的对病原微生物流行病学进行调查的分子分型技术。这种技术包括萃取质粒DNA ,通过琼脂糖凝胶电泳分离DNA。由于不同菌株质粒DNA序列和大小不同,通过琼脂糖凝胶电泳分离得到的DNA质粒图谱也将不同,因此,与流行病相关的分离株能够被分类分型。质粒图谱分析的再现性和分辨力可通过限制性内切酶消化质粒而提高。虽然2个不相关质粒有相同的分子量, 但性内切酶位点的位置和频率是不同的。但质粒是可移动的非染色体遗传物质,细菌能自发的失去或很容易的获得,结果流行病相关的菌株可以展示不同质粒指纹图谱。许多质粒带有抗性决定因子的基因,存在于转位子上,而转位子很容易丢失或获得,这同样可以迅速改变质粒DNA组成。产生图谱的再现性也会由于质粒空间存在的不一致性(超螺旋的、断口的和线形的)而被影响,而凝胶电泳时具有不同迁移速度。大多数病原微生物有质粒,但没有质粒的就不能用此技术分型。此外,由于有些分离株中含有1个或2个质粒,会使菌株间的分辨力降低。三染色体DNA 限制性内切酶分析技术

染色体DNA经限制性核酸内切酶消化,消化后的片段再通过琼脂糖凝胶电泳进行分离。用限制性内切核酸酶BglⅡ和EcoRI等消化病原微生物基因组DNA可以产生大量短的片段。电泳后,将获得一系列被分离的DNA图谱。通过比较图谱,就可以进行菌相似性研究。几乎所有的病原微生物分离株都可以通过这种方法分型,但由于基因组DNA巨大,酶切后产生的片段众多,且含有大量的重叠片段,这将导致菌株间图谱一致性分析产生困难。但若细菌只含一个或少量核糖体操纵子, 则只产生1～ 2条带, 这限制区分密切相关菌株的能力。RFLP分析分辨力低于脉冲场凝胶电泳分型技术（PFGE）, 且比较复杂图谱(数百条带)的难度较大。四．DNA 的脉冲场凝胶电泳分型技术

脉冲场凝胶电泳分型技术（PFGE）是使用对染色体有很少酶切位点的限制性核酸内切酶消化细菌DNA ,产生大的DNA片段(10～800 kb),这些大片段不能通过常规电泳方法进行有效分离。在电场方向周期改变(脉冲)的凝胶电泳条件下,DNA片段根据大小有效分离。PFGE产生的染色体DNA图谱比用那些高频率切割的限制性内切酶产生的图谱更为简单清晰。理论上,所有的细菌都能使用PFGE 进行分型分类,结果具有极高的再现性和分辨率, 常作为分子生物学分型方法的“金标准”使用。PFGE 也有一些局限,例如所需时间长,使用的试剂非常昂贵,要求专门的仪器等。另外,很小的电泳条件的不同就可以改变每条光谱带间距离,使用不同凝胶进行电泳得到的结果也比较复杂,这为不同实验室间的结果比较带来一定麻烦。五．聚合酶链反应技术

聚合酶链反应(PCR)技术自1985年发明以来,因其高度灵敏性和良好的特异性受到了人们的高度重视,各种各样以PCR 为基础的DNA序列的扩增和检测方法得到了迅猛发展,几乎已应用于基础研究的各个领域。各种衍生技术如反转录PCR(RTR)、多重PCR、巢式PCR、PCR单链构象多态性(PCRSSCP)、限制性片段长度多态性（RFLP）、随机扩增的多态性DNA 技术(RAPD)和重复序列PCR技术(Rep-PCR)、荧光定量PCR等。其中定量PCR 既可以用于临床感染性疾病的诊断,又可用于监测其疗效，PCR及其衍生的技术近年来在病原微生物分型研究上得到了广泛应用。

1.随机扩增的多态性DNA 技术

随机扩增的多态性DNA 技术（RAPD）是一种典型PCR衍生技术, 在低复性温度下用短任意序列引物(10～15m ers)扩增有密切同源性的基因组DNA序列, 模板上任意引物杂交点的数目和位置因种的不同株而异, 理论上特定株形成特定图谱。基因组在这些杂交区段如发生了DNA片段缺失、插入或碱基突变,就可能导致这些特定结合位点分布发生相应的变化。通过电泳对扩增产物DNA片段的多态性进行检测、分析就可以反应出不同菌株基因组的DNA特点,从而对他们进行分型，RAPD是目前最简单的DNA分型方法, 分辨力高于RFLP, 但低于Rep－PCR，RAPD技术的使用范围也非常广,分辨结果也有较好的实验室再现性。虽然RAPD技术简单、快速, 但由于其对引物和DNA浓度、DNA模板质量、凝胶电泳和DNA聚合酶类型的变化高度敏感, 故RAPD的重复性不够理想。虽然RAPD的分型结果在不同实验室间变化较大,分辨力不如PFGE技术,但在疾病暴发流行时,PAPD仍是一种分析相关菌株和排除不相关菌株的良好技术。2.重复序列PCR技术

重复序列PCR技术（Rep－PCR是利用细菌基因组中广泛分布的短重复序列为引物靶序列,进行PCR扩增,通过对PCR产物电泳结果的比较,分析菌株间基因组存在的差异。这些重复序列在原核生物界广泛存在,在一些细菌属和种中是保守的。在这种方式获得的图谱中,光谱带的大小和数量的不同代表着不同菌株重复序列间的距离和重复序列的数量。已成功地用于分型的细菌重复DNA序列有肠道菌重复基因间共有(ERIC)序列、重复基因外回纹序列(REP)和BOX序列的分析，与其他分类技术相比,这种技术有更高的分辨力。研究表明,虽然有时Rep-PCR分辨力稍低,但与PFGE获得的结果却有很好的相关性。3.免疫PCR 免疫PCR(immuno polymerase chain reaction ,IM PCR)是1992 年Sano 等建立的一种检测微量抗原的高灵敏度技术。该技术把抗原抗体反应的高特异性和聚合酶链反应的高敏感性有机结合在一起,它的基本原理是用一段已知DNA分子标记抗体作为探针,用此探针与待测抗原反应, 用PCR扩增粘附在抗原抗体复合物上的这段DNA分子,电泳定性,根据特异性PCR产物的有无,来判断待测抗原是否存在。目前,国内外报道的免疫PCR的敏感性一般比现行的ELISA 法高102 ～105 倍。由于PCR产物在抗原量未达到饱和前与抗原抗体复合物的量成正比,因此免疫PCR 还可用于抗原的半定量试验。

PCR－ELISA是PCR与ELISA技术结合的检测方法，其综合了PCR、分子杂交和ELISA三种技术的优点，主要用于检测样品中的特定基因。它引入地高辛(或生物素)标记的dNTP或引物进行PCR扩增,利用酶标抗地高辛抗体(或酶标记亲和素)进行ELISA检测,代替了用于常规PCR产物检测的电泳方法,方便快捷,易于处理大量样品,且其灵敏度比使用琼脂糖凝胶电泳检测方法高100倍,当有适当的标准品时,还可进行定量测定。六．DNA 序列测定

与检测全染色体的PFGE、Rep－PCR和RAPD分析相比,DNA测序只检测细菌或真菌株间潜在变化序列的很小一部分。用于辨别菌株的被测序DNA区域必须满足以下条件:DNA区的结构必须是可变序列，两侧为高度保守区;DNA序列的可变性必须能足以区分特定种的不同株;DNA序列不能水平转移到其它株。对细菌和真菌, 极少序列满足这些条件。相反,DNA测序被认为是病毒分型的 “金标准”。DNA测序费用高、需要很高的技术条件, 而且自动化DNA 测序仪十分昂贵。

七．基于16SrRNA的检测技术

自Woese 等于1987年首次运用rRNA分析以来,rRNA数据库快速扩大起来,成为研究细菌多样性、进化、系统发育中被广泛采用的序列。16SrRNA存在于所有原核生物细胞中,它们相对稳定且有较高的拷贝数(每个细胞几千个拷贝),其序列中含可变区及高度保守区,因此可设计群、属、种特异性的探针。现阶段各种常见细菌的16SrRNA基因几乎全部测序完成,16S rRNA编码基因的这些特点使之成为较理想的细菌基因分类的靶序列,逐渐成为细菌鉴定、分类的“金标准”。目前, 16SrRNA 检测技术已在医学界得到广泛应用,可以用现有病原菌标准菌株制作DGGE(变性梯度凝胶电泳)标准marker , 然后对疑似“病原菌”扩增16SrRNA进行DGGE分析,这样可以做到快速检测。八．生物芯片

生物芯片技术是将生物大分子,如寡核苷酸、cDNA、基因组DNA、肽、抗原以及抗体等固定在诸如硅片、玻璃片、塑料片、凝胶和尼龙膜等固相介质上形成生物分子点阵,当待测样品中的生物分子与生物芯片的探针分子发生杂交或相互作用后,利用激光共聚焦显微扫描仪对杂交信号进行检测和分析。微生物检测基因芯片是指用来检测样品中是否含有微生物目的核酸片段的芯片。基于高通量、微型化和平行分析的特点,微生物检测基因芯片在微生物病原体检测、种类鉴定、功能基因检测、基因分型、突变检测、基因组监测等研究领域中发挥着越来越重要的作用。目前,许多细菌、病毒等病原体的基因组测序已经完成,将许多代表各种微生物的特殊基因制成1张芯片,经反转录就可检测样本中有无病原体基因的表达及表达水平,由此判断病人感染病原、感染进程以及宿主反应等。这样就大大提高了检测效率。基因芯片诊断病原菌的原理基于细菌的16SrRNA基因的高度保守性,由于RNA易于降解,因此多采用检测16SrRNA 所对应染色体上的16SrDNA序列。对16SrDNA而言,如果出现3 个碱基以上的差异就可以断定细菌不属于同一种属,因此可用于细菌的分类和鉴别。对病毒和耐药性病原菌的检测是通过将待测的特定基因(病毒特异性基因和耐药基因)经体外转录、PCR、逆转录、末端标记等处理成标记有荧光分子的核酸分子,然后与芯片上的探针进行杂交,用计算机对杂交信号进行处理,依信号和强度即可得出核酸含量。

液态芯片（Suspension Array Technology，SAT），又称微球蛋白芯片（Protein Bead arrays，PBA），是近年来出现的一种新的芯片技术，也是唯一被美国食品和药品监督管理局（FDA）批准的用于临床诊断的生物芯片。其原理是用两种荧光染料按照不同比例将直径为5.6um的微球（beads/microfluorospheres）染成100种染色，每种颜色的微球共价结合一种生物探针，可以是抗原、抗体、配体，也可以是核酸或酶，分别针对一种待检物。混合载有100种不同颜色的微球，就可以在一个反应孔里同时完成100种不同的生物反应。随后微球成单列通过两束激光照射的管道，计算机采集并处理每种颜色微球的荧光强度变化就可以分别对每个待测物进行定性或定量的检测，该系统可用于多种微生物抗原、抗体和特定基因的联合检测，与固态芯片相比，液态芯片在反应动力学、反应速度、检测敏感性、稳定性以及自动化程度方面都有较大的优越性，因此不少学者看好液态芯片的应用前景。九．生物传感器

生物传感器是将新兴的传感器技术和分子诊断技术相结合而成的一种新技术,是现代临床检验诊断发展的一个新方向。由于生物传感器检测准确、操作简便等特点,近年来已经在许多领域取得了很大的进展,在生物分子相互作用、药物筛选、临床诊断、食物检测等领域获得了广泛的应用，其中临床中用于病原体检测的以DNA生物传感器最为常见。尽管生物传感器作为一种新的传感元件近年来得到了很大的发展,许多光化学、电化学以及压电晶体都相继在生物传感器中得到应用。与常规的核酸和蛋白质检测相比,具有检测准确、操作简单等特点,但由于它存在灵敏度不够、容易受杂质干扰等缺点,随着研究的进一步深化和技术方法的改进,这些问题将会得到解决。

十.蛋白质指纹图谱技术 蛋白质指纹图谱技术是随着蛋白质组学兴起的一种新技术，其中表面增强激光解吸电离飞行时间质谱蛋白芯片技术(SELDI-TOF-MS，下称SELDI-TOF-MS)是由T.William Hutchens 和 Tai-Tung Yip等科学家在上世纪90年代早期所创立的一种蛋白指纹图谱分析技术，并获得了2002年诺贝尔化学奖，为研究蛋白质的结构、属性、功能提供了高效而可靠的技术平台。其原理是利用各种方法（共价键、电荷等）将蛋白“富集”到芯片表面，在激光的轰击下，蛋白解吸附并电离成带电粒子，并在电场作用下飞行，其飞行单位距离的时间取决于其所带电荷数量和其分子量之比（质荷比），从而达到分离和分析蛋白质的目的。该技术是目前最有前途的比较蛋白质组分析方法，为蛋白质组学研究提供了一个利器，具有独特的优势和能力：可直接用粗生物样品（血清、尿、体液）进行分析、可同时快速发现多个生物标记物、具有高通量的验证能力、能发现低丰度蛋白质（灵敏度高达fmol/ml），与“双相电泳加飞行质谱”相比，除了有相似功能外，并可增加测定疏水蛋白质，可在同一系统中集发现和检测为一体，SELDI在微生物检验方面将发挥重要的作用。十一.适体技术

1990年,Tuerk和Gold[1]分别独立研制了一种新型的体外筛选技术,即指数富集的配体系统进化技术(Systematic evolution of ligand by exponential enrichment, SELEX),用于研究小分子核酸与靶物质相结合的部位、序列及空间构像。适体（aptamer），又称适配分子或适配子，实质是运用SELEX技术从人工体外合成的随机寡核苷酸序列库中反复筛选得到的能以极高的亲和力和特异性与靶分子结合的一段寡核苷酸序列。

由于适体分子可用酶、放射性核素、荧光物质及生物素等标记以作为检测分子，它协同传统的单克隆抗体在流式细胞技术、生物传感器、荧光偏振、分子灯塔和毛细管电泳等检测技术上得到了广泛的运用。

适体与抗体相比，具有针对靶分子的范围广、亲和力和特异性高、性能稳定、便于修饰等诸多优点。利用针对微生物的特定蛋白和基因的适体对微生物进行鉴定和分型以及耐药基因的检测方面，适体将具有良好的前景，有的学者认为，未来适体有可能取代抗体。

十二.结语

长期以来,人们试图找到一种既简便又快速、又有足够分辨力的技术来鉴别和区分各种病原微生物，各种新方法和新技术不断涌现，但每一种方法都有其局限性，为了弥补各自的不足，使用一种以上的技术即采用多种方法联合使用的策略,一种技术的缺点会被其他技术的优点所代替。选择检测方法应考虑到自身所拥有的条件,检测所要求达到的灵敏度,而提高灵敏度和去除假阳性是检测方法发展的趋势。近年来,随着计算机技术的不断发展,临床病原菌检测将向着简便、快速、高通量、自动化的方向发展。分子生物学技术通过自动化仪器的使用,将在病原菌诊断、鉴定和耐药基因检测方面越来越广泛地应用于临床。

第三篇：微生物在石油开采中的应用

微生物在石油开采中的应用

摘要：经过几十年的发展，微生物采油技术（MEOR）已经成为继热力学驱、化学驱、聚合物驱之后的第4种提高采收率的新“三采”技术。已经引起了石油工程技术人员的空前关注。本文阐明了微生物采油的方法及特点、作用机理及应用，最后对微生物采油的前景做了展望。

关键词：微生物采油；机理；作用机理；菌种筛选。

前言：MEOR应用于三次采油、提高原油采收率的一项高新技术。主要特点是成本低、适应性强、施工方便、不伤害地层、不污染环境。特别对于枯场或近枯场的油旅更显示其强大的生命力。微生物在生物代谢作用下所产生的酶类，可以裂解重质烃类和石蜡，使原油粘度、凝固点降低，从而降低原油的流动阻力，改 善原油的流动性能，提高原油产量和采收率。

1、微生物采油的背景、方法及特点

当今石油工业面临的一个重要问题是怎样采出在开发成熟的油田和即将枯竭的油田中仍然留在地下未被开采出的很大百分比的原油可采储量。新的技术必须通过经济方法处理现有生产井和扭转井堵塞的加速度，从而延长油田的生产寿命并且提高油藏的原油采收率。

我国稠油（高黏度重质稠油，黏度在1000mPa·s以上）资源分布很广，陆地稠油约占石油总资源的20%以上。稠油突出的特点是沥青质、胶质的含量比较高，具有高凝固点、难流动、难开采、高成本等特点。在我国的准噶尔盆地、塔里木盆地、吐鲁番盆地、渤海湾盆地和松辽盆地等盆地中有丰富的稠油资源，也发现了许多稠油大油田，如塔里木的塔河油田、渤海的PL193油田等，如果能寻找到一种经济有效的方法采出这些原油，对缓解我国石油进口压力具有重要意义。于是研究人员将目光转到微生物上，希望借助于以原油为碳源的微生物能够解决这些短板。

MEOR是指利用微生物提高石油采收率的各种技术总称，凡是与微生物有关的采油技术均属于MEOR。微生物提高石油采收率并不是一种单一的方法，具有明显的优点：① 成本低，微生物的主要营养物之一是用通常手段难以采出的石油，微生物的繁殖能力和适应性很强，作用效果持续时间长。这尤其对边际油田吸引力大；② MEOR工序简单，利用常规注入设备即可实施，不必增添井场设备，比其他EOR技术实用且操作方便；③ 应用范围广，不仅可开采各种类型的原油(重油、轻油、中质 原油)，更适于开采重油；④ 注入的微生物和培养基原料来源广，容易制取，且可根据具体油藏特点灵活调整微生物的配方；⑤ 易于控制，通过停止注入营养液，即可终止微生物的活动；⑥ 为生物细胞小且运动性强，能进入其他驱油工艺的盲区如死油区或裂缝；⑦ 微生物只有在有油的地方繁殖并产生代谢产物，避免了表面活性剂注入或降粘剂段塞的盲目性；⑧ MEOR产物均可生物降解，不损害底层，不会造成环境污染，且可以在同一井中重复使用多次。微生物采油机理

微生物提高原油采收率作用涉及到复杂的生物、化学和物理过程，除了具有化学驱提高采油率的机理外，微生物生命活动本身也具有提高采油率机理。

2.1 微生物的产气作用

在油井一采、二采之后，通常地下压强会降低，油井下的石油不容易抽上地面，传统做法是向油井注水，通过这种方式增大底下的压强，达到将石油抽上来的目的，但是这种方法会使得抽上来的石油含水量高，品质较差，增加后续的分离成本。而微生物在地下发酵过程中能产生各种气体，如CH4、CO2、N2、H2等，这些气体会增加油井下的压强，相应的可以减少注水量，从而提升原油的品质，降低成本。

2.2 微生物代谢产生各种有机物质

微生物在油井中以重链烃为碳源，会代谢产生许多化合物，如生物聚合物、生物表面活性剂、小分子有机酸、醇类等。这些物质可以降低原油粘度，减小表面张力，使得原油的流动性加强。

2.3 微生物代谢产生的酶类

微生物在生物代谢作用下所产生的酶类，可以裂解重质烃类和石蜡，再综合2.2中微生物代谢产生的各种化学物质，可以使原油粘度、凝固点降低，从而降低原油的流动阻力，改善原油的流动性能，使得油井石缝中原油流出，能够溶解岩石，增加岩石孔隙度和渗透率，将有助于提高原油产量和采收率。2.4 微生物发酵产生的生物聚合物

微生物在油井中发酵产生的生物聚合物能调整注水油层的吸水剖面，控制高渗地带的流度比，改善地层渗透率。

2.5 微生物的封堵作用

微生物注入水驱油层后，生长繁殖的菌体和代谢产物与重金属形成沉淀物，具有高效堵水作用，封堵率可达到99%。这对于非均质油藏的堵水调剖面效果较好，可提高原油产量和采收率。在地层中产生的生物聚合物，能够在高渗透地带控制流度比，调整注水油层的吸水剖面，增大扫油面积，提高采收率。微生物的筛选

油井中的环境都是非常苛刻的，通常都具有高温、高压、高盐的特点，为了发挥微生物采油的优点，需要选用生存能力强、代谢活性高的菌株，才能实现利用微生物来提高原油品质和采油率的目的。

一般以利用原油中的重质链烃为碳源的微生物都是生长在含油量丰富的地方，所以将从油田污水、污泥以及炼油厂污水中获得微生物样品作为筛选对象，应用微生物室内富集培养与分离纯化技术，筛选出具有应用潜力的菌株。当然，也可以将菌株的筛选与细胞工程、基因工程等技术结合起来，进行培育，也可以在很大程度上获得高产高效的菌株。应用

近年来，为了探索提高采收率的新途径，已先后在我国华北、新疆、吉林、河南、胜利、长庆、辽河、大庆、中原等14个油田开展了微生物采油现场先导性试验，并且在一些油田取得了较好的增产效果。

4.1 微生物水驱

该技术是将菌种和营养液混合而成的微生物处理液注入目的层，使微生物作用于油层，当处理液被注入水推进并通过油层时，微生物通过代谢作用产生生物表面活性剂、气体、酸、醇等代谢产物的同时，还不断增殖。代谢产物通过物理、化学作用将岩石表面黏附的原油和岩石孔隙中的原油释放出来，使原来不能流动的原油以油水乳状的形式被注入到水驱生产井中，在生产井中被采出。4.2 周期性微生物处理（微生物吞吐法）

该技术是将微生物发酵液及营养液注入生产井内，关井一段时间（从数天到数周不等），让微生物进行发酵，然后开井生产，周而复始。

4.3 微生物选择性封堵地层（微生物调剖法）

该技术是把能够生产聚合物的微生物注入地层，使其在高渗透层内大量繁殖，从而可以起到封堵高渗透带的作用。改种方法比注入人工合成的有机聚合物或凝胶更为有效，而且不会造成底层的永久性破坏。

4.4 微生物清蜡和降低重油粘度

微生物清蜡技术可以取代溶剂和分散剂的使用，并能基本上取代热油处理法。微生物清蜡和降黏机理在于微生物对石蜡和仲有得代谢作用。通常，大多数微生物对蜡类芳香烃的代谢速度大于对对芳香烃的代谢速度。微生物代谢产生的溶剂对近井区域能起到很好的清洗作用。展望

微生物采油技术具有其他三次采油技术无可比拟的有点——多功能性，近些年来，随着生物技术的不断发展，目前，一经发现开始应用一些在极端环境下能够生存、繁殖的微生物、但是MEOR技术也有自己的局限性：微生物在温度较高、盐度较大、重金属离子含量较高的的油藏条件下易于遭到破坏，微生物产生的表面活性剂和生物聚合物有造成沉淀的危险，裴炎微生物的条件不易把握，微生物采油甲护身在冬季不易施工。为了克服这些局限性，在现有的菌种基础上，通过基因工程手段获取基因工程菌，使其性能更加优良，同时将计算机技术、基因检测技术等新技术用于为生物钟。

参考文献

[1] 娜挂玉，黄民生；生物采油技术应用及发展动态[J]。能源环境保护2004,18（2）：8-16.[2] 谢明杰，谢正，邹翠霞，曹文伟；微生物降解原油提高原油采收率的研究[J]；抚顺石油学院学报；1999年02期

[3] 杜宜娟，王晓梅，刘如林，梁凤；微生物采油技术的研究[J]；内蒙古石油化工；1998年02期

[4] 汪卫东；我国微生物采油技术现状及发展前景[J]；石油勘探与开发；2002年06期

第四篇：微生物技术在城市生活垃圾处理中的应用

微生物技术在城市生活垃圾处理中的应用

msw生物处理技术主要包括好氧和厌氧生物处理。好氧生物处理如：好氧堆肥、生物反应器填埋等，其工艺中的微生物主要有细菌、放线菌、真菌等微生物种群。厌氧生物处理，如：厌氧消化、厌氧填埋等，其工艺中的微生物又称“瘤胃微生物”，主要有水解细菌、产氢产乙酸菌群和产甲烷菌群等。

在msw好氧生物降解过程中，细菌凭借强大的比表面积，可以快速将可溶性底物吸收到细胞中，进行胞内代谢。总的来说，其数量要比放线菌和真菌多得多。当然，在不同的环境中分离的细菌在分类学上具有多样性，主要有假单胞菌属（pseudomonas）、克雷伯氏菌属（klebsiella）以及芽孢杆菌属（bacillus）的细菌。在堆肥过程中，细菌总数的变化趋势是高-低-高。堆肥初期，有机废物中携带有的大量细菌分解有机物质释放能量，使堆体温度上升，此时，常温细菌受到抑制，嗜温细菌活跃；当堆温升至高温阶段，只有少量的嗜热细菌可以活动；高温期过后，随着有机成分的减少，堆体温度降低，嗜温及常温细菌又开始活跃，使细菌总数上升。整个好氧降解过程中，嗜温细菌是堆肥系统中最主要的微生物。

现代生物技术与环境保护

现代生物技术是以DNA分子技术为基础，包括微生物工程，细胞工程，酶工程，基因工程等一系列生物高新技术的总称。现代生物技术不仅在农作物改良、医药研究、食品工程方面发挥着重要作用，而且也随着日益突出的环境问题在治理污染、环境生物监测等方面发挥着重要的作用。自20 世纪 80年代以来生物技术作为一种高新技术，已普遍受到世界各国和民间研究机构的高度重视，发展十分迅猛。与传统方法比较，生物治理方法具有许多优点。

（1）生物技术处理垃圾废弃物是降解破坏污染物的分子结构，降解的产物以及副产物，大都是可以被生物重新利用的，有助于把人类活动产生的环境污染减轻到最小程度，这样既做到一劳永逸，不留下长期污染问题,同时也对垃圾废弃物进行了资源化利用。

（2）利用发酵工程技术处理污染物质，最终转化产物大都是无毒无害的稳定物质，如二氧化碳、水、氮气和甲烷气体等，常常是一步到位，避免污染物的多次转移而造成重复污染，因此生物技术是一种既安全又彻底消除污染的手段。

（3）生物技术是以酶促反应为基础的生物化学过程，而作为生物催化剂的酶是一种活性蛋白质，其反应过程是在常温常压和接近中性的条件下进行的，所以大多数生物治理技术可以就地实施，而且不影响其他作业的正常进行，与常常需要高温高压的化工过程比较，反应条件大大简化，具有设备简单、成本低廉、效果好、过程稳定、操作简便等优点。

所以，当今生物技术已广泛应用于环境监测、工业清洁生产、工业废弃物和城市生活垃圾的处理，有毒有害物质的无害化处理等各个方面。

第五篇：痕迹检验在交通肇事中的应用

痕迹检验在交通肇事中的应用

近几年，随着社会经济的不断发展，各种机动车保有量快速增长，再加上车辆驾驶人员培训时间短，不能完全适应道路交通环境的要求，道路交通事故与日俱增，交通肇事逃逸案件不断上升，这不仅给国家、集体和人民生命财产造成重大损失，更给受害人及其家属在精神上造成了极大的痛苦，在生活上带来了许多困难。作为公安交通管理机关，如何通过对交通事故现场痕迹物证进行分析、提取，迅速、及时侦破案件，严厉打击交通肇事犯罪嫌疑人，是摆在我们面前的一项艰巨任务。

一、概述

（一）痕迹检验与痕迹检验技术

痕迹检验是运用科学的理论和方法检验刑事案件中的痕迹，确定痕迹与案件的事实、痕迹与一定的人或物的关系的一种技术手段与司法鉴定工作。

痕迹检验技术是指运用痕迹检验学的理论、方法检验案件中的各种痕迹物证，确定痕迹与案件、痕迹与一定人或物之间关系的一种刑事技术。

（二）交通事故痕迹及鉴定依据

所谓交通事故的痕迹是指交通事故形成的一切痕迹，具体指在交通事故和逃逸案件的发生过程中，车辆与其他车辆或物体相接触和相互作用时，在彼此间的作用面上形成的形象痕迹、整体分离痕迹和表面附着痕迹。

交通事故鉴定的主要依据是指事故发生后遗留在现场路面、车辆、人体及有关物体表面能够证明事故事实的各种印痕和破损的状态。

利用痕迹检验技术对交通事故进行有针对性的现场勘察工作可以确定案件性质，主要依据以下几个方面出发: 1.现场是否有轮胎印

对于现场中的轮胎印，关键是要分析此轮胎与被撞车辆或行人是否有关。我 们主要通过轮胎印痕反映出的行驶方向、轨迹、通行及变异情况还有现场被撞车辆或行人的倒地位置、痕迹等来综合分析现场遗留的轮胎印痕是否是由事故形成的。

2.现场是否有汽车零部件、玻璃碎屑及其他散落物

我们要分析现场的散落物属于肇事车辆的哪个部位并尽量收集；检验被撞车辆或者行人有无油漆、玻璃碎片或其他附着物粘附；还要检验受伤者的受伤部位、程度和形态，来推断肇事车辆的碰撞部位及行人致伤的情节。

3.钝器伤的特点

交通事故中的身上多为钝器伤，应根据受伤者损伤部位、形态、受力方向来分析肇事车辆上是否有形成此伤口的部位。

4.现场痕迹、物证是否有反常表现

在现场勘查中，运用痕迹技术发现现场的疑点，并通过进一步检验找到证实案件性质的依据。如果现场痕迹与事故发生过程存在本质上的差异，案件非交通事故的可能性就较大。

5.勘查外围现场是否有可疑迹象

有些案件现场完全符合交通事故的特点，可通过调查走访外围现场，观察外围现场是否有可疑现象，结合多方面的调查作出客观全面的原因分析。

近几年运用痕迹检验技术查处交通事故和肇事逃逸案件越来越得到公安部门的认可，根据痕迹检验技术作出的鉴定结论在许多重要环节中起到直接的关键性的作用，痕迹检验技术在交通肇事案件中发挥着重要的作用。

（三）痕迹检验在交通肇事案件中的作用 1.痕迹检验在判断交通事故类型的作用

准确的判明事故类型是处理交通事故案件的基础，不仅可以提供排查方向，还可以避免不必要的纠纷。交通事故类型一般分为三种：即车车相撞、车人相撞和车辆单独事故。在这几种类型中，有是会因为事故现场混乱或没有证人而发生混淆。比如有的车辆单独事故现场和车车相撞很相似，如果没有目击证人或者证人陈述不清楚，往往会引发受害人家属上访等事件。这类案件可以通过对事故现场的勘察及人员损伤情况的检验和车辆痕迹的检验、确定痕迹尤其是车辆的痕迹(包括行驶痕迹、刹车痕迹、损坏痕迹和擦伤部位等)，准确的判明痕迹的形成过程，为妥善的解决这类案件提供客观、准确、科学的依据。

如某地仇某某与女友骑一辆二轮摩托车外出，正遇派出所设卡检查过往车辆。因仇某某所骑摩托车的车型、颜色等特征与几天前被盗窃的车相似，民警便令其停车接收检查。仇某某见状驾车仓皇逃走，并与大树相撞，二人当场死亡。受害人家属听信一些“目击者”谗言聚众闹事。为了妥善解决此事，派出所将案件上报上级公安局请示出具现场车辆检验报告。经过检验发现，该车损毁严重，多处痕迹符合撞击树木摩擦地面形成的特征。从而排除了一些别有用心者的谗言。

2.在侦破交通肇事逃逸案件中的作用

交通案件发案率时有上升的趋势，这类案件会因为现场情况和证人情况而侦破起来比较困难，通过痕迹检验技术检验却常常可以取得意想不到的作用。具体体现在如下几个方面:(1)检验鉴定轮胎花纹痕迹。车辆肇事时留在现场地面上的印记是车辆运动过程的真实记录，是交通事故再现中不可缺少的物证。这些轮胎印在现场中除了留在地面上外，有时还留在被撞人或被轧过人的衣裤上。只要认真勘验就可以发现和提取，为破案提供重要物证。

(2)检验鉴定整体分离痕迹。整体分离痕迹是交通肇事现场常出现而且又不易被破坏和改变的物证之一。由于机动车具有体积大、重量大、速度快的特点，所以在车辆与车辆之间的碰撞中，在地面常常会有脱落或在车体上遗留的一些涂料，这为认定肇事车辆提供了线索和依据。

(3)检验鉴定微量痕迹物证。在许多交通肇事案件中，微量痕迹物证常常能发挥很好的证据作用。碰撞的车辆、车人、车物之间互相附着的涂料、纤维、介质物质等都能反映出互相的关系、形态、高低、位置，从而印证两者的作用关系，为破案提供很好的线索与证据。

痕迹检验与鉴定技术在重大交通肇事逃逸案件中的应用十分广泛。上述几方面只是常见的痕迹检验技术在交通肇事逃逸案件中的应用。总的来说，只要我们认真细致地进行现场勘验，就能够很好地发挥痕迹检验与鉴定技术在交通肇事逃逸案件中的作用。

二、痕迹检验在交通肇事案件中的具体应用

（一）轮胎花纹痕迹检验鉴定的应用 1.轮胎印压痕迹

在交通事故中，人与车、车与车之间发生接触，不可避免的会产生物质与痕迹形态的相互交换，在双方客体上会同时留下痕迹物证和微量物证。印压痕迹的形成必须有三个要素，即造型客体、承受客体和作用力。造型客体、承受客体的作用方式不同时，所形成痕迹的种类、特点和形态是不相同的，造型客体的轮廓形态特征会直接反映在承受客体上。

案例：2002年6月2日，某路口，石某驾驶大货车由南向东右转弯时，大货车右前角与李某驾驶的两轮摩托车(后乘其子)相撞，造成二人当场死亡。经勘察，死者李某后腰部、后背肩部印压花纹痕迹清晰，由两种不同轮胎胎面花纹印压形成，经与大货车轮胎胎面花纹样本比对检验，死者腰部车印压花纹图案与大货右前轮轮胎花纹样本图案相同(图略)，后背肩部花纹图案与大货车右中轮轮胎胎面的样本花纹图案相同。

由此可见，肇事大货车右前轮首先由死者腰部碾轧，随即右中轮由后背肩部碾轧。当碾压在人体上后，人体软组织在轮胎胎面人字形的间隙中形成挤压造成淤血，使轮胎胎面花纹较完整地显现在人体皮肤上而形成轮胎印压痕迹。

2.轮胎滚印

滚印是指车辆轮胎在路面作纯滚动运动时，在路面上遗留的印迹，这种印迹可以显示出胎面花纹结构。

路面上的轮胎滚印的宽度决定于轮胎的负荷、气压和规格。对同一种轮胎而言，车辆重载和轮胎气压低时，胎面与路面接触面积增加，滚印较宽。车辆轻载和轮胎气压高时，胎面与路面接触面积减小，滚印较窄。

3.轮胎压印

车辆轮胎受制动力的作用，沿行驶方向在路面作滚动和滑移的复合运动时，在路面遗留的印迹。这种印迹的胎面花纹在车辆行驶方向有所延长。车辆制动时，随着制动力的增加，轮胎与路面间的摩擦力由小变大，车轮由滚动过渡到抱死。由于车轮运动方式的改变，路面上出现由轻到重，向行驶方向延伸的轮胎纹痕迹和拖印。

4.轮胎拖印

拖印是指车轮被制动抱死后，轮胎滑行在路面上遗留的印迹，这种印迹呈带状，不显示胎面花纹。拖印是指由于轮胎与路面接触部位强力摩擦，使胎面物质呈细小颗粒脱落，在路面上形成的平面夹层痕迹。

5.轮胎侧滑印

由于车辆制动性能、速度、装载、轮胎和路面等诸多因素的影响，使车轮偏离原行驶方向作斜向滑移运动，遗留在地面的印迹。侧滑印迹宽度一般大于车轮胎面宽度，不显示胎面花纹。

（二）爆胎痕迹检验鉴定的应用

在交通事故中，车辆轮胎出现爆裂现象并不少见。车胎痕迹在交通事故痕迹中属于车辆行驶痕迹，爆胎后还会产生其它痕迹。爆胎容易导致交通事故的发生，发生交通事故时也会造成爆胎。但对于驾驶员来讲，这两种爆胎现象在交通事故案件中有着本质的区别。爆胎所引发的交通事故属于意外事故，而交通事故中造成的爆胎，其前提是已经发生了交通事故，往往是驾驶员违反交通法规等原因而酿成的交通事故，是要负法律责任的。

案例：今年二月份，我市境内发生一起特大交通事故。一辆“猎豹”牌吉普车，由东向西行至S312线39km + 840m处超车时，与前方同向行驶的一辆“一汽佳宝”牌小型客车相擦刮，后吉普车驶向公路的左侧，与对面沿路边停放的“飞彩”牌农用三轮车及路边6个行人相撞，造成3车受损，4人死亡，8人受伤的特大交通事故。经现场勘查和事故调查，事故处理部门下达了《交通事故责任认定书》：驾驶吉普车的驾驶员，在没有与被超车保持充足的安全距离的情况下实施强行超车，是造成此事故发生的直接原因，根据《中华人民共和国道路交通安全法》等有关法律规定，吉普车驾驶员负事故的全部责任。吉普车驾驶员接到交通事故认定书后，立即提出了异议，并称这是一起由于吉普车左前轮突然爆胎后，方向突然失控导致的意外事故。而最初调查时，吉普车驾驶员未曾提及爆胎之事，车上的4名伤者也均未听到爆胎声。为了查清该起交通事故的真实情况，事故处理部门对吉普车左前轮车胎进行检验以确定该车胎爆裂是在事故发生前还是在事故发生时。

经检验，该轮胎为真空轮胎，轮胎与轮毂已脱离。轮胎面上有大量撕裂状痕 迹，轮胎外侧有一处3cm ×4cm缺失，其他无异常。根据痕迹特征反映，可判定轮胎面上的大量撕裂状裂纹痕迹应为轮胎在爆裂过程中所形成的爆胎痕迹；轮胎外侧面的缺失，因形态规整，痕迹内壁的细微痕迹方向性一致，判定为撞击过程中所形成的切割痕迹。由于被检轮胎同时存在爆胎痕迹和撞击痕迹，要确定两种痕迹所形成的先后顺序，就必须根据痕迹形成的过程和机理加以综合分析。在检验过程中我们首先假定该车是先爆胎后撞击，则爆胎后轮毂将直接承受汽车的部分重量，没有气体的瘪胎必然地面之间形成碾压过程，且轮胎与轮毂由相对静止变成相互摩擦，应该在轮胎上形成轮毂的碾压和摩擦痕迹。根据上述汽车在行使过程中爆胎所形成痕迹的机理，我们在被检轮胎没有发现轮毂与轮胎在碾压过程中所应反映出的痕迹。若撞击后形成爆胎，则由于该轮胎与被撞三轮车某部件形成挤压，造成该轮胎内压瞬间增加可以形成爆裂，并在高速运动的过程中同时可以形成切割痕迹。根据轮胎上痕迹的种类，以及痕迹形成的过程、机理综合分析，可认定这起交通事故中爆胎的形成过程应为：肇事车辆与前方同向行驶的“一汽佳宝”牌小型客车相擦刮后，吉普车变向驶向公路的左侧，与对面沿路边停放的“飞彩”牌农用三轮车及路边6个行人相撞。此鉴定结果进一步支持了事故处理部门下达了《交通事故责任认定书》所认定的结论。

（三）整体分离痕迹检验鉴定的应用 1.同质断裂整体分离痕迹

断裂形态由物体形状所决定，断裂面可能凹凸不平或带有毛刺，或呈其他特征形态，断离面相互对应，界面上的痕迹、附着物及形态也是相互对应的。通常在现场提取到的遗留物，仅仅反映了该残片本身的特征，只能认为是与案件有关的物证，只有当获得了与遗留残片相关的另一分离体客体，而且经过对分离客体的检验，其断裂特征与遗留残片特征相对应时，才能初步确定是否可作为同一认定的依据。因此，不仅要对形态特征进行检验，还要对其进行物理、化学的检验，进一步分析它们的材质、种属，综合起来判断是否原为一体，准确作出同一认定的结论。

案例：2000年7月22日，在某高速路，一辆旅行车由西向东行驶中因爆胎停车，乘车人阎某下车行至超车道内时，被一辆同方向由后驶来的小客车撞出，造成阎某死亡，事故发生后肇事小客车逃逸。经勘验，对现场遗留残损物与嫌疑 车右后视镜基座支架残损件进行了整体吻合复原，其嫌疑车右后视镜基座支架残损件的断面呈凸起弧线，宽度为0.2cm，长度为1.7cm，工字型断裂面宽度为0.2cm，对角线长度为0.8cm，凹陷面弧线宽度为0.3cm，长度为1.1cm；各形态特征均与现场遗留残损物断口形态的弧线宽度、长度相对应，各断面痕迹特征吻合良好，经X射线能谱仪/扫描电子显微镜对其材质进行分析均为同种金属材质，为同一物体断裂分离所形成，可作为同一认定的依据。

2.异质脱离整体分离痕迹

无论是同种材质的组合体，还是不同材质的组合体，各部件之间会有相应的接触面，相邻两部件的接触面上会留下相应的接触印痕和附着物，脱离后，在脱离部位上的印痕形态也是相互对应的。因此，通过异质材质印痕及附着物进行形态特征与分析检验，判断是否原为异体、异质分离同一认定的依据。

案例:2002年10月18日，在某环路发生一起重大交通肇事逃逸案，造成骑三轮车人死亡。经查，车号为晋×××的斯太尔牌大货车有肇事嫌疑。对现场提取的车体部件与大货车左侧脚踏板支架部件经过初步重叠复位后两部件吻合良好。现场遗留物简称A件，车体上部件简称B件，对于这类组合部件在同类大货车上通常属于通用部件，但在这起案件中，它的反映特征在于：(1)擦划痕的贯穿特征。当A、B两个部件拼接在一起时，A件与B件表面的擦划痕由A件表面贯穿至B件表面，划痕连续完整，而且数条划痕均为一次形成。(2)形态特征的完整性。当A、B两个部件拼接在一起时，在其表面的中心部位，有一个由中心跨越两部件边缘而形成的一个孔洞，移开其中任何一个部件，其形状会失去完整性。(3)固有的接触痕迹。A件圆柱体(与B体接触)的外表面与B件半圆形(与A件接触)壳体的内表面上，有形态相对应的磨损痕迹。(4)物理化学特征。A件与B件表面的黑色油漆涂层，经FTIR、SEM/EDS检验，均为同种油漆；两部件对应的磨损面上，均检出对方的不同金属成分。在这一案件中，采用了一物多证、同痕多检、理化分析相结合的方法，依据上述特征，对涉案物证进行全面、细致的分析检验，作出了整体异质分离的鉴定结论，在强有力的证据面前，肇事嫌疑人认罪伏法。

（四）微量物证检验鉴定的应用

交通肇事逃逸案具有现场开放的特点，微量物证的分布复杂，交通事故中常见的微量物证有油漆物证、塑料和合成树脂物证、纤维物证等。由于微量物证种 类、发生作用方式以及遗留部位的不同，交通肇事逃逸案件中微量物证具有不同的存在与分布形式。

1.油漆物证

当车辆与车辆发生碰撞和刮擦，被碰撞和刮擦部位的漆层会发生脱落或相互间的油漆物质转移；机动车辆若与自行车或行人相碰撞和刮擦，有时会在自行车某部位，被害人的衣服、身体上留下肇事车辆的油漆。现场油漆物证的形态与车辆涂层油漆的老化程度及事故本身作用力的大小、方向有关。有的是车辆表面油漆脱落，有的则是多层油漆甚至是底部的腻子层也同时脱落。一般来讲，只有那些旧车因表层油漆严重老化，附着力差，会呈现较大的片状散落，其他则多呈细小颗粒状和小片。如果在事故现场收集到的漆层较厚且厚薄不均匀，可判断此漆片为修补喷涂过油漆的车辆上掉下来的；反之如漆片厚度较均匀，则此漆片为从厂家喷涂油漆的原车上脱落。

(1)油漆物证的提取。现场油漆物证的提取在交通事故现场发现较完整的油漆碎片，可利用竹质镊子轻轻地夹取，放入检材收集瓶中。对于微小的油漆颗粒，则应使用检材收取勺或手术刀刮取后收入检材收集瓶中。对于擦刮痕迹部位的油漆附着物，最好是做完痕迹鉴定和拍照之后，小心地将漆状附着物连同载体一起妥善固定好，直接送检，由检验技术人员进行微量漆状物的提取。

(2)嫌疑肇事车辆上油漆物证的提取。当通过侦查找到嫌疑车后，不要急于提取油漆检材，而应认真、全面地检验该车各部位，重点观察该车涂层是否有划痕、擦痕、脱落及重新喷涂等现象。然后对其形状、离地距离进行测量、记录，同时对照对方车辆或受害人身上接触点的位置、距地高度是否吻合，如不吻合即可排除；如果双方在擦划方向上吻合，相应距地面高度一致，应必须注意两者油漆的颜色是否一致，以便提取到准确的检材。

2.塑料和合成树脂物证

根据塑料零部件成分、性能及事故作用力方向和大小不同，脱落的塑料物质形态不同。可塑性差、质地坚硬的塑料零部件，受到撞击后容易破碎，呈块状脱落。如机动车转向灯灯罩、非机动车尾灯标志等；可塑性较强、质地柔软而有一定韧性的塑料零部件经强力撞击或擦刮，局部产生高温，被撕裂或拉伸，呈胶状或薄膜状，粘附在车辆或物体表面。如非机动车把套，常因被机动车擦刮而呈薄 膜状粘附在车辆表面。

塑料和合成树脂物证的提取。散落在事故现场地面上的塑料碎片，可以用不锈钢镊子夹取。若塑料碎片体积较大或数量较多时，用干净的足够大的纸袋盛放； 若塑料碎片很少，则应用检材收集瓶或硫酸纸制作的盛物袋来收集。对于粘附在痕迹部位的非本身形成的物质，往往是因刮擦作用形成的附着物，提取和保存一定要小心。可借助放大镜观察，用具柄手术刀片轻轻刮取附着物。若附着物较多或具有一定硬度，可用不锈钢镊子提取，然后放入盛物容器中。如果提取连肉眼也难以观察到的附着物，可以使用酒精棉球或用一小块酒精纱布沾擦有附着物处(注意不能来回多次擦)，然后将棉球或纱布连同附着物质一起放入专用玻璃收集瓶中保存。

3.纤维物证

纤维物证的出现率相对于其他微量物证出现率较低，它的形成是有一定条件的，并非车辆与人体接触的事故现场必有纤维物证存在。而且交通事故现场的纤维物证一般都是微量的，有时有数根毛发，有时只有单根毛发或纤维，往往不易发现并且因其颜色特征不明显，除个别差异较大者外，用肉眼难以区分，必须仔细观察和寻找，有时需要使用科学仪器进行观察和鉴别。纤维物证粘附于肇事车辆的事故接触部位与被撞人体纤维的脱落部位具有方位的对应关系。

纤维物证的提取。机动车辆与人、动物的毛发接触，往往会将受害一方的部分毛发转移并附着在肇事车辆上，或掉落在事故现场的地面上，机动车辆与人的织物接触也会造成织物纤维的掉落与转移。由于毛发、纤维掉落或附着的数量较少，而且毛发和纤维本身又很细，因此要用手柄放大镜仔细勘查事故现场，必要时应使用光源照射寻找纤维物证。在提取附着物之前，最好用照相机拍下纤维的原始依附状态，作为重要物证形态资料。然后用干净的不锈钢镊子进行提取，最后将提取到的纤维物证连同所提取的受害一方(人或动物)被刮擦痕迹处的毛发或织物纤维三至五根一同送检。需要注意的是，应在立体显微镜观察到两者的颜色和外观形态近似或一致的基础上才能提取比对检材。若微量纤维的种类较多，在事故现场的散落面积较大，难以在肉眼观察下用镊子一根一根地提取，此时可使用交通事故物证提取箱中配备的静电取迹器进行提取。

三、总结 通过以上交通事故的痕迹检验，我们深刻体会到在交通事故处理中痕迹检验工作的重要性和必要性。随着法律、法规的健全和公民法律意识的增强，在交通事故的处理过程中，车辆痕迹的检验工作将逐步走向规范化、正规化。这就要求公安交通事故处理部门的民警要进一步增强在处理交通事故的过程中的证据意识。要加强对交通事故现场勘查知识的学习和交通事故中的痕迹检验知识的储备。对特大、复杂的交通事故案件以及可能造成矛盾纠纷的案件要有保全证据的意识，以减少不必要的纠纷。

参考文献

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